CN110314205A - 一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂及其制备方法，该天然生物制剂的制备方法，以30‑45％酿酒酵母、10‑40％嗜酸乳杆菌、30‑45％植物乳杆菌的混合液为复合菌种，采用复合发酵技术发酵米糠30‑49％、葛根1‑5％、沙棘10‑20％、黄芩1‑5％、麸皮1‑5％、糖蜜2‑6％、纯净水8‑47％的粉碎混合物，将发酵物稀释或干燥、粉碎后制成不同剂型。采用本发明方法制备的养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂，其含有较高含量的如总黄酮、SOD等多种代谢产物，可作为营养素直接作用于肝脏细胞，修复受损的肝脏细胞。

Description

一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物发酵技术领域，具体涉及一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂及其制备方法。
背景技术
现代鱼类养殖行业，在满足消费需求的同时，都复合高密度，高产出的模式。这是一种极致高压的状态。但伴随而来的也产生了很多问题。以肉食性鱼类为例，由于环保压力，以冰鲜鱼为饵料的肉食性鱼类改为食用配合饲料，配合饲料中由于工艺和成本的问题，淀粉含量居高不下。肉食性鱼类对于淀粉消化的速率较慢导致肝脏代谢困难，从而产生损伤。
草鱼也有类似的问题，养殖业认为饲喂的多，生长速度就快，就能产生更大的经济效益。草食鱼比肉食性鱼类对用淀粉的消化更强，但是淀粉被转化成糖后同样会应为代谢能力不足转化成脂肪，高脂肪也会对肝脏引起损伤。
虽然现在可以通过添加胆汁酸来帮助肝脏代谢，但是对于已经损伤的肝脏来说，即使是药物，也很难得到缓解，随之而来的炎症加重甚至是死亡，这样会对养殖业者带来极大的经济损失。因此，有必要研发一种可以修复养殖鱼类肝损伤的天然生物制剂。
发明内容
本发明为解决现有技术中的上述问题，提出一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明的第一个方面是提供一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂的制备方法，以30-45％酿酒酵母、10-40％嗜酸乳杆菌、30-45％植物乳杆菌的混合液为复合菌种，采用复合发酵技术发酵米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％的粉碎混合物10-15天，将发酵物稀释或干燥、粉碎后制成不同剂型。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，包括如下步骤：
步骤1，菌种复合培养
菌种筛选：按以下重量百分比称取培养后的菌种：酿酒酵母30-45％、嗜酸乳杆菌10-40％、植物乳杆菌30-45％，配制菌种混合液；
菌种复合培养：将步骤(1)的菌种混合液种按1：80-120比例放入以下配比的培养基原料中：糖蜜5-10％、乳清粉3-5％、纯净水85-92％，放入发酵罐搅拌均匀后于28-32℃密闭培养5-10天，得复合菌种；
步骤2，原料复合发酵
复合发酵：将步骤(1)培养的复合菌种按1：15-20比例放入以下配比的复合原料中：米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％，放入发酵罐搅拌均匀后28-32℃密闭培养10-15天；
步骤3，制剂制备
将步骤(2)发酵后的物料制成固态制剂或液体剂型。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中步骤(1)中：所述酿酒酵母的培养工艺为：
将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae，ACCC20065)转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32℃，180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出；
所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：
将嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，ACCC10637)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；以及
所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：
将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(1)中，按重量百分比计，所述菌种混合液包括：酿酒酵母35-40％、嗜酸乳杆菌20-30％、植物乳杆菌35-40％。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(1)中，所述菌种混合液与所述培养基原的重量比为1：90-110，放入发酵罐搅拌均匀后于28-30℃密闭培养5-7天。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(2)中，所述复合菌种与所述复合原料的重量比为1：16-18，放入发酵罐搅拌均匀后30-32℃密闭培养10-12天。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(2)中，所述原料米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮为选用个体均匀的米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮分别通过粉碎机粉碎过40-70目而得。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(2)中，按重量百分比计，所述复合原料包括：米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(3)中，将步骤(2)发酵后的物料用恒温烘箱温度40-50℃，烘干时间8-16h，粉碎成60目的粉剂作为固态制剂产品。
进一步地，在所述的天然生物制剂的制备方法中，步骤(3)中，将步骤(2)发酵后的物料以1：3-5的比例放入纯净水中，制得液态制剂产品。
本发明的第二个方面是提供一种如上述所述方法制备的养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂。
本发明采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明通过微生物复合发酵得到的微生态制剂，用于修复养殖鱼类因配合饲料中高淀粉高蛋白引起代谢障碍造成的肝脏损伤；通过如乳酸菌，酵母菌发酵得到的微生态制剂中含有较高含量的如总黄酮、SOD等多种代谢产物，这些代谢产物作为营养素直接作用于肝脏细胞，修复受损的肝脏细胞；该天然生物制剂，避免现有技术中通过添加胆汁酸来帮助肝脏代谢产生的炎症加重甚至是死亡的后果，增加了经济效益。
具体实施方式
本发明主要技术方案是通过如乳酸菌，酵母菌发酵葛根，沙棘、黄芩得到的微生态制剂中含有较高含量的如总黄酮、SOD等多种代谢产物，这些代谢产物作为营养素直接作用于肝脏细胞，修复受损的肝脏细胞。
总黄铜是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等，具有抗炎症、抗过敏、抑制细菌、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心与脑血管疾病、抗肿瘤和抗化学毒物等作用。而胆汁酸是胆汁的重要成分，在脂肪代谢中起着重要作用。
本发明提供的养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂的制备方法，以30-45％酿酒酵母、10-40％嗜酸乳杆菌、30-45％植物乳杆菌的混合液为复合菌种，采用复合发酵技术发酵米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％的粉碎混合物10-15天，将发酵物稀释或干燥、粉碎后制成不同剂型。
具体地，所述的天然生物制剂的制备方法，具体包括如下步骤：
步骤1，菌种复合培养
菌种筛选：按以下重量百分比称取培养后的菌种：酿酒酵母30-45％、嗜酸乳杆菌10-40％、植物乳杆菌30-45％，配制菌种混合液；
菌种复合培养：将步骤(1)的菌种混合液种按1：80-120比例放入以下配比的培养基原料中：糖蜜5-10％、乳清粉3-5％、纯净水85-92％，放入发酵罐搅拌均匀后于28-32℃密闭培养5-10天，得复合菌种；
步骤2，原料复合发酵
复合发酵：将步骤(1)培养的复合菌种按1：15-20比例放入以下配比的复合原料中：米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％，放入发酵罐搅拌均匀后28-32℃密闭培养10-15天；
步骤3，制剂制备
将步骤(2)发酵后的物料制成固态制剂或液体剂型。
作为一个优选技术方案，所述酿酒酵母的培养工艺为：将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，ACCC20065)转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32℃，180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出；所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：将嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus，ACCC10637)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；以及所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用。
作为一个优选技术方案，步骤(1)中，按重量百分比计，所述菌种混合液包括：酿酒酵母35-40％、嗜酸乳杆菌20-30％、植物乳杆菌35-40％。优选地，按重量百分比计，所述菌种混合液包括：酿酒酵母36-38％、嗜酸乳杆菌25-28％、植物乳杆菌35-37％。更为优选地，按重量百分比计，所述菌种混合液包括：酿酒酵母37％、嗜酸乳杆菌26％、植物乳杆菌37％。
作为一个优选技术方案，步骤(1)中，所述菌种混合液与所述培养基原的重量比为1：90-110，放入发酵罐搅拌均匀后于28-30℃密闭培养5-7天。更为优选地，所述菌种混合液与所述培养基原的重量比为1：98，放入发酵罐搅拌均匀后于30℃密闭培养5天。
作为一个优选技术方案，步骤(2)中，所述复合菌种与所述复合原料的重量比为1：16-18，放入发酵罐搅拌均匀后30-32℃密闭培养10-12天。优选地，所述复合菌种与所述复合原料的重量比为1：17，放入发酵罐搅拌均匀后30℃密闭培养11天。
作为一个优选技术方案，步骤(2)中，所述原料米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮为选用个体均匀的米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮分别通过粉碎机粉碎过40-70目而得；优选地，所述原料葛根、沙棘和黄芩为选用个体均匀的葛根、沙棘和黄芩分别通过粉碎机粉碎过55-60目而得。
作为一个优选技术方案，步骤(2)中，按重量百分比计，所述复合原料包括：米糠35-45％、葛根2-4％、沙棘12-18％、黄芩2-4％、麸皮2-4％、糖蜜3-5％、纯净水20-35％。所述复合原料包括：米糠40％、葛根3％、沙棘15％、黄芩3％、麸皮3％、糖蜜5％、纯净水31％。
作为一个优选技术方案，步骤(3)中，将步骤(2)发酵后的物料用恒温烘箱温度40-50℃，烘干时间8-16h，粉碎成60目的粉剂作为固态制剂产品。或将步骤(2)发酵后的物料以1：3-5的比例放入纯净水中，制得液态制剂产品。
采用本发明方法制备的养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂中含有较高含量的如总黄酮、SOD等多种代谢产物，这些代谢产物可作为营养素直接作用于肝脏细胞，修复受损的肝脏细胞。
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例1
一种养殖鱼类肝损伤修复的天然固体型生物制剂的制备，包括如下步骤：
步骤1，生产制种
将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae，ACCC20065)转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在29℃，180rpm振荡培养48小时，待培养基浑浊后取出；嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，ACCC10637)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)，分别转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在37℃培养48小时，待培养基浑浊后取出，然后放入4℃冰箱保存待用；
步骤2，菌种复合培养
(1)将步骤1培养的菌种按以下重量百分比称取：酿酒酵母40％、嗜酸乳杆菌20％、植物乳杆菌40％；
(2)菌种复合培养：将以上称取的菌种按1：80比例放入以下配比的原料中：糖蜜5％、乳清粉5％、纯净水89％，放入发酵罐搅拌均匀后30℃密闭培养10天；
步骤3，原料复合发酵
(1)原料粉碎：将筛选个体均匀的葛根、沙棘、黄芩分别通过粉碎机粉碎成50目；
(2)复合发酵：将以上复合培养的菌种按1：15比例放入以下配比的原料中：米糠40％、葛根3％、沙棘15％、黄芩3％、麸皮3％、糖蜜5％、纯净水31％，放入发酵罐搅拌均匀后30℃密闭培养15天；
步骤4，制剂制备
将物料用恒温烘箱温度45℃，烘干时间16h，粉碎成60目的粉剂作为固态制剂产品。
实施例2
一种养殖鱼类肝损伤修复的天然液体型生物制剂的制备，包括如下步骤：
步骤1，生产制种
将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae，ACCC20065)转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在30℃，220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出；嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，ACCC10637)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)，分别转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35℃培养72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入3℃冰箱保存待用；
步骤2，菌种复合培养
(1)将步骤1培养的菌种按以下重量百分比称取：酿酒酵母30％、嗜酸乳杆菌25％、植物乳杆菌45％；
(2)菌种复合培养：将以上称取的菌种按1：120比例放入以下配比的原料中：糖蜜10％、乳清粉3％、纯净水86％，放入发酵罐搅拌均匀后32℃密闭培养8天；
步骤3，原料复合发酵
(1)原料粉碎：将筛选个体均匀的葛根、沙棘、黄芩分别通过粉碎机粉碎成70目；
(2)复合发酵：将以上复合培养的菌种按1：20比例放入以下配比的原料中：米糠45％、葛根2％、沙棘13％、黄芩2％、麸皮2％、糖蜜3％、纯净水33％，放入发酵罐搅拌均匀后32℃密闭培养15天；
步骤4，制剂制备
将物料以1：3的比例放入纯净水中，制得液态制剂产品。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (10)

1.一种养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂的制备方法，其特征在于，以30-45％酿酒酵母、10-40％嗜酸乳杆菌、30-45％植物乳杆菌的混合液为复合菌种，采用复合发酵技术发酵米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％的粉碎混合物，将发酵物稀释或干燥、粉碎后制成不同剂型。
2.根据权利要求1所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，包括步骤：
步骤(1)，菌种复合培养
菌种筛选：按以下重量百分比称取培养后的菌种：酿酒酵母30-45％、嗜酸乳杆菌10-40％、植物乳杆菌30-45％，配制菌种混合液；
菌种复合培养：将步骤(1)的菌种混合液种按1：80-120比例放入以下配比的培养基原料中：糖蜜5-10％、乳清粉3-5％、纯净水85-92％，放入发酵罐搅拌均匀后于28-32℃密闭培养5-10天，得复合菌种；
步骤(2)，原料复合发酵
复合发酵：将步骤(1)培养的复合菌种按1：15-20比例放入以下配比的复合原料中：米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％，放入发酵罐搅拌均匀后28-32℃密闭培养10-15天；
步骤(3)，制剂制备
将步骤(2)发酵后的物料制成固态制剂或液体剂型。
3.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：所述酿酒酵母的培养工艺为：
将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae，ACCC20065)转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32℃，180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出；
所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：
将嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，ACCC10637)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；以及
所述嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的培养工艺为：
将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)转接入MRS液体培养基的锥形瓶中，在35-39℃培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用。
4.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，按重量百分比计，所述菌种混合液包括：酿酒酵母35-40％、嗜酸乳杆菌20-30％、植物乳杆菌35-40％。
5.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述菌种混合液与所述培养基原的重量比为1：90-110，放入发酵罐搅拌均匀后于28-30℃密闭培养5-7天。
6.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述复合菌种与所述复合原料的重量比为1：16-18，放入发酵罐搅拌均匀后30-32℃密闭培养10-12天。
7.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述原料米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮为选用个体均匀的米糠、葛根、沙棘、黄芩和麸皮分别通过粉碎机粉碎过40-70目而得。
8.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，按重量百分比计，所述复合原料包括：米糠30-49％、葛根1-5％、沙棘10-20％、黄芩1-5％、麸皮1-5％、糖蜜2-6％、纯净水8-47％。
9.根据权利要求2所述的天然生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，将步骤(2)发酵后的物料用恒温烘箱温度40-50℃，烘干时间8-16h，粉碎成60目的粉剂作为固态制剂产品；或将步骤(2)发酵后的物料以1：3-5的比例放入纯净水中，制得液态制剂产品。
10.一种如权利要求1-9任一项所述方法制备的养殖鱼类肝损伤修复用天然生物制剂。
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