CN109999070A - 一种积雪草总苷脂质体及制备工艺 - Google Patents

一种积雪草总苷脂质体及制备工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN109999070A
CN109999070A CN201910181648.6A CN201910181648A CN109999070A CN 109999070 A CN109999070 A CN 109999070A CN 201910181648 A CN201910181648 A CN 201910181648A CN 109999070 A CN109999070 A CN 109999070A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lecithin
liposome
asiaticoside
cholesterol
mass ratio
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910181648.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109999070B (zh
Inventor
杨荣平
张传辉
闫丹
王云红
周文杰
赵崧钧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing Yue Hua Yue Biotechnology Co Ltd
Southwest University
Original Assignee
Chongqing Yue Hua Yue Biotechnology Co Ltd
Southwest University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing Yue Hua Yue Biotechnology Co Ltd, Southwest University filed Critical Chongqing Yue Hua Yue Biotechnology Co Ltd
Publication of CN109999070A publication Critical patent/CN109999070A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109999070B publication Critical patent/CN109999070B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明提出一种积雪草总苷脂质体及其制备方法，属于药品及药品制造技术领域。积雪草总苷脂肢体包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4‑8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20‑40：1；有机相与水相的体积比为5‑7﹕1。方法：按一定比例称取卵磷脂、胆固醇，将卵磷脂、胆固醇溶于氯仿；再加入积雪草总苷的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂；将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液；继续旋蒸1小时使胶体脱落，冰水浴超声即得脂质体本发明的有益效果：本发明具有良好的透皮性能及缓释效果，能够长期有效的作用于病灶，实现更好的治疗效果。

Description

一种积雪草总苷脂质体及制备工艺
技术领域
本发明属于药品及药品制造技术领域，特别涉及一种积雪草总苷脂质体及其制备工艺。
背景技术
积雪草总苷(centella total glucosides，CTG)是伞形科植物积雪草的提取物，有效 成分为三萜型皂苷及其衍生物类，其中以积雪草苷、羟基积雪草苷的含量最高，活性最强。 现代药理研究表明：CTG不仅能够促进细胞生长，加速伤口愈合，修复皮肤损伤，还具有抗 氧化，抗溃疡、消炎等作用。临床上常用于手术创伤、烧伤，增生性疤痕等疾病的治疗。但 由于CTG中多为极性大分子，不容易透过皮肤表皮到达病变部位，单纯的促渗不能完全达到 治疗疾病的目的。
将药物包封于脂质体中，不仅可以发挥良好的促透作用，还可使药物尽可能少的进入血 液循环，集中于皮肤病灶，形成药物贮库，缓释药物，是理想化的皮肤局部给药载体。与普 通外用制剂相比，脂质体可以增加药物的治疗指数，减少给药次数及剂量，提高患者的顺应 性。因此有必要优化CTG脂质体的制备工艺，并对其理化性质及体外透皮特性进行考察。
发明内容
针对积雪草总苷脂质体的处方优化问题，本发明在前期工作研究的基础上，通过采用单 因素结合Box-Behnken效应面法优化积雪草总苷脂质体的制备工艺。
一种积雪草总苷脂质体，包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固 醇的质量比为4-8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20-40：1；有机相与水相的体积比为 5-7﹕1。
进一步的，卵磷脂与胆固醇的质量比4﹕1，卵磷脂与积雪草总苷的质量比23.22﹕1，有 机相与水相的体积比7﹕1。
一种积雪草总苷脂质体的制备方法，包括以下步骤：
S1、按一定比例称取卵磷脂、胆固醇，将卵磷脂、胆固醇溶于氯仿；
S2、再加入积雪草总苷的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂；
S3、将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液；
S4、继续旋蒸1小时使胶体脱落，冰水浴超声即得脂质体。
进一步的，所述将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液，水化温度为50℃。
本发明的有益技术效果为：本发明的积雪草总苷脂质体中羟基积雪草苷、积雪草苷体外 12h累计释放率分别为52.10％、45.97％，CTG脂质体2种成分透皮速率较小于原料药溶液， 脂质体组表现出明显的缓释性；脂质体组2种有效成分的皮肤滞留量均高于水溶液对照组， 提示药物主要集中于皮肤病灶，以贮库的形式产生缓释作用。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1为第1组A和B、第2组A和C、第3组B和C的交互作用对Y1影响的等高线图(a) 及三维效应面图(b)；
图2为第1组A和B、第2组A和C、第3组B和C的交互作用对Y2影响的等高线图(a) 及三维效应面图(b)；
图3为CTG脂质体的电镜图(A)、粒径分布(B)和Zeta电位(C)；
图4羟基积雪草苷(a)、积雪草苷(b)累计释放量Q与时间t的曲线；
图5为羟基积雪草苷、积雪草苷累积透皮量Qn与时间t的曲线；
图6为羟基积雪草苷、积雪草苷皮肤滞留量Qs与时间t柱状图；
其中：图1、图2中A表示卵磷脂-胆固醇的质量比；图1、图2中B表示卵磷脂-CTG的质量比；图1、图2中C表示有机相-水相的体积比；图1、图2中Y1积雪草苷的包封率；图 1、图2中Y2羟基积雪草苷的包封率。
具体实施方式
为了使本技术领域人员能更好地理解本发明的目的、技术方案和有益效果，下面结合具 体实施例和说明附图来进行完整的描述。
实施例1
1、CTG脂质体包封率的测定
取CTG脂质体，加入甲醇破乳，0.22μm滤膜过滤，取续滤液测定脂质体的总药物含量 W总。采用超滤离心管分离脂质体和游离药物，另取CTG脂质体于超滤离心管内，4000r/min 离心20min取外管溶液，测定游离药物的含量W游。按下式计算包封率：
Y包封率＝(1－W游/W总)×100％
2、CTG脂质体制备方法的筛选
1)薄膜分散法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，氯仿溶解，旋转蒸发至形成均匀 脂质薄膜。继续抽真空20min除尽有机溶剂。加入CTG的水溶液振荡水合1h使薄膜脱落。 冰水浴超声至形成脂质体混悬液。积雪草、苷羟基积雪草苷的包封率分别为65.50％、56.79％。
