CN109957517B - 一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用 - Google Patents

一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)，菌株号为XK‑12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCC No.17198。本发明还公开了上述阿斯青霉菌的应用。本发明菌株具有耐高温、耐盐碱、产纤维素酶、促进铁吸收和溶磷等优异性能，可应用于贫瘠、盐碱地和石灰性土壤修复，秸秆腐熟和堆肥菌剂接种等。本发明的P.asturianumXK‑12菌株产孢量多、高效且具有广谱植物病害生防能力、能促进植物生长并适于工业化生产。

Description

一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用
技术领域
本发明涉及微生物菌剂领域，具体涉及一种P.asturianum及其菌剂和应用。
背景技术
P.asturianumXK-12属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)。该菌株生物安全风险等级为1级，且拥有耐盐碱，高溶磷，高产纤维素酶腐熟秸秆，对广谱植物病害有显著拮抗效果等优异特性，在盐碱地和石灰性土壤改良，秸秆腐熟作为有机肥原位还田，微生物抗病菌剂及其代谢物在生物农药等方面应用前景广阔。该菌株产孢量高，边生长边产孢，固态发酵和液体发酵产菌水平高，且工艺简单，适合工业化生产，对充分发挥微生物菌剂的生物防治、土壤生态肥力及保持农业生态环境的平衡等具有极其重要意义和应用价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种阿斯青霉菌以解决植物病害、盐渍化和石灰性土壤等问题。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)，属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)，缩写为P.asturianum，菌株号为XK-12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCC No.17198。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所保藏中心，邮编100101。
该菌株是发明人于2018年5月23日从呼伦贝尔草原选育的菌株。
P.asturianum XK-12具有下述性质：
1、菌落形态学特征
在PDA培养基28℃培养5天后，菌落为紧紧互相编制的近球形，菌病直径长5.0-8.0cm。属于属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)。在上述培养基中28℃培养，第二天开始形成孢子，菌落呈蓝绿色，圆形，表面光滑，疏水。其生长的温度范围是7-70℃，最适温度为25-35℃，生长的pH范围是4.0-11，最适pH为6.5-7.5。能在PDA、PSA、PDB、CZA、YDA、CMA、CDA、YMG、NA、YpSs、查氏等培养基中正常生长。
2、保守序列分析
ITS序列长度534bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.1；β-tubulin序列长度667bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.2；translation elongation factor 1-alpha序列长度585bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.3。将ITS序列、β-tubulin序列和translation elongation factor 1-alpha序列分别与GenBank/EMBL/DDBJ等数据库中的相关种进行比较，构建系统发育树。结果表明：菌株XK-12与Penicillium asturianum达到99％同源。所以认定本发明的菌株为Penicillium asturianum，命名为P.asturianumXK-12。
所述P.asturianumXK-12可以分生孢子、厚垣孢子、菌丝或含有分生孢子和菌丝的菌丝体的形式存在。
所述P.asturianumXK-12适用的液体发酵培养基配方如下：碳源10-100g/L，氮源1-30g/L，无机盐0.01-50g/L，pH5.0-9.0，所述溶剂为水。
所述碳源为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、木糖、果糖、乳酸、柠檬酸、甘油、淀粉和糖蜜中的任意一种几种的组合，优选为葡萄糖、乳糖、木糖、柠檬酸和淀粉中的任意一种或几种的组合；所述氮源为土豆浸出液、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉、棉籽饼粉、尿素、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4和NH4NO3中的任意一种或几种的组合，优选为蛋白胨、土豆浸出液、酵母膏、玉米浆、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4和NH4NO3中的任意一种或几种的组合；所述无机盐为硫酸盐、磷酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢二盐和盐酸盐中的任意一种或几种的组合。
所述固体发酵培养基配方如下的稻草30％-70％，15％-45％的麦麸，10％-25％玉米秸秆，0.5-5％的玉米面，0.5-5％的黄豆粉和0.5-2％的(NH4)2SO4等的一种或者几种，加入自来水至湿度为100％-500％，搅匀后装入聚丙烯菌袋或浅盘，使用透气性盖子封口，然后于121℃灭菌20min，获得灭菌后的发酵料；
优选为50％稻草，45％麦麸，4.5％黄豆粉和0.5％(NH4)2SO4,加入自然税湿度为300％，搅匀后装入长40cm*宽20cm聚丙烯菌袋，150g/袋，于121℃灭菌20min，接种P.asturianum 5mL 107CFU/ml,在温度为25～32℃，相对湿度为60％～80％的条件下培养15天，获得6*109CFU/g P.asturianum孢子。
所述阿斯青霉菌耐受20wt％NaCl以下(如5wt％、10wt％、20wt％)NaCl盐引起的盐胁迫。
所述阿斯青霉菌耐受pH 11以下(如pH9、pH10、pH11)的碱胁迫。
一种阿斯青霉菌剂，包含上述阿斯青霉菌，可应用于微生物肥料或者生物农药。
其中，所述的菌剂包括聚赖氨酸、甲霜灵、多菌灵、吡唑醚菌酯、咪鲜胺、春雷霉素、链霉素中的任意一种或几种的组合。
本发明更进一步提供所述菌剂的制备方法，步骤如下：将所述骆驼刺泛菌接种于上述PDA培养基中25～32℃活化12-24h，将活化的P.asturianum转接于上述液体或固体发酵培养基中，30-35℃培养5-15天得到发酵液，发酵液或发酵物后处理得到的体系即为菌剂，即所述分生孢子、厚垣孢子、菌丝或含有分生孢子和菌丝的菌丝体制备得到的悬浮液。
所述菌剂的剂型为溶液、悬浮液、颗粒剂、粉剂或棒剂，所述菌剂中菌体浓度为1×105-9×109CFU/g。
本发明菌剂通过灌根或喷施处理，菌剂可与有机肥混合使用，也可以单独使用，改善根际微生物环境，促进植物生长，增强植物抗干旱能力，减少化肥使用量。
上述阿斯青霉菌或上述阿斯青霉菌剂在防治植物病害中的应用也在本发明保护范围之内。P.asturianum XK-12不仅能有效抑制病菌的生长，并且能刺激植物生长和诱导植物防御反应，改善根系的微环境，增强植物的长势和抗病能力，提高作物的产量和收益。
其中，所述的植物为果蔬植物，例如草莓、黄瓜、梨树、苹果树等，所述的病害包括但不限于茄形镰刀菌(Fusarium solani)、旋柄腐霉(Pythium helicoides)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioide)、或丝核菌(Ceratobasidium sp.)引起的真菌病害。
P.asturianum XK-12可与赖氨酸、甲霜灵、多菌灵、嘧菌酯、醚菌酯、吡唑醚菌酯、肟菌酯、啶氧菌酯、苯氧菌胺等中的一种或几种，组合成一种高效杀菌组合物，可通过复配的方式减少作物对杀菌剂的抗性，并达到延长药效的作用。
优选地，当2.5％甲霜灵、0.02％聚赖氨酸与1.0亿CFU/克P.asturianum可湿性粉剂复配时，杀菌效果最好。
上述阿斯青霉菌或上述阿斯青霉菌剂在促进作物生长中的应用也在本发明的保护范围之内，P.asturianum XK-12可分泌吲哚乙酸等，并具有溶解无机磷和有机磷等作用。
其中，所述的作物包括但不限于草莓、葡萄、甜瓜、烟叶、小麦或水稻。
所述P.asturianum XK-12不仅能有效抑制病菌的生长，并且能刺激植物生长和诱导植物防御反应，改善根系的微环境，增强植物的长势和抗病能力，提高作物的产量和收益。
