CN110204593A - 一种生物制药用多肽化合物的制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接，包括如下制备工艺：1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；2)取上清液，采用离子交换柱层析分离；3)透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到目标活性化合物；4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物；5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解。本发明可以一步合成，高产量、制备简单快速，具有制备简单、成胶快速等优点，同时制备方法具备适用性。

Description

一种生物制药用多肽化合物的制备工艺

技术领域

本发明涉及多肽化合物制备技术领域，具体是指一种生物制药用多肽化合物的制备工艺。

背景技术

多肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10～100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。

多肽在诊断试剂中最主要的用途是用作抗原检测病毒、细胞、支原体、螺旋体等微生物和囊虫、锥虫等寄生虫的抗体，多肽抗原比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强，且易于制备，因此装配的检测试剂，其检测抗体的假阴性率和本底反应都很低，易于临床应用。目前用多肽抗原装配的抗体检测试剂包括：甲、乙、丙、庚或肝病毒、艾滋病病毒、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒、梅毒螺旋体、囊虫、锥虫、莱姆病及类风湿等。使用的多肽抗原大部分是从相应致病体的天然蛋白内分析筛选获得，有些是从肽库内筛选的全新小肽。

研究表明，在蛋白蛋白相互作用中，参与结合作用的往往只有很小的一段多肽序列，而其它部分是为了维持蛋白特定构象而存在，因此亟需一种适用性强的生物制药用多肽化合物的制备工艺，从而减少医学资源的浪费。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，克服现有技术缺点，提供一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，适用性强，减少医学资源浪费。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接。

一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，包括如下制备工艺：

1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；

2)取上清液，硫酸铵分级沉淀，取沉淀透析脱盐，采用离子交换柱层析分离；

3)分别收集活性峰，透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到了纯度为99％的目标活性化合物；

4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物生物制药用多肽化合物；

5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解，冷却获得生物制药用多肽偶联化合物水凝胶体系。

作为改进，所述多肽化合物的序列如下：甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-络氨酸。

作为改进，所述生物制药用多肽化合物通过固相合成法合成。

作为改进，所述生物制药用多肽化合物占水凝胶制剂的重量百分比为0.05％-1％。

作为改进，所述弱碱水溶液为碳酸钠水溶液。

本发明具有如下优点：本发明可以一步合成，高产量、制备简单快速，具有制备简单、成胶快速、药物装载量精准定量可控、药物释放可控等优点，同时制备方法具备适用性，可以对更多的多肽化合组合物进行指导参考作用，减少医学资源浪费，适宜广泛推广使用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明。

实施例1

一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接，包括如下制备工艺：

1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；

2)取上清液，硫酸铵分级沉淀，取沉淀透析脱盐，采用离子交换柱层析分离；

3)分别收集活性峰，透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到了纯度为99％的目标活性化合物；

4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物生物制药用多肽化合物；

5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解，冷却获得生物制药用多肽偶联化合物水凝胶体系。

所述多肽化合物的序列如下：甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-络氨酸。

所述生物制药用多肽化合物通过固相合成法合成。

所述生物制药用多肽化合物占水凝胶制剂的重量百分比为0.05％％。

所述弱碱水溶液为碳酸钠水溶液。

实施例2

一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接，包括如下制备工艺：

1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；

2)取上清液，硫酸铵分级沉淀，取沉淀透析脱盐，采用离子交换柱层析分离；

3)分别收集活性峰，透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到了纯度为99％的目标活性化合物；

4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物生物制药用多肽化合物；

5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解，冷却获得生物制药用多肽偶联化合物水凝胶体系。

所述多肽化合物的序列如下：甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-络氨酸。

所述生物制药用多肽化合物通过固相合成法合成。

所述生物制药用多肽化合物占水凝胶制剂的重量百分比为1％。

所述弱碱水溶液为碳酸钠水溶液。

实施例3

一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接，包括如下制备工艺：

1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；

2)取上清液，硫酸铵分级沉淀，取沉淀透析脱盐，采用离子交换柱层析分离；

3)分别收集活性峰，透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到了纯度为99％的目标活性化合物；

4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物生物制药用多肽化合物；

5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解，冷却获得生物制药用多肽偶联化合物水凝胶体系。

所述多肽化合物的序列如下：甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-络氨酸。

所述生物制药用多肽化合物通过固相合成法合成。

所述生物制药用多肽化合物占水凝胶制剂的重量百分比为0.5％。

所述弱碱水溶液为碳酸钠水溶液。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (6)

1.一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于，所述生物制药用多肽化合物由目标活性化合物和多肽化合物通过酰胺键连接。

2.根据权利要求1所述的一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于，包括如下制备工艺：

1)取目标物取出内容物清洗，加入缓冲液匀浆、提取，离心；

2)取上清液，硫酸铵分级沉淀，取沉淀透析脱盐，采用离子交换柱层析分离；

3)分别收集活性峰，透析脱盐后经疏水层析柱分离，得到了纯度为99％的目标活性化合物；

4)将目标活性化合物置于固相反应器中，依次加入二氯甲烷浸泡，依次加入络氨酸、苯丙氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸，延长肽链直至获得终产物生物制药用多肽化合物；

5)将生物制药用多肽化合物分散于水中，加入弱碱水溶液，加热，至其完全溶解，冷却获得生物制药用多肽偶联化合物水凝胶体系。

3.根据权利要求1所述的一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于：所述多肽化合物的序列如下：甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-络氨酸。

4.根据权利要求1所述的一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于：所述生物制药用多肽化合物通过固相合成法合成。

5.根据权利要求1所述的一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于：所述生物制药用多肽化合物占水凝胶制剂的重量百分比为0.05％-1％。

6.根据权利要求1所述的一种生物制药用多肽化合物的制备工艺，其特征在于：所述弱碱水溶液为碳酸钠水溶液。