2)乙醇注入法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，无水乙醇溶解，缓慢匀速滴入CTG的水溶液，300r/min恒温搅拌1h，旋蒸除乙醇，冰水浴超声得CTG脂质体。积雪草苷、羟 基积雪草苷的包封率分别为61.77％、52.51％。
3)逆相蒸发法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，溶于氯仿，加入CTG的水溶液， 冰水浴超声，形成均匀乳剂。旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量水溶液，继续旋蒸1h使 胶体脱落。冰水浴超声即得脂质体。积雪草苷、羟基积雪草苷的包封率分别为74.11％、 60.05％。
以上3种方法以逆相蒸发法制备的脂质体具有较大的水容积，适合于水溶性药物的包封， CTG脂质体的包封率最高。故选择逆相蒸发法用于CTG脂质体的制备。
3、CTG脂质体单因素考察
1)卵磷脂-胆固醇的质量比
固定卵磷脂-CTG的质量比为20﹕1，有机相-水相的体积比为5﹕1，水化介质为2ml超纯水，选取卵磷脂-胆固醇的质量比分别为2﹕1、3﹕1、4﹕1、5﹕1、6﹕1制备脂质体，见 表1，结果表明：随着卵磷脂的增加，两种成分的包封率均呈先增大后减小的趋势；当卵磷 脂-胆固醇的质量比较小时(2:1、3:1)，在水化阶段，胶体脱落困难，放置过夜脂质体 溶液产生絮凝沉淀现象，提示卵磷脂-胆固醇的质量比在4-8﹕1时具有较好的稳定性。
表1卵磷脂-胆固醇的质量比对CTG包封率的影响
2)卵磷脂-CTG的质量比
固定卵磷脂-胆固醇的质量比为4﹕1，有机相-水相的比为5：1，水化介质为2ml超纯水，选取卵磷脂-CTG的质量比分别为1﹕1、5﹕1、10﹕1、20﹕1、40﹕1制备脂质体，见表 2，结果表明：卵磷脂-CTG的质量比是影响脂质体包封率的显著因素，过大或过小包封率均 较低，其中卵磷脂-CTG的质量比为20﹕1时，脂质体包封率高。
表2卵磷脂-CTG的质量比对CTG包封率的影响
3)有机相-水相的体积比
固定卵磷脂-胆固醇的质量比为4﹕1，卵磷脂-CTG的质量比为20：1，水化介质为2ml超 纯水，选取有机相-水相的比为4﹕1、5﹕1、6﹕1、7﹕1、8﹕1制备脂质体，见表3，结果 表明：当有机相-水相的体积比在5-7﹕1间时，形成的乳剂较均一，无分层现象，且包封率 高。
表3有机相-水相的体积比对CTG包封率的影响
实施例2
1、CTG脂质体处方优化的实验数据
为进一步优化CTG脂质体处方，在单因素考察的基础上，选取卵磷脂-胆固醇的质量比 (A)、卵磷脂-CTG的质量比(B)、有机相-水相的体积比(C)3个显著变量，以积雪草苷、羟基积雪草苷的包封率Y1、Y2为响应值，采用Box-Behnken效应面法进行优化设计，通过Dseign-Expert软件对实验结果进行响应面分析，试验安排及结果见表4，方差分析见表5。
表4：响应面分析方案和实验结果
表5：方差分析
方差来源 平方和 自由度 F值 P值 方差来源 平方和 自由度 F值 P值
Y<sub>1</sub>模型 988.37 9 19.28 0.0004 Y<sub>2</sub>模型 1143.31 9 17.44 0.0005
A 294.76 1 51.74 0.0002 A 160.38 1 22.02 0.0022
B 132.11 1 23.19 0.0019 B 217.67 1 29.88 0.0009
C 52.99 1 9.3 0.0186 C 100.32 1 13.77 0.0075
AB 1.51 1 0.27 0.6222 AB 1.04 1 0.14 0.7167
AC 59.44 1 10.43 0.0144 AC 235.93 1 32.39 0.0007
BC 138.89 1 24.38 0.0017 BC 155.88 1 21.4 0.0024
A<sup>2</sup> 3.83 1 0.67 0.4395 A<sup>2</sup> 5.27 1 0.72 0.4231
B<sup>2</sup> 285.24 1 50.07 0.0002 B<sup>2</sup> 241.04 1 33.09 0.0007
C<sup>2</sup> 8.14 1 1.43 0.2708 C<sup>2</sup> 13.06 1 1.79 0.2224
残差 39.88 7 残差 50.99 7
失拟值 24.88 3 2.21 0.2292 失拟值 22.53 3 1.06 0.4604
纯误差 15 4 纯误差 28.46 4 7.12
2、模型拟合
采用Design-Expert软件对数据进行分析处理，以评价指标Y1、Y2对自变量进行模型拟 合处理，以相关系数(R2)和置信度(P)为拟合模型评价。得二次多项回归方程:Y1＝-27.54 +11.77A－0.74B+23.46C－0.03AB－1.92AC+0.49BC－0.24A2－0.06B2－1.39C2，Y2＝-127.24+23.84A－1.24B－39.91C+0.02AB－3.84AC+0.52BC－0.27A2－0.05B2－1.76C2，拟合方程中各项系数绝对值的大小直接反映了各因素对相应值的影响程度，系数的正负 反映了其影响的方向。由方程可知制备工艺的影响顺序为有机相-水相的体积比＞卵磷脂- 胆固醇的质量比＞卵磷脂-CTG的质量比。
由拟合结果可知模型相关性系数R2(R1 2＝0.9612，R2 2＝0.9573)均大于0.95，说明实测值与预测值间有高度相关性，能够准确地预测实际情况；校正决定系数 说明该实验误差较小，操作可信；模型P值均小于0.01，该模型拟合 度较高，极具统计学意义。失拟项P值大于0.05，模型失拟不显著，该回归方程能较好的拟 合真实的效应面，可用来反映卵磷脂-胆固醇的质量比、卵磷脂-CTG的质量比、有机相-水 相的体积比对脂质体包封率的影响，模型可用于优化CTG脂质体的制备工艺。
3、参数预测和工艺优化
通过多元回归方程作等高线及三维效应曲面图，预测CTG脂质体的最佳处方配比，结果 模型Y1见图1、模型Y2见图2。
从回归系数显著性检验结果可知：在模型Y1中：A(P＝0.0002)、B(P＝0.0019)、 C2(P＝0.0002)、BC(P＝0.0017)项极显著，C(P＝0.0184)、AC(P＝0.0144)显著， 其他项均不显著；模型Y2中：A(P＝0.0022)、B(P＝0.0009)、C2(P＝0.0002)、BC(P ＝0.0024)、C(P＝0.0075)、AC(P＝0.0007)项极显著，其他项均不显著；由此可知， 各因素对响应值的影响并非简单的线性关系，所选因素间存在交互作用。
效应面的等高线图和三维效应曲面图可以直观地反应因素间交互作用的强弱及最优条件 下各因素的取值。等高线呈椭圆形且较越密集，则表明影响因素对响应值的影响大，交互作 用强；响应面3D图越弯曲、陡峭，表明交互作用越明显。模型Y1中，AC、BC效应面等高线 图呈椭圆形交互作用强，但BC效应面3D图曲面弯曲程度稍大，BC为影响积雪草苷包封率的 主要交互因素。模型Y2中，AC效应面等高线图呈椭圆形，且3D图曲面坡度陡峭，表明AC对 羟基积雪草苷包封率值交互作用最强。Design-Expert软件优选出最佳脂质体制备处方：卵 磷脂-胆固醇的质量比4﹕1，卵磷脂-CTG的质量比23.22﹕1，有机相-水相的体积比7﹕1。
实施例3
1、验证实验的准备
按最优制备工艺制备3批CTG脂质体，测定两种成分的包封率，积雪草苷实测平均包封 率为84.94％，RSD为1.51％，该成分预测值为87.30％；羟基积雪草苷实测平均包封率为 75.85％，RSD为2.26％，预测值为78.67％。各指标的实测值与预测值接近，相对偏差低于 3％，表明该模型具有良好的预测性，且工艺稳定可行。
2、CTG脂质体形态、粒径和Zeta电位测定
采用扫描电镜观察CTG脂质体的形态，取脂质体适量，稀释至适当浓度，滴少量于载玻 片上，在室温下自然风干，然后真空镀金后，观察其形态。采用激光粒度仪测脂质体平均粒 径分布及Zeta电位。如图3所示，结果表明脂质体呈类球型，表面圆整，无黏连，其粒径为201.7nm，Zeta电位为-15.7mv。
3、CTG脂质体体外释放度测定
采用《中国药典》2015年版四部溶出度与释放度测定法中第三法(小杯法)进行测定， 相关参数：温度37.5℃、转速120r/min、释放介质为脱气的生理盐水100ml。精密移取CTG脂质体混悬液及原料药溶液各6ml分别置于处理好的透析袋内，扎紧并绑于溶出仪搅拌桨上，分别于1、2、3、4、5、6、7、8、10、12h定位吸取溶液2ml(同时补充同温介质2 ml)过微孔滤膜后，HPLC法进样检测，计算样品各时间点的累计释放量Q，并对时间t作图， 见图4。结果表明：脂质体中羟基积雪草苷、积雪草苷体外12h累计释放率分别为52.10％、 45.97％；有明显的缓释效果，与之相比，游离药物7h内几乎释放完全。
实施例4
1、离体皮肤的制备
用8％Na2S溶液脱去小鼠腹部的毛发，24h后将小鼠处死，剥离腹部皮肤，用生理盐水 洗净，置生理盐水中，于4℃保存。
2、体外透皮试验
采用Franz扩散池法，进行体外透皮试验。将皮肤固定于扩散池供给室与接受室之间， 分别精密移取CTG脂质体混悬液、原料药溶液2mL于皮肤表面，接受池加入20％乙醇-生理盐 水，排净气泡使真皮一侧与接收液完全接触。水浴温度为32℃，磁力搅拌速度200r/min。 分别于4、8、12、16、20、24h，取出接收介质2mL，同时向接受池中补加等量的新鲜接收介质。取出的接收介质经0.22μm微孔滤膜过滤后，测定含量。以Qn＝(V总Cn+ΣCn－1V取)/A (Qn为累积透皮量，V总为接受池体积，Cn为该次取样测定浓度，n表示取样次数；V为每次 取样体积，A为渗透面积)计算单位面积累积渗透量。以Qn-t作图，见图5，并对透皮吸收 速率曲线进行模型拟合，结果积雪草苷、羟基积雪草苷在水溶液中符合零级释药模型。透皮 速率拟合方程分别为Qn＝28.50t-58.87，R2＝0.995；Qn＝16.46t-37.01，R2＝0.983。积雪草 苷、羟基积雪草苷脂质体符合higuchi释药模型，透皮速率拟合方程分别为Qn＝139.74 t1/2-241.2，R2＝0.987；Qn＝67.93t1/2-50.34，R2＝0.988。结果表明，CTG脂质体2种成分透皮 速率较小于原料药溶液，脂质体组表现出明显的缓释性。
3、皮肤滞留量试验
取CTG脂质体混悬液、原料药溶液，按上述方法进行透皮实验，分别在4、8、12、16、20、24h取透皮试验给药后的皮肤，轻轻试净表面残留，用打孔器打下半径8mm的圆皮肤 片，剪碎，加入生理盐水0.5mL匀浆，加入1.0mL水饱和正丁醇，涡旋5min，13000r/min 离心30min，分离有机层，氮气吹干。残渣用0.1mL甲醇溶解，涡旋5min混匀，10000r/min 离心15min，取上清液用HPLC法检测，计算不同时间单位面积皮肤滞留量Qs(Qs＝Cs× 0.1/A；Cs为第n个时间点测得的皮肤样品液中药物质量浓度，A为渗透面积)，见图6。结 果表明：经24h透皮后，脂质体组羟基积雪草苷、积雪草苷的皮肤滞留量分别为76.0μg/cm2、 48.7μg/cm2；水溶液组为34.7μg/cm2、29.3μg/cm2。经24h透皮之后，脂质体组2种有 效成分的皮肤滞留量均高于水溶液对照组，提示药物主要集中于皮肤病灶，以贮库的形式产 生缓释作用。
制备脂质体影响因素很多，前期实验考察了卵磷脂-CTG的质量比、卵磷脂-胆固醇的质 量比、有机相的种类及用量、水化介质种类及用量、水化温度等因素对包封率影响，发现脂 材在氯仿中溶解效果最好，且形成凝胶的过程中无起泡现象，与水相混匀后超声可形成均一 的乳剂，故选择氯仿为有机相；预实验用PBS缓冲液(磷酸缓冲盐溶液)制备脂质体，在水 化阶段，凝胶脱落不完全，残留量大，且放置过夜后出现分层现象，故选择超纯水为水化介 质；水化温度考察了40℃、50℃、60℃，其中50℃时所需的水化时间短，凝胶易脱落且脂质体稳定性较好，故选择50℃为水化温度。在单因素筛选的基础上对影响较大的卵磷脂-CTG的质量比、胆固醇-卵磷脂的质量比、有机相-水相体积比采用Box-Behnken效应面法进行优化试验，得到最佳工艺参数，并对最优处方进行验证，相对偏差较小，表明该回归模型可较好地预测CTG脂质体的包封率，结果预测准确，真实可靠。与目前普遍采用的正交和均匀设计优化工艺相比，Box-Behnken效应面法可连续对试验各水平进行分析，在反映各因素不同程度对制备工艺影响的同时，还直观体现了因素间的交互作用，具有实验精度高、预测性好的优势。
在分离游离药物与脂质体的过程中试采用透析法，发现所需时间较长；凝胶柱色谱法， 重现性差，洗脱过程中会因为洗脱剂的稀释而出现药物泄露的现象；超滤离心法效果较好， 且分离迅速，故采用超滤离心法测定CTG脂质体的包封率。
由体外透皮考察结果可知：羟基积雪草苷和积雪草苷的Qn-t曲线具有相似性，其原因可 能是：两者的化学结构、性质和分子量具有相似性。由图6可知，经皮给药前期，CTG脂质 体2种成分的透皮速率较原料药溶液无明显差异，随时间的增加，脂质体透皮速率逐渐降低； 皮肤滞留量试验表明脂质体组羟基积雪草苷、积雪草苷的皮肤滞留量分别为76.0μg/cm2、 48.7μg/cm2；水溶液组为34.7μg/cm2、29.3μg/cm2，相对提高了1.56和1.17倍。
以上所举实施例，对本发明的目的、技术方案和优点进行了进一步的详细说明，所应理解的 是，以上所举实施例仅为本发明的优选实施方式而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的 精神和原则之内对本发明所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范 围之内。

