CN109864910A - 一种具有抗衰老功能的虫草组合物及其制备方法和抗衰老护肤品 - Google Patents
一种具有抗衰老功能的虫草组合物及其制备方法和抗衰老护肤品 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗衰老功能的虫草组合物及其制备方法和抗衰老护肤品，具有抗衰老功能的虫草组合物包括以下重量份数的组分：蚕蛹虫草复合体水提取物1‑25份、蚕蛹虫草复合体醇提取物1‑25份、北虫草水提取物1‑25份和维生素C 1‑25份，能有效清除氧自由基、具有抗衰老、抗皱、抗过敏的功能。本发明还公开了具有抗衰老功能的虫草组合物的制备方法，该方法工艺简单，对设备要求低，能获得具有抗衰老、抗皱、抗过敏的功能的虫草组合物。本发明还公开了含有所述的具有抗衰老功能的虫草组合物的抗衰老护肤品，能提升皮肤角质层含水量，减轻皮肤细纹，具有良好的抗衰老作用。
Description
技术领域
本发明属于护肤品领域，具体涉及一种具有抗衰老功能的虫草组合物及其制备方法和抗衰老护肤品。
背景技术
蛹虫草(Cordyceps militaris)是由蛹草拟青霉感染鳞翅目昆虫的蛹，由上部分子实体与底部虫体两部分组成的复合体。它于1958首次在吉林省被发现，通过鉴定，与冬虫夏草是同一个属，定名叫蛹虫草。大多生长分布在云南、吉林、辽宁、内蒙古等地。多生于混交林或针、阔叶林地表土层中鳞翅目昆虫的蛹体上。在自然环境中，通常没有上部分子实体，只有极少部分会长出细而短的子实体。
现代药理研究证明，虫草素、虫草酸和多种氨基酸和微量元素不仅可以提高免疫力，并且对神经系统和心血管系统有良好的保护作用，蛹虫草其抗衰老、抗氧化、抗缺氧、抗疲劳和抗肿瘤作用也越来越受到人们的重视。蚕蛹药材的价值和食用价值可以与传统的冬虫夏草相媲美，具有良好的药物研发前景。蛹虫草分布广泛，因不同地区的蛹虫草有效成分不同，故药理作用也可能不同。
在生命代谢活动的过程中，会产生不同程度的自由基。它们可以单独存在，大多具有极强的氧化能力。包括超氧阴离子自由基(O2·)、羟自由基(·OH)和脂质自由基(ROO·)。自由基作为中间代谢物存在于人体组织中许多生化反应中。在正常情況下，人体内的自由基总是处于不断产生和不断消除的动态平衡中，但如果自由基过多产生或过少消除，就会对人体组织造成伤害，从而导致机体加速衰老和发生各种疾病。例如，在自由基的作用下，胶原蛋白会发生反应，使皮肤得不到足够的营养供应，造成皮肤组织活力下降，失去弹性，产生皱纹、全身皮肤老化、肤色暗沉等。同时，随着年龄的增大、自由基增多，自由基腐蚀体内蛋白细胞和脂肪细胞的程度也日益加深，脂褐素越积越多，从而导致色斑慢慢形成、显现。
因此，有必要研究一种能有效清除氧自由基、具有抗衰老、抗皱功能的虫草组合物，以减少自由基对人体的损伤。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种具有抗衰老功能的虫草组合物，能有效清除氧自由基、具有抗衰老、抗皱、抗过敏的功能。本发明还提供了具有抗衰老功能的虫草组合物的制备方法，该方法工艺简单，对设备要求低，能获得具有抗衰老、抗皱、抗过敏的功能的虫草组合物。本发明还提供了一种抗衰老护肤品，能提升皮肤角质层含水量，减轻皮肤细纹，具有良好的抗衰老作用。
本发明采用的技术方案是：一种具有抗衰老功能的虫草组合物，包括以下重量份数的组分：
优选的，具有抗衰老功能的虫草组合物中，蚕蛹虫草复合体水提取物、蚕蛹虫草复合体醇提取物、北虫草水提取物和维生素C的重量比为1:1:1:1。
优选的，蚕蛹虫草复合体水提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和水混合，进行提取，离心，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，离心，取沉淀，烘干，得到蚕蛹虫草复合体水提取物；蚕蛹虫草复合体和水的质量比为1:5-15。
更优选的，蚕蛹虫草复合体水提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和水混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，在8000rpm转速下离心10min，取沉淀，倒入平板中挥干，放入65℃烘箱烘干3h，得到蚕蛹虫草复合体水提取物；蚕蛹虫草复合体和水的质量比为1:10。
优选的，蚕蛹虫草复合体醇提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和甲醇混合，进行提取，离心，取上清，烘干，得到蚕蛹虫草复合体醇提取物；蚕蛹虫草复合体和甲醇的质量比为1:5-15。
更优选的，蚕蛹虫草复合体醇提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和甲醇混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，倒入平板，在65℃水浴下挥干3h，放入65℃烘箱烘干1h，得到蚕蛹虫草复合体醇提取物；蚕蛹虫草复合体和甲醇的质量比为1:10。
优选的，蚕蛹虫草复合体由以下方法制备得到：以家养的活体蓖麻蚕蛹为寄主，选择化蛹2～4天的蚕蛹，接种前蛹体表面用棉花蘸取少许75％酒精迅速擦洗消毒，再用无菌水洗去残留酒精。接种前削去蚕茧后放置2d，可有效去除病蛹及生命体征弱的蚕蛹，能在源头上控制污染；接种的蚕蛹虫草液体菌丝的活度越高；在超净工作台上采用注射法接种，接种剂量在0.3ml～0.5ml，接种后的蚕蛹僵化越快；接种部位选择蚕蛹翼翅正后方与第3环节交叉点，易操作且蚕蛹体液和菌液不易溢出；将接种的蚕蛹放入培养箱，前期不加盖，地面不补湿，空气湿度保持在60％～65％。22℃黑暗密闭培养，培养3～5d后蛹体开始出现僵化现象，及时剔除未被蚕蛹虫草菌感染和未僵化的蚕蛹；7～10d后气门处可见白色菌丝，菌丝完成营养生长后立即给予光照和温差刺激，用荧光灯均匀光照(300Ix)，22℃条件下培养14h，黑暗条件下13℃培养10h，以此为周期培养7～10d，以促进菌丝转色和原基的形成。地面全程补湿，空气湿度保持在80％～90％，全程通微风。子座完全形成后进入出草阶段。此时全天进行300Ix光照(散射光照应置于蚕蛹虫草的正上方，避免蚕蛹虫草由于趋光性弯曲生长，以保证虫草有良好的品质)，温度22℃，地面全程补湿.空气湿度保持在90％，菌丝完成营养生长后，给予300Ix光照和10℃温差刺激(300lx光照22℃培养14h，黑暗13℃培养10h为周期)培养7～10d能有效促进蚕蛹虫草菌丝转色和子座的形成，在此条件下出草率达98.5％，虫草平均鲜重达1.25g。
人工培育的蚕蛹虫草新鲜度高，能更好地保存各种活性成分，特别是具有抗氧化功能的活性成分，而且人工培养的蚕蛹虫草产量大，来源广，性价比高，一年四季都可产出，更有利于实现持续稳定的工业化生产。
优选的，北虫草水提取物由以下方法制备得到：将北虫草和水混合，进行提取，离心，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，离心，取沉淀，烘干，得到北虫草水提取物；北虫草和水的质量比为1:5-15。
更优选的，北虫草水提取物由以下方法制备得到：将北虫草和水混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，在8000rpm转速下离心10min，取沉淀，倒入平板中挥干，放入65℃烘箱烘干3h，得到北虫草水提取物；北虫草和水的质量比为1:10。
