CN109868225B - 棘孢木霉n-8-2及其应用 - Google Patents

棘孢木霉n-8-2及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及棘孢木霉N‑8‑2及其应用。本发明的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)N‑8‑2,保藏号CCTCC NO:M2018527。菌株N‑8‑2对多种植物病原菌有寄生作用,且可产生具有抑菌活性的挥发性物质,对芒果炭疽病、蒂腐病等多种芒果植物病原菌具有抑菌活性。在密闭容器中,用75g/L的棘孢木霉麦粒培养物熏蒸处理,对芒果蒂腐病的防治率高达100%。本发明的棘孢木霉可开发为生物熏蒸剂,高效防治果蔬采后病害。

Description

棘孢木霉N-8-2及其应用
技术领域
本发明属于农业微生物技术领域,具体地说,涉及棘孢木霉N-8-2及其应用。
背景技术
木霉(Trichoderma spp.)属于半知菌类的丝孢纲丛梗孢目丛梗孢科,是一种重要的生防真菌,其对水稻纹枯病,辣椒疫病,玉米纹枯病,三七灰霉病等多种植物病害具有防治作用。木霉菌培养物制剂和木霉孢子制剂不仅对农作物和林木植物生长期病害具有防治作用,而且可防治蔬菜、水果及园艺花卉等材料的采后病害,同时还对种子萌发、植株发育和果实发育具有促进作用。由于木霉作为生防菌的优势突出,对于木霉生防菌的研究已成为一大热点,美国能源部基因组研究所已经对4种生物防治效果优良的木霉菌,如“绿色木霉Gv29-8”(Trichoderma virens Gv29-8),“深绿木霉ATCC74058”(T.atrovirideATCC74058),“哈茨木霉CBS226.95”(T.harizianum CBS226.95),“棘孢木霉CBS433.97”(T.asperellum CBS433.97)进行了基因组测序(http://genome.jgi-psf.org/)。目前对木霉生防机制的研究主要集中在竞争作用、重寄生作用、抗生作用、诱导植物系统抗病性等方面。
芒果蒂腐病是芒果采后最为严重的病害之一,可导致芒果在贮藏、运输期间腐烂从而造成严重的经济损失。目前,对芒果蒂腐病的防治主要依靠化学药剂,化学药剂的滥用对环境造成污染,也危害人类的身体健康。
发明内容
本发明的目的是提供一株具有可以抑制多种植物病原真菌的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)N-8-2。
本发明的另一目的是提供棘孢木霉在防治植物病害(特别是芒果炭疽病、芒果蒂腐病)中的应用。
为了实现本发明目的,发明人从采集的芒果叶片中分离纯化得到一株具有广谱拮抗植物病原真菌作用的真菌N-8-2,根据菌株N-8-2的菌学特征及ITS rDNA测序结果(SEQID NO:1),将其鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。菌株N-8-2现已保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国武汉,武汉大学,邮编430072,保藏编号CCTCC No:M2018527,保藏日期2018年8月3日。所述棘孢木霉菌N-8-2的ITS序列已上传至NCBI GenBank,登录号为MK720048。
第一方面,本发明提供棘孢木霉(Trichoderma asperellum)N-8-2,保藏号CCTCCNO:M2018527。
第二方面,本发明提供一种病原菌抑制剂,其活性成分为棘孢木霉N-8-2和/或其代谢产物。
所述病原菌抑制剂对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、白腐真菌(Phanerochaete sordida)、间作壳属真菌(Diaporthe phaseolorum)、链格孢菌(Alternaria brassicae)、黑附球菌属真菌(Epicoccum sorghinum)、突脐蠕孢属(Exserohilum sp)、轮层菌属(Daldinia sp)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、串珠状赤霉(Gibberella moniliformis)、织球壳菌(Plectosphaerella cucumerina)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis camelliae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)具有抑制作用。
第三方面,本发明提供一种植物病害抑制剂,其活性成分为棘孢木霉N-8-2和/或其代谢产物。
本发明所述植物病害包括但不限于芒果炭疽病、芒果蒂腐病。其中,所述芒果炭疽病由炭疽菌属(Colletotrichum sp.)真菌引起,所述炭疽菌属真菌选自C.gloeosporioides,C.acutatum,C.asianum,C.siamense,C.fructicola,C.karstii,C.musae,C.endophytica,C.scovillei,C.cordylinicola,C.tropicale,C.gigasporum,C.cliviae,C.liaoningense,C.jiangxiense等。
