CN109988120A - 一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途 - Google Patents

一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途 Download PDF

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何锦云
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Abstract

本发明提供了一种式(I)所示的化合物。本发明还涉及含有式(I)化合物的药物组合物以及该化合物在制备吲哚胺‑2,3‑双加氧酶(IDO)抑制剂类药物中的用途。本发明制备的化合物对IDO蛋白酶具有明显的抑制作用，且在体内代谢稳定。本发明的化合物或其药物组合物可以用于制备IDO抑制剂类药物，也可以用于制备预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物。

Description

一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于医药化学领域，涉及一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂极其制备方法和用途。
背景技术
恶性肿瘤是目前威胁人类健康和生命的主要疾病之一，根据国家卫生和计划生育委员会统计数据显示，我国大陆肿瘤发生率约为235/10万，死亡率约为144.3/10万。
由于恶性肿瘤的无限制生长于浸润、转移，现今临床采用的三大常规治疗方法(手术、放疗和化疗)无法完全切除或彻底杀灭肿瘤细胞，因此常出现肿瘤转移或复发。肿瘤生物治疗是应用现代生物技术及其相关产品进行肿瘤防治的新疗法，因其安全、有效、不良反应低等特点，成为继手术、放疗、化疗之后肿瘤治疗的第四种模式，其通过调动宿主的天然防御机制或给予天然产生的靶向性很强的物质来获得抗肿瘤的效应。
吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是一种含铁血红素单体蛋白，由403个氨基酸残基组成，包括两个折叠的α-螺旋结构域，大结构域包含催化口袋，底物可在催化口袋内与IDO发生疏水等作用。IDO是肝脏以外唯一可催化色氨酸代谢，使其沿犬尿氨酸途径分解生成包含喹啉酸在内的一系列代谢产物的限速酶。催化色氨酸代谢的另一类酶为色氨酸-2,3-双加氧酶，其与IDO有相似的血红素活性位点，但两者仅有约10％的氨基酸序列相同。人体内约有95％的游离L-色氨酸可按犬尿氨酸途径代谢，并产生多种就有生物活性的代谢产物，包括犬尿氨酸、犬尿酸、3-羟基犬尿氨酸、3-羟基邻氨苯甲酸、吡啶甲酸、喹啉酸以及氧化辅酶A等。IDO在正常状态下表达水平较低，在炎症或感染过程中表达显著增加，此外脂多糖及细胞因子等均可诱导IDO的表达。体外研究发现，除犬尿氨酸外，色氨酸的中间代谢产物3-羟基邻氨苯甲酸和喹啉酸也可在体外诱导小鼠胸腺细胞的T淋巴细胞凋亡。肿瘤细胞可通过消耗局部色氨酸，产生代谢产物诱导局部免疫，同时肿瘤局部浸润性T淋巴细胞水平明显下降。简而言之，IDO可通过以下几种途径抑制肿瘤的局部免疫：①色氨酸耗竭机制：通过使IDO过渡表达，导致T细胞增殖所必需的色氨酸缺乏，影响T细胞的有效增殖，导致T细胞易发生凋亡而被清楚；②色氨酸代谢产物毒性机制：IDO催化色氨酸降解产生的代谢产物可以抑制活化T细胞的功能，甚至诱导T细胞凋亡；③IDO还可以通过诱导调节性T细胞的增殖从而抑制活化T细胞的免疫功能。因此，IDO是一个具有潜力的肿瘤免疫治疗的靶标。
公开的选择性抑制IDO的抑制剂专利申请包括WO2010005958、WO2013174947、WO2014066834、WO2016155545、CN201610059454.5、CN201710060610.4等。
1-甲基色氨酸是由Newlink Genetics公司开发的口服小分子IDO抑制剂，用于治疗转移性乳腺癌和实体瘤，目前长期处于临床二期试验阶段。另外，Incyte公司正在研发的一系列口服IDO小分子抑制剂中INCB-24360也在进行临床三期试验，主要用于治疗包括骨髓增生异常综合症在内的多种癌症，但是在临床试验中出现了一定的药物代谢稳定性的毒性的问题。
因此，为了达到更好的肿瘤治疗效果和目的，更好的满足市场需求，现在急需开发出新一代的高效低毒的选择性IDO抑制剂。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了式(I)所示的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体，或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体：
其中，X为氨基、氧、硫；Y为氨基、氧；
R1为氢、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基、-(CH2)mCOR5、-(CH2)mSO2R6、-(CH2)m(CO)2R7；m选自0～5的整数；
R5、R6、R7分别独立地选自卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、-NR8R9、-OR8；
R8、R9分别独立地选自氢、卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基；或者R8、R9连接成环；
R、R2分别独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C5烷基；
R3、R4分别独立地选自氢、卤素、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基；
其中，氢包括氢元素(H)和同位素氘(D)；
a＝0～2的整数；b＝0～2的整数；c＝0～5的整数；d＝0～5的整数；a和b不同时为0，且a+b不大于2；c和d不同时为0。
进一步地，上述化合物具有如式(Ⅱ)或式(Ⅲ)所示的结构：
其中，R5、R6分别独立地选自卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、-NR8R9、-OR8；
R8、R9分别独立地选自氢、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基。
进一步地，a＝0时，上述化合物具有如式(Ⅳ)所示的结构；b＝0时，上述化合物具有如式(V)所示的结构：
进一步地，a＝0,b＝1时，或者a＝1,b＝0时，上述化合物具有如式(VI)所示的结构：
进一步地，a＝1，b＝1时，上述化合物具有如式(VII)所示的结构：
进一步地，上述化合物为如下化合物之一：
