CN109852562A

CN109852562A - 一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法

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Publication number: CN109852562A
Application number: CN201910137640.XA
Authority: CN
Inventors: 王荣峰; 张�林; 褚刚; 郭中成
Original assignee: Shandong Jingqing Agricultural Science & Technology Co Ltd
Current assignee: Shandong Jingqing Agricultural Science & Technology Co Ltd
Priority date: 2019-02-25
Filing date: 2019-02-25
Publication date: 2019-06-07

Abstract

本发明公开了一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，涉及微生物技术领域，解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，活化培养基包括可溶性淀粉1.1‑1.8%，大豆蛋白胨1.3‑2%，磷酸氢二钾0.3‑0.7%，甘油0.2‑0.4%，水95.1‑97.1%；发酵培养基包括甜菜糖蜜4‑6%，甘油0.2‑0.3%，大豆提取物3.1‑5.6%，酵母浸膏0.7‑1.2%，添加剂0.769‑1.36%，水85.54‑91.231%。本发明采用低成本水溶性的配方发酵培养基，提高发酵液的菌量和芽孢率，解决了传统发酵培养基存在的发酵液菌量低、菌株发酵密度低与产孢率低等问题。

Description

一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法。

背景技术

解淀粉芽孢杆菌是我国农业部批准的生防菌之一，与枯草芽孢杆菌的亲缘性很高，解淀粉芽孢杆菌能够分泌大量的抑菌物质，对农作物致病菌具有很好的抑制作用。解淀粉芽孢杆菌是一种内生共生菌，对农作物和人畜均无害，解淀粉芽孢杆菌已成为我国应用最广泛的农业生防菌之一，具有植物农业预防或植物病害控制的功效。

目前，行业内发酵解淀粉芽孢杆菌通常用粉碎的玉米粉或者豆粕粉等农副产品作为发酵培养基的原料来降低生产成本，虽然成本较低，但发酵后的发酵液菌量较低，菌株发酵的密度和产孢率较低。另外，发酵液中还会残留大量的玉米粉和豆粕粉，一方面造成原料浪费，另一方面容易堵塞设备管道、阀门、喷雾器头、滴灌头等，不利于工业化生产和相关产品的推广应用。

发明内容

根据现有技术中存在的技术缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，采用低成本水溶性的配方发酵培养基，提高发酵液的菌量和芽孢率，解决传统发酵培养基存在的发酵液菌量低、菌株发酵密度低与产孢率低等问题。

为了实现本发明的技术目的，本发明一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法的技术方案是：

一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，所述解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，所述活化培养基包括可溶性淀粉1.1-1.8%，大豆蛋白胨1.3-2%，磷酸氢二钾0.3-0.7%，甘油0.2-0.4%，水95.1-97.1%；所述发酵培养基包括甜菜糖蜜4-6%，甘油0.2-0.3%，大豆提取物3.1-5.6%，酵母浸膏0.7-1.2%，添加剂0.769-1.36%，水85.54-91.231%。

作为本发明的进一步改进，所述添加剂包括硫酸锰0.009-0.02%，氯化镁0.4-0.6%，磷酸氢二钾0.11-0.19%，磷酸二氢钾0.25-0.55%。

作为本发明的进一步改进，所述活化培养的条件为：pH值6.5-8.0，培养温度36-39℃，种子罐装液量50-70%，活化时间6-9h。

作为本发明的进一步改进，所述发酵培养的条件为：pH值6.5-8.0，发酵罐装液量50-70%，接种量5-10%(V/V)，发酵温度36-39℃，发酵时间17-21h。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明采用低成本水溶性的配方发酵培养基，提高发酵液的菌量和芽孢率，解决了传统发酵培养基存在的发酵液菌量低、菌株发酵密度低与产孢率低等问题，发酵周期只需17-21h，发酵周期短，发酵液水溶性好，杂质含量低，二次加工方便，有利于工业化生产和产品的推广应用。

具体实施方式

为对本发明有益效果作进一步阐述，进行了以下具体实施例，特别说明的是，以下具体实施例旨在更好的理解本发明，绝不仅限于本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例中一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法以1吨种子罐，10吨发酵罐为例。

实施例1

一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，活化培养基包括可溶性淀粉1.2%，大豆蛋白胨1.4%，磷酸氢二钾0.3%，甘油0.2%，水96.9%；发酵培养基包括甜菜糖蜜4%，甘油0.2%，大豆提取物3.1%，酵母浸膏0.8%，添加剂0.809%，水91.091%。

添加剂包括硫酸锰0.009%，氯化镁0.4%，磷酸氢二钾0.12%，磷酸二氢钾0.28%。

活化培养的条件为：pH值6.6，培养温度36℃，种子罐装液量55%，活化时间6h。

发酵培养的条件为：pH值6.6，发酵罐装液量55%，接种量10%(V/V)，发酵温度36℃，发酵时间17.6h。

培养结束，发酵液菌量为162亿/mL，芽孢率为97.3%。

实施例2

一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，活化培养基包括可溶性淀粉1.8%，大豆蛋白胨1.9%，磷酸氢二钾0.7%，甘油0.4%，水95.2%；发酵培养基包括甜菜糖蜜6%，甘油0.3%，大豆提取物5.5%，酵母浸膏1.2%，添加剂1.35%，水85.65%。

添加剂包括硫酸锰0.02%，氯化镁0.6%，磷酸氢二钾0.18%，磷酸二氢钾0.55%。

活化培养的条件为：pH值7.9，培养温度39℃，种子罐装液量50%，活化时间9h。

发酵培养的条件为：pH值7.9，发酵罐装液量70%，接种量7.1%(V/V)，发酵温度39℃，发酵时间17.1h。

培养结束，发酵液菌量为169亿/mL，芽孢率为96.5%。

实施例3

一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，活化培养基包括可溶性淀粉1.5%，大豆蛋白胨1.7%，磷酸氢二钾0.5%，甘油0.3%，水96%；发酵培养基包括甜菜糖蜜5%，甘油0.25%，大豆提取物4.3%，酵母浸膏1.0%，添加剂0.98%，水88.47%。

添加剂包括硫酸锰0.01%，氯化镁0.5%，磷酸氢二钾0.16%，磷酸二氢钾0.31%。

活化培养的条件为：pH值7.3，培养温度37℃，种子罐装液量60%，活化时间7.5h。

发酵培养的条件为：pH值7.2，发酵罐装液量70%，接种量8.6%(V/V)，发酵温度37℃，发酵时间17.3h。

培养结束，发酵液菌量为165亿/mL，芽孢率为97.2%。

以上所述，仅是本发明的较好实施例，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实例所作的任何简单修改、变换材料等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims

1.一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌的培养以解淀粉芽孢杆菌为菌种，经活化培养基活化培养后接种到发酵培养基中进行发酵培养，所述活化培养基包括可溶性淀粉1.1-1.8%，大豆蛋白胨1.3-2%，磷酸氢二钾0.3-0.7%，甘油0.2-0.4%，水95.1-97.1%；所述发酵培养基包括甜菜糖蜜4-6%，甘油0.2-0.3%，大豆提取物3.1-5.6%，酵母浸膏0.7-1.2%，添加剂0.769-1.36%，水85.54-91.231%。

2.根据权利要求1所述的一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于：所述添加剂包括硫酸锰0.009-0.02%，氯化镁0.4-0.6%，磷酸氢二钾0.11-0.19%，磷酸二氢钾0.25-0.55%。

3.根据权利要求2所述的一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于：所述活化培养的条件为：pH值6.5-8.0，培养温度36-39℃，种子罐装液量50-70%，活化时间6-9h。

4.根据权利要求3所述的一种以水溶原料培养解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于：所述发酵培养的条件为：pH值6.5-8.0，发酵罐装液量50-70%，接种量5-10%(V/V)，发酵温度36-39℃，发酵时间17-21h。