CN110144409A - 哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒 - Google Patents

哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明公开了哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒，所述引物包括上游引物HtaC1041F和下游引物HtaC1041R；上游引物HtaC1041F的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物HtaC1041R的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明是国内外首次基于分子生物学技术原理建立的哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别的新方法，它利用哲罗鲑EST序列设计了1对SSR引物，通过一个PCR反应就可以实现哲罗鲑和细鳞鲑的鉴别。本发明可以区分哲罗鲑和细鳞鲑完整个体及其加工产品，且可以用于鱼卵、刚孵出苗种的鉴定，具有准确快捷、客观公正、经济实用的特点。

Description

哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒
技术领域
本发明涉及哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒，属于分子鉴定技术领域。
背景技术
哲罗鲑，学名Hucho taimen(Pallas)，分属哲罗鲑属。细鳞鲑，学名Brachymystaxlenok(Pallas)，分属细鳞鲑属。二者均隶属于鲑形目(Salmoniformes)、鲑科(Salmonidae)，是我国珍稀、名贵的冷水性鱼类。哲罗鲑和细鳞鲑属于濒危物种，1998年均被列入中国濒危动物红皮书，2004年被列入中国物种红色名录。为了保护和开发这两种珍稀、名贵鱼类，研究人员相继攻克了这2种鱼类的人工繁殖和苗种培育，成功进行了苗种规模化培育以及商品鱼养殖，丰富了我国水产养殖的品种。同时为了恢复野生资源，也在部分原栖息地进行了哲罗鲑和细鳞鲑的增殖放流。
哲罗鲑和细鳞鲑是近缘物种，生活环境相似，成鱼根据外形易于区分，但幼鱼外形十分相近，很难从外形上对两者进行鉴别，因此极易出现哲罗鲑和细鳞鲑种质混杂，从而损害冷水鱼养殖产业的发展及哲罗鲑、细鳞鲑的资源增殖放流，因此亟需一种快捷、准确的哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别方法。
发明内容
本发明的目的在于针对哲罗鲑和细鳞鲑幼鱼在外形上极难鉴别这一难题，提出了哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物以及利用上述鉴别引物建立哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别的方法、试剂盒。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物，包括上游引物HtaC1041F和下游引物HtaC1041R；上游引物HtaC1041F的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物HtaC1041R的序列如SEQ ID NO.2所示。
一种哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别方法，包括以下步骤：
(1)剪取样本鱼的部分鳍条或鳞片，加入裂解液裂解，制备DNA粗提液；
(2)以DNA粗提液为模板，利用引物进行PCR扩增；
(3)将PCR扩增产物进行电泳，银染，再将电泳结果与标准图谱对比，进行鉴定。
裂解液的主要成分为：蛋白酶K 0.5mg/ml、Tris(pH8.0)10mM、KCl 50mM、Tween 200.3％(w/v)、NP-40 0.3％(w/v)。
裂解条件为：55℃2h，98℃10min。
PCR扩增的反应体系为：2×Taq PCR Mix 10μl、DNA粗提液2μl、10μM上下游引物各0.5μl，用超纯水补足20μl。
PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，66℃退火30s，72℃延伸30s，28个循环；72℃最后延伸5min。
标准图谱中，哲罗鲑样本的条带为166bp；细鳞鲑样本的条带为158bp。
在根据电泳结果无法确定样本鱼属于哲罗鲑或细鳞鲑时，将电泳条带大小相同的3-5个样本测序，根据序列SSR重复的次数与提供的SSR序列对比进行判定，哲罗鲑的SSR序列为：AGGC(AC)7ATGCACATACTG(AC)3AGT；细鳞鲑的SSR序列为：AGGC(AC)4GCACATACTG(AC)3AGT。
鉴别哲罗鲑和细鳞鲑种质的试剂盒，包括上述引物。
本发明有益效果：
本发明是国内外首次基于分子生物学技术原理建立的哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别的新方法，它利用哲罗鲑EST序列设计了1对SSR引物，通过一个PCR反应就可以实现哲罗鲑和细鳞鲑的鉴别。本发明无需依赖专业的分类学背景，也不需要具有长期从事鱼类鉴别的丰富经验，不仅可以区分哲罗鲑和细鳞鲑完整个体，还可以鉴别其加工产品，具有准确快捷、客观公正、经济实用的特点。且可以用于鱼卵、刚孵出苗种的鉴定，能够研究哲罗鲑的群落结构、产卵位置及扩散途径，了解早期生活史，评估哲罗鲑和细鳞鲑资源，解决商品苗种及淡水产品市场上存在的标识错误等方面的问题。
附图说明
图1为哲罗鲑和细鳞鲑的标准图谱，图中HT为哲罗鲑，BL为细鳞鲑。
图2为部分哲罗鲑和细鳞鲑样本电泳检测结果，图中HT为哲罗鲑样本，BL为细鳞鲑样本。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
实施例1、建立鉴别方法
1、提取DNA
剪取样本鱼的部分鳍条或5-10个鳞片，加入40μl裂解液(蛋白酶K 0.5mg/ml、Tris(pH8.0)10mM、KCl 50mM、Tween 20 0.3％(w/v)、NP-40 0.3％(w/v))，55℃2h，98℃10min裂解，裂解后混匀，1000-2000rpm离心1-2min，提取上清液，即为DNA粗提液；
2、设计引物
根据哲罗鲑的EST序列设计了53对SSR引物，12对引物在哲罗鲑中没能扩增出条带，对能扩增出条带的41对引物进行筛选，发现HtaC1041引物具有特异性，引物序列为：
上游引物HtaC1041F：5’-ACTTGGGCATTGGTAAAAGCT-3’(SEQ ID NO.1)
下游引物HtaC1041R：5’-AGGCATCATGAGAGTGCGTG-3’(SEQ ID NO.2)
哲罗鲑HtaC1041扩增序列：
ACTTGGGCATTGGTAAAAGCTAATTACAAATTATCATTAATAACTTACAGTAATAAATACTTTAGGCAGTTTAAATGAAAATGACTGAAGGCACACACACACACACATGCACATACTGACACACAGTAAACATAAATCCTCTTTGACACGCACTCTCATGATGCCT(SEQ ID NO.3)
3、PCR扩增
以DNA粗提液为模板，利用SSR引物HtaC1041进行PCR扩增，PCR扩增的反应体系为：2×Taq PCR Mix 10μl、DNA粗提液2μl、10μM上下游引物各0.5μl，用超纯水补足20μl。PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，66℃退火30s，72℃延伸30s，28个循环；72℃最后延伸5min。
4、电泳
PCR反应结束后，取1.5μl PCR产物用8％的非变性聚丙烯凝胶电泳检测，220V，电泳3.0h，用0.2％的硝酸银染色10min，显色(500ml显色液配方：10g NaOH、0.2g Na2CO3、4ml甲醛，加水定容500ml)，照相并保存。根据电泳结果与提供的哲罗鲑和细鳞鲑标准图谱(图1)对比，鉴定样本鱼属于哲罗鲑或细鳞鲑。其中，哲罗鲑样本的条带为166bp；细鳞鲑样本的条带为158bp。
5、SSR鉴别
在根据电泳结果无法确定样本鱼属于哲罗鲑或细鳞鲑时，将电泳条带大小相同的3-5个样本测序，根据序列SSR重复的次数与提供的SSR序列对比进行判定，哲罗鲑的SSR序列为：AGGC(AC)7ATGCACATACTG(AC)3AGT(SEQ ID NO.4)；细鳞鲑的SSR序列为：AGGC(AC)4GCACATACTG(AC)3AGT(SEQ ID NO.5)。哲罗鲑的AC重复次数比细鳞鲑多3次，同时在AC重复7次后又多了AT，因此哲罗鲑比细鳞鲑大8bp。
实施例2、样本检测
利用实施例1的鉴别方法，采集不同流域根据形态鉴定为野生哲罗鲑的成鱼121尾和细鳞鲑的成鱼41尾，各取5-10个鳞片，进行鉴定。根据电泳结果与提供的哲罗鲑和细鳞鲑标准图谱对比，发现根据形态学鉴定为哲罗鲑的121份样本出现了一条大小为166bp的特异性条带，表明样本为哲罗鲑；根据形态学鉴定为细鳞鲑的41份样本均出现了158bp的特异性条带，表明样本为细鳞鲑样本(图2)，与形态学鉴定结果一致。
哲罗鲑和细鳞鲑分别随机选5尾样本的PCR产物测序，哲罗鲑的SSR序列为：AGGC(AC)7ATGCACATACTG(AC)3AGT，细鳞鲑的SSR序列为：AGGC(AC)4GCACATACTG(AC)3AGT，与提供的标准序列一致。
上述样本检测结果说明本发明的方法十分灵敏，准确率能达100％，对鱼卵、幼鱼和成鱼均能够区分。
序列表
<110> 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
<120> 哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒
<160> 5
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列()
<400> 1
acttgggcat tggtaaaagc t 21
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列()
<400> 2
aggcatcatg agagtgcgtg 20
<210> 3
<211> 166
<212> DNA
<213> 哲罗鲑(Hucho taimen)
<400> 3
acttgggcat tggtaaaagc taattacaaa ttatcattaa taacttacag taataaatac 60
tttaggcagt ttaaatgaaa atgactgaag gcacacacac acacacatgc acatactgac 120
acacagtaaa cataaatcct ctttgacacg cactctcatg atgcct 166
<210> 4
<211> 39
<212> DNA
<213> 哲罗鲑(Hucho taimen)
<400> 4
aggcacacac acacacacat gcacatactg acacacagt 39
<210> 5
<211> 31
<212> DNA
<213> 细鳞鲑(Brachymystax lenok)
<400> 5
aggcacacac acgcacatac tgacacacag t 31

Claims (9)

1.哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物，其特征在于，包括上游引物HtaC1041F和下游引物HtaC1041R；上游引物HtaC1041F的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物HtaC1041 R的序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种利用权利要求1所述引物的哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)剪取样本鱼的部分鳍条或鳞片，加入裂解液裂解，制备DNA粗提液；
(2)以DNA粗提液为模板，利用引物进行PCR扩增；
(3)将PCR扩增产物进行电泳，银染，再将电泳结果与标准图谱对比，进行鉴定。
3.根据权利要求2所述的鉴别方法，其特征在于，裂解液的主要成分为：蛋白酶K0.5mg/ml、Tris(pH8.0)10mM、KCl 50mM、Tween20 0.3％(w/v)、NP-40 0.3％(w/v)。
4.根据权利要求2所述的鉴别方法，其特征在于，裂解条件为：55℃ 2h，98℃ 10min。
5.根据权利要求2所述的鉴别方法，其特征在于，PCR扩增的反应体系为：2×Taq PCRMix 10μl、DNA粗提液2μl、10μM上下游引物各0.5μl，用超纯水补足20μl。
6.根据权利要求2所述的鉴别方法，其特征在于，PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，66℃退火30s，72℃延伸30s，28个循环；72℃最后延伸5min。
7.根据权利要求2所述的鉴别方法，其特征在于，标准图谱中，哲罗鲑样本的条带为166bp；细鳞鲑样本的条带为158bp。
8.根据权利要求2-7任一项所述的鉴别方法，其特征在于，在根据电泳结果无法确定样本鱼属于哲罗鲑或细鳞鲑时，将电泳条带大小相同的3-5个样本测序，根据序列SSR重复的次数与提供的SSR序列对比进行判定，哲罗鲑的SSR序列为：AGGC(AC)7ATGCACATACTG(AC)3AGT；细鳞鲑的SSR序列为：AGGC(AC)4GCACATACTG(AC)3AGT。
9.鉴别哲罗鲑和细鳞鲑种质的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101736007A (zh) * 2009-10-29 2010-06-16 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 哲罗鲑线粒体全基因组序列及其扩增引物
CN101736084A (zh) * 2009-10-29 2010-06-16 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 哲罗鲑微卫星序列与多态性微卫星标记的获取方法和哲罗鲑多态性微卫星标记
CN102876802A (zh) * 2012-10-19 2013-01-16 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 鲑亚科鱼类特异性鉴定方法及其试剂盒
CN103122386A (zh) * 2013-01-29 2013-05-29 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种大西洋鲑鱼的分子鉴别方法
CN109371141A (zh) * 2018-11-29 2019-02-22 岛津企业管理（中国）有限公司 鉴别大西洋鲑和虹鳟的方法及特异性引物对

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101736007A (zh) * 2009-10-29 2010-06-16 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 哲罗鲑线粒体全基因组序列及其扩增引物
CN101736084A (zh) * 2009-10-29 2010-06-16 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 哲罗鲑微卫星序列与多态性微卫星标记的获取方法和哲罗鲑多态性微卫星标记
CN102876802A (zh) * 2012-10-19 2013-01-16 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 鲑亚科鱼类特异性鉴定方法及其试剂盒
CN103122386A (zh) * 2013-01-29 2013-05-29 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种大西洋鲑鱼的分子鉴别方法
CN109371141A (zh) * 2018-11-29 2019-02-22 岛津企业管理（中国）有限公司 鉴别大西洋鲑和虹鳟的方法及特异性引物对

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王伟伟等: "基于mtDNA控制区序列的我国养殖鲑亚科鱼类系统关系", 《淡水渔业》 *

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