CN110423241B - 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法 - Google Patents

头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110423241B
CN110423241B CN201910603523.8A CN201910603523A CN110423241B CN 110423241 B CN110423241 B CN 110423241B CN 201910603523 A CN201910603523 A CN 201910603523A CN 110423241 B CN110423241 B CN 110423241B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cephalosporin
sodium salt
solution
sodium
filtrate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910603523.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110423241A (zh
Inventor
苗瑞春
李雄
王雁
幸华龙
李建平
冯涛
刘君臣
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sinopharm Weiqida Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Sinopharm Weiqida Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sinopharm Weiqida Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Sinopharm Weiqida Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN201910603523.8A priority Critical patent/CN110423241B/zh
Publication of CN110423241A publication Critical patent/CN110423241A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110423241B publication Critical patent/CN110423241B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D501/02—Preparation
    • C07D501/12—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D501/14—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7
    • C07D501/16—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7 with a double bond between positions 2 and 3
    • C07D501/18—7-Aminocephalosporanic or substituted 7-aminocephalosporanic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D501/14—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7
    • C07D501/16—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7 with a double bond between positions 2 and 3
    • C07D501/20—7-Acylaminocephalosporanic or substituted 7-acylaminocephalosporanic acids in which the acyl radicals are derived from carboxylic acids
    • C07D501/24—7-Acylaminocephalosporanic or substituted 7-acylaminocephalosporanic acids in which the acyl radicals are derived from carboxylic acids with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms or hetero rings, attached in position 3
    • C07D501/26—Methylene radicals, substituted by oxygen atoms; Lactones thereof with the 2-carboxyl group
    • C07D501/28—Methylene radicals, substituted by oxygen atoms; Lactones thereof with the 2-carboxyl group with the 7-amino radical acylated by an aliphatic carboxylic acid, which is substituted by hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
    • C12P35/02—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin by desacylation of the substituent in the 7 position

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种头孢菌素C钠盐和7‑氨基头孢烷酸的制备方法。该方法包括：采用膜过滤方式从发酵液中分离得到头孢菌素C滤液；然后使用有机溶剂从滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；将头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，静置分层，收集重相；在重相中加入反溶剂进行结晶，得到头孢菌素C钠盐；之后使用纯化水溶解头孢菌素C钠盐，得到头孢菌素C钠盐水溶液，通过加入固定化头孢菌素C酰化酶，头孢菌素C钠盐经酶水解、结晶、过滤、洗涤和干燥后，得到7‑氨基头孢烷酸。采用本发明方法所制备的头孢菌素C钠盐和7‑氨基头孢烷酸要显著优于常规工艺，该产品用于头孢下游产品的制备所获得的产品品质更高，用药更安全。

Description

头孢菌素C钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法
技术领域
本发明属于制药技术领域，涉及一种头孢菌素C钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法。
背景技术
7-氨基头孢烷酸(7-Amino-Cephalosporanic acid)，结构式如下：
Figure BDA0002119960650000011
7-氨基头孢烷酸简称7-ACA，是头孢菌素中最常用的母核，它有两个活性基团，3-位的乙酰氧基和7-位的氨基，在这两个活性基团上连接不同的侧链，就构成不同性质的头孢类抗生素，因此，7-ACA是非常重要的头孢菌素(β内酰胺类)抗生素的中间体。该头孢类抗生素能够有效抑制细菌细胞壁的合成，而人体细胞无细胞壁，故其具优良的选择性，安全性好，杀菌力强，是目前临床上应用最好的一类抗生素，在医药行业中占有十分重要的地位。
7-ACA的制备方法一般包括：通过生物发酵、化学提炼制取头孢菌素C，再由头孢菌素C化学裂解或酶解成7-ACA。更具体地，头孢菌素C由顶头孢霉菌发酵培养液分离提取得到，即，发酵液除了含有约20g/L～30g/L(根据发酵液上清液测量值)的头孢菌素C外，还含有大量的菌丝体、蛋白质、多糖、胶体、色素等杂质，所以要从发酵液中分离提取头孢菌素C，首先头孢菌素C发酵液经过酸化并混凝处理后，使用板框过滤以除去发酵液中的菌丝体和蛋白质，然后经过大孔吸附树脂和离子交换树脂分离提纯以去除杂质，最后经膜浓缩、酶水解、结晶和干燥等步骤即得到成品7-ACA。该制备工艺中存在一定的问题，首先发酵液经混凝处理后得到的梵花不结实易破碎，经常出现堵塞板框的问题；大孔吸附树脂和离子交换树脂使用过程中产生了大量的废酸水和树脂再生废液，处理这些废液不仅需要付出高昂的费用，而且对环境也会造成一定的影响。
CN104278071B公开了一种头孢菌素C的提取方法，包括一级超滤(膜截留分子量为10000-30000)、二级超滤(膜截留分子量为800-10000)、大孔吸附树脂吸附处理、弱碱性离子交换树脂吸附处理、纳滤浓缩、酶解，得到7-ACA产品。在该工艺中，发酵液不经预处理直接就进行截留分子量为10000-30000的一级超滤，其中的菌丝体、蛋白质、胶体等极易堵塞膜孔，而无法进行超滤；此外，同样存在废酸水和树脂再生废液的问题。
综上，鉴于上述头孢菌素C提取纯化和7-ACA制备工艺上的一些问题，仍有必要改进和优化头孢菌素C的提取纯化和7-ACA的制备工艺。
发明内容
技术问题
