CN110215445B - 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用 - Google Patents

香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110215445B
CN110215445B CN201910614506.4A CN201910614506A CN110215445B CN 110215445 B CN110215445 B CN 110215445B CN 201910614506 A CN201910614506 A CN 201910614506A CN 110215445 B CN110215445 B CN 110215445B
Authority
CN
China
Prior art keywords
resistant
enterobacter
vanillic acid
hopcalis
resistance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910614506.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110215445A (zh
Inventor
钱卫东
杨敏
王婷
沈兰芳
刘淼
孙照欢
张家宁
王文静
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shaanxi University of Science and Technology
Original Assignee
Shaanxi University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shaanxi University of Science and Technology filed Critical Shaanxi University of Science and Technology
Priority to CN201910614506.4A priority Critical patent/CN110215445B/zh
Publication of CN110215445A publication Critical patent/CN110215445A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110215445B publication Critical patent/CN110215445B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用,根据香草酸对耐哌拉西林、左氧氟沙星、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素及萘啶酸的多重耐药霍氏肠杆菌具有较好的体外杀灭作用,能够抑制多重耐药霍氏肠杆菌的生长,且最低杀菌浓度为3.2mg/mL,最小抑菌浓度为1.6mg/mL,本发明提出了中药有效成分香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌的抑制作用,在医药领域具有广泛的应用价值。

Description

香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用
技术领域
本发明涉及中药有效成分香草酸作为肠杆菌的抑制剂的应用,具体涉及香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用。
背景技术
霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)属于革兰氏阴性肠道杆菌,是引起人类或动物感染性疾病的主要肠道致病菌,对人或动物均可引起腹泻、肠炎、胃肠道感染等。而且近年来霍氏肠杆菌的潜在危害日益加剧,有学者(明德松,朱焱,谢尊金.脑卒中患者痰霍尔曼肠杆菌耐药性及耐药机制的研究[J].中华医院感染学杂志,2011,21(05):1025-1026.)从婴幼儿奶粉中分离到霍氏肠杆菌,婴幼儿感染霍氏肠杆菌后还可引起包括脑卒、早产和体弱婴儿的菌血症等。随着抗生素类药物的过量使用和滥用,一部分致病细菌在药物的长期刺激下,变异成为多重耐药菌株。由于这种耐药性既会被其他细菌所获得,又会遗传给下一代,加快或者改变细菌的进化,导致产生超级细菌。而且抗生素的滥用也会对机体产生极其严重的危害,比如人体器官的病变、导致二重污染、发生过敏反应或产生毒副作用等。
细菌耐药性问题已是一项亟待解决的全球性难题,在面对细菌耐药性增强的问题上,中草药显示出得天独厚的优势,例如,具有多成分、多靶点、毒副作用小、不易产生耐药性、反复使用依然有效、不易产生过敏现象、对胃肠道无损伤、对肝肾刺激小、来源广泛、价格便宜的优点。因而,安全有效的中草药成为人们寻找高效低毒的细菌抑制剂的新途径。
香草酸(4-羟基-3-甲氧基苯甲酸,vanillic acid)是一种氧化形式的香兰素,属于酚酸类物质。分子式是C8H8O4,分子量是168.15,CAS号是121-34-6,熔点是208-210℃,分子结构是:
Figure BDA0002123484680000011
香草酸作为景天三七、地骨皮、白花丹及胡黄连等植物的有效成分之一,国内外对其在抗菌消炎、抗氧化、抑制酪氨酸酶活性、调节神经及促凝血活性方面都有一定的研究,但是关于香草酸抑制细菌生长方面的报道较少。文献(李承勇,郝川,史舒,关帅,土继政.香草酸对大鼠膀胱感染性结石的干预研究[J].中国药物与临床,2019,19(05):714-715.)报道了通过体外实验研究香草酸等11种酚类化合物对感染性结石形成的抑制作用,通过与传统抑制物比较发现,香草酸抑制细菌生长和晶体形成的活性最强,对实验中的奇异变形杆菌、克雷伯菌、葡萄球菌、大肠杆菌等均有抑制作用。而关于将香草酸作为抑制霍氏肠杆菌生长的活性成分的报道尚未见到。
发明内容
本发明的目的在于提供香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用,为开发新型抗生素替代物提供实践基础。
为了实现上述目的,本发明采用的技术方案为:
利用纸片扩散法确定霍氏肠杆菌对抗生素的耐药性,通过二倍稀释法确定香草酸对霍氏肠杆菌的最低杀菌浓度和最小抑菌浓度。结果表明:非抗生素类化合物香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌具有较好的抑菌作用,可以用于抑制多重耐药霍氏肠杆菌的生长。
优选的,所述多重耐药霍氏肠杆菌为人源或动物源耐哌拉西林、左氧氟沙星、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素、萘啶酸中多种抗生素的霍氏肠杆菌。
优选的,所述香草酸对耐抗生素哌拉西林、左氧氟沙星、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素及萘啶酸的霍氏肠杆菌具有抑制作用。
优选的,所述香草酸的最低杀菌浓度为3.2mg/mL,最小抑菌浓度为1.6mg/mL。
本发明的有益效果体现在:
本发明从现存药用植物资源库入手,挖掘潜在的耐药菌抑制剂,基于中药有效成分香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌的作用研究,利用香草酸抑制多重耐药霍氏肠杆菌的生长,为多重耐药霍氏肠杆菌抑制剂的研究开发和应用提供新的思路,并为解决抗生素类耐药性提供有益帮助,在医药领域具有广泛的应用价值。
进一步的,本发明针对临床耐药难题,利用香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌的抑制作用,将其作为抗生素的替代品,可缓解或解决多重耐药霍氏肠杆菌的耐药感染问题,降低病死率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明。所述实施例仅用于解释本发明,而非对本发明保护范围的限制。
1、霍氏肠杆菌的药敏实验
本发明以人源霍氏肠杆菌为出发菌株(菌株样本取自疾病预防控制中心),选用哌拉西林、左氧氟沙星、庆大霉素、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素、萘啶酸10种常用抗生素的药敏试纸片进行药敏试验。
挑取培养了18~24h的单菌落均匀溶解于2~5mL无菌生理盐水中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊。无菌吸取50~200μL菌液,用棉签将菌液均匀涂布平板,室温下放置3~5min。然后用无菌镊子按要求将药敏试纸片(直径为6mm)紧贴于平板表面,每种药敏试纸片三个平行。将接种好的平板于36~37℃培养16~24h。用0.02mm精度的游标卡尺测定抑菌圈直径,以抑菌圈的直径来判断人源霍氏肠杆菌对药物的敏感性,抑菌结果根据美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定,判定标准见表1。实验结果见表2,结果显示,1株霍氏肠杆菌(1#菌株)可以耐受9种临床上常见的抗生素,因此将其作为下一步实验的研究对象。
表1.美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定结果
Figure BDA0002123484680000031
表2.霍氏肠杆菌的药敏实验抑菌圈直径结果
Figure BDA0002123484680000032
注:抑菌圈直径的单位为mm,数值均为三个平行的平均值
2、香草酸对多重耐药菌株的抑制作用
为了充分考虑用药安全,本发明以香草酸单一活性成分为研究对象,以ATCC700323为参考菌株(参考菌株购买于北纳生物菌种保藏中心,参考菌株对亚胺培南和美罗培能高度敏感),以1#菌株为实验菌种,进行耐药性抑制作用的研究。挑取培养18~24h的纯菌落均匀溶解于2~5mL LB液体培养基中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊,并用酶标仪测定其OD600值。用二甲基亚砜配制浓度为30mg/mL的香草酸作为药液,利用试管二倍稀释法将药液、菌液及LB液体培养基加入96孔培养板中培养24h,不同浓度的药液组均为三个平行,确保实验数据的可信度。
利用酶标仪测定香草酸对霍氏肠杆菌(1#菌株)以及参考菌株ATCC700323的最小抑菌浓度(MIC)。并将MIC浓度下的培养液转接于无菌的LB液体培养基中继续培养,利用酶标仪测定香草酸对霍氏肠杆菌(1#菌株)以及参考菌株ATCC700323的最低杀菌浓度(MBC),实验结果见表3。
表3.香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌以及参考菌株ATCC700323的抑制结果
Figure BDA0002123484680000041
由表3可知,香草酸对耐哌拉西林、左氧氟沙星、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素及萘啶酸的多重耐药霍氏肠杆菌有抑制作用,其MIC为1.6mg/mL,MBC为3.2mg/mL。尽管香草酸对参考菌株的MIC比多重耐药菌株小,但香草酸对多重耐药菌株也具有明显的抑制作用。
根据以上实验结果,综合中草药不易产生耐药性等特点,可通过获得香草酸活性单品成分,直接针对多重耐药霍氏肠杆菌发挥抑制作用,有效缓解或解决多重耐药霍氏肠杆菌的耐药、感染、致病等问题,降低致病率和病死率,为抑制多重耐药霍氏肠杆菌提出新的思路,为开发多重耐药霍氏肠杆菌的抑制剂奠定了坚实的基础。

Claims (5)

1.香草酸在制备抗多重耐药霍氏肠杆菌的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述多重耐药霍氏肠杆菌为人源或动物源霍氏肠杆菌。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述多重耐药霍氏肠杆菌选自对哌拉西林、左氧氟沙星、溴格门汀、亚胺培南、氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻喹、阿奇霉素、萘啶酸中多种抗生素耐药的霍氏肠杆菌。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述香草酸对所述霍氏肠杆菌的最低杀菌浓度为3.2mg/mL,最小抑菌浓度为1.6mg/mL。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述香草酸对多重耐药霍氏肠杆菌具有体外杀灭作用,以及抑制多重耐药霍氏肠杆菌的体外生长。
CN201910614506.4A 2019-07-09 2019-07-09 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用 Active CN110215445B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910614506.4A CN110215445B (zh) 2019-07-09 2019-07-09 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910614506.4A CN110215445B (zh) 2019-07-09 2019-07-09 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110215445A CN110215445A (zh) 2019-09-10
CN110215445B true CN110215445B (zh) 2021-08-13

Family

ID=67813005

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910614506.4A Active CN110215445B (zh) 2019-07-09 2019-07-09 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110215445B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112481321B (zh) * 2020-09-14 2023-08-29 齐齐哈尔龙江阜丰生物科技有限公司 颗粒型苏氨酸的生产工艺

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ragged Robin (Lychnis flos-cuculi) - a plant with potential medicinal value;Michal等;《Rev Bras Farmacogn》;20141231;第24卷;第722-730页 *
掌叶蝎子草药理活性及作用机制研究;陈章宝;《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20130315(第3期);第1-147页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110215445A (zh) 2019-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WAISBREN et al. A clinical appraisal of neomycin
CN110215445B (zh) 香草酸在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用
CN110279679B (zh) 柠檬醛在抑制多重耐药阴沟肠杆菌生长中的应用
CN111939156B (zh) 一种联合抗菌药物组合物及其应用
CN110251526A (zh) 芍药苷在抑制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生长中的应用
US20070155698A1 (en) Oxazaborolidines as bacteria effectors
JP2006521299A (ja) ウイルスまたは細菌の感染により引き起こされる局所病変または全身症状の治療におけるn−アセチル−d−グルコサミンの使用
CN110946862B (zh) 血根碱在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用
Mou Effect of urine pH on the antibacterial activity of antibiotics and chemotherapeutic agents
CN111135173B (zh) 白屈菜红碱在抑制和清除多重耐药雷氏普罗威登斯菌生物被膜中的应用
CN110237058B (zh) 柠檬醛在抑制多重耐药霍氏肠杆菌生长中的应用
WO2002022147A1 (en) Antibacterial combination comprising neem plant extract
CN110960545A (zh) 安石榴苷在抑制多重耐药肺炎克雷伯菌生长中的应用
CN110215446B (zh) 香草酸在抑制多重耐药阴沟肠杆菌生长中的应用
US20060258729A1 (en) Antibacterial pyrazole carboxylic acid hydrazides
CN110876749B (zh) 白屈菜红碱在抑制多重耐药粘质沙雷菌生长中的应用
CN110772518A (zh) 血根碱在抑制路邓葡萄球菌生长中的应用
Timonin et al. Bacteriostatic activity of citrinin in vitro
CN111228280B (zh) 白头翁皂苷a3在抑制多重耐药雷氏普罗威登斯菌生长中的应用
CN110934871B (zh) 血根碱在抑制多重耐药粘质沙雷菌生长中的应用
CN114224899B (zh) 非达霉素用于制备抑制脓肿分枝杆菌活性的产品
KR20130062187A (ko) 동물용 복합항균제 조성물
CN108113980B (zh) 五味子甲素在抑制多重耐药大肠杆菌生长中的应用
Gibson A clinical appraisal of methenamine hippurate in urinary tract infections
WO2016021695A1 (ja) 抗菌剤

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant