CN110251526A - 芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，根据芍药苷对耐亚胺培南和美罗培南人源肺炎克雷伯菌具有较好的体外杀灭作用，能够抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的生长，且最低杀菌浓度为2mg/mL，最小抑菌浓度为1.15mg/mL，本发明提出了芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的抑制作用。本发明可有效缓解或解决耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药感染问题，降低病死率，为抑制人源耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌提出新的思路，具有重要的实践意义。
Description
技术领域
本发明属于中药有效成分应用技术领域，涉及芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用。
背景技术
肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae，KP)广泛分布于自然界，属于克雷伯菌属的亚种之一，是常见的革兰氏阴性条件致病菌。本菌为兼性厌氧菌，无鞭毛，无动力。有较厚的荚膜。多数菌株有菌毛。营养要求不高，在普通培养基上生长的菌落大，呈粘液状，相互融合，以接种环挑之易拉成丝。其可引起患者泌尿系统感染、呼吸道以及消化系统感染等。
近十年来，随着我国临床中新型抗菌药物的种类不断增多以及药物研发速度的加快，再加上青霉素与碳青霉烯类抗菌药的大量使用，使得众多耐药菌株产生，并不断发生着变化。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性不断增强，其耐药性可能与产生抗生素水解酶、生物被膜形成、外膜孔蛋白缺失等机制有关。并且该耐药菌的出现加剧了各种难治性感染，使治疗十分棘手。而碳青霉烯类抗生素往往是控制KP感染的最后选择药物，不同地区的肺炎克雷伯菌耐药性存在差异，耐药形势更加严峻。因此,设法寻求新的抑制肺炎克雷伯菌的有效抗菌药物迫在眉睫。
芍药苷作为赤芍的有效成分之一，国内外对其在扩张血管、镇痛镇静和抗炎抗溃疡活性方面都有一定的研究，但是暂时没有关于芍药苷抑制细菌生长方面报道。
发明内容
本发明解决的目的在于提供芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，从现存的药用植物资源库入手，挖掘潜在的耐药菌抑制剂，为开发新型抗生素替代物和解决耐药肺炎克雷伯菌的多重耐药困境提供实践基础。
本发明是通过以下技术方案来实现：
芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用。
进一步的，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌为人源肺炎克雷伯菌。
进一步的，肺炎克雷伯菌的耐药性是通过纸片扩散法确定的。
进一步的，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐受的抗生素选自亚胺培南和美罗培南中的多种。
进一步的，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌选自耐亚胺培南和美罗培南的人源肺炎克雷伯菌。
进一步的，芍药苷对所述人源肺炎克雷伯菌的最低杀菌浓度为2mg/mL，最小抑菌浓度为1.15mg/mL。
进一步的，芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌具有体外杀灭作用，以及抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的体外生长。
芍药苷在制备抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物中的应用。
进一步的，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌为人源肺炎克雷伯菌。
进一步的，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌选自对亚胺培南和美罗培南中多种抗生素耐药的人源肺炎克雷伯菌。
与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
本发明基于芍药苷对人源耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的作用的研究，利用芍药苷抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的生长，为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌抑制剂的研究开发和应用提供新的思路，在食品和药品等领域具有广泛的应用价值。
本发明进一步明确了芍药苷对耐抗生素亚胺培南和美罗培南的人源肺炎克雷伯菌耐药性的抑制作用，有效缓解或解决耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药感染问题，降低病死率。
具体实施方式
下面给出具体的实施例。
1、人源肺炎克雷伯菌的药敏实验
本发明以4株人源肺炎克雷伯菌为出发菌株，选用亚胺培南和美罗培南2种常用抗生素的药敏试纸片进行药敏试验。
挑取培养18～24h的纯菌落均匀溶解于2～5mL无菌生理盐水中，调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊。无菌吸取50～200μL菌液，均匀涂布于平板，室温下放置3～5min。用无菌镊子按要求将直径为6mm的药敏纸片紧贴于平板表面，每种药敏片三个平行。将接种好的平板放置于36～37℃下孵育18～24h。用0.02mm精度的游标卡尺测定抑菌圈直径，以抑菌圈的直径来判断药物的敏感性，抑菌结果根据美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定，判定标准见表1。实验结果见表2，结果显示，4组人源肺炎克雷伯菌均可以耐受2种碳青霉烯类抗生素，因此将其作为下一步实验的研究对象。
表1.美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定结果
表2.人源肺炎克雷伯菌的药敏实验中抑菌圈直径结果
注：表中抑菌圈直径的单位为mm，数值均为三个平行的平均值。
由表1和表2可知，芍药苷对耐亚胺培南和美罗培南的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的抑制作用较好。
2、芍药苷对耐药菌株的抑制作用
为了充分考虑用药安全，本发明以芍药苷单一活性成分为研究对象，以多粘菌素作为阳性对照，进行耐药性抑制作用的研究。挑取培养18～24h的纯菌落均匀溶解于2～5mLLB液体培养基中，调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊，并用酶标仪测定其OD600值。用二甲基亚砜配制浓度为30mg/mL的芍药苷作为药液，利用试管二倍稀释法将药液、菌液及LB液体培养基加入96孔培养板中过夜培养，不同浓度的药液组别均为三个平行，确保实验数据的可信度。
利用酶标仪测定芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度。并将最小抑菌浓度下的培养液置于无菌的LB液体培养基中继续培养，利用酶标仪测定芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的最低杀菌浓度，实验结果见表3。
表3.芍药苷和万古霉素对人源耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的抑制结果
由表3可知，芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的MIC为1.15mg/mL，MBC为2mg/mL。
根据以上实验结果，结合中草药解决耐药病原菌的耐药性特点，可通过获得活性单品成分芍药苷，直接针对临床主要的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌发挥抑制作用，可有效缓解或解决耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药感染问题，降低病死率，为抑制人源耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌提出新的思路，具有重要的实践意义。
以上给出的实施例是实现本发明较优的例子，本发明不限于上述实施例。本领域的技术人员根据本发明技术方案的技术特征所做出的任何非本质的添加、替换，均属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用。
2.根据权利要求1所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌为人源肺炎克雷伯菌。
3.根据权利要求1所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述肺炎克雷伯菌的耐药性是通过纸片扩散法确定的。
4.根据权利要求1所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐受的抗生素选自亚胺培南和美罗培南中的多种。
5.根据权利要求1所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌选自耐亚胺培南和美罗培南的人源肺炎克雷伯菌。
6.根据权利要求5所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述芍药苷对所述人源肺炎克雷伯菌的最低杀菌浓度为2mg/mL，最小抑菌浓度为1.15mg/mL。
7.根据权利要求1所述的芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用，其特征在于，所述芍药苷对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌具有体外杀灭作用，以及抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的体外生长。
8.芍药苷在制备抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物中的应用。
9.根据权利要求1所述的芍药苷在制备抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物中的应用，其特征在于，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌为人源肺炎克雷伯菌。
10.根据权利要求1所述的芍药苷在制备抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物中的应用，其特征在于，所述耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌选自对亚胺培南和美罗培南中多种抗生素耐药的人源肺炎克雷伯菌。
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Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN111467469A (zh) * | 2020-05-20 | 2020-07-31 | 广州白云山光华制药股份有限公司 | 小柴胡颗粒联合抗生素在临床上的新用途 |
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-
2019
- 2019-07-22 CN CN201910658739.4A patent/CN110251526A/zh active Pending
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
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| CN111632033A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-08 | 九江学院 | 一种抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物组合物及其制备方法和应用 |
| CN111632033B (zh) * | 2020-06-08 | 2022-02-08 | 九江学院 | 一种抗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物组合物及其制备方法和应用 |
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