CN110420337A - 一种靶向整合素α6的二聚体多肽放射性药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种靶向整合素α6的二聚体多肽放射性药物及其制备方法，该放射性药物包括cKiE二聚体多肽和放射性核素，所述放射性核素通过双功能螯合剂标记所述cKiE二聚体多肽；所述cKiE二聚体多肽由两个连接有连接剂的cKiE多肽单体二聚化而成；所述cKiE多肽单体为环形多肽，所述环形多肽由序列为Lys‑Arg‑Trp‑Tyr‑Asp‑Glu‑Asn‑Ala‑Glu的氨基酸分子链首尾连接而成；连接剂为3‑5个惰性氨基酸分子依次连接的氨基酸分子链或聚合度为3‑12的聚乙二醇，惰性氨基酸为甘氨酸或丝氨酸。发明的放射性药物环型多肽序列不会被体内的蛋白酶识别，能够有效的提高体内代谢稳定性，从而提高肿瘤组织的摄取。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型肿瘤诊断放射性药物，特别涉及一种靶向整 合素α6的放射性制剂及其制备方法。
背景技术
整合素家族是一类由α和β两个亚单位以非共价键结合形成的异 二聚体跨膜糖蛋白。目前已经在哺乳动物中发现18种α亚单位和8 种β亚单位。这些亚单位可组合形成24种整合素。亚基组合的不同， 整合素的分布和生理功能也不同。一种整合素可以有多个配体，而一 种配体又可以和多种受体结合。整合素通常参与细胞内外的信号转导 从而调控各种重要的细胞功能，如粘附、极性、分化、迁移和细胞分 裂等。整合素α6作为整合素家族成员之一，主要和β1或β4亚单位结 合，组成α6β1和α6β4，是层黏连蛋白的特异性受体。整合素α6在乳 腺癌、肝癌、鼻咽癌和宫颈癌等多种肿瘤中表达上调，而在相应的正 常组织中表达下调。整合素α6在肿瘤的发生、新生血管生成、侵袭 和转移中，发挥着重要作用。此外，肿瘤中整合素α6的高表达，与 其预后呈现负相关。因此，整合素α6可以作为肿瘤诊断和预后评价的生物标志物，针对整合素α6开发肿瘤分子影像探针显得尤为重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型的靶向整合素α6阳性肿瘤的多 肽放射性药物。该药物首先将氨基酸分子链或聚乙二醇分子与环型多 肽cKRWYDENAisoE(cKiE)连接，然后再将此二聚化，使二聚体 分子中的两个多肽有足够长的距离能够同时结合两个整合素α6靶点， 在增强体内稳定性、改善药代动力学性质的同时，提高肿瘤的靶向性。 这种双价形式的结合可以进一步增强肿瘤对药物的摄取，达到更好的 诊断效果。该药物通过双功能螯合剂将放射性核素标记到cKiE二聚 体多肽分子上，在体内标记药物通过cKiE多肽的靶向作用浓聚到肿 瘤部位，利用核医学的单光子断层显像(SPECT)技术或正电子发射 计算机断层显像(PET)技术，对整合素α6阳性肿瘤进行显像诊断。
本发明的目的是通过如下技术方案实现：
一种靶向整合素α6的二聚体多肽放射性药物，包括cKiE二聚体 多肽和放射性核素，所述放射性核素通过双功能螯合剂标记所述 cKiE二聚体多肽；所述cKiE二聚体多肽由两个连接有连接剂的cKiE 多肽单体二聚化而成；所述cKiE多肽单体为环形多肽，所述环形多 肽由序列为Lys-Arg-Trp-Tyr-Asp-Glu-Asn-Ala-Glu(赖氨酸-精氨酸- 色氨酸-酪氨酸-天冬氨酸-谷氨酸-天冬酰胺-丙氨酸-谷氨酸，简写为 cKRWYDENAisoE)的氨基酸分子链首尾连接而成；所述连接剂(以 PKM1表示)为3-5个惰性氨基酸分子依次连接的氨基酸分子链或聚 合度为3-12的聚乙二醇(PEGn，PEG＝Polyethylene glycol，n＝ 3-12)，所述惰性氨基酸为甘氨酸或丝氨酸。(惰性氨基酸就是没有侧 链基团或者有侧链基团但不容易与其它基团反应的氨基酸，本发明中 限定为甘氨酸或丝氨酸)。
进一步的，所述cKiE二聚体多肽与所述双功能螯合剂之间连接 有药代动力学修饰分子(PKM)。
进一步的，所述药代动力学修饰分子(PKM)为聚合度为4的 聚乙二醇(PEG4)或者为8-氨基辛酸(Aoc)；
所述放射性核素为99mTc，68Ga，64Cu，111In，90Y和177Lu中任意 一种；
双功能螯合剂为HYNIC，DOTA，NOTA和DTPA中任意一种。
进一步的，所述连接剂为GGG、SSS、GSS、GGS、GSG、GGGG、 GGGGG中任意一种惰性氨基酸分子链，优选为最简单的没有支链的 三个甘氨酸依次连接的分子链GGG。根据需要可以增加Gly的数量 以增加分子链长，比如GGGG或GGGGG，也可以用Ser替换Gly 以增加分子链的亲水性，比如GSG、GGS、GSS和SSS
进一步的，所述连接剂为聚合度为4的聚乙二醇。
进一步的，所述多肽放射性药物为无色透明液体针剂。
一种cKiE二聚体多肽放射性药物的制备方法，包括以下步骤：以 下各步骤中以PKM表示药代动力学修饰分子，以PKM1表示连接剂； 以cKiE表示cKiE多肽单体；
a、HYNIC-PKM-COOH的制备
将Fmoc保护的PKM-COOH溶于终浓度体积分数20％哌啶的 DMF溶液，室温反应15～30分钟后，加入乙醚使PKM-COOH沉淀， 离心，弃掉上清，沉淀用乙醚洗涤，除去残留的乙醚，获得预期产物NH2-PKM-COOH；将HYNIC-NHS和NH2-PKM-COOH溶于DMF， 加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液 并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物 HYNIC-PKM-COOH；
b、HYNIC-PKM-OSu的制备
将HYNIC-PKM-COOH溶于DMF，加入NHS和EDC·HCl，室 温搅拌5-10小时，向反应液中加入体积分数50％ACN的水溶液并过 滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标 物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分 析确认为预期产物HYNIC-PKM-OSu；
c、(PKM1-cKiE)2-Glu的制备
将PKM1-cKiE和OSu2-Glu-Boc溶于DMF，加入DIEA调节pH 值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱 HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期 产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc；将冻干产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc溶于TFA，室温反应5min，反应液用氮气吹干，获得产物经 MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu；
d、HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
将(PKM1-cKiE)2-Glu和HYNIC-PKM-OSu溶于DMF，加入DIEA 调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A 半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干， 获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物 HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2；
e、99mTc-HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
配制含三苯基膦三磺酸钠(TPPTS)、三羟甲基甘氨酸(tricine)、 琥珀酸二钠、琥珀酸和HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的混合液，混合 液中上述各物质的质量比为：4～6:6～7:38～39:12～13:0.05，将混合液冻 干。在冻干粉末中加入Na99mTcO4溶液，100℃水浴加热反应20-25 分钟，待反应结束后室温冷却，制成cKiE多肽放射性药物。经HPLC 分析备用。
另一种cKiE二聚体多肽放射性药物的制备方法，包括以下步骤： 以下各步骤中以PKM表示药代动力学修饰分子，以PKM1表示连接 剂；以cKiE表示cKiE多肽单体；
a、DOTA-PKM-COOH的制备
将Fmoc保护的PKM-COOH溶于终浓度体积分数20％哌啶的 DMF溶液，室温反应15-30分钟后，加入乙醚使PKM-COOH沉淀， 离心，弃掉上清，沉淀用乙醚洗涤，除去残留的乙醚，获得预期产物 NH2-PKM-COOH；将DOTA-NHS和NH2-PKM-COOH溶于DMF， 加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液 并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物 DOTA-PKM-COOH；
b、DOTA-PKM-OSu的制备
将DOTA-PKM-COOH溶于DMF，加入NHS和EDC·HCl，室温 搅拌5-10小时，向反应液中加入体积分数50％ACN的水溶液并过滤， 滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的 馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析确 认为预期产物DOTA-PKM-OSu；
c、(PKM1-cKiE)2-Glu的制备
将PKM1-cKiE和OSu2-Glu-Boc溶于DMF，加入DIEA调节pH 值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱 HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期 产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc；将冻干产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc溶于TFA，室温反应5min，反应液用氮气吹干，获得产物经 MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu；
d、DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
将(PKM1-cKiE)2-Glu和DOTA-PKM-OSu溶于DMF，加入DIEA 调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A 半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干， 获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析确认为预期产物 DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2；
e、68Ga-DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
从锗-镓发生器新鲜淋洗68GaCl3，用2.5M的NH4OAc调节pH 至3.5。加入50μg DOTA-PEG4-(PKM1-cKiE)2，99℃水浴加热20分 钟，待反应结束后室温冷却10分钟，制成cKiE多肽放射性药物。经HPLC分析备用。
进一步的，所述HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备 YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)或分 析柱(250×4.6mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，其中流 动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。 步骤a：配备半制备柱，流速4mL/min，淋洗梯度设定为起始时80％ A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。 步骤b：配备分析柱，流速1mL/min，淋洗梯度为初始时90％A和 10％B，20分钟时30％A和70％B。
所述cKiE多肽放射性药物用于整合素α6阳性肿瘤患者的显像诊 断。
本发明的有益效果：
1、在本发明cKiE多肽放射性药物，环型多肽序列不会被体内的 蛋白酶识别，能够有效的提高体内代谢稳定性，从而提高肿瘤组织的 摄取。
2、本发明cKiE多肽放射性药物，首先将氨基酸分子链或聚乙二 醇分子与环型多肽单体连接，然后再将此二聚化，使二聚体分子中的 两个多肽有足够长的距离能够同时结合两个整合素α6靶点，这种双 价形式的结合可以进一步增强肿瘤对药物的摄取，达到更好的诊断效 果。
3、本发明不仅在两个cKiE多肽之间引入PKM1，同时在用于放 射性核素标记的双功能螯合剂(如HYNIC或DOTA)与整合素α6靶 向的cKiE多肽二聚体之间引入了药代动力学修饰分子PKM，即 HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2或DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2，改善了探 针的生物相容性，优化了药代动力学性质，特别是从非肿瘤组织的清 除动力学。
4、本发明中使用HYNIC作为双功能螯合剂，同时使用TPPTS 和tricine作为协同配体从而使“99mTc-HYNIC核”具有更加良好的体 内外稳定性。
研究证实cCRWYDENAC序列多肽具有很好的整合素α6靶向性 能，能够有效地分辨出不同肿瘤细胞的整合素α6表达情况。本实验 合成优化的cKiE多肽药物(cKRWYDENAisoE)，酰胺键首尾成环， 简化多肽合成工序。同时，cKiE二聚体多肽在两个多肽之间引入足 够长的连接剂，使二聚体分子中的两个多肽有足够长的距离能够同时 结合两个整合素α6靶点，比单体具有更高的亲和力，增强药物的受 体-配体亲和力以达到更高的肿瘤摄取。在用于放射性核素标记的双 功能螯合剂与cKiE二聚体多肽之间加入了药代动力学修饰分子 PKM，优化了药代动力学性质，以达到更好的肿瘤诊断效果。
附图说明
图1.(A)cKiE多肽，(B)HYNIC-GGG-cKiE，(C) HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2，(D)DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2结构示意 图。
图2.99mTc-HYNIC-PKM-(GGG-cKiE)2标记物结构示意图。
图3.99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2细胞结合实验(***表示 P<0.001)。
图4.注射99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5、1和2h后，在 BALB/c Nude鼠CNE2鼻咽癌模型中SPECT/CT显像图(虚线指示肿 瘤部分)。
图5.(A)注射99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5h后，在 BALB/c Nude鼠CNE2鼻咽癌模型，CNE2sh(整合素α6敲低)肿瘤 模型和CNE2鼻咽癌模型注射过量cKiE多肽阻断实验中的 SPECT/CT显像图；(B)注射99mTc-HYNIC-GGG-cKiE 0.5h后，在 CNE2鼻咽癌模型中的SPECT/CT显像图(虚线指示肿瘤部分)。
图6.(A)注射99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5、1和2h后， 在CNE2鼻咽癌模型中体内分布结果；(B)注射 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5h后，在CNE2肿瘤模型和CNE2sh(整合素α6敲低)肿瘤模型实验中的体内分布结果对比；(C) 注射99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5h后，在CNE2肿瘤模型和 CNE2肿瘤模型阻断实验中的体内分布结果对比。
图7.在BALB/c Nude鼠HepG2肝细胞癌模型中注射 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2(A)0.5、1和2h后的SPECT/CT显 像图；(B)0.5h冷肽阻断组的SPECT/CT显像图。
图8.(A)注射99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5、1和2h后， 在HepG2肝细胞癌模型中体内分布结果；(B)注射 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2 0.5h后，在HepG2肿瘤模型和HepG2肿瘤模型阻断实验中的体内分布结果对比。
图9.在CNE2鼻咽癌模型中注射 99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2(A)0.5、1和2h后的SPECT/CT显像 图；(B)0.5h冷肽阻断组的SPECT/CT显像图。
具体实施方式
本发明实施例中所采用的材料：
1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC·HCl，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)， N-hydroxysuccinimide(NHS，N-羟基琥珀酰亚胺)，succinic acid(琥珀 酸)，disodium succinate hexahydrate(琥珀酸二钠)，trisodium triphenylphosphine-3,3',3”-trisulfonate(TPPTS，三苯基膦三磺酸钠)， N,N-Dimethylform amide(DMF，N,N-二甲基甲酰胺)，tricine(三羟甲 基甘氨酸)均购自美国Sigma-Aldrich公司。HYNIC-NHS(联肼尼克酰 胺)，DOTA-NHS购自美国Noca-biochem公司。 GGG-cKRWYDENAisoE(GGG-cKiE)，PEG4-cKRWYDENAisoE (PEG4-cKiE)多肽单体购自中国吉尔生化公司。Na99mTcO4洗脱液购自 北京原子高科股份有限公司。
实施例1：
本实施例以99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2多肽放射性药物及 其制备方法为例。
99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2中，cKiE多肽单体为环型多肽 cKRWYDENAisoE，cKiE二聚体多肽是将连接剂GGG与cKiE多肽 单体连接，再将两个连接有GGG的cKiE多肽单体二聚化而成的cKiE 二聚体多肽，放射性核素99mTc通过一个双功能螯合剂HYNIC标记 所述cKiE二聚体多肽，cKiE二聚体多肽与双功能螯合剂之间还连接 有药代动力学修饰分子PEG4，所述cKiE多肽放射性药物为 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2，所述cKiE多肽放射性药物为无色 透明液体针剂。
99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2制备方法如下：
HYNIC-PEG4-COOH的制备：将Fmoc保护的PEG4-COOH溶于 DMF，加入哌啶使终浓度为20％，室温反应20分钟后，加入10ml 4 ℃乙醚使PEG4-COOH沉淀，4000rpm 4℃离心5分钟，弃掉上清， 沉淀用4℃乙醚洗涤3次，旋蒸除去残留的乙醚，获得产物为 NH2-PEG4-COOH；将HYNIC-NHS和NH2-PEG4-COOH溶于DMF， 加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260 HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5 μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速4mL/min,其中流动A相为去 离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯 度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分 钟时80％A和20％B。收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获 得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析m/z＝568.60([M+H]+)，确认为 预期产物HYNIC-PEG4-COOH。
HYNIC-PEG4-OSu的制备：将HYNIC-PEG4-COOH溶于DMF， 加入NHS和EDC·HCl，室温搅拌7小时，向反应液中加入体积分数 50％ACN的水溶液并过滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC 分离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分 钟，流速4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流 动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目 标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱 分析m/z＝665.67([M+H]+)，确认为预期产物HYNIC-PEG4-OSu。
(GGG-cKiE)2-Glu的制备：将GGG-cKiE和OSu2-Glu-Boc溶于 DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经 YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化。HPLC方法为使用 Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10 mml.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速4mL/min,其中流 动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。 淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目标物的馏分，合并收集液并冻干， 获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析m/z＝2938.04([M+H]+)，确认 为预期产物(GGG-cKiE)2-Glu-Boc；将冻干产物(GGG-cKiE)2-Glu-Boc 溶于1ml TFA，室温反应5min，反应液用氮气吹干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析m/z＝2837.92([M+H]+)，确认为预期产物 (GGG-cKiE)2-Glu。
HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的制备：将(GGG-cKiE)2-Glu和 HYNIC-PEG4-OSu溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室 温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化， HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半 制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速 4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为 乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目标物的 馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析 m/z＝3388.51([M+H]+)，确认为预期产物HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2。
99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的制备：配制含三苯基膦三磺 酸钠(TPPTS)5.0mg，三羟甲基甘氨酸(tricine)6.5mg，琥珀酸 二钠38.5mg，琥珀酸12.7mg和50μg的HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的混合液500μL于10mL西林瓶中，将混合液冻干。在冻干粉末中 加入1.0-1.5mL的Na99mTcO4溶液(10-35mCi)，100℃水浴加热西 林瓶反应20-25分钟，待反应结束后室温冷却10分钟，制成cKiE多 肽放射性药物。
对cKiE多肽放射性药物取样进行放射性HPLC分析。HPLC方 法为使用Agilent1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A分析柱 (250×4.6mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗20分钟，流速1mL/min, 其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时90％A和10％B，20分钟时30％A和 70％B。99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的标记率>95％，经Sep-Pak C18柱纯化后放射化学纯度>98％。
HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2与整合素α6结合亲和力测定：高表达 整合素α6的人鼻咽癌细胞CNE2和整合素α6敲低的人鼻咽癌细胞 CNE2sh作为实验样本，使用99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2作为整 合素α6受体特异性结合的放射性配基，采用细胞结合实验，分别测定99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2与CNE2、CNE2sh的结合力，并 设置过量HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2封闭组，验证 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2与CNE2结合的特异性。实验结果 显示99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2与CNE2、CNE2sh和CNE2封 闭组的结合分别为2.47％，1.04％，1.09％每105个细胞，存在明显的 统计学差异(图3)，表明HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2与整合素α6有 较高的亲和力，并且是特异性结合。
99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2在荷瘤鼠中的SPECT/CT显像： 在CNE2鼻咽癌肿瘤模型中，99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的肿 瘤摄取清晰可见(图4，图5A)，明显高于99mTc-HYNIC-GGG-cKiE (图5B)，除了肾有较高摄取外，其它脏器背景较低，且多肽在肿瘤 部位滞留时间更长，更有利于肿瘤的诊断。在CNE2sh(整合素α6敲 低)鼻咽癌肿瘤模型组和阻断实验组中，肿瘤摄取明显降低(图5A)， 说明多肽与整合素α6位点的特异性结合。
在HepG2肝细胞癌肿瘤模型中， 99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的肿瘤摄取清晰可见(图7A)，除 了肾有较高摄取外，其它脏器背景较低，且多肽在肿瘤部位滞留时间 更长，更有利于肿瘤的诊断。在阻断实验组中，肿瘤摄取明显降低(图 7B)，说明多肽与整合素α6位点的特异性结合。
99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2在荷瘤鼠中生物分布：将 BALB/c Nude鼠荷CNE2鼻咽癌肿瘤和HepG2肝细胞癌肿瘤，每组 4只。各组小鼠分别经尾静脉注射100μL(～74kBq)99mTc-HYNIC-PEG4-(GGG-cKiE)2的cKiE二聚体多肽，于注射后30 分钟、60分钟和120分钟处死，取血及主要脏器，称重并测量放射 性计数，经衰变校正后计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g)。实验 结果验证了显像结果并显示了探针在各个组织器官中的分布(图6， 图8)。
实施例2：
本实施例以99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2多肽放射性药物及 其制备方法为例。
99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2中，cKiE多肽单体为环型多肽 cKRWYDENAisoE，cKiE二聚体多肽是将连接剂GGG与cKiE多肽 单体连接，再将两个连接有GGG的cKiE多肽单体二聚化而成的cKiE 二聚体多肽，放射性核素99mTc通过一个双功能螯合剂HYNIC标记 所述cKiE多肽二聚体，cKiE二聚体多肽与双功能螯合剂之间还连接 有药代动力学修饰分子Aoc，所述cKiE多肽放射性药物为 99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2，所述cKiE多肽放射性药物为无色透 明液体针剂。
99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2制备方法如下：
HYNIC-Aoc-COOH的制备：将Fmoc保护的Aoc-COOH溶于 DMF，加入哌啶使终浓度为20％，室温反应20分钟后，加入10ml 4 ℃乙醚使Aoc-COOH沉淀，4000rpm 4℃离心5分钟，弃掉上清， 沉淀用4℃乙醚洗涤3次，旋蒸除去残留的乙醚，获得产物为 NH2-Aoc-COOH；将HYNIC-NHS和NH2-Aoc-COOH溶于DMF，加 入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260 HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5 μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速4mL/min,其中流动A相为去 离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯 度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分 钟时80％A和20％B。收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获 得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析m/z＝462.52([M+H]+)，确认为 预期产物HYNIC-Aoc-COOH。
HYNIC-Aoc-OSu的制备：将HYNIC-Aoc-COOH溶于DMF，加 入NHS和EDC·HCl，室温搅拌7小时，向反应液中加入体积分数50％ ACN的水溶液并过滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分 离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分 钟，流速4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流 动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目 标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱 分析m/z＝559.59([M+H]+)，确认为预期产物HYNIC-Aoc-OSu。
(GGG-cKiE)2-Glu的制备：其制备方法同上。
HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2的制备：将(GGG-cKiE)2-Glu和 HYNIC-Aoc-OSu溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温 搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化， HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半 制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速 4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为 乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25 分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目标物的 馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析 m/z＝3282.43([M+H]+)，确认为预期产物HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2。
99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2的制备：配制含三苯基膦三磺酸 钠(TPPTS)5.0mg，三羟甲基甘氨酸(tricine)6.5mg，琥珀酸二钠 38.5mg，琥珀酸12.7mg和50μg的HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2的混 合液500μL于10mL西林瓶中，将混合液冻干。在冻干粉末中加入 1.0-1.5mL的Na99mTcO4溶液(10-35mCi)，100℃水浴加热西林瓶 反应20-25分钟，待反应结束后室温冷却10分钟，制成cKiE多肽放 射性药物。
对cKiE多肽放射性药物取样进行放射性HPLC分析。HPLC方 法为使用Agilent1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A分析柱 (250×4.6mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗20分钟，流速1mL/min, 其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时90％A和10％B，20分钟时30％A和 70％B。99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2的标记率>95％，经Sep-Pak C18柱纯化后放射化学纯度>98％。
99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2在荷瘤鼠中的SPECT/CT显像： 在CNE2鼻咽癌肿瘤模型中，99mTc-HYNIC-Aoc-(GGG-cKiE)2的肿瘤 摄取清晰可见(图9A)，但胆囊和肝脏有明显摄取。在阻断实验组中， 肿瘤摄取明显降低(图9B)，说明多肽与整合素α6位点的特异性结合。
实施例3：
本实施例以68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2多肽放射性药物及其 制备方法为例。
68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2中，cKiE多肽单体为环型多肽 cKRWYDENAisoE，cKiE二聚体多肽是将连接剂GGG与cKiE多肽 单体连接，再将两个连接有GGG的cKiE多肽单体二聚化而成的cKiE 二聚体多肽，放射性核素68Ga通过一个螯合剂DOTA标记所述cKiE 多肽二聚体，cKiE二聚体多肽与螯合剂之间还连接有药代动力学修 饰分子PEG4，所述cKiE多肽放射性药物为 68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2，所述cKiE多肽放射性药物为无色透 明液体针剂。
68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2制备方法如下：
DOTA-PEG4-COOH的制备：将Fmoc保护的PEG4-COOH溶于 DMF，加入哌啶使终浓度为20％，室温反应20分钟后，加入10ml 4 ℃乙醚使PEG4-COOH沉淀，4000rpm 4℃离心5分钟，弃掉上清， 沉淀用4℃乙醚洗涤3次，旋蒸除去残留的乙醚，获得产物为 NH2-PEG4-COOH；将DOTA-NHS和NH2-PEG4-COOH溶于DMF， 加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260 HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5 μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速4mL/min,其中流动A相为去 离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯 度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分 钟时80％A和20％B。收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获 得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析m/z＝651.71([M+H]+)，确认为 预期产物DOTA-PEG4-COOH。
DOTA-PEG4-OSu的制备：将DOTA-PEG4-COOH溶于DMF，加 入NHS和EDC·HCl，室温搅拌7小时，向反应液中加入体积分数50％ ACN的水溶液并过滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分 离纯化。HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分 钟，流速4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流 动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目 标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱 分析m/z＝748.78([M+H]+)，确认为预期产物DOTA-PEG4-OSu。
(GGG-cKiE)2-Glu的制备：其制备方法同上。
DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2的制备：将(GGG-cKiE)2-Glu和 DOTA-PEG4-OSu溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温 搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化， HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半 制备柱(250×10mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗30分钟，流速 4mL/min,其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为 乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25 分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。收集目标物的 馏分，合并收集液并冻干，获得产物经MALDI-TOF-MS质谱分析 m/z＝3471.62([M+H]+)，确认为预期产物DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2。
68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2的制备：使用0.05M的HCl从锗 -镓发生器中每1mL一个馏分淋洗68GaCl3，共淋洗5mL。选取第1-2 mL的68GaCl3，用2.5M的NH4OAc调节pH至3.5。加入50μg DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2，99℃水浴加热20分钟，待反应结束后室 温冷却10分钟，制成cKiE多肽放射性药物。
对cKiE多肽放射性药物取样进行放射性HPLC分析。HPLC方 法为使用Agilent1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A分析柱 (250×4.6mm,I.D.S-5μm，12nm)，梯度淋洗20分钟，流速1mL/min, 其中流动A相为去离子水(含0.05％TFA)，流动B相为乙腈(含0.05％TFA)。淋洗梯度设定为起始时90％A和10％B，20分钟时30％A和 70％B。68Ga-DOTA-PEG4-(GGG-cKiE)2的标记率>95％，经Sep-Pak C18柱纯化后放射化学纯度>98％。
Claims (10)
1.一种靶向整合素α6的二聚体多肽放射性药物，其特征在于：包括cKiE二聚体多肽和放射性核素，所述放射性核素通过双功能螯合剂标记所述cKiE二聚体多肽；所述cKiE二聚体多肽由两个连接有连接剂的cKiE多肽单体二聚化而成；所述cKiE多肽单体为环形多肽，所述环形多肽由序列为Lys-Arg-Trp-Tyr-Asp-Glu-Asn-Ala-Glu的氨基酸分子链首尾连接而成；所述连接剂为3-5个惰性氨基酸分子依次连接的氨基酸分子链或聚合度为3-12的聚乙二醇，所述惰性氨基酸为甘氨酸或丝氨酸。
2.根据权利要求1所述的靶向整合素α6的环型多肽放射性药物，其特征在于：所述cKiE二聚体多肽与所述双功能螯合剂之间连接有药代动力学修饰分子。
3.根据权利要求1所述的靶向整合素α6的环型多肽放射性药物，其特征在于：所述药代动力学修饰分子为聚合度为4的聚乙二醇或者为8-氨基辛酸；所述放射性核素为99mTc，68Ga，64Cu，111In，90Y和177Lu中任意一种；双功能螯合剂为HYNIC，DOTA，NOTA和DTPA中任意一种。
4.根据权利要求1所述的靶向整合素α6的环型多肽放射性药物，其特征在于：所述连接剂为GGG、SSS、GSS、GGS、GSG、GGGG、GGGGG中任意一种氨基酸分子链。
5.根据权利要求1所述的靶向整合素α6的环型多肽放射性药物，其特征在于：所述连接剂为聚合度为4的聚乙二醇。
6.根据权利要求1所述的靶向整合素α6的环型多肽放射性药物，其特征在于：所述多肽放射性药物为无色透明液体针剂。
7.一种靶向整合素α6的cKiE多肽放射性药物的制备方法，其特征在于：
所述方法包括以下步骤：以下各步骤中以PKM表示药代动力学修饰分子，以PKM1表示连接剂；以cKiE表示cKiE多肽单体；
a、HYNIC-PKM-COOH的制备
将Fmoc-NH2-PKM-COOH溶于终浓度体积分数20％哌啶的DMF溶液，室温反应15-30分钟后，加入乙醚使NH2-PKM-COOH沉淀，离心，弃掉上清，沉淀用乙醚洗涤，除去残留的乙醚，获得预期产物NH2-PKM-COOH；将HYNIC-NHS和NH2-PKM-COOH溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物HYNIC-PKM-COOH；
b、HYNIC-PKM-OSu的制备
将HYNIC-PKM-COOH溶于DMF，加入NHS和EDC·HCl，室温搅拌5-10小时，向反应液中加入体积分数50％ACN的水溶液并过滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物HYNIC-PKM-OSu；
c、(PKM1-cKiE)2-Glu的制备
将PKM1-cKiE和OSu2-Glu-Boc溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc；将冻干产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc溶于1ml TFA，室温反应5min，反应液用氮气吹干，获得预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu；
d、HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
将(PKM1-cKiE)2-Glu和HYNIC-PKM-OSu溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2；
e、99mTc-HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
配制含三苯基膦三磺酸钠、三羟甲基甘氨酸、琥珀酸二钠、琥珀酸和HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2的混合液，混合液中上述各物质的质量比为：4-6:6-7:38-39:12-13:0.05，将混合液冻干。在冻干粉末中加入Na99mTcO4溶液，100℃水浴加热反应20-25分钟，待反应结束后室温冷却，制成99mTc-HYNIC-PKM-(PKM1-cKiE)2。
8.一种靶向整合素α6的cKiE多肽放射性药物的制备方法，其特征在于：
所述方法包括以下步骤：以下各步骤中以PKM表示药代动力学修饰分子，以PKM1表示连接剂；以cKiE表示cKiE多肽单体；
a、DOTA-PKM-COOH的制备
将Fmoc保护的PKM-COOH溶于终浓度体积分数20％哌啶的DMF溶液，室温反应15～30分钟后，加入乙醚使PKM-COOH沉淀，离心，弃掉上清，沉淀用乙醚洗涤，除去残留的乙醚，获得预期产物NH2-PKM-COOH；将DOTA-NHS和NH2-PKM-COOH溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物DOTA-PKM-COOH；
b、DOTA-PKM-OSu的制备
将DOTA-PKM-COOH溶于DMF，加入NHS和EDC·HCl，室温搅拌5-10小时，向反应液中加入体积分数50％ACN的水溶液并过滤，滤液经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物DOTA-PKM-OSu；
c、(PKM1-cKiE)2-Glu的制备
将PKM1-cKiE和OSu2-Glu-Boc溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc；将冻干产物(PKM1-cKiE)2-Glu-Boc溶于1ml TFA，室温反应5min，反应液用氮气吹干，获得预期产物(PKM1-cKiE)2-Glu；
d、DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
将(PKM1-cKiE)2-Glu和DOTA-PKM-OSu溶于DMF，加入DIEA调节pH值至8.5-9.0，室温搅拌过夜，粗产品经YMC-Pack ODS-A半制备柱HPLC分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得预期产物DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2；
e、68Ga-DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2的制备
从锗-镓发生器新鲜淋洗68GaCl3，用2.5M的NH4OAc调节pH至3.5，加入DOTA-PEG4-(PKM1-cKiE)2，99℃水浴加热20分钟，待反应结束后室温冷却10分钟，制成68Ga-DOTA-PKM-(PKM1-cKiE)2。
9.根据权利要求7或8所述的cKiE多肽放射性药物的制备方法，其特征在于：所述HPLC方法为使用Agilent 1260HPLC系统配备YMC-Pack ODS-A半制备柱或分析柱，梯度淋洗30分钟；其中流动A相为去离子水，含0.05％TFA；流动B相为乙腈，含0.05％TFA；步骤a：配备半制备柱，流速4mL/min，淋洗梯度设定为起始时80％A和20％B，25分钟时60％A和40％B，30分钟时80％A和20％B。步骤b：配备分析柱，流速1mL/min，淋洗梯度为初始时90％A和10％B，20分钟时30％A和70％B。
10.一种权利要求1所述的cKiE多肽放射性药物的应用，其特征在于：所述cKiE多肽放射性药物用于制备整合素α6阳性肿瘤患者的显像诊断药物。
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| CN (1) | CN110420337A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111228521A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-06-05 | 中国科学院生物物理研究所 | 一种Dar2多肽放射性药物及其制备方法 |
| CN113817021A (zh) * | 2021-06-25 | 2021-12-21 | 中山大学 | 一种整合素α6靶向多肽及其应用 |
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101428148A (zh) * | 2008-12-05 | 2009-05-13 | 北京大学 | 一种rgd多肽放射性药物及其制备方法 |
| CN107987127A (zh) * | 2017-06-08 | 2018-05-04 | 中山大学附属肿瘤医院 | 整合素α6靶向多肽及应用 |
-
2019
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101428148A (zh) * | 2008-12-05 | 2009-05-13 | 北京大学 | 一种rgd多肽放射性药物及其制备方法 |
| CN107987127A (zh) * | 2017-06-08 | 2018-05-04 | 中山大学附属肿瘤医院 | 整合素α6靶向多肽及应用 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111228521A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-06-05 | 中国科学院生物物理研究所 | 一种Dar2多肽放射性药物及其制备方法 |
| CN113817021A (zh) * | 2021-06-25 | 2021-12-21 | 中山大学 | 一种整合素α6靶向多肽及其应用 |
| WO2022267097A1 (zh) * | 2021-06-25 | 2022-12-29 | 中山大学 | 一种整合素α6靶向多肽及其应用 |
| CN113817021B (zh) * | 2021-06-25 | 2023-11-07 | 广州珺柏诺医疗科技有限公司 | 一种整合素α6靶向多肽及其应用 |
| WO2024067531A1 (zh) * | 2022-09-29 | 2024-04-04 | 烟台蓝纳成生物技术有限公司 | 一种成纤维细胞活化蛋白FAP和整合素αvβ3双重靶向化合物及其制备方法和应用 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191108 |
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