Claims (4)

1.一种积雪草总苷脂质体，其特征在于：包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4-8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20-40:1；有机相与水相的体积比为5-7:1。
2.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷脂质体，其特征在于：卵磷脂与胆固醇的质量比4﹕1，卵磷脂与积雪草总苷的质量比23.22﹕1，有机相与水相的体积比7﹕1。
3.一种积雪草总苷脂质体的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
S1、按一定比例称取卵磷脂、胆固醇，将卵磷脂、胆固醇溶于氯仿；
S2、再加入积雪草总苷的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂；
S3、将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液；
S4、继续旋蒸1小时使胶体脱落，冰水浴超声即得脂质体。
4.一种积雪草总苷脂质体的制备工艺，其特征在于：所述将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液，水化温度为50℃。
CN201910181648.6A 2018-04-27 2019-03-11 一种积雪草总苷脂质体及制备工艺 Active CN109999070B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2018103897676 2018-04-27
CN201810389767.6A CN108721348A (zh) 2018-04-27 2018-04-27 一种积雪草总苷脂质体及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109999070A true CN109999070A (zh) 2019-07-12
CN109999070B CN109999070B (zh) 2021-10-08

Family

ID=63939361

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810389767.6A Withdrawn CN108721348A (zh) 2018-04-27 2018-04-27 一种积雪草总苷脂质体及其制备方法
CN201910181648.6A Active CN109999070B (zh) 2018-04-27 2019-03-11 一种积雪草总苷脂质体及制备工艺

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810389767.6A Withdrawn CN108721348A (zh) 2018-04-27 2018-04-27 一种积雪草总苷脂质体及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (2) CN108721348A (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115068352B (zh) * 2022-06-01 2023-10-20 吉林大学 一种控油多肽柔性脂质体水凝胶及制备方法与应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1430952A (zh) * 2003-01-30 2003-07-23 上海家化联合股份有限公司 积雪草甙脂质体及其用途
CN103893122A (zh) * 2014-03-28 2014-07-02 华南理工大学 一种羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用
CN107550849A (zh) * 2017-09-08 2018-01-09 华南理工大学 一种局部外用的羟基积雪草苷脂质体凝胶及其制备方法
CN107744502A (zh) * 2017-09-08 2018-03-02 华南理工大学 一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1430952A (zh) * 2003-01-30 2003-07-23 上海家化联合股份有限公司 积雪草甙脂质体及其用途
CN103893122A (zh) * 2014-03-28 2014-07-02 华南理工大学 一种羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用
CN107550849A (zh) * 2017-09-08 2018-01-09 华南理工大学 一种局部外用的羟基积雪草苷脂质体凝胶及其制备方法
CN107744502A (zh) * 2017-09-08 2018-03-02 华南理工大学 一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
任翔: "积雪草苷修饰脂质体的制备及其大鼠体内药动学研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
任艳，等: "积雪苷柔性纳米脂质体的制备与表征分析 ", 《中国中药杂志》 *
闫丹，等: "积雪草总苷脂质体的制备及体外透皮研究", 《中草药》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109999070B (zh) 2021-10-08
CN108721348A (zh) 2018-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101961059B (zh) 一种普洱茶提取物及制备方法和应用
CN101961422B (zh) 普洱茶提取物及其制备
CN100453094C (zh) 中药复方通脉口服液有效部位的药物组合物及其制备方法
CN105300848B (zh) 一种脂质体人工皮肤膜及其制备方法和在外用制剂中的应用
CN101961061B (zh) 一种普洱茶提取物及制备方法和应用
CN107375611B (zh) 一种具有丰胸效果的中药组合物及制备方法
CN102861123B (zh) 一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用
CN101961426B (zh) 普洱茶的提取物及提取方法
CN109998995A (zh) 一种紫草素脂质体及制备工艺
CN109999070A (zh) 一种积雪草总苷脂质体及制备工艺
CN101439083B (zh) 一种具有清风热、通鼻窍的中药软胶囊剂的检测方法
CN107625729A (zh) 泊沙康唑口服混悬液及其制备方法
CN102138963B (zh) 一种当归黄芪提取物及其制备方法和用途
CN114522137B (zh) 一种绿原酸-黄芩苷共载纳米粒鼻腔原位凝胶及其制备方法和应用
CN106491683B (zh) 一种用于治疗哮喘的款冬花提取物及其制备方法
CN100522138C (zh) 小柴胡汤口服液的制备方法及其有效成分测定方法
CN109100432A (zh) 羊耳菊提取物中九种有效成分在Caco-2细胞模型中摄取和转运机制的研究方法
CN103565874A (zh) 滇桂艾纳香提取物及其用途
CN106109416A (zh) 知母皂苷aⅲ纳米脂质体及其制备方法和应用
CN113917031A (zh) Uhplc-ms/ms法测定补肺活血胶囊在体内血药浓度的方法
CN103393708B (zh) 一种治疗心脑血管疾病的人参皂苷、麦冬皂苷d组合物
CN104739923B (zh) 一种用于治疗慢性肾炎的肾茶总酚及其制备方法
CN100368004C (zh) 一种治疗牛皮癣的中药组合物及制备方法和质量控制方法
CN102240315A (zh) 王不留行抗新生血管有效部位的纯化与应用
CN107951959A (zh) 一种裸花紫珠涂膜剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: 400715 No. 2, natural road, Beibei District, Chongqing

Applicant after: SOUTHWEST University

Applicant after: Chongqing yuebencao Biotechnology Development Co.,Ltd.

Address before: 400715 No. 2, natural road, Beibei District, Chongqing

Applicant before: SOUTHWEST University

Applicant before: CHONGQING YUEHUAYUEYOU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.

CB02 Change of applicant information
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant