CN110167961A

CN110167961A - 用于治疗或预防c5相关疾病的药物组合物和治疗或预防c5相关疾病的方法

Info

Publication number: CN110167961A
Application number: CN201880005975.XA
Authority: CN
Inventors: 四宫贤治; 米山洸一郎; 柴原宪仁; 坪井良德; 福泽拓; 原谷健太; 三瓶全次郎; 卡特琳·博格曼; 吉恩·艾瑞克·查罗因
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG; Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG; Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-01-31
Filing date: 2018-01-31
Publication date: 2019-08-23
Also published as: EP3577135B1; KR20180099625A; BR112019015426A2; SG11201801401UA; KR20230043247A; IL307593A; KR20190104982A; JP2022168209A; JP2018141025A; JP2018123125A; MY201148A; KR101949891B1; PL3577135T3; EP4223774A2; KR20220027265A; RU2019126664A3; EP3577135A1; US20190367599A1; RU2019126664A; AU2018215039A1

Abstract

本发明涉及用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物和治疗或预防C5相关疾病的方法。本发明进一步涉及抗‑C5抗体或含有抗‑C5抗体的药物组合物的剂量和施用。

Description

用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物和治疗或预防C5相关疾病的方法

技术领域

本发明涉及抗-C5抗体的剂量和施用。

背景技术

补体系统在免疫复合物的清除和对传染物、外源抗原、病毒感染的细胞和肿瘤细胞的免疫应答中起关键作用。存在约25-30种补体蛋白，其被发现是血浆蛋白和膜辅因子的复合物集合。补体组分通过在一系列复杂的酶切和膜结合事件中相互作用而实现其免疫防御功能。所产生的补体级联导致产生具有调理素、免疫调节和溶菌功能的产物。

目前，被广泛接受的是，补体系统可以通过三种不同的途径被激活：经典途径，凝集素途径和旁路途径。这些途径共有许多组分，并且虽然其初始步骤有不同，但其集中并共有相同的负责激活和摧毁靶细胞的晚期补体组分(C5至C9)。

经典途径通常通过形成抗原-抗体复合物而被激活。独立地，凝集素途径激活的第一步是具体凝集素如甘露聚糖-结合凝集素(MBL)、H-ficolin，M-ficolin、L-ficolin和C-型凝集素CL-11的结合。相反，旁路途径自发进行低水平的回转激活，这可以容易地在外源或其他异常表面(细菌，酵母，病毒感染的细胞，或损伤的组织)上被放大。这些途径会聚于一点，即补体组分C3被活性蛋白酶切割从而产生C3a和C3b。

C3a是一种过敏毒素。C3b结合细菌和其他细胞，以及某些病毒和免疫复合物，并且将其标记用于自循环中除去(已知为调理素的作用)。C3b还与其他组分形成复合物从而形成C5转化酶，该酶将C5切割成C5a和C5b。

C5是在正常血清中发现的约80μg/ml(0.4μM)的190kDa的蛋白。C5是糖基化的，其约1.5-3％的质量归于碳水化合物。成熟的C5是二硫键连接的115kDaα链和75kDaβ链的异源二聚体。C5被合成为1676个氨基酸的单链前体蛋白(pro-C5前体)(见，例如，PTL1和PTL2)。pro-C5前体被切割从而产生作为氨基端片段的β链和作为羧基端片段的α链。α链和β链多肽片段经由二硫键彼此连接并且构成成熟的C5蛋白。

成熟的C5在补体途径的激活期间被切割成C5a和C5b片段。C5a被C5转化酶自C5的α链切割，作为包含α链的前74个氨基酸的氨基端片段。成熟的C5的剩余部分是片段C5b，其含有经二硫键连接的剩余的α链和β链。C5a的11kDa分子量中的约20％归于碳水化合物。

C5a是另一种过敏毒素。C5b与C6、C7、C8和C9组合而形成膜攻击复合物(MAC，C5b-9，在靶细胞表面处的最终补体复合物(TCC))。当足够数量的MAC插入靶细胞膜中时，形成MAC小孔从而介导靶细胞的快速渗透性溶胞作用。

如以上提及的，C3a和C5a是过敏毒素。其可以触发肥大细胞脱粒，这释放组胺和其他炎症介质，导致平滑肌收缩，血管透性增加，白细胞激活，及其他炎性现象，包括导致细胞过多的细胞增殖。C5a还充当趋化肽，其用于吸引粒细胞如嗜中性粒细胞，嗜曙红细胞，嗜碱性粒细胞和单核细胞至补体激活位点。

C5a的活性由血浆酶羧肽酶N调节，所述酶自C5a除去羧基端精氨酸，从而形成C5a-des-Arg衍生物。C5a-des-Arg显示未修饰的C5a的仅1％的过敏性活性和多形核趋化活性。

功能正常的补体系统提供有力的针对感染微生物的防御，而补体的不适当的调节或激活牵涉多种病症的发病，所述病症包括，例如，类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis，RA)；狼疮性肾炎(1upus nephritis)；缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusioninjury)；阵发性夜间血红蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria，PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(atypical hemolytic uremic syndrome，aHUS)；致密沉积物病(dense deposit disease，DDD)；黄斑变性(例如，年龄相关性黄斑变性(age-relatedmacular degeneration，AMD))；溶血(hemolysis)，肝酶升高(elevated liver enzymes)，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(thrombotic thrombocytopenicpurpura，TTP)；自发性流产(spontaneous fetal loss)；微量免疫脉管炎(Pauci-immunevasculitis)；大疱性表皮松解(epidermolysis bullosa)；再发性流产(recurrent fetalloss)；多发性硬化(multiple sclerosis，MS)；外伤性脑损伤(traumatic brain injury)；和由心肌梗死(myocardial infarction)，心肺分流术(cardiopulmonary bypass)和血液透析(hemodialysis)导致的损伤(见，例如，NPL1)。因此，抑制过度的或不受控的补体激活级联可以为患有所述病症的患者提供临床益处。

阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)是一种不常见的血液疾病，其中红血球受损并且因此比正常红血球更快地被破坏。PNH是由于具有位于X染色体上的PIG-A(磷脂酰肌醇聚糖A型)基因的体突变的造血干细胞的克隆扩增所致。PIG-A的突变导致糖基磷脂酰肌醇(GPI)合成的早期阻断，该分子是许多蛋白锚定到细胞表面所需要的。因此，PNH血细胞缺少GPI-锚定的蛋白，所述蛋白包括补体-调节蛋白CD55和CD59。在正常条件下，这些补体-调节蛋白阻断细胞表面上MAC的形成，由此阻止红血球溶胞。在PNH中，不存在GPI-锚定的蛋白导致补体-介导的溶血。

PNH被表征为溶血性贫血(红血球数量减少)，血红蛋白尿(尿中存在血红蛋白，睡眠后尤其明显)，和血红蛋白血症(在血流中存在血红蛋白)。已知受PNH所扰的个体具有突然发作，其在此处被定义为深色尿的发生。溶血性贫血是由于通过补体组分的红血球的血管内破坏所致。其他已知的症状包括言语障碍症，疲劳，勃起功能障碍，血栓形成和复发性腹痛。

依库珠单抗(Eculizumab)是针对补体蛋白C5的人源化单克隆抗体，并且是第一种被批准用于治疗阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)和非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)的疗法(见，例如，NPL2)。依库珠单抗抑制C5转化酶将C5切割成C5a和C5b，这防止产生最终的补体复合物C5b-9。C5a和C5b-9都导致表征为PNH和aHUS的晚期补体介导的事件(也见，PTL3，PTL4，PTL5和PTL6)。

若干报道已经描述了抗-C5抗体。例如，PTL7描述了结合C5的α链但是不结合C5a并且阻断C5的活化的抗-C5抗体，而PTL8描述了抑制C5a形成的抗-C5单克隆抗体。另一方面，PTL9描述了识别C5的α链上的C5转化酶的蛋白水解位点并抑制C5向C5a和C5b转化的抗-C5抗体。PTL10描述了亲和力常数为至少1x10⁷M^-1的抗-C5抗体。

抗体(IgG)结合新生儿Fc受体(FcRn)，并且具有长的血浆保留时间。典型地在酸性条件(例如，pH 6.0)下观察到IgG与FcRn的结合，并且在中性条件(例如，pH 7.4)下几乎观察不到。典型地，IgG经由胞吞作用非特异性地进入到细胞中，并且通过在酸性条件下结合内体中的内体FcRn而回到细胞表面。然后，在血浆中在中性条件下IgG与FcRn解离。没有结合FcRn的IgG在溶酶体中被分解。当通过向IgG的Fc区中引入突变来消除酸性条件下其FcRn结合能力时，IgG不从内体再循环到血浆中，这导致IgG的血浆保留的显著损害。为了提高IgG的血浆保留，增强其在酸性条件下的FcRn结合的方法已被报道。当通过向IgG的Fc区引入氨基酸置换来提高其在酸性条件下的FcRn结合时，IgG更有效地从内体再循环到血浆，并且由此显示提高的血浆保留。同时，还报道了，在中性条件下具有增强的FcRn结合的IgG在血浆中在中性条件下不与FcRn解离(即使是在其经由其在内体中在酸性条件下与FcRn结合而返回细胞表面时)，并且之后其血浆保留保持不变，或者变差(见，例如，NPL3；NPL4；NPL5)。

最近，以pH依赖性方式结合抗原的抗体已被报道(见，例如，PTLl1和PTL12)。这些抗体在血浆中性条件下强烈地结合抗原并且在内体酸性条件下与抗原解离。在与抗原解离后，所述抗体在经由FcRn再循环至血浆时变得能够再次结合抗原。因此，单个抗体分子可以重复地结合多个抗原分子。通常，抗原的血浆保留比具有上述FcRn介导的再循环机制的抗体的血浆保留短得多。因此，当抗原与抗体结合时，抗原通常显示延长的血浆保留，从而导致抗原血浆浓度的增加。另一方面，已经报道了，与典型的抗体相比，上述以pH依赖性方式结合抗原的抗体更快速地将抗原从血浆中消除，因为其在FcRn介导的再循环过程期间在内体内与抗原解离。PTL13还描述了计算机建模分析，所述分析显示具有针对C5的pH依赖性结合的抗体可以延伸抗原敲减(knockdown)。

引用列表

专利文献

[PTL1]美国专利号6,355,245

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[PTL3]WO 2005/074607

[PTL4]WO 2007/106585

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[PTL6]WO 2010/054403

[PTL7]WO 95/29697

[PTL8]WO 2002/30985

[PTL9]WO 2004/007553

[PTL10]WO 2010/015608

[PTL1l]WO 2009/125825

[PTL12]WO 2011/122011

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非专利文献

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[NPL5]Dall′Acqua等，J.Immunol.169(9)：5171-5180(2002)

发明概述

本发明提供了用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物和治疗或预防C5相关疾病的方法。本发明还提供了抗-C5抗体或含有抗-C5抗体的药物组合物的剂量和施用。

本发明的发明人研究了用于治疗和/或预防C5相关疾病的抗-C5抗体的有效剂量和施用。结果，本发明人发现，通过静脉施用抗体，抗-C5抗体的血浆浓度迅速增加至超过治疗有效水平，并且通过在静脉施用后皮下施用抗体将浓度保持在该水平。

本发明人还发现了合适的给药条件，包括抗体剂量、静脉施用或皮下施用的频率和间隔、静脉施用和皮下施用之间的间隔以及从其他药物的转换。

具体而言，本发明涉及：

[1]用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用，其中初始剂量的所述组合物在静脉施用一剂另一种药物组合物后施用，其中另一种药物组合物被配制用于静脉注射并包含抗-C5抗体。

[2]用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用，其中在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前，施用一剂所述组合物，其中另一种药物组合物被配制用于皮下注射并包含抗-C5抗体。

[3][1]或[2]的药物组合物，其中初始剂量的用于皮下注射的组合物在施用一剂用于静脉注射的组合物的同一天或1天至28天之后施用。

[4][1]-[3]中任一项的药物组合物，其中用于皮下注射的组合物每3至42天给予一次。

[5][1]-[4]中任一项的药物组合物，其中用于静脉注射的组合物施用两次或更多次且每小时至每14天给予一次。

[6][1]-[5]中任一项的药物组合物，其中用于皮下注射的组合物以17至6,000mg抗体的剂量给予。

[7][1]-[6]中任一项的药物组合物，其中用于静脉注射的组合物以50至5,000mg抗体的剂量给予。

[8][1]-[7]中任一项的药物组合物，其中所述组合物用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品治疗的受试者的C5相关疾病，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后施用。

[9][8]的药物组合物，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后的第3天或3天后施用。

[10][8]或[9]的药物组合物，其中药理学产品包含靶向C5 mRNA的siRNA，或与所述组合物中包含的抗-C5抗体不同的抗-C5抗体。

[11][8]-[10]中任一项的药物组合物，其中所述药理学产品包含依库珠单抗或其衍生物。

[12]用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并以17至6,000mg抗体的剂量皮下施用。

[13]用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且以50至5,000mg抗体的剂量静脉施用。

[14][1]-[13]中任一项的药物组合物，其中C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤。

[15]治疗或预防C5相关疾病的方法，其中所述方法包括向受试者静脉施用被配制用于静脉注射并包含抗-C5抗体的第一药物组合物，并在施用第一组合物后向所述受试者皮下施用被配制用于皮下注射并包含抗-C5抗体的第二药物组合物。

[16][15]的方法，其中初始剂量的第二组合物施用在最终剂量的第一组合物的同一天或1天至28天后施用。

[17][15]或[16]的方法，其中第二组合物每3至42天给予一次。

[18][15]-[17]中任一项的方法，其中第一组合物施用两次或更多次，并且每小时施用一次至每14天给予一次。

[19][15]-[18]中任一项的方法，其中第二组合物以17至6,000mg抗体的剂量施用。

[20][15]-[19]中任一项的方法，其中第一组合物以50至5,000mg抗体的剂量给予。

[21][15]-[20]中任一项的方法，其中所述方法用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品治疗的受试者的C5相关疾病，其中初始剂量的第一组合物在施用最终剂量的所述药理学产品后施用。

[22][21]的方法，其中初始剂量的第一组合物在施用最终剂量的所述药理学产品后的第3天或3天后施用。

[23][21]或[22]的方法，其中所述药理学产品包含靶向C5mRNA的siRNA，或与所述第一组合物中包含的抗体不同的抗-C5抗体。

[24][21]-[23]中任一项的方法，其中所述药理学产品包含依库珠单抗或其衍生物。

[25]治疗或预防C5相关疾病的方法，其中所述方法包括以17至6,000mg抗体的剂量通过皮下注射向受试者施用包含抗-C5抗体的药物组合物。

[26]治疗或预防C5相关疾病的方法，其中所述方法包括以50至5,000mg抗体的剂量通过静脉注射向受试者施用包含抗-C5抗体的药物组合物。

[27][15]-[26]中任一项的方法，其中C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤。

[28]抗-C5抗体在制备用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物中的用途，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用，其中在静脉施用一剂另一种药物组合物后施用初始剂量的所述组合物，并且其中所述另一种药物组合物被配制用于静脉注射并包含抗-C5抗体。

[29]抗-C5抗体在制备用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物中的用途，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用，其中一剂所述组合物在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前施用，其中所述另一种药物组合物被配制用于皮下注射并包含抗-C5抗体。

[30][28]或[29]的用途，其中初始剂量的用于皮下注射的组合物在施用一剂用于静脉注射的组合物的同一天或1天至28天之后施用。

[31][28]-[30]中任一项的用途，其中用于皮下注射的组合物每3至42天给予一次。

[32][28]-[31]中任一项的用途，其中用于静脉注射的组合物施用两次或更多次，并且每小时给予一次至每14天给予一次。

[33][28]-[32]中任一项的用途，其中用于皮下注射的组合物以17至6,000mg抗体的剂量给予。

[34][28]-[33]中任一项的用途，其中用于静脉注射的组合物以50至5,000mg抗体的剂量给予。

[35][28]-[34]中任一项的用途，其中用于静脉注射的组合物和用于皮下注射的组合物用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品治疗的受试者的C5相关疾病，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后施用。

[36][35]的用途，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后的第3天或3天后施用。

[37][35]或[36]的用途，其中所述药理学产品包含靶向C5 mRNA的siRNA，或与所述组合物中包含的抗-C5抗体不同的抗-C5抗体。

[38][35]-[37]中任一项的用途，其中所述药理学产品包含依库珠单抗或其衍生物。

[39]抗-C5抗体在制备用于治疗或预防C5相关疾病的第一和第二药物组合物中的用途，其中第一药物组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用，其中第二药物组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用，并且其中第一和第二药物组合物的施用按照一个或更多个静脉剂量的第一药物组合物和一个或更多个皮下剂量的第二药物组合物的顺序进行。

[40]抗-C5抗体在制备用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物中的用途，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且以17至6,000毫克抗体的剂量皮下施用。

[41]抗-C5抗体在制备用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物中的用途，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且以50至5,000毫克抗体的剂量静脉施用。

[42][28]-[41]中任一项的用途，其中C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤。

[43]一种用于治疗或预防C5相关疾病的产品，其包含(i)容器；(ii)容器中的药物组合物，其中所述药物组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用；和(iii)文件，其指示在静脉施用一剂另一种药物组合物后施用该药物组合物，其中所述另一种药物组合物被配制用于静脉注射，并且包括抗-C5抗体。

[44]一种用于治疗或预防C5相关疾病的产品，其包含(i)容器；(ii)容器中的药物组合物，其中所述药物组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用；和(iii)文件，其指示在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前施用该药物组合物，其中所述另一种药物组合物被配制用于皮下注射，并且包括抗-C5抗体。

[45]一种用于治疗或预防C5相关疾病的产品，其包含(i)第一容器；(ii)第一容器中的第一药物组合物，其中第一药物组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用；(iii)第二容器；(iv)第二容器中的第二药物组合物，其中第二药物组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用；(v)文件，其指示第一药物组合物和第二药物组合物以一个或更多个静脉剂量的用于静脉注射的第一药物组合物和一个或更多个皮下剂量的用于皮下注射的第二药物组合物的顺序施用。

[46][43]-[45]中任一项的产品，其中所述产品用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品治疗的受试者的C5相关疾病，其中该文件进一步指示在施用最终剂量的药理学产品后，施用初始剂量的任一所述药物组合物。

[47]一种用于治疗或预防C5相关疾病的产品，其包含(i)容器；(ii)容器中的药物组合物，其中药物组合物被配制用于皮下注射并包含抗-C5抗体；(iii)文件，其指示该药物组合物皮下施用并且以剂量为17至6,000mg抗体。

[48]一种用于治疗或预防C5相关疾病的产品，其包含(i)容器；(ii)容器中的药物组合物，其中药物组合物被配制用于静脉注射并包含抗-C5抗体；(iii)文件，其指示该药物组合物静脉施用并且以剂量为50至5,000mg抗体。

[49][43]-[48]中任一项的产品，其中C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤。

附图说明

[图1]

图1显示了通过皮下注射(a)或静脉注射(b)抗体305LO15，食蟹猴中血浆305LO15浓度随时间的变化。通过ELISA测量血浆305LO15浓度。每个点显示(a)中三个雄性或三个雌性的平均值和(b)中六个雄性或六个雌性的平均值。

[图2]

图2显示了食蟹猴中血浆305LO15浓度随时间的变化，其中将抗体305LO15的初始静脉注射和随后皮下维持注射施用至猴子。通过ELISA测量血浆305LO15浓度。每个点显示五个雄性或五个雌性的平均值。

[图3a]

图3a是对于每种指定的给药量和途径，相对于每个抗体血浆浓度绘制的血浆游离C5浓度的图。IV，静脉注射；SC，皮下注射。

[图3b]

图3b是对于每种指定的给药量和途径，相对于每个抗体血浆浓度绘制的测量的补体活性的图。IV，静脉注射；SC，皮下注射。

[图4a]

图4a显示了为第1部分临床研究设计的给药方案中血浆305LO15浓度的模拟时间进程。IV，静脉注射；SC，皮下注射。

[图4b]

图4b显示了为第2部分临床研究设计的给药方案中血浆305LO15浓度的模拟时间进程。SC，皮下注射；QW，每周施用一次。

[图4c]

图4c显示了为第3部分临床研究设计的给药方案中血浆305LO15浓度的模拟时间进程。SC，皮下注射；QW，每周施用一次；Q2W，每两周施用一次；Q4W，每四周施用一次。

[图5]

图5显示了由依库珠单抗(ECZ)，人C5(hC5)和/或305LO15形成的免疫复合物的分布图，其通过体外尺寸排阻色谱法在pH7.4(顶部)和pH6.0(底部)进行分析。

[图6]

图6显示了接受75mg IV输注(超过60分钟)的健康受试者的个体观察和模拟的血浆305LO15浓度-时间曲线。灰色阴影区域是模拟的305LO15浓度-时间曲线的95％预测区间。箭头指示的实线是模拟的中值305LO15浓度-时间曲线。虚线表示40微克/毫升的PD阈值。

[图7]

图7显示了接受125mg IV输注(超过60分钟)的健康受试者的个体观察和模拟的血浆305LO15浓度-时间曲线。灰色阴影区域是模拟的305LO15浓度-时间曲线的95％预测区间。箭头指示的实线是模拟的中值305LO15浓度-时间曲线。虚线表示40微克/毫升的PD阈值。

[图8]

图8显示了接受100mg SC的健康受试者的个体观察和模拟的血浆305LO15浓度-时间曲线。灰色阴影区域是模拟的305LO15浓度-时间曲线的95％预测区间。箭头指示的实线是模拟的中值305LO15浓度-时间曲线。对于单次100mg SC给药进行的模拟，预计生物利用度为90％。虚线表示40微克/毫升的PD阈值。

[图9]

图9显示了单次IV输注或SC注射至健康受试者后血浆305LO15浓度与溶血活性(LIA)之间的关系。使用掺入不同浓度的305LO15的人血浆样品产生离体LIA剂量-反应曲线。

[图10a]

图10a显示PNH患者(患者X)的血清LDH水平的时间曲线，其在第2部分研究中，在第1天接受375mg 305LO15的IV剂量，在第8天接受500mg 305LO15的IV剂量，在第22天接受1000mg 305LO15的IV剂量，在第36天接受170mg 305LO15的SC剂量，在第43天接受170mg305LO15的SC剂量。

[图10b]

图10b显示PNH患者(患者X)的溶血活性(LIA)的时间曲线，所述PNH患者在第2部分研究中，在第1天接受375mg 305LO15的IV剂量，在第8天接受500mg 305LO15的IV剂量，在第22天接受1000mg 305LO15的IV剂量，在第36天接受170mg 305LO15的SC剂量，在第43天接受170mg 305LO15的SC剂量。

具体实施方案

本文中描述或引用的技术和方法是本领域技术人员使用常规方法学通常很好理解并且常规使用的，如，例如，以下中所述的广泛使用的方法Sambrook等，MolecularCloning：A Laboratory Manual第3版(2001)Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.；Current Protocols in Molecular Biology(F.M.Ausubel等，编，(2003))；系列Methods in Enzymology(Academic Press，Inc.)：PCR 2：A PracticalApproach(M.J.MacPherson，B.D.Hames和G.R.Taylor编(1995))，Harlow和Lane，编(1988)Antibodies，A Laboratory Manual，and Animal Cell Culture(R.I.Freshney，ed.(1987))；Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait，ed.，1984)；Methods in MolecularBiology，Humana Press；Cell Biology：A Laboratory Notebook(J.E.Cellis，ed.，1998)Academic Press；Animal Cell Culture(R.I.Freshney)，ed.，1987)；Introduction toCell and Tissue Culture(J.P.Mather和P.E.Roberts，1998)Plenum Press；Cell andTissue Culture：Laboratory Procedures(A.Doyle，J.B.Griffiths，和D.GNewell，编，1993-8)J.Wiley&Sons；Handbook of Experimental Immunology(D.M.Weir和C.C.Blackwell，编)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(J.M.Miller和M.P.Calos，编，1987)；PCR：The Polymerase Chain Reaction，(Mullis等，编，1994)；Current Protocols in Immunology(J.E.Coligan等，编，1991)；Short Protocols inMolecular Biology(Wiley&Sons，1999)；Immunobiology(C.A.Janeway和P.Travers，1997)；Antibodies(P.Finch，1997)；Antibodies：A Practical Approach(D.Catty.，ed.，IRL Press，1988-1989)；Monoclonal Antibodies：A Practical Approach(P.Shepherd和C.Dean，编，Oxford University Press，2000)；Using Antibodies：A Laboratory Manual(E.Harlow和D.Lane Cold Spring Harbor Laboratory Press，1999)；The Antibodies(M.Zanetti和J.D.Capra，编，Harwood Academic Publishers，1995)；以及Cancer：Principles and Practice of Oncology(V.T.DeVita等，编，J.B.Lippincott Company，1993)。

I.定义

“施用间隔”(各次施用之间的间隔)表示施用第n次剂量(n为1或更大的整数)和施用第(n+1)次剂量之间的间隔。

II.用于皮下注射的药物组合物

在本发明中配制用于皮下注射的药物组合物用于治疗或预防C5相关疾病，包含抗-C5抗体，并且皮下施用。可以使用普通装置和方法进行皮下注射，以通过注射将药物组合物施用至皮下组织。还可以选择用于皮下注射的具体装置和方法。

示例性的抗-C5抗体

抗-C5抗体不限于特定实施方案，并且可以适当地选自被称为抗-C5抗体的抗体。术语“抗-C5抗体”或“结合C5的抗体”是指能够以足够的亲和力结合C5的抗体，使得该抗体可用作靶向C5的治疗剂。

在一个方面，抗-C5抗体抑制C5的活化。在某些实施方案中，抗-C5抗体阻止切割C5形成C5a和C5b，因此阻止产生与C5a相关的过敏毒素活性，并且阻止与C5b相关的C5b-9膜攻击复合物(MAC)的组装。在某些实施方案中，抗-C5抗体阻断C5通过C5转化酶向C5a和C5b的转化。在某些实施方案中，抗-C5抗体阻止C5转化酶接近C5上的切割位点。在某些实施方案中，抗-C5抗体阻断由C5的活化引起的溶血活性。在另外的实施方案中，抗-C5抗体经由经典途径和/或旁路途径抑制C5的活化。

在一个方面，本发明的药物组合物可用于至少部分地基于上述抗-C5抗体在抑制C5活化中的活性来治疗或预防C5相关疾病。

在某些实施方案中，C5活性可以作为其在受试者体液中的细胞溶解能力的函数而被测量。C5的细胞溶解能力或其减弱可以通过本领域中已知的方法测量，例如，常规溶血测定，如Kabat和Mayer(编辑)，Experimental Immunochemistry，第2版，135-240，Springfield，IL，CC Thomas(1961)，135-139页描述的溶血测定，或所述测定的常规变形，如例如Hillmen等，N.Engl.J.Med.350(6)：552-559(2004)中描述的鸡红血球溶血方法。在某些实施方案中，使用CH50eq测定来量化C5活性或对其的抑制。CH50eq测定是用于测量血清中总的经典补体活性的方法。该测试是溶胞测定，其使用抗体敏化的红血球作为经典补体途径的激活物，并且使用测试血清的不同稀释液来确定产生50％溶胞作用(CH50)所需的量。溶血百分比可以例如使用分光光度计来确定。CH50eq测定提供对最终补体复合物(TCC)形成的间接测量，因为TCC自身直接对测量的溶血负责。抑制C5激活也可以使用工作实施例中给出并示例的方法检测和/或测量。使用这些或其他合适类型的测定，可以筛选出能够抑制C5活化的候选抗体。在某些实施方案中，抑制C5激活包括：与在类似条件下的阴性对照的作用相比，在测定中C5激活减少至少5％，10％，15％，20％，25％，30％，35％，或40％或更高。在一些实施方案中，其是指抑制C5激活达至少45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，或95％或更高。在优选的实施方案中，抗-C5抗体的表位不同于依库珠单抗的表位。

在某些实施方案中，用于本发明的抗-C5抗体结合C5的β链内的表位。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合C5的β链的MGl-MG2结构域内的表位。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合由C5的β链的氨基酸19-180组成的片段内的表位。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合C5的β链的MG1结构域(SEQ ID NO：1的氨基酸20-124)内的表位。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合由C5的β链(SEQ ID NO：1)的氨基酸33-124组成的片段内的表位。

在某些实施方案中，用于本发明的抗-C5抗体结合由MG1结构域组成的C5的β链内的表位。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合C5的β链(SEQ ID NO：1)内的表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的片段：氨基酸47-57，70-76，和107-110。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合C5的β链(SEQ ID NO：1)的片段内的表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的氨基酸：Thr47，Glu48，Ala49，Phe50，Asp51，Ala52，Thr53，Lys57，His70，Val71，His72，Ser74，Glu76，Val107，Ser108，Lys109，和His110。在某些实施方案中，抗-C5抗体结合C5的β链(SEQ ID NO：1)的片段内的表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的氨基酸：Glu48，Asp51，His70，His72，Lys109，和His110。在某些实施方案中，抗-C5抗体与C5突变体的结合相比其与野生型C5的结合减弱，其中所述C5突变体具有至少一个在选自由以下各项组成的组的位置处的氨基酸置换：Glu48，Asp51，His72，和Lys109。在另一个实施方案中，抗-C5抗体与C5突变体的pH-依赖性结合(在下文描述)相比其与野生型C5的pH-依赖性结合减弱，其中所述C5突变体具有至少一个在选自由以下各项组成的组的位置处的氨基酸置换：His70，His72，和His110。在另一个实施方案中，在C5突变体中，选自Glu48，Asp51和Lys109的位置处的氨基酸被置换成丙氨酸，并且选自His70，His72和His110的位置处的氨基酸被置换成酪氨酸。

在另一个方面，用于本发明的抗-C5抗体可以显示pH依赖性的结合性质。如本文中使用的，表述″pH依赖性的结合″表示抗体″在酸性pH显示的与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″(对于本公开，两种表达可以可交换地使用)。例如，″具有pH依赖性的结合性质″的抗体包括在中性pH下结合C5的亲和力比在酸性pH下更高的抗体。在某些实施方案中，所述抗体在中性pH下结合C5的亲和力是在酸性pH的至少2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更高。在一些实施方案中，所述抗体在pH7.4下结合C5的亲和力比在pH5.8更高。在另外的实施方案中，所述抗体在pH7.4下结合C5的亲和力是在pH5.8的至少2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更高。

对于本公开，抗体对C5的″亲和力″以抗体的KD表示。抗体的KD是指抗体-抗原相互作用的平衡解离常数。抗体结合其抗原的KD值越大，其对所述特定抗原的结合亲和力越弱。因此，如本文中使用的，表述″在中性pH的亲和力比在酸性pH下更高″(或等价表述″pH依赖性的结合″)是指在酸性pH抗体结合C5的KD高于在中性pH抗体结合C5的KD。例如，在本发明的语境中，如果在酸性pH抗体结合C5的KD是在中性pH抗体结合C5的KD的至少2倍高，则认为抗体在中性pH下结合C5的亲和力比在酸性pH下更高。因此，用于本发明的抗-C5抗体包括这样的抗体，所述抗体在酸性pH结合C5的KD是所述抗体在中性pH下结合C5的KD至少2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更多倍高。在另一个实施方案中，所述抗体在中性pH的KD值可以为10^-7M，10^-8M，10^-9M，10^-10 M，10^-11M，10^-12M或更少。在另一个实施方案中，所述抗体在酸性pH的KD值可以为10^-9M，10^-8M，10^-7M，10^-6M或更高。

在另外的实施方案中，如果在pH5.8抗体结合C5的KD是在pH7.4抗体结合C5的KD的至少2倍高，则认为抗体在中性pH下结合C5的亲和力比在酸性pH下更高。在一些实施方案中，抗体在pH5.8结合C5的KD是所述抗体在pH7.4下结合C5的KD的至少3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更多倍高。在另一个实施方案中，所述抗体在pH7.4的KD值可以为10^-7M，10^-8M，10^-9M，10^-10M，10^-11M，10^-12M或更少。在另一个实施方案中，所述抗体在pH5.8的KD值可以为10^-9M，10^-8M，10^-7M，10^-6M或更高。

抗体对特定抗原的结合性质也可以表示为抗体的kd。抗体的kd是指抗体关于特定抗原的解离速率常数并且以单位秒的倒数(即，sec^-1)表示。kd值的增加指示抗体与其抗原的结合较弱。本发明因此包括这样的抗体，所述抗体在酸性pH结合C5的kd值比在中性pH更高。用于本发明的抗体包括这样的抗体，所述抗体在酸性pH结合C5的kd是所述抗体在中性pH下结合C5的kd的至少2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更多倍高。在另一个实施方案中，所述抗体在中性pH的kd值可以为10^-21/s，10^-31/s，10^-41/s，10^-51/s，10^-61/s以下。在另一个实施方案中，所述抗体在酸性pH的kd值可以为10^-31/s，10^-21/s，10^-11/s或更高。用于本发明的抗体还包括这样的抗体，所述抗体在pH5.8结合C5的kd值比在pH7.4更高。用于本发明的抗体包括这样的抗体，所述抗体在pH5.8结合C5的kd是所述抗体在pH7.4下结合C5的kd的至少3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000倍或更多倍高。在另一个实施方案中，所述抗体在pH7.4的kd值可以为10^-21/s，10^-31/s，10^-41/s，10^-51/s，10^-61/s或更少。在另一个实施方案中，所述抗体在pH5.8的kd值可以为10^-31/s，10^-21/s，10^- ¹1/s或更高。

在某些情况中，″在酸性pH与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″被表示为抗体在酸性pH结合C5的KD值与抗体在中性pH下结合C5的KD值之比(或反之亦然)。例如，对于本发明，如果抗体显示2或更高的酸性/中性KD比，则可以认为所述抗体显示″在酸性pH与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″。在某些示例性实施方案中，抗体的pH5.8/pH7.4KD比为2或更高。在某些示例性实施方案中，抗体的酸性/中性KD比可以为2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000或更高。在另一个实施方案中，所述抗体在中性pH的KD值可以为10^-7M，10^-8M，10^-9M，10^-10M，10^-11M，10^- ¹²M或更少。在另一个实施方案中，所述抗体在酸性pH的KD值可以为10^-9M，10^-8M，10^-7M，10^-6M或更高。在另外的情况中，对于本发明来说，如果抗体显示2或更高的pH5.8/pH7.4KD比，则可以认为所述抗体显示″在酸性pH与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″。在某些示例性实施方案中，抗体的pH5.8/pH7.4KD比可以为3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000或更高。在另一个实施方案中，所述抗体在pH7.4的KD值可以为10^-7M，10^-8M，10^-9M，10^-10M，10^-11M，10^-12M或更少。在另一个实施方案中，所述抗体在pH5.8的KD值可以为10^-9M，10^-8M，10^-7M，10^-6M或更高。

在某些情况中，″在酸性pH与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″被表示为抗体在酸性pH结合C5的kd值与抗体在中性pH下结合C5的kd值之比(或反之亦然)。例如，对于本发明，如果抗体显示2或更高的酸性/中性kd比，则可以认为所述抗体显示″在酸性pH与C5的结合与其在中性pH的结合相比减小″。在某些示例性实施方案中，抗体的pH5.8/pH7.4kd比为2或更高。在某些示例性实施方案中，抗体的酸性/中性kd比可以为2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000或更高。在另外的示例性实施方案中，抗体的pH5.8/pH7.4kd比可以为2，3，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100，200，400，1000，10000或更高。在另一个实施方案中，所述抗体在中性pH的kd值可以为10^-21/s，10^-31/s，10^-41/s，10^-51/s，10^-61/s以下。在另一个实施方案中，抗体在pH 7.4的kd值可以为10^-21/s，10^-31/s，10⁴1/s，10^-51/s，10^-61/s以下。在另一个实施方案中，所述抗体在酸性pH的kd值可以为10^-31/s，10^-21/s，10^-11/s或更高。在另一个实施方案中，所述抗体在pH5.8的kd值可以为10^-31/s，10^-21/s，10^-11/s或更高。

如本文中使用的，表述″酸性pH″是指4.0至6.5的pH。表述″酸性pH″包括4.0，4.1，4.2，4.3，4.4，4.5，4.6，4.7，4.8，4.9，5.0，5.1，5.2，5.3，5.4，5.5，5.6，5.7，5.8，5.9，6.0，6.1，6.2，6.3，6.4和6.5中任一个的pH值。在特别的方面，″酸性pH″是5.8。

如本文中使用的，表述″中性pH″是指6.7至约10.0的pH。表述″中性pH″包括6.7，6.8，6.9，7.0，7.1，7.2，7.3，7.4，7.5，7.6，7.7，7.8，7.9，8.0，8.1，8.2，8.3，8.4，8.5，8.6，8.7，8.8，8.9，9.0，9.1，9.2，9.3，9.4，9.5，9.6，9.7，9.8，9.9和10.0中任一个的pH值。在特别的方面，″中性pH″是7.4。

如本文中表示的，KD值以及kd值可以使用基于表面等离子共振的生物传感器来确定以表征抗体-抗原相互作用。KD值和kd值可以在25℃或37℃确定。

在另一个方面，抗-C5抗体包含重链可变结构域(VH)序列，所述VH序列与氨基酸序列SEQ ID NO：2具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，或100％序列同一性。在某些实施方案中，VH序列是氨基酸序列SEQ ID NO：2。在某些实施方案中，具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，或99％同一性的VH序列相对于参比序列包含置换(例如，保守置换)，插入或缺失，但是包含所述序列的抗-C5抗体保持结合C5的能力。在某些实施方案中，SEQ ID NO：2中的总计1至10个氨基酸被置换，插入和/或缺失。在某些实施方案中，所述置换，插入，或缺失发生在HVR外的区域中(即，在FR中)。任选地，抗-C5抗体包含SEQ ID NO：2中的VH序列，包括所述序列的翻译后修饰。在特别的实施方案中，VH包含一个，两个或三个选自以下的HVR：(a)HVR-H1，所述HVR-H1包含氨基酸序列SEQ ID NO：3，(b)HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO：4，和(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO：5。

如本文所用，术语“HVR”代表“高变区”，术语“FR”代表“框架”。

″框架″或″FR″是指不同于高变区(HVR)残基的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由四个FR结构域组成：FR1，FR2，FR3和FR4。因此，在VH(或VL)中HVR和FR序列通常以以下顺序出现：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。

如本文中使用的术语″高变区″或″HVR″是指抗体可变结构域中序列高变(″互补决定区″或″CDR″)和/或形成结构确定的环(″高变环″)和/或含有与抗原接触的残基(″抗原触点″)的各区域。通常，抗体包含六个HVR：VH中的三个(H1，H2，H3)和VL中的三个(L1，L2，L3)。本文中示例性HVR包括：(a)出现在氨基酸残基26-32(L1)，50-52(L2)，91-96(L3)，26-32(H1)，53-55(H2)，和96-101(H3)处的高变环(Chothia，J.Mol.Biol.196：901-917(1987))；(b)出现在氨基酸残基24-34(L1)，50-56(L2)，89-97(L3)，31-35b(H1)，50-65(H2)，和95-102(H3)处的CDR(Kabat等，Sequences of Proteins of Immunological Interest，5thEd.Public Health Service，NIH，Bethesda，MD(1991))；(c)出现在氨基酸残基27c-36(L1)，46-55(L2)，89-96(L3)，30-35b(H1)，47-58(H2)，和93-101(H3)处的抗原触点(MacCallum等，J.Mol.Biol.262：732-745(1996))；以及(d)(a)、(b)和/或(c)的组合，包括HVR氨基酸残基46-56(L2)，47-56(L2)，48-56(L2)，49-56(L2)，26-35(H1)，26-35b(H1)，49-65(H2)，93-102(H3)，和94-102(H3)。可变结构域中的HVR残基和其他残基(例如，FR残基)在本文中根据同上的Kabat等编号。

在另一个方面，抗体包含与氨基酸序列SEQ ID NO：6具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，或100％序列同一性的轻链可结构域(VL)。在某些实施方案中，VL序列是氨基酸序列SEQ ID NO：6。在某些实施方案中，具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，或99％同一性的VL序列相对于参比序列包含置换(例如，保守置换)，插入或缺失，但是包含所述序列的抗-C5抗体保持结合C5的能力。在某些实施方案中，SEQ ID NO：6中的总计1至10个氨基酸被置换，插入和/或缺失。在某些实施方案中，所述置换，插入，或缺失发生在HVR外的区域中(即，在FR中)。任选地，抗-C5抗体包含SEQ ID NO：6中的VL序列，包括所述序列的翻译后修饰。在特别的实施方案中，VL包含一个，两个或三个选自以下的HVR(a)HVR-L1，所述HVR-L1包含氨基酸序列SEQ ID NO：7；(b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO：8；和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO：9。

在另一个实施方案中，抗体是全长抗体，例如完整的IgG1，IgG2，IgG3或IgG4抗体，或通过重组改造为具有来自选自与IgG亚类同源的区域内的IgG1，IgG2，IgG3和IgG4的两种或更多种IgG的区域的抗体。抗体可包含任何合适的包含人Fc区序列(例如，人IgG1，IgG2，IgG3或IgG4Fc区)的Fc区。

Fc区变体

在某些实施方案中，用于本发明的抗-C5抗体包含Fc区变体，在Fc区变体中一个或更多个氨基酸修饰已经引入到抗体的原始序列Fc区中。Fc区变体可以包含在一个或更多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如，置换)的人Fc区序列(例如，人IgG1，IgG2，IgG3或IgG4Fc区)。

在某些实施方案中，本发明考虑这样的抗体变体，其具有一些但非全部效应子功能，这使其对于抗体体内半衰期是重要的而某些效应子功能(如补体和ADCC)非必要或有害的应用是理想的候选物。可以进行体外和/或体内细胞毒性测定以确认CDC和/或ADCC活性的减小/消除。例如，可以进行Fc受体(FcR)结合测定以保证抗体缺少FcγR结合(因此可能缺少ADCC活性)，但是保持FcRn结合能力。介导ADCC的主要细胞，NK细胞，仅表达FcγRIII，而单核细胞表达FcγRI，FcγRII和FcγRIII。造血细胞上的FcR表达被概述于Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol.9：457-492(1991)第464页上的表3中。用于评估目的分子的ADCC活性的体外测定的非限制性实例被描述于美国专利号5,500,362(参见，例如，Hellstrom等Proc.Nat′l Acad.Sci.USA 83：7059-7063(1986))和Hellstrom等，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA 82：1499-1502(1985)；美国专利号5,821,337(参见Bruggemann等，J.Exp.Med.166：1351-1361(1987))中。备选地，可以使用非放射性测定法(参见，例如，用于流式细胞术的ACTI^TM非放射性细胞毒性测定(CellTechnology，Inc.Mountain View，CA)；和CytoTox 96(注册商标)非放射性细胞毒性测定(Promega，Madison，WI))。可用于此种测定的效应器细胞包括外周血单核细胞(PBMC)和天然杀伤(NK)细胞。备选地，或另外地，可以在体内，例如在如Clynes等Proc.Nat′l Acad.Sci.USA 95：652-656(1998)中所述的动物模型中评估目的分子的ADCC活性。也可以进行C1q结合测定以确认抗体不能结合C1q并且因此缺少CDC活性。参见，例如，WO 2006/029879和WO 2005/100402中的C1q和C3c结合ELISA。为了评估补体激活，可以进行CDC测定(参见，例如，Gazzano-Santoro等，J.Immunol.Methods202：163(1996)；Cragg等，Blood 101：1045-1052(2003)；和Cragg等，Blood 103：2738-2743(2004))。也可以使用本领域中已知的方法进行FcRn结合和体内清除/半衰期测定(参见，例如，Petkova等，Int′l.Immunol.18(12)：1759-1769(2006))。

具有减小的效应子功能的抗体包括具有Fc区残基238，265，269，270，297，327和329中的一个或更多个的置换的抗体(美国专利号6,737,056)。此种Fc突变体包括在氨基酸位置265，269，270，297和327中的两或更多处具有置换的Fc突变体，包括所谓的残基265和297置换至丙氨酸的″DANA″Fc突变体(美国专利号7,332,581)。

描述了具有提高的或减少的与FcR的结合的某些抗体变体。(参见，例如，美国专利号6,737,056；WO 2004/056312，和Shields等，J.Biol.Chem.9(2)：6591-6604(2001)。)

在某些实施方案中，抗体变体包含Fc区，所述Fc区具有一个或更多个提高ADCC的氨基酸置换，例如，Fc区的位置298，333和/或334(残基的EU编号)处的置换。

在一些实施方案中，在Fc区中进行改变，所述改变导致改变的(即，提高的或减小的)C1q结合和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)，例如，如美国专利号6,194,551，WO 1999/51642，和Idusogie等，J.Immunol.164：4178-4184(2000)中所述。

US2005/0014934(Hinton等)中描述了这样的抗体，其具有增加的半衰期和提高的与负责将母体IgG转送至胎儿的新生儿Fc受体(FcRn)(J.Immunol.117：587(1976)和Kim等，J.Immunol.24：249(1994))的结合。所述抗体包含具有其中的一个或更多个置换的Fc区，所述置换提高Fc区与FcRn的结合。此种Fc变体包括在以下一个或更多个Fc区残基处具有置换的那些：238，256，265，272，286，303，305，307，311，312，317，340，356，360，362，376，378，380，382，413，424或434，例如，Fc区残基434的置换(美国专利号7,371,826)。

也参见，Duncan，Nature 322：738-40(1988)；美国专利号5,648,260；美国专利号5,624,821；以及涉及Fc区变体的其他实例的WO 1994/29351。

在某些实施方案中，用于本发明的抗-C5抗体包含以上提供的任一实施方案中的VH和包含SEQ ID NO：10，11，12，13，14和15中任一个的氨基酸序列的重链恒定区。在某些实施方案中，抗-C5抗体包含以上提供的任一实施方案中的VL和包含SEQ ID NO：16，17和18中任一个的氨基酸序列的轻链恒定区。

在某些实施方案中，用于本发明的抗-C5抗体是WO2016/098356，WO2017/123636和WO2017/132259中描述的任一种抗体。

在某些实施方案中，在药物组合物通过皮下注射重复施用至受试者的情况下，该组合物每3天至42天施用一次。皮下注射之间的适当施用间隔可根据受试者或患者的病况在合适的范围内确定。皮下注射的具体施用间隔为3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天，15天，16天，17天，18天，19天，20天，21天，22天，23天，24天，25天，26天，27天，28天，29天，30天，31天，32天，33天，34天，35天，36天，37天，38天，39天，40天，41天或42天。在优选的实施方案中，施用间隔是4天至35天。在进一步优选的实施方案中，施用间隔是5天至31天。在最优选的实施方案中，施用间隔是7天，14天或28天或一个月。药物组合物可以每周施用一次(每周一次)，每两周施用一次(每两周一次)，或每四周施用一次(每四周或每月一次)。较长的间隔可以减轻患者的负担或痛苦。

在某些实施方案中，药物组合物以17至6,000mg抗体的剂量皮下施用。可以根据受试者或患者的病况在合适的范围内确定合适的剂量。在药物组合物重复皮下施用受试者的情况下，剂量不必始终相同，并且可以任意确定，只要剂量在合适的范围内即可。例如，剂量可以逐渐减少。在优选的实施方案中，剂量范围是25至4,000mg抗体。在进一步优选的实施方案中，剂量范围是50至2,000mg抗体。在最优选的实施方案中，剂量范围是75至1,000mg抗体。具体的优选剂量是100mg，170mg，340mg，600mg和680mg。进一步优选的剂量是170mg，340mg，600mg和680mg。当每周施用药物组合物(间隔约7天)时，优选剂量为170mg。当每两周施用药物组合物(间隔约14天)时，优选剂量为340mg。当每四周施用药物组合物(间隔约28天)时，优选的剂量为600mg或680mg。每四周600mg或680mg的施用方案是特别优选的，因为它可以减轻患者的负担或痛苦。

在某个实施方案中，可用于皮下注射的普通组合物的任何药学上可接受的载体可包括在药物组合物中。用于皮下注射的一种载体可以从本领域公知的载体中适当选择。

在某个实施方案中，药物组合物的制剂可以是选自由以下各项组成的组中的任何一种：液体，半固体和固体。通常通过将液体制剂冷冻干燥来制备固体组合物。通常就在皮下注射之前使用水或盐水溶液重构冷冻干燥的组合物。

当皮下施用组合物时，组合物的液体制剂中的抗-C5抗体浓度在本领域的常规范围内确定。在某个实施方案中，用于皮下注射的组合物的体积在本领域的常规范围内确定。

在某些实施方案中，C5相关疾病是补体介导的疾病或病况，其涉及C5的过度或不受控制的活化。在某些实施方案中，C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤；难治性全身性重症肌无力(g MG)；视神经脊髓炎(NMO)。在优选的实施方案中，C5相关疾病是选自PNH，aHUS，g MG和NMO中的至少一种。

在某些方面，在静脉施用一剂另一种药物组合物后施用初始剂量的用于皮下注射的组合物。用于静脉注射的药物组合物与下文中提到的相同。

在某些实施方案中，在静脉施用一剂用于静脉注射的组合物的同一天或一天或更多天之后，皮下施用用于皮下注射的组合物。在施用初始剂量的用于皮下注射的组合物之前，可以向受试者或患者施用一剂或更多剂用于静脉注射的组合物。在优选的实施方案中，在施用最终剂量的用于静脉注射的组合物后，施用初始剂量的用于皮下注射的组合物。

在某些实施方案中，在施用一剂用于静脉注射的组合物的同一天或1天至28天后，施用初始剂量的用于皮下注射的组合物。一剂用于静脉注射的组合物与初始剂量的用于皮下注射的组合物之间的具体间隔是0天(即，在24小时内)，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天，15天，16天，17天，18天，19天，20天，21天，22天，23天，24天，25天，26天，27天或28天。在优选的实施方案中，间隔是1天至14天。在进一步优选的实施方案中，间隔是3天至10天。在最优选的实施方案中，间隔是5天至8天。

III.用于静脉注射的药物组合物

在本发明中被配制用于静脉注射的药物组合物用于治疗或预防C5相关疾病，包含抗-C5抗体，并且静脉施用。可以使用普通装置和方法进行静脉注射，以通过注射将药物组合物施用至静脉。还可以选择用于静脉注射的具体装置和方法。

用于静脉注射的抗-C5抗体可以是如上所述的用于皮下注射的药物组合物的任何抗体。用于静脉注射的药物组合物和用于皮下注射的药物组合物可含有相同的抗-C5抗体或可含有不同的抗-C5抗体。在优选的实施方案中，用于静脉注射的抗-C5抗体是与上述用于皮下注射相同的抗体。

在某些实施方案中，药物组合物以50至5,000mg抗体的剂量静脉施用。可以根据受试者或患者的病况在合适的范围内确定合适的剂量。在药物组合物重复静脉施用受试者的情况下，剂量不必始终相同，并且可以任意确定，只要剂量在合适的范围内即可。例如，剂量可以逐渐减少。在优选的实施方案中，剂量范围是55至4,000mg抗体。在进一步优选的实施方案中，剂量范围是60至2,500mg抗体。在最优选的实施方案中，剂量范围是70至1,500mg抗体。具体的优选的剂量是75mg，125mg，150mg，300mg，375mg，500mg和1,000mg。进一步优选的剂量是375mg，500mg和1,000mg，其中，最优选的剂量是1,000mg。

在某些实施方案中，通过静脉注射施用药物组合物的次数没有特别限制并且可以是一次或更多次。在优选实施方案中，次数是一次，两次或三次。在进一步优选的实施方案中，次数是一次或两次。在最优选的实施方案中，次数是一次。较少的次数可以减轻患者的负担或痛苦。

在某些实施方案中，在药物组合物重复静脉施用受试者或患者的情况下，组合物每小时施用一次至每14天施用一次。静脉注射之间的适当施用间隔可根据受试者或患者的病况在合适的范围内确定。静脉注射之间的具体施用间隔为1小时，2小时，3小时，4小时，5小时，6小时，7小时，8小时，9小时，10小时，11小时，12小时，13小时，14小时，15小时，16小时，17小时，18小时，19小时，20小时，21小时，22小时，23小时，24小时，25小时，26小时，27小时，28小时，29小时，30小时，31小时，32小时，33小时，34小时，35小时，36小时，37小时，38小时，39小时，40小时，41小时，42小时，43小时，44小时，45小时，46小时，47小时，48小时，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天或14天。在优选的实施方案中，施用间隔是24小时至10天。在进一步优选的实施方案中，施用间隔是48小时至7天。在最优选的实施方案中，施用间隔是3至5天。

在某个实施方案中，可用于静脉注射的普通组合物的任何药学上可接受的载体可包括在组合物中。用于静脉注射的一种载体可以从本领域公知的载体中适当选择。

在某些实施方案中，药物组合物的制剂可以是选自由以下各项组成的组中的任何一种：液体，半固体和固体中。销售的组合物通常通过将液体制剂冷冻干燥而制备。通常就在静脉注射之前使用水或盐水溶液重构冷冻干燥的组合物。用于静脉注射的药物组合物的制剂可以与用于皮下注射的药物组合物的制剂相同或不同。在优选的实施方案中，用于静脉注射的药物组合物的制剂与用于皮下注射的药物组合物的制剂相同，以降低制造成本。

当静脉施用组合物时，组合物的液体制剂中的抗-C5抗体浓度在本领域的常规范围内确定。在某些实施方案中，用于静脉注射的组合物的体积在本领域的常规范围内确定。

在某些方面，在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前施用一剂用于静脉注射的组合物。用于皮下注射的药物组合物与上述相同。

在某些实施方案中，在皮下施用初始剂量的用于皮下注射组合物的同一天或一天或更多天之前，静脉施用用于静脉注射的组合物。在施用初始剂量的用于皮下注射的组合物之前，可以向受试者或患者施用一剂或更多剂用于静脉注射的组合物。在优选的实施方案中，在施用初始剂量的用于皮下注射的组合物之前，施用最终剂量的用于静脉注射的组合物。

在某些实施方案中，在施用初始剂量的用于皮下注射的组合物的同一天或1天至28天之前，施用一剂用于静脉注射的组合物。一剂用于静脉注射的组合物与初始剂量的用于皮下注射的组合物之间的具体间隔是0天(即，在24小时内)，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天，15天，16天，17天，18天，19天，20天，21天，22天，23天，24天，25天，26天，27天或28天。在优选的实施方案中，间隔是1天至14天。在进一步优选的实施方案中，间隔为3天至10天。在最优选的实施方案中，间隔是5天至8天。

IV.从其他药理学产品转换

在另一个方面，用于皮下或静脉注射的上述药物组合物可用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品治疗过一次或更多次的受试者的C5相关疾病。例如，本发明的药物组合物可用于治疗患有C5相关疾病的患者，该患者已接受过至少一种用于治疗或预防该疾病的药理学产品的先前治疗，但预期通过本发明的药物组合物对治疗产生更好的反应。在这种情况下，药物可以从药理学产品转换为本发明的药物组合物。在优选的实施方案中，在施用最终剂量的已用于先前治疗的药理学产品后，施用初始剂量的本发明中用于静脉注射的组合物。

在某些实施方案中，药理学产品包含与上述用于皮下和静脉注射的组合物中的抗-C5抗体不同的活性物质。在一些实施方案中，药理学产品的活性物质是靶向C5mRNA的siRNA，或与上述用于皮下和静脉注射的组合物中包含的抗-C5抗体不同的抗-C5抗体。在优选的实施方案中，药理学产品包含与上述用于皮下和静脉注射的组合物中的抗体不同的抗体。在最优选的实施方案中，在先前治疗中使用的药理学产品中包含的抗体是依库珠单抗或其衍生物。

在某些实施方案中，在施用最终剂量的药理学产品的同一天或一天或更多天之后，施用初始剂量的本发明的用于静脉注射的组合物。最终剂量的药理学产品与初始剂量的用于本发明的静脉注射的组合物之间的具体间隔为0天(这意味着在施用最终剂量的药理学产品的同一天施用初始剂量的用于静脉注射的组合物)，1天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，8天，9天，10天，11天，12天，13天，14天，15天，16天，17天，18天，19天，20天或21天。在优选的实施方案中，在施用最终剂量的药理学产品3天或更多天之后施用本发明的用于静脉注射的组合物。在更优选的实施方案中，在施用最终剂量的药理学产品7天或更多天之后施用本发明的用于静脉注射的组合物。在进一步优选的实施方案中，在施用最终剂量的药理学产品14天或更多天之后施用本发明的用于静脉注射的组合物。在最优选的实施方案中，在施用最终剂量的药理学产品21天或更多天之后施用本发明的用于静脉注射的组合物。

V.用于治疗或预防的方法

在其他方面，本发明涵盖用于治疗或预防C5相关疾病的方法。

在一个实施方案中，该方法包括静脉施用第一药物组合物，其被配制用于静脉注射并包含抗-C5抗体，并且在施用第一组合物后，皮下施用第二药物组合物，其被配制用于皮下注射并且包含抗-C5抗体。

用于该方法的用于皮下或静脉注射的药物组合物的病况和目标疾病与上述“II.用于皮下注射的药物组合物”和“III.用于静脉注射的药物组合物”部分中提到的那些相同。

VI.疫苗接种

传染病，例如脑膜炎球菌感染，可发生在施用抗-C5抗体的受试者中。为了预防这种传染病，可以在施用上述用于皮下和静脉注射的组合物之前，之后或同时，通过已知用于治疗或预防该疾病的疫苗对受试者进行免疫。

VII.制品

在本发明的另一个方面，提供了含有可用于治疗或预防上述C5相关疾病的物质的制品或产品。所述制品或产品包含一个或更多个容器以及在该容器上或与该容器相关联的标签或包装插页。合适的容器包括例如瓶子，小瓶，注射器，IV溶液袋，SC溶液注射器等。该容器可以由多种材料形成，例如玻璃或塑料。该容器容纳组合物本身，或与另一种有效治疗或预防所述病况的组合物组合的组合物，，并且可具有无菌进入口(例如，容器可以是静脉溶液袋或具有可通过皮下注射针头刺穿的瓶塞的小瓶)。该组合物中的至少一种活性剂是上述抗-C5抗体。标签，包装插页或此类文件指示该组合物用于治疗选择的病况。

在某些实施方案中，包含在制品或产品的容器中的组合物被配制用于皮下注射。本发明该实施方案中的制品或产品可进一步包含包装插页，所述包装插页指示在静脉施用一剂另一种药物组合物后施用所述组合物。本发明该实施方案中的另一种药物组合物包含抗-C5抗体并被配制用于静脉注射。

在某些实施方案中，包含在制品或产品的容器中的组合物被配制用于静脉注射。本发明该实施方案中的制品或产品可进一步包含包装插页，所述包装插页指示在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前施用所述组合物。本发明该实施方案中的另一种药物组合物包含抗-C5抗体并被配制用于皮下注射。

然而在某些其他实施方案中，制品或产品可包含(a)第一容器，其中包含第一组合物，其中所述组合物包含抗-C5抗体并被配制用于静脉注射，和(b)第二容器，其中包含第二组合物，其中所述组合物包含抗-C5抗体并被配制用于皮下注射。本发明该实施方案中的制品还可包含包装插页，所述包装插页指示该组合物可用于治疗特定病况，例如C5相关疾病，并进一步指示第一药物组合物和第二药物组合物的施用以一次或更多次静脉施用用于静脉注射的第一药物组合物和一次或更多次皮下施用用于皮下注射的第二药物组合物的顺序进行。

此外，制品或产品还可包含额外的其中含有组合物的容器，其中所述组合物包含另外的细胞毒性剂或其他治疗剂。本发明该实施方案中的制品还可包含包装插页，所述包装插页指示该组合物可用于治疗特定病况。备选地或额外地，制品可进一步包含另个额外的容器，所述容器包含药学上可接受的缓冲液，例如抑菌性注射用水(BWFI)，磷酸盐缓冲盐水，林格氏溶液和葡萄糖溶液。它可以进一步包括从商业和用户角度所需的其他材料，包括其他缓冲剂，稀释剂，过滤器，针头和注射器。

实施例

以下是本发明的方法和组合物的实施例。应当理解，在给出以上提供的一般描述的情况下，可以实施各种其他实施方案。

实施例1

抗-C5抗体的生成

通过常规方法制备WO2016/098356中的抗-C5抗体305LO15。简而言之，将编码305LO15的重链可变结构域(VH)的基因与编码修饰的人IgG1重链恒定结构域(CH)变体SG115(SEQ ID NO：13)的基因组合。将编码305LO15的轻链可变结构域(VL)的基因与编码人轻链恒定结构域(CL)(SK1，SEQ ID NO：18)的基因组合。抗体在用重链和轻链表达载体的组合共转染的HEK293细胞中表达，并通过蛋白A纯化。

实施例2

蛋白质药物，例如抗体药物，通常是静脉施用，因为蛋白质难以浓缩。事实上，目前唯一批准可用于治疗的抗体，依库珠单抗是静脉施用的。如果皮下注射变得可行，它将减轻患者的负担，例如不需卧床治疗和长时间在医院静脉注射，因为自我注射是可能的。

为了检查皮下施用抗-C5抗体的可能性，选择WO2016/098356中公开的305LO15，因为其具有高溶解度。据认为，较高的溶解度提供了蛋白质药物可以以较小的体积施用，给予皮下注射的可能性。

为了比较皮下注射或静脉注射后305LO15的药代动力学，将食蟹猴分成两组，皮下注射组和静脉注射组。将305LO15皮下施用至第一组动物(三只雄性和三只雌性)，每周一次，总共二十二次，每次给药40mg/kg抗体。在图1a中所示的时间点使用ELISA分析测量那些动物的血浆305LO15浓度。将305LO15静脉施用至第二组动物(6只雄性和6只雌性)，每周一次，总共5次，每次给药40mg/kg抗体。在图1b中所示的时间点通过ELISA分析测量动物的血浆305LO15浓度。

如图1a所示，通过皮下注射增加了食蟹猴的血浆305LO15浓度，证实305LO15可以通过皮下注射进行治疗。初始剂量后血浆浓度初始升高的速率在皮下施用(图1a)中低于在静脉注射中(图1b)。

实施例3

接下来，研究了初始剂量的皮下注射后血浆浓度升高的相对缓慢的速率是否可以通过静脉注射305LO15来补偿。对于5只雄性和5只雌性食蟹猴，以100mg/kg抗体的剂量静脉施用初始剂量的305LO15。从最初的静脉施用开始一周后，开始皮下注射305LO15。总共施用26次皮下注射，以每周施用一次的速度，每次给药以剂量为40mg/kg的抗体。

如图2所示，比没有初始剂量的静脉注射的情况相比，在通过皮下注射维持剂量之前作为静脉注射的初始剂量的抗体的情况下，305LO15的血浆浓度升高的速率更快。305LO15的血浆浓度达到并保持在与图1a所示相当的水平。据认为，305LO15的血浆浓度的这种更快的上升有助于更快地实现藉由药物的治疗效果。

实施例4

为了估计305LO15的有效血浆浓度，在食蟹猴中测定游离抗原(C5)的血浆浓度或补体活性与抗体(305LO15)的血浆浓度之间的关系。静脉(0.8mg/kg，4mg/kg或20mg/kg)或皮下(4mg/kg)施用305LO15。通过ELISA测量抗体和游离C5的血浆浓度。通过RBC溶血测定法测量补体活性。如图3所示，当305LO15的血浆浓度维持在40μg/mL 305LO15以上时(图3a)，游离C5浓度被抑制到低于亚微克/mL的水平，40μg/mL或更高的305LO15的血浆浓度将补体活性(溶血)抑制到小于基线(即未施加抗体)的20％(图3b)。当305LO15在血浆中维持在40μg/mL或更高浓度时，估计补体活性被抑制到小于基线(即没有注射抗体)的20％。

实施例5

为了确定用于305LO15的合适剂量和施用以维持临床试验的有效血浆305LO15浓度，通过模拟预测人血浆305LO15浓度的时间进程。首先，在每次给药以0.8，4，20mg/kg的抗体施用至食蟹猴后，测量随时间的血浆305LO15浓度。通过使用二室模型(2-compartmentmodel)分析数据来估计食蟹猴PK参数。使用异速生长变化(allometric scaling)，基于食蟹猴PK参数估计人PK参数。估计的人PK参数显示在表1中(表1中参数的缩写：BW为体重；CL为药物的总清除率；F为生物利用度，或者变为系统可用的药物施用剂量的分数；Ka为吸收速率常数；mAb为单克隆抗体；PK为药代动力学；Q为室间清除；SC为皮下；Vc为中央室的分布体积；Vp为外周室的分布体积)。

表1

*DirksNL，Meibohm B.Population pharmacokinetics of therapeuticmonoclonal antibodies.Clin Pharmacokinet 2010；49：633-59.

针对预期用于1/2期研究的每个群组估计人PK曲线(图4)。该研究的第1部分被设计为包括三组受试者。第一组是以75mg/人体的剂量静脉施用一次305LO15的一组受试者。第二组是以150mg/人体的剂量静脉施用一次305LO15的一组受试者。第三组是以170mg/人体的剂量皮下施用一次305LO15的一组受试者。据预测，接受任何一种上述剂量的受试者的血浆305LO15浓度未维持在阈值(40μg/mL)以上超过一周(图4a)。

该研究的第2部分被设计为包括一组受试者，向所述受试者静脉施用三次305LO15(最初以剂量为300mg/人体，然后在初次施用一周后以500mg/人体，最后在第二次施用两周后以1000mg/人体)，从最后一次静脉施用后两周开始，以170mg/人体的剂量每周皮下施用一次305LO15。据预测，通过第2部分研究的施用方案，305LO15浓度维持在高于PD阈值(40微克/毫升)(图4b)。

该研究的第3部分被设计为包括三组受试者。最初以500mg/人体的剂量静脉内施用至所有组的受试者305LO15一次。从最初施用后的第二天开始，向第一组受试者皮下施用305LO15每周一次，剂量为170mg/人体，向第二组受试者施用305LO15每两周一次，剂量为340mg/人体，向第三组受试者施用305LO15每四周一次，剂量为600mg/人体。据预测，在第3部分研究的所有三组中，305LO15浓度维持在高于PD阈值(40微克/毫升)(图4c)。

实施例6

依库珠单抗已被用于治疗患有PNH或aHUS的患者。在预期305LO15对于PNH或aHUS患者具有比依库珠单抗更理想的效果的情况下，对患者的药物治疗可以从依库珠单抗转换为305LO15。同时，305LO15有可能与体内的C5和依库珠单抗形成免疫复合物，因为305LO15的表位不同于依库珠单抗的表位，即305LO15与C5的β链结合，而依库珠单抗与C5的α链结合。这种免疫复合物的形成可能导致异常的活化，因此希望尽可能避免。

为了研究305LO15是否与依库珠单抗(ECZ，重链序列显示于SEQ ID NO：19，轻链序列显示于SEQ ID NO：20)和人C5(hC5，SEQ ID NO：21)形成免疫复合物，使用尺寸排阻色谱(SEC)进行体外分析。根据WO2016/098356中公开的方法制备hC5。将ECZ，hC5和305LO15针对DPBS pH7.4透析用于缓冲液交换。然后，将ECZ和hC5混合并在37℃下温育3-4小时。温育后，将305LO15加入到含有ECZ和hC5的该混合物中。将ECZ和hC5的最终浓度调节至200微克/毫升，并将305LO15的浓度调节至0，25，125，250或1250微克/毫升。将这些混合物在37℃温育3-4小时后，在pH7.4和pH6.0下进行SEC分析。具体的SEC条件如下所不。

HPLC系统：Waters Alliance e2695 HPLC系统

柱：TSKgel G4000SWXL

柱温：25℃

洗脱液：50mM Na-PB/300mM NaCl，pH7.4或pH6.0

流速：0.5mL/min

检测：220nm紫外吸收

注射：10微升

结果，浓度为125至1250微克/毫升的305LO15在pH6.0时不影响SEC曲线，但在pH7.4时影响曲线。更具体地，当305LO15与ECZ和hC5混合时，在pH7.4检测到在pH6.0未检测到的大ECZ/hC5/305LO15免疫复合物的峰(参见图5中箭头所示的峰，顶部)，除了小复合物的峰(参见图5中的峰，′2Ag+Ab′和′Ag+Ab′，顶部)。在pH6.0仅检测到小复合物的峰(参见图5的峰，底部，对应于图5的′2Ag+Ab′和′Ag+Ab′，顶部)。这意味着305LO15在pH7.4下与ECZ/hC5复合物结合，但在pH6.0下不结合，符合305LO15的结合特征(在pH7.4但不在pH6.0下与hC5结合)。这些结果可以表明向受试者同时施用305LO15和ECZ可导致在血浆中形成大免疫复合物。

实施例7

在健康志愿者和阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者中305LO15的BP39144研究，适应性I/II期研究，评估了安全性，功效，药代动力学(PK)和药效学(PD)。

BP39144研究的第1部分(随机，研究者/受试者盲法，适应性，安慰剂对照，平行组研究)评估了健康志愿者中单剂量305LO15的安全性和耐受性。在每个剂量水平/组中，总共5名健康志愿者随机接受305LO15或安慰剂的单次静脉(IV；组1和2)或皮下(SC；组3)施用。该研究具有自适应设计，在下次施用开始前持续评估可用的安全性，耐受性，PK和PD数据。对于组1，2和3的计划剂量水平分别为75mg IV，150mg IV和170mg SC(图4a)。基于来自组1的PK和PD数据的初步评论，组2和3的剂量减少至125mg IV(组2)和100mg SC(组3)。

对于IV输注，在给药前，在IV输注结束时(1小时)，在给药后2，6，12，24，48，72，96和144小时以及在第14，21，28，35，42，56，84和91天收集血液样品。对于SC施用，在给药前，在给药后12，24，48，72，96和144小时以及在第14，21，28，35，42，56，84和91天收集血液样品。

BP39144研究的第1部分的初步安全性结果表明，305LO15在所有评估的剂量水平(75和125mg IV以及100mg SC)下耐受良好。现有的临床安全性信息没有引起明显的安全性问题，并且没有证据暗示不良事件或实验室测试异常的模式。在任何治疗组中，生命体征或12导联心电图都没有值得注意的发现或趋势。

图6，图7和图8显示了305LO15的血清中初步PK结果和模拟浓度-时间曲线。基于这些数据，健康受试者的305LO15PK与基于食蟹猴PK数据的人PK的初始预测(实施例5)一致。IV给药后，从75至125mg，暴露似乎与剂量成比例。体重70kg的典型患者的终末半衰期(t_1/2)估计为约25天。SC施用后，初步PK结果显示了305LO15暴露大约在第7天达到峰值，生物利用度约为90％。吸收后，t_1/2与IV输注的t_1/2相当。

暴露-响应关系的初步评估支持初始预测，即，实现完全的补体抑制需要约40微克305LO15/mL血液(图9)。

实施例8

BP39144研究的第2部分(开放标签，多剂量，全球多中心，个体内剂量递增研究)评估了总持续时间为5个月的安全性和耐受性，以及首次用于实验的PNH患者治疗中多剂量305LO15对补体活性的药效学影响。在这项研究中，招募了六名PNH患者。招募的患者未接受任何补体抑制剂治疗或之前已接受过治疗，但由于缺乏基于单个错义C5杂合突变的疗效而停止治疗，并且在筛查时显示血清LDH水平升高(＞1.5 x ULN)(ULN：正常上限)。

六名患者中的一名患者(患者X)是PNH患者和用于用补体抑制剂治疗的候选者。患者X接受了三次单次递增IV剂量；在第1天单次输注375mg 305LO15，然后在第8天单次输注500mg 305LO15，并且在第22天再次输注1000mg 305LO15。第一次SC施用(170mg)开始于第36天，然后每周(QW)SC注射(170mg)305LO15，其将持续5个月的总治疗持续时间。

来自患者X的初步药效学结果显示在表2和图10中。作为溶血的药效学标志物的LDH水平在第15天降至正常范围的限度内，在第36天进一步降低，并在第43天维持在标准水平(表2和图10a)。如表2和图10b所示，脂质体免疫测定(LIA)的结果显示，在研究开始日(第1天)，输注结束时补体活性被完全抑制。第1天375mg 305LO15的剂量保持完全的补体抑制直至第8天500mg 305LO15的下一剂量。第8天500mg 305LO15的剂量保持完全的补体抑制，直至第22天1000mg 305LO15的下一剂量。第22天1000mg 305LO15的剂量保持完全的补体抑制直至第36天170mg 305LO15的下一SC剂量。第36天的SC剂量在第43天保持完全的补体抑制。

305LO15耐受良好，只有与治疗无关的轻微腹痛。

表2

	LDH[U/mL]	LIA[U/mL]
			第1天给药前	2216	80
第1天给药后	未采集	完全抑制
			第2天	2217	完全抑制
第5天	762	完全抑制
			第8天给药前	824	完全抑制
第8天给药后	634	完全抑制
			第9天	溶血	完全抑制
第15天	474	完全抑制
			第22天	455	完全抑制
第36天	414	完全抑制
			第43天	461	完全抑制

实施例9

BP39144研究的第3部分(开放标签，多剂量，全球多中心研究)评估了总持续时间为5个月的安全性和耐受性，以及多剂量305LO15对目前用依库珠单抗治疗的PNH患者的补体活性的药效学影响。在这项研究中，招募18名PNH患者。招募的患者在试验招募前用依库珠单抗连续治疗了至少3个月，患者必须定期接受依库珠单抗输注。

18名患者中的一名患者(患者Y)是用依库珠单抗治疗的PNH患者，其中在第一次静脉输注305LO1514天之前最后施用依库珠单抗。患者Y接受单次IV负荷剂量；在第1天单次输注1000mg 305LO15。在第8天施用第一次SC施用(680mg)，然后每4周(Q4W)SC注射(680mg)305LO15，其将持续5个月的总治疗持续时间。

来自患者Y的初步药效学结果显示在表3中。作为溶血的药效学标记物的LDH水平从第一次给药到第43天保持基线水平(表3)。如表3所示，脂质体免疫测定(LIA)的结果显示，在研究开始日(第1天)，输注结束时补体活性被完全抑制。第1天1000mg 305LO15的剂量保持完全的补体抑制直至在第8天680mg 305LO15的SC给药。第8天的SC给药在第43天保持完全的补体抑制。

表3

Claims

1.用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并且皮下施用，其中在静脉施用一剂另一种药物组合物后，施用初始剂量的所述组合物，其中所述另一种药物组合物被配制用于静脉注射并包含所述抗-C5抗体。

2.用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并且静脉施用，其中在皮下施用初始剂量的另一种药物组合物之前，施用一剂所述组合物，其中所述另一种药物组合物被配制用于皮下注射并包含所述抗-C5抗体。

3.权利要求1或2的药物组合物，其中在施用一剂用于静脉注射的组合物的同一天或1天至28天之后，施用初始剂量的用于皮下注射的组合物。

4.权利要求1至3中任一项的药物组合物，其中用于皮下注射的组合物每3至42天给予一次。

5.权利要求1至4中任一项的药物组合物，其中用于静脉注射的组合物施用两次或更多次且每小时给予一次至每14天给予一次。

6.权利要求1至5中任一项的药物组合物，其中用于皮下注射的组合物以17至6,000mg抗体的剂量给予。

7.权利要求1至6中任一项的药物组合物，其中用于静脉注射的组合物以50至5,000mg抗体的剂量给予。

8.权利要求1至7中任一项的药物组合物，其中所述组合物用于治疗或预防已经用至少一种用于治疗或预防所述疾病的药理学产品治疗的受试者的所述C5相关疾病，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后施用。

9.权利要求8的药物组合物，其中初始剂量的用于静脉注射的组合物在施用最终剂量的药理学产品后的第3天或3天后施用。

10.权利要求8或9的药物组合物，其中所述药理学产品包含靶向C5 mRNA的siRNA，或与所述组合物中包含的所述抗-C5抗体不同的抗-C5抗体。

11.权利要求8至10中任一项的药物组合物，其中所述药理学产品包含依库珠单抗或其衍生物。

12.用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于皮下注射，包含抗-C5抗体，并以17至6,000mg抗体的剂量皮下施用。

13.用于治疗或预防C5相关疾病的药物组合物，其中所述组合物被配制用于静脉注射，包含抗-C5抗体，并以50至5,000mg抗体的剂量静脉施用。

14.权利要求1至13中任一项的药物组合物，其中C5相关疾病是选自由以下各项组成的组中的任一种：类风湿性关节炎(RA)；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；致密沉积物病(DDD)；黄斑变性；溶血，肝酶升高，和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；微量免疫脉管炎；大疱性表皮松解；再发性流产；多发性硬化(MS)；外伤性脑损伤；和由心肌梗死，心肺分流术或血液透析导致的损伤。