上述P.asturianum XK-12可与有机肥混合使用，也可以单独使用，改善根际微生物环境，促进植物生长，增强植物抗干旱能力，减少化肥使用量。
上述阿斯青霉菌或上述阿斯青霉菌剂在土壤修复中的应用也在本发明的保护范围之内。上述阿斯青霉菌可耐盐、促进铁吸收等作用，从而对盐渍化和石灰性土壤有明显的改善。
上述阿斯青霉菌或上述阿斯青霉菌剂在秸秆腐熟和堆肥中的应用也在本发明的保护范围之内。由于P.asturianum XK-12高产纤维素酶，可作为堆肥接种菌种接种于堆肥中，使得秸秆、木薯渣等废弃物腐熟为有机肥料，实现肥料原位还田，减少废弃物处理带来的环境面源污染。工艺简单可行，适合规模化推广。
有益效果：本发明与现有技术相比具有如下优势：
(1)本发明从土壤中筛选出具有增强植物对真菌病害免疫力的P.asturianumXK-12，并以P.asturianumXK-12为菌种通过液体或固体发酵培养制备得到P.asturianumXK-12菌剂，可用作生物肥料或生物农药，并于现有的生物农药形成良好的复配，改善化学农药带来的抗性。P.asturianumXK-12可耐受20％NaCl盐胁迫pH11的碱胁迫，兼具了较好的抗生物和非生物胁迫功能。P.asturianumXK-12可耐重金属胁迫，并具有重金属吸附作用，可应用土壤或废水的重金属处理，而且P.asturianumXK-12可促进石灰性土壤中作物的铁吸收、盐碱地的土壤改善等，具有良好的作物根系菌群改善作用，而且高产纤维素酶对充分发挥土壤生态肥力、保持农业生态环境的平衡等具有极其重要意义和应用价值。
(2)本发明提供的P.asturianumXK-12菌剂不存在生产过程中向环境排放污染物，P.asturianumXK-12是一种真正意义上的环保型肥料和农药；且本发明提供的P.asturianumXK-12菌剂的制备方法，生产工艺简单，生产效率高，能实现工业化大生产，具有良好的经济效应和社会效应。
附图说明
图1，P.asturianumXK-12的菌落形态，左图为培养皿正面，右图为培养皿背面。
图2，P.asturianumXK-12系统发育树。
图3，P.asturianumXK-12生物特性。其中，无机磷培养基A、有机磷培养基B、纤维素刚果红培养基C、pH8 PDA培养基D、pH9 PDA培养基E、pH10 PDA培养基F、pH11 PDA培养基G、含5％NaCl的PDA培养基H、含10％NaCl的PDA培养基I、含20％NaCl的PDA培养基J。
图4，P.asturianum XK-12对致病真菌的拮抗作用。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1：P.asturianumXK-12的筛选和鉴定
P.asturianumXK-12是发明人从草莓根际土壤选育(以尖孢镰刀菌拮抗效果和抗盐胁迫为标准)的菌株，筛选过程如下：
将采集的土样溶于无菌水中，震荡、混匀。将样品溶液进行梯度稀释，取10-4、10-5、10-6三个浓度梯度的稀释液在含有20％NaCl的PDA培养基(培养基成分：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，氯化钠100g蒸馏水1000mL)上均匀涂布。置于28℃恒温培养箱中培养3-5天，长出的少部分菌落转接至空白PDA平板边缘，中间放置尖孢镰刀菌作为指示菌，观察菌落特征，以拮抗效果作为筛选目标。从中挑取能够对尖孢镰刀菌产生优良拮抗效果的的单菌落在固体培养基平板上采用连续转接法纯化，直至培养出形态单一的单菌落。
P.asturianumXK-12具有下述性质：
1、菌落形态学特征
在PDA培养基28℃培养5天后，获得一个5-6cm不规则典型的薄菌饼，菌落呈墨绿色，表面绒松(如图1)。其生长的温度范围是7-48℃，最适温度为20-32℃，生长的pH范围是5.0-11，最适pH为8.5-10.0。
2、ITS序列分析
ITS序列长度534bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.1；β-tubulin序列长度667bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.2；translation elongation factor 1-alpha序列长度585bp，核苷酸序列见SEQ ID NO.3。因ITS序列无法确定菌属，对保守蛋白β-tubulin和translationelongation factor 1-alpha序列进行钓取，与GenBank/EMBL/DDBJ等数据库中的相关种进行比较，结合ITS、β-tubulin和translation elongation factor 1-alpha序列分析，构建菌株系统发育树(如图2)。结果表明：菌株XK-12与Penicillium asturianum达到99％同源。所以认定本发明的菌株为Penicillium asturianum，命名为P.asturianumXK-12。
