CN110143965A - 一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，属于生物技术领域，该方法是从凡纳滨对虾中分离和收集真菌菌株黄曲霉，然后使黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；上述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C32H39NO4。本发明提供的从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法能促进和提高菌株中生成中间体的酶活性，并引进能形成极性中心的杂原子，增加代谢产物多样性和流通效率，延长菌株生长期，提升目标物的选择性和富集倍数，减少检测痕量最低值和纯化损耗率，提高菌株利用率和目标产物得率，所得化合物可用于抗菌抑菌和抗癌领域。

Description

一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法。
背景技术
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)，又称南美白对虾(White Prawn)，别名白脚虾、凡纳对虾，原产国家厄瓜多尔，原产地中南美太平洋海岸水域，生长气候带热带、亚热带、暖温带、温带海域，分布于太平洋西海岸至墨西哥湾中部，生命周期一年。黄曲霉，半知菌类，一种常见腐生真菌。多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。菌落生长较快，结构疏松，表面灰绿色，背面无色或略呈褐色。菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形或近球形顶囊，表面产生许多小梗(一般为双层)，小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子合成孢子头，可用于产生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。
众所周知，微生物早已成为抗生素、酶抑制剂等活性物质的重要来源。微生物由于可以大规模发酵培养，无原料限制，不会破坏环境等优点已成为天然产物研究领域的热点。近年来从陆地微生物中获得新化合物的概率大幅降低，而海洋来源微生物由于其生存环境特异，除可产生与陆地相似的代谢产物之外，有时还会产生一些结构特异的新化合物，显示了巨大的开发利用前景。曲霉属真菌一直以来都是天然产物界研究的重要菌种其次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体，倍半萜，蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有：生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架。这些结构新颖的化合物往往还含有细胞毒，抗菌，抗病毒等多种活性，成为海洋药物先导化合物的重要来源之一，引起了业内学者的广泛关注。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法能促进和提高菌株中生成中间体的酶活性，并引进能形成极性中心的杂原子，增加代谢产物多样性和流通效率，延长菌株生长期，提升目标物的选择性和富集倍数，减少检测痕量最低值和纯化损耗率，提高菌株利用率和目标产物得率。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法通过使黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；上述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C32H39NO4。该方法对海洋中获取的微生物的代谢产物进行分离，并进行生理活性检测，以此获得在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景的吲哚二萜类化合物，为海洋微生物资源提供更多利用途径。
作为优选，吲哚二萜类化合物包括具有结构式如下式(1)的化合物：
作为优选，黄曲霉发酵条件如下：接种量为8～12％，静态发酵，时间为25～35天。发酵过程是通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单—的代谢产物，同时在微生物最适宜条件下发酵，避免了海洋环境中存在的高压、高盐、寡营养等负面影响，能提高菌株代谢产物的多样性，有利于筛选和分离。
作为优选，高低温交互环境是以高温-低温-高温交互的方式控制，高温温度为23～30℃，持续时间为8～10天，低温温度为12～16℃，持续时间为2～5天。发酵温度采用高低温交互的方式控制，一方面发酵中由于微生物生长产生的生理温较多，且散热困难，对微生物生长产生抑制或直接造成死亡，适时降温则可以延长微生物生长期，从而产生更多初级及次生代谢产物，另一方面降至低温后，微生物为维持生理活性，细胞内容物不断收缩，加快了细胞中水分蒸发，造成细胞失重而破坏其完整性，细胞通透性增加，使得培养液中众多杂原子进入细胞内参与生物合成，杂原子形成不同极性中心，而增加了代谢产物的多样性和发现新化合物的几率，同时也降低提取难度和提取剂用量，提高生产效率。
作为优选，发酵培养用培养液中含有0.04～0.1wt％的二氢吡啶和0.02～0.12wt％的薄荷醇。二氢吡啶和薄荷醇能被微生物吸收利用，以此解除微生物代谢途径中的抑制作用，激发氨基酸脱羧酶活性，促进氨基酸转变为吲哚生物碱中间体，通过提高中间产物在竞争途径中的含量，增加吲哚类代谢产物流通效率，此中间体与类萜中间体相结合得到吲哚二萜类化合物，进而提高菌株利用率和目标产物得率，同时能钝化吲哚二萜类化合物中的羟基活性，在提取和纯化过程中对官能团形成保护，减少提取和纯化的损耗率，增加目标产物得率和生产效率。
作为优选，黄曲霉菌株来源为凡纳滨对虾。从海洋资源中获取微生物，并对微生物进行发酵获取有益代谢产物，可以增加海洋资源利用率和潜在价值。
进一步优选，黄曲霉菌株收集步骤如下：将对虾依次用乙醇和无菌海水洗涤后捣碎，然后用无菌海水稀释至10-2，取100～200μl稀释液均匀涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于25～30℃下培养5～8天后，收集并纯化菌落，于0～4℃储存备用。海洋来源的微生物由于其生存环境特异，有时会产生一些结构特异新颖的化合物，而曲霉属真菌的次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体、倍半萜、蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架，具有良好的开发利用前景。
作为优选，提取是用乙酸乙酯对发酵液过滤所得滤液和菌丝分别进行萃取，其中菌丝提取需在体积浓度为70～80％的丙酮溶液保护下进行。丙酮溶液能在减压条件下浓缩后，使菌丝能承受乙酸乙酯有机溶剂的萃取，对菌丝有提取和保护的作用，进而得到菌丝萃取液。
作为优选，分离纯化是依次用硅胶柱真空液相层析、Sphadex LH-20凝胶柱层析和半制备HPLC纯化提取所得粗提物。进一步优选，硅胶柱真空液相层析用石油醚-CH2Cl2(1:1和0:1)和CH2Cl2-甲醇(100～0％)梯度洗脱；Sphadex LH-20凝胶柱层析用1:1的CH2Cl2-甲醇洗脱；半制备HPLC用浓度为90％甲醇溶液洗脱。
作为优选，化合物在抗菌抑菌和抗癌领域的用途。所得化合物为黄色无定形粉末，是吲哚二萜类化合物，并表现出对金黄色葡萄球菌的抗菌活性，同时可以对A549细胞和激酶蛋白C-β产生抑制作用，可作为抗癌药物开发的潜在靶点化合物，因此在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景。
本发明的有益效果为：
1)本发明采用海洋来源的微生物进行化合物的发酵培育，利用发酵温度高低温交互控制的方式，延长微生物生长期，同时利用细胞失重而破坏其完整性，细胞通透性增加，使得杂原子参与生物合成并形成不同极性中心，增加了代谢产物的多样性和产量，同时也降低提取难度和提取剂用量，提高生产效率；
2)本发明中通过向发酵液中添加具有增益效果的物质，激活和提高菌株中氨基酸脱羧酶活性，通过提高中间产物吲哚生物碱中间体在竞争途径中的含量，增加吲哚类代谢产物流通效率，从而提高菌株利用率和目标产物得率，同时对目标产物官能团形成保护，减少提取和纯化的损耗率，增加得率和生产效率；
3)本发明中利用有机提取和多次层析纯化的方法，将目标化合物进行分离和提纯，目标物在提取溶剂中选择性和富集倍数增加，目标物萃取效率和收率显著提高，且目标物检测痕量最低值降低，提升了化合物检出量和产率；
4)本发明中所得化合物为吲哚二萜类化合物，并表现出对金黄色葡萄球菌的抗菌活性，同时可以对A549细胞和激酶蛋白C-β产生抑制作用，可作为抗癌药物开发的潜在靶点化合物，在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景。
本发明采用了上述技术方案提供一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
具体实施方式
马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制：马铃薯提取物200克，葡萄糖20克，琼脂15克，加无菌海水配至1L。
发酵用培养液的配制：葡萄糖10g，麦芽糖20g，甘露醇20g，谷氨酸单钠10g，KH2PO40.5g，MgSO4·7H2O0.3g，酵母抽提物3g，SEA盐33g，加无菌海水配至1L，并调节pH为7～7.5。
以下结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法通过使黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；上述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C32H39NO4。该方法对海洋中获取的微生物的代谢产物进行分离，并进行生理活性检测，以此获得在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景的吲哚二萜类化合物，为海洋微生物资源提供更多利用途径。
吲哚二萜类化合物包括具有结构式如下式(1)的化合物：
黄曲霉发酵条件如下：接种量为8％，静态发酵，时间为25天。发酵过程是通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单—的代谢产物，同时在微生物最适宜条件下发酵，避免了海洋环境中存在的高压、高盐、寡营养等负面影响，能提高菌株代谢产物的多样性，有利于筛选和分离。
高低温交互环境是以高温-低温-高温交互的方式控制，高温温度为23℃，持续时间为10天，低温温度为12℃，持续时间为2天。发酵温度采用高低温交互的方式控制，一方面发酵中由于微生物生长产生的生理温较多，且散热困难，对微生物生长产生抑制或直接造成死亡，适时降温则可以延长微生物生长期，从而产生更多初级及次生代谢产物，另一方面降至低温后，微生物为维持生理活性，细胞内容物不断收缩，加快了细胞中水分蒸发，造成细胞失重而破坏其完整性，细胞通透性增加，使得培养液中众多杂原子进入细胞内参与生物合成，杂原子形成不同极性中心，而增加了代谢产物的多样性和发现新化合物的几率，同时也降低提取难度和提取剂用量，提高生产效率。
发酵培养用培养液中含有0.04wt％的二氢吡啶和0.12wt％的薄荷醇。二氢吡啶和薄荷醇能被微生物吸收利用，以此解除微生物代谢途径中的抑制作用，激发氨基酸脱羧酶活性，促进氨基酸转变为吲哚生物碱中间体，通过提高中间产物在竞争途径中的含量，增加吲哚类代谢产物流通效率，此中间体与类萜中间体相结合得到吲哚二萜类化合物，进而提高菌株利用率和目标产物得率，同时能钝化吲哚二萜类化合物中的羟基活性，在提取和纯化过程中对官能团形成保护，减少提取和纯化的损耗率，增加目标产物得率和生产效率。
黄曲霉菌株来源为凡纳滨对虾。从海洋资源中获取微生物，并对微生物进行发酵获取有益代谢产物，可以增加海洋资源利用率和潜在价值。
黄曲霉菌株收集步骤如下：将对虾依次用乙醇和无菌海水洗涤后捣碎，然后用无菌海水稀释至10-2，取100μl稀释液均匀涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于25℃下培养8天后，收集并纯化菌落，于0℃储存备用。海洋来源的微生物由于其生存环境特异，有时会产生一些结构特异新颖的化合物，而曲霉属真菌的次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体、倍半萜、蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架，具有良好的开发利用前景。
提取是用乙酸乙酯对发酵液过滤所得滤液和菌丝分别进行萃取，其中菌丝提取需在体积浓度为70％的丙酮溶液保护下进行。丙酮溶液能在减压条件下浓缩后，使菌丝能承受乙酸乙酯有机溶剂的萃取，对菌丝有提取和保护的作用，进而得到菌丝萃取液。
分离纯化是依次用硅胶柱真空液相层析、Sphadex LH-20凝胶柱层析和半制备HPLC纯化提取所得粗提物。进一步优选，硅胶柱真空液相层析用石油醚-CH2Cl2(1:1和0:1)和CH2Cl2-甲醇(100～0％)梯度洗脱；Sphadex LH-20凝胶柱层析用1:1的CH2Cl2-甲醇洗脱；半制备HPLC用浓度为90％甲醇溶液洗脱。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为1.168；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为67.8g；经硅胶柱真空液相层析后得到7个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为2.0mg。
化合物在抗菌抑菌和抗癌领域的用途。所得化合物为黄色无定形粉末，是吲哚二萜类化合物，并表现出对金黄色葡萄球菌的抗菌活性，同时可以对A549细胞和激酶蛋白C-β产生抑制作用，可作为抗癌药物开发的潜在靶点化合物，因此在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景。
实施例2：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，具体步骤如下：
1)将对虾依次用乙醇和无菌海水洗涤后捣碎，然后用无菌海水稀释至10-2，取200μl稀释液均匀涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于30℃下培养6天后，收集并纯化菌落，于2℃储存备用；
2)将收集得黄曲霉菌种以11％的接种量培养在含有0.09wt％二氢吡啶和0.04wt％薄荷醇的培养液中，静态条件下培育35天，即得发酵液，上述发酵中温度控制方式为高温-低温-高温交互进行，高温温度为30℃，持续时间为9天，低温温度为14℃，持续时间为5天；
3)将发酵液过滤，所得滤液用乙酸乙酯萃取2次，得到滤液萃取液，然后用体积浓度为75％的丙酮提取所得菌丝2次，再过滤后将所得丙酮提取液减压浓缩，然后用乙酸乙酯萃取浓缩液2次，得到菌丝萃取液，然后将滤液萃取液和菌丝萃取液合并并减压浓缩，得到粗提物备用；
4)将粗提物流经硅胶柱真空液相层析，用石油醚-CH2Cl2(1:1和0:1)和CH2Cl2-甲醇(100～0％)梯度洗脱，洗脱梯度分别为100:0、90:10、80:20、70:30、60:40、50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100，得到8个主要馏分，再将其中的目标馏分2先经硅胶柱层析，洗脱剂为CH2Cl2:甲醇＝100:1的混合溶剂，然后流经Sphadex LH-20凝胶柱层析，用1:1的CH2Cl2-甲醇洗脱，得到馏分1和2，然后以流速为2mL/min流经半制备HPLC，用浓度为90％甲醇溶液洗脱得到目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为1.126；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为67.1g；经硅胶柱真空液相层析后得到8个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为1.9mg。
实施例3：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，具体步骤如下：
1)将对虾依次用乙醇和无菌海水洗涤后捣碎，然后用无菌海水稀释至10-2，取150μl稀释液均匀涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于28℃下培养7天后，收集并纯化菌落，于4℃储存备用；
2)将收集得黄曲霉菌种以9.5％的接种量培养在含有0.07wt％二氢吡啶和0.07wt％薄荷醇的培养液中，静态条件下培育32天，即得发酵液，上述发酵中温度控制方式为高温-低温-高温交互进行，高温温度为25℃，持续时间为10天，低温温度为16℃，持续时间为3天；
3)将发酵液过滤，所得滤液用乙酸乙酯萃取3次，得到滤液萃取液，然后用体积浓度为80％的丙酮提取所得菌丝3次，再过滤后将所得丙酮提取液减压浓缩，然后用乙酸乙酯萃取浓缩3次，得到菌丝萃取液，然后将滤液萃取液和菌丝萃取液合并并减压浓缩，得到粗提物备用；
4)将粗提物流经硅胶柱真空液相层析，用石油醚-CH2Cl2(1:1和0:1)和CH2Cl2-甲醇(100～0％)梯度洗脱，洗脱梯度分别为100:0、90:10、80:20、70:30、60:40、50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100，得到8个主要馏分，再将其中的目标馏分2先经硅胶柱层析，洗脱剂为CH2Cl2:甲醇＝100:1的混合溶剂，然后流经Sphadex LH-20凝胶柱层析，用1:1的CH2Cl2-甲醇洗脱，得到馏分1和2，然后以流速为2mL/min流经半制备HPLC，用浓度为90％甲醇溶液洗脱得到目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为1.157；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为68.3g；经硅胶柱真空液相层析后得到8个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为2.1mg。
实施例4：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，与实施例3中不同之处在于：步骤3)具体如下：将发酵液过滤，所得滤液用乙酸乙酯萃取3次，得到滤液萃取液，然后用体积浓度为80％的丙酮提取所得菌丝3次，再过滤后将所得丙酮提取液减压浓缩，然后用乙酸乙酯萃取浓缩液3次，得到菌丝萃取液，然后将滤液萃取液和菌丝萃取液合并并减压浓缩，得到粗提物备用，上述丙酮溶液中含有重量占比为0.05％的羟基乙酸和0.05％的白皮杉醇，在丙酮中加入羟基乙酸和白皮杉醇，能利用羟基和羧基结构与蛋白质、脂质、金属离子等杂质之间通过配位键形成螯合物沉淀，降低了体系电平衡能阈值，也降低了基质干扰，使得目标物选择性和富集倍数增加，有利于萃取效率和目标物收率的提高，同时也利用官能团间的聚集，扩大有机溶剂与目标物的相容性，使得目标物的检测痕量最低值降低，进而提升化合物检出量和产率。其他步骤与实施例3一致，制得目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为1.216；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为70.2g；经硅胶柱真空液相层析后得到8个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为2.3mg。
实施例5：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，与实施例3中不同之处在于：步骤2)所用发酵培养液中不含有二氢吡啶和薄荷醇。其他步骤与实施例3一致，制得目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为1.007；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为63.2g；经硅胶柱真空液相层析后得到7个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为1.5mg。粗提物和产物产量与实施例3相比，表明外源物质的添加对发酵产生了明显的有益效果，增加了菌株代谢产物的多样性和流通量，同时也提高了提取产量和产率。
实施例6：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，与实施例3中不同之处在于：步骤2)未采用高低温交互的方式控制发酵温度，而是在25℃下培育了32天。其他步骤与实施例3一致，制得目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为0.987；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为63.8g；经硅胶柱真空液相层析后得到7个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为1.3mg。粗提物和产物产量与实施例3相比，表明在高低温交互环境下发酵对发酵产生了明显的有益效果，增加了菌株代谢产物的多样性和流通量，同时也提高了提取产量和产率。
实施例7：
一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，与实施例3中不同之处在于：步骤2)未采用高低温交互的方式控制发酵温度，而是在25℃下培育了32天，同时所用发酵培养液中不含有二氢吡啶和薄荷醇。其他步骤与实施例3一致，制得目标化合物。
本实施例中对发酵液中菌体浓度进行检测，测得其吸光度值为0.823；提取所得粗提物干燥成粉后，其质量为61.8g；经硅胶柱真空液相层析后得到6个主要馏分，将其中的目标馏分2经Sphadex LH-20凝胶柱层析后得到2个馏分，再经过半制备HPLC纯化后所得目标产物产量为1.0mg。粗提物和产物产量与实施例3相比，发酵条件变化最明显，表明在高低温交互环境下发酵和外源物质的添加都明显增加了菌株代谢产物的多样性和流通量，同时也提高了提取产量和产率。
实施例8：
从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的抑菌测试
1)取金黄色葡萄球菌接种于YPD培养基上，37℃摇床培养24h作为种子液备用，用一次性无菌滴管取0.5mL种子液滴加至预先配好的肉汁琼脂固体培养基平板中，用灭菌后的棉签均匀涂布在培养基上，静置5分钟待其被培养基完全吸收，倒置备用；
2)用移液枪分别取10μL实施例3～7中所制化合物样品液(10mg/mL)于滤纸片上，待溶剂挥发后将滤纸片贴附于刚涂布了指示菌的平板上，37℃静置培养12小时后观察抑菌圈直径，并以0.1mg/mL的环丙沙星作为阳性对照组。结果如下表1。
表1从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的抑菌测试
由上表可知，各实施例的抑菌圈直径和对照组相差不大，说明实施例所得产物具有良好的抑菌活性，在抗菌抑菌方面具有实用前景和经济价值。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (10)

1.一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；所述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C32H39NO4。
2.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述吲哚二萜类化合物包括具有结构式如下式(1)的化合物：
3.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述黄曲霉发酵条件如下：接种量为8～12％，静态发酵，时间为25～35天。
4.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述高低温交互环境是以高温-低温-高温交互的方式控制，高温温度为23～30℃，持续时间为8～10天，低温温度为12～16℃，持续时间为2～5天。
5.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述发酵培养用培养液中含有0.04～0.1wt％的二氢吡啶和0.02～0.12wt％的薄荷醇。
6.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述黄曲霉菌株来源为凡纳滨对虾。
7.根据权利要求6所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述黄曲霉菌株收集步骤如下：将对虾依次用乙醇和无菌海水洗涤后捣碎，然后用无菌海水稀释至10-2，取100～200μl稀释液均匀涂布在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于25～30℃下培养5～8天后，收集并纯化菌落，于0～4℃储存备用。
8.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述提取是用乙酸乙酯对发酵液过滤所得滤液和菌丝分别进行萃取，其中菌丝提取需在体积浓度为70～80％的丙酮溶液保护下进行。
9.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述分离纯化是依次用硅胶柱真空液相层析、Sphadex LH-20凝胶柱层析和半制备HPLC纯化提取所得粗提物。
10.根据权利要求1所述的一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，其特征在于：所述化合物在抗菌抑菌和抗癌领域的用途。
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