本发明还提供了上述化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体在制备IDO抑制剂类药物中的用途。
本发明还提供了上述化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体在制备用于预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物中的用途。
进一步地，所述具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病选自癌症、骨髓增生异常综合征、阿尔茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍和艾滋病；其中所述的癌症优选乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、IV期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤。
本发明还提供了一种药物组合物，它是以上述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
本发明还提供了上述药物组合物在制备IDO抑制剂类药物中的用途。
本发明还提供了上述药物组合物在制备用于预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物中的用途。
进一步地，所述具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病选自癌症、骨髓增生异常综合征、阿尔茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍和艾滋病；其中所述的癌症优选乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、IV期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤。
本发明制备的化合物对IDO蛋白酶具有明显的抑制作用，且在体内代谢稳定。本发明的化合物或其药物组合物可以用于制备IDO抑制剂类药物，也可以用于制备预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
通用合成路线：
PG为保护基，包括但不局限于Boc,Fmoc等。
实施例1、顺-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((-3-(磺酰胺)环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物83)的合成
通过文献方法(WO 2015039348A1)合成化合物3-(二苄氨基)环丁基羧酸甲脂83c。1、化合物3-氧代环丁基羧酸甲脂(83b)的合成
氮气保护下，将原料化合物83a(4.0g,35.1mmol)溶于40mL二氯甲烷和5mL甲醇中，冰水浴下，滴加2M的TMSCHN2(30mL,59.6mmol)。冰水浴搅拌2h。滴加1mL冰醋酸淬灭反应，溶剂旋干，过硅胶柱纯化，得到化合物3-氧代环丁基羧酸甲脂(83b)(4.4g,34.3mmol)，收率：96.7％。
2、化合物3-(二苄氨基)环丁基羧酸甲脂(83c)的合成
将化合物3-氧代环丁基羧酸甲脂(83b)(4.4g,34.3mmol)和二苄基胺(8.13g,41.2mmol)溶于100mL四氢呋喃和2mL冰醋酸。搅拌5分钟，加入氰基硼氢化钠(6.6g,103.0mmol)。室温搅拌过夜。冷却至室温，加入乙酸乙酯和饱和NaHCO3萃取，有机层用饱和食盐水洗涤2次，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物3-(二苄氨基)环丁基羧酸甲脂(83c)(7.5g,24.2mmol)，收率：70.6％。MS(ESI)m/e310.4(M+H)+。
3、化合物3-氨基环丁基羧酸甲脂醋酸盐(83d)的合成
将化合物3-(二苄氨基)环丁基羧酸甲脂(83c)(3.5g,11.3mmol)溶于60mL甲醇和2mL冰醋酸，加入1g湿Pd/C，用双层氢气球置换氢气3次。室温搅拌过夜。溶剂旋干，加入10mL乙酸乙酯，有白色固体析出，抽滤，固体旋干。得到白色固体化合物3-氨基环丁基羧酸甲脂醋酸盐(83d)(1.5g,7.9mmol)，收率：70.1％。MS(ESI)m/e130.3(M+H)+。4、化合物3-Boc氨基环丁基羧酸甲脂(83e)的合成
将化合物3-氨基环丁基羧酸甲脂醋酸盐(83d)(500.0mg,2.6mmol)和三乙胺(800.0mg,7.9mmol)溶于20mL二氯甲烷，加入Boc酸酐(750.0mg,3.4mmol)，室温搅拌3h。加入二氯甲烷和0.2N的稀盐酸，萃取。有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物3-Boc氨基环丁基羧酸甲脂(83e)(420.0mg,1.8mmol)，收率：69.6％。MS(ESI)m/e130.3(M-100+H)+。
5、化合物3-Boc氨基环丁基甲醇(83f)的合成
氮气保护下，将化合物3-Boc氨基环丁基羧酸甲脂(83e)(400.0mg,1.7mmol)溶于10mL四氢呋喃，冰水浴下，分批加入四氢铝锂(100.0mg,2.6mmol)。0℃搅拌3h。滴加15％的NaOH 1mL,再加入1mL水，加入硫酸钠干燥，旋干，得到粗产品化合物3-Boc氨基环丁基甲醇(83f)(350.0mg,1.7mmol)，直接投下一步反应，收率：100％。MS(ESI)m/e102.4(M-100+H)+。
6、化合物3-((叔丁氧羰基)氨基)环丁基)甲基甲磺酸脂(83g)的合成
氮气保护下，化合物3-Boc氨基环丁基甲醇(83f)(350.0mg,1.7mmol)和三乙胺(528.0mg,5.2mmol)溶于10mL二氯甲烷，冰水浴下，滴加甲基磺酰氯(219.0mg,1.9mmol)。室温搅拌3h。加入二氯甲烷和0.2N的稀盐酸，萃取。有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，得到化合物3-((叔丁氧羰基)氨基)环丁基)甲基甲磺酸脂(83g)(330.0mg,1.2mmol)，直接投下一步反应，收率：67.9％。MS(ESI)m/e224.2(M-55)+。
7、化合物顺-叔丁基-3-叠氮甲基)环丁基)甲酰胺(83h)的合成
氮气保护下，化合物3-((叔丁氧羰基)氨基)环丁基)甲基甲磺酸脂(83g)(330.0mg,1.2mmol)和叠氮钠(153.0mg,2.4mmol)加入到5mL DMF中。加热到70℃，搅拌过夜。加入乙酸乙酯和水萃取。有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物顺-叔丁基-3-叠氮甲基)环丁基)甲酰胺(83h)(230.0mg,1.0mmol)，收率：86.1％。MS(ESI)m/e127.4(M-100+H)+。
