CN110250499A - 一种抗氧化蛙油的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗氧化蛙油的制备方法，包括以下步骤：S1制备红茶提取液；S2取材：从东北林蛙上取下输卵管，使用生理盐水清洗；S3匀浆：将清洗后的所述输卵管加入组织匀浆机，处理得到组织匀浆；S4混合：将所述红茶提取液加入所述组织匀浆，使其混合均匀得到浆液；S5盐析：对所述浆液进行盐析，然后过滤并收集得到的滤液；S6萃取：向所述滤液中加入萃取剂，充分混合后静置得到处理液；S7收集：通过旋转蒸发仪处理所述处理液，并收集得到的油相有机物，后将所述油相有机物溶于乙醇中，得到收集液；S8吸附：将所述收集液进行两次处理，最后得到所述抗氧化蛙油。本发明操作合理，在降低了蛙油中重金属含量的同时提高了抗氧化的能力。
Description
技术领域
本发明涉及医药保健品技术领域，具体是一种抗氧化蛙油的制备方法。
背景技术
林蛙油又称蛤蟆油、田鸡油、雪蛤、哈什蚂油，是雌性林蛙的输卵管。林蛙油味甘、咸， 性平。林蛙油含有雌醇、孕酮、睾酮等多种生物活性物质及不饱和脂肪酸、维生素等营养物 质，具有明显的延缓衰老、抗疲劳、滋阴养颜、提高机体免疫能力和抗应激能力的功效，是 一种营养价值极高的滋补品和药物。
近些年来，人们对于食品安全的重视程度越来越高，因此对于林蛙油作为食品的安全性 和口感也更加关注。
中国专利文献CN201610009660.5，申请日20160107，专利名称为：一种林蛙油制备方法 及林蛙油即食食品，公开了一种林蛙油制备方法，包括如下步骤：将干林蛙油进行预处理； 低温加入纯净水，同时通入臭氧；浸渍泡发脱水即得林蛙油。本发明还公开了用该方法制备 的食品。
上述专利文献通过臭氧的处理解决了干林蛙油水泡发腐败和腥味的问题，同时还保持了 林蛙油原有组织质构，具有良好的口感。但是一种具备良好的安全性和抗氧化性的蛙油的制 备方法则尚未提出。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗氧化蛙油的制备方法，达到了降低 蛙油中重金属含量和提高抗氧化能力的效果。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种抗氧化蛙油的制备方法，包括以下步 骤：
S1.制备红茶提取液：将过筛和除杂后的红茶茶叶进行粉碎处理，得到粉碎料；将所述粉 碎料和溶剂一起加入提取容器中，在负压的条件下进行浸提，最后经过浓缩、过滤和冷却得 到红茶提取液；
S2.取材：从东北林蛙上取下输卵管，使用生理盐水清洗，通过所述生理盐水清洗，可以 初步除去所述输卵管上的杂质；
S3.匀浆：将清洗后的所述输卵管加入组织匀浆机，处理得到组织匀浆，通过处理可以增 大所述组织匀浆与所述红茶提取液、洗脱液或萃取剂的接触面积，达到了提高洗脱和萃取效 率的效果；
S4.混合：将所述红茶提取液加入所述组织匀浆，使其混合均匀得到浆液；所述红茶提取 液与所述组织匀浆充分接触混合，可以抑制所述组织匀浆的氧化作用，达到了提高制得的所 述蛙油的抗氧化性的效果；
S5.盐析：对所述浆液进行盐析，然后过滤并收集得到的滤液；
S6.萃取：向所述滤液中加入萃取剂，充分混合后静置得到处理液；
S7.收集：通过旋转蒸发仪处理所述处理液，并收集得到的油相有机物，然后将所述油相 有机物溶于乙醇中，得到收集液；
S8.吸附：将所述收集液通过螯合树脂动态吸附和壳聚糖静态吸附进行两次处理，处理顺 序不分前后，最后得到所述抗氧化蛙油；通过两次吸附处理，降低了所述收集液中所含的铅、 镉、汞等重金属的含量，达到了提高所述蛙油的安全性的效果。
优选的，S1中，所述溶剂为蒸馏水，所述浸提的温度范围为80～90℃。
优选的，S1中，所述溶剂为乙醇、丙醇或者乙酸乙酯；所述浸提的温度范围为40～65℃。
优选的，S2中，所述输卵管取自黄白色，光亮，大厚片，不带皮、卵和无碎渣的东北林 蛙。
通过上述技术方案，选取优质的所述东北林蛙制备所述蛙油，达到了提高制得所述蛙油 的质量的效果。
优选的，S4中，所述红茶提取液和组织匀浆的比例为1:1～2。
通过上述技术方案，控制所述红茶提取液和组织匀浆的比例，使所述红茶提取液充分抑 制不饱和脂肪酸的氧化作用，达到了提高所述蛙油的抗氧化性的效果。
优选的，S5中，对所述浆液进行盐析，在洗脱液中加入固体硫酸铵至其比重达到1.24， 并置于冰箱中静置，然后过滤并收集得到的滤液。
优选的，S5中，所述冰箱的内部温度为4℃。
优选的，S6中，所述萃取剂为乙酸乙酯，所述静置的时间为2～3h。
优选的，S7中，所述乙醇的百分比为10％。
本发明的有益效果是：
1.本发明的一种抗氧化蛙油的制备方法，将制备得到的所述红茶提取液加入组织匀浆中， 抑制了组织匀浆在与空气接触时所发生的氧化作用，达到了提高所述蛙油的抗氧化性的效果。
2.本发明的一种抗氧化蛙油的制备方法，严格筛选黄白色，光亮，大厚片，不带皮、卵 和无碎渣的东北林蛙，并将其用于所述蛙油的制备，保证了原料的质量，达到了提高所述蛙 油的品质的效果。
3.本发明的一种抗氧化蛙油的制备方法，通过将所述收集液通过螯合树脂动态吸附和壳 聚糖静态吸附进行两次处理，显著降低了所述收集液中所含的铅、镉、汞等重金属的含量， 达到了提高所述蛙油的使用安全性的效果。
具体实施方式
下面进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。
实施例1
一种抗氧化蛙油的制备方法，包括以下步骤：
S1.制备红茶提取液：将过筛和除杂后的红茶茶叶进行粉碎处理，得到粉碎料；将粉碎 料和蒸馏水一起加入提取容器中，在负压、温度为80℃的条件下进行浸提，最后经过浓缩、 过滤和冷却得到红茶提取液；
S2.取材：选取黄白色，光亮，大厚片，不带皮、卵和无碎渣的东北林蛙，并取下其输卵 管，使用生理盐水清洗；通过生理盐水清洗，可以初步除去输卵管上的杂质；
S3.匀浆：将清洗后的输卵管加入组织匀浆机，处理得到组织匀浆；通过处理可以增大组 织匀浆与红茶提取液、洗脱液或萃取剂的接触面积，达到了提高洗脱和萃取效率的效果；
S4.混合：将红茶提取液加入组织匀浆，红茶提取液和组织匀浆的比例为1:1，使其混合 均匀得到浆液；红茶提取液与组织匀浆充分接触混合，可以抑制组织匀浆的氧化作用，达到 了提高制得的蛙油的抗氧化性的效果；
S5.盐析：对浆液进行盐析，在洗脱液中加入固体硫酸铵至其比重达到1.24，并置于内 部环境为4℃的冰箱中静置，然后过滤并收集得到的滤液；
S6.萃取：向滤液中加入萃取剂，充分混合后静置3h得到处理液，萃取剂采用乙酸乙酯；
S7.收集：通过旋转蒸发仪处理处理液，并收集得到的油相有机物，然后将油相有机物 溶于10％的乙醇中，得到收集液；
S8.吸附：将收集液通过螯合树脂动态吸附和壳聚糖静态吸附进行两次处理，处理顺序不 分前后，最后得到抗氧化蛙油；通过两次吸附处理，降低了收集液中所含的铅、镉、汞等重 金属的含量，达到了提高蛙油的安全性的效果。。
实施例2
一种抗氧化蛙油的制备方法，包括以下步骤：
S1.制备红茶提取液：将过筛和除杂后的红茶茶叶进行粉碎处理，得到粉碎料；将粉碎 料和乙醇一起加入提取容器中，在负压、温度为50℃的条件下进行浸提，最后经过浓缩、过 滤和冷却得到红茶提取液；
S2.取材：选取黄白色，光亮，大厚片，不带皮、卵和无碎渣的东北林蛙，并取下其输卵 管，使用生理盐水清洗；通过生理盐水清洗，可以初步除去输卵管上的杂质；
S3.匀浆：将清洗后的输卵管加入组织匀浆机，处理得到组织匀浆；通过处理可以增大组 织匀浆与红茶提取液、洗脱液或萃取剂的接触面积，达到了提高洗脱和萃取效率的效果；
S4.混合：将红茶提取液加入组织匀浆，红茶提取液和组织匀浆的比例为1:1.2，使其混 合均匀得到浆液；红茶提取液与组织匀浆充分接触混合，可以抑制组织匀浆的氧化作用，达 到了提高制得的蛙油的抗氧化性的效果；
S5.盐析：对浆液进行盐析，在洗脱液中加入固体硫酸铵至其比重达到1.24，并置于内 部环境为4℃的冰箱中静置，然后过滤并收集得到的滤液；
S6.萃取：向滤液中加入萃取剂，充分混合后静置2.5h得到处理液，萃取剂采用乙酸乙 酯；
S7.收集：通过旋转蒸发仪处理处理液，并收集得到的油相有机物，然后将油相有机物 溶于10％的乙醇中，得到收集液；
S8.吸附：将收集液通过螯合树脂动态吸附和壳聚糖静态吸附进行两次处理，处理顺序不 分前后，最后得到抗氧化蛙油；通过两次吸附处理，降低了收集液中所含的铅、镉、汞等重 金属的含量，达到了提高蛙油的安全性的效果。
试验效果
1.为了验证本发明的制备方法对所述蛙油的抗氧化性的提高，进行了对比试验。试验将 40只小鼠随机分为4组，每组10只，即空白对照组、对照组A、对照组B和实验组。其中， 空白对照组灌胃给予10mL/(kg·d)的生理盐水，对照组A灌胃给予10mL/(kg·d)的维生素 C，对照组B给予10mL/(kg·d)按照实施例2中除去S1和S4步骤的方法制得的蛙油，实验 组给予10mL/(kg·d)按照实施例2中的方法制得的蛙油。
连续喂养30天后，断颈处死所有实验小鼠，迅速取出肝脏，用于超氧化物歧化酶SOD、 谷胱甘肽GSH和蛋白质羰基PC的测定。试验结果如下：
由此可知，实验组中小鼠的SOD含量、GSH含量明显高于空白对照组、对照组A和对照组B，PC含量明显低于空白对照组、对照组A和对照组B。因此，本发明的制备方法得到 的蛙油的抗氧化性显著高于维生素C和普通蛙油。
2.为了验证本发明的制备方法对所述蛙油中重金属含量的消除效果，进行了对比试验。 试验分为对照组和实验组，对照组为按照本实施例2中除去S8的步骤制得的蛙油，实验组为 按照本实施例2中的步骤制得的蛙油。试验利用荧光比色法测定了对照组和实验组中的各重 金属的含量，结果如下表所示：
由此可知，相比于对照组，实验组中锡含量降低了53.75％，镉含量降低了50.89％，铬含 量降低了30.36％，铜含量降低了49.94％，铅含量降低了34.29％。因此，本发明的制备方法 显著降低了蛙油中的重金属含量。
综上所述，本发明的一种抗氧化蛙油的制备方法在显著提高蛙油的抗氧化性的同时，达 到了降低其重金属含量从而提高使用安全性的效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式， 不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述 构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动 和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。
Claims (9)
1.一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1.制备红茶提取液：将过筛和除杂后的红茶茶叶进行粉碎处理，得到粉碎料；将所述粉碎料和溶剂一起加入提取容器中，在负压的条件下进行浸提，最后经过浓缩、过滤和冷却得到红茶提取液；
S2.取材：从东北林蛙上取下输卵管，使用生理盐水清洗；
S3.匀浆：将清洗后的所述输卵管加入组织匀浆机，处理得到组织匀浆；
S4.混合：将所述红茶提取液加入所述组织匀浆，使其混合均匀得到浆液；
S5.盐析：对所述浆液进行盐析，然后过滤并收集得到的滤液；
S6.萃取：向所述滤液中加入萃取剂，充分混合后静置得到处理液；
S7.收集：通过旋转蒸发仪处理所述处理液，并收集得到的油相有机物，然后将所述油相有机物溶于乙醇中，得到收集液；
S8.吸附：将所述收集液通过螯合树脂动态吸附和壳聚糖静态吸附进行两次处理，处理顺序不分前后，最后得到所述抗氧化蛙油。
2.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S1中，所述溶剂为蒸馏水，所述浸提的温度范围为80～90℃。
3.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S1中，所述溶剂为乙醇、丙醇或者乙酸乙酯；所述浸提的温度范围为40～65℃。
4.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S2中，所述输卵管取自黄白色，光亮，大厚片，不带皮、卵和无碎渣的东北林蛙。
5.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S4中，所述红茶提取液和组织匀浆的比例为1:1～2。
6.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S5中，对所述浆液进行盐析，在洗脱液中加入固体硫酸铵至其比重达到1.24，并置于冰箱中静置，然后过滤并收集得到的滤液。
7.根据权利要求6所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S5中，所述冰箱的内部温度为4℃。
8.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S6中，所述萃取剂为乙酸乙酯，所述静置的时间为2～3h。
9.根据权利要求1所述的一种抗氧化蛙油的制备方法，其特征在于：S7中，所述乙醇的百分比为10％。
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