CN110272891B

CN110272891B - 餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN110272891B
Application number: CN201910434256.6A
Authority: CN
Inventors: 薛亚平; 刘奇; 郑裕国; 邹树平; 柯霞; 周海岩; 柳志强
Original assignee: Zhejiang University of Technology ZJUT
Current assignee: Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date: 2019-05-23
Filing date: 2019-05-23
Publication date: 2020-09-29
Anticipated expiration: 2039-05-23
Also published as: CN110272891A

Abstract

本发明公开了一种餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用，该菌剂的组分为复合菌体5～15份；载体50～150份；粘合剂1～3份；保护剂1～5份；复合菌体由质量比为1～15:0.5～10的克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB‑091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB‑092混合而成；载体为小麦秸秆。本发明采用克鲁维毕赤酵母和林生地霉作为复合菌体，小麦秸秆作为载体，获得的菌剂不仅解餐厨垃圾能力显著增强，而且能够消除降解餐厨垃圾过程中产生的异味，并防止菌剂结块，进而避免菌剂使用过程中因机械粉碎而造成的活菌数降低的问题。

Description

餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及环保生物技术领域，尤其涉及一种餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着我国社会经济的发展和人民生活水平的提高，餐厨垃圾的数量快速增加；这些餐厨垃圾若得不到正确的处理，将成为社会的公害。由于餐厨垃圾容易发酵、变质和腐烂，如果直接大量排入下水道中，餐厨垃圾会产生大量毒素，并散发恶臭气体、污染水体和大气。而由餐厨垃圾派生的“潲水油”或“地沟油”，其中含有致癌物质——黄曲霉素以及其他毒素，对人体健康危害极大，自2011年以来引起了社会群众的积极关注，很多城市已经积极立法或者严厉打击熬炼“地沟油”的行为。此外，由餐厨垃圾派生的“垃圾猪”、“垃圾羊”、“非洲猪瘟”等问题也引起了社会的极大关注，餐厨垃圾的有效治理任重道远。

专利申请号为201310421477.2的专利申请公开了一种餐厨垃圾分解菌剂及其制备方法与应用。该发明所提供的餐厨垃圾分解菌剂，由以下重量份数的各物质混合而成：枯草芽孢杆菌30～50份、酿酒酵母10～30份、米曲霉10～30份、绿色木霉10～30份、黑曲霉10～30份。该发明将枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、米曲霉、绿色木霉、黑曲霉的菌种进行高密度培养，再进行扩大培养，最后将培养得到的各单一菌体制备成干燥的菌粉，根据其用途采用合理配比，混合得到餐厨垃圾分解菌剂。

专利申请号为201610041697.6的专利申请公开了一种餐厨垃圾高效降解复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂由复合菌体和载体组成，所述复合菌体由东方伊萨酵母菌、枯草芽孢杆菌、异常威克汉姆酵母菌、黒木霉及放线菌混合组成，所述载体由豆粕、麸皮、稻壳粉、刨花组成，将所得的复合菌体与所得的载体混合，制得复合微生物菌剂。

专利申请号为201410468958.3的专利申请提供了一种耐盐的餐厨垃圾处理复合菌剂，所述复合菌剂由复合菌体和载体辅料组成，所述复合菌体包括基础处理菌体，所述基础处理菌体由枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和酿酒酵母所组成，其中，基础处理菌体中枯草芽孢杆菌占总活菌数的30～65％，凝结芽孢杆菌占总活菌数的20～65％，酿酒酵母占总活菌数的5～50％；复合菌剂的制备方法步骤如下：(1)对复合菌剂中的各种菌分别进行单独菌种培养，再通过离心收集将获得的菌体混合，制成湿粉状复合菌体；(2)将载体辅料各组份混合制成载体辅料；(3)取步骤1所得的湿粉状复合菌体和步骤2所得的载体辅料混合制得复合菌剂，所述湿粉状复合菌体与载体辅料的重量比为(0.8～1.3)：1，将复合菌剂烘干至水分含量为15％，然后再抽真空包装。

尽管上述专利申请都提供了餐厨垃圾降解菌剂的微生物菌株配方，但是上述菌株均没有涉及消除降解餐厨垃圾过程中异味的问题，造成降解产物的臭味非常明显。

此外，有部分专利申请在菌剂的制备方法中通过采用载体作为固定化材料以提高菌剂的稳定性和保质期；但是，大部分的载体在与菌体混合烘干后，都会出现结块问题，所以在菌剂使用时都需要进行机械粉碎，而机械粉碎的过程中会使部分菌体失活，从而降低菌剂中的活菌数。

因此，有必要筛选降解餐厨垃圾能力强且除臭效果显著的优势菌株，以解决降解产物臭味明显的问题，并改进菌剂的配方以解决载体结块问题，从而提高菌剂整体的品质和保质期。

发明内容

本发明提供了一种餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用，该无臭型改良微生物菌剂不仅解餐厨垃圾能力强，而且能够消除降解餐厨垃圾过程中产生的异味，并防止菌剂结块，进而避免菌剂使用过程中因机械粉碎而造成的活菌数降低的问题。

具体技术方案如下：

一种餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂，由以下质量份数的组分组成，

所述复合菌体由质量比为1～15:0.5～10的克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092混合而成；

所述克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019263，保藏时间为2019年4月17日；

所述林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019264，保藏时间为2019年4月17日；

所述载体为小麦秸秆；

所述粘合剂为海藻酸钠、聚乙烯醇中的至少一种；

所述保护剂为海藻糖、糖蜜中的至少一种。

本发明的创新之处在于：将克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092进行混合制得复合菌体，并配合特定的小麦秸秆载体，不仅解餐厨垃圾能力显著增强，而且能够消除降解餐厨垃圾过程中产生的异味，并防止菌剂结块，进而避免菌剂使用过程中因机械粉碎而造成活菌数降低。

此外，载体虽然对菌体也有一定的保护作用，但是若没有添加保护剂，制备过程的干燥等操作中也会造成大量菌体失活，而且没有添加保护剂，也不利于菌剂长时间保存。添加粘合剂使菌体与载体之间结合的更紧密，提高载体对菌体的保护作用。

作为优选，所述克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092的质量比为1～10:0.5～5。

进一步地，所述粘合剂由质量比为1～5∶1～5的海藻酸钠和聚乙烯醇组成。

进一步地，所述保护剂由质量比为1～5∶1～5的海藻糖、糖蜜组成。

经检测，本发明提供的无臭型改良微生物菌剂中活菌数大于1000亿CFU/g。

本发明还提供了一种所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)分别将克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichumsilvicola)ZJB-092进行发酵培养，离心得到菌体，再将克鲁维毕赤酵母(Pichiakluyveri)菌体和林生地霉(Geotrichum silvicola)菌体按比例混合，得到复合菌体；

(2)载体经粉碎、过筛后，与复合菌体、保护剂、粘合剂进行混合，烘干后，得到无臭型改良微生物菌剂。

其中，步骤(1)中，所述克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091进行发酵培养的培养基配方为：蛋白胨5g/L、酵母膏3g/L、葡萄糖5g/L、动植物油15g/L、氯化钠5g/L；发酵培养的条件为：温度30～32℃，发酵罐搅拌培养，转速150～180rpm，时间60～80h；所述林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092进行发酵培养的培养基配方为：蔗糖5g/L、动植物油20g/L、硝酸钠5g/L、氯化钾0.5g/L、硫酸二氢钾1g/L硫酸镁0.5g/L；发酵培养的条件为：温度28～30℃，发酵罐搅拌培养，转速150～220rpm，时间1～5天。

作为优选，载体粉碎后的粒径为100～300目。

步骤(2)中，烘干至水分含量为10～20％后，再抽真空包装，得到可以销售的无臭型改良微生物菌剂。

本发明还提供了所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂在处理餐厨垃圾中的应用。

本发明还提供了一种利用所述餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂处理餐厨垃圾的方法，包括：

将所述无臭型改良微生物菌剂加入至待处理的餐厨垃圾中，进行发酵处理；

所述无臭型改良微生物菌剂与待处理的餐厨垃圾的质量比为0.1～0.5:50；所述发酵处理的温度为45～65℃，时间为24～30h；在发酵处理过程中，进行搅拌，搅拌频率为每搅拌25min暂停5min。

进一步地，所述餐厨垃圾的中水的质量百分含量为60％～85％。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明采用克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092作为复合菌体，小麦秸秆作为载体，获得的无臭型改良微生物菌剂不仅解餐厨垃圾能力显著增强，而且能够消除降解餐厨垃圾过程中产生的异味，并防止菌剂结块，进而避免菌剂使用过程中因机械粉碎而造成的活菌数降低的问题。

(2)本发明无臭型改良微生物菌剂的菌种较少，在保证降解效果的情况下减少了生产成本。

(3)本发明无臭型改良微生物菌剂添加了保护剂，减少了菌剂在干燥过程和保藏过程中的菌体失活数量，使单位菌剂有效活菌数含量提高(大于1000亿CFU/g)，处理降解餐厨垃圾时用量少，成本低，使用方便，分解效果好。

(4)本发明无臭型改良微生物菌剂采用小麦秸秆作为载体，不仅在确保与微生物菌体的结合强度，延长菌剂保质期，而且使得载体在干燥后不会结块，减少了干燥结块后粉碎过程中活菌的损失数量。

(5)本发明无臭型改良微生物菌剂添加了粘合剂，能够增强菌体与载体之间的结合强度，使后期处理菌体不易与载体脱离，增强了载体对菌体的保护作用，延长了菌剂保质期。

附图说明

图1为克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091正面(A)、背面(B)和光学显微镜40×10倍下的菌株形态(C)。

图2为克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091的基于18s rDNA序列同源性构建的系统发育树。

图3为林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092在培养皿中正面(A)、背面(B)和光学显微镜10×10倍下的菌株形态(C)。

图4为林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092的基于18s rDNA序列同源性构建的系统发育树。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，以下列举的仅是本发明的具体实施例，但本发明的保护范围不仅限于此。

实施例1餐厨垃圾降解优势菌的筛选与鉴定

取浙江工业大学毓秀餐厅附近的土样5g加入到已灭菌的带有小玻璃珠和50mL无菌水的锥形瓶中，30℃，200r/min震荡20min，于超净台中进行菌悬液梯度稀释，浓度梯度为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7，吸取100μL各浓度的菌悬液接种于PDA平板上，用封口膜将平板封口后倒置，放于28～37℃恒温培养箱中培养24～48h，选择菌落数合适的平板，挑取典型菌落，分离纯化后，分别接种至蛋白质、淀粉、脂肪、纤维素鉴别培养基平板并用已灭菌过的涂布棒涂布均匀，将培养皿用封口膜封口后倒置放于28～37℃恒温培养箱中培养48～37h，观察溶菌圈的直径和菌落直径比。选取菌圈较大的菌株，分别接种至PDA液体培养基，培养24h后，取适量菌液用30％的甘油保藏于-80℃冰箱里；取部分菌液进行形态学、生理生化和分子鉴定。

用FastDNA^TM Spin Kit for Soil试剂盒提取菌株基因组DNA，以此为模板，进行PCR扩增，扩增引物为真菌通用引物：

ITS1 5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’

ITS4 5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’

PCR程序：在95℃进行预变性5min；95℃40s，55℃30s，72℃2min，30个循环延伸；72℃10min。

由上海尚亚生物技术有限公司进行PCR产物测序，其18s rDNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

将获得的DNA序列，输入GenBank，用Blast程序与数据库中的所有序列进行比对，选择合适的DNA序列建立系统发育树(具体见图2和图4)；再结合形态、生理生化鉴定结果，确定筛选所得的菌株分别为克鲁维毕赤酵母和林生地霉，分别命名为克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092。

取克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091菌液在PDA固体培养基上划线，28℃培养24h，结果如图1(A)和(B)所示；将培养好的克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091制片，用光学显微镜40×10倍下的菌株形态(C)。

取林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092菌液在PDA固体培养基上划线，28℃培养24h，结果如图3(A)和(B)所示；将培养好的林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092制片，用光学显微镜观察结果如图3(C)所示。

克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichumsilvicola)ZJB-092均已在中国典型培养物保藏中心进行保藏；具体信息如下：

(1)克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091：

保藏编码：CCTCC NO：M 2019263；

保藏时间：2019年4月17日；

(2)林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092：

保藏编码：CCTCC NO：M 2019264；

保藏时间：2019年4月17日；

中国典型培养物保藏中心CCTCC的地址为：湖北省武汉市洪山区珞珈山街道八一路武汉大学中国典型培养物保藏中心。

上述方法中涉及的培养基成分如下：

PDA固体培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1L、pH自然；

PDA液体培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、水1L、pH自然；

蛋白质鉴别培养基：脱脂奶粉50g、可溶性淀粉10g、酵母提取物5g、KH₂PO₄1g、MgSO₄·7H₂O0.2、琼脂20g、水1L、pH7.0；

淀粉鉴别培养基：蛋白胨10g、可溶性淀粉2g、牛肉膏5g、NaCl5g、琼脂20g、水1L、pH7.0-7.2；

脂肪鉴别培养基：蛋白胨10g、K₂HPO₄ 1g、MgSO₄·7H₂O0.5、聚乙烯醇1.2、维多利亚蓝B0.04、橄榄油10g、琼脂20g、水1L、pH8.0；

纤维素鉴别培养基：K₂HPO₄ 0.5、MgSO₄·7H₂O0.2、CMC-Na2g、刚果红0.2g、琼脂16g、明胶2g、水1L、pH7.0。

实施例2微生物菌剂的制备

1、未改良的微生物菌剂的制备

(一)制备复合菌体

(1)斜面培养：

分别将克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和取林生地霉(Geotrichumsilvicola)ZJB-092接种在PDA固体培养基；

其中，林生地霉在30℃温度下培养48h，克鲁维毕赤酵母在28℃温度下培养72h，进行菌株的活化。

(2)一级种子液培养：

将步骤(1)所得的活化后的克鲁维毕赤酵母和林生地霉分别接种于250mL液体培养基，进行种子培养，得到克鲁维毕赤酵母一级种子液培养和林生地霉一级种子液培养；

其中，林生地霉在30℃温度下培养48h，克鲁维毕赤酵母在28℃温度下培养72h。

(3)发酵罐培养：

将步骤(2)所得的克鲁维毕赤酵母一级种子液培养和林生地霉一级种子液培养分别接种到10L发酵罐的液体培养基中进行发酵培养，得到克鲁维毕赤酵母发酵液和林生地霉发酵液；

克鲁维毕赤酵母的液体培养基配方：蛋白胨5g/L、酵母膏3g/L、葡萄糖5g/L、动植物油15g/L、氯化钠5g/L。

林生地霉的液体培养基配方：蔗糖5g/L、动植物油20g/L、硝酸钠5g/L、氯化钾0.5g/L、硫酸二氢钾1g/L硫酸镁0.5g/L。

(4)将步骤(3)所得的克鲁维毕赤酵母发酵液和林生地霉发酵液分别离心，收集得到各类菌体，按1∶1的质量比混合制成复合菌体。

(二)制备载体

将小麦秸秆粉碎为200目的颗粒。

(三)制备菌剂

将复合菌体、载体按重量比为1∶1进行混合。将混合后的湿菌剂使用震荡流化床40℃烘干至水分含量为15％的粉末状菌剂；干燥菌体约占菌剂重量的10％；所述克鲁维毕赤酵母和林生地霉在复合菌剂中的活菌含量为依次为5×10⁹CFU/g、5×10⁹CFU/g。

2、无臭型改良微生物菌剂I的制备

(一)制备复合菌体

按第1部分的培养方式对各菌种单独培养，然后离心收集菌体，并按以下质量份混合制成湿粉状复合菌体，克鲁维毕赤酵母和林生地霉的质量比为1：1。

(二)制备载体

将小麦粉碎为200目的颗粒。

(三)制备保护剂

将重量比为1∶1的海藻糖、糖蜜进行混合，得到保护剂。

(四)制备粘合剂

将重量比为1∶1的海藻酸钠、聚乙烯醇进行混合，得到粘合剂。

(五)制备菌剂

将菌体、载体、粘合剂和保护剂按重量比为5∶50∶1∶1进行混合。将混合后的湿菌剂使用震荡流化床40℃烘干至水分含量为15％的粉末状菌剂。干燥菌体约占菌剂重量的10％。所述克鲁维毕赤酵母和林生地霉在复合菌剂中的活菌含量为依次为5×10¹⁰CFU/g、5×10¹⁰CFU/g。

3、无臭型改良微生物菌剂II的制备本例为改良后菌剂的制备例。

(一)制备复合菌体

按第1部分的培养方式对各菌种单独培养，然后离心收集菌体，并按以下质量份混合制成湿粉状复合菌体，克鲁维毕赤酵母和林生地霉的质量比为2：1。

(二)制备载体

将小麦秸秆粉碎为300目的颗粒。

(三)制备保护剂

将重量比为1∶5的海藻糖、糖蜜进行混合，得到保护剂。

(四)制备粘合剂

将重量比为1∶3的海藻酸钠、聚乙烯醇进行混合，得到粘合剂。

(五)制备菌剂

将菌体、载体、粘合剂和保护剂按重量比为15∶150∶3∶5进行混合。将混合后的湿菌剂使用震荡流化床40℃烘干至水分含量为15％的粉末状菌剂。干燥菌体约占菌剂重量的10％。所述克鲁维毕赤酵母和林生地霉在复合菌剂中的活菌含量为依次为7×10¹⁰ CFU/g、3×10¹⁰ CFU/g。

实施例3

本实施例为采用实施例2制得的不同微生物菌剂对餐厨垃圾进行降解试验：

(1)取学校食堂餐厅中剩下的饭菜，进行分拣，去除骨头、纸屑、木筷、塑料等固体垃圾；

(2)向垃圾处理机中加入15kg分拣后的餐厨垃圾，取实施例2制得的微生物菌剂(分别为未改良的微生物菌剂、无臭型改良微生物菌剂I和无臭型改良微生物菌剂II)900g放进垃圾处理机里，继续发酵24h后，然后每隔一天加入10kg上述餐厨垃圾，连续10天，加入的总的餐厨垃圾与微生物菌剂的重量比大约为130∶1；

发酵温度为55℃，时间为28h；在发酵处理过程中，进行搅拌，搅拌频率为每搅拌25min暂停5min；餐厨垃圾中水的质量百分含量具体为80％；

(3)将某市售菌剂A和某市售菌剂B分别置于垃圾降解处理机内按照步骤(2)进行降解试验；平行3组。

(4)测定垃圾降解率

降解处理结果(垃圾降解率)以重量减量效率来体现：

餐厨垃圾降解率计算采用以下公式进行：降解率＝(A-B)/A×100％。其中，A表示餐厨垃圾、复合菌剂投入后的总重量；B表示餐厨垃圾、复合菌剂处理后的总重量。

以未改良的微生物菌剂为例，10后加入的餐厨垃圾总重量为115kg(A)，10天后再称量垃圾机和菌剂及剩余餐厨垃圾的总重量为16.91kg(B)。根据公式计算出垃圾机运行10天后的垃圾重量平均减量效率为84.3％。

(5)活菌数测定：使用稀释涂布平板法测定实施例2中的三种菌剂和市售菌剂的单位干菌剂的活菌数。

(6)气味检测：先通过嗅觉感受餐厨垃圾降解过程中产生的气体，判断有无臭气；再收集气体利用四合一气体检测仪，检测氨气和硫化氢的含量，ppm与mg/m³的转换公式：ppm＝(22.4×mg/m³)/所测气体分子量氨气的分子量为17.031，硫化氢的分子量为34.08。

表1气味阈值强度分级表

等级	强度	说明
			0	-	无臭味
1	+	气味较弱，无法辨别气体强度和种类
			2	++	能判断哪种气味
3	+++	明显闻到气味
			4	++++	较强气味
5	+++++	强烈气味，但能接受
			6	++++++	强烈气味，但不能接受

采用实施例2中制得的三种菌剂和市售菌剂对餐厨垃圾进行降解试验，结果如表2所示。

表2实施例2中制备好的三种菌剂和市售菌剂活菌数及其对餐厨垃圾降解结果测定

实施例4载体的筛选

菌剂制备过程需要烘干这一操作，但是一般的载体烘干后会形成结块，粉碎结块菌剂的时候机械的作用会导致大量菌体失活，因此需要筛选一些干燥后不结块的载体。

本实验将玉米秸秆、小麦秸秆、花生秸秆、大豆秸秆等载体制备成为菌剂(除载体替换外，其余步骤与实施例2中无臭型改良微生物菌剂I的制备方法相同)，放置与37℃的烘箱中烘干，测定烘干后载体的结块情况。最终发现只有小麦秸秆不会结块。

结块强度测试：将烘干后的菌剂放置与电子天平上，清零，使用一根针从上至下插入菌剂之中相同的长度，同时记录电子天平的值，取3次平均为最终值。结块强度越强针就越难插入，最终读数就会越大(表3)。

活菌数测定：首先使用稀释涂布平板法测定四种菌剂未干燥的湿菌剂的活菌数，但是因为玉米秸秆、花生秸秆、大豆秸秆烘干后会结块，所以需要粉碎为200目的粉末状菌剂，最后使用稀释涂布平板法测定四种载体制备好的菌剂的活菌数；最后发现小麦秸秆因为不结块所以没有粉碎这一步骤最终损失率为0％，而其他3种载体制备的菌剂粉碎后都有较大的活菌损失率。

表3四种秸秆烘干后的结块强度测试和粉碎后活菌损失率

实施例5餐厨垃圾降解后残渣在有机肥料方面的应用

餐厨废弃物中含有丰富的氮、磷、有机物质和其他微量元素，经过处理后可以作为有机肥料适用于上壤促进植物的生长，利用微生物降解餐厨废弃物中的淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素，可以减少有机物含量，同时释放出N、P、K和微量元素等作物所必需的生长元素，并提高pH值、总氮、发芽率。

本实验探索了将降解后的餐厨废弃物残渣加工成有机肥的可行性，主要研究了将降解后的残渣加工成的有机肥粗品对黄瓜种子发芽指数的影响，评价其对黄瓜种子的生态毒性。

有机肥来源：实施例3中无臭型改良微生物菌剂I降解餐厨废弃物的残渣加工而成；

有机肥提取液的配制方法:称取30g自制有机肥，加入60ml去离子水(1:2)，摇床150rpm震荡浸泡3h，用定量滤纸过滤残渣，取滤液，定容至90ml。

种子发芽指数的测定方法:将上述浸提液用去离子水制备成0％(蒸馏水)、20％、40％、70％、100％(仅为提取液)5个稀释水平，每个水平设3个重复，每个重复溶液20ml，将其转移至直径为9cm，并铺有多层定性滤纸的培养皿中，每个培养皿中均匀分布20粒大小一致、籽粒饱满的黄瓜种子。将其放置在25℃恒温光照培养箱中，在96h测定发芽率和根长(表4)，发芽率指数采用以下公式计算：

表4不同浓度有机肥提取液对黄瓜发芽的影响

提取液浓度	0％	20％	40％	70％	100％
						发芽率	81％	94％	73％	60％	31％
发芽指数	100％	132％	81％	55％	19％

。

序列表

<110> 浙江工业大学

<120> 餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂及其制备方法和应用

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 449

<212> DNA

<213> 克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)

<400> 1

cttccgtagg gtgaacctgc ggaaggatca ttactgtgat ttatatctta tacacatgcg 60

tgagcgcacc aaacacctaa aattgtaata ccaccagtca gtaagtttta acaaaacaaa 120

actttcaaca acggatctct tggttctcgc atcgatgaag agcgcagcga aatgcgatac 180

ctagtgtgaa ttgcagccat cgtgaatcat cgagttcttg aacgcacatt gcgccccatg 240

gtattccatg gggcatgcct gtctgagcgt cgtttccttc ttgcgcaagc agagttgaga 300

acaggctatg cctttttcga aatggaacgt cgtggacgaa gtgaactaaa tttttagcac 360

gctttggccg ccgaactttt aactaagctc gacctcagat caggtaggaa tacccgctga 420

acttaagcat atcaataagc ggaggaaaa 449

<210> 2

<211> 375

<212> DNA

<213> 林生地霉(Geotrichum silvicola)

<400> 2

cttccgtagg tgaacctgcg gaaggatcat taagaattat aaatatttgt gaaatttaca 60

cagcaaacaa taattttata gtcaaaacaa aaataatcaa aacttttaac aatggatctc 120

ttggttctcg tatcgatgaa gaacgcagcg aaacgcgata tttcttgtga attgcagaag 180

tgaatcatca gtttttgaac gcacattgca ctttggggta tcccccaaag tatacttgtt 240

tgagcgttgt ttctctcttg gaattgcatt gcttttctaa aatttcgaat caaattcgtt 300

tgaaaaacaa cactattcaa cctcagatca agtaggatta cccgctgaac ttaagcatat 360

caataagcgg aggaa 375

<210> 3

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 3

tccgtaggtg aacctgcgg 19

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 4

tcctccgctt attgatatgc 20

Claims

1.餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂，其特征在于，由以下质量份数的组分组成，

所述载体为小麦秸秆；

所述粘合剂由质量比为1～5∶1～5的海藻酸钠和聚乙烯醇组成，

所述保护剂由质量比为1～5∶1～5的海藻糖和糖蜜组成。

2.如权利要求1所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂，其特征在于，所述克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)ZJB-091和林生地霉(Geotrichum silvicola)ZJB-092的质量比为1～10:0.5～5。

3.如权利要求1所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂，其特征在于，活菌数大于1000亿CFU/g。

4.一种如权利要求1～3任一项所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂的制备方法，其特征在于，载体粉碎后的粒径为100～300目。

6.如权利要求1～3任一项所述的餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂在处理餐厨垃圾中的应用。

7.一种利用权利要求1～3任一项所述餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂处理餐厨垃圾的方法，其特征在于，包括：

8.如权利要求7所述的利用所述餐厨垃圾处理的无臭型改良微生物菌剂处理餐厨垃圾的方法，其特征在于，所述餐厨垃圾的中水的质量百分含量为60％～85％。