实施例2：P.asturianumXK-12菌株生物特性
将4℃斜面保存的P.asturianumXK-12活化，接种于PDA培养基(即活化培养基)上，活化温度为28℃，活化时间为2天。利用0.8cm打孔器转接新鲜菌饼至空无机磷培养基A、有机磷培养基B、纤维素刚果红培养基C、pH8-11 PDA培养基(D-G)及含5％-20％NaCl的PDA培养基(H-J)于28℃培养5天观察菌落形态。
无机磷培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，
MgSO4·7H2O 0.3g，CO3(PO4)2 10g，FeSO4·7H2O 0.03g，MnSO4·4H2O0.03g，蒸馏水1000mL，pH 7.0～7.5；
有机磷培养基：葡萄糖10.0g，硫酸铵0.5g，酵母浸粉0.5g，氯化钠0.3g，氯化钾0.3g，硫酸镁0.3g，硫酸亚铁0.03g，硫酸锰0.03g，卵磷脂0.2g，碳酸钙1.0g，琼脂15.0g，pH值7.0-7.5
纤维素刚果红培养基：硝酸钠1.0g，磷酸氢二钠1.2g，磷酸二氢钾0.9g，硫酸镁0.5g，氯化钾0.5g，酵母浸出粉0.5g，酸水解酪蛋白0.5g，刚果红，0.2g纤维素粉，5.0g琼脂15.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0±0.1；
pH7-11 PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，用1M NaOH调节培养基pH值至7-11；
含5％-20％NaCl的PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，氯化钠100g蒸馏水1000mL，添加5％-20％NaCl
如图3所示，P.asturianumXK-12可有效的溶解无机磷(A)和有机磷(B)，高产纤维素酶(C)，并耐受pH11碱胁迫(G)和20％NaCl盐胁迫(J)，结果表明P.asturianumXK-12是一株性能优异的菌株，可适用于盐碱地改良，且应用在农业生产中可提高磷肥利用效率，节约生产成本，保护微生态环境，从而有利于农业可持续发展。
实施例3：P.asturianumXK-12对真菌病害致病菌的平板对峙实验
将P.asturianumXK-12和6种致病真菌(Colletotrichum gloeosporioide,Neofusicoccum kwambonambiense,Fusarium oxysporun,Pythium helicoides,Ceratobasidium sp.AG-A和Fusarium solani)同时接种到PDA上，于28℃培养三天，对照组均已长满整个平板，拮抗效果如图4所示，其中对Neofusicoccum kwambonambiense的抑制率达到95％，对Ceratobasidium sp.AG-A拮抗效果达到45％，实验证明该菌株具有较广谱的抗病效果。
菌丝生长抑制率(％)＝(空白对照菌落增长直径-处理菌落增长直径)/空白对照菌落增长直径×100
实施例4：P.asturianumXK-12对作物病害防治盆栽实验
为了验证本发明的P.asturianumXK-12菌株的防病效果，申请人选择36盆长势均匀的草莓植株进行防病效果实验，设置每组6个平行，供试草莓品种：红颜。处理组先用每周用10毫升P.asturianumXK-12菌株104-108各浓度孢子悬浮液分别喷施和灌根，空白组用相同量的蒸馏水处理，第三周用Fusarium oxysporun 105/mL孢子悬浮液侵染草莓植株，光照14h，昼夜温度分别为25℃和20℃，湿度65％。
根据以下草莓根腐病的分级标准调查各个处理草莓根腐病的病情，计算病情指数。
式中Z、X及N分别表示病情级数、各病级株数及调查样本总根段数；10为最高病级
表1 P.asturianumXK-12对草莓根腐病的生物防治
试验结果见表1，本发明的P.asturianumXK-12菌剂在移栽时处理草莓植株，P.asturianumXK-12孢子浓度在105CFU/mL以上均能达到防效80％以上，综合考虑建议使用P.asturianumXK-12的105CFU/mL，且对草莓根腐病的平均防治效果达到了86.3％。
实施例5：P.asturianum XK-12在农药中的应用
依据甲霜灵与P.asturianum XK-12的重量比为15:2时，组合物具有增效作用，按量称取，98％甲霜灵7.65g，300亿CFU/g P.asturianum XK-12菌粉1g，木质磺酸钠12g，十二烷基硫酸钠7.5g，白炭黑15g，硅藻土补足至300克。将以上各成分按配方的比例充分混合，经超细粉碎机粉碎后，即得2.5％甲霜灵1.0亿cfu/g P.asturianum XK-12可湿性粉剂。
该实施例应用于田间草莓根腐病的防治。将2.5％甲霜灵·1.0亿cfu/gP.asturianum XK-12可湿性粉剂，加水稀释1500倍进行均匀喷雾，每隔5天施药1次，连续施药3次，最后1次施药后第3天的防效为92％。采用5％甲霜灵水剂稀释500倍、2.5％甲霜灵1.0亿cfu/g P.asturianum XK-12可湿性粉剂稀释500倍以同样方法使用，单独使用甲霜灵的防效为47％，2.5％甲霜灵1.0亿cfu/g P.asturianum XK-12可湿性粉剂73％。甲霜灵与P.asturianum XK-12菌复配后增效作用明显，既减少有效成分的使用量，又表现出了优于单剂的田间效果。
实施例6：P.asturianum XK-12菌剂对促进小麦增产的作用
P.asturianum XK-12菌剂制备：将平板法上培养的孢子按1∶500的比例与米糠或麦麸混匀施入植物的根围，或者将半液体半固体法培养的菌制剂直接施入根围，也可以1∶20比例与泥炭混合，接种体量针对不同对象和作物而异。
以小麦为研究对象，开展小区实验。实验设置3种处理方式，每个处理方式设3次重复，共计9个小区，小区面积为5m×4m＝20m2，各小区随机分布。
处理1(T1)不加菌剂处理，即为空白组；
处理2(T2)施加P.asturianum XK-12菌剂(16kg/hm2)；
处理3(T3)施加灭活菌剂(16kg/hm2，由实施例1制备的菌剂经高压高温灭活)。
三种处理的其他常规肥料施用量及日常管理均保持一致。在小麦成熟期检测小麦产量等各项指标，实验结果见表2。
表2不同处理条件下小麦的生长状况
结果表明，在小麦实验中，P.asturianum XK-12明显促进了小麦的生长，产量提高了32.4％，而当P.asturianum XK-12灭活后，产量与对照组几乎相同。这说明，P.asturianum XK-12可以显著提高农作物产量。
实施例7：P.asturianum XK-12可以促进石灰性土壤中小麦的铁吸收
以小麦为实验对象，开展石灰性土壤(硅砂和碳酸钙1:1混合)盆栽实验。350g装入透气组培瓶中，并将发芽12天的麦芽移入组培瓶，每周浇水10mL，并于气候箱(14h光照，60％湿度，昼夜25℃/20℃)中培养28天，每组添加铁浓度为15mg/kg基质，实验结果见表3，试验设2种处理方式：
处理1(T1)不接种P.asturianumXK-12，缺铁Hogland营养液25mL
处理2(T2)接种P.asturianumXK-12(10mL105CFU/mL孢子悬浮液)，缺铁Hogland营养液25mL
表3小麦组培实验中不同处理条件下的生长状况(干重)
在小麦的组培实验中，在石灰石与石英砂等比例模拟的石灰性土壤中，在缺铁的情况下，接种P.asturianumXK-12根、地上部分干重均有明显的提升，能显著促进植物铁的吸收。说明P.asturianumXK-12不仅能促进农作物生长，在促进作物对铁元素的吸收能力上有非常显著的优异表现。
实施例8：P.asturianum XK-12可显著提高草莓的品质
以草莓为实验对象，开展大田实验。实验设置3种处理方式，每个处理方式设3次重复：
处理1(T1)为不施加菌剂；
处理2(T2)施加实施例6制备的菌剂(24kg/hm2)；
处理3(T3)施加实施例6制备的灭活菌剂(24kg/hm2)。
三个处理方式的其他常规肥料施用量及日常管理均保持一致，在草莓收获期检测与草莓品质相关的各项指标，实验结果见表4。
表4 P.asturianum XK-12对草莓Vc和硝酸盐含量的影响
与处理1相比，P.asturianum XK-12可以提高Vc含量38.7％，降低硝酸盐含量18.2％。当将菌剂灭活后，Vc含量和硝酸盐含量均与处理1类似。这说明，P.asturianum XK-12能显著提高农作物的品质。
实施例9：P.asturianum XK-12可以吸附重金属及其在土壤改良中的应用
准确量取50mL浓度分别为100mg/L Pb2+、100mg/L Mn2+、100mg/L Cd2+和100mg/LHg2+的重金属离子溶液，用0.1mol/L的NaOH或HCl调节pH 7，分别加入P.asturianum XK-12菌孢子50mg，然后在30℃的恒温震荡培养箱中以120r/min震荡12h，每组设定三个平行，每15min取样，利用火焰原子吸收分光光度计测定吸附率。
菌剂对Pb2+、Mn2+、Cd2+和Hg2+的吸附非常迅速，吸附过程均分为快速吸附阶段和慢速吸附阶段，前30min内属于快速吸附阶段，菌剂对不同重金属的吸附能力各不相同，其中对Pb2+和Cd2+的吸附量在84％、95％以上，且前2hP.asturianum XK-12对对各金属的吸附已基本达到平衡。
实施例10：P.asturianum XK-12作为腐熟剂及其在堆肥生产中的应用
考察了P.asturianum XK-12菌添加至20％-50％糖蜜液(孢子终浓度105CFU/mL)中作为秸秆腐熟剂在秸秆直接还田和堆腐还田两种用法上的应用。
秸秆直接还田：使用秸秆还田机将作物秸秆粉碎均匀分散于田间，将秸秆腐熟剂均匀喷施(或撒施在秸秆表面)，然后使用土壤旋耕机将秸秆翻入地下，深度在20厘米左右，使大部分秸秆埋入土中，每亩地的腐熟剂用量为2.0-4.0kg，在土壤相对湿度50-60％条件下15-25天即可腐熟。
堆腐还田：将秸秆用粉碎，长度小于3-5cm，进行泼水叠兑，每层15-20cm，约十层为一堆层施加秸秆腐熟剂，秸秆含水量在60％左右为宜。每吨秸秆使用腐熟剂2-4kg,可实现20天内快速腐熟。
序列表
<110> 南京工业大学
<120> 一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 534
<212> DNA
<213> 阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)
<400> 1
ggtgaacctg cggaaggatc attaccgagt gagggccctc tgggtccaac ctcccacccg 60
tgtttatcgt accttgttgc ttcggcgggc ccgcctcacg gccgccgggg ggcatccgcc 120
cccgggcccg cgcccgccga agacacacaa acgaactctt gtctgaagat tgcagtctga 180
gtacttgact aaatcagtta aaactttcaa caacggatct cttggttccg gcatcgatga 240
agaacgcagc gaaatgcgat aagtaatgtg aattgcagaa ttcagtgaat catcgagtct 300
ttgaacgcac attgcgcccc ctggtattcc ggggggcatg cctgtccgag cgtcattgct 360
gccctcaagc acggcttgtg tgttgggctc tcgccccccg cttccggggg gcgggcccga 420
aaggcagcgg cggcaccgcg tccggtcctc gagcgtatgg ggcttcgtca cccgctctgt 480
aggcccggcc ggcgcccgcc ggcgaacacc atcaatctta accaggtgac ctcg 534
<210> 2
<211> 667
<212> DNA
<213> 阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)
<400> 2
agcttgtgct aatcttctct tttcgactat ctttacagga tcaccttcag actggccagt 60
gtgtaagtca cattcaaaaa ccacgtggag aataggtcag atgttggaat atgatggttt 120
tgactgaacg gaattccggg gtgtagggta accaaattgg tgccgctttc tggtacgtgc 180
cacgcctccc tgggatatcc cgagcacaac acgacaattc cttgtgtcgt gattcgatct 240
aatatgagaa ccaaactgac tcgatattca ggcaaaccat tgctggtgag cacggccttg 300
acggcgatgg ccagtaagtc aacagcttgc ccccccccca cgatgggatc ctgacgacag 360
agaatggcgg tctgatattt ttcggtttag ctacaatggt tcctccgacc tccagctgga 420
gcgcatgaac gtctacttca cccacgtaag tcgtgaaaaa cgtcttccca atcaaagaaa 480
tctcccaaac ctgatcattg aaacgttcga ttttccaggc tagcggtgac aagtatgttc 540
cccgtgccgt tctcgtcgac ctggagcccg gtaccatgga cgctgtccgt gccggtccct 600
ttggcaagct cttccgcccc gacaacttcg tctttggcca gtctggtgct ggtaacaact 660
gggccaa 667
<210> 3
<211> 585
<212> DNA
<213> 阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)
<400> 3
cgaggatttt gcggtggtat cgacaatcgt accatcgaga agttcgagaa ggaagccgcc 60
gagctcggca agggttcctt caagtacgcc tgggttcttg acaagctgaa ggctgagcgt 120
gagcgtggta tcaccatcga tatcgctctc tggaagttcc agaccgccaa gtatgaggtc 180
accgtcattg gtatgtctta tctgttaccc cttccacccg tctgcccatc gactaacgtt 240
ctctccagac gcccccggtc accgtgactt catcaagaac atgatcactg gtacctccca 300
ggccgattgc gctatcctca tcattgcctc cggtactggt gagttcgagg ctggtatctc 360
caaggatggc cagacccgtg agcacgctct gcttgccttc accctcggtg tccgccagct 420
catcgtcgcc ctgaacaaga tggacacttg caagtggtcc gaggaccgtt acaacgagat 480
tgtcaaggag acctccaact tcatcaagaa ggttggctac aaccccaaga gcgtcccctt 540
cgtccccatc tccggcttca acggcgacaa catgctaaag gctcg 585

Claims (9)

1.一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)，菌株号为XK-12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCC No.17198。
2.根据权利要求1所述的阿斯青霉菌，其特征在于，所述阿斯青霉菌耐受20wt％NaCl以下NaCl盐引起的盐胁迫和耐受pH 11以下的碱胁迫。
3.一种阿斯青霉菌剂，其特征在于，包含权利要求1所述的阿斯青霉菌。
4.根据权利要求3所述的阿斯青霉菌剂，其特征在于，所述的菌剂包括甲霜灵。
5.权利要求1-2中任意一项所述的阿斯青霉菌或权利要求3-4中任意一项所述的阿斯青霉菌剂在防治植物病害中的应用；所述的植物为果蔬植物，所述的病害为茄形镰刀菌(Fusarium solani)、旋柄腐霉(Pythium helicoides)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioide)、或丝核菌(Ceratobasidium sp.)引起的真菌病害。
6.权利要求1-2中任意一项所述的阿斯青霉菌或权利要求3-4中任意一项所述的阿斯青霉菌剂在促进作物生长中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的作物为草莓、葡萄、甜瓜、烟叶、小麦或水稻。
8.权利要求1-2中任意一项所述的阿斯青霉菌或权利要求3-4中任意一项所述的阿斯青霉菌剂在土壤修复中的应用，其中，所述的应用为吸收土壤中的Pb2+、Mn2+、Cd2+和Hg2+。
9.权利要求1-2中任意一项所述的阿斯青霉菌或权利要求3-4中任意一项所述的阿斯青霉菌剂在秸秆腐熟和堆肥中的应用。
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