CN111996127B - 一株携带病毒的核盘菌低毒菌株及其在生物防治中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物病害生物防治技术领域，公开了一株携带病毒的核盘菌低毒菌株及其在生物防治中的应用，所述的菌株为核盘菌767R45，保藏编号为：CCTCC NO:M2020419。核盘菌767R45菌株的产生的挥发性物质及其10%发酵滤液能抑制核盘菌、立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、尖孢镰刀菌、稻平脐蠕孢菌、油菜黑胫病菌和柑橘酸腐病菌菌丝的生长。此外，核盘菌767R45菌株产生的挥发性物质和发酵滤液能抑制储藏期病害灰霉病、青霉病和绿霉病的发生，其发酵滤液还能抑制油菜菌核病的发生，其挥发性物质能促进拟南芥幼苗的生长。该发明使得植物病原菌变成了有益的生防资源，为作物真菌病害的生物防治提供了新的视角和新手段。

Description

一株携带病毒的核盘菌低毒菌株及其在生物防治中的应用

技术领域

本发明涉及植物病害生物防治技术领域，具体包括一种具有高效、广谱的，抗多种植物病原真菌的，多病毒复合侵染的核盘菌低毒菌株767R45在植物病害生物防治和促进植物生长上的应用。

技术背景

植物病害的发生和流行是寄主植物和病原物间互作的结果，农作物病害严重影响了我国经济效益和人民生活。使用化学药剂仍是目前农作物病害防治的主要方法，然而化学农药的过量使用会严重污染农产品和生态环境，残留的农药甚至危及人畜健康，且化学药剂的长期使用也会使病原菌迅速产生抗药性。因此寻找安全有效的植物病害防治新途径显得尤为重要。生物防治符合国家“两减”和绿色可持续发展农业的战略，正日益成为植物病害防治的重要措施，这也为植物病害的综合防治带来新思路。开发环保健康的生物农药是研究者们的主要方向，利用有益微生物进行生物防治日趋受到重视，现有的一些微生物制剂虽然可以在一定程度上达到防病效果，但远不能达到人们的理想状态。

利用生防菌防治植物病害在国内外均有相关报道，以往在研究生防菌的生防机制时，主要从微生物间的竞争作用、抗生素类物质的拮抗作用及诱导抗性等方面来发掘。但近几年不断有关于微生物产生的挥发性物质(Volatile organic compounds,VOCs)和代谢产物抑制植物病害并促进植物生长方面的研究报道。例如，从甜菜根围分离得到的放线菌所产生的VOCs对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用，某些放线菌产生的VOCs还能促进植物生长(Cordovez et al 2015；Vurukonda et al 2018)。在Zhang对内生真菌抑制灰霉病的试验中发现，内生真菌产生的VOCs在体外试验中能显著抑制灰葡萄孢和核盘菌的生长(Zhanget al 2014)。De Vrieze等发现来自马铃薯根际的假单胞杆菌属所产生的VOCs能抑制致病疫霉菌(Phytophthora infestans)，主要表现在抑制致病疫霉菌菌丝、孢子囊和游动孢子的生长并保护马铃薯叶片不受病原菌侵染(De Vrieze et al 2015)。Gotor-Vila等发现解淀粉芽孢杆菌CPA-8产生的VOCs可显著抑制由念珠菌、果蝇和灰葡萄孢引起的樱桃果实腐烂，其中起决定作用的化合物是噻吩(Gotor-Vila et al 2017)。细菌产生的VOCs能促进植物生长并提高肥料利用率，还可提高植物对害虫和病原物的免疫力(Sharifi and Ryu2018)。Giorgio等发现植物病原根瘤菌可以保护大豆免受白叶枯病和菌核病的为害，其产生的VOCs可使核盘菌菌丝的细胞质颗粒化和细胞器超微结构的改变(Giorgio et al2015)。链霉菌NEAU-S7GS2能产生水解葡聚糖酶和纤维素酶，对核盘菌的菌丝生长有显著抑制作用(99.1％)(Zhang et al 2019)。生物活性物质(Bioactive compounds)在人类的医疗健康及农业生产上具有广泛应用，虽然真菌次级代谢产物可以在病原微生物与寄主互作过程中起到关键作用，但利用真菌次级代谢产物进行植物病害防治仍有较大困难。

核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)是一种重要的植物病原真菌，可以侵染油菜、大豆、向日葵等油料作物，及莴苣、大白菜、胡萝卜等常见蔬菜。

发明内容

本发明的目的在于提供了一株广谱抑菌的低毒核盘菌，所述核盘菌的保藏编号为CCTCC NO:M2020419。

本发明的另一个目的在于提供了核盘菌767R45在制备成生防菌剂中的应用。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

申请人自四川省菌核病发病油菜茎秆内的菌核中分离出一株菌落形态异常的核盘菌，通过原生质体再生，最终获得了一株生长速度适中且具有生防潜力的原生质体再生菌株767R45，该菌株已于2020年8月14日送至在中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)767R45，保藏编号为：CCTCC NO:M2020419，地址：中国武汉武汉大学。

核盘菌767R45在PDA培养基上生长良好，生长速度较野生型核盘菌慢，气生菌丝不发达，颜色为白色或淡黄色，有特殊性气味，培养温度为20℃，菌落形态不规则。

核盘菌767R45在制备成生防菌剂中的应用，包括利用该核盘菌的发酵液，或是发酵滤液，或是其发酵过程中产生的挥发性气体用于植物病原菌的预防或抑制，即制备成植物生防菌抑菌剂，或是蔬果贮藏防病剂；本发明的核盘菌固态发酵产生的挥发性气体还可用于植物促生剂。

以上所述的应用中，优选的，所述的植物病原真菌包括但不限于：核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、灰葡萄孢菌(Botrytiscinerea)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、稻平脐蠕孢菌(Bipolaris oryzae)、油菜黑胫病菌(Leptosphaeria biglobosa)和柑橘酸腐病菌(Oospora citriaurantii)、意大利青霉(Penicillium italicum)、指状青霉(Penicillium digitatum)、黑曲霉(Aspergillusniger)。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

1.本发明提供的核盘菌767R45具有高效广谱的抑菌谱，可抑制核盘菌、立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、尖孢镰刀菌、稻平脐蠕孢菌、油菜黑胫病菌和柑橘酸腐病菌的生长。

2.本发明提供的核盘菌其液体发酵物和产生的挥发性均有抑菌活性，既可用于露天栽培的植物病害防治，也可以用于储藏期病害的防治。

3.本发明提供的核盘菌代谢产物除了可以用于病害生物防治，还对植物的生长有促进作用，提高种子的萌发率。

4.本发明首次发现一株被病毒复合侵染的低致病力的核盘菌，病毒的侵染影响了病原菌代谢产物的变化，其代谢产物可用于防治植物病害，可以减少化学农药的使用量。

附图说明

图1为核盘菌767R45的菌落形态示意图。

图2为核盘菌767R45在离体油菜叶片上的致病力比较示意图；

其中：图A为接种第2天和第6天的病斑扩展情况，图B为接种第2天的平均病斑直径。

图3二分隔皿法检测核盘菌767R45产生的挥发性物质对多种植物病原真菌的抑制作用示意图；

其中：图A显示核盘菌767R45在PDA培养基上产生的挥发性物质抑制多种病原真菌的生长；图B为各处理组和对照组的平均菌落半径。

图4为平板对扣法检测核盘菌767R45产生的挥发性物质对多种植物病原真菌的抑制作用；其中：图A为核盘菌767R45在PDA培养基上产生的挥发性物质抑制多种病原真菌的生长；B为各处理组和对照组的平均菌落直径。

图5为核盘菌767R45的发酵滤液对多种植物病原真菌的抑制作用示意图；

其中：图A为核盘菌767R45 10％PDB发酵滤液抑制病原真的生长；图B为各处理组和对照组的平均菌落直径。

图6为核盘菌767R45发酵产生的挥发性物质对储藏期病害的防治效果示意图；

其中：图A为核盘菌767R45的高粱固体发酵产生的挥发性物质对草莓灰霉病、脐橙青霉和脐橙绿霉病的防治效果；图B为对照组和处理组的草莓灰霉病发病情况；图C和D分别为对照组脐橙青霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图E和F分别为处理组脐橙青霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图G和H分别为对照组脐橙绿霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图I和J分别为处理组脐橙绿霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图，图K为挥发性物质熏蒸果实的模式图。

图7为核盘菌767R45的发酵滤液对储藏期病害草莓灰霉病、脐橙青霉病和脐橙绿霉病的防治效果示意图；

其中：图A为和图B分别为对照组和处理组的草莓灰霉病发病情况；图C和图D分别为对照组脐橙青霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图E和图F分别为处理组脐橙青霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图G和图H分别为对照组脐橙绿霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图；图I和图J分别为处理组脐橙绿霉病发病情况及其果实表皮腐烂症状切面图。

图8为核盘菌767R45的发酵滤液对离体油菜叶片菌核病的防治示意图；

其中：图A为三种施药方式对油菜菌核病的抑制情况；图B为对照组和处理组接种第2天的平均病斑直径。

图9为核盘菌767R45在PDA培养基上产生的挥发性物质对拟南芥幼苗的促生作用示意图；其中：图A和图B(种子春化后处理)分别为对照组和处理组的种子萌发情况；图C和图E(种子发芽后处理)分别为对照组(图D为放大图)和处理组(图F为放大图)的幼苗生长情况。

具体实施方案

结合以下具体实施例及附图对本发明的原理和内容进行进一步阐述，但本发明的内容不仅局限于以下实施例。本发明实施例所用的核盘菌为1980(Xiao et al2014)，灰霉菌为B05.10(Liu et al 2020)，立枯丝核菌为WH-1(王婧2009)，尖孢镰刀菌为PH-1(Zhaoet al 2011)，油菜黑胫病菌为H3-38(Wang et al 2019)，稻平脐蠕孢菌，柑橘酸腐病菌，意大利青霉和指状青霉，上述未指明到具体株的病原菌均为具有其常规性质的植物致病病原菌。

实施例1：

核盘菌低毒菌株767R45的菌株的筛选、鉴定及特性

1)核盘菌低毒菌株767R45的菌株的筛选及鉴定

核盘菌767R45自四川省菌核病发病油菜茎秆内的菌核中分离，是菌落形态异常的核盘菌767的原生质体再生菌株。由于原始菌株767形态异常，因此对该菌株进行了高通量测序并发现原始菌株767中携带6个不同的ssRNA病毒，但由于原始菌株767生长缓慢，因此对其进行了原生质体再生，最终获得了一株生长速度适中且具有生防潜力的原生质体再生菌株767R45。

将培养5天的767R45菌丝从铺有玻璃纸的PDA培养基上刮下，放至研钵，加入适量液氮后充分研磨，通过CTAB法提取767R45菌株的总DNA，上述真菌的鉴定是基于内转录间隔区l(ITS1)、5.8S rDNA、内转录间隔区2(ITS2)进行鉴定的。通过引物ITS1和ITS4对菌株的总DNA进行PCR扩增，所得到的序列在NCBI网站中进行BLAST比对，鉴定结果为核盘菌Sclerotinia sclerotiorum。

用Trizol法提取767R45菌株的总RNA，通过RT-PCR验证该菌株中携带病毒Sclerotinia sclerotiorumumbra-like virus 1/767(SsULV1/767)、Sclerotiniasclerotiorum mitovirus 6/767(SsMV6/767)和Sclerotinia sclerotiorum mitovirus32/767(SsMV32/767)。该菌株目前已至少活化了十代，生物性状一直非常稳定。

该菌株的第三代已于2020年8月14日送至在中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)767R45，保藏编号为：CCTCC NO:M2020419，地址：中国武汉武汉大学。

核盘菌767R45在PDA培养基上生长良好，生长速度较野生型核盘菌慢，气生菌丝不发达，颜色为白色或淡黄色，有特殊性气味，培养温度为20℃，菌落形态不规则(图1)。

2)核盘菌低毒菌株767R45的培养方式：

(1)液体发酵：

先将核盘菌767R45菌株在PDA平板上于20℃活化3d，再将5块新鲜的直径为6mm的菌丝块接种于装有100mL PDB的三角瓶中，于20℃，150r/min振荡培养7d；即得核盘菌767R45发酵液。

本发明发酵滤液的制备：

将上述摇培产物转移至100mL离心管中，于4℃，10000r/min离心20min，用细菌过滤器(孔径0.22μm)过滤上清液，或将离心上清液通过滤纸/擦镜纸过滤去除菌体杂质，得到无菌发酵滤液；向无菌发酵滤液中加入吐温20(Tween 20)，使发酵滤液中Tween 20的终浓度为0.05％，即为本发明以下实施例用到的发酵滤液制剂。

(2)固体发酵：

红高粱固体培养基的制作方法：将红高粱用蒸馏水清洗至无杂质漂浮、洗涤液不浑浊后加蒸馏水煮沸30min，每个500mL三角瓶中装入200g煮沸后的红高粱，在121℃高压蒸汽灭菌60min后烘干至高粱表面干燥，既得。

在0.5g核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)767R45菌丝中加入10mL无菌水研磨，在每瓶无菌红高粱中接种2mL研磨液，并于20℃发酵培养25d，即得核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)767R45固体培养物，用于以下实施例。

3)核盘菌767R45的低毒特性：

釆用离体叶片法，测定核盘菌菌株对离体油菜叶片的致病力。采集新鲜、均一、无损的叶片，规律放置于铺有湿润吸水纸的方形托盘中。在距主叶脉约1cm的位置处接种新鲜菌丝块，每片叶片接种一个菌丝块，每个菌株至少接种3个片叶，在每个叶片同侧接种菌丝块。在叶片叶柄处盖上三层无菌水浸湿的吸水纸保湿，用保鲜膜覆盖接种盘保湿20℃下培养，每隔大约12h喷一次水进行保湿培养。每24h观察发病情况，记录病斑直径。

核盘菌767R45在离体油菜叶片上的致病力(病斑平均直径：0.45cm)较野生型核盘菌1980(病斑平均直径：3.16cm)显著降低，明显产酸，叶片变黄但致病力低(图2)。

实施例2：

核盘菌767R45菌株产生的挥发性气体抑制多种病原真菌菌丝的生长

采用二分隔皿法和平板对扣法两种不同的方法，分析核盘菌767R45菌株产生的挥发性气体对植物病原真菌核盘菌、立枯丝核菌、灰葡萄孢菌、尖孢镰刀菌、稻平脐蠕孢菌、油菜黑胫病菌和柑橘酸腐病菌生长的影响。

1)二分隔皿法：在90mm PDA二分隔平板一侧先接种核盘菌767R45菌株菌丝块，20℃下培养5d后，在另一侧接种新鲜病原真菌菌丝块，用封口膜密封。每个处理重复三次，以空白PDA作为对照，在20℃下培养至对照长满半隔，测量处理病原真菌菌落直径，计算抑菌率。

抑菌率(％)＝(对照组真菌菌丝直径平均值-处理组真菌菌丝直径平均值)/(对照组真菌菌丝直径平均值-接种菌丝块直径)×100％，以下同。

结果如图3所示，生防菌挥发性气体对多种病原真菌的平均抑制率如下表，其中对立枯丝核菌的防治效果最好。

2)平板对扣法：在90mm PDA平板上先接种核盘菌767R45菌株菌丝块，20℃下培养10d后，在另一个PDA平板上接种新鲜病原真菌菌丝块，在无菌操作台上弃掉培养皿的盖子，将两个培养皿底对扣，核盘菌767R45菌株菌丝块在下，病原真菌在上，用封口膜将双皿密封，使生防菌产生的挥发性物质能充分在两培养皿间流通，每个处理重复三次。以空白PDA和病原真菌对扣培养为对照，在20℃下培养至对照长满全皿，测量处理病原真菌菌落直径，计算抑菌率。

结果如图4所示，生防菌挥发性气体对多种病原真菌的平均抑制率如下表，其中对稻平脐蠕孢菌的防治效果最好。

相比两种不同的方法，小空间范围的挥发性气体对核盘菌、立枯丝核菌和灰葡萄孢菌的

0级

1级

2级

3级

4级

5级

发病率

病情指数

防效

防治效果更好，而大空间范围的挥发性气体对尖孢镰刀菌、稻平脐蠕孢菌、油菜黑胫病菌和酸腐病菌的防治效果更好。

实施例3：

核盘菌767R45菌株产生的VOCs抑制储藏期草莓灰霉病、脐橙青霉病和脐橙绿霉病的发生

选取新鲜、健康、大小一致的果实用蒸馏水冲洗2次后自然晾干表面，草莓果实放在直径60mm的培养皿中接种灰葡萄孢菌丝块，脐橙用20根一捆的昆虫针刺伤后滴加10μL浓度为2×10⁷个孢子/mL的意大利青霉/指状青霉孢子悬液。将实施例1制备的400g的固体培养物(核盘菌767R45菌株的高粱固体培养物)放在干燥器底部，然后放入陶瓷隔板，将接种过病原菌孢子液的草莓/脐橙立即放进干燥器，在盖子边缘涂抹凡士林，扭转后盖紧盖子，防止气体外泄，以放入等质量的未接种菌株的无菌高粱作对照，密封后的干燥器放置在20℃，培养7d待对照组发病后，观察记录处理组发病情况，试验共重复3次。调查发病率和严重程度，计算病情指数和防治效果。

病情指数＝∑[病级数×该级病果数]/(调查总数×最高病级数)×100，以下同；

相对防效(％)＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100％，以下同；

结果如图6所示，菌株767R45的挥发性气体能有效抑制草莓灰霉病、脐橙青霉和绿霉病的发生，从而延长草莓和柑橘储藏期病害的发生，防效均可达80％以上。

实施例4：

核盘菌767R45菌株的发酵滤液抑制多种病原真菌菌丝的生长

在180mL PDA培养基中添加20mL实施例1制备的核盘菌767R45菌株的发酵滤液，以添加20mLPDB为对照，发酵滤液浓度为10％(v/v)，分装在90mm培养皿中，每皿15mL混合培养基制成平板。在平板中央接种直径6mm的新鲜病原真菌菌丝块，在20℃下培养，各处理设置5次重复，待对照长满全皿，记录病原真菌菌丝生长直径，计算生防菌发酵滤液抑菌率并拍照记录。

结果如图5所示，生防菌10％PDB发酵滤液对多种病原真菌的平均抑制率如下表，其中对尖孢镰刀菌的防治效果最好。

实施例5：

核盘菌767R45菌株发酵滤液制剂抑制储藏期草莓灰霉病、脐橙青霉病和脐橙绿霉病的发生

选取新鲜、健康、大小一致的果实用蒸馏水冲洗2次后自然晾干表面，喷施实施例1制备的发酵滤液制剂2mL，以喷施相同体积的蒸馏水作对照，自然晾干后，草莓果实放在直径90mm的培养皿中接种灰葡萄孢菌丝块，脐橙用20根一捆的昆虫针刺伤后滴加10μL浓度为2×10⁷个孢子/mL的意大利青霉/指状青霉孢子悬液。20℃培养7d待对照组发病后，观察记录处理组发病情况，试验共重复3次。调查发病率和严重程度，计算病情指数和防治效果。

结果如图7所示，菌株767R45的发酵滤液能有效抑制草莓灰霉病、脐橙青霉和绿霉病的发生，从而延长草莓和柑橘储藏期病害的发生，抑制率均可达45.84％。

实施例6：

核盘菌767R45菌株发酵滤液制剂防治油菜菌核病的离体叶片试验

在PDA平板上活化野生型核盘菌菌株1980，剪取新鲜、健康且大小相同油菜叶片，放置在铺有吸水纸的白盆中。喷施实施例1制备的发酵滤液制剂，以喷施相同体积的蒸馏水对照，直至油菜叶片表面有一层液膜，6h后将新鲜的6mm核盘菌1980菌丝块接种到油菜叶片上，每个处理设5个重复，保湿48h后拍照观察发病情况，测量病斑大小，计算相对防效。

