CN110339349A - 一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 - Google Patents
一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110339349A CN110339349A CN201810301218.9A CN201810301218A CN110339349A CN 110339349 A CN110339349 A CN 110339349A CN 201810301218 A CN201810301218 A CN 201810301218A CN 110339349 A CN110339349 A CN 110339349A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- buffer
- parts
- recombinant human
- solvent
- human urokinase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 title claims abstract description 45
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 title claims abstract description 45
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 title claims abstract description 45
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims abstract description 34
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims abstract description 25
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 20
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 20
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 19
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims abstract description 17
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 20
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 12
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 10
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 10
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 10
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 claims description 9
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 8
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 claims description 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 22
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 11
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid group Chemical group C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 108010073863 saruplase Proteins 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 230000005496 eutectics Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229940001501 fibrinolysin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 244000248349 Citrus limon Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000006101 laboratory sample Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000955 prescription drug Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000013777 protein digestion Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- -1 sorbierite Chemical compound 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/49—Urokinase; Tissue plasminogen activator
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21031—Urokinase (3.4.21.31)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明涉及一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法，本发明的重组人尿激酶原的组合物，由重组人尿激酶原、赋形剂、保护剂和溶剂制备而成，其中保护剂为吐温80和蔗糖，或吐温80和海藻糖，其中，吐温80和蔗糖或海藻糖的重量比例为1‑3：50‑150，优选2:100。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物制剂配方及其制备，特别涉及一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法。
背景技术
尿激酶原(Prourokinase，简称pro-UK)是一类丝氨酸蛋白酶，可以激活体内的纤溶酶原转变成有活性的纤溶酶，从而溶解血栓中的纤维蛋白，因此在溶血栓的治疗方面有着广泛的应用。
pro-UK中Lys158-Ile159间肽键容易被纤溶酶及其他一些酶类水解，生成尿激酶(urokinase,简称UK)。UK由A链和B链两条肽链组成，靠链间二硫键连接。和UK相比，pro-UK和纤维蛋白的亲和力较高，激活纤溶系统的部位常在血栓形成的部位，因而引起全身出血倾向的副作用要比尿激酶小，是一种更优越的纤溶酶原激活剂。pro-UK还具有使用剂量小、使用安全、溶栓效果好、再栓率低、无过敏反应等优点，是一种安全无毒的、理想的生物类溶栓制剂，具有广阔的市场前景。
pro-UK制剂不稳定，原因是容易被多种蛋白酶切割为尿激酶，同时，在液体状态下，即使低温保存也会自动分解(CN1730098A的背景技术部分)另外，为了增加稳定性，通常需要采用干燥方法稳定其活性防止降解。
基于以上原因，对尿激酶原进行了修饰，如现有的Pro-UK的制剂处方如专利CN1730098A(申请号为200410058006.0)中所述，由重组人尿激酶原、赋形剂、缓冲溶液和盐类组成，还可包括浓度为1.5‰-7.5‰(重量/体积比)的人血白蛋白作为保护剂，赋形剂是糖类和/或多元醇，选自甘露醇、蔗糖、海藻糖、乳糖、葡萄糖、山梨醇、麦芽糖中的一种或几种，缓冲溶液是磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液。盐类是浓度为0.03-0.20mol/L的氯化钠。然而，该制剂中存在一定量的人血白蛋白作为产品保护剂，原料较为特殊，存在三方面的制约因素，一是其来源于人血，存在病毒安全性风险；二是其原料供给存在较大的问题，市场上经常出现供不应求的局面，带来一定的采购风险；三是蛋白在储存过程中发挥发生蛋白聚集、脱酰胺化、非酶褐变、氧化反应和水解作用，其存在于处方中对成品较低的共晶点存在贡献(低共晶点使得产品冻干后的外观较差)。
另外，生物制品的冻干过程是多步骤过程，会产生低温冻结脱水等多种效应；即使在成功完成冻干后，在长期储存过程中，也很难保证冻干活性组分的变性。为了防止生物制品在冷冻干燥和储存过程的活性成分发生变性，在液体处方中添加保护剂是必不可少的步骤。
为了解决上述问题，发明人在上述专利的基础上做了改进。基本方案：用稳定性更强的缓冲体系：柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液体系或琥珀酸缓冲体系替代原处方中的磷酸盐缓冲体系，以无病毒污染风险的蔗糖或者海藻糖及吐温80作为保护剂，替代原来处方中的人血白蛋白，使用甘露醇或者甘氨酸作为赋形剂。
发明内容
本发明是在现有技术的基础上做的改进发明。
本发明提供的一种含有重组人尿激酶原的组合物，该组合物由重组人尿激酶原、赋形剂、保护剂和溶剂制备而成，其中保护剂为吐温80和蔗糖，或吐温80和海藻糖，其中，吐温80和蔗糖或海藻糖的重量比例为1-3：50-150，优选2:100。
本发明所述组合物的由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原1.5-5.5份、赋形剂1-5份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至4.0-6.0。
优选地，本发明所述组合物的由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原3-5份、甘露醇3-5份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至5.0-6.0。或
本发明所述组合物的由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原3-5份、甘氨酸1-3份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至5.0-6.0。
进一步优选，本发明所述组合物的由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原5mg、甘露醇4mg或甘氨酸2mg、蔗糖或海藻糖1mg、吐温800.02mg，用缓冲液溶解至100ml，调节pH值至4.0-6.0。
上述组合物中，虽然在配比中限定了用量，但是不应以上述内容限定本发明的保护范围，本领域技术人员可以根据需要对上述单位进行调整，比如调整为g、Kg、L等。
所述溶剂为缓冲液或缓冲液与注射用水的组合，当溶剂为缓冲液和注射用水的组合时，溶剂缓冲液与注射用水的重量比为10-100：90-0，优选为20-80：80-20，如果组合物中加入的溶剂为缓冲液和注射用水的组合时，需要调节pH值至4.0-6.0。
所用缓冲液为柠檬酸盐缓冲液或琥珀酸盐缓冲液，浓度为18-25mM、pH为5.0～6.0，优选浓度为20mM；
所述赋形剂为甘露醇或甘氨酸；
本发明还提供了上述组合物的制备方法，该方法包括以下步骤：按照配比称取各成分，然后将重组人尿激酶原、赋形剂、保护剂混匀，溶于溶剂中，总体积为100ml，调节pH4.0-6.0，然后冷冻干燥，即得。
冷冻干燥方法为现有技术常规方法，或采用200410058006.0的方法。
本申请的重组人尿激酶原组合物与现有技术相比，存在以下优势：
1、重组人尿激酶原现有制剂的缺点是使用了人血白蛋白作为保护剂，其缺点见背景技术部分内容，为了避免使用人血白蛋白，发明人采用以下辅料进行了改进：
