CN109932328A - 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法 - Google Patents

一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109932328A
CN109932328A CN201910239494.1A CN201910239494A CN109932328A CN 109932328 A CN109932328 A CN 109932328A CN 201910239494 A CN201910239494 A CN 201910239494A CN 109932328 A CN109932328 A CN 109932328A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acrylamide
instant coffee
added
solution
measuring method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910239494.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109932328B (zh
Inventor
张东霞
罗春阳
寇宰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xijing University
Original Assignee
Xijing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xijing University filed Critical Xijing University
Priority to CN201910239494.1A priority Critical patent/CN109932328B/zh
Publication of CN109932328A publication Critical patent/CN109932328A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109932328B publication Critical patent/CN109932328B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Abstract

一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，包括以下步骤；步骤一，选取丙烯酰胺测量其吸光度值；步骤二；不加丙烯酰胺测量其吸光度值；步骤三：实际样品的提取；步骤四：测定实际速溶咖啡样品中丙烯酰胺的含量；本发明研究了还原型谷胱甘肽易被氧化脱氢，丙烯酰胺和还原型谷胱甘肽发生亲核加成反应，在酸性条件下，以Fe3+‑邻菲罗啉为显色体系，还原型谷胱甘肽将Fe3+还原为Fe2+，Fe2+与邻菲罗啉发生显色反应，加入的丙烯酰胺与还原型谷胱甘肽发生反应，降低了还原型谷胱甘肽的浓度，阻抑体系还原生成Fe2+。

Description

一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法
技术领域
本发明涉及测定丙烯酰胺技术领域，特别涉及一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法。
背景技术
丙烯酰胺是一种在热加工食品过程中形成的一种致癌化学物质。速溶咖啡中丙烯酰胺含量不容忽视。广泛使用的检测丙烯酰胺的分析方法是气相色谱-质谱法(GC-MS)、液相色谱-质谱法(LC-MS)、气相色谱法、高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法。丙烯酰胺常规检测方法存在仪器昂贵、测试成本高、样品预处理过程复杂等问题。电化学测定法在低成本，灵敏度高等方面显示出优越性，近年来多有报道。然而传感器的重现性还是亟待解决的重要问题。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，研究了还原型谷胱甘肽易被氧化脱氢，丙烯酰胺和还原型谷胱甘肽发生亲核加成反应，在酸性条件下，以Fe3+-邻菲罗啉为显色体系，还原型谷胱甘肽将Fe3+还原为Fe2+，Fe2+与邻菲罗啉发生显色反应，加入的丙烯酰胺与还原型谷胱甘肽发生反应，降低了还原型谷胱甘肽的浓度，阻抑体系还原生成Fe2+。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，包括以下步骤；
步骤一，选取丙烯酰胺测量其吸光度值；
量取一定体积的丙烯酰胺标准溶液，依次加入还原型谷胱甘肽标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，转移至25mL容量瓶，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤二；不加丙烯酰胺测量其吸光度值；
另取一25mL容量瓶，依次加入还原型GSH标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤三：实际样品的提取；
称取速溶咖啡0.2g，然后用30ml热水将其溶解，将溶解后的速溶咖啡溶液转移至离心试管中，设置离心机转速4000r、离心时间30min，离心结束后取出上清液；
步骤四：测定实际速溶咖啡样品中丙烯酰胺的含量；
将1×105μg/L步骤一中的丙烯酰胺标准溶液逐级稀释浓度为1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L一系列溶液，取五个比色管各加入步骤三中的上清液2ml、5ml GSH(1×106μg/L)，分别加入1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L的丙烯酰胺溶液2ml，第五个比色管中为步骤二中的不加丙烯酰胺溶液，再分别加入0.9ml显色剂、5ml缓冲液，然后用水定容至25ml，经过加热和冷却后在510nm测定其吸光值，另取五个比色管加入2ml样品2的上清液，其他条件不变进行测定，参比溶液为5ml还原型谷胱甘肽、5ml HAc-NaAc缓冲溶液在比色管中用水定容至25ml得到的，然后与步骤一、二的吸光度值进行对比，得到数据。
所述的丙烯酰胺的吸收波长为510nm。
所述的HAc-NaAc缓冲液的pH为4.0，用量为5mL。
所述的还原型谷胱甘肽标准溶液的浓度为1×105μg/L，用量为4mL。
所述的显色剂的用量为0.9ml。
所述的丙烯酰胺标准溶液的配制为：
准确称取0.0100g丙烯酰胺，加入适量二次蒸馏水溶解，定容至100ml容量瓶，得到1×105μg/L丙烯酰胺标准溶液，使用前在4℃冰箱保存。
所述的显色剂的配制：分别准确称取0.0910g邻菲罗啉和0.2380g硫酸铁铵混合、加入适量二次蒸馏水溶解后，加入2mL1mol/L盐酸溶液，转移至100mL容量瓶，定容至刻度线。
本发明的有益效果：
建立了一种可靠、准确、简便、快速、经济的速溶咖啡中AAm的分析方法，可作为速溶咖啡中丙烯酰胺分析的一种新方法，在食品质量监测方面推广使用。
附图说明
图1为本发明吸收曲线图。
图2为本发明温度的影响图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步详细说明。
实施例：
步骤一，选取丙烯酰胺测量其吸光度值；
量取一定体积的丙烯酰胺标准溶液，依次加入还原型谷胱甘肽标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，转移至25mL容量瓶，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤二；不加丙烯酰胺测量其吸光度值；
另取一25mL容量瓶，依次加入还原型GSH标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤三：实际样品的提取；
称取速溶咖啡0.2g，然后用30ml热水将其溶解，将溶解后的速溶咖啡溶液转移至离心试管中，设置离心机转速4000r、离心时间30min，离心结束后取出上清液；
步骤四：测定实际速溶咖啡样品中丙烯酰胺的含量；
将1×105μg/L步骤一中的丙烯酰胺标准溶液逐级稀释浓度为1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L一系列溶液，取五个比色管各加入步骤三中样品1的上清液2ml、5mlGSH(1×106μg/L)，分别加入1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L的丙烯酰胺溶液2ml，第五个比色管中为步骤二中的不加丙烯酰胺溶液，再分别加入0.9ml显色剂、5ml缓冲液，然后用水定容至25ml，经过加热和冷却后在510nm测定其吸光值，另取五个比色管加入2ml样品2的上清液，其他条件不变进行测定，参比溶液为5ml还原型谷胱甘肽、5ml HAc-NaAc缓冲溶液在比色管中用水定容至25ml得到的。
(1)最佳吸收波长的确定
取一25mL容量瓶中，依次加入2ml AAm标准溶液、5ml还原型GSH标准溶液、0.9ml显色剂和5ml HAc-NaAc缓冲液(pH4.0)，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，为待测阻抑体系。另取一25mL容量瓶，依次加入5ml还原型GSH标准溶液、0.9ml显色剂和5ml HAc-NaAc缓冲液(pH4.0)，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，为待测非阻抑体系。按照实验方法，在450～530nm波长范围内测定吸光度，如附图1所示。1线为待测非阻抑体系吸光度；2线为待测非阻抑体系吸光度测定结果。加入AA后整体的吸光值都有所下降，在510nm处出现最大吸收峰。
(2)温度、反应时间的影响
研究了温度及反应时间对测定结果的影响。附图2a为未加显色剂的试剂空白，b为加入显色剂后生成邻菲罗啉-Fe2+有色配合物，此时测定其吸光度值不稳定，是由于Fe3+反应不完全。为加快反应速率，将待测样品体系于沸水浴中加热后，冷却至室温进行测定。加热后颜色加深，如图2c所示。吸光度值随着加热时间的增加而增加，加热6min后，吸光度值达到最大，并不再发生变化。本法确定反应条件为在沸水浴中加热6min。
(3)试剂用量的选择
沸水浴中反应6min条件不变，在25mL容量瓶中固定还原型GSH标准溶液体积5mL，加入一定体积的样品溶液，依次加入显色剂和缓冲液，稀释至刻度，按照实验方法测定。实验表明，显色剂和HAc-NaAc缓冲液(pH4.0)的用量在0.8～1.0mL，4.0～6.0mL范围内阻抑体系和非阻抑体系的△A相差较大。本法选择显色剂用量为0.9mL，HAc-NaAc缓冲液(pH4.0)5ml。
上述步骤一中加入的丙烯酰胺与还原型谷胱甘肽发生反应，降低了GSH的浓度，阻抑体系还原生成Fe2+。步骤一为阻抑体系测定吸光度值，步骤二未加丙烯酰胺，为非阻抑体系测定吸光度值。步骤一测得吸光度值比步骤二测得吸光度值小。依据朗伯比尔定律，Fe2+的浓度与吸光度值成正比，而丙烯酰胺定量的抑制还原生成Fe2+，从而得到丙烯酰胺的浓度与吸光度值成反比的关系。按照实验方法，配制不同浓度的丙烯酰胺。以丙烯酰胺的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在与标准溶液相同的测定条件下进行样品测定，由标准曲线求出丙烯酰胺的物质的量的浓度。

Claims (7)

1.一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，包括以下步骤；
步骤一，选取丙烯酰胺测量其吸光度值；
量取一定体积的丙烯酰胺标准溶液，依次加入还原型谷胱甘肽标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，转移至25mL容量瓶，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤二；不加丙烯酰胺测量其吸光度值；
另取一25mL容量瓶，依次加入还原型GSH标准溶液、显色剂和HAc-NaAc缓冲液，用二次蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，将容量瓶放入沸水浴中加热6min，流水冷却至室温，设定最佳波长，用1cm比色皿，以试剂空白为参比测定其吸光度值；
步骤三：实际样品的提取；
称取速溶咖啡0.2g，然后用30ml热水将其溶解，将溶解后的速溶咖啡溶液转移至离心试管中，设置离心机转速4000r、离心时间30min，离心结束后取出上清液；
步骤四：测定实际速溶咖啡样品中丙烯酰胺的含量；
将1×105μg/L步骤一中的丙烯酰胺标准溶液逐级稀释浓度为1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L一系列溶液，取五个比色管各加入步骤三中样品1的上清液2ml、5ml GSH(1×106μg/L)，分别加入1400μg/L、1200μg/L、900μg/L、100μg/L的丙烯酰胺溶液2ml，第五个比色管中为步骤二中的不加丙烯酰胺溶液，再分别加入0.9ml显色剂、5ml缓冲液，然后用水定容至25ml，经过加热和冷却后在510nm测定其吸光值，另取五个比色管加入2ml样品2的上清液，其他条件不变进行测定，参比溶液为5ml还原型谷胱甘肽、5ml HAc-NaAc缓冲溶液在比色管中用水定容至25ml得到的，然后与步骤一、二的吸光度值进行对比，得到数据。
2.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的丙烯酰胺的吸收波长为510nm。
3.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的HAc-NaAc缓冲液的pH为4.0，用量为5mL。
4.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的还原型谷胱甘肽标准溶液的浓度为1×105μg/L，用量为4mL。
5.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的显色剂的用量为0.9ml。
6.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的丙烯酰胺标准溶液的配制为：
准确称取0.0100g丙烯酰胺，加入适量二次蒸馏水溶解，定容至100ml容量瓶，得到1×105μg/L丙烯酰胺标准溶液，使用前在4℃冰箱保存。
7.根据权利要求1所述的一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法，其特征在于，所述的显色剂的配制：分别准确称取0.0910g邻菲罗啉和0.2380g硫酸铁铵混合、加入适量二次蒸馏水溶解后，加入2mL 1mol/L盐酸溶液，转移至100mL容量瓶，定容至刻度线。
CN201910239494.1A 2019-03-27 2019-03-27 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法 Active CN109932328B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910239494.1A CN109932328B (zh) 2019-03-27 2019-03-27 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910239494.1A CN109932328B (zh) 2019-03-27 2019-03-27 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109932328A true CN109932328A (zh) 2019-06-25
CN109932328B CN109932328B (zh) 2021-06-25

Family

ID=66988437

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910239494.1A Active CN109932328B (zh) 2019-03-27 2019-03-27 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109932328B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110261628A (zh) * 2019-07-08 2019-09-20 东华理工大学 一种吸附材料的在线吸附性能试验平台及其测试方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101171518A (zh) * 2005-05-12 2008-04-30 和光纯药工业株式会社 铁浓度测定方法
US20100261181A1 (en) * 2006-02-10 2010-10-14 Life Technologies Corporation Labeling and detection of nucleic acids
CN102830076A (zh) * 2012-09-21 2012-12-19 江苏南天农科化工有限公司 一种工业丙烯酰胺中对羟基苯甲醚的测定方法
CN105115968A (zh) * 2015-08-25 2015-12-02 浙江大学 纳米金比色生物传感器快速检测热加工食品中丙烯酰胺的方法
CN105588809A (zh) * 2015-12-15 2016-05-18 新疆科力新技术发展股份有限公司 油田聚驱采出液中聚丙烯酰胺浓度的测定方法
CN109496237A (zh) * 2016-06-10 2019-03-19 隆扎有限公司 用于稳定化蛋白质的方法
US20190086325A1 (en) * 2016-02-24 2019-03-21 Tomra Sorting N.V. System and method for the detection of acrylamide precursors in raw potatoes and potato-based food products

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101171518A (zh) * 2005-05-12 2008-04-30 和光纯药工业株式会社 铁浓度测定方法
US20100261181A1 (en) * 2006-02-10 2010-10-14 Life Technologies Corporation Labeling and detection of nucleic acids
CN102830076A (zh) * 2012-09-21 2012-12-19 江苏南天农科化工有限公司 一种工业丙烯酰胺中对羟基苯甲醚的测定方法
CN105115968A (zh) * 2015-08-25 2015-12-02 浙江大学 纳米金比色生物传感器快速检测热加工食品中丙烯酰胺的方法
CN105588809A (zh) * 2015-12-15 2016-05-18 新疆科力新技术发展股份有限公司 油田聚驱采出液中聚丙烯酰胺浓度的测定方法
US20190086325A1 (en) * 2016-02-24 2019-03-21 Tomra Sorting N.V. System and method for the detection of acrylamide precursors in raw potatoes and potato-based food products
CN109496237A (zh) * 2016-06-10 2019-03-19 隆扎有限公司 用于稳定化蛋白质的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
QINQIN HU ET AL.: "Rapid methods for detecting acrylamide in thermally processed foods：A review", 《FOOD CONTROL》 *
胡沁沁 等: "基于巯基-烯键加成比色法快速检测丙烯酰胺", 《中国化学会第29届学术年会摘要集——第04分会：纳米生物传感新方法》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110261628A (zh) * 2019-07-08 2019-09-20 东华理工大学 一种吸附材料的在线吸附性能试验平台及其测试方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109932328B (zh) 2021-06-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cheng A rapid method for microdetermination of halogen in organic compounds
CN110174395A (zh) 微波消解icp-aes法测定磷铁中锰和钛含量的方法
CN103323412B (zh) 一种高温合金中铁含量的硫氰酸盐分光光度测定法
CN102539426A (zh) 硅锰合金中磷的测定方法
CN109596683A (zh) 一种测定石膏、硅石中氟含量的方法
CN106950306B (zh) 一种测定复方氨基酸注射液中半胱氨酸含量的方法
CN110987918A (zh) 一种水质总氮的检测试剂及快速检测方法
Mehlig et al. Spectrophotometric determination of iron with o-phenanthroline and with nitro-o-phenanthroline
CN109932328A (zh) 一种速溶咖啡中丙烯酰胺含量的可见分光光度测定方法
CN104133035B (zh) 一种用差减法测定压块球化剂中金属镁含量的方法
CN101660995B (zh) 测定稀土铬锰硅孕育剂中稀土总量的方法
CN106338534B (zh) 采用x射线荧光光谱仪快速测定萤石中氟化钙含量的方法
CN105352900A (zh) 钒铬储氢合金中铬的分析方法
CN104865253A (zh) 一种铁矿石中铜的光度测定法
CN106814144B (zh) 一种富马酸二甲酯中硫酸二甲酯含量的测定分析方法
Zhang et al. Estimation of Cr (III) in water with the presence of Cr (VI) by chlorophosphonazo I color reaction spectrophotometry
CN109975285A (zh) 一种钼基样品中硝酸根的检测方法
CN106248775A (zh) 一种减少icp‑ms、icp‑aes全过程分析误差的定量检测方法
CN110161151A (zh) 一种通过检测肌酐和1-甲基海因含量推断水中尸体浸没时间的方法
CN108760705A (zh) 一种检测面粉中过氧化苯甲酰的荧光分析方法
CN103063590A (zh) 钢中钴含量分光光度测定法
Singer et al. Spectrophotometric determination of bischlorophenol and other phenolic compounds
Sweeney et al. Chemical differentiation between nicotinic acid and nicotinamide
CN106404764B (zh) 锌焙砂中低含量锗的检测方法
CN103592249A (zh) 一种测定食盐中碘酸根的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant