CN110041443A - 多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法，属于高分子材料技术领域，多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法，可以实现相较于单链或双链的聚唾液酸衍生物，本多分支聚唾液酸衍生物的流体力学体积更大，从而使其对接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用更为有效，从而有效降低免疫反应的产生，使得此药物的治疗效果更好，使得使用本药物进行治疗的治愈率更高，同时通过在双层定温反应容器中进行本药物，工作人员可以通过肉眼直接观察，或者光线发射器和光纤传感器的配合来判断反应物是否降至0℃，不需要直接与反应物接触，从而有效提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度。

Description

多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法

技术领域

本发明涉及高分子材料技术领域，更具体地说，涉及多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法。

背景技术

目前，药物的种类繁多，就其分子量大小来分，一般可分为两大类：一类分子量较低，通常在1000以下，绝大多数为常用的化学合成药物和一些天然药物，如氮芥，顺铂，5-氟尿嘧啶，紫杉醇等都属此列；另一类则分子量较大，绝大多数由基因工程生产的蛋白质和多肽药物。但是无论小分子药物还是大分子药物，都存在着毒性大，溶解性差，半衰期短等缺点。对蛋白质和多肽药物还存在免疫原性的问题。

蛋白质化学修饰技术是近年来快速发展的新兴技术。利用基因工程方法生产的多肽、蛋白质类药物在临床应用中往往存在稳定性差、活性偏低、体内半衰期短、引起免疫反应等问题，通过化学修饰可以有效改善上述不足之处，同时，蛋白质化学修饰也是进行蛋白质结构功能研究的一个重要手段。

在US05846951和WO0187922描述了利用天然的PSA来改进蛋白质治疗剂的药代动力学性质。描述了依靠聚合物非还原端的化学衍生来产生蛋白质反应活性醛基将多糖连接到治疗剂上的方法。在WO2005016973中，描述了由末端唾液酸单元引入巯基反应活性基团的多糖衍生物。产物可用于蛋白质的定位衍生。在CN101160326公开了一种新的PSA衍生物，其中还原和/或非还原端的末端唾液酸被转化为N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)基因。可以与含有胺基或肼基团的底物反应。

尽管已经描述的各种将PSA连接到治疗药剂上的方法在理论上是可行的，但是为使蛋白与PSA非还原端(醛的形式)反应生成的缀合物达到可接受的量，所要求的反应时间在较高温度下将不利于蛋白质的稳定性。其次，所需的反应物浓度可能难以实现或不够经济。

众所周知，药物高分子化后的性能和所用的高分子材料的结构、分子量、分子量分布以及高分子的构型有关。同一结构，不同分子量的高分子在修饰药物后，会产生不同的性质；同一结构，相同分子量，但构型不同的高分子在修饰药物后，也会产生很大的差异。目前在对蛋白质或者其它药物进行聚唾液酸化时用的都是单链聚唾液酸，存在的几个问题使得所制备的聚唾液酸与蛋白质或者药物的结合物的优点难以实现。其一是PSA的结合使蛋白质或者药物的结合物生物活性降低。另外，在形成结合物时PSA可以发生部分水解断裂，使结合物失去了由结合PSA带来的优点。在研究中人们发现，PSA对生物活性物质的修饰效果与所使用的PSA的分子的分子量及特定的修饰度相关。一般来说，所用的PSA的分子量越大，修饰度越高，PSA-蛋白质结合物的抗原性越小，排除时间越长。为了解决这个问题，我们合成了双链聚唾液酸。

现有的聚唾液酸衍生物多为单链后双链的，其对于接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用极为有限，导致免疫反应的发生率很高，使得很多病人因高的免疫反应而治愈率降低，并且在药物的制备过程中，对于温度的要求很高，某些步骤需要反应物在0℃下进行，一般测温的方法是，使用温度传感器进行测量，但是这种方式，温度传感器需要与反应物直接接触，极易对反应物造成污染，导致后期药物成品的卫生度和纯净度均会受到很大的影响。

发明内容

1.要解决的技术问题

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供多分支聚唾液酸衍生物及其制备方法，它可以实现相较于单链或双链的聚唾液酸衍生物，本多分支聚唾液酸衍生物的流体力学体积更大，从而使其对接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用更为有效，从而有效降低免疫反应的产生，使得此药物的治疗效果更好，使得使用本药物进行治疗的治愈率更高，同时通过在双层定温反应容器中进行本药物，工作人员可以通过肉眼直接观察，或者光线发射器和光纤传感器的配合来判断反应物是否降至0℃，不需要直接与反应物接触，从而有效避免因温度传感器的探头而给反应物中带来外来杂质细菌等，进而提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度，并且在实际进行S3和S4时，静置过夜后，温度降为0℃的过程，工作人员不是必须一直在现场进行温度的测量，进而降低了工作人员的劳动强度。