蚕蛹虫草水提取物、蚕蛹虫草醇提取物和北虫草水提取物中含有多种虫草多糖，多糖的储水性能和吸湿性能较强，能使皮肤角质层含水量增加，因此，有助于消除由于皮肤缺水干燥引起的干纹，增加皮肤水合度，恢复皮肤正常功能。酸性的维生素C，能松动皮肤表面高水合度坏死的角质层，避免角质层堆积引起的皮肤异常纹理，增加表皮透过率，使得皮肤对活性物的吸收度增加。单独的维生素C水溶液在受热的情况下容易被氧化成黄色，而搭配虫草提取物的组合物，在耐热耐寒挑战实验中，组合物的变色程度较维生素C单独组分的颜色变化要慢，因此虫草提取物具有减缓维生素C被氧化的功能。
优选的，蚕蛹虫草复合体和北虫草经超微粉碎机粉碎至1-100nm。
更优选的，将蚕蛹虫草复合体和北虫草在60-70℃温度下烘干5-7h，然后在-18℃温度下冷冻20-30min，再经超微粉碎机粉碎20-30min，得到粒径为1-100nm的蚕蛹虫草复合体和北虫草。
超微粉碎是一门研究粉体的结构尺度在1-100nm范围内的物质所具备的特有的现象和功能的科学技术，粉体尺度在该范围内的物质，在表面效应、体积效应、光学性质、力学性质及化学与催化性能等诸多方面都表现出于普通粉体不一样的性质，从而使物料在溶解性、分散性、吸附性等多方面的活性具备异于常态的高效能表现。
本发明采用超微粉碎法对原材料进行处理，最大限度的提高原材料中活性物的溶出率，有效提高原料的利用率，其优势和特点在于：(1)细胞级粉碎，有利于原料中活性成分的释放；(2)粉碎速度快，时间短，提高工作效率；(3)可低温粉碎，有利于保留生物活性成分；(4)节省原料，提高利用率降低成本；(5)全封闭系统，可有效地避免粉尘污染。本发明采用的超微粉碎技术属于纯物理加工，可以更好地保存虫草的全部活性成分，保证了产品的纯天然属性，是一种理想的加工手段，所有的生物活性物质都能被充分的利用，增加了虫草的利用率。
一种具有抗衰老功能的虫草组合物的制备方法，由以下方法制备：将蚕蛹虫草复合体水提取物、蚕蛹虫草复合体醇提取物、北虫草水提取物和维生素C混合，搅拌均匀，得到具有抗衰老功能的虫草组合物，避光低温保存。
一种含有所述的具有抗衰老功能的虫草组合物的抗衰老护肤品。
优选的，具有抗衰老功能的虫草组合物的质量占抗衰老护肤品总质量的1-10％。更优选的，具有抗衰老功能的虫草组合物的质量占抗衰老护肤品总质量的2-5％。最优选的，具有抗衰老功能的虫草组合物的质量占抗衰老护肤品总质量的4％。
优选的，抗衰老护肤品中还包括乳化剂、保湿剂、润肤剂、皮肤调理剂、增稠剂和防腐剂中的一种或几种。
优选的，乳化剂选自Montanov-82、Armlaceml-165和Montanov-68中的一种或几种。
优选的，保湿剂选自甘油、丙二醇、β-葡聚糖、银耳多糖、透明质酸钠、甜菜碱、1,3-丁二醇和1,2-己二醇中的一种或几种。
优选的，润肤剂选自棕榈酸乙基己酯、聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷、异壬酸异壬酯、C12-15醇苯甲酸酯、向日葵(HELIANTHUS ANNUUS)籽油、霍霍巴(SIMMONDSIACHINENSIS)籽油、牛油果树(BUTYROSPERMUM PARKII)果脂、角鲨烷、异构十六烷和凡士林中的一种或几种。
优选的，皮肤调理剂选自精氨酸、神经酰胺、尿囊素、生育酚乙酸酯、烟酰胺、白藜芦醇、熊果苷、视黄醇棕榈酸酯、D-泛醇、红没药醇、甘草酸二钾和光甘草定中的一种或几种。
优选的，增稠剂选自鲸蜡硬脂醇、卡波姆、羟乙基纤维素、黄原胶、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的一种或几种。
优选的，防腐剂为对羟基苯乙酮、甲基异噻唑啉酮、碘丙炔醇丁基氨甲酸酯、DMDM乙内酰脲、苯氧乙醇、乙基己基甘油、山梨酸钾、苯甲酸钠、辛酰羟肟酸和辛甘醇中的一种或几种。
优选的，抗衰老护肤品的剂型为乳液、霜剂、凝胶、面膜、爽肤水或其他。
更优选的，抗衰老护肤品的剂型为霜剂。
具体的，一种抗衰老护肤霜，包括以下重量百分比的组分：
上述各组分的重量百分比之和为100％。
所述的抗衰老护肤霜的制备方法，包括以下步骤：
1)将A相各组分加入主锅，搅拌(25HZ)升温至85℃，保温搅拌(25HZ)至物料溶解均匀，得到混合物A；