所述芒果蒂腐病由选自以下真菌中的至少一种引起:Botryosphaeria dothidea,Lasiodiplodia brasiliense,Lasiodiplodia hormozganensis,Lasiodiplodiatheobromae,Lasiodiplodia pseudotheobromae,Neofusicoccum parvum,Neofusicoccummangiferae,B.fabicerciana,B.ramosa,B.mamane等。
第四方面,本发明提供所述棘孢木霉N-8-2的下述任一种应用:
1)棘孢木霉N-8-2在抑制病原菌中的应用;
2)棘孢木霉N-8-2在制备病原菌抑制剂中的应用;
3)棘孢木霉N-8-2在抑制植物病害中的应用;
4)棘孢木霉N-8-2在制备植物病害抑制剂中的应用。
1)-4)中,所述病原菌选自胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌、黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌。
进一步地,所述抑制植物病害包括利用所述棘孢木霉的培养物对植物进行熏蒸处理。
第五方面,本发明提供一种用于防治仓储植物病害的熏蒸剂,所述熏蒸剂包含棘孢木霉N-8-2的培养物,优选棘孢木霉N-8-2的麦粒培养物。
其中,所述植物病害由如下植物病原菌中的至少一种所致:胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌、黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌。
本发明中,棘孢木霉N-8-2麦粒培养物的制备方法如下:麦粒于水中煮至沸腾后,持续加热至麦粒外壳破裂,用纱布过滤后晾干,装入三角瓶中高温湿热灭菌,得到麦粒培养基。挑取菌株N-8-2菌丝接种于麦粒培养基上,于25℃-28℃培养7-15天,即得N-8-2麦粒培养物。
第六方面,本发明提供由棘孢木霉N-8-2产生的代谢产物(具有杀菌活性的挥发性物质),包括但不限于:6-戊基-2H-吡喃-3-酮(2H-Pyran-2-one,6-pentyl-)、2,4-二叔丁基苯酚(Phenol,2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-)、2,2,4-三甲基-3-羧基异丙醇,异丁酯戊酸(Pentanoic acid,2,2,4-trimethyl-3-carboxyisopropyl,isobutyl ester)、1,4-二氯苯(Benzene,1,4-dichloro-)、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊基)双环[3.1.1]七碳-2-烯(Bicyclo[3.1.1]hept-2-ene,2,6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl)-)、2,4-二叔丁基苯酚(Phenol,2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-)。
第七方面,本发明提供上述代谢产物的以下任一应用:
1)在抑制病原菌中的应用;
2)在制备病原菌抑制剂中的应用;
3)在抑制植物病害中的应用;
4)在制备植物病害抑制剂中的应用。
1)-4)中,所述病原菌选自胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌、黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌;所述植物病害包括芒果炭疽病、芒果蒂腐病。
借由上述技术方案,本发明至少具有下列优点及有益效果:
(一)棘孢木霉菌株N-8-2对多种植物病原菌有寄生作用,且可产生具有杀菌活性的挥发性物质,对芒果炭疽病、蒂腐病等多种芒果病原菌具有抑菌活性。利用棘孢木霉麦粒培养物进行熏蒸处理,对芒果蒂腐病菌抑制率高达100%。
(二)菌株N-8-2产生的挥发性物质中具有多种抑菌成分,可被开发为生物熏蒸剂,高效防治果蔬采后病害。
(三)菌株N-8-2主要通过与病原菌竞争生存空间,在病原菌菌落重寄生,产生抑制病原菌生长的挥发性物质及难挥发物质等多种协同机制,对多种自芒果叶斑样本分离的病原菌产生较强的抑制作用。木霉菌株N-8-2可以在密闭环境中不接触水果而通过挥发性气体来抑制多种芒果病原菌菌丝生长及防治芒果蒂腐病等芒果果实上主要的贮藏期病害,由于木霉培养物并不直接接触芒果果实从而减少了对芒果品质的影响和对人体健康的危害。与现有保鲜药剂相比,具有防病效果好,低残留的优点,在农业生产中具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明棘孢木霉N-8-2孢子形态图。
图2为本发明实施例2中棘孢木霉菌株N-8-2对12种植物病原菌的寄生作用。
图3为本发明实施例3中棘孢木霉菌株N-8-2与4种芒果病原菌对扣培养的菌落图片。
图4为本发明实施例4中不同质量木霉培养物对芒果蒂腐病菌的抑菌活性。
图5为本发明实施例5中木霉挥发性物质对芒果蒂腐病的防治效果。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段,所用原料均为市售商品。
实施例1棘孢木霉N-8-2的分离与鉴定
1、生防木霉菌的分离
采集健康芒果叶片,取叶肉组织,进行表面消毒。将样品用75%酒精浸泡10秒,10%次氯酸钠溶液浸泡1分钟,然后用灭菌超纯水漂洗3次,将消毒好的样品放置在马铃薯琼脂(PDA)培养基上,于25℃-28℃下培养。培养期间定期观察,对外观形态颜色明显差异的木霉菌落进行纯化,保存备用。
PDA培养基配方:马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂16g,蒸馏水1000ml。
2、生防木霉菌的鉴定
菌株N-8-2在PDA平板上匍匐菌丝生长迅速,3天就能覆盖直径9厘米的培养皿,气生菌丝不发达。菌落初期呈白色或淡黄色,逐渐变成绿色产生孢子,形成环状。在60倍显微镜下观察到木霉分生孢子为圆形或卵圆形(图1),透明或呈淡绿色。ITS序列测序结果在GenBank数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/)中与相关同源序列进行比对,与棘孢木霉100%相似,结合形态和培养特征鉴定菌株N-8-2为棘孢木霉。菌株N-8-2的ITSrDNA序列见SEQ ID NO:1。
实施例2棘孢木霉N-8-2对植物病原菌的寄生作用
对峙培养:用灭菌的打孔器(直径为5mm)分别在病原菌与木霉的菌落边缘打孔,取菌丝块接种于新鲜的PDA平板的左右两侧,菌丝块间距离5.5cm,以只接种病原菌的平板为对照,每处理重复3次,置于28℃进行培养。待对照菌落长满平板时,用十字交叉法分别测量菌落直径,以只接种病原菌作对照,计算抑菌率。计算公式如下:
抑菌率(%)=(对照菌落半径-处理菌落半径)/对照菌落半径×100%
在对峙培养中,木霉N-8-2对从芒果叶斑样本上分离的12种病原菌都显示出较强的抑制作用,其中,对胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌的抑制率分别达到:64%、58%、53%、53%;对黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌的抑制率分别达到:47%、46%、46%、44%、44%、40%、39%、31%(表1)。在对峙培养过程中观察发现,除了生长速度较快的葡萄座腔菌,木霉的菌落生长速率普遍比病原菌的菌落生长速率快,能够在短时间内迅速占据生长空间,对病原菌的生长产生抑制作用,当木霉菌丝与病原菌菌丝相接时,木霉逐步包围病原菌菌落,直至病原菌菌落完全萎缩,被木霉菌落覆盖(图2)。对峙培养结果说明,木霉菌株N-8-2通过竞争作用和寄生作用,能够抑制病原菌的生长。
表1木霉菌株N-8-2对12种病原菌的抑制率
Figure BDA0002028781780000071
实施例3棘孢木霉N-8-2挥发性物质对植物病菌菌的抑菌活性
挥发性代谢产物对病原菌的抗生作用采用对扣培养法,分别采用木霉PDA培养物和和木霉麦粒培养物对扣培养两种方法。
木霉PDA培养物对扣培养:用灭菌的牙签分别挑取病原菌与木霉N-8-2菌丝块,接种于新鲜的PDA平板上(直径9cm),再将接种木霉N-8-2的平板和接种病原菌的平板对扣(木霉平板在下,病原菌平板在上),用封口膜密封,于28℃培养,每种病原菌4个重复。将每种病原菌分别接种于新鲜PDA平板上,置于相同环境中培养,为对照组,待对照组长满整个平板时,用十字交叉法测量各处理病原菌菌落大小,计算抑菌率。木霉PDA培养物对扣培养实验结果表明,在接种4天时,与病原菌同时接种的木霉对病原菌抑制作用比较弱,特别是对葡萄座腔菌两种菌丝生长迅速的病原菌抑制作用不强,但是对胶孢炭疽菌和拟盘多毛孢两种菌丝生长较慢的病原菌任具有较好的抑制效果(图3)。
木霉麦粒培养物对扣培养:采用煮熟并灭菌的小麦进行木霉培养。用灭菌的牙签挑取木霉N-8-2置于20g小麦培养基上,在25℃培养3天,用灭菌的牙签挑取病原菌接种于新鲜的PDA平板上(直径9cm),再将木霉麦粒培养物和培养不同种类病原菌的平板对扣(木霉在下,病原菌平板在上),用封口膜密封,于28℃培养,每个病原菌3个重复。将每种病原菌分别接种于新鲜PDA平板上,置于相同环境中培养,为对照组,待对照组长满整个平板时,用十字交叉法测量病原菌菌落大小,计算抑菌率。结果表明,木霉对4种病原菌都有很好的抑制效果,对拟盘多毛孢、葡萄座腔菌和胶孢炭疽菌的抑制率分别达到93%、89%、87%;对镰刀菌的抑制率为65%。两个对扣实验说明,当木霉与病原菌未直接接触时,主要通过木霉产生的挥发性物质抑制病原菌生长。
实施例4菌株N-8-2挥发性物质对芒果蒂腐病菌的抑制效果