用蔗糖或海藻糖替换了人血白蛋白，降低了人血白蛋白所带来的病毒污染风险，增加了产品的安全性，由于蔗糖或海藻糖比较容易从市场获得，同时降低了市场采购的风险。同时，发明人还增加了吐温80，该产品可以使蛋白免受剪切力作用。在本处方中，蔗糖或海藻糖与吐温80都作为重组人尿激酶原的保护剂，它们联合作用，保护产品机理不同，使重组人尿激酶原的结构更为稳定，不易降解。
用柠檬酸或琥珀酸盐缓冲液替换了磷酸盐缓冲液，重组人尿激酶原在柠檬酸或琥珀酸盐缓冲液体系中，产品更为稳定。
最终提供的组合物降低了来源于人血、易被病毒感染的风险，原料更易从市场获得，降低了成本同时，为患者带来质量更为可控、安全性更高的产品。
2、与现有技术相比：
原有处方中存在注射用重组人尿激酶原和人血白蛋白两种蛋白质，且注射用重组人尿激酶原和人血白蛋白的分子量非常接近，仅差10KD左右，人血白蛋白本身也会降解一些杂质，因此采用SDS电泳纯度以及SEC-HPLC的分析分析手段无法精准确认产品的纯度和杂质。本发明的组合物中除了处方药物之外均是成分明确的化学物质，采用目前常规的SDS电泳纯度以及SEC-HPLC的分析分析方法可以很好的分析纯度和杂质，以便更好的控制注射用重组人尿激酶原制剂。
另外，原有处方所用的人血白蛋白随着血源和生产工艺不同，产品质量会有所不同。目前很难选择相同工艺和血源的人血白蛋白非常困难，对制剂而言存在非常大风险。
3、本发明提供的组合物改变了原制剂中的缓冲体系，使重组人尿激酶原的新处方制剂更加的稳定。通过新制剂处方的研究，使得注射用重组人尿激酶原在生产过程中更加稳定，并大大降低病毒污染风险低和人血白蛋白的采购风险。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘露醇4mg、海藻糖1mg、吐温-80 0.02mg，加入20mM、pH为6.0的柠檬酸盐缓冲溶液中，总体积为100ml，调节pH至5.0，然后冷冻干燥，即得。
实施例2：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘露醇3mg、蔗糖1.5mg、吐温-80 0.03mg，加入20ml20mM、pH为5.0的柠檬酸盐缓冲溶液中，用注射用水补足至100ml，然后调节pH到5.5，然后冷冻干燥，即得。
实施例3：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘氨酸3mg、蔗糖1mg、吐温-80 0.02mg，加入60ml 20mM、pH为5.5的柠檬酸盐缓冲溶液，用注射用水补足至100ml，调节溶液至pH6.0，然后冷冻干燥，即得。
实施例4：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘氨酸2mg、海藻糖0.5mg、吐温-80 0.01mg，加入20mM、pH为5.5柠檬酸盐缓冲溶液，总体积为100ml，调节溶液pH至5.0，然后冷冻干燥，即得。
实施例5：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘露醇5mg、蔗糖0.5mg、吐温-80 0.01mg，加入40ml20mM、pH为6.0琥珀酸盐缓冲溶液，用注射用水补足至100ml，调节溶液pH至5.5，然后冷冻干燥，即得。
实施例6：注射用重组人尿激酶原
称取重组人尿激酶原5mg、甘氨酸2mg、蔗糖1.5mg、吐温-80 0.02mg，加入80ml20mM、pH为5.0琥珀酸盐缓冲溶液，用注射用水补足至100ml，调节溶液pH至6.0，然后冷冻干燥，即得。
实验例1：配方筛选实验：
稳定性实验
1、实验样品：
F1-F6：分别为实施例1-6的样品；
F7：根据CN1730098A(申请号为200410058006.0)的实施例2制备；
F8：根据实施例1的配方及制备方法，删除吐温-80；
F9：根据实施例1的配方及制备方法，用磷酸盐缓冲液替换柠檬酸盐缓冲液，并调节pH值为7.0；
F10：根据实施例1的配方及制备方法，用葡萄糖替换蔗糖作为保护剂。
2、数据检测：
2.1 DSC扫描，用差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)进行Tm值测定，参数设置见表1：
表1：DSC扫描参数设置表
| 项目 | 设置值 |
| 开始扫描温度 | 10℃ |
| 结束扫描温度 | 110℃ |
| 扫描速率 | 200℃/hr |
| 每个样品再扫描次数 | 0 |
| 冷却速率 | Exp |
| 扫描前平衡时间 | 3mins |
| 下个扫描前等待时间 | 0 |
| 最终仪器保持温度 | 25℃ |
| 数据采集频率 | 10sec |
| 热补偿方式 | none |
| 进样前毛细管温度 | 30℃ |
2.2外观性状
取各样品，放置并使样品恢复至室温后，检查颜色和澄清度。
2.3浓度检测
取各考察点项下的样品，放置并使样品恢复至室温后，取样用pH7.0的磷酸缓冲液稀释蛋白至浓度约为0.5mg/mL，按照紫外测定仪器进行蛋白含量测定。
2.4 SEC-HPLC
采用《中国药典》2010版三部(附录III B)中面积归一化法。色谱柱为TSKgelG3000SWXL7.8×300mm，流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8含0.4mol/L氯化钠)，柱温25℃，样品池温度4℃，流速0.8ml/min，上样量20μg，于波长280nm处检测。
2.5 DLS
取各考察点项下的样品，放置并使样品恢复至室温后。按照动态光散射(DynamicLight Scattering，DLS)仪器进行检查。
2.6 SDS-PAGE
采用《中国药典》2010版三部(附录IV C)法，用非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，考马斯亮蓝R250染色，分离胶浓度15％，浓缩胶浓度为5％，样品与上样缓冲液混合后，60℃保温3min，上样量10μg；经扫描仪扫描，蛋白纯度不低于95.0％。
2.7单链比例
采用S2444显色底物反应法进行检测。
3、实验结果：
3.1 DSC扫描结果，见表2
表2：DSC扫描结果汇总
