CN109843892B - 噁二氮杂卓酮衍生物及其在治疗乙型肝炎感染中的用途 - Google Patents

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Abstract

本文提供了可用于在对其有需要的受治疗者中治疗HBV感染的式(IA)和(III)的化合物，其药物组合物，以及在受治疗者中抑制、制止或预防HBV感染的方法。
Figure DDA0001982694800000011
Figure DDA0001982694800000012

Description

噁二氮杂卓酮衍生物及其在治疗乙型肝炎感染中的用途
相关专利申请
本专利申请要求提交于2016年6月29日的美国临时专利申请62/356,487；以及提交于2017年5月26日的美国临时专利申请62/511,565的权益；所述专利申请各自全文以引用方式并入本文。
背景技术
慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是重大的全球健康问题，影响着世界人口的超过5％(全世界超过3亿5千万的人口和美国125万的个体)。
尽管可获得预防性HBV疫苗，但是慢性HBV感染的负担因发展中国家大部分地区的次优治疗选择和持续的新感染率而仍旧为一个重大且未能应对的世界性医学问题。目前的治疗无法提供治愈并且仅受限于两类试剂(干扰素α和病毒聚合酶的核苷类似物/抑制剂)；药物耐受性、低功效和耐药性问题限制了它们的影响。HBV的低治愈率至少部分归因于这样的事实：病毒产生的完全抑制难以用单一的抗病毒剂来实现。然而，HBV DNA的持久性抑制减缓了肝脏疾病的发展并且有助于预防肝细胞癌。对于HBV感染患者的当前治疗目标旨在将血清HBV DNA降至很低或不可检出的水平，并最终减少或预防硬化症和肝细胞癌的发展。
HBV衣壳蛋白在病毒生命周期期间发挥着重要功能。HBV衣壳/核心蛋白形成了在细胞间通过的过程中保护病毒基因组的亚稳态病毒颗粒或蛋白质壳，并且还在复制过程中发挥核心作用，包括基因组衣壳化、基因组复制、以及病毒体形态形成和释放。衣壳结构还对环境信号作出响应，以允许在病毒侵入之后脱壳。相一致地，已发现衣壳组装和解组装的适当时序、适当的衣壳稳定性和核心蛋白的功能对病毒感染至关重要。
本领域需要可提高对病毒产生的抑制并且可治疗、改善、或预防HBV感染的治疗剂。将此类治疗剂作为单一治疗药物施用或与其它HBV治疗或辅助治疗联合施用于HBV感染的患者，将导致病毒载量显著降低、预后改善、疾病发展减慢并且转化率增强。
发明内容
本文提供了可用于治疗对其有需要的受治疗者中HBV感染的化合物。因此，在一方面，本文提供了式Ia的化合物：
Figure BDA0001982694780000021
或其药学上可接受的盐，其中
A为N或C(H)；
R1为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH；
R2在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH和卤素；
R3在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R5选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R6选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基；
R7选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)O-C1-C6-卤代烷基、-C(O)O-C3-C7-环烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基和-S(O)2C3-C7-环烷基；
或者其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中所述C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代；
R8选自H和C1-C6-烷基；
R9选自H和C1-C6-烷基；
R10选自H和C1-C6-烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；并且
p为0、1、2、3或4。
在另一方面，本文提供了式I的化合物：
Figure BDA0001982694780000041
或其药学上可接受的盐，其中
R1为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH；
R2在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH和卤素；
R3在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R5选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R6选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基；
R7选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R8选自H和C1-C6-烷基；
R9选自H和C1-C6-烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；并且
p为0、1、2、3或4。
在一个实施方案中，式Ia的化合物具有式II的结构：
Figure BDA0001982694780000051
或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本文提供了式III的化合物：
Figure BDA0001982694780000052
或其药学上可接受的盐，其中
Figure BDA0001982694780000061
为单键或双键；
X为N-Rc；
R1为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH；
R2在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH和卤素；
R3在每次出现时独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R5选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R6选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基；
R7选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)O-C1-C6-卤代烷基、-C(O)O-C3-C7-环烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基和-S(O)2C3-C7-环烷基；
或者其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中所述C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代；
R8选自H和C1-C6-烷基；
R9选自H和C1-C6-烷基；
R10选自H和C1-C6-烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
Rc不存在，为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-卤代烷基、或C1-C6-烷基-OH；
m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；并且
p为0、1、2、3或4。
在另一方面，本文提供了一种药物组合物，该药物组合物包含式Ia、式I、式II、或式III中的至少一种化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
在另一方面，本文提供了一种药物组合物，该药物组合物包含至少一种所公开的化合物，以及药学上可接受的载体。在另一方面，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式Ia、式I、式II、或式III的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本文提供了一种在对其有需要的个体中抑制或减少含HBV DNA的颗粒或含HBV RNA的颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式Ia、式I、式II、或式III的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本文提供的任何方法还包括向个体施用至少一种附加治疗剂，所述至少一种附加治疗剂选自：HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、亲环蛋白/TNF抑制剂、TLR-激动剂、HBV疫苗、以及它们的任何组合。
附图说明
图1示出中间体18的碘代苯甲酸类似物(也称为化合物215)的X射线晶体结构。
具体实施方式
本文提供了化合物，例如式Ia、式I、式II、或式III的化合物，或其药学上可接受的盐，可用于在受治疗者中治疗和预防HBV感染。
不受任何特定作用机理的束缚，据信这些化合物调节或破坏HBV组装以及HBV复制或产生感染性颗粒所需的其他HBV核心蛋白功能。此外或另选地，化合物可破坏HBV衣壳组装来诱导感染性或复制能力大幅下降的缺陷型病毒颗粒产生。换句话讲，本文提供的化合物可通过如下方式而充当衣壳组装调节剂：调节(例如促进、延迟、抑制、破坏或减少)正常病毒衣壳的组装或解组装；结合衣壳；并且/或者改变细胞多蛋白或前体的代谢。该调节可发生在衣壳蛋白成熟时或病毒感染性期间。所公开的化合物可在调节HBV cccDNA的活性或特性，或从被感染的细胞内产生或释放HBV RNA颗粒的方法中使用。
在一个实施方案中，本文所述的化合物适用于单一疗法，并且针对自然或天然HBV菌株和耐受目前已知药物的HBV菌株是有效的。在另一个实施方案中，本文所述的化合物适用于联合治疗。
定义
以下列出了用于描述本发明的各种术语的定义。除非在特定情况下另作限定，当术语在整篇说明书和权利要求中单独地或作为较大基团的一部分使用时，这些定义均适用于该术语。
除非另有定义，否则本文所用的所有技术术语和科学术语的含义通常与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。一般来讲，本文所用的命名以及细胞培养、分子遗传、有机化学和肽化学中的实验规程在本领域中是众所周知且普遍应用的。
如本文所用，冠词“一个”和“一种”是指一个或多于一个(即至少一个)冠词的语法对象。以举例的方式，“元件”是指一个元件或多于一个元件。此外，使用的术语“包括”以及其它形式，如“包括”、“包含”和“含有”不是限制性的。
如本文所用，术语“约”应被本领域普通技术人员理解并在使用其的上下文中有某种程度的变化。如本文所用，在涉及可测量值诸如量、时距等等时，术语“约”意指涵盖与指定值±20％或±10％，包括±5％、±1％和±0.1％的变化，因为此类变化适合执行本发明所公开的方法。
如本文所用，术语“衣壳组装调节剂”是指破坏或促进或抑制或阻碍或延迟或减少或修饰正常的衣壳组装(例如，在成熟期间)或正常的衣壳解组装(例如，在感染期间)或干扰衣壳稳定性的化合物，由此诱导异常的衣壳形态和功能。在一个实施方案中，衣壳组装调节剂促进衣壳组装和/或解组装，由此诱导异常的衣壳形态。在另一个实施方案中，衣壳组装调节剂与主要衣壳组装蛋白(CA)相互作用(例如，在活性位点抑制，在别构部位结合，修饰或阻碍折叠等等)，由此破坏衣壳组装或解组装。在另一个实施方案中，衣壳组装调节剂致使CA的结构或功能扰乱(例如，CA组装、解组装，结合至底物，折叠为合适构象的能力等)，其使病毒感染性衰减或对病毒是致死的。
如本文所用，术语“处理”或“治疗”被定义为向具有HBV感染，HBV感染的症状或者有发展成HBV感染的潜能的患者施加或施用治疗剂，即所公开的化合物(单独或与另一种药剂组合)，或者将治疗剂施加或施用于从患者分离的组织或细胞系(例如，用于诊断或体外施用)，目的在于治愈、愈合、减轻、缓解、改变、治疗、改善、改良或影响HBV感染、HBV感染的症状或者发展成HBV感染的潜能。此类治疗可基于获自药物基因组学领域的知识进行修改或改进。
如本文所用，术语“预防”或“防止”意指如果还未发生，则疾病或障碍没有发展，或者如果该障碍或疾病已经发生，则障碍或疾病没有进一步发展。还考虑了预防与障碍或疾病相关联的一些或所有症状的能力。
如本文所用，术语“患者”、“个体”或“受治疗者”是指人类或非人类哺乳动物。非人类哺乳动物包括例如牲畜和宠物，诸如绵羊、牛、猪、犬科、猫科和鼠科哺乳动物。优选地，患者、受治疗者或个体是人类。
如本文所用，术语“有效量”、“药学有效量”和“治疗有效量”是指无毒但足以提供期望生物学结果的试剂用量。结果可以是疾病的体征、症状或病因减轻或缓和，或生物系统的任何其他所需的改变。在任何个体情况中，适当的治疗剂量可通过本领域的普通技术人员用常规实验测定出。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指没有消除化合物的生物活性或特性并且相对无毒的材料，诸如载体或稀释剂，即可将材料施用于个体而不引起不期望的生物效应或者以有害方式与包含其的组合物中的任何组分相互作用。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中通过将现有的酸或碱部分转化为其盐形式来修饰母体化合物。药学上可接受的盐的示例包括但不限于碱性残基如胺的无机或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱性或有机盐；等。本发明的药学上可接受的盐包括例如由无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐。本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由包含碱或酸部分的母体化合物合成。通常，这些盐可通过以下过程制备：使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的合适碱或酸在水中或在有机溶剂中或者在这两者的混合物中反应；通常优选非水性介质，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的列表见于雷明顿药物科学，第17版(Remington'sPharmaceutical Sciences,17th ed.)，宾夕法尼亚州伊斯顿的麦克出版公司，1985，第1418页(Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985,p.1418)和药物科学杂志，第66卷，第2期(1977)(Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977))，其各自全文以引用方式并入本文。
如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指本发明内可用的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物有助于将化合物施用于患者或受治疗者。本领域存在的多种施用化合物的技术包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼部、肺部以及局部施用。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”是指参与在患者体内运载或转运本发明内可用的化合物或者将其运载或转运给患者的药学上可接受的材料、组合物或载体，例如液体或固体填料、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或包封材料。通常，此类构建体从身体的一个器官或部分运载或转运到身体的另一个器官或部分。各载体必须是“可接受的”，其意指与制剂(包括本发明内可用的化合物)中其它成分相容并且对患者无害。可用作药学上可接受的载体的材料的一些示例包括：糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素。粉末化黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，诸如可可油和栓剂蜡；油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝蔴油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，诸如丙二醇；多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；不含热原的水；等渗盐水；林格氏液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及用于药物制剂中的其它非毒性相容物质。
如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括与本发明内可用的化合物的活性相容的任何和所有包衣、抗菌剂和抗真菌剂、以及吸收延迟剂等等，并且对于患者是生理可接受的。还可将辅助活性化合物掺入组合物中。“药学上可接受的载体”还可包括本发明内可用的化合物的药学上可接受的盐。可在用于实施本发明的药物组合物中包括的其他附加成分在本领域中是已知的，并且描述于例如Remington's Pharmaceutical Sciences(Genaro编辑，Mack Publishing Co.,1985,Easton,PA)，其以引用方式并入本文。如本文所用，除非另行指出，否则术语“烷基”自身或者作为另一取代基的一部分是指具有指定碳原子数的直链或支链烃(即C0-C6-烷基意指不存在或含有一至六个碳原子的烷基)，并且包括直链和支链。示例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基和己基。C1-C6-烷基的其它示例包括乙基、甲基、异丙基、异丁基、正戊基和正己基。
如本文所用，术语“烯基”代表衍生自含有至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键的烃部分的一价基团。双键可以为或可以不为与另一个基团的连接点。烯基基团(例如，C2-C8-烯基)包括但不限于例如乙烯基、丙烯基、丙-1-烯-2-基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基、庚烯基、辛烯基等等。
除非另行指出，否则如本文所用，术语“卤”或“卤素”单独或作为另一取代基的一部分是指氟、氯、溴或碘原子，优选氟、氯、或溴，更优选氟或氯。
如本文所用，术语“卤代烷基”是指任何一个或多个烷基碳原子被如上定义的卤素取代的烷基基团。卤代烷基涵盖单卤代烷基、二卤代烷基和多卤代烷基基团。术语“卤代烷基”包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、以及五氟乙基。
如本文所用，术语“环烷基”是指单环或多环非芳族基团，其中每一个成环原子(即，骨架原子)均为碳原子。在一个实施方案中，环烷基基团是饱和或部分不饱和的。在另一个实施方案中，环烷基基团与芳环稠合。环烷基基团包括具有3至10个环原子的基团(C3-C10-环烷基)，具有3至8个环原子的基团(C3-C8-环烷基)，具有3至7个环原子的基团(C3-C7-环烷基)，以及具有3至6个环原子的基团(C3-C6-环烷基)。单环的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。双环的环烷基包括但不限于四氢萘基、茚满基和四氢环戊二烯(tetrahydropentalene)。多环的环烷基包括金刚烷和降莰烷。术语环烷基包括含有至少一个碳-碳双键或一个碳-碳三键的不饱和非芳族环状基团。
如本文所用，术语“杂环烷基”或“杂环基”是指含有一至四个各自选自O、S和N的环杂原子的杂脂环族基团。在一个实施方案中，各个杂环基基团在其环体系中具有3至10个原子，前提条件是所述基团的环不含有两个相邻的O或S原子。杂环基取代基或者可由碳原子数定义，例如C2-C8-杂环基指示杂环基团中所含的碳原子数而不包括杂原子数。例如，C2-C8-杂环基将包括附加的一至四个杂原子。优选地，杂环基基团具有少于三个杂原子。更优选地，杂环基基团含有一至两个杂原子。在另一个实施方案中，杂环烷基基团与芳环稠合。在一个实施方案中，氮和硫杂原子可任选地被氧化，并且氮原子可任选地被季铵化。除非另行指出，否则杂环体系可在提供稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接。
3-元杂环基基团的示例包括但不限于氮丙啶。4-元杂环烷基基团的示例包括但不限于氮杂环丁烷和β-内酰胺。5-元杂环基基团的示例包括但不限于吡咯烷、噁唑烷和噻唑烷二酮。6-元杂环烷基基团的示例包括但不限于哌啶、吗啉和哌嗪。
杂环基基团的其他非限制性示例包括单环基团，诸如氮丙啶、环氧乙烷、环硫乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、吡咯啉、吡唑啶、咪唑啉、二氧戊环、环丁砜、2,3-二氢呋喃、2,5-二氢呋喃、四氢呋喃、四氢噻吩、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶、1,4-二氢吡啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃、2,3-二氢吡喃、四氢吡喃、1,4-二氧杂环己烷、1,3-二氧杂环己烷、高哌嗪、高哌啶、1,3-二氧庚环、4,7-二氢-1,3-二氧庚环、以及环氧己烷。
如本文所用，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环且具有芳族特征(即具有(4n+2)离域π(pi)电子，其中n为整数)的碳环或杂环。
如本文所用，除非另行指出，否则单独使用或与其它术语结合使用的术语“芳基”意指含有一个或多个环(通常一个、两个、或三个环)的碳环芳族体系，其中此类环可以侧基的形式连接在一起，例如联苯基，或者可以稠合在一起，例如萘。芳基基团的示例包括苯基、蒽基和萘基。优选的示例为苯基(例如，C6-芳基)和联苯基(例如，C12-芳基)。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十六个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十二个碳原子(例如，C6-C12-芳基)。在一些实施方案中，芳基基团具有六个碳原子(例如，C6-芳基)。
如本文所用，术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有芳族特征的杂环。杂芳基取代基可由碳原子数定义，例如C1-C9-杂芳基指示杂芳基基团中所含的碳原子数而不包括杂原子数。例如，C1-C9-杂芳基将包括附加的一至四个杂原子。优选地，杂芳基基团具有少于三个杂原子。更优选地，杂芳基基团具有一至两个杂原子。多环杂芳基可包含一个或多个部分饱和的环。杂芳基的非限制性示例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基(包括例如2-和4-嘧啶基)、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基(包括例如2-吡咯基)、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基(包括例如3-和5-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。
多环的杂环和杂芳基的非限制性示例包括吲哚基(包括例如3-、4-、5-、6-和7-吲哚基)、二氢吲哚基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基(包括例如1-和5-异喹啉基)、1,2,3,4-四氢异喹啉基、噌啉基、喹喔啉基(包括例如2-和5-喹喔啉基)、喹唑啉基、酞嗪基、1,8-二氮杂萘基、1,4-苯并二氧杂环己烷基、香豆素、二氢香豆素、1,5-二氮杂萘基、苯并呋喃基(包括例如3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氢苯并呋喃基、1,2-苯并异噁唑基、苯并噻吩基(包括例如3-、4-、5-、6-和7-苯并噻吩基)、苯并噁唑基、苯并噻唑基(包括例如2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基(包括例如2-苯并咪唑基)、苯并三唑基、硫磺嘌呤基(thioxanthinyl)、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯里西啶基(pyrrolizidinyl)和喹嗪啶基。
如本文所用，术语“取代的”意指原子或原子团作为连接至另一个基团的取代基来取代氢。
如本文所用，术语“选自…”(例如“R4选自A、B和C”)被理解为等同于术语“选自由……构成的组”(例如“R4选自由A、B和C构成的组”)。
化合物
本文提供了具有式Ia的结构的化合物：
Figure BDA0001982694780000141
或其药学上可接受的盐。
A可为N或C(H)。在一些实施方案中，A为N。在一些实施方案中，A为C(H)。
R1可为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH。在一些实施方案中，R1为H。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烯基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基-OH。
在一些实施方案中，可存在0、1、2、3或4个R2取代基：m为0、1、2、3或4。
每个R2可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在某些实施方案中，m为0且不存在R2取代基。在某些实施方案中，m为1且存在一个R2取代基。在某些实施方案中，m为2且存在两个R2取代基。在某些实施方案中，m为3且存在三个R2取代基。在某些实施方案中，m为4且存在四个R2取代基。在一些实施方案中，可存在0、1、2、3、或4个R3取代基：n为0、1、2、3、或4。在某些实施方案中，n为0且不存在R3取代基。在某些实施方案中，n为1且存在一个R3取代基。在某些实施方案中，n为2且存在两个R3取代基。在某些实施方案中，n为3且存在三个R3取代基。在某些实施方案中，n为4且存在四个R3取代基。
在某些实施方案中，R2可为任选地被1、2、或3个卤素基团取代的C1-C6-烷基。在某些实施方案中，R2可为C0-C6-烷基-OR6，其中R6为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，R2可为(CH2)1-2-O-C1-C3-烷基，其中C1-C3-烷基任选地被1、2、或3个卤素基团取代。在某些实施方案中，m为1或2。
每个R3可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在某些实施方案中，至少一个R3为–OH。在某些实施方案中，至少一个R3为卤素。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为–O-C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基-OH。
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C6-C12-芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C3-C7-环烷基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基。在某些实施方案中，R4为苯基或吡啶基，其中所述苯基或吡啶基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在一个具体的实施方案中，R4为苯基，其中苯基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在另一个具体的实施方案中，R4为吡啶基，其中吡啶基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。
