CN107019807A - 一种gpc3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断与治疗药物。本发明所述的GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物包括：氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽；所述多肽偶联放射性核素或者正电子核素标记。本发明采用放射性核素标记多肽作为肝细胞癌特异性靶向分子探针，在活体水平显示肝细胞癌肿瘤组织内GPC3受体表达情况，提高肝细胞癌肿瘤治疗的有效率。对于肺癌、黑色素瘤等其他GPC3受体表达阳性的肿瘤，本发明所述的GPC3受体靶向的多肽也可用于制备诊断或治疗肺癌、黑色素瘤的药物。

Description

一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物
技术领域
本发明涉及一种GPC3受体靶向的诊断与治疗药物，特别是涉及一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断与治疗药物。
背景技术
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，常规影像诊断技术主要为B超、CT和MRI，虽然这些影像诊断技术通过显示肝细胞癌的形态改变及血流供应情况对肝细胞癌的诊断有较好的应用价值，但在鉴别诊断、全身分期和早期疗效评价上仍存在一定的不足。目前，国际上对晚期肝细胞癌无标准化疗方案，传统的联合化疗对延长晚期肝细胞癌患者的生存期无肯定的作用，其疗效多低于20％且毒副作用大。
正电子发射计算机断层/计算机断层扫描(positron emission tomography/computerized tomography，PET/CT)是近20年来发展起来并在临床上推广的一种新型的核医学显像技术，主要是利用短半衰期正电子放射性核素的示踪作用进行显像。将放射性核素标记的葡萄糖、氨基酸、核素、配体、靶向多肽等注射入静脉内，体内代谢稳定后进行扫描显像，显示活体内物质代谢、细胞增殖、受体分布等信息，用于疾病的诊断和人体生命活动的研究。临床上最常用的PET/CT显像剂是葡萄糖的类似物：2-氟-18氟-2-脱氧-D-葡萄糖(2-Fluorine-18-Fluoro-2–deoxy-D-glucose，18F-FDG)。18F-FDG是葡萄糖类似物，具有和葡萄糖相同的细胞转运及己糖激酶磷酸化过程。绝大多数恶性肿瘤代谢率较高，能量消耗大，所以大多数肿瘤消耗葡萄糖较多，因此18F-FDG可以显示肿瘤内葡萄糖代谢状态，以及肿瘤的部位、大小、数量及全身分布情况，用于肿瘤的良恶性鉴别诊断、分期、疗效评价、监测复发以及预后监测。18F-FDG PET/CT显像对于原发性肝细胞癌的总敏感度只有50％～70％。18F-FDG PET/CT显像对于高分化肝细胞癌敏感性低，但是对于中分化及低分化肝细胞癌、肿瘤直径＞5cm或者甲胎蛋白显著升高者18F-FDG PET/CT显像是一种较好的非侵入性检查手段(参见Koroglu,R.,et al.,A(18)F-FDG PET/CT Screening Study of aHepatocellular Carcinoma Patient with Diffuse(18)F-FDG Uptake into the PortalVein and its Intrahepatic Branches.World J Nucl Med,2016.15(1):p.68-70.或Pandey,A.K.,et al.,Digital contrast enhancement of(18)Fluorine-fluorodeoxyglucose positron emission tomography images in hepatocellularcarcinoma.Indian J Nucl Med,2016.31(1):p.20-6.)
为了提高18F-FDG PET/CT显像对原发性肝细胞癌诊断的敏感性，Ho等[Ho,C.L.,S.C.Yu,and D.W.Yeung,11C-acetate PET imaging in hepatocellular carcinoma andother liver masses.J Nucl Med,2003.44(2):p.213-21.]首次将11C-乙酸盐应用于临床，联合应用11C-乙酸盐和18F-FDG对39例肝细胞癌患者进行了PET显像，结果显示二者联合诊断敏感度达到了100％，而单用11C-乙酸盐和18F-FDG的敏感度分别为87.3％和47.3％。高分化肝细胞癌在11C-乙酸盐PET显像时代谢明显增高，与18F-FDG PET/CT显像形成互补。有学者对11C-胆碱(11C-choline)、18F-胆碱显像也进行了研究，虽然研究显示11C-乙酸盐、11C-胆碱、18F-胆碱显像在提高PET/CT肝细胞癌的诊断灵敏度方面有较好的补充价值，但由于结节样增生等良性病变也易出现11C-乙酸盐、11C-胆碱阳性而使18F-FDG、11C-乙酸盐和18F-FDG、11C-胆碱双显像方法仍难达到很高的诊断准确性。靶向与肝细胞癌增长有关的新生血管、尤其是特异性靶向肝细胞癌细胞本身的靶向显像可能在肝细胞癌的诊断、分期及疗效评价上更有优势，但遗憾的是目前尚无一种PET分子探针能实现肝细胞癌高灵敏度、高特异性诊断。合成并制备高亲和力的分子探针，利用高特异性的靶向结合作用，能够敏感快速的探测到靶向病灶，并可以从分子层面分析病灶。因此分子影像学将有望成为实现肝细胞癌早期诊断提供重要依据。
研究发现(参见Bhave,V.S.,et al.,Regulation of liver growth by glypican3,CD81,hedgehog,and Hhex.Am J Pathol,2013.183(1):p.153-9.和Capurro,M.I.,etal.,Glypican-3inhibits Hedgehog signaling during development by competingwith patched for Hedgehog binding.Dev Cell,2008.14(5):p.700-11.)，作为硫酸类肝素蛋白聚糖家族一员的磷酸酯酰肌醇蛋白聚糖-3(glypcian-3，GPC3)，特异性高表达于80％以上的人肝细胞癌细胞膜上，而在成人的正常组织中不表达。大量的研究证实GPC3可以成为肝细胞癌的治疗靶点，目前关于GPC3受体的抗体及小分子多肽已成功合成，并已进入临床前期实验研究阶段。目前早期肝细胞有较多的治疗手段，如手术、射频消融、化疗及生物免疫治疗，而晚期肝癌尚无有效的治疗方法。靶向特定靶点的靶向治疗是未来治疗晚期肝细胞癌的重要发展方向。靶向GPC3受体的靶向治疗有望改变目前晚期肝细胞癌治疗十分被动的局面。
作为核医学领域比较先进的临床检查影像技术——PET是目前惟一可在活体上显示生物分子代谢、受体及神经介质活动的新型影像技术，现已广泛用于多种疾病的诊断与鉴别诊断、病情判断、疗效评价、脏器功能研究和新药开发等方面。利用PET/CT显像技术无创性地在活体上显示GPC3受体表达情况，对该项靶向治疗具有重要的指导意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物。
本发明所述的GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物包括：氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽；所述多肽偶联放射性核素或者正电子核素标记。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽是修饰后的多肽，采用以下之一进行修饰：化合物、氨基酸和寡肽或它们的组合。
优选地，所述化合物的分子量小于5000，选自：叠氮戊酸、丙炔酸、聚乙二醇(PEG)、PEG4、1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、7-[(4-羟基丙基)亚甲基]-1,4,7-三氮杂化壬烷-1,4-二乙酸、1,4,7,10-四氮杂环四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、巯基乙酰三甘氨酸(MAG3)、MAG2、N3S、N2S2类配体、二乙基三胺五乙酸(DTPA)、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、聚乙烯亚胺(PEI)、6-肼基吡啶-3-甲酸(HYNIC)、溴甲酸苯甲基、N-(2-氨基乙酸)马来酰亚胺以及它们的组合修饰。其中，对于叠氮戊酸、丙炔酸、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、溴甲酸苯甲基，其碳链长度不限于此，可以延长或缩短。
优选地，所述寡肽为分子量不大于15个氨基酸的小分子肽，或者寡肽自身偶联形成的二聚体或多聚体。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽由第一双功能偶联剂修饰后，再与第一放射性金属核素(*M)形成络合物；其中，所述第一双功能偶联剂是选自：DOTA，NOTA或DTPA；所述第一放射性金属核素(*M)是选自：64Cu，67Ga，68Ga，90Y，111In或177Lu。
NOTA：1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(1,4,7-triazacylononane-1,4,7-triacetic acid)。
DOTA：1,4,7,10-四氮杂环十二环-N’,N”,N”’-四乙酸(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-N’,N”,N”’-tetraacetic,)。
DTPA：二乙撑三胺五乙酸(diethylene triamine pentoacetic acid)。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽由第二双功能偶联剂修饰后，再与第二放射性金属核素(*N)形成络合物；其中，所述第二双功能偶联剂是选自：MAG3、HYNIC、NXS4-X类配体或者三羰基化合物；所述第二放射性金属核素(*N)是选自：99mTc、186Re或188Re。
MAG3：巯基乙酰三甘氨酸(mercaptocetyltriglycine)。
HYNIC：联肼尼可酰胺(hydrazinonicotinamide)。
NXS4-X：硫氮化合物(sulfur nitride)。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽通过第三放射性金属核素(*H)间接标记，形成*H-Y-修饰物-多肽，所述第三放射性金属核素是选自：123I、124I、131I、76Br或者211At；所述*H-Y-modifier-是选自：
其中，第三放射性金属核素*H在苯环上的位置包括：羰基的对位或者苯环上任何位置。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽通过第三放射性金属核素(*H)直接标记，形成*H-多肽-修饰物，所述第三放射性金属核素是选自：123I、124I、131I、76Br或者211At。
根据本发明所述的药物的进一步特征，所述多肽经18F标记，形成18F-X-修饰物-多肽，其中18F-X-修饰物是选自：
，其中，n为1、2、3或4；Z为-CN，-NO2或-CF3基团。
本发明还提供了一种GPC3受体靶向的多肽用于制备诊断或治疗GPC3受体表达阳性的肿瘤的药物中的用途，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述多肽偶联放射性核素或者正电子核素标记。
本发明采用放射性核素标记多肽作为肝细胞癌特异性靶向分子探针，在活体水平显示肝细胞癌肿瘤组织内GPC3受体表达情况，提高肝细胞癌肿瘤治疗的有效率。对于肺癌、黑色素瘤等其他GPC3受体表达阳性的肿瘤，本发明所述的GPC3受体靶向的多肽也可用于制备诊断或治疗肺癌、黑色素瘤的药物。
附图说明
图1是18F标记的多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)在肝细胞癌HepG2肿瘤模型的显像图片。
具体实施方式
本发明涉及一种GPC3受体新型靶向的多肽放射性诊断与治疗药物，所述多肽含RLNVGGTYFLTTRQ(SEQ ID NO.1)序列，其具有分子靶向GPC3受体的功能，可用于GPC3受体阳性的肝细胞癌的诊断和治疗。所述多肽放射性诊断于治疗药物的制备方法如下：
1.多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)的合成
采用固相9-芴甲氧羰基(Fmoc)肽化学合成方法合成多肽。以氯三苯基氯树脂为载体，采用Fmoc氨基保护策略，固相合成多肽，氨基酸序列为：RLNVGGTYFLTTRQ。第一个氨基酸与树脂的连接采用对称酸酐法，反应结束后用适量的吡啶和乙酸酐封闭树脂上剩余的活性位点。后续氨基酸以HOBt/HBTU/DIEA为缩合剂依次连接。反应结束后，以三氟乙酸为主切割剂将目的肽段从树脂上裂解下来，合成产物经高效液相色谱分离、纯化、分析，质谱分析鉴定。
2.多肽链的NOTA修饰
将NOTA，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(Sulfo-NHS)按10:5:4的比例加入到pH5.5的5mL酸性水溶液中，室温反应30min后形成NOTA-OSu，然后冷却至4℃，加入步骤1合成的多肽，用NaOH调节pH至8.5，反应过夜，然后进行HPLC纯化得到产物，其他的有机酸，如DOTA，DTPA，叠氮戊酸，丙炔修饰的多肽以此为例。
3.Chelator-peptide的制备(chelator为MAG3，HYNIC，DOTA，NOTA，DTPA)
将多肽与chelator溶于1mL DMF中，加入20uL的DIPEA，室温搅拌过夜，经BEHC18柱半制备柱分离纯化，经液质联用确认为预期产物Chelator-peptide。
4.多肽的64Cu标记
取5mCi的64CuCl2加入到0.1mol/L醋酸钠水溶液中，调整pH值后加入DOTA偶联的peptide，50℃孵育1h，经XBridge BEH130Prep C18柱分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到64Cu标记的多肽，其化学结构式如下：
5.多肽的68Ga标记
从发生器淋洗的68Ga溶液用醋酸钠调节pH值至5.5，然后加入NOTA偶联的多肽，100℃孵育10min，进行HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到68Ga标记的多肽，可作为诊断药物，其化学结构式如下。多肽的67Ga操作于此相同。
6.多肽的111In标记
111InCl3溶液用醋酸铵调节pH值至5.3，然后加入DOTA偶联的多肽，37℃孵育1h，HPLC分离纯化后去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到111In标记的多肽，可作为诊断药物，其化学结构式如下。
7.多肽的90Y标记
取90Y溶液，加入醋酸铵调节pH值至5.0，然后加入DOTA偶联的多肽，80℃孵育1h，HPLC分离纯化后去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到90Y标记的多肽，可作为诊断药物，其化学结构式如下。
8.多肽的99mTc标记
取MAG3修饰的多肽，溶于NH4OAc缓冲液(pH＝5.2)，加入酒石酸钠溶液(50g/L)，再加入新鲜99mTcO4 -洗脱液和新鲜配置的SnCl2溶液。反应30min后HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到99mTc标记的多肽，所得产物可作为SPECT诊断药物，其化学结构式如下。
MAG2，NXS4-X类配体的99mTc标记多肽的方法于此类似。
取HYNIC修饰的多肽，溶于生理盐水中，加入三(羟甲基)甲基甘胺酸(tricine)缓冲液(10g/L)，再加入新鲜99mTcO4 -洗脱液和新鲜配置的SnCl2溶液。反应30min后HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，所得产物可作为SPECT诊断药物，其化学结构式如下。
称取5mg BH3·NH3放在干燥洁净的10mL西林瓶中，压盖密封。向装有BH3·NH3的西林瓶中通20min CO气体。加入7uL浓度＞85％的H3PO4加入1mL 99mTcO4 -淋洗液中，混合均匀后注射到已通CO气体的西林瓶中。反应在75℃水浴中进行15min。反应完成后，立即将反应瓶放入冰水中冷却。然后向其中加入100uL组氨酸修饰的多肽溶液(多肽的最终浓度为5-10mol/L)，75℃条件下反应30min。经HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜。所得产物可作为SPECT诊断药物，其化学结构式如下：
9.多肽的188Re标记
取MAG3修饰的多肽，溶于1mL生理盐水中，加入0.1mL酒石酸亚锡(2.5g/L)，再加入新淋洗的0.3mL 188Re—洗脱液，100℃反应30min，自然冷却至室温，HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，即得到188Re标记的多肽，其可作为SPECT诊断药物。
10.多肽的18F标记
采用18F-SFB标记多肽，取100ug多肽，用DMSO溶解，加入DIPEA 20uL，5mCi 18F-SFB，37℃孵育30min，HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，即得18F标记的多肽，化学结构式如下，其作为PET诊断药物。
采用18F-FBEM标记多肽
100ug多肽用DMSO溶解，加入18F-FBEM溶于PBS和三(2-羰基乙基)磷酸盐，室温孵育20min，HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，即得18F-FBEM标记多肽，化学结构式如下，其可作为PET诊断药物。
当然半胱氨酸修饰的多肽18F标记方法并不仅限于此，另外还包括N-[4-[(4-18F-fluorobenzylidene)aminooxyl]-butyl]maleimide(18F-FBABM),1-[3-(2-(18 F-fluoropyridin-3-yloxy)propyl]pyrrole-2,5-dione(18F-FpyME)等。
18F-NFP
取多肽100μg用DMSO溶解，加入50μL乙腈溶液，DIPIA20μL，80℃孵育30min，采用HPLC分离纯化，浓缩去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶剂溶解，调整pH为6-8，过无菌滤膜，作为PET诊断药物。
通过NOTA偶联的多肽螯合18F-氟化铝标记多肽
将NOTA偶联的多肽50ug用40uL纯水溶解于2mL离心管中，加入6uL、2mM的AlCl3(1.6ug)，5uL冰醋酸，324uL乙腈，混匀、离心；加入30uL 18F靶水(30.1mci)，混匀、100℃加热10min；采用HPLC分离纯化，浓缩除去溶剂，用生理盐水溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，得到标记产物18F-NOTA-多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)作为PET诊断药物。
用1.5mL含1mg K2CO3,5mgK222的乙腈溶液将QMA阴离子交换柱富集的18F-氟离子淋洗下来，然后与1ml无水乙腈共沸蒸干三次，加入(2-氰基-4羧基-苯基)N，N，N三甲氨基三氟甲基磺酸盐修饰的多肽2mg，50℃反应15min，采用HPLC分离，浓缩去除溶剂，用生理盐水溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化合物结构式如下，其可作为PET诊断药物。
其中Z可为-CN，-NO2，CF3等强吸电子基团。
采用点击化学法
氮气保护下，将丙炔酸修饰的多肽溶于300uL pH6.0磷酸盐缓冲液，加入硫酸铜和抗坏血酸钠，再加入500uL[18F]2-氟叠氮乙烷溶于乙腈，在50℃密闭诊断反应15min。HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用生理演说溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化合物结构式如下，其可作为诊断和治疗药物。该方法不仅局限于此，还包括18F偶联的其他烷基、芳基叠氮都与却极修饰的多肽发生点击反应，完成18F的标记。
氮气保护下，将叠氮戊酸修饰的多肽溶于300uL pH6.0磷酸缓冲液，加入硫酸铜和抗坏血酸钠，再加入5mCi溶于乙腈的[18F]3-氟代丙炔，在50℃密闭振荡反应15min。HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用生理盐水溶解，调节pH值，过无菌滤膜，所得产物结构式如下，其作为诊断和治疗药物。该方法不仅局限于此，还包括18F偶联的其他烷基、芳香修饰的炔基与叠氮基团修饰的多肽发生点击反应，完成18F的标记。
用1.5mL含1mgK2CO3,5mg K222的乙腈溶液将QMA阴离子交换柱富集的18F-氟离子淋洗下来，然后与1ml无水乙腈共沸蒸干三次，加入对(二叔丁基)硅基苯甲酸修饰的多肽2mg，80℃反应10min，采用HPLC分离，浓缩取出溶剂，用生理盐水溶解，调节pH值至6-8，过无菌滤膜，所得化合物结构式如下，其作为PET诊断药物。
11.多肽的131I标记
多肽的直接标记取10ug酪氨酸修饰的多肽溶于磷酸盐缓冲液中，加入5mCi131I-碘离子，然后加入催化剂N-溴代琥珀酰亚胺(或者是氯胺-T，Iodogen涂在反应管上)，室温反应10min，HPLC分离纯化，悬蒸除去溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调整pH值为6-8，过无菌滤膜，作为诊断和治疗药物。
其中131I可在苯环上的任何位置。123I，125I，124I标记多肽可通过此法。
采用SIB标记多肽：取100ug多肽，用DMSO溶解，加入DIPEA 20uL，5mCi131I-SIB，37℃孵育30min。HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化学结构式如下，其作为诊断和治疗药物。
取100ug多肽，用DMSO溶解，加入5mCi131I-IBEM和三(2-羰基乙酸)磷酸盐，室温孵育20min。HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化学结构式如下，其作为诊断和治疗药物。123I，125I，124I标记多肽可通过此法。
12.多肽的211At标记
取2mCi N-琥珀酰亚胺对[211At]砹苯甲酸酯，加入到DMSO溶解的多肽中，加入DIPEA 20uL，室温孵育30min，HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化合物可作为诊断和治疗药物。211At可在苯环上的任意位置。
100ug多肽用DMSO溶解，加入5mCi的溶于PBS的N-[2-(211At-对砹苯甲酰基)乙基]马来酰亚胺和三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，室温孵育20min，HPLC分离纯化，悬蒸去除溶剂，用0.9％NaCl注射液溶解，调节pH值为6-8，过无菌滤膜，所得化合物可作为诊断或治疗药物。211At可在苯环上的任意位置。
放射性核素标记的含有氨基酸序列为RLNVGGTYFLTTRQ的多肽放射性药物具有分子靶向GPC3受体的功能，可用于靶向GPC3受体的诊断和治疗。为进一步阐述上述应用，本发明采用氨基酰化反应标记多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)，在肝细胞癌HepG2裸鼠肿瘤模型进行显像，具体实验为：选取裸鼠，体重约20g，每只小鼠左前肢腋下注射肝细胞癌HepG2细胞(2×106细胞/裸鼠)，当肿瘤长到直径约1cm时进行实验。每只裸鼠尾静脉注射100uL，200uCi放化纯度大于95％的18F-NOTA–多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)，在体内代谢1小时后，在SiemensInveon Micro PET/CT显像。其显像结果如图1所示，左图显示肿瘤特异性摄取18F-NOTA–多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)(见箭头所指区域)，其他浓聚区域为肝脏、胆囊、肠道、膀胱。右图为阻断实验，受体被阻断后显像为阴性。
分析图1可知NOTA修饰多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)与18F-AlF发生螯合反应后，经过HPLC分离纯化后得到18F-NOTA-多肽(RLNVGGTYFLTTRQ)，其放化纯度达到95％以上，经尾静脉注射入肝细胞癌HepG2裸鼠模型60min后在Siemens Inveon Micro PET/CT显像，左图(I)受体阻断前Micro PET/CT显示为阳性；右图(II)受体阻断后显像结果为阴性。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，其构架形式能够灵活多变，可以派生系列产品。只是作出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 南方医科大学南方医院
<120> 一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.4
<210> 1
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 1
Arg Leu Asn Val Gly Gly Thr Tyr Phe Leu Thr Thr Arg Gln
1 5 10

Claims (10)

1.一种GPC3受体靶向的多肽放射性诊断或治疗药物，其特征在于，包括：氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽；所述多肽偶联放射性核素或者正电子核素标记。
2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽是修饰后的多肽，采用以下之一进行修饰：化合物、氨基酸和寡肽或它们的组合。
3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于：所述化合物的分子量小于5000，选自：叠氮戊酸、丙炔酸、聚乙二醇(PEG)、PEG4、1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、7-[(4-羟基丙基)亚甲基]-1,4,7-三氮杂化壬烷-1,4-二乙酸、1,4,7,10-四氮杂环四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、巯基乙酰三甘氨酸(MAG3)、MAG2、N3S、N2S2类配体、二乙基三胺五乙酸(DTPA)、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、聚乙烯亚胺(PEI)、6-肼基吡啶-3-甲酸(HYNIC)、溴甲酸苯甲基、N-(2-氨基乙酸)马来酰亚胺以及它们的组合修饰。
对于叠氮戊酸、丙炔酸、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、溴甲酸苯甲基，其碳链长度不限于此，可以延长或缩短。
4.根据权利要求2所述的药物，其特征在于：所述寡肽为分子量不大于15个氨基酸的小分子肽，或者寡肽自身偶联形成的二聚体或多聚体。
5.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽由第一双功能偶联剂修饰后，再与第一放射性金属核素(*M)形成络合物；其中，所述第一双功能偶联剂是选自：DOTA，NOTA或DTPA；所述第一放射性金属核素(*M)是选自：64Cu，67Ga，68Ga，90Y，111In或177Lu。
6.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽由第二双功能偶联剂修饰后，再与第二放射性金属核素(*N)形成络合物；其中，所述第二双功能偶联剂是选自：MAG3、HYNIC、NXS4-X类配体或者三羰基化合物；所述第二放射性金属核素(*N)是选自：99mTc、186Re或188Re。
7.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽通过第三放射性金属核素(*H)间接标记，形成*H-Y-修饰物-多肽，所述第三放射性金属核素是选自：123I、124I、131I、76Br或者211At；所述*H-Y-modifier-是选自：
其中，第三放射性金属核素*H在苯环上的位置包括：羰基的对位或者苯环上任何位置。
8.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽通过第三放射性金属核素(*H)直接标记，形成*H-多肽-修饰物，所述第三放射性金属核素是选自：123I、124I、131I、76Br或者211At。
9.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述多肽经18F标记，形成18F-X-修饰物-多肽，其中18F-X-修饰物是选自：
，其中，n为1、2、3或4；Z为-CN，-NO2或-CF3基团。
10.一种GPC3受体靶向的多肽用于制备诊断或治疗GPC3受体表达阳性的肿瘤的药物中的用途，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述多肽偶联放射性核素或者正电子核素标记。
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