2)将B相各组分加入水锅，搅拌(25HZ)升温至85℃，保温搅拌(25HZ)至物料溶解均匀，得到混合物B；
3)将步骤2)得到的混合物B加入到步骤1)的混合物A中，抽真空至-0.03mpa，均质(50HZ)10min，搅拌降温至45℃，得到混合物C；
4)将C相各组分依次加入到步骤3)得到的混合物C中，搅拌(25HZ)均匀，检验合格出料，得到抗衰老护肤霜。
本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
1.本发明以蚕蛹虫草复合体水提取物、蚕蛹虫草复合体醇提取物、北虫草水提取物和维生素C复配组成具有抗衰老功能的虫草组合物，该具有抗衰老功能的虫草组合物具有良好的抗氧化效果，能有效清除氧自由基，可作为抗衰老、抗皱纹、抗过敏的化妆品的原料，而且价格便宜，来源广泛，易于获取，具有广阔的应用前景。
2.本发明的具有抗衰老功能的虫草组合物的制备方法工艺简单，对设备要求低，能获得具有抗衰老、抗皱、抗过敏的功能的虫草组合物。
3.本发明含有所述的具有抗衰老功能的虫草组合物的抗衰老护肤品能有效清除氧自由基，具有良好的抗衰老、抗皱纹、抗过敏的功效，对受试者的皮肤状况进行跟踪监测，在10周内能提升皮肤角质层含水量，减轻皮肤细纹，具有良好的抗衰老作用，而且不会引起皮肤过敏，适用人群广泛。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
蚕蛹虫草复合体由以下方法制备得到：以家养的活体蓖麻蚕蛹为寄主，选择化蛹2～4天的蚕蛹，接种前蛹体表面用棉花蘸取少许75％酒精迅速擦洗消毒，再用无菌水洗去残留酒精。接种前削去蚕茧后放置2d，可有效去除病蛹及生命体征弱的蚕蛹，能在源头上控制污染；接种的蚕蛹虫草液体菌丝的活度越高；在超净工作台上采用注射法接种，接种剂量在0.3ml～0.5ml，接种后的蚕蛹僵化越快；接种部位选择蚕蛹翼翅正后方与第3环节交叉点，易操作且蚕蛹体液和菌液不易溢出；将接种的蚕蛹放入培养箱，前期不加盖，地面不补湿，空气湿度保持在60％～65％。22℃黑暗密闭培养，培养3～5d后蛹体开始出现僵化现象，及时剔除未被蚕蛹虫草菌感染和未僵化的蚕蛹；7～10d后气门处可见白色菌丝，菌丝完成营养生长后立即给予光照和温差刺激，用荧光灯均匀光照(300Ix)，22℃条件下培养14h，黑暗条件下13℃培养10h，以此为周期培养7～10d，以促进菌丝转色和原基的形成。地面全程补湿，空气湿度保持在80％～90％，全程通微风。子座完全形成后进入出草阶段。此时全天进行300Ix光照(散射光照应置于蚕蛹虫草的正上方，避免蚕蛹虫草由于趋光性弯曲生长，以保证虫草有良好的品质)，温度22℃，地面全程补湿.空气湿度保持在90％，菌丝完成营养生长后，给予300Ix光照和10℃温差刺激(300lx光照22℃培养14h，黑暗13℃培养10h为周期)培养7～10d能有效促进蚕蛹虫草菌丝转色和子座的形成，在此条件下出草率达98.5％，虫草平均鲜重达1.25g。
北虫草购于超市。
将蚕蛹虫草复合体和北虫草在65℃温度下烘干6h，然后在-18℃温度下冷冻30min，再经超微粉碎机粉碎25min，得到粒径为1-100nm的蚕蛹虫草复合体和北虫草。
蚕蛹虫草复合体水提取物由以下方法制备得到：将粉碎后的蚕蛹虫草复合体和水混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，在8000rpm转速下离心10min，取沉淀，倒入平板中挥干，放入65℃烘箱烘干3h，得到蚕蛹虫草复合体水提取物；蚕蛹虫草复合体和水的质量比为1:10。
蚕蛹虫草复合体醇提取物由以下方法制备得到：将粉碎后的蚕蛹虫草复合体和甲醇混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，倒入平板，在65℃水浴下挥干3h，放入65℃烘箱烘干1h，得到蚕蛹虫草复合体醇提取物；蚕蛹虫草复合体和甲醇的质量比为1:10。
北虫草水提取物由以下方法制备得到：将北虫草和水混合，置于高压均质机中，在20℃温度下、210bar的压力下提取40min，在8000rpm转速下离心10min，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，在8000rpm转速下离心10min，取沉淀，倒入平板中挥干，放入65℃烘箱烘干3h，得到北虫草水提取物；北虫草和水的质量比为1:10。
实施例1
将上述得到的蚕蛹虫草复合体水提取物、蚕蛹虫草复合体醇提取物和北虫草水提取物分别用水配成6mg/mL的虫草提取物溶液，作为样品待测溶液，进行抗氧化活性测试。
抗氧化活性测试包括：
1.清除DPPH能力测定：
称取DPPH粉末7.8mg加无水乙醇100mL，制得0.2mmol/L的DPPH无水乙醇混合溶液。准确吸取200μL DPPH无水乙醇混合溶液和200μL样品待测溶液，震荡混匀后室温下避光放置30min。准确吸取200μL无水乙醇溶液和200μL样品待测溶液，震荡混匀。200μL蒸馏水和200μL DPPH无水乙醇混合液，震荡混匀。于酶标仪中测得其A517nm。
清除率(％)＝[1-(As-Ab)/Ac]×100％
式中：As为样品溶液和DPPH无水乙醇混合液各200μL的OD值；Ab为无水乙醇和样品溶液各200μL的OD值；Ac为DPPH无水乙醇混合液和蒸馏水各200μL的OD值。
2.清除超氧阴离子自由基能力的测定：
按照抗超氧阴离子自由基及产生超氧阴离子自由基试剂盒(南京建成海浩生物科技有限公司，货号：A052)说明书步骤进行操作，于酶标仪下测得其A550nm。蒸馏水作空白对照，维生素C(Vc)作阳性对照。
清除率(％)＝(A0-Ax)/A0×100％
式中：A0为对照管OD值；Ax为测定管OD值。
3.Fe2+螯合能力的测定
称取氯化亚铁2.5mg，加蒸馏水10mL，制成2mmol/L氯化亚铁溶液。称取菲啰嗪25.5mg，加蒸馏水10mL，制成5mmol/L菲啰嗪溶液。配置2、4、6、8、10mg/mL乙二胺四乙酸(EDTA)溶液各3mL。准确吸取300μL样品待测溶液、20μL菲啰嗪和5μL氯化亚铁溶液混匀做测定管，吸取300μL样品待测溶液、20μL菲啰嗪和5μL蒸馏水做空白对照。EDTA作阳性对照。酶标仪剧烈振荡1min，室温下放置10min，于酶标仪下测得其A562nm。
螯合能力(％)＝[A0-(As-Ac)]/A0×100％
式中：A0为对照组的OD值(使用蒸馏水代替样品)；As为样品的OD值；Ac为空白的OD值(使用蒸馏水代替氯化亚铁溶液)。
4.清除羟基自由基(·OH)的测定
根据羟基自由基测定试剂盒(南京建成海浩生物科技有限公司，货号：A018)说明书步骤进行操作，于酶标仪测得其A550nm。蒸馏水作空白对照，维生素C作阳性对照。
清除率(％)＝(A0-Ax)/(A0-Ab)×100％
式中：A0为对照管的OD值；Ax为测定管的OD值；Ab为空白管的OD值。
5.总抗氧化能力的测定
根据总抗氧能力(T-AOC)测定试剂盒(南京建成海浩生物科技有限公司，货号：A015-2)说明书步骤进行操作，于酶标仪下测得其A405nm。蒸馏水作空白对照，维生素C作阳性对照。
总抗氧化能力＝A0-Ax
式中：A0为测定管的OD值；Ax为对照管的OD值。
所有数据均为3次平行测定的平均值，表示为平均值±标准差(Mean±SD)。采用SPSS 19.0软件对试验结果进行统计分析，Duncan多重比较进行单因素方差分析，P＜0.05代表差异显著。
浓度为6mg/mL的蚕蛹虫草复合体水提取物溶液、蚕蛹虫草复合体醇提取物溶液和北虫草水提取物溶液和维生素C的抗氧化活性测试结果如表1所示。
表1抗氧化活性测试结果
从表1的测试结果可知，3种虫草提取物均具有良好的抗氧化作用，能有效清除氧自由基，将3种虫草提取物进行复配，所得的具有抗衰老功能的虫草组合物具有抗氧化、抗衰老、抗皱纹、抗过敏的功效。
实施例2
一种具有抗衰老功能的虫草组合物，包括以下重量份数的组分：
实施例3
一种具有抗衰老功能的虫草组合物，包括以下重量份数的组分：
实施例4
一种具有抗衰老功能的虫草组合物，包括以下重量份数的组分：
实施例5
一种抗衰老护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法包括以下步骤：
1)将A相各组分加入主锅，搅拌(25HZ)升温至85℃，保温搅拌(25HZ)至物料溶解均匀，得到混合物A；
2)将B相各组分加入水锅，搅拌(25HZ)升温至85℃，保温搅拌(25HZ)至物料溶解均匀，得到混合物B；
3)将步骤2)得到的混合物B加入到步骤1)的混合物A中，抽真空至-0.03mpa，均质(50HZ)10min，搅拌降温至45℃，得到混合物C；
4)将C相各组分依次加入到步骤3)得到的混合物C中，搅拌(25HZ)均匀，检验合格出料。
实施例6
一种抗衰老护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
实施例7
一种抗衰老护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
实施例8
一种抗衰老护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
对比例1
一种虫草护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
对比例2
一种虫草护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
对比例3
一种虫草护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
对比例4
一种含有维生素C的护肤霜，其各组分的重量百分比如表2所示，其制备方法同实施例5。
表2护肤霜各组分的重量百分比
将表2的9种护肤霜分别进行抗衰老测试。
(1)研究对象
选取健康志愿者135名。纳入标准：男女不限，年龄在28-40岁；有一定的面部或眼部皮肤松弛或面部眼部有细纹皱纹现象；身体健康，能配合试验，态度认真，能够按规范使用护肤霜并配合工作人员按要求完成评价工作；具有一定表述能力，能真实反应使用后的感受；志愿参加并签阅知情同意书，能严格遵守研究方案的要求，按研究方案要求使用产品并完成随访。
排除标准：妊娠或哺乳期妇女，敏感性皮肤面部皮肤破损或有影响观察面部状态的皮肤病者；面部使用过激光、化学剥脱术、肉毒素、皮肤填充或拉皮手术，近1个月内有晒伤，当前或近3个月或拉皮手术，近1个月内有晒伤，当前或近3个月内参加过其他面部临床研究或接受过皮肤科医生治疗者。
终止和剔除标准：受试者要求中止试验；受试者的顺应性不好；由于不良反应或特殊生理病理变化等无法继续试验；测试中使用其他对试验有影响的护肤品，过多接受紫外线照射等。
(2)产品使用与测试安排
选择符合纳入标准的志愿者135人，平均年龄(34±2.12)岁；将志愿者随机平均分为9组，每组15人，分别使用表2中的9种护肤霜。志愿者每天早晚各用护肤霜，连续10周。在试验期间不与其他抗皱护肤品同用。在使用0周、2周、4周、6周、8周和10周各随访1次，共计6次，要求志愿者每次随访为日间同一时间，且每次测试前，志愿者用清水清洗面部，用纸轻轻吸干面部水分，在温度20±2℃、相对湿度50％环境下，静坐30min后由技术员进行皮肤角质层含水量测量和面部成像，并收集志愿者的主观评价。
(1)皮肤角质层含水量测量：使用水分测试仪测量左右脸部同一区域位角质层含水量，测量4次取平均值，水分测试仪Corneometer(CM825，德国CK公司)。
(2)面部成像：采用VISIA面部图像分析系统对志愿者面部进行拍照(正面，左、右侧)。提取纹理分值，取平均值，分数越高，皮肤皱纹越多。
VSIA面部图像分析系统(Canfiemld公司，美国)。
(3)志愿者的主观评价：志愿者在随访时完成护肤霜使用调查问卷，根据个人主观感受对产品功效进行评价。
效果判断标准：
效果明显：自觉面部皮肤细纹明显减少；
有效：自觉皮肤细纹略有减少或皮肤粗糙程度有所改善；
无效：自觉症状无改变，或改变不明显；
显效率(％)为感觉有效和效果明显的人数占该组总人数的百分比。
皮肤角质层含水量测量、面部成像和志愿者的主观评价结果分别如表3-5所示。
表3皮肤角质层含水量平均上升率(％)
由表3可知，同0周值相比，各组在使用护肤霜2周、4周、6周、8周和10周后，皮肤角质层含水量逐渐上升。其中，第9组志愿者的角质层含水量较其他组志愿者角质层含水量都低，原因为维生素C在面部皮肤上使用时，维生素C本身pH相对较低，容易改变角质层层的渗透性，增加皮肤角质层水分蒸发，因此角质层含水量提升率较其他实验组低。第2-5组志愿者的角质层含水量提高率较第6-9组效果显著，有利于减少面部皮肤由于缺少保湿而引发的干纹细纹。
第2组和第4组与第6-9组的护肤霜相比，在复配活性物与单独活性物总含量相同的情况下，第2组和第4组的抗衰老护肤霜对皮肤角质层含水量提高率显著，即在活性物总含量相同的情况下，四种活性物复配的护肤品较各活性物组分单独使用效果更好。
第2组与第3组相比，虽然第3组护肤品中虫草组合物的含量较低，但其效果与第2组的效果相比只是略有下降，并不存在显著性差异，说明四种活性物复配的优越性。而且与第6-9组的护肤霜(单独使用活性物)相比，其对皮肤角质层含水量提高率提升高约5倍，进一步说明，即使在总活性物含量较低的情况下，四种活性物复配的护肤品仍较各活性物组分单独使用的活性更高。
因此，本发明的抗衰老护肤霜对提升皮肤角质层含水量具有显著作用，其中的蚕蛹虫草水提取物、蚕蛹虫草醇提取物、北虫草水提取物和维生素C起到协同增效的作用。
表4皮肤纹理分值平均降低率(％)
由表4可知，同0周值相比，使用护肤霜2周、4周、6周、8周和10周后，皮肤纹理分值呈不同程度的下降。其中，第2-5组皱纹消除效果较其他组明显，说明抗衰老护肤霜有很强的改善面部皱纹及细纹的功效，也不会因长时间使用而产生皮肤耐受性。
第2组和第4组与第6-9组的护肤霜相比，在复配活性物与单独活性物总含量相同的情况下，第2组在第10周皮肤纹理分值平均降低率为15.3％，第4组在第10周皮肤纹理分值平均降低率为12.6％，第6-9组在第10周皮肤纹理分值平均降低率仅为2.3-6.2％，第2组和第4组的皮肤纹理分值平均降低率明显高于第6-9组，说明在活性物总含量相同的情况下，四种活性物复配的护肤品较各活性物组分单独使用效果更好。
第2组与第3组相比，因为第3组护肤品中虫草组合物的含量较低，其效果与第2组的效果相比略有下降，但与第6-9组的护肤霜(单独使用活性物)相比，其皮肤纹理分值平均降低率增大约2-5倍，进一步表明，即使在总活性物含量较低的情况下，四种活性物复配的护肤品仍较各活性物组分单独使用的活性更高，说明四种活性物复配的优越性。
因此，本发明的抗衰老护肤霜对减少皮肤纹理具有显著作用，其中的蚕蛹虫草水提取物、蚕蛹虫草醇提取物、北虫草水提取物和维生素C起到协同增效的作用。
表5志愿者的主观评价
由表5可知，在复配活性物与单独活性物总含量相同的情况下，第2组和第4组志愿者的自我评价显效率为80-87％，而第6-9组志愿者的自我评价显效率仅为26-33％，使用本发明的护肤霜的志愿者的自我评价显效率更高，且差异明显。说明在活性物总含量相同的情况下，四种活性物复配的护肤品较各活性物组分单独使用效果更好。
第2组与第3组相比，由于第3组护肤品中虫草组合物的含量较低，志愿者评价的显效率低于第2组，但仍高于第6-9组，这进一步表明，即使在总活性物含量较低的情况下，四种活性物复配的护肤品仍比各活性物组分单独使用的效果更明显，使用者满意度更高，说明四种活性物复配的优越性。
因此，本发明的抗衰老护肤霜在提高皮肤角质层含水量、消除皮肤纹理、改善皮肤状态方面具有显著作用，其中的蚕蛹虫草水提取物、蚕蛹虫草醇提取物、北虫草水提取物和维生素C起到协同增效的作用。
优异的抗衰老效果是因为蚕蛹虫草水提取物、蚕蛹虫草醇提取物和北虫草水提取物中含有多种虫草多糖，多糖的储水性能和吸湿性能较强，能使皮肤角质层含水量增加，因此，有助于消除由于皮肤缺水干燥引起的干纹，增加皮肤水合度，恢复皮肤正常功能。酸性的维生素C，能松动皮肤表面高水合度坏死的角质层，避免角质层堆积引起的皮肤异常纹理，增加表皮透过率，使得皮肤对活性物的吸收度增加。单独的维生素C水溶液在受热的情况下容易被氧化成黄色，而搭配虫草提取物的组合物，在耐热耐寒挑战实验中，组合物的变色程度较维生素C单独组分的颜色变化要慢，因此虫草提取物具有减缓维生素C被氧化的功能。
Claims (10)
1.一种具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，包括以下重量份数的组分：
2.根据权利要求1所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，蚕蛹虫草复合体水提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和水混合，进行提取，离心，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，离心，取沉淀，烘干，得到蚕蛹虫草复合体水提取物；蚕蛹虫草复合体和水的质量比为1:5-15。
3.根据权利要求1所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，蚕蛹虫草复合体醇提取物由以下方法制备得到：将蚕蛹虫草复合体和甲醇混合，进行提取，离心，取上清，烘干，得到蚕蛹虫草复合体醇提取物；蚕蛹虫草复合体和甲醇的质量比为1:5-15。
4.根据权利要求2或3所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，蚕蛹虫草复合体经超微粉碎机粉碎至1-100nm。
5.根据权利要求1所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，北虫草水提取物由以下方法制备得到：将北虫草和水混合，进行提取，离心，取上清，减压浓缩，加入3倍体积的95％乙醇，置于4℃冰箱过夜，用无水乙醇进行清洗，离心，取沉淀，烘干，得到北虫草水提取物；北虫草和水的质量比为1:5-15。
6.根据权利要求5所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，其特征在于，北虫草经超微粉碎机粉碎至1-100nm。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的具有抗衰老功能的虫草组合物的制备方法，其特征在于，将蚕蛹虫草复合体水提取物、蚕蛹虫草复合体醇提取物、北虫草水提取物和维生素C混合，搅拌均匀，得到具有抗衰老功能的虫草组合物，避光低温保存。
8.一种抗衰老护肤品，其特征在于，含有权利要求1-6中任一项所述的具有抗衰老功能的虫草组合物，且具有抗衰老功能的虫草组合物的质量占抗衰老护肤品总质量的1-10％。
9.根据权利要求8所述的抗衰老护肤品，其特征在于，抗衰老护肤品中还包括乳化剂、保湿剂、润肤剂、皮肤调理剂、增稠剂和防腐剂中的一种或几种。
10.根据权利要求8所述的抗衰老护肤品，其特征在于，抗衰老护肤品的剂型为乳液、霜剂、凝胶、面膜或爽肤水。
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- 2019-03-12 CN CN201910183547.2A patent/CN109864910B/zh active Active
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