2.技术方案

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。

多分支聚唾液酸衍生物，所述多分支聚唾液酸衍生物由三官能团小分子化合物经化学反应与PSA结合在一起形成，活性的所述双臂或多分支PSA可记为R2-PSA-X-F和{(R2-PSA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-X-F，其中，R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统，n代表1-2小分支，2代表双链，X代表连接点，即为三官能团小分子化合物，F表示活性功能基团，可以实现其一，由于活性多分支PSA的流体力学体积大，当它与蛋白质上的某个部位结合后，由于空间位阻的作用，其他部位很难与另一双链PSA反应，从而提高了对结合部位的选择性，可以实现相较于单链或双链的聚唾液酸衍生物，本多分支聚唾液酸衍生物的流体力学体积更大，从而使其对接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用更为有效，从而有效降低免疫反应的产生，使得此药物的治疗效果更好，使得使用本药物进行治疗的治愈率更高。

进一步的，所述所述PSA多分支链与三官能团小分子化合物以共价键连接，连接基团选自氨基、酰胺基、亚酰胺基、氨基甲酸酯、酯基、环氧基、羧基、羟基、巯基或碳水化合物，或其中几个组合之一种。

进一步的，所述三官能团小分子化合物的结构式为下列之一种：

这里，n为1-9的整数，m为0-6的整数。

进一步的，所述其中三官能团小分子化合物X为H2N(CH2)nCH(NH2)CO2H(n为1-9的整数)，连接基团为酰胺基或者氨基甲酸酯时，其结构式如以下通式：

其中A为NR3、NR3NR4、O或S，其中R3和R4独立地选自H、C1-4烷基和芳基；

Sylo为一个唾液酸基团；

n为1-9；q为1-100；p为0或1；

W为O、S或者NH之一；

F为下列功能基团之一：

R1为连接基团；

R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统。

多分支聚唾液酸衍生物，其制备方法为：

S1、先将活性的聚唾液酸与三官能团小分子加入到双层定温反应容器中；

S2、加入缓冲液，并控制反应PH值在8-8.3之间；

S3、然后再加入带有活性基团的F，在室温下搅拌并静置过夜；

S4、将上述混合的反应物温度降至0℃，经除杂、萃取、干燥和重结晶，即得到活性的多分支结构的聚唾液酸活性衍生物。

进一步的，所述三官能小分子化合物(X)的活性基团为羧基和两个氨基，或者为羧基和两个羟基,具体可以为前述结构式之一种。

进一步的，所述双层定温反应容器包括下定温筒和上定温筒，且下定温筒和上定温筒为一体结构，所述下定温筒与上定温筒固定连接且位于上定温筒上方，所述下定温筒和上定温筒共同围成内反应槽，所述下定温筒和上定温筒内部均开凿有外定温腔，两个所述外定温腔相通，且外定温腔内部填充有液体，该液体可以为蒸馏水，在S4中，可以根据外定温腔内液体状态的变化来确定双层定温反应容器内反应物的温度，从而实现不需要使用温度传感器可以确定双层定温反应容器内反应物是否已经降至0℃，从而有效避免因温度传感器的探头而给反应物中带来外来杂质细菌等，进而提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度。

进一步的，所述上定温筒为透明材质，且下定温筒和上定温筒(2)内壁均涂设有0.1-0.5mm厚的纳米超疏水透明自洁涂料，上定温筒的透明材质，一方面当外定温腔内液体变为冰水混合物时，工作人员可以直接通过上定温筒观察外定温腔内液体状态变化，直接判断反应物的温度，并且上定温筒透明材质不易影响光线发射器和光纤传感器之间光信号的传递，纳米超疏水透明自洁涂料，该涂料根据“荷叶自清洁原理”设计，具有强劲的疏水、抗油污能力，使得反应物粘附在双层定温反应容器内壁的几率很小，从而降低因反应物反应不完全造成的产物不纯，同时也有效预防，因粘附在容器内壁而造成的各反应物的量的变化，而导致产物与目标产物存在差异的情况。

进一步的，所述上定温筒外端安装有光线发射器和光纤传感器，所述光线发射器和光纤传感器分别位于上定温筒同一直径的两个端点上，当温度未降至0℃时，外定温腔内的液体还是液态，此时光线发射器和光纤传感器之间只有透明的上定温筒为遮挡物，光纤传感器可以接收到来自光线发射器的光信号，将此时的光信号数据设置为光纤传感器内的阈值，当温度降至0℃时，该液体开始结冰，变成冰水混合物，此时相较于液态，其体积增大，则液面上升，由于冰比水密度小，其会漂浮在液面上，当带有冰块的液面上升到光线发射器和光纤传感器之间时，光纤传感器不能正常接收到来自光线发射器的光信号，当该光信号数据持续超出或低于阈值的范围时，此时光纤传感器可以通过无线信号将该信号发送给工作人员，提醒工作人员温度已经降为0℃，可以进行下一步操作。

进一步的，所述双层定温反应容器外表面刻有全水线和全冰线，所述全冰线位于全水线上方，且光线发射器和光纤传感器均位于全水线和全冰线之间，外定温腔内液体的填充标准为液面刚好为全水线的位置，全冰线的位置为经过多次测量，液体全部变为固体时的液面位置，并且全冰线低于双层定温反应容器边缘以下10-20cm，有效避免液体意外全部变为冰时将双层定温反应容器外胀裂。

3.有益效果

相比于现有技术，本发明的优点在于：

(1)相较于单链或双链的聚唾液酸衍生物，本多分支聚唾液酸衍生物的流体力学体积更大，从而使其对接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用更为有效，从而有效降低免疫反应的产生，使得此药物的治疗效果更好，使得使用本药物进行治疗的治愈率更高。

(2)通过在双层定温反应容器中进行本药物，工作人员可以通过根据实际操作需要灵活性的选择，通过肉眼直接观察，或者光线发射器和光纤传感器的配合来判断反应物是否降至0℃，且这两种方式均不需要使用温度传感器，在进行温度鉴定时，均不需要直接与反应物接触，从而有效避免因温度传感器的探头而给反应物中带来外来杂质细菌等，进而提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度，并且在实际进行S3和S4时，静置过夜后，温度降为0℃的过程，工作人员不是必须一直在现场进行温度的测量，进而降低了工作人员的劳动强度。

附图说明

图1为本发明的主要的流程框图；

图2为本发明的双层定温反应容器正面的结构示意图；

图3为本发明的双层定温反应容器内液体为冰水混合状态时的结构示意图。

图中标号说明：

1下定温筒、2上定温筒、3光线发射器、4光纤传感器。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图；对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然；所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例；而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例；本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例；都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例：

多分支聚唾液酸衍生物，多分支聚唾液酸衍生物由三官能团小分子化合物经化学反应与PSA结合在一起形成，活性的双臂或多分支PSA可记为R2-PSA-X-F和{(R2-PSA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-X-F，其中，R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统，n代表1-2小分支，2代表双链，X代表连接点，即为三官能团小分子化合物，F表示活性功能基团。所述PSA多分支链与三官能团小分子化合物以共价键连接，连接基团选自氨基、酰胺基、亚酰胺基、氨基甲酸酯、酯基、环氧基、羧基、羟基、巯基或碳水化合物，或其中几个组合之一种。

三官能团小分子化合物的结构式为下列之一种：

这里，n为1-9的整数，m为0-6的整数。

其中三官能团小分子化合物X为H2N(CH2)nCH(NH2)CO2H(n为1-9的整数)，连接基团为酰胺基或者氨基甲酸酯时，其结构式如以下通式：

其中A为NR3、NR3NR4、O或S，其中R3和R4独立地选自H、C1-4烷基和芳基；

Sylo为一个唾液酸基团；

n为1-9；q为1-100；p为0或1；

W为O、S或者NH之一；

F为下列功能基团之一：

R1为连接基团；

R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统。

多分支聚唾液酸衍生物，其制备方法为：

S1、先将活性的聚唾液酸与三官能团小分子加入到双层定温反应容器中；

S2、加入缓冲液，并控制反应PH值在8-8.3之间，缓冲液可以为NAOH溶液也可以为NaCO3溶液；

S3、然后再加入带有活性基团的F，在室温下搅拌并静置过夜；

S4、将上述混合的反应物温度降至0℃，经除杂、萃取、干燥和重结晶，即得到活性的多分支结构的聚唾液酸活性衍生物。

三官能小分子化合物(X)的活性基团为羧基和两个氨基，或者为羧基和两个羟基。

双层定温反应容器包括下定温筒1和上定温筒2，且下定温筒1和上定温筒2为一体结构，下定温筒1与上定温筒2固定连接且位于上定温筒2上方，下定温筒1和上定温筒2共同围成内反应槽，下定温筒1和上定温筒2内部均开凿有外定温腔，两个外定温腔相通，且外定温腔内部填充有液体，该液体可以为蒸馏水，在S4中，可以根据外定温腔内液体状态的变化来确定双层定温反应容器内反应物的温度，从而实现不需要使用温度传感器可以确定双层定温反应容器内反应物是否已经降至0℃，从而有效避免因温度传感器的探头而给反应物中带来外来杂质细菌等，进而提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度。

上定温筒2为透明材质，且下定温筒1和上定温筒2内壁均涂设有0.1-0.5mm厚的纳米超疏水透明自洁涂料，上定温筒2的透明材质，一方面当外定温腔内液体变为冰水混合物时，工作人员可以直接通过上定温筒2观察外定温腔内液体状态变化，直接判断反应物的温度，并且上定温筒2透明材质不易影响光线发射器3和光纤传感器4之间光信号的传递，纳米超疏水透明自洁涂料，该涂料根据“荷叶自清洁原理”设计，具有强劲的疏水、抗油污能力，使得反应物粘附在双层定温反应容器内壁的几率很小，从而降低因反应物反应不完全造成的产物不纯，同时也有效预防，因粘附在容器内壁而造成的各反应物的量的变化，而导致产物与目标产物存在差异的情况。

上定温筒2外端安装有光线发射器3和光纤传感器4，本领域技术人员可以根据实际需要选择合适型号的光纤传感器4，例如：IFM光纤传感器E20421，光线发射器3和光纤传感器4分别位于上定温筒2同一直径的两个端点上，当温度未降至0℃时，外定温腔内的液体还是液态，此时光线发射器3和光纤传感器4之间只有透明的上定温筒2为遮挡物，光纤传感器4可以接收到来自光线发射器3的光信号，将此时的光信号数据设置为光纤传感器4内的阈值，当温度降至0℃时，该液体开始结冰，变成冰水混合物，此时相较于液态，其体积增大，则液面上升，由于冰比水密度小，其会漂浮在液面上，当带有冰块的液面上升到光线发射器3和光纤传感器4之间时，光纤传感器4不能正常接收到来自光线发射器3的光信号，当该光信号数据持续超出或低于阈值的范围时，此时光纤传感器4可以通过无线信号将该信号发送给工作人员，提醒工作人员温度已经降为0℃，可以进行下一步操作。

双层定温反应容器外表面刻有全水线和全冰线，全冰线位于全水线上方，且光线发射器3和光纤传感器4均位于全水线和全冰线之间，外定温腔内液体的填充标准为液面刚好为全水线的位置，全冰线的位置为经过多次测量，液体全部变为固体时的液面位置，并且全冰线低于双层定温反应容器边缘以下10-20cm，有效避免液体意外全部变为冰时将双层定温反应容器外胀裂。

实施例1：

X为赖氨酸(Lysine),双分支链或多分支链PSA为非还原端和还原端衍生的活性CA-NHS类，W为NH，n为4，P为1，F为NHS时，按下列反应路线来制备活性端基为NHS不同双分支链或多分支结构的聚唾液酸活性衍生物(Ⅰ型或Ⅴ型)(R2-PSA)2-Lys-NHS和{(R2-PSA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-Lys-NHS(n＝1或2)：

上述路线中是通过N-羟基琥珀酰亚胺酯来活化羧基的，也可以用生成其他活性酯的方法来对羧基进行活化，如对硝基苯酚酯等。

实施例2：

X为赖氨酸(Lysine),活性PSA为非还原端衍生的CA-DSG，W为NH，n为4，F为琥珀酰亚胺时，按照下列反应路线进行制备：

实施例3：

X为赖氨酸(Lysine),活性PSA为还原端衍生的CA-NHS类，W为NH，n为4，F为NHS时，可按下列反应路线来制备活性端基为NHS双链或多分支聚唾液酸(R2-PSA)2-Lys-NHS和{(R2-PSA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-Lys-NHS(n＝1或2)：

实施例4：

X为赖氨酸(Lysine),活性PSA为还原端衍生的CA-BS3，W为NH，n为4，F为NHS时，可按下列反应路线来制备活性端基为NHS双分支或多分支聚唾液酸(CA)2-Lys-NHS和{(CA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-Lys-NHS(n＝1或2)：