8、化合物顺-叔丁基-3-氨甲基)环丁基)甲酰胺(83i)的合成
化合物顺-叔丁基-3-叠氮甲基)环丁基)甲酰胺(83h)(230.0mg,1.0mmol)和三苯基膦(400.0mg,1.5mmol)加入到5mL THF和0.1mL水中。室温搅拌过夜。干燥，旋干，到粗产品化合物顺-叔丁基-3-氨甲基)环丁基)甲酰胺(83i)(200.0mg,1.0mmol)，直接投下一步反应，收率：100％。
9、化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)甲酰胺(83j)的合成
化合物4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-恶唑-3-基)-1,2,4-恶唑-5(4氢)-酮(1)(200.0mg,0.5mmol)和粗品化合物顺-叔丁基-3-氨甲基)环丁基)甲酰胺(83i)(200.0mg,1.5mmol)加入到16mL THF和1mL 2N的氢氧化钠中，室温搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，萃取，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)甲酰胺(83j)(150.0mg,0.3mmol)，收率：53.1％。MS(ESI)m/e425.0,427.0(M-100+H)+。
10、化合物顺-3-(4-(((3-环丁氨基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二氮唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(83k)的合成
化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二氮唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)甲酰胺(83j)(110.0mg,0.2mmol)加入到2.0mL TFA和1.0mL二氯甲烷中，室温搅拌1h。溶剂旋干，得到化合物顺-3-(4-(((3-环丁氨基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(83k)(100.0mg,0.2mmol)的三氟乙酸盐，收率：100％。MS(ESI)m/e523.0(M-1)+。
11、化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二氮唑-3-基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)磺酰基甲酰胺(83l)的合成
氮气保护下，化合物顺-3-(4-(((3-环丁氨基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二氮唑-5(4H)-酮(83k)(90.0mg,0.2mmol)和三乙胺(213.0mg,2.1mmol)加入到4mL二氯甲烷中，将Boc氨基磺酰氯的二氯甲溶液(135.0mg,1mL,0.6mmol)滴加到反应液中。室温搅拌3h。加入二氯甲烷和0.2N的稀盐酸萃取，有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，得到化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)-1,2,5-噁二氮唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)磺酰基甲酰胺(83l)(80.0mg,0.13mmol)，收率：62.5％。MS(ESI)m/e621.1(M+18)+。
12、合成化合物83：顺-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((-3-(磺酰胺)环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物83)的合成
化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二氮唑-3-基)-1,2,5-噁二氮唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)磺酰基甲酰胺(83l)(80.0mg,0.13mmol)加入到2.0mL TFA和1.0mL二氯甲烷中，室温搅拌1h。溶剂旋干，得到白色固体5.0mg。将白色固体溶于2.0mL甲醇，加入2.5N氢氧化钠1mL，室温搅拌1h。加入乙酸乙酯和水萃取。有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物顺-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((-3-(磺酰胺)环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物83)(25.0mg,0.05mmol)，收率：39.5％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),8.89(s,1H),7.19(t,J＝8.8Hz,1H),7.10(d,J＝3.4Hz,1H),6.79(dd,J＝16.6,8.5Hz,2H),6.47(s,2H),6.14(d,J＝5.9Hz,1H),3.57(dd,J＝16.4,8.2Hz,1H),3.19(t,J＝6.1Hz,2H),2.34(d,J＝7.6Hz,2H),2.24–2.12(m,1H),1.67(d,J＝10.0Hz,2H).MS(ESI)m/e 478.0,480.0(M+H)+。
实施例2、顺-4-(((-3-氨基环丁基)甲基)氨基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物82)的合成
化合物顺-叔丁基-3-(((4-(4-(3-溴-4-氟苯基)-5-羰基-4,5-二氢-1,2,4-噁二氮唑-3-基)-1,2,5-噁二氮唑-3-基)氨基)甲基)环丁基)甲酰胺(83k)(40.0mg,0.073mmol)溶于2.0mL甲醇，加入2.5N氢氧化钠1mL，室温搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，萃取。有机层用食盐水洗涤2次，干燥，旋干，得到泡沫状固体35mg。泡沫状固体加入到2.0mL TFA和1.0mL二氯甲烷中，室温搅拌1h。溶剂旋干，加入水和二氯甲烷萃取。取水层，调节pH至8～9，加入二氯甲烷萃取，有机层干燥想，旋干。得到化合物顺-4-(((-3-氨基环丁基)甲基)氨基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物82)(25.0mg,0.05mmol)，收率：65.7％。
MS(ESI)m/e399.2,401.2(M+H)+。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.22–7.11(m,1H),6.93(ddd,J＝12.2,11.5,6.6Hz,3H),5.89(s,1H),3.52–3.26(m,3H),2.51(d,J＝6.4Hz,2H),2.37–2.23(m,1H),1.70–1.50(m,2H)。
实施例3、HC-2507-01:N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-((((1s,3s)-3-羟基环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物90)的合成
1、N-苯基-3-氧代环丁基甲酰胺(90a)的合成
氮气保护下，将3-氧代环丁基羧酸(83a)(5.0g,43.8mmol)，苄氨(7.4g,57.0mmol)和HATU(16.0g,48.0mmol)溶于200mL DMF，滴加二异丙胺(11.7g,109.0mmol)。室温搅拌3h。入乙酸乙酯和饱和水萃取，有机层用饱和食盐水洗涤2次，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到N-苯基-3-氧代环丁基甲酰胺(90a)(4.5g,22.1mmol)，收率：50.5％。MS(ESI)m/e 204.3(M+H)+。
2、3-((苯甲氨基)甲基)环丁醇(90b)的合成
将N-苯基-3-氧代环丁基甲酰胺(90a)(4.5g,22.1mmol)溶于150mL四氢呋喃，分批缓慢加入四氢铝锂(1.7g,44.3mmol)。加热到70℃，搅拌3h。冷却至室温，滴加15％的NaOH5mL，再加入3mL水，加入硫酸钠干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到3-((苯甲氨基)甲基)环丁醇(90b)(2.6g,13.6mmol)，收率：61.2％。MS(ESI)m/e 192.4(M+H)+。
3、顺-3-(氨甲基)环丁醇(90c)的合成
将3-((苯甲氨基)甲基)环丁醇(90b)(2.0g,11.3mmol)溶于60mL甲醇，加入0.4g湿Pd/C，用双层氢气球置换氢气3次。室温搅拌过夜。垫硅藻土抽滤，滤液旋干，得到粗品顺-3-(氨甲基)环丁醇(90c)(1.0g,11.3mmol)，收率：100％。MS(ESI)m/e102.4(M+H)+
4、顺-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((3-羟基环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物90)的合成
化合物4-(3-溴-4-氟苯基)-3-(4-硝基-1,2,5-恶唑-3-基)-1,2,4-恶唑-5(4氢)-酮(1)(200.0mg,0.5mmol)和粗品顺-3-(氨甲基)环丁醇(90c)(100.0g,1.1mmol)加入到16mLTHF和2mL 2N的氢氧化钠中，室温搅拌4h。加入乙酸乙酯和水，萃取，干燥，旋干，硅胶柱层析纯化。得到化合物顺-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((3-羟基环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-脒(化合物90)(90.0mg,0.2mmol)，收率：41.8％。MS(ESI)m/e400.0,402.2(M+H)+。
实施例4、顺式-3-(((4-(N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基脒基)-1,2,5-噁二唑-3-基)氨基)甲基)环丁醇氨基磺酸酯(化合物91)的制备
使用化合物90c和化合物1为原料，用类似于实施例1的合成方法制备得到。MS(ESI)m/e 479(M+H)+。
实施例5、(反)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((2-(胺磺酰基)环丙基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物3)的合成
中间体化合物反式叔丁基(2-(氨基甲基)环丙烷基)氨基甲酸酯(3.1i)的合成路线：
1、化合物3.1b的合成
将氢化钠8.4g加入到200mL的甲苯中，冰浴条件下滴加磷酰基乙酸三乙酯(44.8g,0.2mol)，加完后继续搅拌20min左右，加入2-((苄氧基)甲基)环氧乙烷(3.1a,16.4g,0.1mol)。将反应液温度升高到100℃，搅拌反应2h，待反应液冷却到室温，将反应液倒入200mL饱和的氯化铵水溶液中，用甲基叔丁基醚萃取，得到的有机相，经减压蒸馏，除去溶剂后得到粗品。粗品采用柱层析纯化(淋洗剂：PE:EA＝10:1)，得到产物3.1b 10.54g，产率45％。
2、化合物3.1c的合成
将化合物3.1b(9.37g,0.04mol)溶于20mL甲醇中，加入2.5N氢氧化钠溶液，室温搅拌反应。反应结束后，用1N的盐酸将pH调至3左右，用二氯甲烷萃取，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到标题产物3.1c(8.1g，无色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。
MS:m/z(LC-MS):235[M+1]。
3、化合物3.1d的合成
将化合物3.1c(6.19g,0.03mol)溶于20mL四氢呋喃中，冰浴条件下滴加草酰氯(4.57g,0.036mol)，滴加完后，室温继续搅拌0.5h。将上述四氢呋喃溶液滴加到叠氮钠(2.93g)的水(2mL)溶液中，反应结束后，用二氯甲烷萃取，得到的有机相水洗3次(每次30mL)。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到标题产物3.1d(6.8g，无色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。
4、化合物3.1e的合成
将化合物3.1d(5.78g,0.025mol)溶于20mL甲苯中，加入10mL叔丁醇。反应液温度升高到80℃，搅拌反应4h，反应完成后，减压蒸馏除去溶剂，得到的粗品。粗品经柱层析纯化(淋洗剂：PE:EA＝4:1)，得到产物3.1e(3.54g,产率51％)。MS:m/z(LC-MS):278[M+1]。
5、化合物3.1f的合成
将化合物3.1e(2.77g,0.01mol)溶于20mL甲醇中，加入10％Pd/C，通入氢气反应，反应完成后，减压过滤除去Pd/C，得到产物3.1f(1.78g)，产物不经纯化直接进行下一步反应。
6、化合物3.1g的合成
将化合物3.1f(1.69g,0.009mol)溶于20mL乙酸乙酯中，加入IBX(5.04g)，回流条件下反应2h，反应完成后，减压过滤，得到的滤液经减压蒸馏，除去溶剂得到产物3.1g(1.58g)，产物不经纯化直接进行下一步反应。
7、化合物3.1h的合成
将化合物3.1g(1.48g,0.008mol)溶于5mL甲醇中，加入苄胺(1.03g)，室温搅拌反应1h后，加入硼氢化钠(0.45g)，反应完成后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取，得到的有机相，经减压蒸馏除去溶剂，得到粗品。粗品经柱层析纯化(淋洗剂：PE:EA＝3:1)，得到产物3.1h(1.55g，产率70％)。
8、化合物3.1i的合成
将化合物3.1h(1.66g,6mmol)溶于10mL甲醇中，加入10％Pd/C，通入氢气反应，反应完成后，减压过滤除去Pd/C，得到产物3.1i(1.05g)，产物不经纯化直接进行下一步反应。MS:m/z(LC-MS):187[M+1]。
化合物3的合成路线如下：
第一步：化合物1a合成实例：
将3-(4-氨基-1,2,5-噁二唑-3-基)-4-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(26.0g,76.01mmol)加入380mL三氟乙酸中，加入230mL双氧水溶液(30％)，于55℃-60℃反应12小时。反应结束后，冷却，将反应液倒入1L冰水中，搅拌条件下析出固体。过滤，固体用100mL水洗两次，得到的固体为化合物1a，固体干燥后重13.57g(棕黄色固体)，产率48％。1HNMR(DMSO-d6，400MHz):δ8.05(dd,J＝2.4,6.0Hz,1H),7.67(m,J＝2.4,4.4Hz,1H),7.57(t,J＝8.8,17.6Hz,1H)。
第二步：化合物3.1合成实例：
将化合物1a(312.53mg,0.84mmol)溶于22.5mL四氢呋喃中，加入化合物3.1a(312.9mg,1.68mmol)，加入2.25mL 2.5M的氢氧化钠溶液，搅拌反应30分钟。反应结束后，向反应液中加入饱和的氯化铵水溶液50mL，用乙酸乙酯萃取(50mL)，得到的有机相用0.2N的盐酸水洗(50mL)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品化合物3.1(240mg，黄色固体)，粗品经柱层析纯化(淋洗剂：PE:EA＝1:1)，得产物190mg。MS:m/z(LC-MS):485.1[M+1]。
第三步：化合物3.2合成实例：
将化合物3.1(190mg,0.392mmol)溶于10mL乙酸乙酯中，加入N,N-羰基二咪唑(94.86mg,0.587mol)，搅拌条件下回流反应0.5小时。反应结束后，待反应液冷却后，用0.2N的盐酸水洗(20mL)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品产物化合物3.2(185mg，黄色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。MS:m/z(LC-MS):511.1[M+1]。
第四步：化合物3.3合成实例：
将化合物3.2(185mg,0.362mmol)溶于3mL二氯甲烷中，加入1.5mL三氟乙酸，搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，得到粗品产物化合物3.3(136mg，黄色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。MS:m/z(LC-MS):411[M+1]。
第五步：化合物3.4合成实例：
将氯磺酸异氰酸酯(56.5mg,0.4mmol)溶于5mL二氯甲烷中，冷却至0℃，加入叔丁醇(32.6mg,0.44mmol)，反应液在0℃条件下反应1小时，制得反应液A。将化合物3.3(136mg，0.331mmol)溶于5mL二氯甲烷中，加入1.0mL三乙胺，制得反应液B。在0℃条件下将反应液A加入反应液B中，并在0℃条件下反应1小时。反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶液将反应液淬灭，分液，有机相用0.2N的盐酸水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法展开剂体系二氯甲烷/甲醇＝10:1纯化，得到产物化合物3.4(150mg，白色固体)。MS:m/z(LC-MS):590.1[M+1]。
第六步：化合物3.5合成实例：
将化合物3.4(150mg,0.254mmol)溶于3mL二氯甲烷中，加入1.5mL三氟乙酸，搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，得到粗品产物化合物3.5(115mg，白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。MS:m/z(LC-MS):490[M+1]。
第七步：化合物3合成实例：
将化合物3.5(115mg,0.235mmol)溶于2mL四氢呋喃中，在0℃条件下加入0.3mL2.5N氢氧化钠溶液，搅拌反应1小时。反应结束后，向反应液中加入饱和的氯化铵水溶液(5mL)，用乙酸乙酯萃取，得到的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法展开剂体系二氯甲烷/甲醇＝10:1纯化，得到产物化合物3(65mg，白色固体)。1H NMR(CD3OD,400MHz)：δ7.15-7.13(m,1H),7.07-7.03(m,1H),6.86-6.83(m,1H),6.76-6.72(m,1H),3.27-3.25(m,1H),3.15-3.10(m,1H),0.92-0.87(m,2H),0.73-0.68(m,1H).LC/MS(ESI+)m/z,464(M+H+)。
实施例6、(反)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-((((1S,2R)-2-(胺磺酰基)环丙基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物19)的合成
使用手性2-((苄氧基)甲基)环氧乙烷为原料用类似于实施例5的方法制备得到化合物19。MS:m/z(LC-MS):464[M+1]。
实施例7、(反)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-((((1R,2S)-2-(胺磺酰基)环丙基)甲基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物35)的合成
使用手性2-((苄氧基)甲基)环氧乙烷为原料用类似于实施例5的方法制备得到化合物35。MS:m/z(LC-MS):464[M+1]。
实施例8、(反)-4-(((2-氨基环丙基)甲基)氨基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物2)的合成
用实施例1中类似的方法，以化合物3.1为原料用TFA脱去保护基后得到化合物2。MS:m/z(LC-MS):385[M+1]。
实施例9、(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-((2-(羟基甲基)环丙烷基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物146)
以中间体化合物3.1f为原料用TFA脱去Boc保护基后用类似于实施例1的实验方法制备得到化合物146。MS:m/z(LC-MS):386[M+1]。
实施例10、(Z)-N-(3-溴-4-氟苯基)-N'-羟基-4-(((1-羟基-3-(氨磺酰基氨基)环丁基)甲基)氨基)-1,2,5-恶二唑-3-甲脒(化合物115)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.73(s,1H),8.88(s,1H),7.19(t,J＝8.8Hz,1H),7.12(dd,J＝6.0,2.7Hz,1H),6.86(d,J＝7.5Hz,1H),6.79(ddd,J＝8.8,4.0,2.8Hz,1H),6.50(s,2H),6.07(t,J＝5.5Hz,1H),5.51(s,1H),3.32(s,1H),3.27(d,J＝5.5Hz,2H),2.45–2.38(m,2H),2.01(dd,J＝11.4,9.1Hz,2H).LC/MS(ESI+)Calcd for C14H17BrFN7O5S(M-54+H+)m/z,495.0；Found,496.0
其余化合物的制备方法类似实施例1或实施例5。
以下通过试验例来具体说明本发明的有益效果：
以下生物学试验例来进一步说明本发明的用途，但并不意味着限制本发明的应用范围。
试验例1：本发明化合物对人源IDO1蛋白酶抑制活性的测定
1)实验材料及仪器：
IDO1(His-tag)酶(BPS Bioscience)
L-色氨酸(Sigma)
亚甲基蓝(Sigma)
源自牛肝脏的过氧化氢酶(Sigma)
L-抗坏血酸(Sigma)
丙三醇(Sigma)
磷酸二氢钾溶液(Sigma)
吐温20(Tween 20，Sigma)
自动加样工作平台Liquid handler(Bravo&Echo)
酶标仪SpectraMax M5e(Molecular Devices)
2)化合物测试实验方法：用吸光度试验方法对待测化合物进行测试：
将待测化合物和参照化合物加DMSO配成高浓度储存溶液。用DMSO稀释参照化合物储存液，配成100×溶液。在工作板中第一列加入8μL上述待测化合物和100×参照化合物为最高浓度，3倍稀释11个浓度，配成100×溶液。取以上板中溶液0.5μL到检测板。每孔加入0.5μL 100×化合物溶液。HPE和ZPE对照孔加入0.5μL 100％DMSO。
向每孔加入25μL 2×IDO1(His-tag)酶溶液(包含L-抗坏血酸，亚甲基蓝和过氧化氢酶)。HPE对照孔加入25μL不含有IDO1(His-tag)酶的反应液。将检测板1000rpm离心1分钟混匀。然后将检测板放置室温下孵育30分钟。再向每孔加入25μL上述2×底物(L-色氨酸)溶液。将检测板1000rpm离心1分钟混匀。将检测板置于酶标仪(SpectraMax M5e)，设置温度为25℃，每隔10分钟在320nm处测吸光度(OD值)，测至60分钟。
计算吸光值增长率：从SpectralMax M5e中导出10分钟到60分钟吸光值增长曲线的斜率。计算化合物抑制系数：化合物抑制率＝(ZPE对照孔吸光值增长率-化合物孔吸光值增长率)/(ZPE对照孔吸光值增长率-HPE对照孔吸光值增长率)×100。结果用Prism 5.0进行分析。
3)结果：本发明中化合物对人源IDO1蛋白酶活性抑制IC50见表1。
表1本发明化合物对人源IDO1蛋白酶活性抑制IC50
化合物编号 IC<sub>50</sub>(nM)
2 76
3 53
10 104
82 81
83 39
90 93
91 126
99 91
115 125
结论：本发明制备的化合物对人源IDO1蛋白酶活性具有明显的抑制作用。可以用于制备IDO抑制剂类药物，也可以用于制备预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物。
试验例2：本发明化合物对Hela细胞内IDO蛋白酶活性抑制的测定
1)实验材料及仪器：
HeLa细胞(ATCC,Cat.No.CCL-2)
γ干扰素IFNγ(R&D,Cat.No.285-IF-100)
DMEM High Glucose培养基(Invitrogen,Cat.No.11965-084)
胎牛血清FBS(Invitrogen,Cat.No.10100-147)
胰酶Trypsin-EDTA(0.05％)(Invitrogen,Cat.No.25300-054)
磷酸盐缓冲液PBS,pH 7.4(Invitrogen,Cat.No.10010023)
青-链霉素Penicillin-Streptomycin(P/S)(Invitrogen,Cat.No.15070063)
L-色氨酸(Trp)(Sigma,Cat.No.T8941)
L-犬尿氨酸(Kyn)(Sigma,Cat.No.K8625)
N'-二甲酰犬尿氨酸(NFK)(J&K,Cat.No.F700490)
3-硝基-L-酪氨酸(J&K,Cat.No.N0905)
乙腈(Sigma,Cat.No.34851)
二甲基亚砜DMSO(Sigma,Cat.No.D8418)
抑制剂INCB024360(Selleckchem,Cat.No.S7910)
抑制剂INCB024360-analog(MedKoo,Cat.No.205493)
抑制剂NLG919(Selleckchem,Cat.No.S7111)
96孔透明平底聚苯乙烯细胞培养板(Corning,Cat#3599)
96孔V型底聚丙烯板(PE,Cat#6008290)
96孔U型底聚丙烯板(PE,Cat.No.6008390)
MultidropTM小管金属尖端的分配盒(Thermo,Cat.No.24073295)
MultidropTM标准管金属尖端的分配盒(Thermo,Cat.No.24072670)
自动加液工作平台(Agilent)
MultidropTMCombi自动分液器(Thermo)
离心机(Eppendorf)
细胞培养箱(Thermo)
细胞计数仪(Thermo)
RapidFire质谱系统(Agilent)
2)化合物测试实验方法：
用DMSO将化合物配置成浓度3mM，然后取15μL化合物加入到96孔板中，以3倍连续稀释化合物共10个点。转移2μL化合物或DMSO(用于HPE/ZPE)到一个新的96孔板中。HeLa细胞悬液以10000个细胞/孔的密度接种到细胞培养板。用于检测的细胞培养基为：HPE对照孔为DMEM；10％FBS；1％P/S；122μM Trp；ZPE对照孔及化合物孔为DMEM；10％FBS；1％P/S；122μM Trp；25ng/ml IFNγ。加入192μL上述准备的检测培养基到一个96孔板中。化合物板中加入78μL DMEM培养基并充分混匀，然后转移8μLDMEM培养基稀释过的化合物到已经加入检测培养基的96孔板。取出细胞培养板并弃去其中的细胞培养基，然后转移100μL上述化合物到细胞培养板中，将细胞培养板转入细胞培养箱中继续培养48小时。检测时取出细胞培养板，并转出50μL上清液到一新的96孔板，加入200μL乙腈到上述板中并充分混匀，4℃离心20分钟(转速4000rpm)，转移40μL上清液到另一96孔板中，再加入360μL含有2μg/ml内参(3-硝基-L-酪氨酸)的去离子水，充分混匀后用RapidFire/MS系统对样品进行检测。将L-色氨酸(Trp)和L-犬尿氨酸(Kyn)的标准品溶解于水中配置浓度为10mM，并进行三倍稀释配制标准曲线。所得数据计算出抑制率用Graphpad Prism5软件进行处理得到其IC50曲线。
3)结果：
本发明化合物对HeLa细胞内IDO蛋白酶抑制活性通过以上的试验进行测定，测得的IC50值见表2。
表2.本发明中化合物对HeLa细胞内IDO蛋白酶抑制活性
化合物编号 IC<sub>50</sub>(nM)
3 16
83 7.6
结果显示本发明中化合物对HeLa细胞内IDO蛋白酶有显著抑制活性。可以用于制备IDO抑制剂类药物，也可以用于制备预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物。
试验例3：本发明化合物的肝微粒体代谢稳定性实验
第一步：母溶液按以下表3的成分比列配制：
表3.母溶液的配制
试剂 浓度 体积 最后浓度
磷酸盐缓冲液 200mM 200μL 100mM
高纯水 - 106μL -
MgCl<sub>2</sub>溶液 50mM 40μL 5mM
第二步：两个实验分别进行如下：
A)加NADPH：10μL 20mg/mL浓度的肝微粒体和40μL 10mM浓度的NADPH加入孵化试验中。肝微粒体和NADPH的最终浓度为0.5mg/mL和1mM。
B)不加NADPH：10μL 20mg/mL浓度的肝微粒体和40μL高纯水加入孵化试验中。肝微粒体的最终浓度为0.5mg/mL。
第三步：加入4μL的200μM浓度的阳性对照物或者测试化合物后反应开始。本实验中的阳性对照物为Verapamil。测试化合物的最终浓度为2μM。
第四步：在0,15,30,45和60分钟的时间点由反应溶液中各取出50μL。往反应液中加入4倍体积的乙腈和IS(100nM浓度的alprazolam,200nM浓度的labetalol,200nM浓度的caffeine和2μM浓度的ketoprofen)。样品在3，220克重力下离心40分钟。上层清夜100μL中加入100μL高纯水用LC-MS/MS分析。
第五步：数据分析：从提取的离子色谱图确定峰面积。斜率值k通过母体药物的剩余百分比与孵育时间曲线的自然对数的线性回归来确定。
体外半衰期(体外t1/2)由斜率值确定：in vitro t1/2＝-(0.693/k)
体外内在清除率(in vitro CLint，以μL/min/mg为单位)使用以下等式(重复测定的平均值)由体外半衰期t1/2(分钟)换算：
放大内在清除率(Scale up CLint，以mL/min/kg为单位)通过使用以下式(重复测定的平均值)由体外t1/2(分钟)换算：
小鼠，大鼠和人肝微粒体代谢稳定性实验结果见表4。
表4小鼠，大鼠和人肝微粒体代谢稳定性实验结果
INCB024360是美国Incyte公司开发的IDO抑制剂，目前已经进入临床III期。表4中的数据显示本发明的化合物在人肝微粒体中的代谢稳定性比参照化合物INCB024360有显著提高，预示了本发明化合物有很大可能可以有更好的临床药代动力学。
综上，本发明制备的化合物对IDO蛋白酶具有明显的抑制作用，且在体内代谢稳定。本发明的化合物或其药物组合物可以用于制备IDO抑制剂类药物，也可以用于制备预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物。

Claims (13)

1.式(I)所示的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体，或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体：
其中，X为氨基、氧、硫；Y为氨基、氧；
R1为氢、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基、-(CH2)mCOR5、-(CH2)mSO2R6、-(CH2)m(CO)2R7；m选自0～5的整数；
R5、R6、R7分别独立地选自卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、-NR8R9、-OR8；
R8、R9分别独立地选自氢、卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基；或者R8、R9连接成环；
R、R2分别独立地选自氢、羟基、卤素、C1-C5烷基；
R3、R4分别独立地选自氢、卤素、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基；
其中，氢包括氢元素(H)和同位素氘(D)；
a＝0～2的整数；b＝0～2的整数；c＝0～5的整数；d＝0～5的整数；a和b不同时为0，且a+b不大于2；c和d不同时为0。
2.根据权利要求1所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体，其特征在于：所述化合物具有如式(Ⅱ)或式(Ⅲ)所示的结构：
其中，R5、R6分别独立地选自卤素、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、-NR8R9、-OR8；
R8、R9分别独立地选自氢、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C1-C8烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基。
3.根据权利要求1所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体，其特征在于：a＝0时，所述化合物具有如式(Ⅳ)所示的结构；b＝0时，所述化合物具有如式(V)所示的结构：
4.根据权利要求3所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体，其特征在于：a＝0,b＝1时，或者a＝1,b＝0时，所述化合物具有如式(VI)所示的结构：
5.根据权利要求1所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体，其特征在于：a＝1，b＝1时，所述化合物具有如式(VII)所示的结构：
6.根据权利要求1所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体，其特征在于：所述化合物为如下化合物之一：
7.权利要求1～6任一项所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体在制备IDO抑制剂类药物中的用途。
8.权利要求1～6任一项所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体在制备用于预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病选自癌症、骨髓增生异常综合征、阿尔茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍和艾滋病；其中所述的癌症优选乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、IV期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤。
10.一种药物组合物，其特征在于：它是以权利要求1～6任一项所述的化合物、或其光学异构体、或其顺反异构体、或其溶剂合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药物、或其互变异构体、或其内消旋体、或其外消旋体、或其对映异构体、或其非对映异构体、或其混合物形式、或其代谢产物、或其代谢前体为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
11.权利要求10所述的药物组合物在制备IDO抑制剂类药物中的用途。
12.权利要求10所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药物中的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于：所述具有IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病选自癌症、骨髓增生异常综合征、阿尔茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁症、焦虑症、白内障、心理障碍和艾滋病；其中所述的癌症优选乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、脑癌、皮肤癌、口腔癌、前列腺癌、骨癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、IV期黑色素瘤、实体瘤、神经胶质瘤、神经胶母细胞瘤、肝细胞癌、乳突肾性瘤。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113816858A (zh) * 2021-11-02 2021-12-21 四川汇宇制药股份有限公司 一种反式-1,2-二氨甲基环丁烷及其盐酸盐的制备方法
CN114573575A (zh) * 2020-04-28 2022-06-03 江南大学 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106967005A (zh) * 2017-04-07 2017-07-21 钟燕 一种能抑制ido的化合物、其制备方法及其用途
CN109111438A (zh) * 2017-06-26 2019-01-01 正大天晴药业集团股份有限公司 用于ido抑制剂的脒类化合物
CN109574950A (zh) * 2017-09-28 2019-04-05 上海翔锦生物科技有限公司 1,2,5-噁二唑类衍生物及其用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106967005A (zh) * 2017-04-07 2017-07-21 钟燕 一种能抑制ido的化合物、其制备方法及其用途
CN109111438A (zh) * 2017-06-26 2019-01-01 正大天晴药业集团股份有限公司 用于ido抑制剂的脒类化合物
CN109574950A (zh) * 2017-09-28 2019-04-05 上海翔锦生物科技有限公司 1,2,5-噁二唑类衍生物及其用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALICE COLETTI ET AL.: "Advances in indoleamine 2,3-dioxygenase 1 medicinal chemistry", 《MED. CHEM. COMMUN.》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114573575A (zh) * 2020-04-28 2022-06-03 江南大学 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途
CN114605401A (zh) * 2020-04-28 2022-06-10 江南大学 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途
CN114573575B (zh) * 2020-04-28 2023-08-04 江南大学 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途
CN114605401B (zh) * 2020-04-28 2023-08-22 江南大学 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途
CN113816858A (zh) * 2021-11-02 2021-12-21 四川汇宇制药股份有限公司 一种反式-1,2-二氨甲基环丁烷及其盐酸盐的制备方法

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