CN110074252A - 一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物饲料领域,涉及一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法及应用;步骤为:活化菌株,得到芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌发酵种子液;豆渣与麸皮或米糠混合后添加蔗糖,再添加纤维素酶、纤维二糖酶、葡糖淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和β‑葡聚糖酶,混合得到一期好氧发酵培养基,接种芽孢杆菌发酵种子液与酵母菌发酵种子液进行一期好氧发酵,发酵后得到一期发酵混合物,再接种乳酸菌发酵种子液,在密封条件下进行厌氧发酵后获得成品;本发明采用菌酶协同发酵以及好氧、厌氧分步发酵的模式,发酵彻底,大豆肽转化程度高,胰蛋白酶抑制剂的去除率达85%以上,各霉菌毒素低于国家饲料卫生限量标准;适口性好,动物喜食,经济效益高。
Description
技术领域
本发明属于生物饲料领域,具体涉及一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法及 应用。
背景技术
豆渣是生产豆奶、豆腐等豆制品加工过程中的主要副产品,其产量巨大。豆渣营养丰富, 由蛋白质、纤维素、脂肪、氨基酸、维生素以及少量其他有机物组成,可用作动物饲料。但 是在实际生产中,由于豆渣自身含水量比较大,口感粗糙,容易腐败变质,不易运输等缺点, 大部分被遗弃。这既浪费了资源,又造成了环境污染。另外,豆渣中含有胰蛋白酶抑制剂、 抗原蛋白和致甲状腺肿素等抗营养物质,部分农户将其高温蒸煮后直接饲喂动物,这不会消 除所有的抗营养物质,残留的抗营养物质会对动物的生长产生不利影响。并且,在高温烹饪 过程中也破坏了一些营养素,导致其营养和能量的利用率非常低,没有完全发挥豆渣的潜在 利用价值。因此,合理开发利用豆渣资源,变废为宝,利用微生物发酵技术使其转变为优质 的生物饲料具有非常重要的意义。
目前对豆渣饲料已有一些研究,如专利CN 106509350A,其采用豆渣、玉米粉和麦壳为 发酵原料,将其混合均匀后需要进行脱氧和压力压缩处理,这种处理方式费事费力,发酵周 期较长;如专利CN 105961900A需要加入山黄皮、黄柏、北参沙、胆木、椰果、鱿鱼须等原 料,专利CN 105265281A需要加入牛大力、陈皮、金银花、柿饼、鱼冻等,专利CN106173507A 需要加入紫甘蓝、蛹虫草、牡丹皮、秦皮、菊花瓣、木棉花、芦苇花等,此三个公开发明专 利需要的原料均不易于一般养殖场或饲料厂获得,原料造价较高,且均需要蒸煮、烘干、造 粒处理,成本较高,不利于规模化推广与生产,无法获得可观的经济效益;现有研究报道中, 也有采用酵母菌、芽孢杆菌或乳酸菌进行发酵,但是没有添加酶制剂进行菌酶协同发酵,抗 营养因子降解不彻底,发酵效果不显著;此外,也有利用豆渣生产青储饲料的研究报道,但 是发酵周期长,耗时耗力,其发酵产品品质得不到保证;而且,豆渣中含有大量的抗营养因 子,现有研究报道的文献中均没有以抗营养因子为检测指标,抗营养因子降解效果如何也无 从得知,难以评价饲料成品的品质,另外,对于发酵前后豆渣中含有的苷元型大豆异黄酮的 含量变化也没有提及。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明旨在解决所述问题之一,提供一种基于豆渣的高效低 成本的发酵饲料加工方法及应用,使其抗营养因子得到完全去除或大幅度降解,纤维素与半 纤维素含量得到大幅度降低,大豆肽含量大幅度提高,富含益生菌与大豆异黄酮,具有酸香 味,适口性好,饲喂效果良好,保存期长;并且操作简便,成本极低,经济效益显著。
为了实现以上目的,本发明采用的技术方案具体如下:
(1)将芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌分别接种到液体培养基进行活化培养,得到芽孢杆菌 发酵种子液、酵母菌发酵种子液和乳酸菌发酵种子液;
(2)配置一期好氧发酵培养基:将豆渣与麸皮或米糠混合均匀,然后添加蔗糖混合均匀, 再添加纤维素酶、纤维二糖酶、葡糖淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶,混合均 匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)接种步骤(1)得到的芽孢杆菌发酵种子液与酵母菌发酵种子液于步骤(2)得到的 一期好氧发酵培养基,调整发酵温度以及培养基的含水量进行一期好氧发酵,发酵一定时间 后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)得到的乳酸菌发酵种子液于步骤(3)得到的一期发酵混合物,混合 均匀,得到二期发酵混合物;在密封条件下进行二期厌氧发酵,厌氧发酵后获得成品。
优选的,步骤(1)中所述的芽孢杆菌包括纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。
优选的,步骤(2)中所述一期好氧发酵培养基的各组分重量百分含量分别为:
豆渣40%~79.89%;
麸皮或米糠20%~59.89%;
蔗糖0.01%~1.5%;
纤维素酶0.02%~0.5%;
纤维二糖酶0.02%~1%;
葡糖淀粉酶0.01%~0.9%;
甘露聚糖酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的总量为0.05%~1.5%,三酶的添加质量比例为 1:1:1。
优选的,步骤(2)中所述纤维素酶的酶活力为11000u/g、纤维二糖酶的酶活力为4000u/g、 葡糖淀粉酶的酶活力为26万u/g、木聚糖酶的酶活力为10万u/g、甘露聚糖酶的酶活力为1 万u/g和β-葡聚糖酶的酶活力为2.7万u/g。
优选的,步骤(3)中所述芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液的接种量均为一期好 氧发酵培养基重量的0.1%~12%;所述芽孢杆菌和酵母菌的活菌总数均为 0.2×109~2.5×109cfu/mL;所述酵母菌发酵种子液包括酿酒酵母发酵种子液、产朊假丝酵母发酵种子液或热带假丝酵母发酵种子液的一种或多种。
优选的,步骤(3)中所述发酵的温度为24~38℃,时间为6~48h。
优选的,步骤(3)中所述调整培养基的含水量为35%~70%。
优选的,步骤(4)中所述乳酸菌发酵种子液的活菌总数为1×109~6×109cfu/mL,接种量 为发酵混合物重量的0.1%~15%。所述乳酸菌发酵种子液包括嗜酸乳杆菌发酵种子液、植物 乳杆菌发酵种子液、干酪乳杆菌发酵种子液、副干酪乳杆菌发酵种子液或鼠李糖乳杆菌发酵 种子液的一种或多种。
优选的,步骤(4)中所述二期发酵混合物的含水量为36%~75%。
优选的,步骤(4)中所述二期发酵的时间为3~20天,温度为20~38℃。
其中,纤维素酶、纤维二糖酶、葡糖淀粉酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶均购 自沧州夏盛酶生物技术有限公司,均为普通商业化酶制剂。
菌种来源:(1)芽孢杆菌:纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)CGMCC1.1086、地衣芽孢杆 菌(Bacillus licheniformis)CGMCC1.813、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC1.921;
(2)酵母菌:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2.1527、产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC2.1180和热带假丝酵母(Candida tropicalis)CGMCC2.637;
(3)乳酸菌:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC 1.557、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CGMCC 1.2467、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CGMCC 1.577、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)CGMCC 1.8727和副干酪乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CGMCC 8903;
上述菌种均购于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
本发明的有益效果是:
(1)本发明方法采用豆渣这种廉价的豆制品为发酵原料,成本低,不需要高温灭菌处理, 成品不需要干燥;而且不需要大型设备的投入,方法简便实用,可行性高。
(2)本发明采用菌酶协同发酵以及好氧、厌氧分步发酵的模式,发酵彻底,大豆肽转化 程度高,大豆肽含量高,效果显著;其中抗原蛋白被完全降解,胰蛋白酶抑制剂的去除率达 85%以上,纤维素、半纤维素得到大幅度降解,各霉菌毒素低于国家饲料卫生限量标准。
(3)本发明采用多种益生菌,所用的酵母菌可使一期发酵培养基含有丰富的菌体蛋白、 维生素以及氨基酸,显著提高了豆渣的营养价值;乳酸菌作为益生菌之一,可产生大量有机 酸,促进动物的健康生长,维护肠道的稳态平衡;芽孢杆菌可产生大量的消化酶类,促进动 物对营养物质的消化与吸收;最终发酵产品富含多种益生菌活菌,对动物的肠道健康具有有 利影响。
(4)本发明制备的发酵产品富含功能性物质-大豆异黄酮,糖苷型大豆异黄酮被大幅度 转化为活性更强的游离型大豆异黄酮,其抗氧化能力强,雌性动物食用后有助于提高其泌乳 能力,并提高机体免疫力;而且,与发酵原料相比,饲料成品的大豆肽含量提高了3倍之多。
(5)本发明方法获得的产品有机酸含量高,酸香味扑鼻、无苦味、适口性好,动物喜食; 经动物饲养实验验证,可明显提高动物的重量。
附图说明
图1是本发明发酵工艺的简略流程图。
图2是发酵成品与发酵原料的大豆抗原蛋白对比SDS-PAGE图;其中M为蛋白Marker, F1指的是实施例1发酵成品的蛋白条带;F0是发酵原料的蛋白条带。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。
实施例1:
(1)芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的活化培养:
A、首先配置芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的培养基;
芽孢杆菌斜面和平板培养基:酵母膏5g,氯化钠10g,蛋白胨10g,琼脂15g,葡萄糖5g,蒸馏水1L,pH自然,110℃灭菌30min;芽孢杆菌液体种子培养基的成分同斜面培养基,区别是不加琼脂。
酵母菌斜面和平板培养基:蛋白胨15g,酵母浸粉10g,葡萄糖10g,琼脂20g,1000mL蒸馏水,pH自然,110℃灭菌20min。酵母菌液体种子培养基的成分同斜面培养基,区别是 不加琼脂。
乳酸菌斜面和平板培养基:酵母膏5g,氯化钠10g,蛋白胨10g,琼脂20g,葡萄糖15g, 蒸馏水1L,pH自然。110℃灭菌30min;乳酸菌液体种子培养基的成分同斜面培养基,区别 是不加琼脂。
B、芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的活化培养方法:
芽孢杆菌液体菌种培养:无菌条件下分别将4℃保存的芽孢杆菌接种至斜面培养基,37℃ 培养24h复苏菌种,再在平板上划菌落,挑取种子分别接种到装有120mL液体培养基的摇瓶 (250mL)中,160r/min,37℃培养18h,得到芽孢杆菌发酵种子液,按实际需要再以2%的 接种量接种到大量液体培养基中扩大培养;所述芽孢杆菌包括纳豆芽孢杆菌CGMCC1.1086、 地衣芽孢杆菌CGMCC1.813和枯草芽孢杆菌CGMCC 1.921。
酵母菌液体菌种培养:无菌条件下分别将4℃保存的酵母菌接种至斜面培养基,28℃培 养30h复苏菌种,再在平板上划菌落,挑取培养后的菌种分别接种到装有120mL液体培养基 的摇瓶(250mL)中,160r/min,28℃培养20h,得到酵母菌发酵种子液,按实际需要再3% 的接种量接种到大量液体培养基中扩大培养;所述酵母菌包括酿酒酵母CGMCC2.1527、产 朊假丝酵母CGMCC2.1180和热带假丝酵母CGMCC2.637。
乳酸菌液体菌种培养:无菌条件下分别将4℃保存的乳酸菌接种至斜面培养基,30℃培 养30h复苏菌种,再在平板上划菌落,挑取种子分别接种到装有130mL液体培养基的摇瓶 (250mL)中,160r/min,30℃培养22h,得到乳酸菌发酵种子液,按实际需要再以2%的接种量接种到大量液体培养基中扩大培养;所述乳酸菌包括植物乳杆菌CGMCC 1.557、嗜酸乳杆菌CGMCC 1.2467、鼠李糖乳杆菌CGMCC 1.577、干酪乳杆菌CGMCC 1.8727和副干酪乳 杆菌CGMCC 8903。
(2)配置一期好氧发酵培养基,各组分重量百分含量分别为:豆渣70%;麸皮28.19%; 蔗糖1%;纤维素酶0.05%;葡糖淀粉酶0.5%;纤维二糖酶0.06%;甘露聚糖酶、木聚糖酶和 β-葡聚糖酶的总添加量0.2%,混合均匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)将步骤(1)活化培养后的纳豆芽孢杆菌发酵种子液和酿酒酵母发酵种子液接种到 一期好氧发酵培养基,接种量均为一期好氧发酵培养基重量的6%,纳豆芽孢杆菌和酿酒酵母 的活菌总数均为2.0×109cfu/mL,调整培养基的含水量为55%,发酵温度为32℃,好氧发酵 24h,进行一期好氧发酵后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)活化培养后的鼠李糖乳杆菌发酵种子液于步骤(3)得到的一期发酵 混合物,接种量为一期发酵混合物重量的9%,活菌总数为5×109cfu/mL,混合均匀,调整含 水量为60%,得到二期发酵混合物;置于发酵袋中在密封条件下进行二期厌氧发酵,发酵温 度为34℃,发酵12天后获得成品,并检测各项指标验证饲料品质。
实施例2:
(1)芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的活化培养,具体操作同实施例1;
(2)配置一期好氧发酵培养基,各组分重量百分含量分别为:豆渣79.89%;麸皮20%; 蔗糖0.01%;纤维素酶0.02%,纤维二糖酶0.02%,葡糖淀粉酶0.01%;甘露聚糖酶、木聚糖 酶和β-葡聚糖酶的总添加量0.05%,混合均匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)将步骤(1)活化培养后的枯草芽孢杆菌发酵种子液和产朊假丝酵母发酵种子液接 种到一期好氧发酵培养基,接种量均为一期好氧发酵培养基重量的12%,枯草芽孢杆菌和产 朊假丝酵母的活菌总数均为0.2×109cfu/mL,调整培养基的含水量为35%,发酵温度为24℃, 好氧发酵48h,进行一期好氧发酵后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)活化培养后的嗜酸乳杆菌发酵种子液和植物乳杆菌发酵种子液于步 骤(3)得到的一期发酵混合物,两菌的接种量为一期发酵混合物重量的0.1%,两菌接种量 的质量比为1.5:1,两菌的活菌数均为6×109cfu/mL,混合均匀,调整含水量为36%,得到二 期发酵混合物;置于发酵袋中在密封条件下进行二期厌氧发酵,发酵温度为38℃,发酵20 天后获得成品,并检测各项指标验证饲料品质。
实施例3:
(1)芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的活化培养,具体操作同实施例1;
(2)配置一期好氧发酵培养基,各组分重量百分含量分别为:豆渣40%;米糠59.89%; 蔗糖0.01%;纤维素酶0.02%;纤维二糖酶0.02%;葡糖淀粉酶0.01%;甘露聚糖酶、木聚糖 酶和β-葡聚糖酶的总添加量0.05%,混合均匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)将步骤(1)活化培养后的地衣芽孢杆菌发酵种子液、热带假丝酵母发酵种子液和 酿酒酵母发酵种子液接种到一期好氧发酵培养基,地衣芽孢杆菌发酵种子液的接种量为 0.1%,热带假丝酵母发酵种子液和酿酒酵母发酵种子液的总接种量为0.1%,热带假丝酵母发 酵种子液和酿酒酵母发酵种子液的接种质量比为1:1;地衣芽孢杆菌、热带假丝酵母和酿酒 酵母的活菌总数均为2.5×109cfu/mL;调整培养基的含水量为70%,发酵温度为38℃,好氧 发酵6h,进行一期好氧发酵后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)活化培养后的副干酪乳杆菌发酵种子液和嗜酸乳杆菌发酵种子液于 步骤(3)得到的一期发酵混合物,总接种量为一期发酵混合物重量的15%,副干酪乳杆菌发 酵种子液和嗜酸乳杆菌发酵种子液的接种质量比为1:1.5,副干酪乳杆菌和嗜酸乳杆菌的活菌 数均为1×109cfu/mL,混合均匀,调整含水量为75%,得到二期发酵混合物;置于发酵袋中 在密封条件下进行二期厌氧发酵,发酵温度为20℃,发酵3天后获得成品,并检测各项指标 验证饲料品质。
实施例4:
(1)芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的活化培养,具体操作同实施例1;
(2)配置一期好氧发酵培养基,各组分重量百分含量分别为:豆渣74%;米糠20.60%; 蔗糖1.5%;纤维素酶0.5%;纤维二糖酶1%;葡糖淀粉酶0.9%;甘露聚糖酶、木聚糖酶和β- 葡聚糖酶的总添加量1.5%,混合均匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)将步骤(1)活化培养后的枯草芽孢杆菌发酵种子液、产朊假丝酵母发酵种子液和 酿酒酵母发酵种子液接种到一期好氧发酵培养基,酿酒酵母发酵种子液和产朊假丝酵母发酵 种子液的总接种量为6%,其中酿酒酵母发酵种子液和产朊假丝酵母发酵种子液的接种量比例 为2:1,枯草芽孢杆菌发酵种子液的接种量为6%,枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和产朊假丝酵母 的活菌总数均为1.5×109cfu/mL;调整培养基的含水量为35%,发酵温度为30℃,好氧发酵 36h,进行一期好氧发酵后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)活化培养后的植物乳杆菌发酵种子液、嗜酸乳杆菌发酵种子液和干 酪乳杆菌发酵种子液于步骤(3)得到的一期发酵混合物,三种菌液的总接种量为9%,植物 乳杆菌发酵种子液、嗜酸乳杆菌发酵种子液和干酪乳杆菌发酵种子液接种量的质量比为 2:2:1,三种菌的活菌总数均为6×109cfu/mL,混合均匀,调整含水量为75%,得到二期发酵 混合物;置于发酵袋中在密封条件下进行二期厌氧发酵,发酵温度为24℃,发酵15天后获 得成品,并检测各项指标验证饲料品质。
实施例5:产品饲喂效果实验;本发明制备的豆渣发酵成品添加到普通饲料中用于家畜 的喂养,添加量以重量计为5%~30%;
选择实施例2的豆渣发酵成品,以猪为实验对象,进行饲喂实验;试验点为浙江嘉兴南 湖余新镇大不同猪场。取60只保育猪(长白猪),20公斤左右,随机组合成两组,每组30只,试验日粮配方如表7,饲养90天,试验结果如表8。
本发明的饲料成本价为2000元/吨,售价为2500元每吨,本次的添加量以重量计为15%, 以15%的实施例2制备的发酵成品饲料代替普通饲料中15%的麸皮;麸皮按1500元每吨算, 从日粮饲料成本上试验组饲料成本多27元;但是使用本发明饲料的料肉比从2.69下降到2.30, 总体上讲,全期毛重相对于对照组增加12Kg,猪价以18元/Kg算,经济效益增加216元; 除去饲料成本增加的27.1元,每头猪直接增加收入约188.8元,不包括生病减少,用药减少, 肉质好,猪价略高等增收因素,总体上讲,使用本发明饲料,饲用和经济效果非常明显。
表1-4是发酵成品各检测指标的结果,其中游离型大豆异黄酮的含量指的是大豆苷元、 黄豆黄素和染料木素的含量之和;各检测指标减少率及增加率是各实施例的发酵成品与发酵 前的发酵原料(豆渣与麸皮或米糠)中的各指标含量做对比而得到的。
表1是实施例1的发酵成品各检测指标的结果
检测项目 | 含量 | 减少率/增加率(%) |
胰蛋白酶抑制剂(TIU/g) | 558.00 | -86.00 |
异硫氰酸酯(mg/kg) | 5.4 | -70.60 |
大豆肽(%) | 50.47 | +364.31 |
纤维素(%) | 20.24 | -12.00 |
半纤维素(%) | 14.96 | -32.00 |
游离型大豆异黄酮(mg/kg) | 211.00 | +68.89 |
pH | 3.80 | -40.90 |
表2是实施例2的发酵成品各检测指标的结果
检测项目 | 含量 | 减少率/增加率(%) |
胰蛋白酶抑制剂(TIU/g) | 534.00 | -89.35 |
异硫氰酸酯(mg/kg) | 4.90 | -76.96 |
大豆肽(%) | 43.49 | +316.89 |
纤维素(%) | 20.76 | -9.74 |
半纤维素(%) | 15.06 | -31.55 |
游离型大豆异黄酮(mg/kg) | 205.00 | +50.66 |
pH | 4.01 | -37.17 |
表3是实施例3的发酵成品各检测指标的结果
检测项目 | 含量 | 减少率/增加率(%) |
胰蛋白酶抑制剂(TIU/g) | 309.00 | -86.73 |
异硫氰酸酯(mg/kg) | 3.55 | -65.34 |
大豆肽(%) | 30.02 | +306.16 |
纤维素(%) | 21.98 | -8.38 |
半纤维素(%) | 14.25 | -35.23 |
游离型大豆异黄酮(mg/kg) | 155.00 | +51.85 |
pH | 3.88 | -38.90 |
表4是实施例4的发酵成品各检测指标的结果
检测项目 | 含量 | 减少率/增加率(%) |
胰蛋白酶抑制剂(TIU/g) | 459.00 | -88.48 |
异硫氰酸酯(mg/kg) | 4.50 | -75.50 |
大豆肽(%) | 50.55 | +365.04 |
纤维素(%) | 20.13 | -13.04 |
半纤维素(%) | 14.11 | -39.41 |
游离型大豆异黄酮(mg/kg) | 228.00 | +68.96 |
pH | 3.63 | -38.11 |
表5是实施例1、2、3、4的发酵成品的感官评价结果
表6是实施例1、2、3、4的发酵成品常规霉菌毒素的检测结果
表7试验猪日粮配方(%)
日粮组成 | 试验组 | 对照组 |
玉米 | 62 | 62 |
豆粕 | 20 | 20 |
预混料 | 3 | 3 |
麸皮 | 0 | 15 |
发酵成品饲料 | 15 | 0 |
合计 | 100 | 100 |
表8实施例2制备的成品饲料饲喂试验结果
说明:以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案;因此,尽管 本说明书参照上述的各个实施例对本发明已进行了详细的说明,但是本领域的普通技术人员 应当理解,仍然可以对本发明进行修改或等同替换;而一切不脱离本发明的精神和范围的技 术方案及其改进,其均应涵盖在本发明的权利要求范围内。
Claims (10)
1.一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,按照下述步骤进行:
(1)将芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌分别接种到液体培养基进行活化培养,得到芽孢杆菌发酵种子液、酵母菌发酵种子液和乳酸菌发酵种子液;
(2)配置一期好氧发酵培养基:将豆渣与麸皮或米糠混合均匀,然后添加蔗糖混合均匀,再添加纤维素酶、纤维二糖酶、葡糖淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶,混合均匀,得到一期好氧发酵培养基;
(3)接种步骤(1)得到的芽孢杆菌发酵种子液与酵母菌发酵种子液于步骤(2)得到的一期好氧发酵培养基,调整发酵温度以及培养基的含水量进行一期好氧发酵,发酵一定时间后得到一期发酵混合物;
(4)接种步骤(1)得到的乳酸菌发酵种子液于步骤(3)得到的一期发酵混合物,混合均匀,得到二期发酵混合物;在密封条件下进行二期厌氧发酵,厌氧发酵后获得成品。
2.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(2)中所述一期发酵培养基的各组分重量百分含量分别为:豆渣40%~79.89%,麸皮或米糠20%~59.89%,蔗糖0.01%~1.5%,纤维素酶0.02%~0.5%,纤维二糖酶0.02%~1%,葡糖淀粉酶0.01%~0.9%,甘露聚糖酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的总量为0.05%~1.5%。
3.根据权利要求1或2所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,所述添加甘露聚糖酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的质量比为1:1:1;所述纤维素酶的酶活力为11000u/g、纤维二糖酶的酶活力为4000u/g、葡糖淀粉酶的酶活力为26万u/g、木聚糖酶的酶活力为10万u/g、甘露聚糖酶的酶活力为1万u/g和β-葡聚糖酶的酶活力为2.7万u/g。
4.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(3)中所述芽孢杆菌发酵种子液与酵母菌发酵种子液的接种量均为一期好氧发酵培养基重量的0.1%~12%;所述芽孢杆菌和酵母菌的活菌总数均为0.2×109~2.5×109cfu/mL;所述酵母菌发酵种子液包括酿酒酵母发酵种子液、产朊假丝酵母发酵种子液或热带假丝酵母发酵种子液的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(3)中所述调节含水量为35%~70%。
6.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(3)中所述发酵的温度为24~38℃,时间为6~48h。
7.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(4)中所述乳酸菌发酵种子液的活菌总数为1×109~6×109cfu/mL,接种量为一期发酵混合物重量的0.1%~15%;所述乳酸菌发酵种子液包括嗜酸乳杆菌发酵种子液、植物乳杆菌发酵种子液、干酪乳杆菌发酵种子液、副干酪乳杆菌发酵种子液或鼠李糖乳杆菌发酵种子液的一种或多种。
8.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(4)中所述二期发酵混合物的含水量为36%~75%。
9.根据权利要求1所述的一种基于豆渣的高效低成本的发酵饲料加工方法,其特征在于,步骤(4)中所述二期发酵的时间为3~20天,温度为20~38℃。
10.根据权利要求1~9任意一项所述的方法制备的发酵饲料应用于添加到普通饲料中进行家畜的喂养,所述添加量以重量计为5%~30%。
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