CN110301335A

CN110301335A - 西红花的侧芽繁育球茎的培养法

Info

Publication number: CN110301335A
Application number: CN201910617716.9A
Authority: CN
Inventors: 毛碧增; 毛福江; 何家浩
Original assignee: Zhejiang University ZJU
Current assignee: Zhejiang University ZJU
Priority date: 2019-07-10
Filing date: 2019-07-10
Publication date: 2019-10-08
Anticipated expiration: 2039-07-10
Also published as: CN110301335B

Abstract

本发明公开了一种西红花侧芽繁育球茎的培养法，依次包括以下步骤：将收获的西红花球茎平摊于培育室内，球茎主芽朝上，待球茎的芽原基萌发且发育生长成长度≥13cm的侧芽时，掰下球茎上的侧芽；把侧芽的基部浸泡于促根生长液(贝莱斯芽孢杆菌的发酵液)中；将基部沾有促根生长液的侧芽扦插到球茎繁育基质上，种植(常规种植)直至收获球茎。本发明把西红花生产上掰下的废弃的侧芽作为材料，培育成球茎，大大扩大了球茎繁育母本，为获得大量球茎提供了物质保障。

Description

西红花的侧芽繁育球茎的培养法

技术领域

本发明涉及西红花的侧芽繁育球茎的培养法。

背景技术

西红花(Crocus sativus L.)又名番红花、藏红花，为鸢尾科番红花属的多年生植物，以柱头入药，是一味传统名贵中药材，同时享有世界上“最贵药用植物”、“最好染料”和“最高档香料”之美誉。中国药典2015年版(一部)记载西红花味甘、性平、归心、肝经；能活血化瘀，凉血，解毒，解郁安神；用于经闭癥瘕，产后瘀阻，温毒发斑，忧郁痞闷，惊悸发狂等疾病。

西红花的生长为二段式，即球茎田间繁育和球茎室内开花。当年5月收获的西红花球茎平摊于培育室内培育，11月上中旬将采花后的球茎抹去侧芽种植于大田，到次年5月份新球茎起挖为田间球茎繁育；侧芽作丢弃处理。生产上一直利用采花后球茎繁种，繁殖系数低，年繁殖率一般为1.5～2倍。此外多年种植，球茎病害严重，导致西红花种质退化、品质下降，这些因素严重阻碍了良种推广，影响了西红花药材产业的发展。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种西红花侧芽繁育球茎的培养法，采用该方法能获得大量的西红花球茎。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种西红花侧芽繁育球茎的培养法，依次包括以下步骤：

1)、将收获的西红花球茎(无病斑、无虫瘿、完整且健壮饱满的西红花球茎)平摊于培育室内，球茎主芽朝上，培育室的温度保持在22℃～30℃，相对湿度70％～85％；

待球茎的芽原基萌发且发育生长成长度≥13cm的侧芽时，掰下球茎上的侧芽；

2)、把侧芽的基部(即，靠近球茎处)浸泡于促根生长液中；所述促根生长液为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis ZJU-C612-1(CCTCC NO：M 2018311)的发酵液；

3)、将步骤2)所得的基部沾有促根生长液的侧芽扦插到球茎繁育基质上，种植(常规种植)直至收获球茎(一般为次年5月上中旬)。

该常规种植法，可参照《西红花、菊米全程标准化操作手册》，2016年，浙江科学技术出版社。

作为本发明的西红花侧芽繁育球茎的培养法的改进：步骤2)中促根生长液的制备方法为：挑贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis ZJU-C612-1(CCTCC M 2018311)的一个单菌落接种到1mL的LB液体培养基中，置于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养箱中培养(12±0.5)h作为菌种，将菌种以1％接种量(体积比)接种到LB液体培养基(新的LB液体培养基)中，于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养(24±1)h，得促根生长液。

作为本发明的西红花侧芽繁育球茎的培养法的进一步改进：所述步骤3)中，浸泡于促根生长液的侧芽基部的长度为0.5～1.0cm，浸泡时间为5～10分钟。

作为本发明的西红花侧芽繁育球茎的培养法的进一步改进：所述步骤1)中的掰下侧芽，是指将侧芽连同该侧芽基部的生长点一体掰下。

作为本发明的西红花侧芽繁育球茎的培养法的进一步改进，步骤3)中的球茎繁育基质的制备方法为：

先将泥炭、蛭石、珍珠岩按照2:1:1的体积比混匀，然后添加有机肥，得到球茎繁育基质；所述球茎繁育基质中总养分(以N+P₂O₅+K₂O计)2.2～4.0％；具体为：全氮(以N计)1.2～2.0％，全磷(以P₂O₅计)0.4～1.0％，全钾(以K₂O计)，0.6～1.5％。

上述含量均是相对于球茎繁育基质总重而言。

作为本发明的西红花侧芽繁育球茎的培养法的进一步改进，所述步骤3)为：将步骤2)所得的基部沾有促根生长液的侧芽扦插到球茎繁育基质上，置于大棚内避雨栽培；种植(常规种植)直至等到次年5月西红花植株叶片枯黄后，收获球茎。

Bacillus velezensis ZJU-C612-1(CCTCC NO：M 2018311)在申请号：2018107910364的发明专利中《多花黄精内生细菌菌株ZJU-C612-1及其应用》有明确告知。

在本发明的步骤1)中，西红花开花时(一般都是10月中下旬到11月上旬)，此时侧芽也发育成不同长度(绝大部分侧芽的长度能超过13cm)，收获花丝后，选择长度≥13cm的侧芽，进行后续的步骤2)，对不符合长度条件的侧芽可作废弃处理。对上述掰下侧芽后的球茎仍然可按照常规方式进行繁育。

过短的侧芽扦插成活率低，而将长度≥13cm的侧芽继续留在球茎母体上生长直至获得更长的侧芽，不会增加该侧芽的扦插成活率；且还会消耗球茎母体的营养，影响母体球茎繁育子代球茎。

本发明的西红花的侧芽繁育球茎的培养法，属于一种利用西红花球茎上大量侧芽繁育球茎的方法，球茎会萌发大量的侧芽，目前的生产实际中往往采用把侧芽都抹去的方法来繁育球茎，从而浪费了大量的侧芽材料。在本发明的方法中，将西红花生产上掰下的废弃的侧芽作为材料，培育成球茎，大大扩大了球茎繁育母本，为获得大量球茎提供了物质保障；繁种母本材料的拓宽，为育球茎茎和生产球茎的繁育体系提供了技术支撑，有助于提高西红花球茎的品质，提升花丝的产量和质量。所以，本发明的西红花的侧芽繁育球茎的培养法，是一种高效、快速提供优质西红花球茎的方法，可以加速良种推广速度，提高田间种植产量。

本发明具有如下技术优势：

1、本发明基于芽原基发育成侧芽、侧芽具有发育成完整植株的原理，把西红花生产上掰下的废弃的侧芽作为材料，培育成球茎，大大扩大了球茎繁育母本，为获得大量球茎提供了物质保障。

2、繁种母本材料的拓宽，为育球茎和生产球茎的繁育体系提供了技术支撑，有助于提高西红花球茎的品质，提升花丝的产量和质量。

综上所述，本发明建立的西红花的侧芽繁育球茎的培养法将为西红花良种工厂化球茎繁育提供理论依据和技术支撑。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1、一种西红花的侧芽繁育球茎的培养法，依次进行以下步骤：

1)、当年的5月，西红花球茎收获后，将无病斑、无虫瘿、完整且健壮饱满的西红花球茎平摊到匾上，球茎主芽朝上，培育室的温度保持在22℃～30℃，相对湿度70％～85％；

培育直至西红花开花(一般都是10月中下旬到11月上旬)，此时球茎的芽原基萌发且发育生长成不同长度的侧芽(绝大部分侧芽的长度能超过13cm)，收获花丝后，掰下球茎上的侧芽(是指将侧芽连同该侧芽基部的生长点一体掰下，即，轻轻摇动侧芽，连基部生长点一起掰下，从而实现掰下球茎上的整个侧芽)；选择长度≥13cm的侧芽(此时侧芽的长度约为13～16cm)，进行后续的步骤2)，对不符合长度条件的极少数的侧芽可作废弃处理。

对上述掰下侧芽后的球茎仍然可按照常规方式进行繁育。

2)、把侧芽基部浸泡于促根生长液中：

浸泡于促根生长液的侧芽基部的长度为0.5～1.0cm，浸泡时间为7～8分钟。

促根生长液为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis ZJU-C612-1(CCTCC NO：M2018311)的发酵液，该促根生长液的制备方法为：挑贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensisZJU-C612-1(CCTCC M 2018311)的一个单菌落接种到1mL的LB液体培养基中，置于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养箱中培养12h作为菌种，将菌种以1％接种量(体积比)接种到新的LB液体培养基中，于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养24h，得促根生长液。

1％接种量，即，菌种：LB液体培养基＝1:100的体积比。

3)、将浸泡后的侧芽(基部沾有促根生长液的侧芽)扦插在生长基质框中并置于大棚内避雨栽培；直至次年5月等植株叶片枯黄后，收获球茎。

将泥炭、蛭石、珍珠岩按照体积比2:1:1的比例混匀，添加有机肥，把球茎繁育基质的各指标调整到总养分(以N+P₂O₅+K₂O计)3.5％，其中全氮(以N计)1.2％，全磷(以P₂O5计)1.0％，全钾(以K₂O计)，1.3％。经检测：容重0.6g.cm^-3,总孔隙度75.0％，pH值6.8，电导率(EC)≤2.0mS.cm^-1。

在本发明中，没有详细告知的，均属于常规种植法，可参照《西红花、菊米全程标准化操作手册》，2016年，浙江科学技术出版社。

实施例1所得结果：侧芽扦插成活率高达85％，球茎收获后，单个球茎重量平均为：2.5±0.3克。

侧芽扦插成活率＝成活侧芽数量/扦插侧芽总数×100％。

对比例1-1、选用长度为6cm的侧芽进行后续的步骤2)和3)，其余等同于实施例1。

所得结果：6cm侧芽扦插成活率0％。

对比例1-2、选用长度为10cm的侧芽进行后续的步骤2)和3)，其余等同于实施例1。

所得结果：10cm左右侧芽扦插成活率36％，球茎收获后，单个球茎重量平均为：0.28±0.02克。

对比例1-3、将实施例1步骤2)中的“侧芽连同该侧芽基部的生长点一体掰下”改成“掰下不带有基部生长点的侧芽”，其余等同于实施例1。

所得结果：侧芽扦插成活率0。

对比例1-4、将实施例1步骤3)中的“置于大棚内避雨栽培”改成“置于露天栽培”；其余等同于实施例1。

所得结果：露天栽培，成活率为45％，球茎收获后，单个球茎重量平均为：0.46±0.02克。

对比例1-5、取消实施例1的步骤2)，即，将步骤1)所得的侧芽直接扦插到球茎繁育基质上，其余等同于实施例1。

所得结果：侧芽扦插成活率60％，球茎收获后，单个球茎重量平均为：0.62±0.1克。

对比例1-6、将实施例1步骤2)的促根生长液由贝莱斯芽孢杆菌的发酵液改成饮用水；其余等同于实施例1。

所得结果：侧芽扦插成活率62％，球茎收获后，单个球茎重量平均为：0.66±0.1克。

注：在发明过程中，还曾使用了多种常规的生根液替代本发明的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis ZJU-C612-1(CCTCC NO：M 2018311)的发酵液进行如同实施例1的实验，但是最终所得的结果为成活率为62～70％，球茎收获后，单个球茎重量平均为0.8～1.2克；远不如本发明的效果。

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims

1.西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是依次包括以下步骤：

1)、将收获的西红花球茎平摊于培育室内，球茎主芽朝上，培育室的温度保持在22℃～30℃，相对湿度70％～85％；

2)、把侧芽的基部浸泡于促根生长液中；所述促根生长液为贝莱斯芽孢杆菌Bacillusvelezensis ZJU-C612-1(CCTCC NO：M 2018311)的发酵液；

3)、将步骤2)所得的基部沾有促根生长液的侧芽扦插到球茎繁育基质上，种植直至收获球茎。

2.根据权利要求1所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是：

步骤2)中促根生长液的制备方法为：挑贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis ZJU-C612-1的一个单菌落接种到1mL的LB液体培养基中，置于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养箱中培养(12±0.5)h作为菌种，将菌种以1％接种量接种到LB液体培养基中，于(37±0.5)℃，(200±20)r/min振荡培养(24±1)h，得促根生长液。

3.根据权利要求1或2所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是步骤2)：浸泡于促根生长液的侧芽基部的长度为0.5～1.0cm，浸泡时间为5～10分钟。

4.根据权利要求3所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是：所述步骤1)中的掰下侧芽，是指将侧芽连同该侧芽基部的生长点一体掰下。

5.根据权利要求1～4任一所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是所述步骤3)中的球茎繁育基质的制备方法为：先将泥炭、蛭石、珍珠岩按照2:1:1的体积比混匀，然后添加有机肥，得到球茎繁育基质；所述球茎繁育基质中总养分(以N+P₂O₅+K₂O计)2.2～4.0％。

6.根据权利要求5所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是：所述球茎繁育基质中，全氮(以N计)1.2～2.0％，全磷(以P₂O₅计)0.4～1.0％，全钾(以K₂O计)，0.6～1.5％。

7.根据权利要求1～6任一所述的西红花侧芽繁育球茎的培养法，其特征是所述步骤3)为：将步骤2)所得的基部沾有促根生长液的侧芽扦插到球茎繁育基质上，置于大棚内避雨栽培；种植直至等到次年5月西红花植株叶片枯黄后，收获球茎。