CN110072538A - 包含植物提取复合物的抗炎组合物及用于治疗炎症性疾病的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含植物提取复合物的抗炎组合物及用于治疗炎症性疾病的组合物,更具体地说,涉及含有紫苏提取物和白术提取物的植物提取复合物的抗炎组合物;及其制备方法;和包含所述提取复合物的用于治疗炎症性疾病的药学组合物。
Description
技术领域
本发明涉及包含天然植物提取复合物的抗炎组合物,更具体地,涉及包含紫苏和白术提取物的抗炎组合物及用于治疗炎症性疾病的药物组合物。
背景技术
炎症是由组织损伤或破坏引起的局部保护性反应,其作用是破坏、削弱或屏蔽所有引起损伤的物质和受损组织。炎症的特征是毛细血管穿孔、血液成分渗漏到间质空间、白细胞迁移到发炎的组织。在宏观方面,它通常伴有如红斑,浮肿,痛觉过敏和疼痛等临床症状。
如上所限定的,炎症反应是由于炎症出现的某一特定反应。在医学领域中众所周知的是,炎症反应引起与不同疾病和损伤相关的许多身体不适,例如疼痛和功能丧失。因此,给予降低炎症反应引起的身体不适的药剂为宜,并且具有该性质作用的物质被归类为抗炎药。抗炎药用于治疗多种疾病,并且相同的药物常常也可用于治疗不同的疾病。
作为抗炎物质,天然和合成的皮质类固醇制剂会产生许多副作用,包括血压升高、盐和水停滞、肾脏受损、钾和钙分泌增加。另外,为克服类固醇类物质的副作用,已开发非类固醇类抗炎作用物质(NSAID)。其中,使用最广泛的是水杨酸盐,乙酰水杨酸或阿司匹林是最广泛使用的镇痛、解热及抗炎物质,已在韩国专利申请No.2008-7027164等中公开。然而,当大量给药时,会出现各种副作用,例如呼吸急促、循环系统衰竭、上腹痛、呕吐、胃肠道出血、肝损伤、血小板抑制等。
尽管许多类型的抗炎物质已经被应用,但仍然需要不具有副作用且具有优异抗炎效果的物质。
因此,当开发出具有优异的抗炎活性并且对人体安全的天然抗炎剂时,预计可在相关领域得到有效应用。
发明内容
本发明的一个方面是提供包括抗炎活性优异且对人体是安全的植物提取复合物的抗炎组合物。
本发明的另一方面是提供包括抗炎活性优异且对人体是安全的植物提取复合物的抗炎组合物的制备方法。
本发明的另一方面是提供包含抗炎活性优异且对人体是安全的植物提取复合物的用于治疗炎症性疾病的药学组合物。
根据本发明的一个方面,提供一种包括由紫苏提取物及白术提取物构成的植物提取复合物的抗炎组合物。
根据本发明的另一方面,提供一种抗炎组合物的制备方法,包括分别获得包含紫苏提取物及白术提取物的植物提取物的步骤;以及通过混合各个获得的植物提取物来制备提取复合物的步骤。
根据本发明的另一方面,提供一种包括由紫苏提取物及白术提取物构成的植物提取复合物的用于治疗炎症性疾病的抗炎组合物。
有益效果
根据本发明的抗炎组合物及用于治疗炎症性疾病的药学组合物使用从异白苏烯酮(isoegomaketone)含量优异的紫苏及白术中获得的提取物的混合物构成的提取复合物,因此预计可在炎症的治疗、预防及改善,以及化妆品、保健食品、医药品、生活用品等诸多领域以抗炎为目的得到有效利用。
附图说明
图1是可在本发明中使用的紫苏Antisperill的培育过程示意图。
图2示出了超临界提取过程,显示了压力变化与时间的关系。
图3示出了提取复合物的毒性程度测量结果。
图4示出了以每种酒精提取物处理细胞时产生的NO量的测量结果(a)和以白术提取物及紫苏提取物的各个超临界提取物处理细胞时产生的NO量测量结果(b),用于评价白术提取物及紫苏提取物各自的抗炎效果。
图5示出了以实施例的提取复合物处理细胞时产生的NO量测量结果,以评价实施例的提取复合物的抗炎效果。
图6示出了将本发明的酒精提取复合物(a)和超临界提取复合物(b)口服给予关节炎小鼠模型后的后肢变化。
图7A至7C分别示出了口服给予关节炎小鼠模型25mg/kg至100mg/kg剂量的实施例1的提取复合物后确认至第六天的关节炎数值的变化(a)、后肢浮肿的厚度变化(b)、以及后肢浮肿的体积变化(c)。
图8A至8C分别示出了口服给予关节炎小鼠模型66.5mg/kg至133.0mg/kg剂量的实施例6的提取复合物后确认至第七天的关节炎数值的变化(a)、后肢浮肿的厚度变化(b)、以及后肢浮肿的体积变化(c)。
具体实施方式
在下文中,将参考附图描述本发明的优选实施例。然而,可以将本发明的实施例修改为各种其他形式,并且本发明的范围不限于下面描述的实施例。
根据本发明,提供一种抗炎组合物,包含含有紫苏提取物及白术提取物的植物提取复合物。而且,根据本发明,如果需要,可以进一步包括刺五加提取物。
在本发明中,所述白术(Atractylodes japonica Koidz)使用根茎。白术具有增强脾脏和提神、排除湿气促进尿液流畅、止汗、稳定孕妇胎气的功效。此外,白术可用于治疗脾虚、食欲不振、腹泻、痰或哮喘引起摄取食物时头晕的症状、浮肿、多汗症、孕妇胎动不稳定等症状。
刺五加(Acanthopanaxsenticosus)与人参同属五加科植物,为落叶阔叶灌木,可以使用树皮制备植物提取物。因刺五加树外形似山参,因此也被称为西伯利亚山参(Siberian Ginseng)。刺五加树含有大量生物活性优异的无梗五加苷和多种有效成分,因此用于治疗神经痛、高血压、神经衰弱、糖尿病,并可用作滋补品等。
此外,紫苏(Perilla frutescens BRITT.紫苏;苏叶)为唇形科(Labiatae)一年生草本植物,可以使用叶子制备植物提取物,用于发汗、镇咳、健胃、利尿,镇静和镇痛,而且对于晕眩症、身体疼痛及鼻塞和鼻涕也有治疗效果。
本发明中使用的所述紫苏提取物含有异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)或其盐作为活性成分,尤其在本发明中使用的所述紫苏提取物,每1g提取物含有10mg至30mg异白苏烯酮(IK,isoegomaketone),异白苏烯酮浓度优选为100mg/mL至300mg/mL。
本发明中,每1g紫苏提取物中的异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)含量不足10mg或异白苏烯酮浓度不足100mg/mL时,目标抗炎效果可能不充分,并且当每1g紫苏提取物中的异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)含量超过30mg或IK异白苏烯酮浓度超过300mg/mL时,毒性趋于增加。
所述异白苏烯酮含量增加的紫苏可通过照射例如50至500范围内的射线获得,优选可通过照射150至250Gy的γ射线,更优选地照射约200Gy的γ射线获得。
图1是Antisperill的示例性培育过程。更具体地,在紫苏种子上照射射线之后,在M1代挑选出生育优良的,将其培育至M3代,确认性状是否固定,最终对150株进行品系化处理,可通过生理活性评价选出抗炎效果优异的CJ-29A。此时,选择过程可以优秀繁育为主。
由此获得的Antisperill于2016年8月17日保藏于韩国生物资源中心(KoreanCollection for Type Cultures,KCTK),并获得了保藏号KCTC 13077BP。
在本说明书中,异白苏烯酮含量增加的紫苏优选获得保藏号KCTC 13077BP的Antisperill。
另外,本发明的所述提取复合物指独立制备紫苏提取物及白术提取物等植物提取物后,混合而成的复合物。
另外,在本发明中,所述紫苏提取物、白术提取物、刺五加提取物可分别以乙醇溶剂提取,更优选地,所述乙醇溶剂浓度为60%以上,更为优选地,所述乙醇溶剂浓度为100%。在使用乙醇溶剂提取的情况下,如图4所示,可获得显着改善的抗炎效果。
此时,所述植物提取复合物优选1重量份的紫苏提取物、白术提取物及刺五加提取物中的任一提取物与1重量份至2重量份的其他两种提取物的混合物。更为优选地,所述植物提取复合物由紫苏提取物、白术提取物及刺五加提取物以1:1:1的重量比混合而成。紫苏提取物、白术提取物及刺五加提取物以1:1:1的重量比混合而成时,如图3所示,与其他混合比相比,毒性可显著降低。
另外,所述紫苏提取物及白术提取物优选为分别以超临界提取获得的提取物,通过超临界提取方法从紫苏提取提取物时,与使用乙醇的酒精提取相比,异白苏烯酮含量增加为7倍左右;通过超临界提取方法从白术提取提取物时,与使用乙醇的酒精提取相比,白术内酯含量显著增加。
根据本发明,包含所述植物提取复合物的抗炎组合物的制备方法通过下述步骤进行:分别获得包含紫苏提取物及白术提取物的植物提取物的步骤;将分别获得的植物提取物混合以制备提取复合物的步骤进行。
分别获得所述植物提取物的步骤可以通过包括冻干各植物的步骤,粉碎冻干植物的步骤,以及将冻干植物独立地悬浮在乙醇溶剂并提取的步骤来进行。此时,植物提取物可进一步包括刺五加提取物。
此时,执行所述冻干步骤前,为去除污染物,还包括分别冲洗紫苏、白术、刺五加等的阶段,所述冻干步骤可在分别冲洗紫苏、白术、刺五加的步骤后后续进行。
在本发明中,冻干步骤可以在本领域的常规条件下进行,并且冻干步骤是优选的,因为其具有优异的干燥效率并且没有残留溶剂。
所述提取步骤优选粉碎冻干的植物来进行。所述冻干的植物被粉碎时,优点是没有残留的溶剂,并且之后的定量测量是容易的。
此外,分别获得植物提取物的步骤可以通过超临界提取各植物来进行,此时,可以获得具有改善的抗炎效果的抗炎组合物。
另一方面,本发明提供一种用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其包含含有紫苏提取物及白术提取物的植物提取复合物。
所述植物提取物复合物可包括各植物的酒精提取物,此时,所述植物提取复合物可进一步包括刺五加提取物。另一方面,所述植物提取复合物可以包括各植物的超临界提取物,此时,可以获得用于治疗炎症性疾病的具有显着增加的抗炎效果的药学组合物。
根据本发明,所述炎症性疾病选自由哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、过敏性鼻炎、皮炎、关节炎、过敏和炎症性肠病组成的群,尤其所述关节炎是类风湿性关节炎。
进一步地,所述药学组合物还可包含药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明的用于治疗炎症性疾病的药学组合物可以根据各使用目的,按照常规方法配制成各种形式,例如粉末、颗粒、片剂、胶囊、悬浮液、乳液、糖浆、气雾剂等口服制剂,可以灭菌注射溶剂形式等多种形式形成制剂使用,可口服或通过注入静脉内、腹腔内、皮下、直肠或局部等多种途径给药。
可包含在此类用于治疗炎症性疾病的药学组合物中的合适载体、赋形剂和稀释剂的实例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、无定形纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁,以及矿物油等。
此外,所述用于治疗炎症性疾病的药学组合物还可包括填充剂、抗凝血剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、乳化剂、防腐剂等。
用于口服给药的固体形式包括片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等,这些固态制剂可以通过在用于治疗炎症性疾病的药学组合物中混合至少一种赋形剂如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等来配制。除了简单的赋形剂外,还可以使用如硬脂酸镁和滑石等润滑剂。
口服液制剂包括悬浮液、溶液、乳液、糖浆等,除了常用的单纯稀释剂水和液体石蜡之外,还可包括例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂和保鲜剂等各种赋形剂。
非口服制剂包括无菌水溶液、非水溶剂、悬浮液、乳液、冻干形成物和栓剂。非水溶剂和悬浮液可包括丙二醇、聚乙二醇、橄榄油等植物油、如乙酸乙酯的可注射的酯类等。用于注射的基础材料可包括例如增溶剂、等渗剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂等常规添加剂。
通过向患者施用本发明的组合物,可以通过抑制和改善炎症性疾病中炎症的进展和恶化来预防和治疗炎症性疾病。本发明的用于治疗炎症性疾病的药学组合物以药学有效量施用。
本发明的组合物可以作为单独的治疗剂施用或与其他治疗剂组合施用,与现有治疗剂可顺序或同时施用,并且可以单独施用或多种施用。重要的是要考虑所有上述因素在没有副作用的情况下以最小量获得最大效果的施用量,本领域技术人员可以容易地确定这一点。
具体地,根据本发明的化合物的药物有效量可以根据患者的年龄、性别和体重而变化,并且通常为每kg体重1mg至50mg,优选每天或每两天1mg至10mg或者每天1次至3次分剂量给药。
然而,剂量不以任何方式限定本发明的范围,因为剂量可以根据给药途径、疾病的严重程度、性别、体重、年龄等而变化。
在下文中,将参考详细实施例更具体地描述本发明。以下实施例仅是用于更容易理解本发明的示例,并且本发明的范围不限于此。
实施例
1.异白苏烯酮(IK)含量增加的紫苏的制备
本发明的紫苏提取物中每1g紫苏提取物的异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)含量为10mg以上,其从IK浓度为100mg/mL以上的紫苏中获取。拥有如此高的IK含量的紫苏通过以下具体的品种培育过程获得。
1995年,在紫苏种子上照射200Gy的γ射线,收集了2000粒种子。播种培养从M1代2000株中收集的种子,在M3代中品系化150株给予了品系名称。为了测试基于M9代优异生长选择的150株的均一性和稳定性,培育1本组30株,选择具有优良农艺性状的6个品系,通过分析选择的6个品系成分,选出了抗炎效果优异的异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)含量增加的CJ-29A品系。此时,基本上选择生长优异的品系,并且使用所选品系测量抗炎生理活性,结果发现CJ-29A品系显示出最高活性,并且代谢分析确认异白苏烯酮增加。之后,CJ-29A品系被命名为“Antisperill”,并在韩国原子能研究院先进放射线研究所育种试验中心进行了数量测试和区域适应性试验。图1是所述“Antisperill”培养过程的图示。
由此获得的Antisperill于2016年8月17日保藏于韩国生物资源中心(KoreanCollection for Type Cultures,KCTC),并获得了保藏号KCTC 13077BP。
2.提取复合物的制备
制备例1
(1)紫苏酒精提取物的制备
在约45℃下干燥并粉碎在上述1.部分中获得的紫苏叶,使用提取装置(产品名称:SI-600R,制造商:JeioTech)将制备的10g紫苏粉末样品与100mL发酵酒精(100%乙醇)在45℃和100rpm下搅拌6个小时提取。
用滤纸(filter paper)过滤由此获得的提取物,使用旋转真空浓缩器(产品名称:N-1100,制造商:EYELA)浓缩,然后使用高效离心浓缩器(产品名称:HT-4X,制造商:GeneVac)除去所有溶剂以获得紫苏提取物。
(2)白术提取物及/或刺五加酒精提取物的制备
在约45℃下干燥并粉碎刺五加及白术样品,分别将10g粉末与100mL发酵酒精(100%乙醇)在60℃和100rpm下搅拌6个小时(产品名称:SI-600R,制造商:JeioTech)提取。
将获得的刺五加提取物及白术提取物分别用滤纸(filter paper)过滤,使用旋转真空浓缩器(产品名称:N-1100,制造商:EYELA)浓缩,然后使用高效离心浓缩器(产品名称:HT-4X,制造商:GeneVac)除去所有溶剂以分别获得刺五加提取物及白术提取物。
制备例2
除了在提取紫苏、刺五加及白术时使用70%乙醇作为溶剂,其余通过与制备例1相同的工艺分别提取了紫苏、刺五加及白术提取物。
制备例3
(1)紫苏超临界提取物的制备
收集在上述1.部分中获得的Antisperill紫苏叶放入干燥器,在50℃下干燥24小时后粉碎制成粉末状。使用超临界流体提取装置(supercritical fluid extraction,ILSHIN AUTOCLAVE,ISA-SEFE-0500-0700-080)将制成的200g紫苏粉末按照下列表1的具体提取条件进行提取。
【表1】
提取过程如图2所示,通过等压10分钟、吹扫10分钟、加压10分钟、在400巴压力下持续提取180分钟,之后减压20分钟按照图2进行。从获得的超临界提取物中除去水后,得到最终提取物。
(2)白术提取物的制备
购买干燥的食物用白术并粉碎成粉末状,使用超临界流体提取装置(supercritical fluid extraction,ILSHIN AUTOCLAVE,ISA-SEFE-0500-0700-080)将200g白术粉末按照与上述(1)相同的条件提取。从获得的超临界提取物中除去水后,得到最终提取物。
对比制备例1
除了在提取紫苏、刺五加及白术时使用水作为溶剂,其余通过与制备例1相同的工艺分别提取了紫苏、刺五加及白术提取物。
(3)提取复合物的制备
实施例1
通过将制备例1中分别获得的白术、Antisperill及刺五加提取物以1:1:1的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
实施例2
通过将制备例1中分别获得的白术、Antisperill及刺五加提取物以2:1:1的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
实施例3
通过将制备例1中分别获得的白术、Antisperill及刺五加提取物以1:2:1的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
实施例4
通过将制备例1中分别获得的白术、Antisperill及刺五加提取物以2:2:1的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
实施例5
通过将制备例1中分别获得的白术、Antisperill及刺五加提取物以1:1:2的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
实施例6
通过将制备例3中分别获得的白术及Antisperill提取物以1:1的重量比混合,制备本发明的提取复合物。
3.紫苏提取物中异白苏烯酮的定量分析
为分析上述制备例1的(1)中得到的紫苏提取物和普通紫苏提取物内的异白苏烯酮(isoegomaketone),使用了HPLC(Agilent Technologies)。用于所述定量分析的操作条件如下表2。
【表2】
上述制备例1的(1)中得到的紫苏提取物和普通紫苏提取物内的异白苏烯酮(isoegomaketone)分析结果如下表3。
【表3】
从表3中可以确认,在制备例1的(1)中获得的紫苏中,每1g紫苏提取物中的IK(isoegomaketone)含量为10mg以上,浓度为100mg/mL以上,与普通的野生紫苏相比,异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)含量最多增加为40倍左右。
4.根据提取方式的提取物内有效成分定量分析
(1)紫苏提取物
在上述制备例3的(1)中得到的紫苏超临界提取物1mg中加入1ml甲醇,并通过0.45μm过滤器过滤,使用HPLC(Agilent Technologies)分析,用于所述定量分析的操作条件如下表4。
【表4】
结果,当从紫苏通过超临界提取方法获得提取物时,如下表5所示,可以确认,与普通酒精提取相比,异白苏烯酮的含量增加为约7倍。
【表5】
酒精提取(制备例1) | 超临界提取(制备例3) | |
紫苏内异白苏烯酮的含量 | 9-10mg/g | 75-76mg/g |
(2)白术提取物
通过超临界提取方法在上述制备例3的(2)中得到的白术中获得提取物时,可以确认,与常规酒精提取物相比,如下表6所示,白术内酯含量增加为约2倍。
【表6】
酒精提取(制备例1) | 超临界提取(制备例3) | |
白术的白术内酯含量 | 3-4mg/g | 8.2-8.5mg/g |
5.提取复合物的细胞毒性实验
将小鼠炎症细胞RAW264.7细胞放96孔(well)细胞培养板,以2.0×105cell/ml浓度,在37℃,5%CO2环境中培养24小时。然后,用从实施例1至5中获得的每种提取复合物以50μg/ml的浓度处理。进一步培养24小时后,通过使用EZ-Cytox(Daeillab Service公司)套盒测量细胞毒性程度。
每种提取复合物的毒性程度的测量结果显示在图3中。如图3所示,与未处理的对照区相比,分别混合白术提取物、紫苏提取物及刺五加提取物的提取复合物显示出可接受的毒性程度,尤其可以证实,与其他混合比率相比,以相同的重量比混合的实施例1的提取物复合物,毒性显著低10%以上。
6.抗炎效果评价
(1)每种提取物的抗炎效果评价
通过测量是否产生一种炎症反应标志之一的一氧化氮(NO,nitric oxide)来评估抗炎效果。将小鼠炎症细胞RAW264.7细胞置于96孔细胞培养板,以2.0×105cell/ml浓度,在37℃,5%CO2环境中培养24小时,然后用每种提取复合物以50μg/ml的浓度处理。之后进一步培养2小时后,以LPS进行1μg/m浓度处理后进一步培养18小时,之后使用格里斯试剂(Griess reagent)测量产生NO的量。
此时,对制备例1、制备例2和对比制备例1中得到的白术提取物、紫苏提取物及刺五加提取物的每种提取物进行上述实验,并且对制备例3的白术提取物及紫苏提取物的每种提取物进行了上述实验。
以各提取物处理时产生的NO量的测量结果示于图4中。如图4a所示,与对比制备例1中使用水的情况相比,在使用如制备例1和2中的乙醇溶剂的情况下,白术提取物、紫苏提取物及刺五加提取物可以获得显著的抗炎效果。此外,还可以确认,与使用制备例2的70%乙醇作为溶剂相比,当使用制备例1的100%乙醇作为溶剂时,可以获得更有效的抗炎效果。
进一步地,如图4b所示,可以确认,当如制备例3那样通过超临界提取获得提取物时,可以获得更显著的抗炎效果。
此时,如图4所示,阴性对照区使用未以任何提取物处理的RAW 264.7细胞,阳性对照区则使用了以LPS处理的RAW 264.7细胞。
(2)复合提取物的抗炎效果评价
通过测量是否产生炎症反应标志之一的一氧化氮(NO,nitric oxide)来评估抗炎效果。将小鼠炎症细胞RAW264.7细胞置于96孔(well)细胞培养板,以2.0×105cell/ml浓度,在37℃,5%CO2环境中培养24小时,然后用实施例1的提取复合物以50μg/ml的浓度处理。之后培养2小时后,用LPS进行1μg/m浓度处理后进一步培养18小时,之后使用格里斯试剂(Griess reagent)测量产生NO的量。
实施例1的提取复合物NO产生量测量结果如图5所示,从图5中可以确认,混合白术提取物、紫苏提取物及刺五加提取物的本发明的提取复合物与未以本发明的提取复合物处理的对照区相比,抗炎效果更为显著。此时,从图4中可以确认,阴性对照区使用未以任何提取物处理的RAW 264.7细胞,阳性对照区则使用了以LPS处理的RAW 264.7细胞。以本发明实施例1的提取物处理时,可确认抗炎效果是否比阳性对照区减少。
7.对于关节炎的效果评价
(1)关节炎动物模型的制作
为在动物模型中验证本发明的提取复合物的抗炎效果,制作了关节炎动物模型。
此时,所述关节炎动物模型通过将ArthritoMab抗体鸡尾酒(antibody cocktail,Mabioscience公司)以IP注射2mg至Balb/c小鼠,并在3天后以腹腔内注射(IP)注射50ugLPS来制作。
(2)对于关节炎动物模型效果的评价
使用上述(1)中获得的小鼠模型,从给小鼠注射LPS当天开始,每天以25mg/kg至100mg/kg的剂量口服施用本发明的实施例1和实施例6的提取复合物,测量关节部位的厚度和体积。
图6a示出了当以每天25mg/kg至100mg/kg的剂量口服施用本发明的实施例1的提取复合物时,在第7天确认的实际关节炎小鼠模型的后肢变化。
如图6所示,可以确认,关节炎的治疗效果随本发明的提取复合物的剂量而增加,并且在7天后获得可见效果。
另一方面,图6b示出了将以1:1的比例混合紫苏与白术超临界提取物的实施例6的提取复合物每天分别以66.5和133.0mg/Kg的浓度口服给药,并在第6天测量关节部位的厚度和体积的程度。
如图6b所示,可以确认提取复合物的关节炎治疗效果随着剂量增加而提高,进一步地,在酒精提取复合物中,减轻关节炎的效果是依赖浓度的,但是效果小于超临界提取复合物。
另一方面,图7a至7c分别示出了对小鼠关节炎模型口服施用剂量为25mg/kg至100mg/kg的本发明的实施例1的提取复合物后,第6天确认的关节炎数值变化a、后肢浮肿厚度变化b和后肢浮肿体积变化c。
从图7中可以确认,关节炎治疗效果随本发明的提取复合物的剂量而增加。
进一步地,图8a至8c分别示出了以66.5mg/kg及133.0mg/kg的剂量对关节炎小鼠模型(CAIA)口服施用本发明的实施例6的提取复合物时,第7天确认的关节炎数值变化a、后肢浮肿厚度变化b和后肢浮肿体积变化c。
根据图8可以确认,使用本发明的提取复合物时,尤其是使用通过超临界提取获得的复合提取物时,关节炎的治疗效果可显著增加。
虽然已经在上面详细地对本发明的实施例进行了描述,但本发明的权利范围不限于此,对于本领域技术人员来说显而易见的是,在不脱离由权利要求记载的本发明的技术思想的范围内,可以进行多种修改和变化。
存托机构:韩国生命工学研究院
保藏编号:KCTC13077BP
保藏日期:2016817
国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约
国际表格
由本页下端指出的国际保藏单位发出的原保存的存单
依据第7.1款规定
收件人:KIM,Jin-Baek
韩国原子能研究院
(56212)大韩民国全罗北道井邑市金邱路29号
格式BP/4(KCTC格式17) 共1页
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Claims (20)
1.一种抗炎组合物,包括:
含有紫苏提取物和白术提取物的植物提取复合物。
2.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中,
所述紫苏提取物含有异白苏烯酮(IK,isoegomaketone)或其盐作为活性成分。
3.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中,
所述紫苏为Antisperill(Antisperill,KCTC 13077BP)。
4.根据权利要求3所述的抗炎组合物,其中,
所述紫苏提取物的每1g提取物含有10mg至30mg异白苏烯酮(IK,isoegomaketone),IK异白苏烯酮浓度为100mg/mL至300mg/mL。
5.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中,
所述紫苏提取物及白术提取物分别是通过用乙醇溶剂进行酒精提取而获得的提取物。
6.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中,
所述紫苏提取物及白术提取物分别是通过超临界提取获得的提取物。
7.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中,
所述植物提取复合物还包括利用乙醇作为溶剂提取的刺五加的酒精提取物。
8.根据权利要求7所述的抗炎组合物,其中,
所述植物提取复合物是1重量份的紫苏提取物、白术提取物及刺五加提取物中的任一提取物与1重量份至2重量份的其他两种提取物的混合物。
9.根据权利要求7所述的抗炎组合物,其中,
所述植物提取复合物由紫苏提取物、白术提取物及刺五加提取物以1:1:1的重量比混合而成。
10.一种抗炎组合物的制备方法,所述抗炎组合物包含植物提取复合物,所述制备方法包括:
分别获得包含紫苏提取物及白术提取物的植物提取物的步骤;以及
通过混合各个获得的植物提取物来制备提取复合物的步骤。
11.根据权利要求10所述的抗炎组合物的制备方法,其中,
所述紫苏为Antisperill(Antisperill,KCTC 13077BP)。
12.根据权利要求10所述的抗炎组合物的制备方法,其中,
分别获得所述植物提取物的步骤包括执行如下步骤:
冻干各植物的步骤;
粉碎冻干植物的步骤;以及
将所述冻干的植物独立地用乙醇溶剂悬浮后提取的步骤。
13.根据权利要求12所述的抗炎组合物的制备方法,其中,
所述植物提取物还包括刺五加提取物。
14.根据权利要求10所述的抗炎组合物的制备方法,其中,
分别获得所述植物提取物的步骤通过执行超临界提取各植物获得。
15.一种用于治疗炎症性疾病的药学组合物,包括:
包括紫苏提取物及白术提取物的植物提取复合物。
16.根据权利要求15所述的用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其中,
所述紫苏为Antisperill(Antisperill,KCTC 13077BP)。
17.根据权利要求15所述的用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其中,
所述植物提取复合物还包括刺五加提取物。
18.根据权利要求15所述的用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其中,
所述炎症性疾病选自由哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、过敏性鼻炎、皮炎、关节炎、过敏和炎症性肠病组成的群。
19.根据权利要求18所述的用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其中,
所述关节炎为类风湿性关节炎。
20.根据权利要求15所述的用于治疗炎症性疾病的药学组合物,其中,
所述药学组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102964866A (zh) * | 2012-11-20 | 2013-03-13 | 中北大学 | 从紫苏叶中提取紫苏色素的方法 |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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CN103109740A (zh) * | 2013-03-08 | 2013-05-22 | 中国科学院近代物理研究所 | 高品质紫苏的新品系选育方法 |
KR20150106058A (ko) * | 2014-03-11 | 2015-09-21 | 한국원자력연구원 | 축엽자소 변종 안티스페릴 및 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
CHANG-HO KANG, ET AL: "Inhibitory Effects of Aralia cordata Thunb Extracts on Nitric Oxide Synthesis in RAW 264.7 Macrophage Cells", 《KOREAN JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY》 * |
GUANG-QUAN JI, ET AL: "Anti-inflammatory activity of atractylenolideIII through inhibition of nuclear factor-κB and mitogen-activated protein kinase pathways in mouse macrophages", 《IMMUNOPHARMACOLOGY AND IMMUNOTOXICOLOGY》 * |
GUANGQUAN JI, ET AL: "Atractylenolide I inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory responses via mitogen-activated protein kinase pathways in RAW264.7 cells", 《IMMUNOPHARMACOLOGY AND IMMUNOTOXICOLOGY》 * |
YUNYAO JIANG,ET AL: "Different Solvent Fractions of Acanthopanax senticosus Harms Exert Antioxidant and Anti-Inflammatory Activities and Inhibit the Human Kv1.3 Channel", 《JOURNAL OF MEDICINAL FOOD》 * |
潘景芝等: "刺五加的化学成分及药理活性研究进展", 《食品工业科技》 * |
谭美莲等: "60Co伽马射线辐照对苏子生长及生理特性的影响", 《中国油料作物学报》 * |
顾思浩等: "白术的化学成分与药理作用及复方临床应用进展", 《中华中医药学刊》 * |
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