| 编号 | pH值 | Tm Onset(℃) | Tm1(℃) |
| F1 | 5.0 | 34.74 | 64.19 |
| F2 | 5.5 | 33.31 | 68.32 |
| F3 | 6.0 | 36.83 | 69.62 |
| F4 | 5.0 | 35.26 | 65.27 |
| F5 | 5.5 | 37.81 | 68.36 |
| F6 | 6.0 | 36.2 | 69.43 |
| F7 | 6.5 | 25.73 | 61.61 |
| F8 | 7.0 | 21.64 | 62.31 |
| F9 | 7.5 | 24.06 | 61.33 |
| F10 | 7.0 | 18.31 | 60.21 |
表2结果：Tm值越低越不稳定，F1-F6Tm值高于F7-F10。
结果表明：本发明产品中使用的琥珀酸盐或柠檬酸盐缓冲体系及其调节的pH，效果优于不加吐温80的保护剂体系、用葡萄糖作为赋形剂的体系及磷酸盐缓冲体系。
3.2外观性状：见表3
表3：外观性状
表3结果显示：在T0时各处方溶液为无色澄明溶液，F1-F6在25℃或40℃放置均只有少量蛋白沉淀，F7在40℃第2、4周出现白色浑浊溶液，F8、F9在40℃第1、2、4周时出现白色浑浊溶液。F10在25℃第4周和40℃第1、2、4周均出现大量的蛋白沉淀。
分析上述结果的原因，F10中使用的保护剂是葡萄糖，不能用作保护剂；F7、F9均采用的是磷酸盐，其pH也略高于本发明；F8是去除吐温80的制剂，吐温80的加入避免了重组人尿激酶原的降解。
结果表明：本发明提供的缓冲体系、保护剂，产品外观性状稳定。
3.3浓度检测，测定结果见表4。
表4：浓度
备注：*标示样品均在微型离心机上离心30～60s后，取上清液进行浓度检测。
试验结果表明：外观发生明显沉淀的样品浓度测定结果有明显降低的，但也有无明显降低的。
结果表明：本发明提供的缓冲体系、保护剂，产品无明显降解。
3.4DLS，检查结果见5。
表5：DLS
表5结果显示：本发明实施例各处方溶液样品的平均粒径没有明显变化，表现出较好的稳定性，而F7～F9在25℃或40℃条件下放置后，平均粒径急剧升高，表明有较多蛋白聚集产生。
结果表明：本发明提供的缓冲体系、保护剂产品平均粒径稳定。
3.5 SEC-HPLC，结果见表6。
表6：SEC-HPLC
表6结果显示：F1～F6样品在T0是纯度较高，在25℃和40℃考察后，SEC-HPLC纯度结果均呈现下降趋势，但明显优于F7～F9。
结果表明：本发明提供的缓冲体系、保护剂，产品更稳定，降解杂质更少。
3.6 SDS-PAGE，测定结果见表7。
表7：SDS-PAGE_
表7结果显示：F1～F6样品在T0是纯度较高均在97％以上，在25℃和40℃考察后，SDS-PAGE纯度结果有一定程度下降，但F7～F10检测出的主成份已趋近于没有。
结果表明：本发明提供的缓冲体系、保护剂，产品更稳定。
3.7单链比例，测定结果见表8。
表8：单链比例
表8结果显示：F1～F10样品在T0单链比例无明显差异，在25℃和40℃考察后，单链比例有一定程度下降，明显优于F7～F10。
分析原因：本发明提供的缓冲体系、保护剂，产品更稳定，双链杂质更少。
结果表明：与现有技术相比，本发明提供的产品更稳定，双链杂质更少。
以上实验结果表明：
1、发明人去除保护剂后，产品的稳定性下降，上述质量属性比如DLS、SEC-HPLC、SDS电泳纯度、单练比例均会有不同程度的迅速下降。因此想用常规的糖类作为替换，比如葡萄糖，所申报保护的处方的保护剂为比较常规的保护剂，市场上更容易获得，原来用的人血白蛋白不是常规的保护剂；采用葡萄糖作为保护剂，由于葡萄糖属于单糖，与蛋白质结合的保护作用不明显，加速考察过程中，容易形成聚集。
2、目前产品处方中的磷酸缓冲体系一般是中性或接近中性(7±0.5)，实验结果表明在缓冲体内，液态状态下产品的热稳定性不大好，通过加速考察容易出现多聚体聚集的现象。通过加热作用，蛋白质分子的氢键会被破坏，容易出现聚集。因此采用本发明的柠檬酸盐缓冲液或琥珀酸盐缓冲液。
最终结果证实：与现有技术相比，本发明提供的配方更适合制备成冻干粉针，稳定性更强。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种重组人尿激酶原组合物，其特征在于，所述组合物由重组人尿激酶原、赋形剂、保护剂和溶剂制备而成，其中保护剂为吐温80和蔗糖的混合物，或吐温80和海藻糖的混合物，其中，吐温80和蔗糖或海藻糖的重量比例为1-3：50-150。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中，吐温80和蔗糖或海藻糖的重量比例为1.5-2.5：80-120。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，其中，吐温80和蔗糖或海藻糖的重量比例为2：100。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原1.5-5.5份、赋形剂1-5份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至4.0-6.0。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原3-5份、甘露醇3-5份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至5.0-6.0。
6.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原3-5份、甘氨酸1-3份、保护剂0.5-1.6份，用溶剂溶解至100份，调节pH值至5.0-6.0。
7.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成：
重组人尿激酶原5mg、甘露醇4mg或甘氨酸2mg、蔗糖或海藻糖1mg，吐温800.02mg、用缓冲液溶解至100ml，调节pH值至4.0-6.0。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中所述溶剂为缓冲液或缓冲液与注射用水的组合，当溶剂为缓冲液和注射用水的组合时，溶剂缓冲液与注射用水的重量比为10-100：90-0，其中所用缓冲液为柠檬酸盐缓冲液或琥珀酸盐缓冲液，浓度为18-25mM、pH为5.0-6.0，如果组合物中加入的溶剂为缓冲液和注射用水的组合时，需要调节pH值至4.0-6.0。
9.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中所述溶剂为缓冲液或缓冲液与注射用水的组合，当溶剂为缓冲液和注射用水的组合时，溶剂缓冲液与注射用水的重量比为20-80：80-20，其中所用缓冲液为柠檬酸盐缓冲液或琥珀酸盐缓冲液，浓度为20mM、pH为5.0-6.0。
10.根据权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：按照配比称取各成分，然后将重组人尿激酶原、赋形剂、保护剂混匀，溶于溶剂中，总体积为100ml，调节pH 4.0-6.0，然后冷冻干燥，即得。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810301218.9A CN110339349A (zh) | 2018-04-04 | 2018-04-04 | 一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810301218.9A CN110339349A (zh) | 2018-04-04 | 2018-04-04 | 一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110339349A true CN110339349A (zh) | 2019-10-18 |
Family
ID=68172818
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810301218.9A Pending CN110339349A (zh) | 2018-04-04 | 2018-04-04 | 一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110339349A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114191385A (zh) * | 2021-12-22 | 2022-03-18 | 天士力生物医药股份有限公司 | 一种重组人尿激酶原注射液及其制备方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989007641A1 (en) * | 1988-02-10 | 1989-08-24 | Genzyme Corporation | Enhancement of the therapeutic properties of glycoprotein |
| CN1037360A (zh) * | 1988-04-18 | 1989-11-22 | 法米塔利亚·卡洛·埃巴有限责任公司 | 尿激酶原的低分子量衍生物及含有它们的药用组合物 |
| CN1262131A (zh) * | 1999-01-29 | 2000-08-09 | 长春长生实业股份有限公司 | 海藻糖替代人血白蛋白保护微生物及微生物制剂 |
| CN1730098A (zh) * | 2004-08-06 | 2006-02-08 | 上海天士力药业有限公司 | 含活性尿激酶原的组合物、其冻干方法及冻干制剂 |
| CN101642572A (zh) * | 2009-08-28 | 2010-02-10 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 海洋微生物溶菌酶保护冻干粉的制造方法 |
| CN102657870A (zh) * | 2012-06-04 | 2012-09-12 | 长春祈健生物制品有限公司 | 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂 |
| CN105078906A (zh) * | 2015-08-11 | 2015-11-25 | 蚌埠丰原涂山制药有限公司 | 一种含尿激酶的药物冻干制剂及其制备方法 |
-
2018
- 2018-04-04 CN CN201810301218.9A patent/CN110339349A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989007641A1 (en) * | 1988-02-10 | 1989-08-24 | Genzyme Corporation | Enhancement of the therapeutic properties of glycoprotein |
| CN1037360A (zh) * | 1988-04-18 | 1989-11-22 | 法米塔利亚·卡洛·埃巴有限责任公司 | 尿激酶原的低分子量衍生物及含有它们的药用组合物 |
| CN1262131A (zh) * | 1999-01-29 | 2000-08-09 | 长春长生实业股份有限公司 | 海藻糖替代人血白蛋白保护微生物及微生物制剂 |
| CN1730098A (zh) * | 2004-08-06 | 2006-02-08 | 上海天士力药业有限公司 | 含活性尿激酶原的组合物、其冻干方法及冻干制剂 |
| WO2006012791A1 (fr) * | 2004-08-06 | 2006-02-09 | Shanghai Tasly Pharmaceutical Co., Ltd. | Composition contenant de la pro-urokinase active, son procede de lyophilisation et sa preparation lyophilisee |
| CN101642572A (zh) * | 2009-08-28 | 2010-02-10 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 海洋微生物溶菌酶保护冻干粉的制造方法 |
| CN102657870A (zh) * | 2012-06-04 | 2012-09-12 | 长春祈健生物制品有限公司 | 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂 |
| CN105078906A (zh) * | 2015-08-11 | 2015-11-25 | 蚌埠丰原涂山制药有限公司 | 一种含尿激酶的药物冻干制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MICHAEL D. HILL ET AL.: "Selection of Acute Ischemic Stroke Patients for Intra-Arterial Thrombolysis With Pro-Urokinase by Using ASPECTS", 《STROKE》 * |
| 王丽英 等: "注射用重组人尿激酶原溶栓治疗急性心肌梗死的临床效果观察", 《临床误诊误治》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114191385A (zh) * | 2021-12-22 | 2022-03-18 | 天士力生物医药股份有限公司 | 一种重组人尿激酶原注射液及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018220051B2 (en) | Liquid pharmaceutical composition | |
| AU617451B2 (en) | Process for stabilizing human albumin solutions and the solution obtained | |
| US11633462B2 (en) | Pharmaceutical composition comprising plasminogen and uses thereof | |
| CN104224705B (zh) | 稳定化的液体和冻干的adamts13制剂 | |
| FI88873B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av kompositioner som innehaoller stabiliserad human vaevnadsplasminogenaktivator | |
| US4478829A (en) | Pharmaceutical preparation containing purified fibronectin | |
| FI85335B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av lyofiliserad, farmaceutisk vaevnadsplasminogenaktivator(t-pa)-komposition. | |
| CN100448482C (zh) | Hgf冻干制剂 | |
| US20070167368A1 (en) | Dried blood factor composition comprising trehalose | |
| RU2481823C2 (ru) | Стабилизированные составы, содержащие фактор ix и трегалозу | |
| KR20120112248A (ko) | 보톨리눔 독소의 동결건조제제 | |
| AU2004298728A1 (en) | Pharmaceutical preparation containing an antibody for the EGF receptor | |
| KR20040074099A (ko) | Ｅｇｆ 수용체에 대한 항체를 함유하는 동결건조된 제제 | |
| PL195090B1 (pl) | Stabilny liofilizowany preparat aktywowanego białka C i jego stosowanie | |
| CN104231073B (zh) | 一种人凝血因子viii的制备方法 | |
| TWI787161B (zh) | 含有抗人類ｔｓｌｐ受體抗體之醫藥組成物 | |
| JPH11502833A (ja) | 凝固因子ｖｉｉｉもしくは因子ｉｘを水溶液中に含む蛋白質処方物 | |
| NZ530959A (en) | Pharmaceutical compositions of metalloproteinase fibrinolytic agent | |
| KR100377967B1 (ko) | Hcg액상조성물 | |
| CN104225601B (zh) | 人凝血因子viii冻干及干热处理保护剂 | |
| JP2004536129A (ja) | セツキシマブおよびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む液体製剤 | |
| CN110339349A (zh) | 一种重组人尿激酶原组合物及其制备方法 | |
| JP2021524470A (ja) | 安定な融合タンパク質製剤 | |
| Foster et al. | Thermal stability of low molecular weight urokinase during heat treatment. III. Effect of salts, sugars and Tween 80 | |
| EP0419252B1 (en) | Thrombolytic composition containing tissue type plasminogen activator or derivative thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191018 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |