CN109845953A

CN109845953A - 一种桑叶脱涩处理工艺及其超微粉

Info

Publication number: CN109845953A
Application number: CN201811649328.0A
Authority: CN
Inventors: 姚正颖; 孙力军; 侯北伟; 王松均
Original assignee: Institution Of Comprehensive Utllization Of Wild Plants All China Federation Of Supply And Maketing C00peratives
Current assignee: Institution Of Comprehensive Utllization Of Wild Plants All China Federation Of Supply And Maketing C00peratives
Priority date: 2018-12-30
Filing date: 2018-12-30
Publication date: 2019-06-07

Abstract

本发明公开了发表了一种桑叶脱涩处理工艺及其超微粉。该工艺主要以一种薏苡发酵物作为脱涩剂结合三次汽蒸和热风干燥的方法对霜桑叶进行脱涩。本发明以较简单的工序解决了桑叶的涩口和青臭气问题，不仅保留了桑叶特有的滋味和清香，还增添了独特的醇香和酯香，滋气味层次感丰富。所制备的脱涩桑叶超微粉主要营养成分保留率高，对α‑葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制效果明显，可作为食品基料开发降糖降脂的健康食品。

Description

一种桑叶脱涩处理工艺及其超微粉

技术领域

本发明涉及一种桑叶脱涩处理工艺，具体内容涉及桑叶的脱涩处理及其超微粉的制备，属于桑产品加工技术领域。

背景技术

桑叶味甘、苦，性寒，归肺、肝经，有疏散风热、清肺润燥、清肝明目之效，以初霜后采收为佳。现代医学研究表明桑叶富含多种生物活性物质，如黄酮、多酚、多糖、生物碱、植物甾醇、γ-氨基丁酸等，具有降血糖、降血压、降血脂、抗病毒等保健作用。桑叶自古以来即是传统的药食两用植物，随着现代消费人群对健康食品的追求，食用桑叶产品越来越受到关注，桑叶已成为天然保健食品的重要原料。

将桑叶加工成桑叶粉可作为一种食品添加剂制成形式多样的桑叶产品。而桑叶中的某些物质如鞣质、有机酸等会给产品带来涩味、青气味重等不良口感，霜桑叶尤甚，作为食用，难以迎合消费者的需求。

在现有技术中，专利CN 1081901C公开了一种桑叶保健制品的脱涩方法，通过汽蒸和阴干，重复9-10次，进行脱涩制成桑叶茶。该方法汽蒸次数过多，桑叶颜色发黄，破坏桑叶营养成分以及桑叶特有的清香和滋味。专利201710562991.6公开了一种桑叶除臭脱色处理工艺，在桑叶茶渥堆脱涩工序中加入脱涩剂，在汽蒸除臭工序中加入除臭剂，经漂洗过滤、二次汽蒸和增香剂烘焙提香，去除桑茶的苦涩味和异味。该方法工序繁琐，加入的除臭剂需要通过漂洗去除，该过程易损失桑叶营养，且加入了增香剂改变了桑叶特有的清香和滋味。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种以薏苡发酵物作为脱涩剂结合汽蒸脱涩的桑叶脱涩处理工艺，该方法以较简单的工序解决了桑叶的口感不佳问题，所制备的脱涩桑叶超微粉主要营养成分保留率高，可作为食品基料生产桑叶健康食品。

本发明目的可通过以下技术方案实现：

一种桑叶脱涩处理工艺，包括以下步骤：

（1）霜后采摘无病虫害、无污染的新鲜桑叶，清水洗净晾干，切除叶梗，叶片切条，蒸汽杀青摊晾；

（2）按桑叶条重量的50~95%均匀喷洒薏苡发酵物，揉捻搅拌均匀，铺陈于密闭容器中，于20~40℃静置反应4~12小时，60~65℃热风干燥110~150分钟；

（3）将干燥桑叶条铺于蒸盘2~4厘米厚，待上汽后蒸5~10分钟，重复步骤（2）；

（4）重复步骤（3），继续升温至90~95℃热风干燥10~20分钟，干燥至含水量在5%以下。

所述步骤（1）中的蒸汽杀青是将桑叶条铺于蒸盘2~4厘米厚，待上汽后蒸3~5分钟。

所述步骤（2）中的薏苡发酵物采用以下步骤制备：

A. 活化酵母菌种；

B. 按重量份配成薏苡发酵培养基，含5-30份薏苡粉、10-20份乳清粉、5-15份蔗糖、余量用水补足，经高温高压灭菌后接入酵母菌液3~6份，控温18-30℃，摇瓶150~200rpm发酵1~3天；

C. 发酵结束后冷冻离心取发酵液上清液，冻干；

D. 冻干粉配成20~50%质量分数的水溶物即得薏苡发酵物。

所述薏苡发酵物制备步骤A中所用的酵母菌种由酵母属菌株(Saccharomycessp.)和克鲁维酵母属菌株(Kluyveromycessp.)复配而得，优选酿酒酵母、啤酒酵母、面包酵母以及乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母，复配比例为1:1~4:1 (按菌落数计)。

所述薏苡发酵物制备步骤B中的酵母菌液活菌接入量为1.21×10⁸ ~2.39×10¹⁰CFU/mL。

按照本发明所述的方法制备脱涩桑叶超微粉的平均粒径在20μm以下。

按照本发明所述的方法制备脱涩桑叶超微粉可作为食品基料应用于降糖降脂的健康食品。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

（1）本发明的桑叶脱涩处理工艺操作流程简单，制备的桑叶超微粉脱涩增香明显。薏苡发酵物能有效与桑叶中的单宁类物质结合，极大程度地减少了桑叶的涩味，保留住桑叶的特有滋味和清香；而且发酵物、桑叶中的有机酸、醇类等成分相互作用后给桑叶超微粉增添了独特的醇香和酯香，口感好，层次感强。

（2）本发明中经脱涩处理制备的桑叶超微粉营养成分保留率高，对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制效果明显，适宜作为食品基料开发降糖降脂的健康食品。

附图说明

图1热风干燥处理、实施例1、对比例制备的桑叶超微粉对α-葡萄糖苷酶抑制作用的比较图。

图2热风干燥处理、实施例1、对比例制备的桑叶超微粉对胰脂肪酶抑制作用的比较图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

1、制备薏苡发酵物

（1）酵母菌株Saccharomyces cerevisiae DC-2和Kluyveromyces marxianus Y-3单菌落分别接种于YPD液体培养基，30℃、180rpm培养2天，活化菌株。

（2）按2%的接种量将活化好的两株酵母菌分别转接至YPD液体培养基，30℃、180rpm培养1天，菌落计数S. cerevisiae DC-2为2.52×10⁸ CFU/mL，K. marxianus Y-3为1.13×10⁸ CFU/mL，二者按菌落数之比为1:1复配成种子液，活菌数为1.56×10⁸ CFU/mL。

（3）按重量份配成薏苡发酵培养基，含20份薏苡粉、10份乳清粉、8份蔗糖、余量用水补足，经高温高压灭菌，接入复配种子液3份，控温30℃，摇瓶200rpm发酵2天；

（3）发酵结束后冷冻离心取发酵液上清液，冻干；

（4）冻干粉配成50%质量分数的水溶物即得薏苡发酵物。

2、桑叶脱涩处理

（2）按桑叶条重量的95%均匀喷洒50%薏苡发酵物，揉捻搅拌均匀，铺陈于密闭容器中，于28℃静置反应12小时， 65℃热风干燥120分钟；

（3）将干燥桑叶条铺于蒸盘2~4厘米厚，待上汽后蒸6分钟，重复步骤（2）；

（4）重复步骤（3），继续升温至95℃热风干燥20分钟，干燥至含水量在5%以下。

3、处理后的桑叶干品利用高速粉碎机粉碎至80目，再经气流超微粉碎机制备脱涩桑叶超微粉，平均粒径在20μm以下。

实施例2：

1、制备薏苡发酵物

（1）酵母菌株Saccharomyces cerevisiae DC-2和Kluyveromyces lactis Y-1单菌落分别接种于YPD液体培养基，30℃、180rpm培养2天，活化菌株。

（2）按5%的接种量将活化好的两株酵母菌分别转接至YPD液体培养基，30℃、180rpm培养1天，菌落计数S. cerevisiae DC-2为8.9×10⁹ CFU/mL，K. lactis Y-1为3.55×10⁹ CFU/mL，二者按菌落数之比为4:1复配成种子液，活菌数为6.84×10⁹ CFU/mL。。

（3）按重量份配成薏苡发酵培养基，含30份薏苡粉、20份乳清粉、5份蔗糖、余量用水补足，经高温高压灭菌，接入复配种子液6份，控温30℃，摇瓶180rpm发酵3天；

（3）发酵结束后冷冻离心取发酵液上清液，冻干；

（4）冻干粉配成30%质量分数的水溶物即得薏苡发酵物。

2、桑叶脱涩处理

（2）按桑叶条重量的95%均匀喷洒30%薏苡发酵物，揉捻搅拌均匀，铺陈于密闭容器中，于37℃静置反应5小时，60℃热风干燥150分钟；

（3）将干燥桑叶条铺于蒸盘2~4厘米厚，待上汽后蒸8分钟，重复步骤（2）；

（4）重复步骤（3），继续升温至90℃热风干燥10分钟，干燥至含水量在5%以下。

对比例：

将实施例1里的薏苡发酵物替换成水，对桑叶进行和实施例1相同的脱涩处理，作为对比例。

1、采用《中国药典》（2015版）中的鞣质含量测定（通则2202），对实施例和对比例中桑叶超微粉中的鞣质含量进行测定，检测结果如表1所示。超微粉之间感官上的差异如表2所示。可以看出，实施例1与热风干燥处理相比，鞣质减少了84.61%，是对比例中鞣质减少量的2.45倍；从感官指标来看，实施例1的桑叶超微粉与对比例相比，明显脱涩增香，口感更好，层次感更丰富。

表1 实施例1与对比例的桑叶超微粉鞣质含量比较

注：桑叶经热风干燥处理（65℃热风干燥120分钟，95℃热风干燥20分钟）制备超微粉的鞣质含量为5.35±0.09 mg/g。

表2实施例1桑叶超微粉与对比例桑叶超微粉感官比较

2、采用水提醇沉法提取桑叶超微粉的粗多糖。取2 g桑叶超微粉，按料液比1:30，90℃水浴，搅拌提取3小时；抽滤，保留滤液，滤渣重复上述操作提取一次，合并两次滤液，加入80%乙醇过夜沉淀，离心取沉淀，冻干，得粗多糖。采用硫酸-苯酚法检测实施例和对比例中桑叶超微粉的粗多糖含量，见表3。可以看出，按实施例1与对比例的工艺处理桑叶制备多糖，多糖含量较热风干燥处理分别增加了44.09%和21.73%，实施例1多糖增加量是对比例中的2.02倍。

表3 实施例1与对比例1的桑叶超微粉多糖含量比较

注：桑叶经热风干燥处理（65℃热风干燥120分钟，95℃热风干燥20分钟）制备超微粉的多糖含量为78.30±0.88 mg/g。

3、采用水提法提取桑叶超微粉的DNJ。取0.5 g桑叶超微粉，按料液比1:70，80 ℃水浴，搅拌提取2 小时，抽滤，滤渣再加15 mL纯净水重复提取一次，合并两次滤液，用纯净水定容至50 mL，即得样品提取液。

DNJ的衍生化：取DNJ提取液（或标准液）300 μL于10.0 mL离心管中，加入0.4 mol/L的硼酸钾缓冲溶液（pH 8.5）300 μL，再加入5 mmol/L的FMOC-Cl（溶于乙腈中）300 μL，混匀，25 ℃水浴20 min。加入1 mol/L的甘氨酸300 μL中和剩余的FMOC-Cl以终止反应，加入体积分数为1%的醋酸液300 μL及超纯水1 200 μL稀释，6 000 r/min离心10 min，再以0.45μm微孔滤膜过滤器过滤，收集滤液备用。

高效液相色谱（HPLC）条件：色谱柱：C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.1%醋酸（50∶50，V/V）；流速1.0 mL/min；柱温25 ℃；进样量10 μL；紫外检测器，检测波长254 nm。

实施例1和对比例中桑叶超微粉的DNJ含量如表4。可以看出，按实施例1与对比例的工艺处理桑叶，DNJ提取量较热风干燥处理分别增加了22.32%和2.72%，实施例1 DNJ增加量是对比例中8.21倍。

表4 实施例1与对比例1的桑叶超微粉DNJ含量比较

注：桑叶经热风干燥处理（65℃热风干燥120分钟，95℃热风干燥20分钟）制备超微粉的DNJ含量为2.33±0.06 mg/g。

4、制备桑叶超微粉醇提物，测定对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。取10 g桑叶超微粉，加入150 mL 75%乙醇浸提24小时；抽滤，滤液60℃以下减压回收乙醇，得稠浸膏，放入60℃真空干燥箱中减压干燥24h，即得样品。

按表5各取一定量磷酸钾缓冲液、酶溶液、底物和待测液于96孔板中，37℃孵育30min后，加终止剂碳酸钠溶液，于405nm处测定吸光值。α-葡萄糖苷酶抑制率按以下公式计算：

其中，A_E为不加样品时的吸光值；A_EB为不加样品且不加酶液时的吸光值；A_I为加入抑制剂时的吸光值；A_IB为加入抑制剂但未加酶液时的吸光值。

表5α-葡萄糖苷酶酶活测定体系

附图1表明，热风干燥处理、实施例1、对比例桑叶超微粉对α-葡萄糖苷酶的半数抑制率分别为1.82 mg/mL、1.23 mg/mL、0.86 mg/mL。可以看出，实施例1的脱涩桑叶超微粉对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最好，可应用于开发降糖健康食品。

5、制备桑叶超微粉醇提物，测定对胰脂肪酶的抑制作用。

醇提物的制备同前。按表1各取一定量Tris-HCl（pH 7.4）缓冲液、酶溶液、底物和待测液于96孔板中，37℃孵育20 min后，立即于405 nm处测定吸光值。胰脂肪酶抑制率按以下公式计算：

其中，A _E为不加样品时吸光值；A _I为加入抑制剂时得吸光值；A _IB为加入抑制剂但未加底物和酶液时吸光值。

表6胰脂肪酶酶活测定体系

附图2表明，热风干燥处理、实施例1、对比例桑叶超微粉对胰脂肪酶的半数抑制率分别为2.12 mg/mL、1.84mg/mL、1.29 mg/mL。可以看出，实施例1的脱涩桑叶超微粉对胰脂肪酶的抑制作用最好，可应用于开发降脂健康食品。

Claims

1.一种桑叶脱涩处理工艺，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种桑叶脱涩处理工艺，其特征在于，所述蒸汽杀青是将桑叶条铺于蒸盘2~4厘米厚，待上汽后蒸3~5分钟。

3.根据权利要求1所述的一种桑叶脱涩处理工艺，其特征在于，所述的薏苡发酵物采用以下步骤制备：

（1）活化酵母菌种；

（2）按重量份配成薏苡发酵培养基，含5-30份薏苡粉、10-20份乳清粉、5-15份蔗糖、余量用水补足，经高温高压灭菌后接入酵母菌液3~6份，控温18-30℃，摇瓶150~200 rpm发酵1~3天；

（3）发酵结束后冷冻离心取发酵液上清液，冻干；

（4）冻干粉配成20~50%质量分数的水溶物即得薏苡发酵物。

4.根据权利要求3所述的一种桑叶脱涩处理工艺，其特征在于，薏苡发酵物所用的酵母菌种由酵母属菌株(Saccharomyces sp.)和克鲁维酵母属菌株(Kluyveromycessp.)复配而得，优选酿酒酵母、啤酒酵母、面包酵母以及乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母，复配比例为1:1~4:1 (按菌落数计)。

5.根据权利要求3所述的一种桑叶脱涩处理工艺，其特征在于，酵母菌液活菌接入量为1.21×10⁸ ~2.39×10¹⁰ CFU/mL。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法制备脱涩桑叶超微粉，其特征在于，超微粉的平均粒径在20μm以下。

7.根据权利要求6所述方法制备脱涩桑叶超微粉，其特征在于，可作为食品基料应用于降糖降脂的健康食品。