因此，鉴于上述问题，本发明的目的在于提供一种工艺简便、可操作性强、产品质量优异且适于产业化推广的头孢菌素C钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法。
技术方案
为了实现本发明的目的，本发明所采用的技术方案为：采用膜过滤方式从发酵液中分离得到头孢菌素C滤液；然后使用与水不混溶的有机溶剂从滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；之后将头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，而后静置分层，收集重相(即水相)；然后在重相中加入反溶剂进行结晶，经过滤、洗涤和干燥后即得到头孢菌素C钠盐；之后使用纯化水溶解头孢菌素C钠盐，得到头孢菌素C钠盐水溶液，通过加入固定化头孢菌素C酰化酶，头孢菌素C钠盐经酶水解、结晶、过滤、洗涤和干燥后，即可得到质量符合标准的7-氨基头孢烷酸。
根据本发明的一个方面，提供一种头孢菌素C钠盐的制备方法，该方法包括如下步骤：
(1)含头孢菌素C滤液的制备
头孢菌素C发酵液经酸化后，采用50～100纳米的陶瓷膜过滤除去发酵液中的菌丝体和蛋白质，然后采用截留分子量20KD～100KD的超滤膜除去滤液中的色素和杂质，得到含头孢菌素C的滤液；
(2)头孢菌素C钠盐的制备
使用与水不混溶的有机溶剂从上述步骤(1)得到的滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；然后，该头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，而后静置分层，收集重相，得到高浓度的头孢菌素C钠盐溶液；该高浓度的头孢菌素C钠盐溶液与反溶剂混合，头孢菌素C钠盐结晶析出。
根据本发明的另一个方面，提供一种7-氨基头孢烷酸的制备方法，该方法包括：将上述得到的头孢菌素C钠盐晶体加水溶解，得到头孢菌素C钠盐水溶液，该水溶液在固定化头孢菌素C酰化酶存在下，进行酶水解，而后结晶，得到7-氨基头孢烷酸。
有益效果
在本发明中，创造性地开发了一种头孢菌素C钠盐的制备方法和7-氨基头孢烷酸的制备方法。与现有技术中的发酵液板框压滤及树脂分离提取工艺相比具有如下优点：首先通过采用膜过滤替代板框压滤的方式不仅消除了混凝和板框压滤工艺中存在的诸多问题，而且还大幅提升了产品的收率和质量；其次采用萃取、反萃、结晶的组合工艺方式不仅能够制备出头孢菌素C钠盐，进而大幅提升终产品7-氨基头孢烷酸产品的质量，满足高端客户需求，而且采用该工艺组合解决了常规工艺中再生废水和树脂固废等难题，大幅降低了产品的生产成本。因此采用本发明方法所制备的头孢菌素C钠盐和7-氨基头孢烷酸要显著优于常规工艺，该产品用于头孢下游产品的制备所获得的产品品质更高，用药更安全。
具体实施方式
下面，更具体地说明本发明的头孢菌素C钠盐的制备方法和7-氨基头孢烷酸的制备方法。
在本发明提供的头孢菌素C钠盐的制备方法中，在所述步骤(1)含头孢菌素C滤液的制备中，头孢菌素C发酵液经酸化后，采用50～100纳米的陶瓷膜过滤除去发酵液中的菌丝体和蛋白质，然后采用截留分子量20KD～100KD的超滤膜除去滤液中的色素和杂质，得到含头孢菌素C滤液。
其中，所述头孢菌素C发酵液为本领域常规生物发酵法制备头孢菌素C生物发酵后的发酵液，一般pH为4.50～6.00，上清液含有约20g/L～30g/L头孢菌素C，该发酵液还含有大量的菌丝体、蛋白质、多糖、胶体等。
所述头孢菌素C发酵液的酸化处理，可以采用本领域已知的酸对其进行酸化处理，例如硫酸，特别是浓度为15％～30％(v/v)硫酸，酸化处理后的头孢菌素C发酵液pH一般为2.50～3.50。
所述陶瓷膜过滤可以采用50～100纳米的陶瓷膜过滤除去发酵液中的菌丝体和蛋白质；然后采用截留分子量20KD～100KD的超滤膜，优选截留分子量为20KD～50KD的超滤膜，最优选截留分子量为30KD～40KD的超滤膜除去滤液中的色素和杂质，得到头孢菌素C滤液。步骤(1)过程一般在5～10℃低温条件下实施。在所得到的头孢菌素C滤液中，头孢菌素C的浓度一般为7g/L～8g/L，425nm波长条件下透光率一般为60％～80％。
在所述步骤(2)头孢菌素C钠盐的制备步骤中，使用与水不混溶的有机溶剂从上述步骤(1)得到的滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；然后，该头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，而后静置分层，收集重相，得到高浓度的头孢菌素C钠盐溶液；该高浓度的头孢菌素C钠盐溶液与反溶剂混合，头孢菌素C钠盐结晶析出。
其中，所述与水不混溶的有机溶剂，可以是例如选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯中的一种，在这些有机溶剂中优选乙酸乙酯。
萃取过程可以优选控温在5～10℃，例如，向头孢菌素C滤液中加入上述有机溶剂的一种，有机溶剂的加入量为3～4倍头孢菌素C滤液的体积，充分搅拌，静置分层后分离得到含有头孢菌素C的萃取液。萃取液中头孢菌素C的效价一般为2.0～3.5g/L。
上述头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，其中异辛酸钠采用头孢菌素C萃取液中的溶剂体系配制成溶液，以溶液的形式与头孢菌素C萃取液混合，且异辛酸钠溶液配置浓度优选介于20wt％～30wt％。头孢菌素C与异辛酸钠进行成盐反应，一般头孢菌素C与异辛酸钠的摩尔比优选介于1：1.0～1：1.2之间，更优选头孢菌素C与异辛酸钠的摩尔比介于1：1.10～1：1.15之间。混合成盐时，异辛酸钠溶液在10～15分钟内快速加入到所述头孢菌素C萃取液中，在异辛酸钠流加的过程中会产生明显的白色浑浊物但是随即迅速溶解。异辛酸钠流加完毕后，静置分层并收集重相，即得到头孢菌素C钠盐溶液。混合成盐过程一般选择在0～5℃条件下进行。在头孢菌素C钠盐溶液中头孢菌素C浓度一般为150mg/mL～250mg/mL(在本发明中头孢菌素C钠盐溶液以头孢菌素C的含量计量)。
所述反溶剂可以选择丙酮，其加入量为头孢菌素C钠盐溶液体积的5～10倍，在该条件下溶液中的头孢菌素C钠盐以高收率和品质结晶析出。
所述头孢菌素C钠盐溶液与反溶剂丙酮的混合方式可以选择将丙酮缓慢加入到头孢菌素C钠盐溶液中，亦可选择将头孢菌素C钠盐溶液缓慢加入到丙酮中，优选将头孢菌素C钠盐溶液缓慢加入到丙酮中，头孢菌素C钠盐溶液的流加时间优选30min～60min。该步骤优选在0～5℃的温度下实施。分离得到的头孢菌素C钠盐晶体根据本领域已知的方法洗涤和干燥后可得到头孢菌素C钠盐产品。
根据本发明的另一个方面，本发明提供一种7-氨基头孢烷酸的制备方法，该方法包括：将上述得到的头孢菌素C钠盐晶体加水溶解，得到头孢菌素C钠盐水溶液，该水溶液在固定化头孢菌素C酰化酶存在下，进行酶水解，而后结晶，得到7-氨基头孢烷酸。
其中，将上述得到的头孢菌素C钠盐晶体加水溶解，得到头孢菌素C钠盐水溶液。所述的水为纯化水，在得到的头孢菌素C钠盐水溶液中头孢菌素C的浓度介于15g/L～35g/L，优选头孢菌素C的浓度介于20g/L～30g/L。
所述固定化头孢菌素C酰化酶可市购得到，例如艾美科健(中国)生物医药有限公司、湖南福莱格生物技术有限公司等可以购买得到；在头孢菌素C的转化中，每升头孢菌素C水溶液所对应的投酶量为8000～10000U，反应过程中pH需维持在8.00～8.50，优选8.10～8.20；反应温度10～20℃，优选10～15℃，反应时间约需30～60分钟。
头孢菌素C彻底转化为7-氨基头孢烷酸后，采用筛网将固定化头孢菌素C酰化酶从反应液中分离出来，分离得到7-氨基头孢烷酸反应液，向该反应液中缓慢滴加盐酸，例如10～15％(v/v)盐酸，待溶液中有晶体析出后停止加酸，养晶20～30分钟；继续滴加前述盐酸至pH3.00～5.50，优选pH3.50～4.50，最优选pH3.80，养晶120～240分钟；养晶结束后经过滤、洗涤、干燥等步骤可以分离得到7-氨基头孢烷酸。
下面，通过实施例更具体地说明本发明，但本发明的保护范围不局限于这些实施例中。
实施例1
取4.5L头孢菌素C发酵液，pH为4.65，含有约22g/L头孢菌素C(上清液)，使用15％(v/v)的硫酸调节pH至2.50，然后在5℃～10℃的条件下，经50纳米陶瓷膜、20KD超滤膜过滤后得到5.2L滤液(含陶瓷膜顶洗水)，头孢菌素C的浓度为7.50g/L，425nm波长条件下透光率为72％。
向滤液中加入15.6L经预冷至5～10℃的乙酸乙酯，充分混匀，待静置分层后收集轻相15.0L，头孢菌素C浓度为2.52g/L；然后，在约5℃，在15min内向所收集的轻相中匀速滴加20wt％的异辛酸钠乙酸乙酯溶液83mL，流加完毕后静置20min，分层，收集重相175mL，头孢菌素C浓度为211.8g/L；在5℃条件下，将重相175ml在30min时间段内加入到1750ml丙酮中，养晶60min并经过滤、洗涤和干燥后得到头孢菌素C钠盐晶体37.5克，含量93.0％(以头孢菌素C计)。
使用1.4L纯化水溶解上述头孢菌素C钠盐晶体37.5克，溶解完毕加入固定化头孢菌素C酰化酶140克，在pH8.20、温度15℃条件下，头孢菌素C酶解转化为7-氨基头孢烷酸，然后采用筛网将固定化头孢菌素C酰化酶从反应液中分离出来，分离得到7-氨基头孢烷酸反应液，用15％(v/v)盐酸调节该反应液pH至3.80，7-氨基头孢烷酸结晶析出，经养晶、过滤、洗料、干燥等步骤后得到7-氨基头孢烷酸晶体21.8克。经检测，7-ACA成品含量99.6％，透光率99.2％，有关物质中去乙酰7-ACA0.18％、去乙酰氧7-ACA0.19％、7-ACA二聚体0.20％，产品品质优异。
实施例2
取4.5L头孢菌素C发酵液，pH为4.72，含有约23g/L头孢菌素C(上清液)，使用15％(v/v)的硫酸调节pH至2.56，然后在5℃～10℃的条件下，经50纳米陶瓷膜、20KD超滤膜过滤后得到5.4L滤液(含陶瓷膜顶洗水)，头孢菌素C的浓度为7.32g/L，425nm波长条件下透光率为76％。
向滤液中加入16.2L经预冷至5～10℃的乙酸乙酯，充分混匀，待静置分层后收集轻相15.7L，头孢菌素C浓度为2.43g/L；然后，在约5℃，在15min内向所收集的轻相中匀速滴加20wt％的异辛酸钠乙酸乙酯溶液84mL，流加完毕后静置20min，分层，收集重相195mL，头孢菌素C浓度为193.0g/L；在5℃条件下，将重相195ml在30min时间段内加入到1950ml丙酮中，养晶60min并经过滤、洗涤和干燥后得到头孢菌素C钠盐晶体38.1克，含量92.7％(以头孢菌素C计)。
使用1.5L纯化水溶解上述头孢菌素C钠盐晶体38.1克，溶解完毕加入固定化头孢菌素C酰化酶150克，在pH8.20、温度15℃条件下，头孢菌素C酶解转化为7-氨基头孢烷酸，然后采用筛网将固定化头孢菌素C酰化酶从反应液中分离出来，分离得到7-氨基头孢烷酸反应液，用15％(v/v)盐酸调节该反应液pH至3.80，7-氨基头孢烷酸结晶析出，经养晶、过滤、洗料、干燥等步骤后得到7-氨基头孢烷酸晶体22.3克。经检测，7-ACA成品含量99.5％，透光率99.1％，有关物质中去乙酰7-ACA0.19％、去乙酰氧7-ACA0.21％、7-ACA二聚体0.21％，产品品质优异。
实施例3
取4.5L头孢菌素C发酵液，pH为4.59，含有约24g/L头孢菌素C(上清液)，使用15％(v/v)的硫酸调节pH至2.51，然后在5℃～10℃的条件下，经50纳米陶瓷膜、20KD超滤膜过滤后得到5.8L滤液(含陶瓷膜顶洗水)，头孢菌素C的浓度为7.11g/L，425nm波长条件下透光率为79％。
向滤液中加入17.4L经预冷至5～10℃的乙酸乙酯，充分混匀，待静置分层后收集轻相16.8L，头孢菌素C浓度为2.37g/L；然后，在约5℃，在15min内向所收集的轻相中匀速滴加20wt％的异辛酸钠乙酸乙酯溶液88mL，流加完毕后静置20min，分层，收集重相214mL，头孢菌素C浓度为182.2g/L；在5℃条件下，将重相214ml在30min时间段内加入到1070ml丙酮中，养晶60min并经过滤、洗涤和干燥后得到头孢菌素C钠盐晶体35.7克，含量93.2％(以头孢菌素C计)。
使用1.4L纯化水溶解上述头孢菌素C钠盐晶体35.7克，溶解完毕加入固定化头孢菌素C酰化酶140克，在pH8.20、温度15℃条件下，头孢菌素C酶解转化为7-氨基头孢烷酸，然后采用筛网将固定化头孢菌素C酰化酶从反应液中分离出来，分离得到7-氨基头孢烷酸反应液，用15％(v/v)盐酸调节该反应液pH至3.80，7-氨基头孢烷酸结晶析出，经氧晶、过滤、洗料、干燥等步骤后得到7-氨基头孢烷酸晶体20.7克。经检测，7-ACA成品含量99.7％，透光率99.3％，有关物质中去乙酰7-ACA0.17％、去乙酰氧7-ACA 0.18％、7-ACA二聚体0.19％，产品品质优异。

Claims (9)

1.一种头孢菌素C钠盐的制备方法，该方法包括如下步骤：
(1)含头孢菌素C滤液的制备
头孢菌素C发酵液经酸化后，采用50～100纳米的陶瓷膜过滤除去发酵液中的菌丝体和蛋白质，然后采用截留分子量20KD～100KD的超滤膜除去滤液中的色素和杂质，得到含头孢菌素C的滤液，且在所得到的含头孢菌素C的滤液中，头孢菌素C的浓度为7g/L～8g/L；
(2)头孢菌素C钠盐的制备
使用与水不混溶的有机溶剂从上述步骤(1)得到的滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；然后，该头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，而后静置分层，收集重相，得到高浓度的头孢菌素C钠盐溶液；该高浓度的头孢菌素C钠盐溶液与反溶剂混合，头孢菌素C钠盐结晶析出，
其中，在步骤(2)中，所述与水不混溶的有机溶剂选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯和乙酸丁酯中的一种，萃取过程控温在5～10℃，萃取中有机溶剂的加入量为3～4倍头孢菌素C滤液的体积，且萃取液中头孢菌素C的效价为2.0g/L～3.5g/L；
在步骤(2)中，异辛酸钠采用头孢菌素C萃取液中的溶剂体系配制成溶液，以溶液的形式与头孢菌素C萃取液混合，且异辛酸钠溶液配置浓度介于20wt％～30wt％；以及
在步骤(2)中，所述反溶剂为丙酮。
2.如权利要求1所述的头孢菌素C钠盐的制备方法，其特征是，所述头孢菌素C发酵液pH为4.50～6.00，其上清液含有20g/L～30g/L头孢菌素C。
3.如权利要求1或2所述的头孢菌素C钠盐的制备方法，其特征是，步骤(1)在5～10℃下进行；且在所述步骤(1)中，采用硫酸进行酸化处理，酸化处理后的头孢菌素C发酵液pH为2.50～3.50。
4.如权利要求1或2所述的头孢菌素C钠盐的制备方法，其特征是，在步骤(2)中，所述与水不混溶的有机溶剂是乙酸乙酯。
5.如权利要求1或2所述的头孢菌素C钠盐的制备方法，其特征是，在步骤(2)中，头孢菌素C与异辛酸钠进行成盐反应，头孢菌素C与异辛酸钠的摩尔比介于1：1.0～1：1.2之间；所得到的头孢菌素C钠盐溶液中头孢菌素C浓度为150mg/mL～250mg/mL。
6.如权利要求1或2所述的头孢菌素C钠盐的制备方法，其特征是，在步骤(2)中，所述反溶剂加入量为头孢菌素C钠盐溶液体积的5～10倍。
7.一种7-氨基头孢烷酸的制备方法，该方法包括：将头孢菌素C钠盐晶体加水溶解，得到头孢菌素C钠盐水溶液，该水溶液在固定化头孢菌素C酰化酶存在下，进行酶水解，而后结晶，得到7-氨基头孢烷酸，其中所述头孢菌素C钠盐晶体采用权利要求1所述的制备方法制备，包括如下步骤：
(1)含头孢菌素C滤液的制备
头孢菌素C发酵液经酸化后，采用50～100纳米的陶瓷膜过滤除去发酵液中的菌丝体和蛋白质，然后采用截留分子量20KD～100KD的超滤膜除去滤液中的色素和杂质，得到含头孢菌素C的滤液，且在所得到的含头孢菌素C的滤液中，头孢菌素C的浓度为7g/L～8g/L；
(2)头孢菌素C钠盐的制备
使用与水不混溶的有机溶剂从上述步骤(1)得到的滤液中萃取头孢菌素C，得到头孢菌素C萃取液；然后，该头孢菌素C萃取液与异辛酸钠混合，进行成盐反应，而后静置分层，收集重相，得到高浓度的头孢菌素C钠盐溶液；该高浓度的头孢菌素C钠盐溶液与反溶剂混合，头孢菌素C钠盐结晶析出，
其中，在步骤(2)中，所述与水不混溶的有机溶剂选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯和乙酸丁酯中的一种，萃取过程控温在5～10℃，萃取中有机溶剂的加入量为3～4倍头孢菌素C滤液的体积，且萃取液中头孢菌素C的效价为2.0g/L～3.5g/L；
在步骤(2)中，异辛酸钠采用头孢菌素C萃取液中的溶剂体系配制成溶液，以溶液的形式与头孢菌素C萃取液混合，且异辛酸钠溶液配置浓度介于20wt％～30wt％；以及
在步骤(2)中，所述反溶剂为丙酮。
8.如权利要求7所述的7-氨基头孢烷酸的制备方法，其特征是，所得到的头孢菌素C钠盐水溶液中头孢菌素C的浓度介于15g/L～35g/L；酶水解反应过程中pH维持在8.00～8.50，反应温度10～20℃，反应时间30～60分钟。
9.如权利要求7所述的7-氨基头孢烷酸的制备方法，其特征是，在酶水解反应后，采用筛网将固定化头孢菌素C酰化酶从反应液中分离出来，分离得到7-氨基头孢烷酸反应液，向该反应液中滴加盐酸，待溶液中有晶体析出后停止加酸，养晶20～30分钟；而后继续滴加盐酸至pH 3.00～5.50，养晶120～240分钟；养晶结束后经过滤、洗涤、干燥步骤，得到7-氨基头孢烷酸。
CN201910603523.8A 2019-07-05 2019-07-05 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法 Active CN110423241B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910603523.8A CN110423241B (zh) 2019-07-05 2019-07-05 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910603523.8A CN110423241B (zh) 2019-07-05 2019-07-05 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110423241A CN110423241A (zh) 2019-11-08
CN110423241B true CN110423241B (zh) 2020-11-27

Family

ID=68409014

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910603523.8A Active CN110423241B (zh) 2019-07-05 2019-07-05 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110423241B (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111875621A (zh) * 2020-08-26 2020-11-03 山东鲁抗医药股份有限公司 一种注射用头孢菌素盐的制备方法
CN112625053B (zh) * 2020-12-30 2022-08-09 伊犁川宁生物技术股份有限公司 一种具有低含量最大未知单杂的7-aca及其制备方法
CN113150010A (zh) * 2021-04-19 2021-07-23 瑞阳制药股份有限公司 一种7-氨基头孢烷酸纯化工艺
CN115010723B (zh) * 2022-06-08 2024-03-29 伊犁川宁生物技术股份有限公司 一种头孢烷酸类亚砜组合物及其制备方法
CN115322207B (zh) * 2022-08-31 2023-09-26 中科医药行业生产力促进中心有限公司 头孢菌素c的提纯方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5403929A (en) * 1993-09-27 1995-04-04 Industrial Technology Research Institute Process for preparing alkali salts of cephalosporin C
CN102503958A (zh) * 2011-11-18 2012-06-20 山东立海润生物技术有限公司 一种干燥头孢霉素c钠盐的生产工艺
CN104278071A (zh) * 2013-07-03 2015-01-14 上海凯鑫分离技术有限公司 头孢菌素c的提取方法
CN106511281A (zh) * 2016-09-30 2017-03-22 华北制药河北华民药业有限责任公司 一种注射用头孢孟多酯钠粉针制剂的制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5403929A (en) * 1993-09-27 1995-04-04 Industrial Technology Research Institute Process for preparing alkali salts of cephalosporin C
CN102503958A (zh) * 2011-11-18 2012-06-20 山东立海润生物技术有限公司 一种干燥头孢霉素c钠盐的生产工艺
CN104278071A (zh) * 2013-07-03 2015-01-14 上海凯鑫分离技术有限公司 头孢菌素c的提取方法
CN106511281A (zh) * 2016-09-30 2017-03-22 华北制药河北华民药业有限责任公司 一种注射用头孢孟多酯钠粉针制剂的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110423241A (zh) 2019-11-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110423241B (zh) 头孢菌素c钠盐和7-氨基头孢烷酸的制备方法
CN110283869B (zh) 7-氨基头孢烷酸的制备方法
CN102268019B (zh) 一种头孢羟氨苄化合物及其制法
CN109627269B (zh) 一种提取n-乙酰神经氨酸的方法
CN101486637A (zh) 从发酵液中提取丁二酸的方法
CN101948494B (zh) 一种腺苷钴胺提取方法
CN111039808A (zh) 一种从发酵液中提取酪氨酸的方法
CN110590867A (zh) 一种d-氨基葡萄糖盐酸盐的合成方法
CN102796120A (zh) 一种头孢克洛的制备方法
CN101492408A (zh) 一种从发酵液分离色氨酸的方法
CN109628541A (zh) 一种酶法合成青霉素v盐的方法
US5853720A (en) Combined process for the purification of vancomycin hydrochloride
CN101906109B (zh) 一种头孢呋辛钠的制备方法
CN113005161A (zh) 一种聚唾液酸的制备方法及聚唾液酸制品
CN112645912A (zh) 一种高纯度m2晶型麦考酚钠的制备方法
US20070213313A1 (en) Direct process for the production of an amino acid dihydrochloride
CN110922506A (zh) 一种高澄清度的肝素钠
CN115215949B (zh) 透明质酸钠及其提纯方法
CN104610282A (zh) 一种头孢唑啉酸的提纯方法
CN110627848A (zh) 一种去除唾液酸中杂质的方法及其应用
CN112625053B (zh) 一种具有低含量最大未知单杂的7-aca及其制备方法
CN114149477A (zh) 一种高纯度维生素b12晶体的结晶方法及其产品
CN111875621A (zh) 一种注射用头孢菌素盐的制备方法
CN113214103A (zh) 一种酶法合成d-对羟基苯甘氨酸的后续处理方法
RU2294371C2 (ru) Способ получения лимонной кислоты и комплекса кислотостабильных амилолитических ферментов

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant