CN110389105B - 一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法，其包括将胶体果胶铋中加入聚沉溶剂，振摇后离心并取上清液经过滤，再加显色液作为供试品溶液，再称取铋标准溶液配制成对照品溶液，检测在可见光波段的吸光值，获得游离铋浓度‑吸收值标准曲线。我方申请的游离铋的检测方法，填补了目前胶体果胶铋中游离铋检测领域的空白，属于一种新检测方法。且此游离铋检测浓度适用范围广，准确度高，重复性好。
Description
技术领域
本发明涉及一种游离铋的检测方法，特别涉及一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法及其应用。
背景技术
胶体果胶铋是一种新型的胶体铋制剂，由大同市药物研究所研制合成，具有保护胃肠黏膜、直接杀灭幽门螺旋杆菌和止血的作用，可促进溃疡愈合、炎症好转，并可降低溃疡的复发率。胶体果胶铋是果胶与三价铋离子形成的碱式盐，对于溃疡黏膜的保护作用明显优于单独使用果胶和次硝酸铋、次碳酸铋、次枸橼酸铋等铋盐。其作用机制在于胶体果胶铋具有较强的胶体特性。胶体果胶铋是用生物大分子果胶酸代替了现有铋制剂中的小分子酸根，如碳酸根、硝酸根及枸橼酸根等，从而增强了胶体果胶铋的胶体特性，使其在酸性介质中能形成高黏度溶胶。此溶胶与溃疡面及炎症表面有强的亲和力，可在胃黏膜表面形成一层牢固的保护膜，增强胃黏膜的屏障作用，因此胶体果胶铋对消化性溃疡和慢性胃炎有较好的治疗作用。胶态铋剂对消化性溃疡的疗效大体与H2受体拮抗剂相似，主要优点在于能减少溃疡复发率。其原料药和胶囊制剂已收载于我国药典。
胶体果胶铋的主要成分是一种果胶与铋生成的复合物，主要组成为铋离子及D-半乳糖醛酸甲酯、D-半乳糖醛酸铋和D-半乳糖醛酸钾的结构片段形成的高分子化合物，原料药中可能存在少量游离铋盐，铋本身没什么毒性，主要有微弱放射性，但铋的化合物往往有毒。铋属微毒类，大多数化合物、特别是盐基性盐类，在消化道中难吸收，不溶于水，仅稍溶于组织液，不能经完整皮肤粘膜吸收。铋在体内的代谢与铅相似，在酸中毒时，组织可将积存的铋释放，铋与铅可互相影响。在体内，铋化合物能形成不易溶于水和稀酸的硫化铋，沉淀在组织中或栓塞在毛细血管中，发生局部溃疡，甚至坏死。硝酸铋在肠道内细菌的作用下，可还原为亚硝酸铋，吸收后引起高铁血红蛋白血症。严重慢性中毒时，由于铋多存在于肾脏，可出现严重肾炎，其中以肾小管上皮细胞的损害最重，肝亦可累及。反复经口或经其他途径慢性中毒患者可出现 “铋线”。慢性中毒主要由含可溶性铋盐的药物所引起，静脉注射或肌肉注射可溶性铋盐，曾有引起死亡的报道。皮肤有损伤者要避免直接接触可溶性铋盐。因此鉴于过量铋盐已知的毒副作用，开发一种在原料药和制剂中检测游离铋盐的方法非常有必要。
检索国内相关标准及文献资料，未找到游离铋盐检侧方法及相关限度参考；只有美国药典标准中部分铋制剂对“水溶性铋”进行了控制，胶体果胶铋中的游离铋盐亦为水溶性的。近年来，根据国家药监局的相关要求，胶体果胶铋中游离铋的含量也列入相关的质量标准。因此，如何提供一种胶体果胶铋中游离铋的精确检测方法，成为了业界研发人员研究的方向。
中国专利申请CN201510348311.1公开了一种胶体果胶铋或含胶体果胶铋制剂中铋含量的测定方法，是以质子酸将铋从胶体果胶铋中解离出来，利用铋与碘化钾生成黄色碘化铋钾的特征反应原理，采用紫外-可见分光光度法测定，以外标法计算。此发明建立的胶体果胶铋或含胶体果胶铋制剂中铋含量的测定方法专属性强，线性关系好，准确度高，重复性好，灵敏度高，可作为胶体果胶铋或含胶体果胶铋制剂中铋的质量控制方法，有效控制产品质量。但是其检测的对象和目的是不一致的，此专利其是使用质子酸将果胶铋中结合的铋置换出来检测总铋含量，和我方使用溶剂避免结合铋溶解从而检测游离铋的目的是完全不一致的。
发明内容
针对现有技术的不足，本申请的主要目的是提供一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法及其应用，能够方便快速、低成本、高灵敏、高稳定性的实现胶体果胶铋中游离铋的浓度检测。
为了实现上述目的及解决胶体果胶铋中游离铋检测中存在的问题，本申请采用了以下技术方案：
一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将胶体果胶铋中加入聚沉溶剂，振摇后离心并取上清液经过滤，再加显色液作为供试品溶液，再称取铋标准溶液配制成对照品溶液，检测在可见光波段的吸光值，获得游离铋浓度-吸收值标准曲线。
优选的，聚沉溶剂是氯化钙。
优选的，聚沉溶剂浓度为1～5%。
优选的，过滤步骤先用0.45μm过滤膜过滤，滤液再用0.1μm过滤膜过滤。
优选的，显色液由4%的抗坏血酸以及10%的碘化钾组成。
优选的，铋标准溶液中的铋浓度为1000μg/ml。
优选的，对照品溶液由铋标准溶液经过两步稀释而配成，对照品溶液中的铋浓度为9μg/ml。
对照品溶液具体的制备步骤为：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液。
优选的，检测吸光值的方法为紫外-可见分光光度法，波长为463nm，使用的为1cm石英池。
优选的，游离铋浓度在1.5～15ug/ml的浓度范围内与吸收值具有线性关系。
本申请还包括此检测方法在胶体果胶铋中游离铋检测当中的应用。
我方技术方案利用了聚沉原理，向胶体中加入电解质溶液时，加入的阳离子（或阴离子）中和了胶体粒子所带的的电荷，使胶体粒子聚集成较大颗粒，从而形成沉淀从分散剂里析出。我方技术人员通过多次实验发现了可以较为精确的检测胶体果胶铋中游离铋的方法，并将检测实验中的重复性、准确度、线性、专属性、稳定性等因素纳入了考量范围，得出了最优的检测胶体果胶铋中游离铋的检测方法，为胶体果胶铋的质量检测提供了依据。
由于采用以上技术方案，本申请的有益效果在于：
（1）我方申请的游离铋的检测方法，填补了目前胶体果胶铋中游离铋检测领域的空白，属于一种新检测方法。
（2）我方游离铋检测方法浓度适用范围广，准确度高，重复性好。
附图说明
图1是我方实施例1中使用氯化钙作为溶剂的准确度初步验证实验的供试品的浓度-吸收值标准曲线图；
图2是我方实施例1中使用氯化钙作为溶剂的线性实验的游离铋的浓度-吸收值标准曲线图；
图3是我方对比实施例2中使用乙醇作为溶剂的对照品溶液线性实验的游离铋的浓度-吸收值标准曲线图；
图4是我方对比实施例3中使用氯化钠作为溶剂的线性实验的游离铋的浓度-吸收值标准曲线图；
图5是我方对比实施例3中使用氯化钠作为溶剂的对照品溶液线性初步验证实验中的游离铋的浓度-吸收值标准曲线图。
具体实施方式
下面通过具体实施例和附图对本申请作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。
实施例中所使用的胶体果胶铋样品中干混悬剂为湖南九典制药股份有限公司自制，原料药选自新乡市新辉药业有限公司，参比试剂选自湖南华纳大药厂。
实施例1
使用氯化钙作为溶剂进行游离铋检测。
1．重复性初步验证（分光光度法）
取自制胶体果胶铋样品3g，精密称定，置50ml量瓶中，加入50ml 2%氯化钙溶液，振摇2小时，以4000转/分钟的转速离心30分钟，取上清液先用0.45μm过滤膜过滤，滤液再用0.1μm过滤膜过滤，再精密量取滤液5ml置10ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾10%）稀释至刻度，作为供试品溶液，照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，依法测定。
重复性试验结果如下表所示：
其RSD为5.12%，证明本检测方法的重复性良好。
2．准确度初步验证（分光光度法）
分别精密称取胶体果胶铋样品1.5g、3g、4.5g各两份分别至50ml量瓶中，加入50ml2%氯化钙溶液，振摇2小时，以4000转/分钟的转速离心30分钟，取上清液先用0.45μm滤膜滤过，滤液再用0.1μm滤膜滤过，再精密量取滤液5ml置10ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾10%）稀释至刻度，作为供试品溶液，照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，依法测定。
准确度试验结果如下表所示：
| 序号 | 1 | 2 | 3 |
| 平均浓度（mg/ml） | 15.057 | 30.0585 | 45.0495 |
| 平均吸收值 | 0.063 | 0.126 | 0.188 |
以供试品的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线图，结果如附图图1所示，得回归方程为y=0.0042x+0.0002，相关系数r=1。
此结果表明，该检测方法准确度符合要求。
3．不同显色液浓度比较
精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中（三份），分别加不同浓度显色液（显色液1、抗坏血酸3%、碘化钾8%；显色液2、抗坏血酸4%、碘化钾10%；显色液3、抗坏血酸5%、碘化钾12%；）稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液。
检测：取对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池
不同显色液浓度试验结果如下表所示：
| 名称 | 显色液1 | 显色液2 | 显色液3 |
| 吸收值 | 0.340 | 0.340 | 0.342 |
结果表明：不同显色液浓度对检测结果无影响，后续试验选择显色液2各溶液浓度（抗坏血酸4%、碘化钾10%）进行进一步验证试验。
4．不同浓度氯化钙溶液验证
称取胶体果胶铋样品约6.0g（三份），精密称定，分别加不同浓度的氯化钙溶液（1%、2%、3%；）稀释至50ml，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤，再用0.1μm滤膜过滤，取滤液5ml加显色液稀释至10ml，作为供试品溶液。
检测：取供试品溶液照中国药典2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
不同浓度氯化钙溶液试验结果如下表所示：
| 名称 | 浓度1 | 浓度2 | 浓度3 |
| 吸收值 | 0.129 | 0.133 | 0.134 |
| 含量（ppm） | 76 | 78 | 79 |
结果表明：不同浓度氯化钙溶液配制的供试品溶液对检测结果无影响，后续试验选择中间浓度2%氯化钙溶液进行试验。
5．供试品溶液浓度试验
称取胶体果胶铋样品约3.0g、6.0g、9.0g（三份），精密称定，分别加2%氯化钙溶液稀释至50ml，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤，再用0.1μm滤膜过滤，取滤液5ml加显色液稀释至10ml，即得供试品溶液；精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液。
检测：取供试品溶液、对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
不同供试品浓度试验结果如下表所示：
| 名称 | 浓度1 | 浓度2 | 浓度3 |
| 吸收值 | 0.126 | 0.250 | 0.377 |
| 含量（ppm） | 74 | 73 | 74 |
结果表明：不同浓度供试品溶液对检测结果无影响，后续试验选择中间浓度试验。
6．振摇时间考察
称取胶体果胶铋样品约6.0g（四份），精密称定，分别加2%氯化钙溶液稀释至50ml，分别振摇0.5、1、2、3小时，分别离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤，再用0.1μm滤膜过滤，取滤液5ml加显色液稀释至10ml，即得供试品溶液；精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液。
检测：取供试品溶液、对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
不同振摇时间试验结果如下表所示：
| 时间 | 0.5h | 1h | 2h | 3h |
| 吸收值 | 0.126 | 0.137 | 0.137 | 0.136 |
| 含量（ppm） | 74 | 80 | 80 | 80 |
结果表明：不同振摇时间对检测结果无影响，后续试验选择振摇2h试验。
我方还对以氯化钙作为溶剂做了相关的方法学验证，结果如下表所示：
游离铋方法学验证结果
| 项目 | 验证结果 |
| 专属性 | 空白辅料不干扰样品含量的测定。 |
| 精密度 | 本法的精密度符合规定。 |
| 检测限 | 胶体果胶铋的检测限为0.073μg/ml。 |
| 定量限 | 胶体果胶铋的定量限为0.242μg/ml。 |
| 溶液稳定性 | 胶体果胶铋对照品贮备液Ⅱ、对照品溶液室温放置24小时浓度无明显变化，结果显示对照品贮备液Ⅱ、对照品溶液室温下放置24h基本稳定。供试品滤液、供试品溶液室温放置24小时内浓度无明显变化，结果显示供试品滤液、供试品溶液在室温下放置24h基本稳定。 |
| 线性 | 铋在1.5μg/ml～15μg/ml的浓度范围内与吸光度具有良好的线性关系，线性回归方程为y=0.0501x+0.0008，相关系数r=1。 |
| 准确度试验 | 平均回收率为98.8%，RSD为2.2%，表明本法准确度较好。 |
| 中间精密度 | 本法中间精密度精密度符合规定。 |
| 重复性 | 平行测定6份样品，RSD为4.1%，表明本方法重复性好。 |
| 批间均一性 | 批间均一性符合规定。 |
验证方法：
取本品内容物约6.0g，精密称定，加2%氯化钙溶液稀释至50ml，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤，再用0.1μm滤膜过滤，取滤液5ml加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾10%）稀释至10ml，即得供试品溶液；精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ3ml置25ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（18μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋9μg的溶液，作为对照品溶液。
检测：取供试品溶液、对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，计算铋离子含量。
7．线性试验
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ1、2、4、6、8、10ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，配制成每1ml中含铋3、6、12、18、24、30μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml，置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋1.5、3、6、9、12、15μg的溶液。
检测：取上述对照品溶液，照原子吸收分光光度法（中国药典2015版第四部通则0406），在463nm的波长处测定。
线性试验结果表
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 浓度（μg/ml） | 1.5 | 3 | 6 | 9 | 12 | 15 |
| 吸收值 | 0.076 | 0.151 | 0.302 | 0.452 | 0.602 | 0.753 |
以游离铋的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线图，结果如附图图2所示，得回归方程为y=0.0501x+0.0008，相关系数r=1。
8．检测限和定量限
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ1、2、4、6、8、10ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度配制成每1ml中含铋3、6、12、18、24、30μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋1.5、3、6、9、12、15μg的溶液。
检测：取上述对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检 测，波长：463nm，1cm石英池，以铋的浓度(μg/ml)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标 准曲线图，得工作曲线的斜率。
取2%氯化钙溶液-显色液（1:1）作为空白溶液测定11次，计算标准偏差，按下式计算
CLOD=3 SA/ k
式中：CLOD：检测限浓度，μg/ml；
SA：11次空白的标准偏差；
k：工作曲线的斜率。
试验结果表
结果：k=0.0501，SA=0.0012，故本品的检测限为0.073μg/ml。
定量限,按下式计算
CLOQ=10 SA/ k
式中：CLOQ：检测限浓度，μg/ml；
结果：k=0.0501，SA=0.0012，故本品的定量限为0.242μg/ml。
9．专属性
分别取胶体果胶铋干混悬剂空白辅料2g（按处方配比）、胶体果胶铋原料4g，按上述测定方法进行检测，记录吸收值，并计算游离铋的含量。
专属性试验结果表
| 样品名称 | 吸收值 | 游离铋含量ppm |
| 空白辅料 | 0.001 | 1.0 |
| 胶体果胶铋原料 | 0.220 | 110.4 |
结果表明：空白辅料不干扰胶态果胶铋中游离铋的含量测定。
10. 重复性
对照品溶液：同游离铋含量测定方法中配制；
供试品溶液：取30袋中试样品内容物混匀，称取供试品6g，共6份，照上述确定的游离铋含量测定方法测定，计算供试品的游离铋含量。
游离铋含量测定重复性试验
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 平均值 | RSD |
| 游离铋含量（ppm） | 69.1 | 70.7 | 77.1 | 72.8 | 73.8 | 70.1 | 72.2 | 4.1% |
结果表明：本方法重复性较好。
11. 溶液稳定性
11.1对照品贮备液Ⅱ稳定性试验
精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml）室温放置，分别于0、5、17、24h精密量取对照品贮备液Ⅱ5ml置10ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液①，另取对照品贮备液Ⅰ同法新配制对照品溶液②。
检测：取对照品溶液①、②照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，计算铋离子含量。
对照品贮备液Ⅱ稳定性试验结果表
| 时间（h） | 0 | 5 | 17 | 24 |
| 浓度（μg/ml） | 6 | 6.0000 | 5.9811 | 5.9414 |
| 相对含量（%） | 100.0 | 100.0 | 99.7 | 99.0 |
结果表明：对照品贮备液Ⅱ室温下放置24h基本稳定。
11.2对照品溶液稳定性试验
精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2%氯化钙溶液稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml），再精密量取对照品贮备液Ⅱ25ml置50ml量瓶中，加显色液稀释至刻度配制成每1ml中含铋6μg的溶液，作为对照品溶液①室温放置0、5、17、24h检测，另取对照品贮备液Ⅰ同法新配制对照品溶液②。
检测：取对照品溶液①、②照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，计算铋离子含量。
对照品溶液稳定性试验结果表
| 时间（h） | 0 | 5 | 17 | 24 |
| 浓度（μg/ml） | 6 | 5.9601 | 5.9621 | 5.9609 |
| 相对含量（%） | 100.0 | 99.3 | 99.4 | 99.3 |
结果表明：对照品溶液室温下放置24h基本稳定。
11.3供试品滤液（显色前）稳定性试验
取本品内容物约12.0g，精密称定，加2%氯化钙溶液稀释至100ml，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜滤过，滤液，再用0.1μm滤膜滤过，滤液室温放置，于0、4、17、24h分别取滤液5ml加显色液稀释至10ml，得供试品溶液；
对照品溶液：按线性试验项下配制对照品溶液。
检测：取供试品溶液、对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，计算铋离子含量。
供试品滤液稳定性试验结果表
| 时间（h） | 0 | 4 | 17 | 24 |
| 浓度（μg/ml） | 4.2081 | 4.2259 | 4.2019 | 4.2020 |
| 相对含量（%） | 100.0 | 100.4 | 99.9 | 99.9 |
结果表明：供试品滤液在室温下放置24h基本稳定。
11.4供试品溶液（显色后）稳定性试验
取本品内容物约12.0g，精密称定，加2%氯化钙溶液稀释至100ml，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜过滤，再用0.1μm滤膜滤过，再取滤液25ml加显色液稀释至50ml，得供试品溶液，室温放置0、4、17、24h；
对照品溶液：按线性试验项下配制对照品溶液。
检测：取供试品溶液、对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，计算铋离子含量。
供试品溶液稳定性试验结果表
| 时间（h） | 0 | 4 | 17 | 24 |
| 浓度（μg/ml） | 4.2081 | 4.2259 | 4.1451 | 4.2215 |
| 相对含量（%） | 100.0 | 100.4 | 98.5 | 100.3 |
结果表明：供试品溶液在室温下放置24h基本稳定。
12. 准确度
对照品溶液：按线性试验项下配制对照品溶液。
供试品溶液的制备：分别精密称取空白辅料2g（按处方量配置）共9份，分别置50ml量瓶中，分别精密加入对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml）3ml（低浓度）、6ml（中浓度）、9ml（高浓度）各三份，分别加2%氯化钙溶液稀释至刻度，振摇2小时，离心，取上清液用0.45μm滤膜滤过，滤液，再用0.1μm滤膜滤过，再取滤液5ml加显色液稀释至10ml，得供试品溶液，照游离铋含量测定方法测定，计算。
准确度试验结果表
结果表明：本方法准确度较好。
13. 测量精密度
取重复性试验项下供试品1照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，依法测定6次，结果见下表：
精密度试验结果表
| 测定次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 平均值 | RSD（%） |
| 吸光度 | 0.206 | 0.207 | 0.207 | 0.207 | 0.207 | 0.207 | 0.207 | 0.2% |
结果表明：本方法精密度符合规定。
14. 中间精密度
对照品溶液：按线性试验项下配制对照品溶液。
供试品溶液：换另一人取30袋中试样品内容物混匀，称取供试品6g，共6份，精密称定，照上述确定的游离铋含量测定方法测定，计算供试品的游离铋含量。
游离铋含量测定中间精密度试验
结果表明：本方法中间精密度好。
15. 样品中游离铋含量测定
游离铋含量测定
由上述结果可知，中试样品中游离铋的含量低于80ppm，三批参比制剂中游离铋含量在110~130ppm之间，但各样品中游离铋的含量均高于美国药典中规定的限度。根据对比原料药与相应制剂中游离铋含量，发现从原料到制剂游离铋含量并无明显变化，说明制剂工艺过程中未改变原料药中游离铋的含量。
对比实施例1
使用水作为溶剂进行游离铋检测。
1.原子吸收法
取参比制剂2袋（约相当于胶体果胶铋2g）加水稀释至25ml，振摇 2小时，用滤纸过滤（供试品黏度高，无法过滤），离心，取上清液用滤纸过滤（无法过滤）；
取参比制剂1袋（约相当于胶体果胶铋1g）加水稀释至25ml，振摇 2小时，用滤纸过滤（供试品黏度高，无法过滤），离心，取上清液用滤纸过滤（无法过滤），另取上清液换用0.45μm滤膜过滤（无法过滤）；
取参比制剂1袋（约相当于胶体果胶铋1g）加水稀释至25ml，振摇 2小时，离心，取上清液5ml置50ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜过滤（较难过滤），取滤液再用0.1μm滤膜过滤（较难过滤）；
结果表明：参比制剂在水中分散后，非常难过滤，且通过降低供试品溶液浓度亦无法解决该问题。因此用水无法作为胶体果胶铋中游离铋检测的溶剂。
对比实施例2
使用乙醇作为溶剂进行游离铋检测。乙醇与水具有相同的极性，希望通过使用乙醇能降低胶体果胶铋的溶解度，提高试验的可操作性。考虑到使用乙醇做溶剂无法采用原子吸收法测定，故选择用分光光度法。
1.对照品浓度摸索
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2.4mol/L硝酸稀释至刻度配制成每1ml中含铋12μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ3、4、6、8ml置20ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾25%）稀释至刻度配制成每1ml中含铋1.8、2.4、3.6、4.8μg的溶液。
再精密量取对照品贮备液Ⅱ4ml置20ml量瓶中，加显色液（碘化钾25%）稀释至刻度配制成每1ml中含铋2.4μg的溶液。
检测：取对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
对照品溶液浓度试验结果表
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 浓度（μg/ml） | 1.8 | 2.4 | 3.6 | 4.8 |
| 吸收值 | 0.099 | 0.144 | 0.217 | 0.280 |
不加抗坏血酸试验结果表
| 名称 | 25%KI | 25%KI+4%抗坏血酸 |
| 浓度（μg/ml） | 2.4 | 2.4 |
| 吸收值 | 0.161 | 0.144 |
结果表明：同浓度的样品显色后采用分光光度法测得吸收值较原子吸收大，考虑到抗坏血酸可能会解离供试品中的结合铋，同步对比了不加抗坏血酸试验，结果显示二者结果差异较大。
2. 显色剂浓度考察及加入抗坏血酸对比
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加2.4mol/L硝酸稀释至刻度配制成每1ml中含铋12μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ6ml置20ml量瓶中（平行四份），分别加显色液1（碘化钾5%）、显色液2（碘化钾10%）、显色液3（碘化钾25%）、显色液4（抗坏血酸4%、碘化钾25%）稀释至刻度配制成每1ml中含铋3.6μg的溶液（避光试验）。
检测：取对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
样品处理方法考察结果表
| A463.00nm | 5%KI | 10%KI | 25%KI | 25%KI+4%抗坏血酸 |
| 0h | 101.84% | 107.37% | 104.15% | 100.0% |
| 1.5h | 94.22% | 107.56% | 99.56% | 100.0% |
| 3h | 99.55% | 105.86% | 118.47% | 100.0% |
| 4h | 109.63% | 105.96% | 114.22% | 100.0% |
备注：专利中的检测方法加入了抗坏血酸，故以在该条件下测定的结果为100%，对比其他条件下的检测结果。
结果表明：试验结果显示不加抗坏血酸，避光条件下，测得对照品含量波动大。故最终选择加入抗坏血酸进行下一步验证研究。
3. 以乙醇为溶剂对照品溶液线性试验
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度配制成每1ml中含铋12μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ2、3、4、5、6、8ml置20ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾25%）稀释至刻度配制成每1ml中含铋1.2、1.8、2.4、3.0、3.6、4.8μg的溶液。
检测：取对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
线性试验结果表
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 浓度（μg/ml） | 1.2 | 1.8 | 2.4 | 3.0 | 3.6 | 4.8 |
| 吸收值 | 0.061 | 0.087 | 0.111 | 0.142 | 0.174 | 0.192 |
以游离铋的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线图，结果如附图图3所示，得回归方程为y=0.0384x+0.0203，相关系数r=0.9813。
结果表明：铋在浓度1.2μg/ml～4.8μg/ml的浓度范围内不成线性关系。
总结：溶剂由水更换成乙醇，线性不符合标准，故该方法不可行。
对比实施例3
使用氯化钠作为溶剂进行游离铋检测。按照聚沉相关原理，使用氯化钠作为一种盐，也可以使胶体果胶铋的胶体聚凝，减少胶体果胶铋的溶解，达成检测游离铋的效果。
1.线性实验（原子吸收）
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加5%氯化钠溶液稀释至刻度配制成每1ml中含铋12μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ2、4、5、7.5ml置10ml量瓶中，加5%氯化钠稀释至刻度配制成每1ml中含铋2.4、4.8、6、9μg的溶液。
检测：取上述各对照品溶液，照原子吸收分光光度法（中国药典2015版第四部通则0406），波长223nm，铋空心阴极灯、乙炔-空气火焰原子化器，依法测定。
线性试验结果表
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 浓度（μg/ml） | 2.4 | 4.8 | 6 | 9 | 12 |
| 吸收值 | 0.0495 | 0.0963 | 0.1193 | 0.1772 | 0.2346 |
以游离铋的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线图，结果如附图图4所示，得回归方程为y=0.0193x+0.0035，相关系数r=1。
结果表明：铋在浓度2.4μg/ml～12μg/ml的浓度范围内与吸收值具有良好的线性关系。
2. 准确度初步验证（原子吸收）
供试品溶液的制备：分别精密称取空白辅料1g（按处方量配置）共3份，分别置50ml量瓶中，分别精密加入对照品贮备液Ⅱ（12μg/ml）16ml（低浓度）、20ml（中浓度）、24ml（高浓度）各一份，分别加5%氯化钠溶液稀释至刻度，振摇2小时，以4000转/分钟的转速离心30分钟，取上清液先用0.45μm滤膜过滤，滤液再用0.1μm滤膜过滤，作为供试品溶液，照原子吸收分光光度法（中国药典2015版第四部通则0406），波长223nm，铋空心阴极灯、乙炔-空气火焰原子化器，依法测定。
游离铋测定回收率试验
结果表明：本法的回收率试验结果符合要求。
3. 重复性初步验证（原子吸收）
取参比制剂3g，精密称定，置50ml量瓶中，加入50ml 5%NaCl溶液，振摇2小时，以4000转/分钟的转速离心30分钟，取上清液先用0.45μm过滤膜过滤，滤液再用0.1μm过滤膜过滤，作为供试品溶液，照原子吸收分光光度法（中国药典2015版第四部通则0406），波长223nm，铋空心阴极灯、乙炔-空气火焰原子化器，依法测定。
重复性试验结果表
结果表明：本方法重复性不是很好，样品处理虽较水有所改善，但仍较难过滤，耗时较长，将进一步改善。
4. 对照品溶液线性初步验证（分光光度法）
对照品溶液：精密量取铋标准溶液（1000μg/ml）7.5ml，置50ml量瓶中，用2.4mol/L硝酸稀释至刻度，作为对照品贮备液Ⅰ（150μg/ml），精密量取对照品贮备液Ⅰ4ml置50ml量瓶中，加5%氯化钠溶液稀释至刻度配制成每1ml中含铋12μg的对照品贮备液Ⅱ，再分别精密量取对照品贮备液Ⅱ2.5、4、5、6、7、8ml置20ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾10%）稀释至刻度配制成每1ml中含铋1.5、2.4、3.0、3.6、4.2、4.8μg的溶液。
检测：取对照品溶液照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池。
线性试验结果表
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 浓度（μg/ml） | 1.5 | 2.4 | 3.0 | 3.6 | 4.2 | 4.8 |
| 吸收值 | 0.130 | 0.177 | 0.216 | 0.255 | 0.290 | 0.312 |
以游离铋的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线图，结果如附图图5所示，得回归方程为y=0.0572x+0.044，相关系数r=0.9975。
结果表明：铋在浓度1.5μg/ml～4.8μg/ml的浓度范围内与吸收值具有良好的线性关系。
5. 重复性初步验证（分光光度法）
取参比制剂3g，精密称定，置50ml量瓶中，加入50ml 5%NaCl溶液，振摇2小时，以4000转/分钟的转速离心30分钟，取上清液先用0.45μm过滤膜过滤，滤液再用0.1μm过滤膜过滤，再精密量取滤液5ml置10ml量瓶中，加显色液（抗坏血酸4%、碘化钾10%）稀释至刻度，作为供试品溶液，照《中国药典》2015年版通则0401紫外-可见分光光度法检测，波长：463nm，1cm石英池，依法测定。
重复性试验结果表
结果表明：分光光度法与原吸检测结果基本一致。
总结：本方法重复性不是很好，样品处理虽较水有所改善，但仍较难过滤，耗时较长，另外使用原子吸收分光光度法检测氯化钠浓度较高，对仪器影响较大，紫外-可见分光光度法检测样品成胶状，本方法不可行。
以上内容是结合具体的实施方式对本申请所作的进一步详细说明，不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本申请的保护范围。
Claims (9)
1.一种胶体果胶铋中游离铋的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将胶体果胶铋中加入聚沉溶剂，所述聚沉溶剂是氯化钙；振摇后离心，取上清液经过滤，加显色液作为供试品溶液，称取铋标准溶液配制成对照品溶液，检测在可见光波段的吸光值，获得游离铋浓度-吸收值标准曲线。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述聚沉溶剂的浓度为1～5％。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述过滤步骤先用0.45μm过滤膜过滤，滤液再用0.1μm过滤膜过滤。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述显色液由4％的抗坏血酸以及10％的碘化钾组成。
5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述铋标准溶液中的铋浓度为1000μg/ml。
6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述对照品溶液由铋标准溶液经过两步稀释而配成，对照品溶液中的铋浓度为9μg/ml。
7.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，检测吸光值的方法为紫外-可见分光光度法，波长为463nm，使用的为1cm石英池。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述游离铋浓度在1.5～15ug/ml的浓度范围内与吸收值具有线性关系。
9.如权利要求1～8任一项所述的检测方法在胶体果胶铋中游离铋检测当中的应用。
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| WO2018026536A1 (en) * | 2016-07-20 | 2018-02-08 | Elysium Industries Ltd. | Actinide recycling system |
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