CN110448572A - 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法 - Google Patents

一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110448572A
CN110448572A CN201910733118.8A CN201910733118A CN110448572A CN 110448572 A CN110448572 A CN 110448572A CN 201910733118 A CN201910733118 A CN 201910733118A CN 110448572 A CN110448572 A CN 110448572A
Authority
CN
China
Prior art keywords
active matter
umbilical cord
stem cells
stem cell
cord blood
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910733118.8A
Other languages
English (en)
Inventor
马亚东
黄宗堂
曹娜
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fengze Kang Biomedicine (shenzhen) Co Ltd
Original Assignee
Fengze Kang Biomedicine (shenzhen) Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fengze Kang Biomedicine (shenzhen) Co Ltd filed Critical Fengze Kang Biomedicine (shenzhen) Co Ltd
Priority to CN201910733118.8A priority Critical patent/CN110448572A/zh
Publication of CN110448572A publication Critical patent/CN110448572A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/48—Reproductive organs
    • A61K35/51—Umbilical cord; Umbilical cord blood; Umbilical stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，提取脐带组织得到原代脐带干细胞；培育第五代原代脐带间充质干细胞，并获得细胞培养上清液进行离心，并对所述上清溶液进行过滤、超滤浓缩，加入冻干保护剂，并进行真空冷冻干燥，得到脐带间充质干细胞活性物冻干粉末；获得脐带血，进行传代培养；分离得到脐带血干细胞溶液，反复冻融至细胞完全破碎，得到脐带血干细胞提取物溶液，冻干制得脐带血干细胞活性物冻干粉。本发明所得的制剂具有更好促进皮肤烫伤修复的作用，能促进皮肤烫伤的创面愈合、更好地促进其表皮的再生化、皮肤细胞增殖再生能力等作用。

Description

一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合 物的制备方法
技术领域
本发明涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法。
背景技术
间充质干细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞的增殖与分化。还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病及其他移植相关并发症。间充质干细胞目前主要是从脊髓和脐血中提取的。脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。人体脐带血间充质干细胞是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。
皮肤损伤是日常生活常见的一种创伤。目前大面积的皮肤损伤治疗主要通过全身支持治疗、创面的清理及结痂切除和外科植皮等方法，传统的治疗方法虽然有一定效果但其结痂深度难于把握、皮源紧张和易感染的问题有待解决。
近年来，以干细胞特别是间质干细胞为基础的皮肤再生医学研究得到广泛关注，目前提高细胞干性和促再生能力的主要是通过基因改造的方法，但是基因编辑的不确定性导致其改造后的干细胞具有安全性的问题。
发明内容
本发明提供一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，目的在于克服现有技术中存在干细胞使用安全的缺陷。为解决上述的技术问题，具体技术方案：
一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)获得脐带间充质干细胞活性物；
(1.1)提取脐带组织；
(1.2)利用所述脐带组织制备原代脐带干细胞；
(1.3)利用所述原代脐带干细胞培育第五代原代脐带间充质干细胞，并获得细胞培养上清液；
(1.4)将所述细胞培养上清液进行离心，收集上清溶液，并对所述上清溶液进行过滤；然后进行超滤浓缩；
(1.5)超滤浓缩后加入冻干保护剂，并进行真空冷冻干燥，得到脐带间充质干细胞活性物冻干粉末；
(2)获得脐带血干细胞活性物；
(2.1)获得脐带血，放入培养箱中，恒温恒湿持续进行传代培养；
(2.2)弃去培养基，分离得到脐带血干细胞溶液；
(2.3)将脐带血干细胞溶液冻结，然后在4～8℃的温度下解冻，如此反复冻融至细胞完全破碎，采用孔径为0.22μm的过滤膜过滤，除去杂质，得到脐带血干细胞提取物溶液；
(2.4)将脐带血干细胞提取物溶液，冻干制得脐带血干细胞活性物冻干粉；
(3)脐带间充质干细胞活性物冻干粉末与脐带血干细胞活性物冻干粉混合。
其中，所述的步骤(1.2)具体包括以下步骤：在脐带组织中注射膨胀液后，用生理盐水对脐带组织进行洗涤；加入II型胶原酶溶液，进行消化后，离心消化产物，去除上层组织，保留沉淀和部分中间层溶液，得到原代原代脐带干细胞。
所述的步骤(1.3)中的第五代脐带间充质干细胞的培育方法为：将所述原代脐带干细胞接种于干细胞培养基中，在37℃、5v/v％CO2的条件下培养，在培养7天，观察到细胞集落，并继续培养；当细胞融合度达80～85％时，用生理盐水温和冲洗培养容器的底部，冲洗2次，加入4～5毫升消化液，室温放置30秒，并在显微镜下观察细胞背景变透亮，细胞间隙变大的时候加入5毫升完全培养基终止消化，并反复冲培养容器底部，将细胞悬液转移到毫升离心管中，混匀计数，按照1×105密度接种传代，培养2～4天后细胞密度达到80～85％时，重复以上操作获得第五代脐带间充质干细胞。
所的步骤(1.4)的超滤浓缩包括以下步骤：在4℃的环境下对获得溶液进行超滤浓缩，用孔径0.2nm的超滤膜过滤，过滤的压力为0.35Mpa，超滤后浓缩上清液体，将10L液体超滤至500-800ml。
所述的步骤(1.5)的真空冷冻干燥包括以下步骤：冷冻干燥机设定-30℃预冷4小时；温度下降到-25℃，在-5帕压下，操作12h，将溶液成分冻干成粉末状；温度升温到30℃，保持-5帕压力，继续干燥1小时。
所述的冻干保护剂，由以下物质按照质量份数组成：质量浓度为1％的右旋糖苷0.01～0.02，质量浓度为0.5％的海藻糖0.5～0.8份，质量浓度为1.5％的甘露醇1.5～2.0份，质量浓度为0.5％精氨酸0.5～2.0份。
进一步的，所述的步骤(2.1)传代培养，条件为：DMEM/F12培养基中加入体积比10％的胎牛血清，培养基的pH为7.0，放入培养箱中，培养温度为37℃，湿度为95％。
所述的步骤(2.4)冻干条件为，1ml/支分装冻干，冻干的温度为-20～-35℃，真空度为50～200Pa，冻干时间为24～36小时。
本发明提供的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，所得的制剂具有更好促进皮肤烫伤修复的作用，能促进皮肤烫伤的创面愈合、更好地促进其表皮的再生化、皮肤细胞增殖再生能力等作用，具有极佳的临床应用价值。
具体实施方式
为了使本领域相关技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合本发明实施方式，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式仅仅是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。
一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)获得脐带间充质干细胞活性物；
(1.1)提取脐带组织；
(1.2)利用所述脐带组织制备原代脐带干细胞；在脐带组织中注射膨胀液后，用生理盐水对脐带组织进行洗涤；加入II型胶原酶溶液，进行消化后，离心消化产物，去除上层组织，保留沉淀和部分中间层溶液，得到原代原代脐带干细胞。
(1.3)利用所述原代脐带干细胞培育第五代原代脐带间充质干细胞，并获得细胞培养上清液；第五代脐带间充质干细胞的培育方法为：将所述原代脐带干细胞接种于干细胞培养基中，在37℃、5v/v％CO2的条件下培养，在培养7天，观察到细胞集落，并继续培养；当细胞融合度达80～85％时，用生理盐水温和冲洗培养容器的底部，冲洗2次，加入4～5毫升消化液，室温放置30秒，并在显微镜下观察细胞背景变透亮，细胞间隙变大的时候加入5毫升完全培养基终止消化，并反复冲培养容器底部，将细胞悬液转移到毫升离心管中，混匀计数，按照1×105密度接种传代，培养2～4天后细胞密度达到80～85％时，重复以上操作获得第五代脐带间充质干细胞。
(1.4)将所述细胞培养上清液进行离心，收集上清溶液，并对所述上清溶液进行过滤；然后进行超滤浓缩；超滤浓缩包括以下步骤：在4℃的环境下对获得溶液进行超滤浓缩，用孔径0.2nm的超滤膜过滤，过滤的压力为0.35Mpa，超滤后浓缩上清液体，将10L液体超滤至500-800ml。
(1.5)超滤浓缩后加入冻干保护剂，并进行真空冷冻干燥，得到脐带间充质干细胞活性物冻干粉末；真空冷冻干燥包括以下步骤：冷冻干燥机设定-30℃预冷4小时；温度下降到-25℃，在-5帕压下，操作12h，将溶液成分冻干成粉末状；温度升温到30℃，保持-5帕压力，继续干燥1小时。
所述的冻干保护剂，由以下物质按照质量份数组成：质量浓度为1％的右旋糖苷0.01，质量浓度为0.5％的海藻糖0.8份，质量浓度为1.5％的甘露醇1.5份，质量浓度为0.5％精氨酸2.0份。
(2)获得脐带血干细胞活性物；
(2.1)获得脐带血，放入培养箱中，恒温恒湿持续进行传代培养；传代培养，条件为：DMEM/F12培养基中加入体积比10％的胎牛血清，培养基的pH为7.0，放入培养箱中，培养温度为37℃，湿度为95％。
(2.2)弃去培养基，分离得到脐带血干细胞溶液；
(2.3)将脐带血干细胞溶液冻结，然后在4～8℃的温度下解冻，如此反复冻融至细胞完全破碎，采用孔径为0.22μm的过滤膜过滤，除去杂质，得到脐带血干细胞提取物溶液；
(2.4)将脐带血干细胞提取物溶液，冻干制得脐带血干细胞活性物冻干粉；冻干条件为，1ml/支分装冻干，冻干的温度为-20～-35℃，真空度为50～200Pa，冻干时间为24～36小时。
(3)脐带间充质干细胞活性物冻干粉末与脐带血干细胞活性物冻干粉混合。
将该脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物通过SD大鼠进行实验：将体重200g左右的大鼠背部用8％的Na2S脱毛处理，次日烫伤，条件为80℃损伤8s，得到一个直径为大约1.5cm的圆形创面；
创面皮下组织注射1×105的脐带间充质干细胞活性物冻干粉末与脐带血干细胞活性物冻干粉，注射前用生理盐水制成悬液。
修复效果观察的时间是2周，明显促进烫伤皮肤的修复作用，创伤面积显著的减少；说明该复合物明显促进烫伤皮肤的表皮再生化，表现为表皮覆盖创面的范围明显增多。
以上仅表达了本发明的一种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)获得脐带间充质干细胞活性物；
(1.1)提取脐带组织；
(1.2)利用所述脐带组织制备原代脐带干细胞；
(1.3)利用所述原代脐带干细胞培育第五代原代脐带间充质干细胞，并获得细胞培养上清液；
(1.4)将所述细胞培养上清液进行离心，收集上清溶液，并对所述上清溶液进行过滤；然后进行超滤浓缩；
(1.5)超滤浓缩后加入冻干保护剂，并进行真空冷冻干燥，得到脐带间充质干细胞活性物冻干粉末；
(2)获得脐带血干细胞活性物；
(2.1)获得脐带血，放入培养箱中，恒温恒湿持续进行传代培养；
(2.2)弃去培养基，分离得到脐带血干细胞溶液；
(2.3)将脐带血干细胞溶液冻结，然后在4～8℃的温度下解冻，如此反复冻融至细胞完全破碎，采用孔径为0.22μm的过滤膜过滤，除去杂质，得到脐带血干细胞提取物溶液；
(2.4)将脐带血干细胞提取物溶液，冻干制得脐带血干细胞活性物冻干粉；
(3)脐带间充质干细胞活性物冻干粉末与脐带血干细胞活性物冻干粉混合。
2.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1.2)具体包括以下步骤：在脐带组织中注射膨胀液后，用生理盐水对脐带组织进行洗涤；加入II型胶原酶溶液，进行消化后，离心消化产物，去除上层组织，保留沉淀和部分中间层溶液，得到原代原代脐带干细胞。
3.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1.3)中的第五代脐带间充质干细胞的培育方法为：将所述原代脐带干细胞接种于干细胞培养基中，在37℃、5v/v％CO2的条件下培养，在培养7天，观察到细胞集落，并继续培养；当细胞融合度达80～85％时，用生理盐水温和冲洗培养容器的底部，冲洗2次，加入4～5毫升消化液，室温放置30秒，并在显微镜下观察细胞背景变透亮，细胞间隙变大的时候加入5毫升完全培养基终止消化，并反复冲培养容器底部，将细胞悬液转移到毫升离心管中，混匀计数，按照1×105密度接种传代，培养2～4天后细胞密度达到80～85％时，重复以上操作获得第五代脐带间充质干细胞。
4.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所的步骤(1.4)的超滤浓缩包括以下步骤：在4℃的环境下对获得溶液进行超滤浓缩，用孔径0.2nm的超滤膜过滤，过滤的压力为0.35Mpa，超滤后浓缩上清液体，将10L液体超滤至500-800ml。
5.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1.5)的真空冷冻干燥包括以下步骤：冷冻干燥机设定-30℃预冷4小时；温度下降到-25℃，在-5帕压下，操作12h，将溶液成分冻干成粉末状；温度升温到30℃，保持-5帕压力，继续干燥1小时。
6.根据权利要求5所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的冻干保护剂，由以下物质按照质量份数组成：质量浓度为1％的右旋糖苷0.01～0.02，质量浓度为0.5％的海藻糖0.5～0.8份，质量浓度为1.5％的甘露醇1.5～2.0份，质量浓度为0.5％精氨酸0.5～2.0份。
7.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2.1)传代培养，条件为：DMEM/F12培养基中加入体积比10％的胎牛血清，培养基的pH为7.0，放入培养箱中，培养温度为37℃，湿度为95％。
8.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2.4)冻干条件为，1ml/支分装冻干，冻干的温度为-20～-35℃，真空度为50～200Pa，冻干时间为24～36小时。
CN201910733118.8A 2019-08-04 2019-08-04 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法 Pending CN110448572A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910733118.8A CN110448572A (zh) 2019-08-04 2019-08-04 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910733118.8A CN110448572A (zh) 2019-08-04 2019-08-04 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110448572A true CN110448572A (zh) 2019-11-15

Family

ID=68485613

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910733118.8A Pending CN110448572A (zh) 2019-08-04 2019-08-04 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110448572A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112592892A (zh) * 2020-12-25 2021-04-02 夏爽 一种诱导脐带间充质干细胞因子分泌的培养基及培养方法
CN113583950A (zh) * 2021-08-06 2021-11-02 合肥滴碧云生物科技有限公司 一种制备干细胞活性因子的方法及其应用
CN114075543A (zh) * 2021-11-17 2022-02-22 章毅 制备干细胞凝胶的方法
CN114129597A (zh) * 2021-12-15 2022-03-04 安徽科门生物科技有限公司 一种治疗子宫内膜损伤干细胞活性因子制剂的制备方法
CN114652662A (zh) * 2020-12-23 2022-06-24 天津拂瑞雅生物科技有限公司 修复霜及其制备方法
CN115125193A (zh) * 2021-07-09 2022-09-30 广州赛莱拉生物基因工程有限公司 一种动物脐带外泌体及其提取方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105002133A (zh) * 2014-04-23 2015-10-28 宋阳 人体脐带血干细胞提取物及其制备方法和应用
CN106109496A (zh) * 2016-07-06 2016-11-16 广东科玮生物技术股份有限公司 人脐带间充质干细胞提取物冻干粉及制备方法
CN109453200A (zh) * 2018-11-29 2019-03-12 云南研灵生物科技有限公司 多组织来源的间充质干细胞裂解因子冻干粉的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105002133A (zh) * 2014-04-23 2015-10-28 宋阳 人体脐带血干细胞提取物及其制备方法和应用
CN106109496A (zh) * 2016-07-06 2016-11-16 广东科玮生物技术股份有限公司 人脐带间充质干细胞提取物冻干粉及制备方法
CN109453200A (zh) * 2018-11-29 2019-03-12 云南研灵生物科技有限公司 多组织来源的间充质干细胞裂解因子冻干粉的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
姚静等: "《药物冻干制剂技术的设计及应用》", 30 June 2007 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114652662A (zh) * 2020-12-23 2022-06-24 天津拂瑞雅生物科技有限公司 修复霜及其制备方法
CN112592892A (zh) * 2020-12-25 2021-04-02 夏爽 一种诱导脐带间充质干细胞因子分泌的培养基及培养方法
CN115125193A (zh) * 2021-07-09 2022-09-30 广州赛莱拉生物基因工程有限公司 一种动物脐带外泌体及其提取方法和应用
CN115125193B (zh) * 2021-07-09 2024-04-26 广州赛莱拉生物基因工程有限公司 一种动物脐带提取物及其提取方法和应用
CN113583950A (zh) * 2021-08-06 2021-11-02 合肥滴碧云生物科技有限公司 一种制备干细胞活性因子的方法及其应用
CN114075543A (zh) * 2021-11-17 2022-02-22 章毅 制备干细胞凝胶的方法
CN114129597A (zh) * 2021-12-15 2022-03-04 安徽科门生物科技有限公司 一种治疗子宫内膜损伤干细胞活性因子制剂的制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110448572A (zh) 一种脐带间充质干细胞活性物与脐带血干细胞活性物的复合物的制备方法
CN106109496B (zh) 人脐带间充质干细胞提取物冻干粉及制备方法
CN101757691B (zh) 一种组织工程角膜的制备方法
CN106244652B (zh) 一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法及制得的冻干粉
CN101954124B (zh) 含基底膜的组织工程皮肤的构建方法
CN106344493A (zh) 含人间充质干细胞因子的精华液的制备方法
CN103251649B (zh) 人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备方法
CN106754674A (zh) 从人胎盘羊膜制备羊膜间充质干细胞的方法及其应用
CN108004207B (zh) 从脂肪中获取大量脂肪间充质干细胞的方法
CN104087551B (zh) 一种体外分离培养人的表皮细胞的方法
CN106421920B (zh) 一种脂肪填充物及其制备方法
CN104814980A (zh) 人胚胎素制作方法及应用
CN102732586B (zh) 一种间充质干细胞分泌素的制备方法
CN107224617A (zh) 一种以脾脏细胞外基质为原料的水凝胶及其制备方法
CN101288779A (zh) 基于温敏性壳聚糖水凝胶的可注射性心肌组织工程产品
CN106511387A (zh) 鸡胚胎素制备方法及应用
CN103074298A (zh) 一种人脂肪间充质干细胞库及其构建方法
CN108472319A (zh) 用于治疗心脏病的移植材料
US20160287855A1 (en) Surgical methods/devices for tissue injury removal by tattooing of autologous stem cells
CN105477626A (zh) 混合干细胞制剂及其制备方法
CN102233144A (zh) 一种利用组织工程技术进行皮下组织再生的方法
CN105456293A (zh) 一种用于治疗糖尿病的干细胞制剂及其制备方法
CN107779430A (zh) 脐带间充质干细胞上清液的收集方法
CN102172337B (zh) 具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤及其制备方法
CN112402458A (zh) 一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20191115

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication