CN110244062A - 一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法 - Google Patents

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CN110244062A CN201910649650.1A CN201910649650A CN110244062A CN 110244062 A CN110244062 A CN 110244062A CN 201910649650 A CN201910649650 A CN 201910649650A CN 110244062 A CN110244062 A CN 110244062A
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郭勇华
刘现杰
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    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
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    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids

Abstract

本发明公开了一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法，包括PVC底板，所述PVC底板的顶部从左到右依次设置有样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫，且硝酸纤维素膜检测垫的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线、钙卫蛋白检测线和质控线，所述胶体金标记垫的左侧位于样品垫的内侧。本发明可以全面反应肠道炎症情况，用于区分炎症性肠病和肠易激综合征的辅助鉴别和诊断、肠道肿瘤、息肉等器质性病变的早期筛查，急性细菌性腹泻与非细菌性腹泻的鉴别，同时可以指导用药，避免抗生素滥用，同时其检测工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，可以部分代替目前有创的检测手段，临床实用性强。

Description

一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及医疗检测技术领域，具体为一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法。
背景技术
钙卫蛋白是一种分子量为36kDa与钙锌结合的异二聚体蛋白，相关的研究日益增多，目前认为钙卫蛋白的功能主要涉及免疫调节、诱导细胞凋亡、抑制细菌生长等，而钙卫蛋白与肿瘤关系的研究也逐渐成为热点；乳铁蛋白属于铁蛋白家族，它是一种分泌性的糖蛋白，分子量为80kDa，乳铁蛋白具有参与铁代谢、抗菌、抗病毒、免疫调节和抗炎、抗肿瘤等多种生物学功能，近年来发现乳铁蛋白具有明显的抗肿瘤作用。
由于钙卫蛋白、乳铁蛋白在粪便中极其稳定，因而远优于以往的粪便标志物，特别是与肿瘤的粪便DNA检测比较，标本无须冷冻保存，在临床应用极为方便，采用胶体金法检测粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白，也比酶联免疫法检测更为方便快捷，无需仪器，5-10min即可判读结果(而不是长达2-3h)，标本也不需要集中检测。
现有的研究表明，钙卫蛋白、乳铁蛋白均参与炎性反应及肿瘤免疫，具有广泛的生物学活性，而在肠道肿瘤、溃疡等器质性病变的发生过程中，常常有出血以及大量炎性细胞浸润，因而，患者粪便中钙卫蛋白、乳铁蛋白显著增高，如果粪便钙卫蛋白、乳铁蛋白检测结果阳性，则提示肠道可能发生炎症及/或肿瘤，这对于早期发现肠道肿瘤极具价值，但现有的检测装置其检测效果不理想，从而不能真正达到普筛的目的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，包括PVC底板，所述PVC底板的顶部从左到右依次设置有样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫，且硝酸纤维素膜检测垫的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线、钙卫蛋白检测线和质控线，所述胶体金标记垫的左侧位于样品垫的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫的左侧位于胶体金标记垫的内侧，硝酸纤维素膜检测垫的右侧位于吸水垫的内侧。
优选的，所述胶体金标记垫的材质为聚酯膜，样品垫材质为聚酯膜或玻璃纤维素膜。
一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
A、制备样品垫：将样品垫置于处理液中浸泡，然后将含有处理液的样品垫置于温度为18-24℃、相对湿度小于40％的环境中烘干16-24h，备用；
B、制备胶体金标记垫：胶体金溶液、抗体标记及胶体金标记垫制备；
C、制备硝酸纤维素膜检测垫：①、按照配方要求配置好包被用的鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体的抗体溶液，且最终抗体溶液浓度为1.0-1.2mg/ml；②取硝酸纤维素膜(规格宽度25mm)，按照距离间隔一次性划出乳铁蛋白检测线、钙卫蛋白检测线和质控线，划膜时，抗体溶液的消耗量设定为1.0-1.2ul/cm，乳铁蛋白检测线包被有鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4，钙卫蛋白检测线包被有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1，质控线包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；
D、贴板及切割：将样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫顺序搭接PVC底板上，并按照规格要求切割成宽度3.3mm(条型)和4mm(卡型)。
优选的，所述步骤A中，处理液为样品垫处理液，且处理液由0.5％吐温-20、1％BSA的pH为8.0的1mol/L磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液组成。
优选的，所述步骤B中，胶体金溶液的制备方法(以制备1000ml为例)包括以下步骤：①、用量筒量取980mL工艺用水到烧瓶中；②、加入制备量1％氯化金溶液，边搅拌边加热至沸腾；③、在搅拌过程中，迅速加入制备量1％柠檬酸三钠溶液；④、颜色变成橙红色后，继续煮沸15min；⑤、关闭搅拌器，让胶体金溶液自然冷却，用工艺用水将胶体金溶液定容至1000mL。
优选的，所述步骤B中，抗体标记及胶体金标记垫的制备方法(以制备40米胶体金标记垫为例)包括以下步骤：①、最佳pH值的确定：取320ml胶体金溶液，取用0.1M的碳酸钾溶液调整胶体金溶液的pH值至合适pH值；②、将溶液放到磁力搅拌器上，调整转速为250rpm；③搅拌状态下，加入所需量鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1，这两种抗体在此溶液中的浓度控制在8-10ug/ml；④、静置15min后加入10％BSA，使BSA终浓度为0.1％，加入0.32ml的1％PEG20000，继续搅拌10min；⑤、离心：将标记好的溶液转移到离心管中，天平上调整平衡，并控制温度为2-8℃，转速为10000rpm，离心时间为30min；⑥、小心吸出上清，收集沉淀，用金标结合物稀释液定容到原胶体金溶液体积的10％；⑦、涂布：取聚酯无纺布，设定涂布量为6-8ul/cm，干燥温度为37℃，相对湿度≤40％，转动速度1.5m/min，将涂布好的胶体金标记垫转移到干燥间；⑧、干燥温度为37℃，干燥湿度≤40％，干燥时间为16-24h；⑨、胶体金标记垫干燥后，用铝箔袋封存备用。
优选的，所述步骤B中的胶体金标记垫制备完成后，在其表面上标记有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1。
优选的，所述步骤C中还包括③、距离间隔设定：乳铁蛋白检测线离硝酸纤维素膜检测垫的底端距离为7mm，钙卫蛋白检测线离硝酸纤维素膜检测垫的底端距离为12mm，质控线离硝酸纤维素膜检测垫的底端距离为17mm；④、设定干燥温度为37℃，相对湿度≤40％的环境下干燥，干燥时间为16-24h；⑤、包被好的硝酸纤维素膜检测垫经干燥塔干燥后，卷好备用。
优选的，所述步骤D中还包括①、检查内包间温湿度，确保温度为18-24℃，湿度≤40％才能开始工作；②、在台面上展开PVC底板，两端粘在操作台上，撕掉中间部分宽度为25mm的离层纸；③、将硝酸纤维素膜检测垫对准直线贴在撕开离层纸的地方；④、再撕开PVC底板下边的保护纸，将胶体金标记垫黏贴在PVC底板上，让胶体金标记垫的上边缘与硝酸纤维素膜检测垫的下边缘重叠1-2mm，将样品垫粘贴在胶体金标记垫的下方，让样品垫的上边缘与胶体金标记垫的下边缘重叠1-2mm；⑤、撕开PVC底板上边的离层纸，将吸水垫直线黏贴到PVC底板上，让吸水垫与硝酸纤维素膜检测垫的上边缘重叠2mm左右；⑥、贴透明胶带，让透明胶带完全覆盖胶体金标记垫；⑦、操作自动斩切机，按要求的宽度切割。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
本发明将胶体金标记鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1标记在胶体金标记垫上，鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体包被于硝酸纤维素膜检测垫上，包被在硝酸纤维素膜检测垫上的抗体的特异性与样本中的钙卫蛋白、乳铁蛋白结合而进行检测，可以全面反应肠道炎症情况，用于区分炎症性肠病和肠易激综合征的辅助鉴别和诊断、肠道肿瘤、息肉等器质性病变的早期筛查，急性细菌性腹泻与非细菌性腹泻的鉴别，同时可以指导用药，避免抗生素滥用，同时其检测工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，可以部分代替目前有创的检测手段，临床实用性强。
附图说明
图1为本发明结构示意图。
图中：1 PVC底板、2样品垫、3胶体金标记垫、4硝酸纤维素膜检测垫、5质控线、6吸水垫、7钙卫蛋白检测线、8乳铁蛋白检测线。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在本申请的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。
本申请的PVC底板1、样品垫2、胶体金标记垫3、硝酸纤维素膜检测垫4、质控线5、吸水垫6、钙卫蛋白检测线7和乳铁蛋白检测线8部件均为通用标准件或本领域技术人员知晓的部件，其结构和原理都为本技术人员均可通过技术手册得知或通过常规实验方法获知。
请参阅图1，一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，包括PVC底板1，PVC底板1的顶部从左到右依次设置有样品垫2、胶体金标记垫3、硝酸纤维素膜检测垫4和吸水垫6，胶体金标记垫3的材质为聚酯膜，样品垫2材质为聚酯膜或玻璃纤维素膜，且硝酸纤维素膜检测垫4的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线8、钙卫蛋白检测线7和质控线5，胶体金标记垫3的左侧位于样品垫2的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫4的左侧位于胶体金标记垫3的内侧，硝酸纤维素膜检测垫4的右侧位于吸水垫6的内侧，将胶体金标记鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1标记在胶体金标记垫3上，鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体包被于硝酸纤维素膜检测垫4上，包被在硝酸纤维素膜检测垫4上的抗体的特异性与样本中的钙卫蛋白、乳铁蛋白结合而进行检测，可以全面反应肠道炎症情况，用于区分炎症性肠病和肠易激综合征的辅助鉴别和诊断、肠道肿瘤、息肉等器质性病变的早期筛查，急性细菌性腹泻与非细菌性腹泻的鉴别，同时可以指导用药，避免抗生素滥用，同时其检测工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，可以部分代替目前有创的检测手段，临床实用性强。
一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
A、制备样品垫2：将样品垫2置于处理液中浸泡，然后将含有处理液的样品垫2置于温度为18-24℃、相对湿度小于40％的环境中烘干16-24h，备用；
B、制备胶体金标记垫3：胶体金溶液、抗体标记及胶体金标记垫3制备；
C、制备硝酸纤维素膜检测垫4：①、按照配方要求配置好包被用的鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体的抗体溶液，且最终抗体溶液浓度为1.0-1.2mg/ml；②取硝酸纤维素膜(规格宽度25mm)，按照距离间隔一次性划出乳铁蛋白检测线8、钙卫蛋白检测线7和质控线5，划膜时，抗体溶液的消耗量设定为1.0-1.2ul/cm，乳铁蛋白检测线8包被有鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4，钙卫蛋白检测线7包被有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1，质控线5包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；
D、贴板及切割：将样品垫2、胶体金标记垫3、硝酸纤维素膜检测垫4和吸水垫6顺序搭接PVC底板1上，并按照规格要求切割成宽度3.3mm(条型)和4mm(卡型)。
步骤A中，处理液为样品垫处理液，且处理液由0.5％吐温-20、1％BSA的pH为8.0的1mol/L磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液组成。
步骤B中，胶体金溶液的制备方法(以制备1000ml为例)包括以下步骤：①、用量筒量取980mL工艺用水到烧瓶中；②、加入制备量1％氯化金溶液，边搅拌边加热至沸腾；③、在搅拌过程中，迅速加入制备量1％柠檬酸三钠溶液；④、颜色变成橙红色后，继续煮沸15min；⑤、关闭搅拌器，让胶体金溶液自然冷却，用工艺用水将胶体金溶液定容至1000mL。
步骤B中，抗体标记及胶体金标记垫3的制备方法(以制备40米胶体金标记垫3为例)包括以下步骤：①、最佳pH值的确定：取320ml胶体金溶液，取用0.1M的碳酸钾溶液调整胶体金溶液的pH值至合适pH值；②、将溶液放到磁力搅拌器上，调整转速为250rpm；③搅拌状态下，加入所需量鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1，这两种抗体在此溶液中的浓度控制在8-10ug/ml；④、静置15min后加入10％BSA，使BSA终浓度为0.1％，加入0.32ml的1％PEG20000，继续搅拌10min；⑤、离心：将标记好的溶液转移到离心管中，天平上调整平衡，并控制温度为2-8℃，转速为10000rpm，离心时间为30min；⑥、小心吸出上清，收集沉淀，用金标结合物稀释液定容到原胶体金溶液体积的10％；⑦、涂布：取聚酯无纺布，设定涂布量为6-8ul/cm，干燥温度为37℃，相对湿度≤40％，转动速度1.5m/min，将涂布好的胶体金标记垫3转移到干燥间；⑧、干燥温度为37℃，干燥湿度≤40％，干燥时间为16-24h；⑨、胶体金标记垫3干燥后，用铝箔袋封存备用。
步骤B中的胶体金标记垫3制备完成后，在其表面上标记有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1。
步骤C中还包括③、距离间隔设定：乳铁蛋白检测线8离硝酸纤维素膜检测垫4的底端距离为7mm，钙卫蛋白检测线7离硝酸纤维素膜检测垫4的底端距离为12mm，质控线5离硝酸纤维素膜检测垫4的底端距离为17mm；④、设定干燥温度为37℃，相对湿度≤40％的环境下干燥，干燥时间为16-24h；⑤、包被好的硝酸纤维素膜检测垫4经干燥塔干燥后，卷好备用。
步骤D中还包括①、检查内包间温湿度，确保温度为18-24℃，湿度≤40％才能开始工作；②、在台面上展开PVC底板1，两端粘在操作台上，撕掉中间部分宽度为25mm的离层纸；③、将硝酸纤维素膜检测垫4对准直线贴在撕开离层纸的地方；④、再撕开PVC底板1下边的保护纸，将胶体金标记垫3黏贴在PVC底板1上，让胶体金标记垫3的上边缘与硝酸纤维素膜检测垫4的下边缘重叠1-2mm，将样品垫2粘贴在胶体金标记垫3的下方，让样品垫2的上边缘与胶体金标记垫3的下边缘重叠1-2mm；⑤、撕开PVC底板1上边的离层纸，将吸水垫6直线黏贴到PVC底板1上，让吸水垫6与硝酸纤维素膜检测垫4的上边缘重叠2mm左右；⑥、贴透明胶带，让透明胶带完全覆盖胶体金标记垫3；⑦、操作自动斩切机，按要求的宽度切割。
使用时，将胶体金标记鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1标记在胶体金标记垫3上，鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体包被于硝酸纤维素膜检测垫4上，包被在硝酸纤维素膜检测垫4上的抗体的特异性与样本中的钙卫蛋白、乳铁蛋白结合而进行检测，可以全面反应肠道炎症情况，用于区分炎症性肠病和肠易激综合征的辅助鉴别和诊断、肠道肿瘤、息肉等器质性病变的早期筛查，急性细菌性腹泻与非细菌性腹泻的鉴别，同时可以指导用药，避免抗生素滥用，同时其检测工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，可以部分代替目前有创的检测手段，临床实用性强。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (9)

1.一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，包括PVC底板(1)，其特征在于：所述PVC底板(1)的顶部从左到右依次设置有样品垫(2)、胶体金标记垫(3)、硝酸纤维素膜检测垫(4)和吸水垫(6)，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线(8)、钙卫蛋白检测线(7)和质控线(5)，所述胶体金标记垫(3)的左侧位于样品垫(2)的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫(4)的左侧位于胶体金标记垫(3)的内侧，硝酸纤维素膜检测垫(4)的右侧位于吸水垫(6)的内侧。
2.根据权利要求1所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂，其特征在于：所述胶体金标记垫(3)的材质为聚酯膜，样品垫(2)材质为聚酯膜或玻璃纤维素膜。
3.一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：
A、制备样品垫(2)：将样品垫(2)置于处理液中浸泡，然后将含有处理液的样品垫(2)置于温度为18-24℃、相对湿度小于40％的环境中烘干16-24h，备用；
B、制备胶体金标记垫(3)：胶体金溶液、抗体标记及胶体金标记垫(3)制备；
C、制备硝酸纤维素膜检测垫(4)：①、按照配方要求配置好包被用的鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4、羊抗鼠IgG多克隆抗体的抗体溶液，且最终抗体溶液浓度为1.0-1.2mg/ml；②取硝酸纤维素膜(规格宽度25mm)，按照距离间隔一次性划出乳铁蛋白检测线(8)、钙卫蛋白检测线(7)和质控线(5)，划膜时，抗体溶液的消耗量设定为1.0-1.2ul/cm，乳铁蛋白检测线(8)包被有鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体5A4，钙卫蛋白检测线(7)包被有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体2D1，质控线(5)包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；
D、贴板及切割：将样品垫(2)、胶体金标记垫(3)、硝酸纤维素膜检测垫(4)和吸水垫(6)顺序搭接PVC底板(1)上，并按照规格要求切割成宽度3.3mm(条型)和4mm(卡型)。
4.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤A中，处理液为样品垫处理液，且处理液由0.5％吐温-20、1％BSA的pH为8.0的1mol/L磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液组成。
5.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，胶体金溶液的制备方法(以制备1000ml为例)包括以下步骤：①、用量筒量取980mL工艺用水到烧瓶中；②、加入制备量1％氯化金溶液，边搅拌边加热至沸腾；③、在搅拌过程中，迅速加入制备量1％柠檬酸三钠溶液；④、颜色变成橙红色后，继续煮沸15min；⑤、关闭搅拌器，让胶体金溶液自然冷却，用工艺用水将胶体金溶液定容至1000mL。
6.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤B中，抗体标记及胶体金标记垫(3)的制备方法(以制备40米胶体金标记垫(3)为例)包括以下步骤：①、最佳pH值的确定：取320ml胶体金溶液，取用0.1M的碳酸钾溶液调整胶体金溶液的pH值至合适pH值；②、将溶液放到磁力搅拌器上，调整转速为250rpm；③搅拌状态下，加入所需量鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1，这两种抗体在此溶液中的浓度控制在8-10ug/ml；④、静置15min后加入10％BSA，使BSA终浓度为0.1％，加入0.32ml的1％PEG20000，继续搅拌10min；⑤、离心：将标记好的溶液转移到离心管中，天平上调整平衡，并控制温度为2-8℃，转速为10000rpm，离心时间为30min；⑥、小心吸出上清，收集沉淀，用金标结合物稀释液定容到原胶体金溶液体积的10％；⑦、涂布：取聚酯无纺布，设定涂布量为6-8ul/cm，干燥温度为37℃，相对湿度≤40％，转动速度1.5m/min，将涂布好的胶体金标记垫(3)转移到干燥间；⑧、干燥温度为37℃，干燥湿度≤40％，干燥时间为16-24h；⑨、胶体金标记垫(3)干燥后，用铝箔袋封存备用。
7.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤B中的胶体金标记垫(3)制备完成后，在其表面上标记有鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体11F10、鼠抗人乳铁蛋白单克隆抗体13H1。
8.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤C中还包括③、距离间隔设定：乳铁蛋白检测线(8)离硝酸纤维素膜检测垫(4)的底端距离为7mm，钙卫蛋白检测线(7)离硝酸纤维素膜检测垫(4)的底端距离为12mm，质控线(5)离硝酸纤维素膜检测垫(4)的底端距离为17mm；④、设定干燥温度为37℃，相对湿度≤40％的环境下干燥，干燥时间为16-24h；⑤、包被好的硝酸纤维素膜检测垫(4)经干燥塔干燥后，卷好备用。
9.根据权利要求3所述的一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂的制备方法，其特征在于：所述步骤D中还包括①、检查内包间温湿度，确保温度为18-24℃，湿度≤40％才能开始工作；②、在台面上展开PVC底板(1)，两端粘在操作台上，撕掉中间部分宽度为25mm的离层纸；③、将硝酸纤维素膜检测垫(4)对准直线贴在撕开离层纸的地方；④、再撕开PVC底板(1)下边的保护纸，将胶体金标记垫(3)黏贴在PVC底板(1)上，让胶体金标记垫(3)的上边缘与硝酸纤维素膜检测垫(4)的下边缘重叠1-2mm，将样品垫(2)粘贴在胶体金标记垫(3)的下方，让样品垫(2)的上边缘与胶体金标记垫(3)的下边缘重叠1-2mm；⑤、撕开PVC底板(1)上边的离层纸，将吸水垫(6)直线黏贴到PVC底板(1)上，让吸水垫(6)与硝酸纤维素膜检测垫(4)的上边缘重叠2mm左右；⑥、贴透明胶带，让透明胶带完全覆盖胶体金标记垫(3)；⑦、操作自动斩切机，按要求的宽度切割。
CN201910649650.1A 2019-07-18 2019-07-18 一种粪便钙卫蛋白或乳铁蛋白联合检测试剂及其制备方法 Pending CN110244062A (zh)

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