CN110302260A - 一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法，所述的含片由冬虫夏草、红曲、丹参和山楂组成。本发明首先将中国被毛孢菌诱导产生的分生孢子均匀喷洒到蝙蝠蛾幼虫上，在适宜条件下培育出冬虫夏草，且与野生冬虫夏草有相同的指标性成分，可以有效的解决冬虫夏草资源紧缺、难以采集和价格昂贵的问题，对冬虫夏草人工规模化培育和生产具有推广作用；采用本发明的配方，可以不制粒，直接压片，工艺步骤简单，容易操作，制得的含片外观光滑整洁、品质优良，并且可以延长口腔作用时间，而且制得的含片没有添加任何辅料，对高血脂、高血压、糖尿病、心血管病、肾病等疾病的人们具有良好的辅助疗效，其保健和治疗效果更为显著。

Description

一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法
技术领域
本发明涉及或药食用菌培育和中药技术领域，具体是涉及一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法。
背景技术
近年来，随着物质丰富多样，人们的生活水平的不断提高，高血脂病发病率呈明显增长趋势，已经成为危害人类身体健康的重大疾病之一。因此，降血脂药物的研究与发展越来越受到人们的重视。目前公认调脂最有效并广泛应用的西药是他汀类，但是其副作用也相对显著。而相对于西药来讲，中药越来越多地应用治疗高脂血症中，且中药降脂药疗效肯定、持续、副作用小。
红曲古代称为丹曲，是我国的伟大发明和传统的药食两用发酵产品，最早见于李时珍的《本草纲目》，迄今已有一千多年的应用历史，被中医认为是珍贵的保健功能性食品，具有消食健脾，活血化瘀，降脂化浊的功效。丹参为唇形科鼠尾草属草本植物丹参的根及根茎，具有养血安神、清心除烦、活血通经、祛瘀止痛的功效；可用于月经不调、闭经、痛经、心烦不眠、胸腹刺痛、肝脾肿大及心绞痛等症。现代临床在治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血、抗动脉粥样硬化、改善微循环等心脑血管疾病方面应用比较广泛。山楂为蔷薇科植物山里红或山楂的干燥成熟果实，具有消食健胃，行气散瘀，化浊降脂；可用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，胸痹心痛，疝气疼痛，高脂血症。
冬虫夏草是麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体，是我国民间惯用的一种传统的名贵滋补药食同源药材，具有“补肺、强肾、益精气、理诸虚百损”等多种功效，在我国滋补市场占有非常重要的地位，一直被推崇，并在国际市场热销。现代医学研究表明冬虫夏草含有多种成分，使其具有多种生理活性，如抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、降血压、免疫调节和调节内分泌、心血管等，而且药效温和。
中国被毛孢菌已经被证实是冬虫夏草菌无性型菌株。野生冬虫夏草生长繁殖具有极为显著的地区性和周期性、对生活环境条件要求苛刻，所以本身资源比较有限。近年来由于人们大量盲目不合理采挖致使冬虫夏草主产地生态环境遭到严重破坏，资源日趋减少，产量逐年下降。冬虫夏草作为药食两用品种，且人们不断发现其新的药理作用，所以多个国家对它的需求倍增，但由于冬虫夏草资源稀少，且不容易采集到，导致价格逐年上涨，国际市场日益紧缺。
为了让冬虫夏草更好的普及于大众，让中医药更好的为人们的健康服务，本发明提供了一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法，可以培育出大量的冬虫夏草，不仅创造了价值，而且保护了生态环境。
发明内容
本发明的目的是提供了一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法，所述的含片由冬虫夏草、红曲。丹参和山楂组成。本发明首先将中国被毛孢菌诱导产生的分生孢子均匀喷洒到蝙蝠蛾幼虫上，在适宜条件下培育出冬虫夏草，且与野生冬虫夏草有相同的指标性成分，可以有效的解决冬虫夏草资源紧缺、难以采集和价格昂贵的问题，对冬虫夏草人工规模化培育和生产具有推广作用；采用本发明的配方，可以不制粒，直接压片，工艺步骤简单，容易操作，制得的含片外观光滑整洁、品质优良，并且可以延长口腔作用时间，使其精华成分能吸收充分，同时减少了胃肠道和肝脏的首过效应，使其吸收利用率极高，而且制得的含片没有添加任何辅料，对高血脂、高血压、糖尿病、心血管病、肾病等疾病的人们具有良好的辅助疗效，其保健和治疗效果更为显著。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种降血脂的冬虫夏草含片，由下述重量份的原料组成：冬虫夏草40～90重量份、红曲10～60重量份、丹参8～20重量份、山楂7～24重量份。
进一步的，一种降血脂的冬虫夏草含片，由下述重量份的原料组成：冬虫夏草60～80重量份、红曲20～40重量份、丹参10～15重量份、山楂9～20重量份。
进一步的，一种降血脂的冬虫夏草含片，由下述重量份的原料组成：冬虫夏草75重量份、红曲25重量份、丹参12重量份、山楂20重量份。
一种降血脂的冬虫夏草含片的制备方法，包括下述步骤：
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，过100目筛得冬虫夏草粉，备用；
(2)按量取红曲，取其中部分红曲粉碎成细粉；备用；
(3)按量取丹参，粉碎成粗粉(指全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过40％的粉末)，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用；
(4)按量取山楂，将(2)中红曲细粉和(3)中丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入按量取的(1)中冬虫夏草细粉、(2)中红曲粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过100目筛，得混合干燥物，备用；
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.2～0.6g；
进一步的，所述步骤(2)为：按量取红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，不高于55℃温度干燥，得红曲细粉，备用。
进一步的，所述步骤(1)中的冬虫夏草采用下述步骤制备：
(4)中国被毛孢菌分生孢子悬浮液的制备
将中国被毛孢菌接种于液体培养基中，在10～20℃，180r/min恒温摇床中，避光培养20～30天，得菌液；将菌液涂布于固体培养基上，在10～20℃温度和65～85％相对湿度条件下培育30～50天，然后把培养基放置于4℃冰箱中培养24小时，再置于10～14℃和65～85％相对湿度条件下，避光培养20～30天，即得中国被毛孢分生孢子；用无菌生理盐水将培养基上的分生孢子洗脱下来，打散孢子团粒，离心，弃去上清液，用无菌10％葡萄糖溶液重悬，即获得分生孢子悬浮液；
液体种子培养基组分如下：土豆200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母提取物1g/L，pH自然。土豆切小块煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟；
固体培养基组分如下：麸皮20g/L，葡萄糖30g/L，蛋白胨15g/L，酵母提取物10g/L，琼脂20g/L，pH自然。麸皮煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟；
(5)侵染
用无菌喷雾器将分生孢子悬浮液均匀的喷洒到2～4龄蝙蝠蛾幼虫上，每隔8～12小时喷洒一次，连喷2～3次；
(6)培育
将染菌的蝙蝠蛾幼虫置于洁净的培育间进行培养至幼虫僵化；将僵化幼虫按照150～180只/每平方米栽培于养虫盒中，盒内装有灭菌过的腐殖土(厚3厘米，湿度40％～60％)，然后将养虫盒置于栽培间，在适宜条件下进行培养，经2～4个月后，便可获得冬虫夏草；
培育间培养条件如下：温度为15～18℃，相对湿度为65～85％，避光培养，每天通风30分钟；
栽培间适宜培养条件如下：温度为10～15℃，相对湿度为80～95％，避光培养，每天通风30分钟。
由于采用上述技术方案，本发明至少具有以下优点：
本发明公开了一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法，所述的含片由冬虫夏草、红曲、丹参和山楂组成。本发明首先通过科学合理的技术方案，获得了冬虫夏草，且具有与野生冬虫夏草相同的指标性成分，对冬虫夏草人工规模化培育和生产具有推广作用，不仅具有显著的经济效益，而且还有效的解决冬虫夏草资源紧缺、难以采集和价格昂贵的问题。采用本发明的配方，可以直接压片，中间不需要制粒，工艺步骤简单，容易操作，制得的含片外观光滑整洁、品质优良，并且可以延长口腔作用时间，使其精华成分能吸收充分，同时减少了胃肠道和肝脏的首过效应，使其吸收利用率极高，保健和治疗效果更为显著。
附图说明
图1是本发明的一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法培育的冬虫夏草腺苷成份HPLC分析图(A为腺苷标准品图谱，B为人工冬虫夏草样品)。
图2是本发明的一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法培育的冬虫夏草指纹图谱相似度对比图(图中R为野生冬虫夏草指纹图谱，S1为人工培育的冬虫夏草测试样品指纹图谱)。
图3是本发明的一种降血脂的冬虫夏草含片及其制备方法制备的含片。
具体实施方式
上述仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，以下结合附图与具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。应当理解，以下的实施例便于更好地理解本发明，而不用于限定本发明。
下述实施例中的试验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中的所用的试剂及原料，如无特殊说明，均通过常规途径购买获得；下述实施例中的％，如无特殊说明，均为质量百分含量。
实施例1：冬虫夏草的获得及检测
(1)中国被毛孢菌分生孢子悬浮液的制备
将中国被毛孢菌接种于液体培养基中，在20℃，180r/min恒温摇床中，避光培养20天，得菌液；将菌液涂布于固体培养基上，在16℃温度和70％相对湿度条件下培育45天，然后把培养基放置于4℃冰箱中培养24小时，再置于12℃和65～85％相对湿度条件下，避光培养20天，即得中国被毛孢分生孢子；用无菌生理盐水将培养基上的分生孢子洗脱下来，打散孢子团粒，离心，弃去上清液，用无菌10％葡萄糖溶液重悬，即获得分生孢子悬浮液(105cfu/mL)；
液体种子培养基组分如下：土豆200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母提取物1g/L，pH自然。土豆切小块煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟。
固体培养基组分如下：麸皮20g/L，葡萄糖30g/L，蛋白胨15g/L，酵母提取物10g/L，琼脂20g/L，pH自然。麸皮煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟。
(2)侵染
用无菌喷雾器将分生孢子悬浮液均匀的喷洒到3龄蝙蝠蛾幼虫上，每隔12小时喷洒一次，连喷3次。
(3)培育
将染菌的蝙蝠蛾幼虫置于洁净的培育间进行培养至幼虫僵化；将僵化幼虫按照150只/每平方米栽培于养虫盒中(40×30×6cm)，盒内装有灭菌过的腐殖土(厚3厘米，湿度45％)，然后将养虫盒置于栽培间，在适宜条件下进行培养，经3个月后，便可获得冬虫夏草。
培育间培养条件如下：温度为16℃，相对湿度为68％，避光培养，每天通风30分钟。
栽培间适宜培养条件如下：温度为10℃，相对湿度为85％，避光培养，每天通风30分钟。
经上述发酵工艺所得的冬虫夏草经检测，性状符合药典对冬虫夏草的标准要求(图1)；冬虫夏草供试品指纹图谱与野生冬虫夏草指纹图谱的相似度为98.5％(图3)；含腺苷为0.022％。
实施例2：一种降血脂的冬虫夏草含片的制备
利用本发明上述的冬虫夏草进行一种降血脂的冬虫夏草含片的制备，主要采用以下方法步骤：
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，得目数为大于100的冬虫夏草最细粉，备用。
(2)按量取红曲，取其中部分红曲粉碎成最细粉；另取剩余的红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，干燥(温度不高于55℃)，得红曲最细粉，备用。
(3)按量取丹参，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用。
(4)按量取山楂，将(2)、(3)中醇提取后的红曲和丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.20(60℃)的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入按量取的(1)中冬虫夏草最细粉、(2)中红曲粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过筛(目数大于100目)，得混合干燥物，备用。
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.2～0.6g。
实施例2.1
本实施例通过以下步骤制备降血脂冬虫夏草含片，其中包括冬虫夏草45g、红曲55g、丹参15g、山楂20g。
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，得目数为大于100的冬虫夏草最细粉，备用。
(2)按量取红曲55g，取25g红曲碎成最细粉；另取剩余30g红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，干燥(温度不高于50℃)，得红曲最细粉，备用。
(3)按量取丹参15g，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用。
(4)按量取山楂20g，将(2)、(3)中醇提取后的红曲和丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.12(60℃)的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入(1)中45g冬虫夏草最细粉、(2)中红曲最细粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过筛(目数大于100目)，得混合干燥物，备用。
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.6g。
实施例2.2
本实施例通过以下步骤制备降血脂冬虫夏草含片，其中包括冬虫夏草50g、红曲50g、丹参20g、山楂20g。
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，得目数为大于100的冬虫夏草最细粉，备用。
(2)按量取红曲50g，取20g红曲碎成最细粉；另取剩余30g红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，干燥(温度不高于50℃)，得红曲最细粉，备用。
(3)按量取丹参20g，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用。
(4)按量取山楂20g，将(2)、(3)中醇提取后的红曲和丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.13(60℃)的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入(1)中50g冬虫夏草最细粉、(2)中红曲最细粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过筛(目数大于100目)，得混合干燥物，备用。
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.6g。
实施例2.3
本实施例通过以下步骤制备降血脂冬虫夏草含片，其中包括冬虫夏草75g、红曲25g、丹参20g、山楂24g。
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，得目数为大于100的冬虫夏草最细粉，备用。
(2)按量取红曲25g，取10g红曲碎成最细粉；另取剩余15g红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，干燥(温度不高于50℃)，得红曲最细粉，备用。
(3)按量取丹参20g，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用。
(4)按量取山楂24g，将(2)、(3)中醇提取后的红曲和丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.12(60℃)的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入(1)中75g冬虫夏草最细粉、(2)中红曲最细粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过筛(目数大于100目)，得混合干燥物，备用。
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.6g。
综上所述，本发明首先通过科学合理的技术方案，获得了冬虫夏草，且具有与野生冬虫夏草相同的指标性成分，对冬虫夏草人工规模化培育和生产具有推广作用，不仅具有显著的经济效益，而且还有效的解决冬虫夏草资源紧缺、难以采集和价格昂贵的问题。采用本发明的配方，可以直接压片，中间不需要制粒，工艺步骤简单，容易操作，制得的含片外观光滑整洁、品质优良，并且可以延长口腔作用时间，使其精华成分能吸收充分，同时减少了胃肠道和肝脏的首过效应，使其吸收利用率极高，保健和治疗效果更为显著。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，本领域技术人员利用上述揭示的技术内容做出些许简单修改、等同变化或修饰，均落在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种降血脂的冬虫夏草含片，其特征在于由下述重量份的原料组成：冬虫夏草40～90重量份、红曲10～60重量份、丹参8～20重量份、山楂7～24重量份。
2.根据权利要求1所述的一种降血脂的冬虫夏草含片，其特征在于由下述重量份的原料组成：冬虫夏草60～80重量份、红曲20～40重量份、丹参10～15重量份、山楂9～20重量份。
3.根据权利要求1所述的一种降血脂的冬虫夏草含片，其特征在于由下述重量份的原料组成：冬虫夏草75重量份、红曲25重量份、丹参12重量份、山楂20重量份。
4.一种降血脂的冬虫夏草含片的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)取经清洗、干燥处理的冬虫夏草进行粉碎，过100目筛得冬虫夏草粉，备用；
(2)按量取红曲，取其中部分红曲粉碎成细粉，备用；
(3)按量取丹参，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取1.5小时，静置，滤过，滤液回收乙醇，备用；
(4)按量取山楂，将(2)中红曲细粉和(3)中丹参药渣与山楂一起加水煎煮2次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎煮液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.20的清膏，放置，待药液温度降至40℃时，加入按量取的(1)中冬虫夏草细粉、(2)中红曲粉和(3)中丹参提取液，搅拌均匀，冷冻干燥，粉碎，过100目筛，得混合干燥物，备用；
(5)将步骤(4)所得混合干燥物采用直接粉末压片法即制成降血脂的冬虫夏草含片，压力控制在4.0～10.0kg，每片重约0.2～0.6g。
5.如权利要求4中所述的一种降血脂的冬虫夏草含片制备方法，其特征在于所述步骤(2)为：按量取红曲，加5～10倍75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，静置，滤过，回收乙醇，减压浓缩至适量，喷红曲最细粉入中，不高于55℃温度干燥，得红曲细粉，备用。
6.如权利要求4中所述的一种降血脂的冬虫夏草含片制备方法，其特征在于所述步骤(1)中的冬虫夏草采用下述步骤制备：
(1)中国被毛孢菌分生孢子悬浮液的制备
将中国被毛孢菌接种于液体培养基中，在10～20℃，180r/min恒温摇床中，避光培养20～30天，得菌液；将菌液涂布于固体培养基上，在10～20℃温度和65～85％相对湿度条件下培育30～50天，然后把培养基放置于4℃冰箱中培养24小时，再置于10～14℃和65～85％相对湿度条件下，避光培养20～30天，即得中国被毛孢分生孢子；用无菌生理盐水将培养基上的分生孢子洗脱下来，打散孢子团粒，离心，弃去上清液，用无菌10％葡萄糖溶液重悬，即获得分生孢子悬浮液；
液体种子培养基组分如下：土豆200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母提取物1g/L，pH自然，土豆切小块煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟；
固体培养基组分如下：麸皮20g/L，葡萄糖30g/L，蛋白胨15g/L，酵母提取物10g/L，琼脂20g/L，pH自然，麸皮煮沸30分钟，纱布滤过，滤液中加入其余组分，加水定容至1升，121℃，灭菌30分钟；
(2)侵染
用无菌喷雾器将分生孢子悬浮液均匀的喷洒到2～4龄蝙蝠蛾幼虫上，每隔8～12小时喷洒一次，连喷2～3次；
(3)培育
将染菌的蝙蝠蛾幼虫置于洁净的培育间进行培养至幼虫僵化；将僵化幼虫按照150～180只/每平方米栽培于养虫盒中，盒内装有灭菌过的腐殖土(厚3厘米，湿度40％～60％)，然后将养虫盒置于栽培间，在适宜条件下进行培养，经2～4个月后，便可获得冬虫夏草；
培育间培养条件如下：温度为15～18℃，相对湿度为65～85％，避光培养，每天通风30分钟；
栽培间适宜培养条件如下：温度为10～15℃，相对湿度为80～95％，避光培养，每天通风30分钟。
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