叶片浸泡发酵滤液：将叶片置于实施例1制备的发酵滤液制剂中浸泡30s，6h后用吸水纸擦干表面剩余水分，然后接种菌丝块；

接种点施用发酵滤液：移液枪吸取20μL实施例1制备的发酵滤液制剂至接种点处并均匀涂抹于直径2cm范围，6h后用吸水纸擦干表面剩余水分，然后接种菌丝块；

相对防效(％)＝(对照叶片病斑大小-处理叶片病斑大小)/对照叶片病斑大小×100％

结果如图8所示，将20μL发酵滤液制剂涂抹于接种点范围的施药方式，其对菌核病病斑扩展的平均抑制率为26.35％；将叶片浸泡于实施例1制备的发酵滤液制剂后用吸水纸擦干的施药方式，其对菌核病病斑扩展的平均抑制率为14.92％；喷洒发酵滤液制剂后晾干的施药方式，其对菌核病病斑扩展的平均抑制率为21.37％。

结果表明本发明的生物防治菌剂对油菜菌核病有一定预防效果。

实施例7：

核盘菌767R45菌株产生的VOCs对拟南芥种子萌发及幼苗生长的影响

(1)核盘菌767R45菌株产生的VOCs对拟南芥种子萌发的影响

供试拟南芥品种为，在边长为100mm的正方形PDA平板中接种4个核盘菌767R45菌株的菌丝块，于20℃培养10d。在另外一个正方形1/2MS培养基平板中点接消毒处理后的拟南芥种子(20×5共100个)，将拟南芥平板放入4℃冰箱黑暗春化2-3d后，将核盘菌767R45菌株和拟南芥种子平板对扣培养，在光照培养室中竖直平板，一段时间后观察拟南芥种子发芽情况，统计发芽率。

(2)核盘菌767R45菌株产生的VOCs促进拟南芥幼苗生长

供试拟南芥品种为，在直径为90mm的1/2MS培养基平板中均匀涂布消毒后的拟南芥种子后将平板放入4℃冰箱黑暗春化2-3d，然后在光照培养室中竖直平板培养拟南芥至发芽。在边长为100mm的正方形PDA平板中接种4个核盘菌767R45菌株的菌丝块，于20℃培养10d。在另外一个正方形1/2MS培养基平板中移栽入上述的拟南芥幼苗共100棵，将核盘菌767R45菌株和拟南芥幼苗平板对扣培养，在光照培养室中竖直平板，一段时间后观察拟南芥幼苗生长情况，统计根长及干重。

发芽率(％)＝(拟南芥发芽种子数/拟南芥种子总数)×100％

结果如图9所示，生防菌767R45的VOCs在拟南芥种子的萌发期处理，发芽率仅有46.67％，而对照组发芽率为100％。生防菌767R45的VOCs在拟南芥幼苗生长期处理，发芽率为100.00％，平均根长为1.07cm，干重可达173μg/棵；而对照组发芽率虽为100％，但平均根长仅有0.53cm，且干重仅达93μg/棵。

生防菌767R45的VOCs抑制拟南芥种子的萌发，但能促进拟南芥幼苗的生长，若应用于田间，应在植株发芽后期施药。生防菌767R45的VOCs能促进拟南芥幼苗的根长增长50.34％，生物学产量(干重)提高46.15％。

应说明的是：以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，并不用于限制本发明，尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但可视情况对上述各实施例中的技术方案进行修改或等同替换等，而这些改进均属于本发明保护范围之内。

Claims (8)

1.一种分离的核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum），所述的核盘菌的保藏编号为CCTCC NO:M2020419。

2.权利要求1所述的核盘菌的发酵液。

3.权利要求1所述的核盘菌的发酵滤液。

4.权利要求1所述的核盘菌的固态发酵过程中产生的挥发性气体。

5.权利要求1所述的核盘菌、或权利要求2所述的发酵液、或权利要求3所述的发酵滤液、或权利要求4所述的挥发性气体在制备成植物病原菌抑菌剂中的应用。

6.权利要求1所述的核盘菌在制备成生防菌剂中的应用。

7.权利要求1所述的核盘菌或权利要求4所述的挥发性气体在制备成蔬果贮藏防病剂中的应用。

8.权利要求4所述的挥发性气体在制备成植物促生剂中的应用。

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