相较于单链或双链的聚唾液酸衍生物，本多分支聚唾液酸衍生物的流体力学体积更大，从而使其对接近药物表面的大分子或者细胞的阻止作用更为有效，从而有效降低免疫反应的产生，使得此药物的治疗效果更好，使得使用本药物进行治疗的治愈率更高；通过在双层定温反应容器中进行本药物，工作人员可以通过根据实际操作需要灵活性的选择，通过肉眼直接观察，或者光线发射器3和光纤传感器4的配合来判断反应物是否降至0℃，且这两种方式均不需要使用温度传感器，在进行温度鉴定时，均不需要直接与反应物接触，从而有效避免因温度传感器的探头而给反应物中带来外来杂质细菌等，进而提高本多分支聚唾液酸衍生物的纯净度以及卫生度，并且在实际进行S3和S4时，静置过夜后，温度降为0℃的过程，工作人员不是必须一直在现场进行温度的测量，进而降低了工作人员的劳动强度。

以上所述；仅为本发明较佳的具体实施方式；但本发明的保护范围并不局限于此；任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内；根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变；都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述多分支聚唾液酸衍生物由三官能团小分子化合物经化学反应与PSA结合在一起形成，活性的所述双臂或多分支PSA可记为R2-PSA-X-F和{(R2-PSA-Gal-GlcNAc)n-Man}2-X-F，其中，R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统，n代表1-2小分支，2代表双链，X代表连接点，即为三官能团小分子化合物，F表示活性功能基团。

2.根据权利要求1所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述PSA多分支链与三官能团小分子化合物以共价键连接，连接基团选自氨基、酰胺基、亚酰胺基、氨基甲酸酯、酯基、环氧基、羧基、羟基、巯基或碳水化合物，或其中几个组合之一种。

3.根据权利要求1所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述三官能团小分子化合物的结构式为下列之一种：

这里，n为1-9的整数，m为0-6的整数。

4.根据权利要求1所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述其中三官能团小分子化合物X为H2N(CH2)nCH(NH2)CO2H(n为1-9的整数)，连接基团为酰胺基或者氨基甲酸酯时，其结构式如以下通式：

其中A为NR3、NR3NR4、O或S，其中R3和R4独立地选自H、C1-4烷基和芳基；

Sylo为一个唾液酸基团；

n为1-9；q为1-100；p为0或1；

W为O、S或者NH之一；

F为下列功能基团之一：

H，OH，NH₂，

R1为连接基团；

R2为氢或一种单、双、寡聚或多聚唾液酸基团、一种蛋白、一种肽、一种脂质、一种药物、一种细胞膜或细胞壁组分或一种药物传递系统。

5.根据权利要求1所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：其制备方法为：

S1、先将活性的聚唾液酸与三官能团小分子加入到双层定温反应容器中；

S2、加入缓冲液，并控制反应PH值在8-8.3之间；

S3、然后再加入带有活性基团的F，在室温下搅拌并静置过夜；

S4、将上述混合的反应物温度降至0℃，经除杂、萃取、干燥和重结晶，即得到活性的多分支结构的聚唾液酸活性衍生物。

6.根据权利要求5所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述三官能小分子化合物(X)的活性基团为羧基和两个氨基，或者为羧基和两个羟基。具体可以为前述结构式之一种。

7.根据权利要求5所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述双层定温反应容器包括下定温筒(1)和上定温筒(2)，且下定温筒(1)和上定温筒(2)为一体结构，所述下定温筒(1)与上定温筒(2)固定连接且位于上定温筒(2)上方，所述下定温筒(1)和上定温筒(2)共同围成内反应槽，所述下定温筒(1)和上定温筒(2)内部均开凿有外定温腔，两个所述外定温腔相通，且外定温腔内部填充有液体。

8.根据权利要求7所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述上定温筒(2)外端安装有光线发射器(3)和光纤传感器(4)，所述光线发射器(3)和光纤传感器(4)分别位于上定温筒(2)同一直径的两个端点上。

9.根据权利要求7所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述上定温筒(2)为透明材质，且下定温筒(1)和上定温筒(2)内壁均涂设有0.1-0.5mm厚的纳米超疏水透明自洁涂料。

10.根据权利要求5所述的多分支聚唾液酸衍生物，其特征在于：所述双层定温反应容器外表面刻有全水线和全冰线，所述全冰线位于全水线上方，且光线发射器(3)和光纤传感器(4)均位于全水线和全冰线之间。