用灭菌的牙签挑取木霉置于小麦培养基上,在25℃培养3天。在直径15cm的玻璃培养皿中放入4个直径为6cm的玻璃培养皿,灭菌备用。将每个大培养皿中的3个小培养皿倒入PDA培养基制成PDA平板,并用灭菌牙签挑取直径6mm的蒂腐病菌菌丝块置于平板中央;另外1个小培养皿加入不等量的木霉麦粒培养物(0克/皿,1克/皿,5克/皿,10克/皿,20克/皿,30克/皿),加入木霉麦粒培养物候立即cm用封口膜密封,每组设3个重复,以不接种木霉的麦粒为对照,置于25℃光照培养箱内恒温培养,待对照组病原菌长满培养皿时,用十字交叉法测了处理病原菌菌落直径,计算抑菌率。结果表明,熏蒸培养4天后,随着木霉麦粒培养物量的增加,芒果蒂腐病菌菌丝生长越缓慢,菌落直径越小(图4),不同量木霉麦粒培养物对芒果蒂腐病菌的抑菌率与木霉培养物的重量呈线性关系。
实施例5菌株N-8-2挥发性物质对芒果蒂腐病的防治效果
选取成熟程度较为一致,无明显病害的芒果果实,进行表面消毒,用75%酒精浸泡10秒,2%次氯酸钠溶液浸泡1分钟,无菌水清洗3次,风干后用灭菌的牙签在每个芒果果实表面刺伤6个小孔,各小孔直径2mm,深度3mm左右,6个小孔形成一个直径6mm的小圆圈。从培养4天的芒果蒂腐病菌菌落边缘打取0.5mm菌丝块,将菌丝块置于伤口处。每个芒果果实只接种一个菌丝块,在玻璃干燥器底部按照75g/L(麦粒培养物的量/干燥器内部空间体积)的比例加入用小麦培养基培养15天的木霉麦粒培养物(在按照100g灭菌麦粒接种1个直径5mm木霉菌丝块的比例接种后,25℃恒温培养15天),然后再干燥器上层放入5个已接种芒果蒂腐病菌(每个果实接种1个菌丝块)的芒果果实,立即用封口膜进行密封,置于25℃-28℃进行培养,每个处理设置三个重复(干燥器)。将接种的芒果放入装有按75g/L的无菌麦粒玻璃干燥器中密封培养,作为对照组。结果表明,芒果接种芒果蒂腐病菌无木霉熏蒸的处理芒果果实发病率100%,形成明显的病斑,平均病斑直径约5.97cm。而木霉麦粒培养物熏蒸处理的芒果果实发病率为0%。木霉熏蒸处理对芒果蒂腐病的防治效果达100%(图5)。
本发明采用木霉麦粒培养物熏蒸的方式防治芒果蒂腐病,避免了木霉与芒果果实的直接接触,减少了生防木霉菌对芒果果实品质的影响。
实施例6菌株N-8-2挥发性物质的测定
用三角瓶称取100g煮好灭菌的小麦,将木霉菌饼接种在小麦上,进行培养,以不接种的小麦为空白对照,利用顶空固相微萃取气相色谱质谱联用(SPME-GC/MS)对培养9天、16天,以及空白对照的挥发性物质进行测定。置于25℃-28℃条件下培养的木霉菌N-8-2培养物,在40℃下平衡0.5h,通过隔垫插入己活化好的SPME萃取头,推出纤维头,顶空吸附40min后,插入GC-MS进样口解析5min。GC/MS操作条件:Agilent 6890N型气相色谱仪,气相色谱条件:程序升温,起始温度40℃,保持2min,以4℃/min升至150℃,保持5min,再以10℃/min升至280℃,保持52min,进样量1.0μL,进样口温度250℃,检测器温度(FID)250℃。Agilent5975B质谱仪,质谱条件:离子源温度230e,四极杆温度150℃,离子化方式EI,电子能量70eV,质量范围为45-550AMU/sec。
经气相色谱法测定,用小麦培养9天的木霉菌N-8-2挥发性物质主要成分为:6-戊基-2H-吡喃-3-酮(2H-Pyran-2-one,6-pentyl-)、2,4-二叔丁基苯酚(Phenol,2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-)、2,2,4-三甲基-3-羧基异丙醇,异丁酯戊酸(Pentanoic acid,2,2,4-trimethyl-3-carboxyisopropyl,isobutyl ester)。用小麦培养16天的木霉挥发性物质主要成分为:1,4-二氯苯(Benzene,1,4-dichloro-)、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊基)双环[3.1.1]七碳-2-烯(Bicyclo[3.1.1]hept-2-ene,2,6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl)-)、2,4-二叔丁基苯酚(Phenol,2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-)。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之做一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
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序列表
<110> 广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所
<120> 棘孢木霉N-8-2及其应用
<130> KHP191111417.6
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gaacctgcgg agggatcatt accgagttta caactcccaa acccaatgtg aacgttacca 60
aactgttgcc tcggcggggt cacgccccgg gtgcgtcgca gccccggaac caggcgcccg 120
ccggaggaac caaccaaact ctttctgtag tcccctcgcg gacgtatttc ttacagctct 180
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tgaagaacgc agcgaaatgc gataagtaat gtgaattgca gaattcagtg aatcatcgaa 300
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tcaaccctcg aacccctccg ggggatcggc gttggggatc gggacccctc acacgggtgc 420
cggccccgaa atacagtggc ggtctcgccg cagcctctcc tgcgcagtag tttgcacaac 480
tcgcaccggg agcgcggcgc gtccacgtcc gtaaaacacc caactttctg aaatgtgacc 540
tcggatcagg taggaatacc cgctgaactt aagcatatca ataaagcg 588

Claims (9)

1.棘孢木霉(Trichoderma asperellum)N-8-2,其特征在于,保藏号CCTCC NO:M2018527。
2.病原菌抑制剂,其特征在于,其活性成分为权利要求1所述的棘孢木霉;
所述病原菌抑制剂对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、白腐真菌(Phanerochaete sordida)、间作壳属真菌(Diaporthe phaseolorum)、链格孢菌(Alternaria brassicae)、黑附球菌属真菌(Epicoccum sorghinum)、突脐蠕孢属(Exserohilum sp.)、轮层菌属(Daldinia sp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、串珠状赤霉(Gibberella moniliformis)、织球壳菌(Plectosphaerella cucumerina)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis camelliae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)具有抑制作用。
3.植物病害抑制剂,其特征在于,其活性成分为权利要求1所述的棘孢木霉;
所述植物病害包括芒果炭疽病、芒果蒂腐病。
4.根据权利要求3所述的植物病害抑制剂,其特征在于,所述芒果炭疽病由炭疽菌属(Colletotrichum sp.)真菌引起,所述炭疽菌属真菌选自C. gloeosporioidesC. acutatumC. asianumC. siamenseC. fructicolaC. karstiiC. musaeC. endophyticaC. scovilleiC. cordylinicolaC. tropicaleC. gigasporumC. cliviaeC. liaoningenseC. jiangxiense
所述芒果蒂腐病由以下真菌中的至少一种引起:Botryosphaeria dothideaLasiodiplodia brasilienseLasiodiplodia hormozganensisLasiodiplodia theobromaeLasiodiplodia pseudotheobromaeNeofusicoccum parvumNeofusicoccum mangiferaeB. fabicercianaB. ramosaB. mamane
5.权利要求1所述棘孢木霉的以下任一应用:
1)在抑制病原菌中的应用;所述应用为非疾病治疗目的;
2)在制备病原菌抑制剂中的应用;
3)在抑制植物病害中的应用;
4)在制备植物病害抑制剂中的应用;
1)-4)中,所述病原菌选自胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌、黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌;所述植物病害包括芒果炭疽病、芒果蒂腐病。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述抑制植物病害包括利用所述棘孢木霉的培养物对植物进行熏蒸处理。
7.用于防治仓储植物病害的熏蒸剂,其特征在于,所述熏蒸剂包含权利要求1所述棘孢木霉的培养物;
其中,所述植物病害由如下植物病原菌中的至少一种所致:胶孢炭疽菌、白腐真菌、间作壳属真菌、链格孢菌、黑附球菌属真菌、突脐蠕孢属、轮层菌属、尖孢镰刀菌、串珠状赤霉、织球壳菌、拟盘多毛孢、葡萄座腔菌。
8.根据权利要求7所述的熏蒸剂,其特征在于,所述熏蒸剂包含所述棘孢木霉的麦粒培养物。
9.根据权利要求7或8所述的熏蒸剂,其特征在于,所述植物病害包括芒果炭疽病、芒果蒂腐病。
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