R5可选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在一个具体的实施方案中，R5为H。
R6可选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基。在一个具体的实施方案中，R6选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基。
R7可独立地选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)O-C1-C6-卤代烷基、-C(O)O-C3-C7-环烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基和-S(O)2C3-C7-环烷基；
或者其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代。在一个实施方案中，R7在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基。在另一个实施方案中，R7在每次出现时独立地选自H、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)O-C1-C6-卤代烷基、-C(O)O-C3-C7-环烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基或-S(O)2C3-C7-环烷基。在一个实施方案中，R7在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)O-C1-C6-卤代烷基、-C(O)O-C3-C7-环烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基或-S(O)2C3-C7-环烷基。
R8可选自H和C1-C6-烷基。
R9可选自H和C1-C6-烷基。
R10可选自H和C1-C6-烷基。
Ra可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。
Rb可独立地选自H和C1-C6-烷基。
m可为0、1、2、3或4。
n可为0、1、2、3或4。
p可为0、1、2、3或4。
在另一个方面，本文提供了具有式I的结构的化合物：
Figure BDA0001982694780000171
或其药学上可接受的盐。
R1可为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH。在一些实施方案中，R1为H。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烯基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基-OH。
在一些实施方案中，可存在0、1、2、3、或4个R2取代基：m为0、1、2、3、或4。
每个R2可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在某些实施方案中，m为0且不存在R2取代基。在某些实施方案中，m为1且存在一个R2取代基。在某些实施方案中，m为2且存在两个R2取代基。在某些实施方案中，m为3且存在三个R2取代基。在某些实施方案中，m为4且存在四个R2取代基。在一些实施方案中，可存在0、1、2、3、或4个R3取代基：n为0、1、2、3、或4。在某些实施方案中，n为0且不存在R3取代基。在某些实施方案中，n为1且存在一个R3取代基。在某些实施方案中，n为2且存在两个R3取代基。在某些实施方案中，n为3且存在三个R3取代基。在某些实施方案中，n为4且存在四个R3取代基。
在某些实施方案中，R2可为任选地被1、2、或3个卤素基团取代的C1-C6-烷基。在某些实施方案中，R2可为C0-C6-烷基-OR6，其中R6为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，R2可为(CH2)1-2-O-C1-C3-烷基，其中C1-C3-烷基任选地被1、2、或3个卤素基团取代。在某些实施方案中，m为1或2。
每个R3可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在某些实施方案中，至少一个R3为–OH。在某些实施方案中，至少一个R3为卤素。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为–O-C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基-OH。
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C6-C12-芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C3-C7-环烷基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基。在某些实施方案中，R4为苯基或吡啶基，其中所述苯基或吡啶基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在一个具体的实施方案中，R4为苯基，其中苯基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在另一个具体的实施方案中，R4为吡啶基，其中吡啶基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。
R5可选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在一个具体的实施方案中，R5为H。
R6可选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基。在一个具体的实施方案中，R6选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基。
R7可独立地选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在一个具体的实施方案中，R7在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基。
R8可选自H和C1-C6-烷基。
R9可选自H和C1-C6-烷基。
Ra可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。
Rb可独立地选自H和C1-C6-烷基。
m可为0、1、2、3或4。
n可为0、1、2、3或4。
p可为0、1、2、3或4。
在另一个方面，本文提供了具有式III的结构的化合物：
Figure BDA0001982694780000191
或其药学上可接受的盐。
Figure BDA0001982694780000201
可为单键或双键。在一些实施方案中，
Figure BDA0001982694780000202
为单键。在一些实施方案中，
Figure BDA0001982694780000203
为双键。
X为N-Rc。
R1可为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、或C1-C6-烷基-OH。在一些实施方案中，R1为H。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烯基。在一些实施方案中，R1为C1-C6-烷基-OH。
在一些实施方案中，可存在0、1、2、3、或4个R2取代基：m为0、1、2、3、或4。
每个R2可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-亚烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-杂环烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在某些实施方案中，m为0且不存在R2取代基。在某些实施方案中，m为1且存在一个R2取代基。在某些实施方案中，m为2且存在两个R2取代基。在某些实施方案中，m为3且存在三个R2取代基。在某些实施方案中，m为4且存在四个R2取代基。在一些实施方案中，可存在0、1、2、3、或4个R3取代基：n为0、1、2、3、或4。在某些实施方案中，n为0且不存在R3取代基。在某些实施方案中，n为1且存在一个R3取代基。在某些实施方案中，n为2且存在两个R3取代基。在某些实施方案中，n为3且存在三个R3取代基。在某些实施方案中，n为4且存在四个R3取代基。
每个R3可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在某些实施方案中，至少一个R3为–OH。在某些实施方案中，至少一个R3为卤素。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为–O-C1-C6-烷基。在某些实施方案中，至少一个R3为C1-C6-烷基-OH。
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基和(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基，其中杂芳基、芳基、环烷基和杂环烷基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C6-C12-芳基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C3-C7-环烷基。在某些实施方案中，R4为任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代的(CRaRb)p-C2-C6-杂环烷基。在某些实施方案中，R4为苯基或吡啶基，其中所述苯基或吡啶基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在一个具体的实施方案中，R4为苯基，其中苯基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在另一个具体的实施方案中，R4为吡啶基，其中吡啶基被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。
R5可选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在一个具体的实施方案中，R5为H。
R6可选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基。在一个具体的实施方案中，R6选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基。
R7可独立地选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。在一个具体的实施方案中，R7在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基。
R8可选自H和C1-C6-烷基。
R9可选自H和C1-C6-烷基。
Ra可独立地选自–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH。
Rb可独立地选自H和C1-C6-烷基。
Rc可选自缺失、H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-卤代烷基、或C1-C6-烷基-OH。
m可为0、1、2、3或4。
n可为0、1、2、3或4。
p可为0、1、2、3或4。
在式III的化合物的一个实施方案中，n为0、1或2；并且每个R3独立地为C1-C6-烷基。
在式III的化合物的另一个实施方案中，R4为苯基、吡啶基、或环己基，其中R4任选地被1、2、或3个各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–I、–CN、–CH3、–CH2CH3、–CF3、–CHF2和–SF5的基团取代。
在式III的化合物的另一个实施方案中，R1为CH3；
R2选自：H、C1-4卤代烷基、OH、C1-4烷基、CH2OH、CH(OH)CH3、CH(OH)CH2CH3、CH(OH)环丙基和CH2OCH2CHF2；
R3为H或CH3；
R4为
Figure BDA0001982694780000221
R5为H；
Rc不存在，为H、C1-4烷基、CH2CH＝CH2、CH3CHF2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、或CH2CH(OH)CH3；
m为0、1或2；并且
n为0或1。
在式Ia的化合物的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基或C1-C6-烯基。
在式Ia的化合物的另一个实施方案中，R1为–CH3、–CH2CH3、–CH2CH2CH3、–CH2CH＝CH2、或–CD3。
在式Ia的化合物的一个实施方案中，m为1或2；并且
每个R2独立地选自C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C0-C6-烷基-OR6；C1-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。
在式I的化合物的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基或C1-C6-烯基。
在式I的化合物的另一个实施方案中，R1为–CH3、–CH2CH3、–CH2CH2CH3、–CH2CH＝CH2、或–CD3。
在式I的化合物的一个实施方案中，m为1或2；并且
每个R2独立地选自C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C0-C6-烷基-OR6；C1-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。
在一个实施方案中，式Ia的化合物具有式II的结构：
Figure BDA0001982694780000231
或其药学上可接受的盐。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R2为C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2和C1-C6-烷基-N(R7)2。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R2选自–CH2OH、–CH2OCF3、–C(O)-3,3-二氟氮杂环丁烷、–C(O)-3,3-二氟吡咯烷、–C(O)N(CH3)(CH2CHF2)、–C(O)N(CH3)(CH2CF3)、–C(O)N(H)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH3)、–C(O)N(H)(CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH3)、–CH2N(H)(C(O)CF3)、–CH2N(H)(C(O)OCH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CF3)、–CH2-吡咯烷-2-酮、–CH2N(H)(C(O)CH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)C(CH3)3)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)O-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)N(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)CH2CN)、–CH2N(H)(C(O)CH2OH)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CF3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CF3)和–CH2N(H)(S(O)2-环丙基)。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R2选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH＝CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R2为任选地被1、2、或3个卤素基团取代的C1-C6-烷基。在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R2为C0-C6-烷基-OR6，其中R6为C1-C6-卤代烷基。在某些实施方案中，R2为(CH2)1-2-O-C1-C3-烷基，其中C1-C3-烷基任选地被1、2、或3个卤素基团取代。在某些实施方案中，m为1或2。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，n为0、1或2；并且每个R3独立地为C1-C6-烷基。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，每个R3独立地为C1-C3-烷基。在式I或式II的化合物的另一个实施方案中，R3独立地为–CH3。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，n为1，并且R3处于以下位置：
Figure BDA0001982694780000241
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R4为(CRaRb)p-C1-C5-杂芳基、(CRaRb)p-C6-芳基、或(CRaRb)p-C3-C7-环烷基，其中杂芳基、芳基和环烷基任选地被1、2、或3个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代；
Ra为H或C1-C6-烷基；
Rb为H或C1-C6-烷基；并且
p为0或1。
在式I或式II的化合物的一个实施方案中，R2选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH＝CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2。在式I或式II的化合物的一个实施方案中，n为0、1或2；并且每个R3独立地为C1-C6-烷基。在式I或式II的化合物的一个实施方案中，每个R3独立地为C1-C3-烷基。在式I或式II的化合物的另一个实施方案中，R3独立地为–CH3。
在式Ia或式II的化合物的另一个实施方案中，R4为C1-C5-杂芳基、C6-芳基、或C3-C7-环烷基，它们中的任一者任选地被1、2、或3个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R4为苯基、吡啶基、或环己基，它们中的任一者任选地被1、2、或3个各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–I、–CN、–CH3、–CH2CH3、–CF3、–CHF2和–SF5的基团取代。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R4选自：
Figure BDA0001982694780000261
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R4选自：
Figure BDA0001982694780000271
在式I或式II的化合物的一个实施方案中，R4为(CRaRb)p-C1-C5-杂芳基、(CRaRb)p-C6-芳基、或(CRaRb)p-C3-C7-环烷基，其中杂芳基、芳基和环烷基任选地被1、2、或3个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH的基团取代；
Ra为H或C1-C6-烷基；
Rb为H或C1-C6-烷基；并且
p为0或1；在式I或式II的化合物的另一个实施方案中，R4为C1-C5-杂芳基、C6-芳基、或C3-C7-环烷基，它们中的任一者任选地被1、2、或3个各自独立地选自–OH、卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代。在式I或式II的化合物的一个实施方案中，R4为苯基、吡啶基、或环己基，它们中的任一者任选地被1、2、或3个各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–I、–CN、–CH3、–CH2CH3、–CF3、–CHF2和–SF5的基团取代。
在式I或式II的化合物的一个实施方案中，R4选自：
Figure BDA0001982694780000281
在式Ia或式II的化合物的另一个实施方案中，R4为
Figure BDA0001982694780000282
在式Ia或式II的化合物的另一个实施方案中，R5为H或–CH3。
在式Ia或式II的化合物的一个实施方案中，R5为H或C1-C6-烷基。在式I或式II的化合物的一个实施方案中，R5为H或C1-C6-烷基。在式I或式II的化合物的另一个实施方案中，R5为H或–CH3。
在式Ia的化合物的另一个实施方案中，
A为N或C(H)
R1为C1-C6-烷基；
R2独立地选自C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C0-C6-烷基-OR6、C1-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基和(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中杂芳基或芳基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代；
R5为H或C1-C6-烷基；
R6选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基；
R7选自H、C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
R8选自H和C1-C6-烷基；
R9选自H和C1-C6-烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0或1。
在式Ia的化合物的另一个实施方案中，
R1为C1-C6-烷基；
R2在每次出现时独立地选自–CH2OH、–CH2OCF3、–C(O)-3,3-二氟氮杂环丁烷、–C(O)-3,3-二氟吡咯烷、–C(O)N(CH3)(CH2CHF2)、–C(O)N(CH3)(CH2CF3)、–C(O)N(H)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH3)、–C(O)N(H)(CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH3)、–CH2N(H)(C(O)CF3)、–CH2N(H)(C(O)OCH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CF3)、–CH2-吡咯烷-2-酮、–CH2N(H)(C(O)CH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)C(CH3)3)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)O-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)N(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)CH2CN)、–CH2N(H)(C(O)CH2OH)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CF3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CF3)和–CH2N(H)(S(O)2-环丙基)；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基和(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中杂芳基或芳基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代；
R5为H；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0。
在式Ia的化合物的另一个实施方案中，
R1为C1-C6-烷基；
R2在每次出现时独立地选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH＝CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基和(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中杂芳基或芳基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代；
R5为H；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0。
在式I的化合物的另一个实施方案中，
R1为C1-C6-烷基；
R2在每次出现时独立地选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH＝CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基和(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中杂芳基或芳基任选地被1、2、3、或4个各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代；
R5为H；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0。
在一个具体的实施方案中，R1为甲基，并且R4为3-氯-4-氟苯基。
在另一个具体的实施方案中，R1为甲基，R2为–CH2OH，并且m为1。
在另一个具体的实施方案中，R1为甲基，R2为–CH2F，并且m为1。
本文提供了根据以下实施方案的化合物：
在式I的一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH3，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，m为1，并且n为0。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH3，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，m为2，并且n为0。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2F，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，并且n为0。
在式Ia的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OCH2CHF2，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，n为1，并且R3为C1-C6-烷基。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基；R2为C1-C6-烷基或C0-C6-烷基-OR6，其中烷基被卤素取代，并且R6为H或C1-C6-卤代烷基；R3为C1-C6-烷基；R4为被1或2个各自独立地选自卤素和–CN的基团取代的苯基；R5为H；m为1；并且n为1。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为甲基；R2为-CH2F或CH2-O-CH2CHF2；R3为甲基；R4为被1或2个各自独立地选自F和–CN的基团取代的苯基；R5为H；m为1；并且n为1。
在式II的一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OH，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，并且n为0。
在式II的一个具体的实施方案中，R1为–CD3，R2为–CH2OH，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2F，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OCH2CHF2，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，n为1，并且R3为C1-C6-烷基。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OH，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2S(O)2CH3，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OC(O)O-C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OC(O)NH2，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、或–C(O)N(CH3)2，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2OC(O)N(CH3)2，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，m为0，并且n为0。
在式I的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，m为0，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2F，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为–CH2N(CH3)2，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2选自–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH＝CH2、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2和–CH2OCH2CF3，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式Ia的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，m为0，并且n为0。
在式Ia的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基被1-3个独立地选自卤素、–CN、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基的基团取代，R5为H，m为0，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-OR6，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，R6为H，并且n为0。
在式II的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-OR6，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，R6为C1-C6-卤代烷基，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(C1-C6-烷基)(C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(H)(C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(H)(C1-C6-烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(R7)2，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(C1-C6-烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)C1-C6-烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)C1-C6-烷基-OH)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)C1-C6-烷基-CN)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)C3-C7-环烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)O-C1-C6-烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)O-C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)O-C3-C7-环烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-C(O)N(C1-C6-烷基)2)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-S(O)2C1-C6-烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-S(O)2C1-C6-卤代烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(H)(-S(O)2C3-C7-环烷基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，R7为-S(O)2C3-C7-环烷基和H，并且n为0。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2选自–CH2OH、–CH2OCF3、–C(O)-3,3-二氟氮杂环丁烷、–C(O)-3,3-二氟吡咯烷、–C(O)N(CH3)(CH2CHF2)、–C(O)N(CH3)(CH2CF3)、–C(O)N(H)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH3)、–C(O)N(H)(CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH3)、–CH2N(H)(C(O)CF3)、–CH2N(H)(C(O)OCH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CF3)、–CH2-吡咯烷-2-酮、–CH2N(H)(C(O)CH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)C(CH3)3)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)O-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)N(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)CH2CN)、–CH2N(H)(C(O)CH2OH)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CF3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CF3)和–CH2N(H)(S(O)2-环丙基)，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为0。
在式II的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-OR6，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，R6为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(C1-C6-卤代烷基)(C1-C6-烷基)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(C1-C6-卤代烷基)(H)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C0-C6-烷基-C(O)N(C1-C6-烷基)(H)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(-C(O)C1-C6-烷基)(H)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(-S(O)2C1-C6-烷基)(H)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2为C1-C6-烷基-N(-C(O)O-C1-C6-烷基)(H)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式II的另一个具体的实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2选自–CH2OH、–C(O)N(CH3)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH3)、–CH2N(H)(C(O)CH3)、–CH2N(H)(C(O)OCH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH3)，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式III的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，Rc为H、C1-4烷基、CH2CH＝CH2、CH3CHF2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、或CH2CH(OH)CH3，m为0，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式III的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2选自-C1-4卤代烷基、OH、C1-4烷基、CH2OH、CH(OH)CH3、CH(OH)CH2CH3、CH(OH)环丙基、CH2OCH2CHF2、R3为C1-C6-烷基，R4为苯基、其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，Rc为H、C1-4烷基、CH2CH＝CH2、CH3CHF2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、CH2CH(OH)CH3，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式III的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R3为C1-C6-烷基，R4为苯基，其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，Rc不存在，m为0，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
在式III的一个实施方案中，R1为C1-C6-烷基，R2选自-C1-4卤代烷基、OH、C1-4烷基、CH2OH、CH(OH)CH3、CH(OH)CH2CH3、CH(OH)环丙基、CH2OCH2CHF2、R3为C1-C6-烷基，R4为苯基、其中苯基被至少一个卤素取代，R5为H，Rc不存在，并且n为1。在一个更具体的实施方案中，R3为(R)-甲基。
式I和式II的某些实施方案示于下表1中。
表1：
Figure BDA0001982694780000381
Figure BDA0001982694780000391
Figure BDA0001982694780000401
Figure BDA0001982694780000411
Figure BDA0001982694780000421
Figure BDA0001982694780000431
Figure BDA0001982694780000441
Figure BDA0001982694780000451
Figure BDA0001982694780000461
Figure BDA0001982694780000471
Figure BDA0001982694780000481
在一个实施方案中，式I和式II的化合物选自：
Figure BDA0001982694780000482
Figure BDA0001982694780000491
Figure BDA0001982694780000501
Figure BDA0001982694780000511
Figure BDA0001982694780000521
Figure BDA0001982694780000531
Figure BDA0001982694780000541
Figure BDA0001982694780000551
Figure BDA0001982694780000561
Figure BDA0001982694780000571
*纯但未知的对映体或非对映体。
以及其药学上可接受的盐。
式I和式II的某些实施方案示于下表2中。
表2：
Figure BDA0001982694780000572
Figure BDA0001982694780000581
Figure BDA0001982694780000591
在一个实施方案中，式I和式II的化合物选自：
Figure BDA0001982694780000601
Figure BDA0001982694780000611
Figure BDA0001982694780000621
*纯但未知的对映体或非对映体。
以及其药学上可接受的盐。
式Ia和式II的某些实施方案示于下表3中。
表3：
Figure BDA0001982694780000631
Figure BDA0001982694780000641
Figure BDA0001982694780000651
Figure BDA0001982694780000661
Figure BDA0001982694780000671
Figure BDA0001982694780000681
Figure BDA0001982694780000691
Figure BDA0001982694780000701
Figure BDA0001982694780000711
Figure BDA0001982694780000721
在一个实施方案中，式Ia和II的化合物选自：
Figure BDA0001982694780000722
Figure BDA0001982694780000731
Figure BDA0001982694780000741
Figure BDA0001982694780000751
Figure BDA0001982694780000761
Figure BDA0001982694780000771
Figure BDA0001982694780000781
Figure BDA0001982694780000791
以及其药学上可接受的盐。
式Ia的某些实施方案示于下表4中。
表4：
Figure BDA0001982694780000801
在一个实施方案中，式Ia的化合物选自：
Figure BDA0001982694780000802
Figure BDA0001982694780000811
*纯但未知的对映体或非对映体。
以及其药学上可接受的盐。
式III的某些实施方案示于下表5中。
表5：
Figure BDA0001982694780000812
Figure BDA0001982694780000821
在一个实施方案中，式III的化合物选自：
Figure BDA0001982694780000831
Figure BDA0001982694780000841
*纯但未知的对映体或非对映体。
以及其药学上可接受的盐。
所公开的化合物可具有一个或多个立构中心，并且每个立构中心可独立地存在于R或S构型中。在一个实施方案中，本文所述的化合物以光学活性或外消旋形式存在。应当理解，本文所述的化合物涵盖外消旋、光学活性、区域异构和立体异构的形式，或它们的组合，具有本文所述的治疗学上可用的特性。
光学活性形式的制备以任何合适的方式实现，作为非限制性示例，包括：通过重结晶技术拆分外消旋形式、由光学活性起始物进行合成、手性合成、或使用手性固定相进行色谱分离。在一个实施方案中，将一种或多种异构体的混合物用作本文所述的所公开的化合物。在另一个实施方案中，本文所述的化合物包含一个或多个手性中心。这些化合物通过任何方式进行制备，包括立体选择性合成、对映选择性合成或对映体或非对映体混合物的分离。化合物及其异构体的拆分通过任何方式实现，作为非限制性示例，包括化学方法、酶方法、分级结晶、蒸馏和色谱。
在一个实施方案中，所公开的化合物可作为互变异构体存在。所有互变异构体都包括在本文所提供化合物的范围内。
本文所述的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数、但原子量或质量数与通常存在于自然界的原子量或质量数不同的原子替代。适于包含在本文所述化合物中的同位素的示例包括但不限于2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、32P和35S。在一个实施方案中，同位素标记的化合物可用于药物或底物的组织分布研究中。在另一个实施方案中，使用重同位素诸如氘取代提供更大的代谢稳定性(例如，体内半衰期增加或剂量需求降低)。
在另一个实施方案中，使用正电子发射同位素诸如11C、18F、15O和13N取代可用于正电子发射断层显像(PET)研究，以检查底物受体的占有率。同位素标记的化合物通过任何合适的方法或者通过使用适当的同位素标记的试剂代替以其它方式使用的未标记的试剂的方法来制备。
在一个实施方案中，本文所述的化合物通过其它方式进行标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分，生物发光标记，或化学发光标记。
使用本文所述以及如下文献中所述的技术和材料来合成本文所述的化合物和具有不同取代基的其它相关的化合物：例如菲泽和菲泽的有机合成试剂，第1-17卷(约翰·威利父子出版社，1991)(Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis,Volumes1-17(John Wiley and Sons,1991))；Rodd的Chemistry of Carbon Compounds，第1-5卷和增刊(Elsevier Science Publishers,1989)；Organic Reactions，第1-40卷(John Wileyand Sons,1991)；Larock的Comprehensive Organic Transformations(VCH PublishersInc.,1989)；March,Advanced Organic Chemistry，第4版(Wiley 1992)；Carey和Sundberg，Advanced Organic Chemistry，第4版，卷A和B(Plenum 2000,2001)；以及Green和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版(Wiley 1999)(所有这些都以引用方式并入本文)。如本文所述的化合物的一般性制备方法通过使用适当的试剂和条件来改进，以引入如本文提供的式中的所见的各个部分。
本文所述的化合物使用任何合适的规程从获自商业来源的化合物起始合成，或者使用本文所述的规程进行制备。
方法
本文提供了在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文还提供了在对其有需要的个体中根除HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文提供了在对其有需要的个体中减少与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
另外，本文提供了在对其有需要的个体中降低HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文提供了在对其有需要的个体中抑制或减少含HBV DNA的颗粒或含HBV RNA的颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
在某些方面，本文所述的方法和/或组合物有效地抑制或减少HBV缔合的颗粒在体外或体内(例如，细胞内，组织内，器官内(例如肝脏内)，生物体内等)的形成或存在。HBV缔合的颗粒可包含HBV DNA(即线形和/或共价闭合的环形DNA(cccDNA))和/或HBV RNA(即前基因组RNA和/或亚基因组RNA)。因此，HBV缔合的颗粒包括含HBV DNA颗粒或含HBV RNA颗粒。
如本文所用，“HPV缔合的颗粒”是指感染性HBV病毒体(即Dane颗粒)和非感染性HBV亚病毒颗粒(即HBV丝状体和/或HBV球体)。HBV病毒体包括包含表面蛋白的外膜、包含核心蛋白、至少一种聚合酶蛋白和HBV基因组的核衣壳。HBV丝状体和HBV球体包含HBV表面蛋白，但缺乏核心蛋白、聚合酶和HBV基因组。HBV丝状体和HBV球体也被统称为表面抗原(HBsAg)颗粒。HBV球体包含中和小HBV表面蛋白。HBV丝状体还包含中、小和大HBV表面蛋白。
HBV亚病毒颗粒可包含非粒状或分泌性HBeAg，其充当HBV活跃复制的标记物。
本文提供了在对其有需要的个体中减少HBV感染的不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文还提供了在对其有需要的个体中减少、减慢或抑制HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文提供了在对其有需要的个体中诱导来自HBV感染的肝损伤逆转的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文提供了在对其有需要的个体中降低长期抗病毒治疗HBV感染的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
本文提供了在对其有需要的个体中预防性地治疗HBV感染的方法，其中该个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的所公开化合物。
在一个实施方案中，个体是其它治疗类别的HBV药物(例如，HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物等，或它们的组合)难以治愈的。在另一个实施方案中，相比于其他治疗类别的HBV药物使个体中的病毒载量降低的程度，所公开的方法使患有HBV感染的个体中的病毒载量更大程度地降低或以更快速率降低。
在一个实施方案中，在对其有需要的个体中预防性地治疗HBV感染的情况下，相比于需要实现类似结果而单独施用至少一种附加治疗剂，施用所公开化合物或其药学上可接受的盐使得能够以更低的剂量或频率施用至少一种附加制剂。
在一个实施方案中，施用所公开的化合物或其药学上可接受的盐使个体中的病毒载量相比于施用选自以下的化合物而言更大程度地降低或以更快速率降低：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物、以及它们的任何组合。
在一个实施方案中，所公开的方法使患有HBV感染的个体中的病毒载量减少，因此允许使用较低剂量或不同的联合治疗方案。
在一个实施方案中，所公开的方法导致病毒成熟的发生率或病毒抗性相比于其他类别的HBV药物更低，由此允许长期治疗并使治疗方案改变的需要最小化。
在一个实施方案中，施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐导致病毒成熟的发生率或病毒抗性比施用选自以下的化合物更低：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物、以及它们的组合。
在一个实施方案中，所公开的方法使从HBV感染到非HBV感染或从可检测HBV病毒载量到不可检测HBV病毒载量的血清转化率提高到超出目前的治疗方案。如本文所用，“血清转化”是指HBV抗体发展和变得可检测的过程内的时间段。
在一个实施方案中，所公开的方法提高或正常化或恢复正常健康状态，引发完全恢复正常健康状态，恢复预期寿命，或消退对其有需要的个体中的病毒感染。
在一个实施方案中，所公开的方法消除或减少从HBV感染的细胞释放的HBV RNA颗粒的数目，因此增强、延长、或增大所公开化合物的治疗益处。
在一个实施方案中，所公开的方法从感染有HBV的个体根除HBV，从而避免长期或终生治疗的需要，或者缩短治疗的持续时间，或者允许其他抗病毒剂的剂量减少。
在另一个实施方案中，所公开的方法还包括监测或检测受治疗者的HBV病毒载量，并且其中该方法进行一定的时间段，包括直至HBV病毒不可检出的时候。
因此，在一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式Ia的化合物或其药学上可接受的盐。
因此，在一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式II的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的式III的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的表1的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的表2的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的表3的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的表4的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括向个体施用治疗有效量的表5的化合物或其药学上可接受的盐。
在本文提供的方法中任一种的一个实施方案中，该方法还可包括监测受治疗者的HBV病毒载量，其中该方法进行一定的时间段以使得HBV病毒不可检出。
联合治疗
所公开的化合物可用于与一种或多种可用于治疗HBV感染的附加化合物组合。这些附加化合物可包括其他所公开的化合物和/或已知治疗、预防、或减轻HBV感染的症状或效应的化合物。此类化合物包括但不限于HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、免疫调节剂、TLR-激动剂、以及具有影响HBV生命周期或影响HBV感染后果的不同或未知机制的其他试剂。
在非限制性示例中，所公开的化合物可与选自以下的一种或多种药物(或它们的盐)结合使用：
HBV逆转录酶抑制剂，以及DNA和RNA聚合酶抑制剂，包括但不限于拉米夫定(3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir和Epivir-HBV)、恩替卡韦(Baraclude、Entavir)、阿德福韦酯(Hepsara、Preveon、双-POMPMEA)、替诺福韦地索普西富马酸盐(Viread、TDF或PMPA)；
干扰素，包括但不限于干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)、以及干扰素γ(IFN-γ)；
病毒侵入抑制剂；
病毒成熟抑制剂；
文献描述的衣壳组装调节剂，诸如但不限于BAY 41-4109；
逆转录酶抑制剂；
免疫调节剂，诸如TLR-激动剂；以及
不同或未知机制的试剂，诸如但不限于AT-61((E)-N-(1-氯-3-氧代-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲酰胺)、AT-130((E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲酰胺)、以及类似的类似物。
在一个实施方案中，附加的治疗剂是干扰素。术语“干扰素”或“IFN”是指抑制病毒复制和细胞增殖以及调节免疫应答的高度同源种特异性的蛋白质家族的任何成员。人干扰素被分组成三类：I类，包括干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素ω(IFN-ω)，II类，包括干扰素γ(IFN-γ)，以及III类，包括干扰素λ(IFN-λ)。如本文所用，术语“干扰素”涵盖已开发并可商购获得的重组形式的干扰素。如本文所用，术语“干扰素”还涵盖亚型干扰素，诸如化学改性或成熟的干扰素。化学改性的干扰素可包括聚乙二醇化干扰素和糖基化干扰素。干扰素的示例还包括但不限于干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、干扰素-α-n1、干扰素-β-1a、干扰素-β-1b、干扰素-λ-1、干扰素-λ-2、以及干扰素-λ-3。聚乙二醇化干扰素的示例包括聚乙二醇化干扰素-α-2a和乙二醇化干扰素α-2b。
因此，在一个实施方案中，式Ia、式I、或式II的化合物可与选自以下的干扰素联合施用：干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)、以及干扰素γ(IFN-γ)。在一个具体的实施方案中，干扰素为干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、或干扰素-α-n1。在另一个具体的实施方案中，干扰素-α-2a或干扰素-α-2b是聚乙二醇化的。在一个优选的实施方案中，干扰素-α-2a是聚乙二醇化干扰素-α-2a(PEGASYS)。
在另一个实施方案中，附加治疗剂选自免疫调节剂或免疫刺激剂治疗剂，其包括属于干扰素类的生物制剂。
此外，附加治疗剂可为不同或未知机制的试剂，包括破坏其它原发性病毒蛋白功能或HBV复制或持久生存所需的宿主蛋白的试剂。
在另一个实施方案中，附加治疗剂为阻断病毒侵入或成熟或者靶定HBV聚合酶诸如核苷或核苷酸或非核苷类聚合酶抑制剂的抗病毒剂。在联合治疗的另一个实施方案中，逆转录酶抑制剂或DNA或RNA聚合酶抑制剂为齐多夫定、地达诺新、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、Atevirapine、三氮唑核苷、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依非韦伦、奈韦拉平、地拉夫定或依曲韦林。
在一个实施方案中，附加治疗剂为诱导天然限制性免疫应答的免疫调节剂，从而导致针对无关病毒诱导免疫应答。换句话讲，免疫调节剂可影响抗原递呈细胞的成熟，T-细胞的增殖和细胞因子释放(例如，IL-12、IL-18、IFN-α、IFN-β和IFN–γ以及TNF-α等等)。
在另一个实施方案中，附加治疗剂为TLR调节剂或TLR激动剂，诸如TLR-7激动剂或TLR-9激动剂。在联合治疗的另一个实施方案中，TLR-7激动剂选自SM360320(9-苄基-8-羟基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)和AZD 8848([3-({[3-(6-氨基-2-丁氧基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-吗啉基)丙基]氨基}甲基)苯基]乙酸甲酯)。
在本文提供的任何方法中，该方法还可包括向个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂、干扰素或它们的任何组合。在一个实施方案中，HBV疫苗选自RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B、或SHANVAC B中的至少一种。
在一个实施方案中，本文所述的方法还包括施用至少一种选自以下的附加治疗剂：核苷酸/核苷类似物、侵入抑制剂、融合抑制剂、以及这些或其它抗病毒机制的任何组合。
在另一方面，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括通过如下方式降低HBV病毒载量：向个体单独施用治疗有效量的所公开化合物或与逆转录酶抑制剂联合施用；并且还向个体施用治疗有效量的HBV疫苗；逆转录酶抑制剂可为以下中的至少一种：齐多夫定、地达诺新、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、Atevirapine、三氮唑核苷、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依非韦伦、奈韦拉平、地拉夫定或依曲韦林中。
在另一方面，本文提供了一种在对其有需要的个体中治疗HBV感染的方法，该方法包括通过如下方式降低HBV病毒载量：向个体单独施用治疗有效量的所公开化合物或与靶定HBV核酸的反义寡核苷酸或RNA干扰剂联合施用；并且还向个体施用治疗有效量的HBV疫苗；反义寡核苷酸或RNA干扰剂所具有的与靶HBV核酸的互补性足以抑制病毒基因组复制、病毒RNA转录、或病毒蛋白翻译。
在另一个实施方案中，所公开的化合物和至少一种附加的治疗剂是共配制的。在另一个实施方案中，所公开的化合物和至少一种附加的治疗剂是共施用的。
对于本文所述的任何联合治疗，可例如使用诸如以下合适的方法计算协同增强效应：Sigmoid-Emax公式(Holford&Scheiner,19981,Clin.Pharmacokinet.6：429-453)、Loewe相加模型公式(Loewe&Muischnek,1926,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.114：313-326)和中值效应公式(Chou&Talalay,1984,Adv.Enzyme Regul.22:27-55)。可将以上提及的各个公式用于实验数据来生成对应的图，以助于评估药物的组合效应。与以上提及公式相关的对应曲线图分别是浓度-效应曲线、等效应曲线图以及结合指数曲线。
在施用本文提供的联合治疗的方法中任一种的一个实施方案中，该方法还可包括监测或检测受治疗者的HBV病毒载量，其中该方法进行一定的时间段，包括直至HBV病毒不可检出的时刻。
给药/剂量/制剂
在另一方面，本文提供了包含至少一种所公开的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平可变化，以便获得的活性成分的量能够有效地实现对特定患者的期望治疗响应、组成和施用方式而对患者没有毒性。
具体地，所选的剂量水平将依赖于各种因素，包括所用具体化合物的活性，施用时间，化合物排出速率，治疗持续时间，与化合物联合使用的其它药物、化合物或材料，被治疗患者的年龄、性别、体重、病情、总体健康状态和既往病史，以及医疗领域公知的类似因素。
医生例如具有本领域普通技术的内科医生或兽医可容易地确定和规定所需药物组合物的有效量。例如，内科医生或兽医可开始以比需要实现期望治疗效果更低的水平给予所公开的化合物来施用药物组合物，并且逐渐增大剂量直至实现期望的效果。
在特定实施方案中，尤其有利的是将化合物配制成便于给药且剂量均匀的剂量单位形式。如本文所用的剂量单位形式是指适合作为用于待治疗的患者的单元剂量的物理上不连续单位；每个单位含有与所需可药用载体结合的预定数量的所公开化合物，所述预定数量计算为产生所需治疗效应。本发明的剂量单位形式由以下指示并直接取决于：(a)所公开化合物的独特特征和待实现的具体治疗效果，和(b)用于治疗患者中的HBV感染的此类所公开化合物的调配/配制领域中固有的局限性。
在一个实施方案中，将本发明的化合物用一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体配制。在一个实施方案中，本发明的药物组合物包含治疗有效量的所公开化合物和药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，所公开的化合物的剂量为约1mg至约2,500mg。在一些实施方案中，本文所述组合物中所用的所公开化合物的剂量小于约10,000mg、或小于约8,000mg、或小于约6,000mg、或小于约5,000mg、或小于约3,000mg、或小于约2,000mg、或小于约1,000mg、或小于约500mg、或小于约200mg、或小于约50mg。类似地，在一些实施方案中，如本文所述的第二化合物(即，用于HBV治疗的另一种药物)的剂量小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约400mg、或小于约300mg、或小于约200mg、或小于约100mg、或小于约50mg、或小于约40mg、或小于约30mg、或小于约25mg、或小于约20mg、或小于约15mg、或小于约10mg、或小于约5mg、或小于约2mg、或小于约1mg、或小于约0.5mg，以及它们的任何和所有全部或部分增量。
在一个实施方案中，本发明涉及包装的药物组合物，其包括：容器，该容器容纳治疗有效量的单独的或与第二药剂组合的所公开化合物；以及使用化合物治疗、预防、或减轻患者中HBV感染的一种或多种症状的说明书。
本发明的任何组合物的给药途径包括口服、鼻腔、直肠、阴道内、肠胃外、颊面、舌下或局部给药途径。在本发明中使用的化合物可被配制成用于通过任何合适的途径给药，例如用于口服或肠胃外，例如经皮、经粘膜(例如，舌下、舌、经(颊)、经(尿道)、阴道(例如，经阴道和阴道周)、鼻(内)和(经)直肠)、膀胱内、肺内、十二指肠内、灌胃、鞘内、皮下、肌肉内、皮内、动脉内、静脉内、支气管内、吸入和局部给药。
合适的组合物和剂型包括例如片剂、胶囊剂、囊片、药丸、胶囊锭、糖锭、分散剂、混悬剂、溶液、糖浆剂、颗粒料、小丸、皮肤贴片、凝胶、粉末、微丸、乳浆剂、锭剂、霜剂、糊剂、硬膏剂、洗剂、盘剂(discs)、栓剂、用于经口或经鼻给药的液体喷雾剂、用于吸入的干粉或雾化制剂、用于膀胱内给药的组合物和制剂等等。应当理解，将用于本发明的制剂和组合物不限于本文所述的具体制剂和组合物。
对于口服应用，特别合适的是片剂、糖衣丸、液体、滴剂、栓剂、或胶囊剂、囊片和胶囊锭。旨在口服使用的组合物可根据本领域已知的任何方法制备，并且此类组合物可包含选自适于制造片剂的惰性无毒的配药学赋形剂的一种或多种试剂。此类赋形剂包括例如惰性稀释剂，诸如乳糖；造粒剂和崩解剂，诸如玉米淀粉；粘合剂，诸如淀粉；以及润滑剂，诸如硬脂酸镁。片剂可以是未包衣的或者它们可用已知技术包衣以求美观或延缓活性成分的释放。口服用的制剂也可提供为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性稀释剂混合。
对于非肠道给药，所公开的化合物可被配制成用于注射或输注，例如静脉内、肌内或皮下注射或输注，或者用于以推注剂量或持续输注给药。可在油性或含水载体中使用混悬剂、溶液或乳剂，所述载体任选地包含其他配制剂诸如悬浮剂、稳定剂或分散剂。
本领域的技术人员将会认识到，或者仅使用常规实验就能够确定本文所述的具体规程、实施方案、权利要求和实施例的多种等同物。此类等同物被考虑在本发明的范围内，并且被这里所附的权利要求涵盖。例如，应当理解，具有领域认可的替代品并且仅使用常规实验的反应条件的修改在本申请的范围内，该反应条件包括但不限于反应时间、反应尺寸/体积和实验试剂，诸如溶剂、催化剂、压力、气氛条件(例如，氮气气氛)以及还原/氧化剂。
应当理解，在本文提供的值和范围的任何地方，由这些值和范围涵盖的所有值和范围都意在涵盖在本发明的范围内。此外，本申请也考虑了落入这些范围内的所有值，以及值范围的上限或下限。
以下实施例进一步说明了本发明的各方面。然而，其决不限制本文所列的本发明的教导内容或公开内容。
实施例
现在将参考示例性合成方案来描述可用于本发明的方法中的示例性化合物，以用于下文的它们的一般性制备和后面的具体实施例。本领域技术人员将认识到，为获得本文的多种化合物，可适当地选择原料，使得在根据需要进行保护或不保护的情况下，在整个反应方案中将携带最终需要的取代基，以得到所期望的产物。另选地，可能需要或者希望采用适宜的基团代替最终期望的取代基，所述适宜的基团可经历整个反应方案，并且在适当情况下用所期望的取代基代替。除非另外指明，否则变量均如上文针对式(Ia)所定义。反应可在溶剂的熔点和回流温度之间进行，并且优选在介于0℃和溶剂的回流温度之间进行。可采用常规加热或微波加热来加热反应。反应还可在密闭压力容器中在高于溶剂的正常回流温度下进行。
本文所用的缩写和首字母缩略词包括以下：
表6：
Figure BDA0001982694780000951
Figure BDA0001982694780000961
Figure BDA0001982694780000971
Figure BDA0001982694780000981
Figure BDA0001982694780000991
制备例
现在将参考示例性合成方案来描述可用于本发明的方法中的示例性化合物，以用于下文的它们的一般性制备和后面的具体示例。
方案1
Figure BDA0001982694780000992
根据方案1，用烷基化剂如2-溴-2-甲基丙酸甲酯等将可商购获得或合成获得的式(Xa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，并且PG为合适的氮保护基团，诸如BOC、Bn等)烷基化，得到式(XIa)的化合物(其中Rb是任选地被CO2Me取代的C1-6烷基)。在本领域的技术人员已知的条件(例如，在有或没有碱诸如NaH、Cs2CO3、K2CO3等的情况下反应)下，在如THF、DMF等的合适溶剂中，用烷基化剂诸如氘甲基碘、烯丙基溴等将式(Xb)的化合物(其中PG为合适的氮保护基团，诸如BOC、Bn等)烷基化，得到式(XIb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
采用本领域的技术人员已知的条件对氮保护基团去保护，提供式(XIIa)和(XIIb)的化合物。例如，在如DCM等的合适溶剂中，利用酸诸如TFA、HCl等移除BOC保护基团。
方案2
Figure BDA0001982694780001001
根据方案2，在酰胺键偶联条件下，使可商购获得或合成获得的式(XIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基)与式(XIIb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)偶联，得到式(XIV)的化合物。例如，在溶剂诸如甲苯、MeCN、EtOAc、DMF、THF、DCM、或它们的混合物中，在脱水剂诸如HOBt/EDAC、CDI、PyBOP、HATU、HOAT、丙基膦酸酐(T3P)以及适当选择的碱诸如DIPEA、TEA等的存在下，使式(XIII)的酸化合物与式(XII)的胺反应，得到式(XIV)的化合物。
采用碱如碳酸铯和相转移催化剂如TBAI，在溶剂如DMF中，使式(XIV)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与溴化氧杂环丁烷在约60-80℃的温度下反应5-6h时段，提供式(XVa)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
在约20℃的温度下，采用碱诸如碳酸钾、溶剂诸如DMF，使式(XIV)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与1-甲基-二溴乙烷反应，提供式(XVb)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
在约40-60℃的温度下，在溶剂如DMF中，采用碱如碳酸铯和相转移催化剂如TBAI，使式(XIV)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与2-溴丙酸乙酯反应14-18h时段，提供式(XVc)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
在约20℃的温度下，采用碱如碳酸铯以及相转移催化剂如TBAI、溶剂如DMF，使式(XIV)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与1-甲基-二溴乙烷反应，提供式(XVd)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
在酰胺键偶联条件下，使可商购获得或合成获得的式(XIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基)与式(XIIa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，并且Rb是任选地被CO2Me取代的C1-6烷基)偶联，得到式(XIVa)的化合物。例如，在溶剂诸如甲苯、MeCN、EtOAc、DMF、THF、DCM、或它们的混合物中，在脱水剂诸如HOBt/EDAC、CDI、PyBOP、HATU、HOAT、丙基膦酸酐(T3P)以及适当选择的碱诸如DIPEA、TEA等的存在下，使式(XIII)的酸化合物与式(XIaI)的胺反应，得到式(XIVa)的化合物。
在约回流温度下，采用偶联剂如DIAD、溶剂如THF，使式(XIV)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，Ra为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，并且Rb是任选地被CO2Me取代的C1-6烷基)与磷酸三烷基酯(例如磷酸三丁酯)反应，提供式(XVe)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)。
方案3
Figure BDA0001982694780001021
根据方案3，式(XVI)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)能够以两步制备。例如，在溶剂诸如DCM中，使式(XVa)的化合物与酸如TFA在约15℃温度下反应约30分钟，得到式(XVI)的化合物(其中Boc基团已被移除)。所得的产物可随后与任选取代的N-芳基苯基氨基甲酸酯例如(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯以及碱如TEA在溶剂诸如DCM中发生反应，得到式(XVI)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环)。
方案4
Figure BDA0001982694780001022
根据方案4，在溶剂诸如DCM中，使式(XVI)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与氟化剂如DAST反应，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2F)。
式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2SC1-C6烷基，并且m为1)以两步制备。首先，在碱如TEA的存在下溶剂诸如DCM中，使式(XVI)的化合物与磺化剂如MsCl在约25℃的温度下偶联约2h，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2OMs且m为1)。其次，在约15℃的温度下，添加含有硫化物亲核试剂诸如甲硫醇钠的溶剂如DMF保持约16h，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2SC1-C6烷基，并且m为1)。
在溶剂诸如DCM中，使式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2SC1-C6烷基，并且m为1)与氧化剂例如m-CPBA在约30℃的温度下反应约16h，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2S(O)C1-C6烷基或CH2SO2C1-C6烷基，并且m为1)。
在溶剂诸如DCM中，采用酸如TFA，使式(XVI)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与NaOCN在约25℃的温度下反应约32h，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2O(O)NH2)。
在溶剂如DMF中，采用碱如DIPEA使用偶联剂如HATU，使式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为COOH，并且m为1)与N(C1-6烷基)0-2诸如甲胺或二甲胺反应，得到式(XVII)的化合物(其中R2为C(O)N(C1-6烷基)0-2且m为1)。
式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为C3-6内酰胺，并且m为1)以2步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，采用碱如TEA使式(XVII)的化合物(其中R2为CH2NH2)与卤烷基酸氯例如ClCH2CH2CH2C(O)Cl反应，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2NHC(O)CH2CH2CH2Cl且m为1)。其次，使之与强碱如NaH在溶剂如THF中发生反应，得到式(XVII)的化合物(R2为C3-6内酰胺，并且m为1)。
在溶剂诸如THF、水、或两者的混合物中，使式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2N3，并且m为1)与膦例如三苯基膦反应，得到式(XVII)的化合物(其中R2为CH2NH2)。
方案5
Figure BDA0001982694780001041
根据方案5，式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2N(C1-6烷基)0-2或C(O)N(C1-6烷基)0-2，并且m为1)以两步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，采用碱如TEA使式(XVIII)的化合物与磺化剂如MsCl反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2OH)。其次，在溶剂如DMF中采用碱如碳酸钾，使式(XVIII)的化合物与胺如N(C1-6烷基)0-2在约80℃的温度下反应约24h，得到(XIX)的化合物(其中R2为CH2N(C1-6烷基)0-2或C(O)N(C1-6烷基)0-2，并且m为1)。
在溶剂如DMF中，采用强碱诸如NaH使式(XVIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与C1-6烷基卤化物、C1-6烯基卤化物、C1-6卤代烷基三氟甲磺酸酯或卤代-C1-6烷基-C1-6环烷基例如MeI、EtI、正丙基碘、烯丙基溴、CHF2CH2OTf、CF3CH2OTf或c-PrCH2Br反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2OC1-6烷基、CH2OC1-6烯基、CH2OC1-6卤代烷基、或CH2OC1-6烷基-C1-6环烷基)。
式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为COOC1-6烷基，并且m为1)以2步制备。首先，使式(XVIII)的化合物与氧化剂如TPAP、助氧化剂如NMO在溶剂如MeCN中反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为COOH)。其次，在溶剂如MeCN中采用碱如碳酸钾，使式(XVIII)的化合物与C1-6烷基-卤化物如MeI反应，得到(XIX)的化合物(其中R2为COOC1-6烷基，并且m为1)。
在溶剂如乙酸乙酯中，使式(XVIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基)与硅烷例如TMSCF3、三氟甲磺酸盐例如三氟甲磺酸银、碱诸如2-氟吡啶、去硅烷基化(desilation)试剂诸如氟化钾、氟化剂例如
Figure BDA0001982694780001051
发生反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2OCF3且m为1)。
在溶剂如MeCN中，使式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2OMs，并且m为1)与胺例如N(C1-6烷基)0-2或N(C1-6卤代烷基)0-2、碱诸如碳酸钾在约80℃的温度下反应约16h，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2N(C1-6烷基)0-2或N(C1-6卤代烷基)0-2且m为1)。
在溶剂如MeCN中，使式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为COOH，并且m为1)与胺例如N(C1-6烷基)0-2、N(C1-6卤代烷基)0-2或N(C1-6烷基)(C1-6卤代烷基)、碱诸如3-甲基吡啶、磺化剂例如MsCl在约0℃至30℃的温度下反应约1h，得到式(XIX)的化合物(其中R2为C(O)N(C1-6烷基)0-2、C(O)N(C1-6卤代烷基)0-2、或C(O)N(C1-6烷基)(C1-6卤代烷基)且m为1)。
式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2NHC(O)C1-6烷基，并且m为1)以三步制备。首先，在溶剂如DMF中，使式(XIX)的化合物(其中R2为CH2OMs且m为1)与亲核叠氮化物例如叠氮化钠在约70℃的温度下反应约16h，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2N3)。其次，使式(XIX)的化合物与膦例如三苯基膦在溶剂诸如THF、水、或这两者的混合物中发生反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2NH2)。第三，使式(XIX)的化合物与C1-6烷基酸酐例如乙酸酐、碱诸如TEA在溶剂诸如DCM中发生反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2NHC(O)C1-6烷基)。
在溶剂诸如DCM中，使式(XIX)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2为CH2NH2，并且m为1)与C1-6烷基-SO2-卤化物例如MsCl、碱诸如TEA发生反应，得到式(XIX)的化合物(其中R2为CH2NH(SO2C1-6烷基)，并且m为1)。
方案6
Figure BDA0001982694780001061
方法A：
根据方案6，式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2如任何以上示例所述，并且m为1)以2步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，使式(XIX)的化合物与酸诸如TFA在约15℃的温度下反应约30分钟，得到式(XIX)的化合物(其中Boc已被移除)。其次，在约25℃的温度下，添加溶于溶剂诸如DCM中的可用于形成异氰酸酯的试剂诸如三光气、任选取代的芳基胺如苯胺(analine)、碱诸如TEA保持约15min，得到式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环)。
方法B：
式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2如任何以上示例所述，并且m为1)以2步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，使式(XIX)的化合物与酸诸如TFA在约15℃的温度下反应约30分钟，得到式(XIX)的化合物(其中Boc已被移除)。其次，添加溶于溶剂诸如DCM中的任选取代的N-芳基苯基氨基甲酸酯诸如(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯和碱诸如TEA，得到式(XVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环)。
方案7
Figure BDA0001982694780001071
根据方案7，采用合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等对可商购获得或合成获得的式(XXa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，并且PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等)进行保护，得到式(XXIa)的化合物(其中PG2为合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等)。
式(XXIIa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等，PG2为合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等，并且Rb为CH2CH2OH)以两步由(XXIa)制备。首先，在本领域的技术人员已知的条件(例如，在有或没有碱诸如NaH、Cs2CO3、K2CO3等的情况下反应)下，在如THF、DMF等的合适溶剂中，用烷基化剂诸如1-溴-甲基乙酸酯等将(XXIa)烷基化，得到式(XXIIa)的化合物(其中Rb为CH2(O)OMe)。其次，在本领域的技术人员已知的条件下还原，例如在诸如THF等的合适溶剂中使用硼氢化锂等进行还原，得到式(XXIIa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等，PG2为合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等，并且Rb为CH2CH2OH)。
在本领域的技术人员已知的条件(例如，在有或没有碱诸如二异丙基乙胺、NaH、Cs2CO3、K2CO3等情况下反应)下，在诸如THF、DMF等的合适溶剂中，用烷基化剂诸如(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷等将可商购获得或合成获得的式(XXb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，并且PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等)烷基化，得到式(XXIb)的化合物(其中Rc为CH2CH2OTBS等)。
式(XXIIb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等，Rb为Me或CH2CH＝CH2，并且Rc为CH2CH2OH等)以两步制备。首先，在本领域的技术人员已知的条件下进行烷基化，例如在有或没有碱诸如二异丙基乙胺、NaH、Cs2CO3、K2CO3等的情况下，在诸如THF、DMF等的合适溶剂中，采用烷基化剂诸如烯丙基溴、碘甲烷等反应，得到式(XXIIb)的化合物(其中Rb为Me或CH2CH＝CH2)。其次，在本领域的技术人员已知的条件下进行去保护，例如在合适的溶剂诸如乙酸乙酯等中使用盐酸等去保护，得到式(XXIIb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，PG为合适的氮保护基团诸如BOC、Bn等，Rc为CH2CH2OH且Rb为Me或CH2CH＝CH2)。
采用本领域的技术人员已知的条件对氮保护基团去保护，提供式(XXIIIa)和(XXIIIb)的化合物。例如，在如DCM等的合适溶剂中，利用酸诸如TFA、HCl等移除BOC保护基团。
任何以上烷基化步骤是任选的。在不存在烷基化情况下，质子被理解为替代Rb或Rc。
方案8
Figure BDA0001982694780001081
根据方案8，在酰胺键偶联条件下，使可商购获得或合成获得的式(XIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基)与式(XXIIIa)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，PG2为合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等，并且Rb为2-乙醇)进行偶联，得到式(XXIVa)的化合物。例如，在溶剂诸如甲苯、MeCN、EtOAc、DMF、THF、DCM、或它们的混合物中，在脱水剂诸如HOBt/EDAC、CDI、PyBOP、HATU、HOAT、丙基膦酸酐(T3P)以及适当选择的碱诸如DIPEA、TEA等的存在下，使式(XIII)的酸化合物与式(XXIIIa)的胺反应，得到式(XXIVa)的化合物。
在酰胺键偶联条件下，使可商购获得或合成获得的式(XIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基)与式(XXIIIb)的化合物(其中Ra为C1-6烷基，Rc为CH2CH2OH，并且Rb为Me或CH2CH＝CH2)进行偶联，得到式(XXIVb)的化合物。例如，在溶剂诸如甲苯、MeCN、EtOAc、DMF、THF、DCM、或它们的混合物中，在脱水剂诸如HOBt/EDAC、CDI、PyBOP、HATU、HOAT、丙基膦酸酐(T3P)以及适当选择的碱诸如DIPEA、TEA等的存在下，使式(XIII)的酸化合物与式(XXIIIb)的胺反应，得到式(XXIVb)的化合物。
在溶剂诸如DCM中，采用碱如三乙胺，使式(XXIVa)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，其中Ra为C1-6烷基，PG2为合适的氮保护基团诸如羧基苄基(Cbz)等，并且Rb为2-乙醇)与MsCl发生反应，得到式(XXVa)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基且R1为C1-6烷基，并且R2为合适的氮保护基团如羧基苄基(Cbz))。
在溶剂诸如DCM中，采用碱如三乙胺使式(XXIVb)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，其中Ra为C1-6烷基，Rc为CH2CH2OH，并且Rb为Me或CH2CH＝CH2)与MsCl发生反应，得到式(XXVa)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基并且R1为C1-6烷基，并且R2为Me或CH2CH＝CH2)。
采用本领域的技术人员已知的条件对氮保护基团进行去保护，提供式(XXVa)的化合物(其中R2为H)。例如，在诸如MeOH等的合适溶剂中，采用氢气和载于碳上的钯等移除Cbz保护基团。
方案9
Figure BDA0001982694780001101
根据方案9，在溶剂如MeOH中，使式(XXVI)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基)与还原剂诸如氢气和载于碳上的钯进行反应，得到式(XXVII)的化合物(其中R2为CH2CH2CH3)。
式(XXVII)化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH2CH2OH)以两步制备。首先，在溶剂诸如THF与水的混合物中在NaIO4的存在下，采用试剂诸如OsO4使式(XXVI)的化合物氧化，得到式(XXVII)的化合物(其中R2为CH2CH＝O)。其次，添加溶于诸如THF和乙醇混合物的溶剂中的还原剂诸如硼氢化钠，得到式(XXVII)的化合物(其中R2为CH2CH2OH)。
式(XXVII)化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH2CHF2)以两步制备。首先，在溶剂诸如THF与水的混合物中在NaIO4的存在下，采用试剂诸如OsO4使式(XXVI)的化合物氧化，得到式(XXVII)的化合物(其中R2为CH2CH＝O)。其次，添加溶于诸如DCM的溶剂中的氟化剂诸如DAST，得到式(XXVII)的化合物(其中R2为CH2CHF2)。
方案10
Figure BDA0001982694780001102
根据方案9，使用溶于溶剂诸如THF中的试剂诸如BH3-DMS，之后以碱诸如氢氧化钠以及氧化剂诸如过氧化氢，使式(XXVIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基)在硼氢化条件下反应，得到式(XXIX)的化合物(其中R2为CH2CH2CH2OH)。
使用溶于溶剂诸如THF中的试剂诸如BH3-DMS，之后以碱诸如氢氧化钠以及氧化剂诸如过氧化氢，使式(XXVIII)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，并且R1为C1-6烷基)在硼氢化条件下反应，得到式(XXIX)的化合物(其中R2为CH2CHOHCH3)。
方案11
Figure BDA0001982694780001111
式(XXXI)化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH2OH)以三步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，在合适的酸诸如对甲苯璜酸的存在下，使式(XXX)的化合物与试剂诸如3-氯-2-氧代丙基乙酸酯发生偶联。其次，在合适的碱诸如吡啶的存在下，添加溶于溶剂诸如DCM中的试剂诸如MsCl。第三，添加溶于溶剂诸如THF中的合适的碱如氢化钠，得到式(XXXI)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH2OH)。
式(XXXI)化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为Me)以三步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，在合适的酸诸如对甲苯璜酸的存在下，使式(XXX)的化合物与试剂诸如1-羟基丙-2-酮发生偶联。其次，在合适的碱诸如吡啶的存在下，添加溶于溶剂诸如DCM中的试剂诸如MsCl。第三，添加溶于溶剂诸如THF中的合适的碱如氢化钠，得到式(XXXI)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为Me)。
方案12
Figure BDA0001982694780001121
式(XXXI)化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH(Et)OH、CH(Me)OH、或CH(cPr)OH)以两步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，采用试剂诸如DMP使式(XXXII)的化合物氧化。其次，添加溶于溶剂诸如THF中的格氏试剂诸如EtMgBr、MeMgBr、或cPrMgBr，得到式(XXXI)的化合物(其中R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2为CH(Et)OH、CH(Me)OH、或CH(cPr)OH)。
方案13
Figure BDA0001982694780001122
方法A：
根据方案13，将式(XXXIII)或式(XXVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基，并且R2如任何以上示例所述)以2步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，使式(XXXI)或式(XXIX)的化合物与酸诸如TFA在约15℃的温度下反应约30分钟，得到式(XXXI)或式(XXIX)的化合物(其中Boc已被移除)。其次，在约25℃的温度下，添加溶于溶剂诸如DCM中的可用于形成异氰酸酯的试剂诸如三光气、任选取代的芳基胺如苯胺(analine)、碱诸如TEA保持约15min，得到式(XXXIII)或式(XXVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环)。
方法B：
式(XXXIII)或式(XXVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环，R3为H或C1-6烷基，R1为C1-6烷基、C1-6卤代烷基、或C1-6烯基，R2如以上任何示例所述，并且m为1)以2步制备。首先，在溶剂诸如DCM中，使式(XXXI)或式(XXIX)的化合物与酸诸如TFA在约15℃的温度下反应约30分钟，得到式(XXXI)或式(XXIX)的化合物(其中Boc已被移除)。其次，添加溶于溶剂诸如DCM中的任选取代的N-芳基苯基氨基甲酸酯诸如(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯和碱诸如TEA，得到式(XXXIII)或式(XXVII)的化合物(其中Ar为任选取代的芳基环)。
中间体1：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡 唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001131
步骤1：3-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在-78℃和N2下，向LiHMDS(1M，652.44mL，1.30当量)中滴加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(100.00g，501.88mmol，1.00当量)于THF(1.00L)中的溶液。将反应混合物在N2下于-78℃下搅拌30分钟。滴加草酸二乙酯(95.35g，652.44mmol，1.30当量)。在添加之后，将反应混合物在30分钟时段内升温至15℃并在15℃下再搅拌2小时。TLC显示反应已经完成。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1.5L)猝灭，然后用稀盐酸中和，用EtOAc(800mL*3)萃取水层。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(165.00g，粗制物)并直接用于下一步骤。
步骤2：1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基-3-乙酯的制备：使3-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(165.00g，551.25mmol，1.00当量)和NH2NH2.H2O(35.71g，606.37mmol，1.10当量)在AcOH(1.00L)中的混合物脱气并用N2吹扫3次。然后，将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌1小时。TLC和LCMS显示反应已经完成。将混合物减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc(800mL)中并用Na2CO3(1N，1.2L)洗涤。用乙酸乙酯(800mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤(1L*2)，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(130.00g，440.19mmol，79.85％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝4.57-4.65(m,2H),4.36(d,J＝7.03Hz,2H),3.67-3.74(m,2H),2.75(t,J＝5.65Hz,2H),1.49(s,9H),1.36-1.40(m,3H)。LCMS:296[M+1]
步骤3：3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔 丁酯的制备：在0℃下，将金属钠(7.78g，338.60mmol，8.02mL，10.00当量)分批加入MeOH(100.00mL)中，并将混合物在N2下于15℃下搅拌0.5小时。然后，将N-甲基羟胺(8.48g，101.58mmol，3.00当量，HCl)加入混合物中，并将混合物在N2下于15℃下搅拌0.5小时。随后，添加1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯(10.00g，33.86mmol，1.00当量)，将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌16小时。TLC显示原料完全被消耗并且主要检测到一个新斑点。将混合物倾注到冰水(300mL)中并搅拌5min。然后，对混合物进行真空浓缩以获得残余物。将水相的pH用稀盐酸(1N)调节至约6并用乙酸乙酯(100mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(300mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(8.00g，27.00mmol，79.73％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝4.62(brs,2H)3.70(t,J＝5.52Hz,2H)3.31-3.58(m,3H)2.74(s,2H)1.48(s,9H)。LCMS:297[M+1]
步骤4：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：使3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(8.00g，27.00mmol，1.00当量)、3-溴氧杂环丁烷(4.07g，29.70mmol，1.10当量)、TBAI(997.22mg，2.70mmol，0.10当量)和Cs2CO3(13.19g，40.50mmol，1.50当量)在DMF(80.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌3小时。TLC显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(200mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(100mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(300mL*2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/2)纯化残余物，以获得黄色固体状标题化合物(4.50g，12.39mmol，45.88％收率，97％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.62(brs,2H)4.53(brs,2H)4.32-4.42(m,1H)3.57-3.88(m,4H)3.29(br.s.,3H)2.68-2.79(m,2H)1.41-1.53(m,9H)。LCMS:353[M+1]。
通过SFC来分离4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(2.6g)的外消旋体，得到两种对映体E1(1.2g，第一峰)和E2(1.3g，第二峰)(SFC分离条件：柱：Chiralpak AD-3100×4.6mm I.D.，3um；流动相：含甲醇(0.05％DEA)的CO2，5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm)。各对映体独立地用于以两个连续的Boc保护和脲形成步骤来制备目标脲。
中间体2：3-氯-4-氟-N-甲苯胺：
Figure BDA0001982694780001151
步骤1：N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯的制备：在N2下于15℃下，向3-氯-4-氟-苯胺(1.00g，6.87mmol，1.00当量)和(Boc)2O(3.00g，13.74mmol，3.16mL，2.00当量)在H2O(10.00mL)中的混合物中滴加TEA(2.09g，20.61mmol，2.86mL，3.00当量)。将混合物在10-20℃下搅拌3h。LCMS显示剩余3.6％的原料且产生93.2％的期望产物。用DCM(10mL*2)萃取反应混合物。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。用PE(2mL)冲洗残余物。通过过滤收集固体，并在高真空中干燥，以获得白色固体状标题化合物(1.10g，4.48mmol，65.21％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(br s,1H),7.60-7.81(m,1H),7.23-7.44(m,2H),3.33(s,2H),2.37-2.60(m,11H),1.47(s,9H)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯的制备：在N2下于0-5℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯(600.00mg，2.44mmol，1.00当量)在DMF(5.00mL)中的混合物中添加NaH(195.38mg，4.88mmol，60％纯度，2.00当量)。将所得的混合物在20℃下搅拌1小时。然后，在15-20℃下滴加CH3I(1.04g，7.32mmol，455.70μL，3.00当量)。将所得的混合物搅拌2小时。LCMS显示原料被消耗，并且形成98.55％期望的产物。将混合物倾注到水(20mL)中并用EtOAc(3*5mL)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，以获得黄色油状标题化合物(500.00mg，1.93mmol，78.91％收率)，将其直接用于下一步骤。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ7.30(dd,J＝2.01,6.53Hz,1H),7.26(s,1H),7.04-7.14(m,2H),3.22(s,3H),1.39-1.52(m,9H)
步骤3：3-氯-4-氟-N-甲基-苯胺的制备：在低于0℃下，向HCl的二氧杂环己烷(4M，5.00mL，11.56当量)溶液中添加N-(3-氯-4-氟苯基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(450.00mg，1.73mmol，1.00当量)。将所得的混合物在0-5℃下搅拌1小时，然后自然升温至15-20℃并在15-20℃下搅拌2小时。LCMS显示原料被消耗，并且形成98％的期望产物。使所得的混合物减压浓缩，以获得白色固体状标题化合物(240.00mg，1.22mmol，70.76％收率，HCl)，其直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
中间体3：4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001161
步骤1：叔丁基-5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-3,3-二甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸 酯的制备：在N2下于-78℃下，向LiHMDS(1M，5.72mL，1.30当量)中添加3,3-二甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g，4.40mmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟。滴加草酸二乙酯(835.82mg，5.72mmol，781.14μL，1.30当量)。在添加之后，将反应混合物升温至15℃并再搅拌2小时。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到具有较大极性的主要新斑点。将反应用稀HCl(1N，40mL)猝灭，然后用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(1.00g，粗制物)。将产物用于下一步骤而无需纯化。
步骤2：7,7-二甲基-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-(叔丁 基)3-乙酯的制备：向5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-3,3-二甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(800.00mg，2.44mmol，1.00当量)的EtOH(10.00mL)溶液中添加NH2NH2.H2O(143.70mg，2.44mmol，139.51μL，85％纯度，1.00当量)。将反应混合物在15℃下搅拌2小时。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到一个具有较大极性的主要新斑点。将反应混合物用EtOAc(150mL)稀释并用水(80mL*2)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(760.00mg，2.23mmol，91.50％收率，95％纯度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝4.61(s,2H)4.33-4.38(q,J＝7.11Hz,2H)3.44(brs,2H)1.49(s,9H)1.37-1.40(t,J＝7.09Hz,3H)1.28(s,6H)。LCMS:324[M+1]。
步骤3：5-叔丁氧羰基-7,7-二甲基-4,6-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的 制备：向7,7-二甲基-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-(叔丁基)3-乙酯(900.00mg，2.78mmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中添加NaOH(222.64mg，5.57mmol，2.00当量)的H2O(2.00mL)溶液，将反应混合物升温至50℃并于50℃下搅拌5小时。TLC显示反应已经完成。将反应混合物的pH通过添加稀盐酸(2N，10mL)调节至约6，然后用EtOAc(100mL*4)和水(20mL)萃取，将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到白色固体状标题化合物(780.00mg，2.59mmol，93.10％收率，98％纯度)。将产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。LCMS:296[M+1]。
步骤4：3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-7,7-二甲基-4,6-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡 啶-5-羧酸叔丁酯的制备：向5-叔丁氧羰基-7,7-二甲基-4,6-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(200.00mg，677.21μmol，1.00当量)在THF(5.00mL)中的混合物中添加T3P(1.72g，2.71mmol，1.61mL，50％纯度，4.00当量)和TEA(342.63mg，3.39mmol，469.36μL，5.00当量)，然后添加N-甲基羟胺(113.12mg，1.35mmol，2.00当量，HCl)，将反应混合物在40℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释并用水(50mL*2)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(70.00mg，215.80μmol，31.87％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.64(s,2H)3.39(brs,5H)1.47(s,9H)1.27(s,6H)。LCMS:269[M+1-56]。
步骤5：4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9-六氢吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(11H)-羧酸叔丁酯的制备：向3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-7,7-二甲基-4,6-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(70.00mg，215.80μmol，1.00当量)和3-溴氧杂环丁烷(35.47mg，258.96μmol，1.20当量)在DMF(2.00mL)中的混合物中添加Cs2CO3(105.47mg，323.70μmol，1.50当量)和TBAI(7.97mg，21.58μmol，0.10当量)，将反应混合物升温至75℃并于75℃下搅拌3小时。LCMS示出剩余约50％的原料。将反应混合物在75℃再搅拌3小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释并用水(50mL*3)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以得到黄色油状标题化合物(53.00mg，粗制物)。将产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。LCMS:381[M+1]。
中间体4：4-(羟甲基)-2,8-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001191
步骤1：3-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向1-苄基-3-甲基-哌啶-4-酮(2.00g，9.84mmol，1.00当量)和Boc2O(2.15g，9.84mmol，2.26mL，1.00当量)在MeOH(50.00mL)中的溶液中添加Pd/C(9.84mmol，1.00当量)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫几次。在H2(50psi)下于20℃下，将混合物搅拌16小时。TLC(PE:EA＝5:1)显示反应已经完成。过滤混合物。真空浓缩滤液。通过柱色谱(PE:EA＝0％～15％)纯化残余物，得到无色油状标题化合物(2.00g，9.38mmol，95.33％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.16-4.24(m,1H),3.22-3.33(m,1H),2.86(brs,1H),2.38-2.61(m,3H),1.51(s,9H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H)。
步骤2：3-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-5-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯的制 备：在-60℃下，向3-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.00g，9.38mmol，1.00当量)的THF(40.00mL)溶液中滴加LiHMDS(1M，11.26mL，1.20当量)。将混合物在-60℃下搅拌30min。在-60℃下滴加草酸二乙酯(1.51g，10.32mmol，1.41mL，1.10当量)。然后将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC(PE:EA＝5:1)显示反应已经完成。将反应物用饱和NH4Cl(20mL)猝灭并用EtOAc(60mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。使滤液真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(2.00g，粗制物)。
步骤3：7-甲基-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-(叔丁基)3- 乙酯的制备：向3-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-5-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.00g，6.38mmol，1.00当量)的EtOH(40.00mL)溶液中添加NH2NH2.H2O(394.59mg，6.70mmol，383.10μL，85％纯度，1.05当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。经由LCMS检测主要的期望产物。将混合物真空浓缩。将残余物用EtOAc(80mL)和H2O(30mL)稀释。将有机相经Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(PE:EA：10％～50％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(1.00g，3.23mmol，50.61％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.30-1.34(m,3H)1.41(t,J＝7.09Hz,3H)1.49-1.55(m,9H)2.98-3.38(m,2H)3.74-4.08(m,1H)4.40(q,J＝6.78Hz,2H)4.47-4.68(m,1H)4.78(d,J＝17.19Hz,1H)。
步骤4：5-叔丁氧羰基-7-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的制备：向7-甲基-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-(叔丁基)3-乙酯(1.00g，3.23mmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中添加NaOH(258.40mg，6.46mmol，2.00当量)的H2O(2.00mL)溶液。将混合物在40℃下搅拌16小时。TLC(PE:EA＝1:1)显示反应已经完成并且出现一个主要斑点。将混合物的pH用1N HCl(10mL)调节至5～6并用EtOAc(20mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液，得到白色固体状标题化合物(850.00mg，2.95mmol，91.21％收率，97.5％纯度)。LCMS:282[M+1]。
步骤5：3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-7-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶- 5-羧酸叔丁酯的制备：向5-叔丁氧羰基-7-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(200.00mg，710.96μmol，1.00当量)和N-甲基羟胺(237.52mg，2.84mmol，4.00当量，HCl)在THF(5.00mL)中的溶液中添加T3P(1.81g，2.84mmol，1.69mL，50％纯度，3.99当量)，然后添加TEA(575.54mg，5.69mmol，788.41μL，8.00当量)。将混合物加热至40℃持续16小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示出现两个主要斑点。将混合物用EtOAc(20mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。将滤液浓缩。通过柱色谱(PE:EA＝50％～100％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(66.00mg，212.66μmol，29.91％收率)。LCMS:312[M+1]。
步骤6：4-(羟甲基)-2,8-二甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9-六氢吡啶并[4',3':3,4] 吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(11H)-羧酸叔丁酯的制备：向3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-7-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(60.00mg，193.33μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加Cs2CO3(188.97mg，579.99μmol，3.00当量)，然后添加3-溴氧杂环丁烷(31.78mg，232.00μmol，1.20当量)。将混合物在75℃下搅拌4小时。LCMS显示反应已经完成，检测到主要的期望产物。将混合物用EtOAc(60mL)和H2O(30mL)稀释。将有机层分离并用H2O(30mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤。将滤液真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(60.00mg，粗制物)。LCMS:367[M+1]。
中间体5：2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡 唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001211
步骤1：3-[乙基(羟基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔 丁酯的制备：向5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(100.00mg，374.14μmol，1.00当量)的DMF(3.00mL)溶液中添加HATU(184.94mg，486.38μmol，1.30当量)、DIPEA(241.77mg，1.87mmol，326.72μL，5.00当量)和N-乙基羟胺(109.48mg，1.12mmol，3.00当量，HCl)。将混合物在80℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到期望产物并且剩余约20％的原料。将混合物倾注到水(20mL)中并用DCM(20mL*2)萃取。将有机层用盐水(30mL*3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)纯化粗制物，以获得无色油状标题化合物(36.00mg，115.65μmol，30.91％收率，99.7％纯度)。LCMS:311[M+1]。
步骤2：2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：向3-[乙基(羟基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(36.00mg，116.00μmol，1.00当量)和3-溴氧杂环丁烷(19.07mg，139.20μmol，1.20当量)在DMF(2.00mL)中的溶液中添加Cs2CO3(45.35mg，139.20μmol，1.20当量)和TBAI(4.28mg，11.60μmol，0.10当量)。将混合物在75℃下搅拌3小时。LCMS显示剩余约40％的原料2。将混合物在75℃下再搅拌3小时。将混合物用乙酸乙酯(40mL)稀释，用盐水(30mL*3)洗涤。将有机层用无水Na2SO4干燥，真空浓缩。通过制备型TLC(100％乙酸乙酯)纯化粗制物。获得无色油状标题化合物(25.00mg，68.23μmol，58.82％收率)。
中间体6：3-(羟基(甲基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5- 羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001221
步骤1：3-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于-78℃下，向LiHMDS(1M，652.44mL，1.30当量)中滴加含有4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(100.00g，501.88mmol，1.00当量)的THF(1.00L)溶液。将反应混合物在N2下于-78℃下搅拌30分钟。然后滴加草酸二乙酯(95.35g，652.44mmol，1.30当量)。在添加之后，将反应混合物在30分钟时段内升温至15℃并在15℃下再搅拌2小时。TLC(PE/EA＝3/1)显示反应已经完成。将反应用NH4Cl(饱和水溶液，1.5L)猝灭，然后用稀盐酸中和，用EtOAc(800mL×3)萃取水层。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(165.00g，粗制物)并直接用于下一步骤。
步骤2：1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯的制备：使3-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(165.00g，粗制物，551.25mmol，1.00当量)和NH2NH2·H2O(35.71g，606.37mmol，1.10当量)在AcOH(1.00L)中的混合物脱气并用N2吹扫3次。然后，将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌1小时。TLC(PE/EA＝1/1)和LCMS显示反应已经完成。将混合物减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc(800mL)中并用Na2CO3(1N，1.2L)洗涤。用乙酸乙酯(800mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(1L×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色固体状标题化合物(130.00g，440.19mmol，79.85％收率)。LCMS:296[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝4.57-4.65(m,2H),4.36(d,J＝7.03Hz,2H),3.67-3.74(m,2H),2.75(t,J＝5.65Hz,2H),1.49(s,9H),1.36-1.40(m,3H)。
步骤3：5-叔丁氧羰基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的制备：使1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯(10.00g，33.86mmol，1.00当量)和NaOH(2.03g，50.79mmol，1.50当量)在THF(100.00mL)和H2O(20.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于40℃下搅拌16小时。然后将混合物在50℃下搅拌4h，LCMS显示反应已经完成。将混合物用水(100mL)稀释，并且用EA(50mL×2)萃取。将水相分离并通过添加稀盐酸(1N)调节pH～6，沉淀出固体。过滤混合物并真空浓缩滤饼，得到黄色固体状标题化合物(8.00g，29.93mmol，88.40％收率，100％纯度)。LCMS:268[M+1]
步骤4：3-(羟基(甲基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧 酸叔丁酯的制备：使5-叔丁氧羰基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(3.00g，11.22mmol，1.00当量)、N-甲基羟胺(1.41g，16.83mmol，1.50当量，HCl)、T3P(17.86g，56.10mmol，16.69mL，5.00当量)和TEA(11.35g，112.20mmol，15.55mL，10.00当量)在THF(30.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于50℃下搅拌16小时。LCMS显示反应已经完成。将混合物倾注到水(80mL)中，通过1N HCL调节水层pH～4，然后用DCM(40mL×3)萃取水层，将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，PE/EA＝100/1至1/1)纯化残余物以获得粗产物，将该粗产物用EtOAc冲洗，获得白色固体状标题化合物(1.30g，4.39mmol，39.10％收率，100％纯度)。LCMS:319[M+23]。
中间体7：2,5-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5, 1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001241
向3-(羟基(甲基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(中间体6，50.00mg，168.74μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加TBAI(6.23mg，16.87μmol，0.10当量)。将反应混合物在15℃下搅拌3小时。LCMS显示剩余约77％的原料，并且检测到约8.5％的期望产物。将反应混合物在50℃下再搅拌24小时。TLC显示剩余有原料并且形成两个新斑点。将反应混合物用水(20mL)猝灭并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl洗涤。通过制备型TLC(PE/EA，1/3)纯化残余物，得到作为白色固体获得的标题化合物(10.00mg，29.73μmol，17.62％收率)。LCMS:337[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)(试运行EW4043-68)δ4.60-4.76(m,3H),4.48(dd,J＝5.52,11.42Hz,1H),3.88-4.04(m,1H),3.73-3.85(m,1H),3.66(s,1H),3.31(s,3H),2.79(s,2H),1.62(d,J＝6.65Hz,3H),1.49(s,9H)。
中间体8：2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5, 1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001242
步骤1：3-[(2-乙氧基-1-甲基-2-氧代-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四 氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向3-(羟基(甲基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(中间体6，400.00mg，1.35mmol，1.00当量)的THF(20.00mL)溶液中添加t-BuOK(151.50mg，1.35mmol，1.00当量)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。然后，在N2下滴加2-溴丙酸乙酯(232.00mg，1.28mmol，166.91μL，0.95当量)的THF(4.00mL)溶液。在添加之后，将反应混合物在15℃下搅拌2小时。TLC(PE/EA，1/2)指示原料完全被消耗并且形成两个新斑点。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(15mL)猝灭，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用水(15mL)和盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(PE/EA，2/1至1/1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(510.00mg，1.29mmol，95.29％收率)。
步骤2：3-[(2-羟基-1-甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并 [4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制备：在-10℃下，向3-[(2-乙氧基-1-甲基-2-氧代-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(400.00mg，706.29μmol，1.00当量)的THF(5.00mL)溶液中添加NaBH4(26.72mg，706.29μmol，1.00当量)，然后添加MeOH(200.00μL)。将混合物在10℃下搅拌2小时。TLC显示原料被消耗并且出现三个斑点。将混合物用饱和NH4Cl(10mL)猝灭并用EtOAc(20mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过制备型TLC(EA：MeOH＝10：1)纯化残余物，得到无色油状标题化合物(80.00mg，225.73μmol，31.96％收率)。
步骤3：2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1- d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向3-[(2-羟基-1-甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(70.00mg，197.52μmol，1.00当量)的THF(4.00mL)溶液添加三丁基膦(79.92mg，395.04μmol，97.46μL，2.00当量)，然后添加DIAD(79.88mg，395.04μmol，76.81μL，2.00当量)。将混合物加热至60℃持续16小时。TLC显示原料被消耗并且出现一个主要斑点。将混合物用EtOAc(30mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过制备型TLC(PE:EA＝1:2)纯化残余物，得到无色油状标题化合物(42.00mg，124.86μmol，63.21％收率)。
中间体9：2,4,4-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001261
步骤1：甲基-2-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氧基-2-甲基-丙酸酯的制备：在15℃下，向CH3ONa(587.78mg，10.88mmol，1.00当量)的MeOH(20.00mL)溶液中添加2-溴-2-甲基-丙酸甲酯(1.97g，10.88mmol，1.41mL，1.00当量)和N-羟基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.60g，10.88mmol，1.00当量)。将混合物在搅拌下加热至60℃维持16h。TLC(PE:EtOAc＝5:1)显示原料被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。使混合物蒸发以除去溶剂并得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至20/1)纯化残余物，获得灰白色液体状标题化合物(2.30g，9.30mmol，85.49％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.74(s,3H),3.11(s,3H),1.48(d,J＝4.9Hz,15H)。
步骤2：N-(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯的制备：在N2下于-78℃下，将LiBH4(704.60mg，32.35mmol，4.00当量)装入冷却的三颈圆底烧瓶中，然后滴加2-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氧基-2-甲基-丙酸甲酯(2.00g，8.09mmol，1.00当量)的THF(20.00mL)溶液。在添加之后，将反应混合物升温至0℃并在0℃下搅拌2小时。TLC(PE:EtOAc＝2:1)显示反应物3被完全消耗，并且形成一个主要斑点。将混合物用20mL的水猝灭并过滤，得到滤液。用EtOAc(20mL*3)萃取滤液，并且合并有机相。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至15/1)纯化残余物，获得灰白色液体状标题化合物(1.30g，5.93mmol，73.32％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.60(brs,1H),3.59(br d,J＝12.35Hz,1H),3.01-3.21(m,4H),1.49(s,9H),1.15-1.33(m,6H)。
步骤3：2-甲基-2-(甲基氨基氧基)丙-1-醇的制备：在搅拌和15℃下，向N-(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.30g，5.93mmol，1.00当量)的二氧杂环己烷(2.00mL)溶液中添加HCl/二氧杂环己烷(4M，6.00mL，4.05当量)维持2h。TLC(PE:EtOAc＝3:1)显示原料被完全消耗，并且形成一个主要斑点。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(1.10g，粗制物，HCl)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝3.75(s,2H),2.95(s,3H),1.37(s,6H)。
步骤4：3-[(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑 并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制备：向5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(800.00mg，2.99mmol，1.00当量)和2-甲基-2-(甲基氨基氧基)丙-1-醇(604.89mg，3.89mmol，1.30当量，HCl)在THF(8.00mL)中的溶液中添加T3P(3.81g，5.98mmol，3.56mL，50％纯度，2.00当量)和TEA(2.42g，23.92mmol，3.32mL，8.00当量)。将混合物在30℃下搅拌2小时。LCMS显示30％的期望产物和40％的副产物(MS+1＝747)。将混合物用饱和NH4Cl(50mL)稀释并用EtOAc(50mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(PE:EA：30％～100％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(200.00mg，542.84μmol，18.16％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.70(brs,2H),3.60-3.77(m,4H),3.50(brs,3H),2.77(t,J＝5.32Hz,2H),1.49(s,9H),1.36(s,6H)。
步骤5：2,4,4-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5, 1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向3-[(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(200.00mg，542.84μmol，1.00当量)的THF(2.00mL)溶液中添加三丁基膦(219.66mg，1.09mmol，267.87μL，2.00当量)，然后添加DIAD(219.54mg，1.09mmol，211.09μL，2.00当量)。将混合物加热至80℃持续16小时。TLC(PE:EA＝0:1)显示原料被消耗并且出现一个主要斑点。将混合物用EtOAc(10mL*2)和H2O(10mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过制备型TLC(PE:EA＝0:1)纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(150.00mg，428.07μmol，78.86％收率)。
中间体10：2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1- d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001281
在15℃下，向3-(羟基(甲基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(中间体6，100.00mg，337.47μmol，1.00当量)和K2CO3(93.28mg，674.94μmol，2.00当量)在DMF(3.00mL)中的混合物中一次性加入1,2-二溴乙烷(69.74mg，371.22μmol，28.01μL，1.10当量)。将混合物于15℃下搅拌36小时。LCMS和TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示反应已经完成。将混合物倾注到水(15mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(15mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(55.00mg，170.62μmol，50.56％收率，100％纯度)。LCMS:323[M+1]。
中间体11：N-烯丙基羟胺：
Figure BDA0001982694780001282
步骤1：[烯丙基(叔丁氧羰基)氨基]叔丁基碳酸酯的制备：在N2下，向(叔丁氧羰基氨基)叔丁基碳酸酯(5.50g，23.58mmol，1.00当量)的DMF(30.00mL)溶液中添加K2CO3(6.52g，47.16mmol，2.00当量)和3-溴丙-1-烯(3.71g，30.65mmol，1.30当量)，将反应混合物在50℃下搅拌12小时。TLC指示原料完全被消耗并且形成一个新斑点。对反应混合物进行过滤并用EtOAc(100mL×3)洗涤滤饼，向有机层添加水(200mL)并用EtOAc(200mL×3)萃取，将合并的各层用水(50mL×3)和盐水(150mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(5.20g，19.03mmol，80.68％收率)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.76-6.00(m,1H)5.18-5.31(m,2H)4.19(d,J＝5.77Hz,2H)1.52(s,9H)1.49(s,9H)。
步骤2：N-烯丙基羟胺的制备：向[烯丙基(叔丁氧羰基)氨基]叔丁基碳酸酯(1.90g，6.95mmol，1.00当量)的DCM(35.00mL)溶液中添加TFA(53.90g，472.74mmol，35.00mL，68.02当量)，将反应混合物在15℃下搅拌3小时。TLC指示原料完全被消耗并且形成一个新斑点。将反应混合物真空浓缩，以获得浅黄色油状标题化合物(1.31g，粗制物，TFA)。
中间体12：2-烯丙基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5, 1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001291
步骤1：3-[烯丙基(羟基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸 叔丁酯的制备：向N-烯丙基羟胺(中间体11，1.05g，5.61mmol，1.50当量，TFA)和TEA(3.07g，30.29mmol，4.20mL，8.10当量)的THF(50.00mL)溶液中添加T3P(9.64g，15.15mmol，9.01mL，50％纯度，4.05当量)和5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.00g，3.74mmol，1.00当量)，将反应混合物在30℃下搅拌40min。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个峰(约69％)。将反应混合物用水(40mL)猝灭并用EtOAc(40mL×3)萃取，将合并的有机层用水(50mL×3)和盐水(50mL)洗涤，过滤，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，以获得浅黄色固体状标题化合物(900.00mg，2.29mmol，61.21％收率，82％纯度)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.90(s,1H)5.20-5.35(m,2H)4.23-4.77(m,4H)3.67(s,2H)2.71(s,2H)1.48(s,9H)。LCMS:323[M+1]。
步骤2：2-烯丙基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2, 5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：向3-[烯丙基(羟基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(80.00mg，248.17μmol，1.00当量)和1,2-二溴乙烷(69.93mg，372.25μmol，28.08μL，1.50当量)在DMF(2.00mL)中的混合物中添加Cs2CO3(242.58mg，744.51μmol，3.00当量)和TBAI(9.17mg，24.82μmol，0.10当量)，将反应混合物在30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到约60％的期望化合物。将反应混合物用EtOAc(80mL)稀释并用水(50mL*2)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱纯化，以获得黄色油状标题化合物(53.00mg，136.91μmol，55.17％收率，90％纯度)。LCMS:349[M+1]。
中间体13：5-(叔丁氧羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧 酸：
Figure BDA0001982694780001301
步骤1：3-氨基丁酸乙酯的制备：在N2下于0℃下，将SOCl2(28.84g，242.43mmol，17.59mL，2.50当量)滴加到EtOH(100.00mL)中。将混合物在N2下于0℃下搅拌0.5小时。然后，将3-氨基丁酸(10.00g，96.97mmol，1.00当量)加入混合物中，并将混合物在N2下在25℃下搅拌1.5小时。然后，将混合物在N2气氛下于50℃下搅拌1小时。TLC(DCM/MeOH＝10/1)显示反应已经完成。将混合物真空浓缩，得到褐黑色油状标题化合物(16.00g，95.45mmol，98.43％收率，HCl)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝2.66(d,J＝7.15Hz,2H),2.09-2.19(m,1H),1.17(d,J＝6.53Hz,2H),-0.18(d,J＝6.65Hz,3H),-0.27(s,3H)
步骤2：3-[(3-乙氧基-3-氧代-丙基)氨基]丁酸乙酯的制备：向3-氨基丁酸乙酯(10.00g，59.66mmol，11.24mL，1.00当量，HCl)的EtOH(100.00mL)溶液中添加NaOH(2.51g，62.64mmol，1.05当量)，然后添加丙-2-烯酸乙酯(7.17g，71.59mmol，7.79mL，1.20当量)。将混合物加热至80℃并于80℃下搅拌16小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示原料有剩余并出现一个新斑点。将混合物的pH用HCl(1N)调节至4并用EA(200mL)萃取。将水相用Na2CO3(饱和水溶液)调节至pH～8并然后用EA(200mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到无色油状标题化合物(9.00g，38.91mmol，65.22％收率)。
步骤3：3-[叔丁氧羰基-(3-乙氧基-3-氧代-丙基)氨基]丁酸乙酯的制备：
在30℃下，向3-[(3-乙氧基-3-氧代-丙基)氨基]丁酸乙酯(9.00g，38.91mmol，1.00当量)和TEA(5.51g，54.47mmol，7.55mL，1.40当量)在THF(50.00mL)中的混合物中添加Boc2O(8.49g，38.91mmol，8.94mL，1.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。TLC(PE/EA＝5/1)和LCMS显示反应已经完成。将混合物倾注到水(30mL)中并搅拌1min。用乙酸乙酯(30mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1)纯化残余物，获得黄色油状标题化合物(7.00g，21.12mmol，54.29％收率)。
步骤4：6-甲基-4-氧代-哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基3-乙基酯的制备：在N2下于-40℃下，向3-[叔丁氧羰基-(3-乙氧基-3-氧代-丙基)氨基]丁酸乙酯(7.20g，21.73mmol，1.00当量)在THF(200.00mL)中的混合物中一次性加入t-BuOK(2.68g，23.90mmol，1.10当量)。将混合物在-40℃下搅拌1小时。LCMS显示反应已经完成。将混合物倾注到水(50mL)中并搅拌3min。用乙酸乙酯(50mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤(50mL×2)，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(5.00g，17.52mmol，80.64％收率)。LCMS:186[M-99]。
步骤5：3-羟基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于30℃下，向6-甲基-4-氧代-哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基3-乙基酯(5.00g，17.52mmol，1.00当量)在MeOH(30.00mL)中的混合物中一次性加入N2H4·H2O(1.03g，17.52mmol，1.00mL，85％纯度，1.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(1.50g，5.92mmol，33.80％收率)。LCMS:254[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ4.70-4.82(m,1H),4.58-4.68(m,1H),3.76-3.89(m,1H),2.75-2.88(m,1H),2.37-2.50(m,1H),1.49(s,9H),1.13(d,J＝6.90Hz,3H)
步骤6：6-甲基-3-(三氟甲基磺酰氧基)-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧 酸叔丁酯的制备：在N2下，向3-羟基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(1.50g，5.92mmol，1.00当量)在Py(5.00mL)中的混合物中一次性加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲烷磺酰胺(3.17g，8.88mmol，1.50当量)。将混合物在20℃下搅拌12小时。TLC(PE/EA＝2/1)显示反应已经完成。将混合物真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯(150mL)稀释并倾注到HCl(0.5N，20mL)中并搅拌1min。用乙酸乙酯(100mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(100mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1)纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(1.40g，3.63mmol，61.37％收率)。
步骤7：6-甲基-3-乙烯基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制 备：在N2下，向6-甲基-3-(三氟甲基磺酰氧基)-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(200.00mg，519.00μmol，1.00当量)和[三氟(乙烯基)-硼烷基]钾(1+)(208.56mg，1.56mmol，3.00当量)在二氧杂环己烷(2.00mL)和H2O(200.00μL)中的混合物中一次性加入XPHOS-Pd-G2(氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(II))(40.83mg，51.90μmol，0.10当量)和K3PO4(330.50mg，1.56mmol，3.00当量)。将反应容器密封并在微波下于140℃下加热2小时。TLC(PE/EA＝2/1)显示剩余约10％的原料，检测到80％的标题化合物。将混合物倾注到水(30mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(30mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1)纯化残余物，获得黄色油状标题化合物(190.00mg，656.59μmol，42.17％收率，91％纯度)。LCMS:264[M+1]。
步骤8：3-甲酰基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的制 备：在20℃下，向6-甲基-3-乙烯基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(400.00mg，1.52mmol，1.00当量)在THF(40.00mL)和H2O(8.00mL)中的混合物中一次性加入NaIO4(1.30g，6.08mmol，336.79μL，4.00当量)和OsO4(38.62mg，152.00μmol，7.88μL，0.10当量)。将混合物在20℃下搅拌3小时。LCMS显示反应已经完成。将混合物用Na2SO3(饱和水溶液，20mL)猝灭并搅拌5min。用乙酸乙酯(20mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤(20mL×2)，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(400.00mg，粗制物)。
步骤9：5-叔丁氧羰基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的制备：在0℃下，向3-甲酰基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(400.00mg，粗制物，1.51mmol，1.00当量)在t-BuOH(20.00mL)中的混合物中滴加2-甲基丁-2-烯(1PD0.56g，150.58mmol，16.00mL，99.72当量)，然后在0℃下将NaH2PO4(905.85mg，7.55mmol，5.00当量)和亚氯酸钠(1.37g，15.10mmol，10.00当量)的H2O(10.00mL)溶液滴加到以上混合物中。将混合物在0℃下搅拌2小时。LCMS显示反应已经完成。将混合物用固体NaHCO3调节至pH～9，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取水相。将水层用2N HCl酸化至pH～4，并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得黄色固体状标题化合物(320.00mg，910.03μmol，60.27％收率，80％纯度)。LCMS:282[M+1]。
中间体14：4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001331
在N2下，向5-(叔丁氧羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(中间体13，400.00mg，1.42mmol，1.00当量)和N-(氧杂环丁烷-3-基氧基)甲胺(585.72mg，5.68mmol，4.00当量)在THF(5.00mL)中的混合物中一次性加入T3P(2.71g，4.26mmol，2.53mL，50％纯度，3.00当量)和TEA(7.29g，72.05mmol，9.99mL，50.74当量)。将混合物在50℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成并且检测到一个峰，而TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示三个新点。将残余物倾注到水(30mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(30mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1，50/1)，之后以制备型HPLC(碱)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(50.00mg，136.46μmol，9.61％收率)。LCMS:367[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)4.63-5.16(m,3H),4.09-4.61(m,4H),3.60-3.94(m,2H),3.30(s,3H),2.85-3.02(m,1H),2.50-2.66(m,1H),1.48(s,9H),1.13(dd,J＝3.64,6.78Hz,3H)。
中间体15：6-甲基-3-(甲基(氧杂环丁烷-3-基氧基)氨基甲酰基)-1,4,6,7-四氢- 5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001341
在N2下，向5-(叔丁氧羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(中间体13，400.00mg，1.42mmol，1.00当量)和N-(氧杂环丁烷-3-基氧基)甲胺(585.72mg，5.68mmol，4.00当量)在THF(5.00mL)中的混合物中一次性加入T3P(2.71g，4.26mmol，2.53mL，50％纯度，3.00当量)和TEA(7.29g，72.05mmol，9.99mL，50.74当量)。将混合物在50℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成并且检测到一个峰，而TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示三个新点。将残余物倾注到水(30mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(30mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1，50/1)，之后以制备型HPLC(碱)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(160.00mg，436.67μmol，30.75％收率)。
LCMS:367[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ5.11(d,J＝5.14Hz,2H),4.86(d,J＝6.15Hz,3H),4.75(dd,J＝5.02,7.65Hz,2H),4.08-4.26(m,1H),3.48(br.s.,3H),2.91-3.05(m,1H),2.52-2.65(m,1H),1.49(s,9H),1.13(d,J＝6.90Hz,3H)。
中间体16：10-(叔丁基)4-甲基2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二羧酸酯：
Figure BDA0001982694780001351
步骤1：10-叔丁氧羰基-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸的制备：在N2下于0℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(1.00g，2.84mmol，1.00当量)和NMO(2.50g，21.30mmol，2.25mL，7.50当量)在MeCN(30.00mL)中的混合物中一次性加入TPAP(199.61mg，568.00μmol，0.20当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。LCMS显示反应已经完成。使残余物真空浓缩，以得到黑褐色固体状标题化合物(1.04g，粗制物)。LCMS:367[M+1]。
步骤2：10-(叔丁基)4-甲基2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二羧酸酯的制备：在N2下于25℃下，向10-叔丁氧羰基-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(1.04g，2.84mmol，1.00当量)和K2CO3(1.18g，8.52mmol，3.00当量)在MeCN(5.00mL)中的混合物中一次性加入MeI(1.21g，8.52mmol，530.70μL，3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS显示反应物没有反应。在用1N HCl中和至pH 3之后，通过用乙酸乙酯(20mL*2)萃取从反应混合物回收原料。随后再次反应(在N2下于25℃下，向10-叔丁氧羰基-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(1.04g，2.84mmol，1.00当量)和K2CO3(1.18g，8.52mmol，3.00当量)在MeCN(5.00mL)中的混合物中一次性加入MeI(1.21g，8.52mmol，530.70μL，3.00当量。将混合物在25℃下搅拌12小时)。LCMS和TLC(乙酸乙酯:石油醚＝2:1)显示反应已经完成。将残余物倾注到水(20mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(20mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1，2/1)纯化残余物，得到黄色油状标题化合物(150.00mg，394.33μmol，13.88％收率，100％纯度)。LCMS:381[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)4.79-4.98(m,2H),4.45-4.75(m,3H),3.88(s,3H),3.54-3.85(m,2H),3.38(s,3H),2.67-2.89(m,2H),1.49(s,9H)。
中间体17：(R)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001361
步骤1：(2R)-5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯 的制备：在-70℃下，向(2R)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.00g，18.76mmol，1.00当量)的THF(50.00mL)溶液中滴加LiHMDS(1M，22.51mL，1.20当量)。将混合物在-70℃下搅拌0.5小时。然后，在-70℃下滴加草酸二乙酯(3.56g，24.38mmol，3.33mL，1.30当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)显示原料被消耗并且出现一个新斑点。将混合物用1N HCl(500mL)猝灭并用乙酸乙酯(300mL*5)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。将滤液真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(5.00g，粗制物)。
步骤2：(6R)-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3- 乙基酯的制备：向(2R)-5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.00g，15.96mmol，1.00当量)的EtOH(30.00mL)溶液中添加NH2NH2.H2O(939.75mg，15.96mmol，912.38μL，85％纯度，1.00当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(石油醚(PE):乙酸乙酯(EA)＝1:1)显示原料被消耗并且出现一个主要斑点。将反应混合物真空浓缩。通过柱色谱(PE:EA:20％～60％)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(3.60g，11.64mmol，72.91％收率)。
步骤3：(6R)-5-叔丁氧羰基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的 制备：向(6R)-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯(3.60g，11.64mmol，1.00当量)的THF(30.00mL)溶液中添加NaOH(930.95mg，23.27mmol，2.00当量)的H2O(7.00mL)溶液。将混合物在50℃下搅拌16小时。TLC(PE:EA＝1:1)显示原料被消耗并且出现一个具有较高极性的主要斑点。用1N HCl调节混合物的pH至5～6。将混合物用乙酸乙酯(300mL)和H2O(100mL)稀释。将有机层分离，经Na2SO4干燥并过滤。真空浓缩滤液，得到白色固体状标题化合物(3.00g，10.66mmol，91.62％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝4.93(d,J＝17.24Hz,1H),4.68-4.75(m,1H),4.04(d,J＝16.51Hz,1H),2.82(dd,J＝6.05,15.96Hz,1H),2.52(d,J＝15.89Hz,1H),1.39(s,9H),1.02(d,J＝6.97Hz,3H)。
步骤4：(6R)-3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c] 吡啶-5-羧酸叔丁酯的制备：向(6R)-5-叔丁氧羰基-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(2.70g，9.60mmol，1.00当量)和N-甲基羟胺(2.40g，28.79mmol，3.00当量，HCl)在DMF(20.00mL)中的溶液中添加HOBt(1.95g，14.40mmol，1.50当量)、PyBOP(7.49g，14.40mmol，1.50当量)和DIEA(6.20g，47.99mmol，8.38mL，5.00当量)。将混合物在30℃下搅拌3小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示原料被消耗并且出现一个主要斑点。将混合物用乙酸乙酯(150mL*3)和H2O(150mL)萃取。将合并的有机层用H2O(150mL*2)、1N HCl(80mL)和饱和Na2CO3(50mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯：60％～100％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(2.00g，6.44mmol，67.13％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝5.06(d,J＝13.82Hz,1H),4.78-4.84(m,1H),4.20(brs,1H),3.40(brs,3H),2.93(dd,J＝5.93,15.71Hz,1H),2.63(d,J＝15.89Hz,1H),1.50(s,9H),1.14(d,J＝6.85Hz,3H)。
步骤5：(R)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：向(6R)-3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-6-甲基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(2.00g，6.44mmol，1.00当量)的DMF(20.00mL)溶液中添加Cs2CO3(6.30g，19.32mmol，3.00当量)，之后添加1,2-二溴乙烷(1.81g，9.66mmol，728.81μL，1.50当量)和TBAI(238.03mg，644.00μmol，0.10当量)。将混合物在50℃下搅拌16小时。TLC(PE:EA＝0:1)显示原料被消耗并且出现一个主要斑点。将混合物用乙酸乙酯(20mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用H2O(20mL*2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝50％～100％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(1.50g，4.19mmol，65.09％收率，94％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.73-5.06(m,1H),4.38-4.52(m,1H),4.21-4.36(m,1H),4.11(d,J＝17.48Hz,1H),3.21(s,3H),2.84-2.93(m,1H),2.51(d,J＝15.77Hz,1H),1.41(s,10H),1.06(d,J＝6.97Hz,3H)。
中间体18：(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001381
向(R)-5-(叔丁氧羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(中间体13，2.30g，7.41mmol，1.00当量)的DMF(20.00mL)溶液中添加Cs2CO3(7.24g，22.23mmol，3.00当量)，然后添加3-溴氧杂环丁烷(1.32g，9.63mmol，1.30当量)和TBAI(273.74mg，741.00μmol，0.10当量)。将混合物在75℃下搅拌4小时。LCMS显示出70％的期望产物。将混合物用乙酸乙酯(20mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用H2O(20mL*2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝50％～100％)纯化残余物，得到1.8g期望产物(85％纯度)。将1.5g经由制备型HPLC(FA)再纯化，得到1.1g的纯期望产物，通过SFC使该纯期望产物分离，得到两种非对映体(420mg)和(470mg)。
SFC分离条件：仪器：SFC Thar_80_Q；柱：OD-10μm；流动相：A为CO2且B为异丙醇(0.1％氨)；等度洗脱：B 20％；流速：50mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm。
中间体19：2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯：
Figure BDA0001982694780001391
在N2下于0℃下，向2,2-二氟乙醇(500.00mg，6.09mmol，1.00当量)和DIPEA(945.08mg，7.31mmol，1.28mL，1.20当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加Tf2O(1.89g，6.70mmol，1.11mL，1.10当量)，并将混合物在10℃下搅拌3h。原料具有较低的沸点并且未检测到反应。将混合物用DCM(10mL)稀释，并用水(20mL*2)和盐水(20mL*1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥并过滤。加入DMF(1mL)。使所得的混合物真空浓缩，得到2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(5.68mmol，1mL)的DMF溶液，其直接用于下一步骤。
中间体20：2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯：
Figure BDA0001982694780001392
在N2下于0℃下，向2,2,2-三氟乙醇(2.09g，20.84mmol，1.50mL，1.00当量)和DIPEA(3.23g，25.01mmol，4.36mL，1.20当量)在DCM(10.00mL)中的溶液中添加Tf2O(6.47g，22.92mmol，3.78mL，1.10当量)，并将混合物在10℃下搅拌3h。原料具有较低的沸点并且未检测到反应。将混合物用DCM(10mL)稀释，并用水(20mL*2)和盐水(20mL*1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥并过滤。加入DMF(1.00mL)。使所得的混合物真空浓缩，得到2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(14.19mmol，1mL)的DMF溶液，其直接用于下一步骤。
中间体21：4-(羟甲基)-2-(甲基-d3)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001401
步骤1：[叔丁氧羰基(三氘甲基)氨基]叔丁基碳酸酯的制备：使(叔丁氧羰基氨基)叔丁基碳酸酯(100.00mg，428.71μmol，1.00当量)、CD3I(138.04mg，857.42μmol，2.00当量)和K2CO3(88.88mg，643.07μmol，1.50当量)在DMF(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于50℃下搅拌16小时。TLC显示原料完全被消耗并且出现一个新斑点。将混合物倾注到水(5mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(3mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得无色油状标题化合物(100.00mg，399.50μmol，93.19％收率)，其直接用于下一步骤。
步骤2：N-(三氘甲基)羟胺的制备：向[叔丁氧羰基(三氘甲基)氨基]叔丁基碳酸酯(100.00mg，399.50μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，67.62当量)。将混合物于15℃下搅拌2小时。TLC显示原料完全被消耗并且出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状物(65.56mg，399.51μmol，100.00％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤3：3-[羟基(三氘甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧 酸叔丁酯的制备：使5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(100.00mg，374.14μmol，1.00当量)、N-(三氘甲基)羟胺(61.40mg，374.14μmol，1.00当量，TFA)、T3P(357.13mg，1.12mmol，333.77μL3.00当量)和TEA(189.30mg，1.87mmol，259.32μL，5.00当量)在THF(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于15℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且期望产物占主要部分。将混合物倾注到冰水(5mL)中并搅拌5min。然后，对混合物进行真空浓缩以获得残余物。将水相的pH通过添加稀盐酸(1N)调节至约6并用乙酸乙酯(3mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得白色固体状标题化合物(75.00mg，238.02μmol，63.62％收率，95％纯度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ4.62(s,2H)3.71(d,J＝4.16Hz,2H)2.70-2.78(m,2H)1.48(d,J＝3.42Hz,9H)。LCMS:300[M+1]。
步骤4：4-(羟甲基)-2-(甲基-d3)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：使3-[羟基(三氘甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(75.00mg，250.55μmol，1.00当量)、3-溴氧杂环丁烷(41.18mg，300.66μmol，1.20当量)、TBAI(9.25mg，25.06μmol，0.10当量)和Cs2CO3(122.45mg，375.83μmol，1.50当量)在DMF(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌3小时。TLC显示原料完全被消耗并且出现两个新斑点。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10/1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(41.00mg，98.06μmol，39.14％收率，85％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.47-4.72(m,4H)4.31-4.43(m,1H)3.59-3.95(m,4H)2.77(br.s.,2H)1.49(s,9H)。LCMS:356[M+1]。
中间体22：10-(叔丁基)4-甲基2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二羧酸酯：
Figure BDA0001982694780001411
步骤1：10-叔丁氧羰基-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸的制备：在N2下于0℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(中间体1，1.00g，2.84mmol，1.00当量)和NMO(2.50g，21.30mmol，2.25mL，7.50当量)在MeCN(30.00mL)中的混合物中一次性加入TPAP(199.61mg，568.00μmol，0.20当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。LCMS显示反应已经完成。使混合物真空浓缩，得到黑褐色固体状标题化合物(1.04g，粗制物)。LCMS:367[M+1]。
步骤2：4-甲基2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d] [1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二羧酸10-叔丁酯的制备：在N2下于25℃下，向10-叔丁氧羰基-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(1.04g，粗制物，2.84mmol，1.00当量)和K2CO3(1.18g，8.52mmol，3.00当量)在MeCN(20.00mL)中的混合物中一次性加入MeI(1.21g，8.52mmol，530.70μL，3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS显示反应物未反应。回收原料：将反应混合物用HCl(1N，水溶液)中和至pH＝3，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。再次进行反应。在N2下于25℃下，向含有经回收原料和K2CO3(1.18g，8.52mmol，3.00当量)的MeCN(20.00mL)中一次性加入MeI(1.21g，8.52mmol，530.70μL，3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS和TLC(EA/PE＝2/1)显示反应已经完成，并且检测到45％的标题化合物。将残余物倾注到水(20mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(20mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1，2/1)纯化残余物，获得黄色油状标题化合物(150.00mg，394.33μmol，13.88％收率，100％纯度)。LCMS:381[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)4.79-4.98(m,2H),4.45-4.75(m,3H),3.88(s,3H),3.54-3.85(m,2H),3.38(s,3H),2.67-2.89(m,2H),1.49(s,9H)。
中间体23：9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001421
步骤1：4-氧代基吡啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向吡啶-4-醇(5.00g，52.58mmol，1.00当量)的t-BuOH(250.00mL)溶液中添加NaH(2.73g，68.35mmol，60％纯度，1.30当量)，并使混合物在热水浴中温热至50℃直至混合物变成浆液。滴加(Boc)2O(14.92g，68.35mmol，15.71mL，1.30当量)的t-BuOH(100.00mL)溶液，将混合物在30℃下搅拌16h。TLC指示剩余50％的吡啶-4-醇，并且检测到一个具有较低极性的主要新斑点。将反应混合物用水(200mL)猝灭，用10％HCl酸化至PH＝7，并然后用乙酸乙酯(300mL*3)萃取，将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱来纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(2.90g，14.86mmol，28.25％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.03-8.09(m,2H)6.25-6.33(m,2H)1.61(s,9H)。
步骤2：4-氧代-2-乙烯基-2,3-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于-78℃下，向4-氧代基吡啶-1-羧酸叔丁酯(5.80g，29.71mmol，1.00当量)和TMSCl(9.68g，89.13mmol，11.26mL，3.00当量)在THF(50.00mL)中的混合物中滴加溴(乙烯基)镁(1M，44.57mL，1.50当量)。使反应混合物升温至10℃并在10℃下搅拌2小时。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到一个具有较低极性的主要新斑点。将反应用NH4Cl水溶液(120mL)猝灭并然后用乙酸乙酯(150mL*3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，以获得黄色油状标题化合物(4.60g，20.19mmol，67.96％收率，98％纯度)。LCMS：224[M+1]。
步骤3：4-氧代-2-乙烯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备：在N2下，向4-氧代-2-乙烯基-2,3-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(4.60g，20.60mmol，1.00当量)的AcOH(30.00mL)溶液中添加Zn(6.74g，103.00mmol，5.00当量)，将反应混合物在70℃下搅拌4小时。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到具有较低极性的两个新斑点。将反应混合物过滤，并且将滤液用乙酸乙酯(200mL)稀释并用NaHCO3水溶液(100mL*3)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，获得黄色油状标题化合物(3.05g，13.40mmol，65.06％收率，99％纯度)。LCMS:170[M-56+1]。
步骤4：5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-2-乙烯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯的 制备：使三颈圆底烧瓶冷却至-78℃，在N2下添加LiHMDS(1M，11.54mL，1.30当量)，然后滴加含有4-氧代-2-乙烯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.00g，8.88mmol，1.00当量)的THF(15.00mL)溶液，将反应混合物在N2下于-78℃下搅拌30分钟。然后滴加含有草酸二乙酯(1.56g，10.66mmol，1.46mL，1.20当量)的THF(10.00mL)溶液。在添加之后，将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后在10℃下再搅拌2小时。TLC指示4-氧代-2-乙烯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯被完全消耗，并且检测到一个具有较大极性的主要新斑点。将反应混合物用NH4Cl水溶液(100mL)猝灭并然后用乙酸乙酯(150mL*2)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到作为黄色油状物获得的标题化合物(2.00g，粗制物)，其直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤5：6-乙烯基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基 酯的制备：向5-(2-乙氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-2-乙烯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.00g，6.15mmol，1.00当量)的EtOH(20.00mL)溶液中滴加NH2NH2.H2O(289.76mg，4.92mmol，281.32μL，85％纯度，0.80当量)的EtOH(2.00mL)溶液。将反应混合物在10℃下搅拌一小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。将反应混合物用乙酸乙酯(150mL)稀释并用水(80mL*2)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到作为黄色固体获得的标题化合物(1.30g，3.92mmol，63.74％收率，97％纯度)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.71(ddd,J＝17.32,10.54,4.89Hz,1H)5.04-5.18(m,3H)4.09-4.44(m,4H)2.98-3.05(m,2H)1.51(s,9H)1.38(t,J＝7.09Hz,3H)；LCMS:322[M+1]。
步骤6：6-乙基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯 的制备：在N2下，向6-乙烯基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯(1.50g，4.67mmol，1.00当量)的MeOH(60.00mL)溶液中添加Pd/C(200.00mg，10％纯度)。使悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫三次，将混合物在H2(15psi)下于10℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到期望产物。将反应混合物过滤并浓缩滤液，以获得黄色固体状标题化合物(1.42g，4.22mmol，90.26％收率，96％纯度)，使之与另一批次(187mg)合并，以通过SFC分离得到一对对映体(E1：0.76g和E2：0.77g)。
SFC分离条件：仪器：SFC Thar_80_Q；柱：IC-10μm；流动相：A为CO2且B为甲醇(0.1％氨)；等度洗脱：B 25％；流速：55mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm。
E1：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.92-5.25(m,1H)4.47-4.76(m,1H)4.32-4.45(m,2H)3.95-4.18(m,1H)2.95(dd,J＝16.02,5.99Hz,1H)2.74(d,J＝16.02Hz,1H)1.43-1.54(m,11H)1.39(t,J＝7.09Hz,3H)0.90(t,J＝7.34Hz,3H)。
E2：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.97-5.25(m,1H)4.46-4.75(m,1H)4.28-4.45(m,2H)3.95-4.18(m,1H)2.89-3.01(m,1H)2.76(d,J＝16.02Hz,1H)1.42-1.57(m,11H)1.38(t,J＝7.09Hz,3H)0.87-0.94(m,3H)。
步骤7：5-叔丁氧羰基-6-乙基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸的制备：向6-乙基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸5-叔丁基3-乙基酯(750.00mg，2.32mmol，1.00当量)的MeOH(15.00mL)溶液中添加NaOH(139.20mg，3.48mmol，1.50当量)的H2O(3.00mL)溶液，将反应混合物在50℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。通过添加稀HCl(1N，15mL)将反应混合物的pH调节至约6。用乙酸乙酯(50mL*3)萃取所得的混合物。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得白色固体状标题化合物(630.00mg，粗制物)，该标题化合物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
LCMS:296[M+1]。
步骤8：6-乙基-3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶- 5-羧酸叔丁酯的制备：向5-叔丁氧羰基-6-乙基-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(600.00mg，2.03mmol，1.00当量)和N-甲基羟胺(339.09mg，4.06mmol，2.00当量，HCl)在DMF(8.00mL)中的混合物中添加PyBOP(1.27g，2.44mmol，1.20当量)、HOBt(329.15mg，2.44mmol，1.20当量)和DIPEA(1.05g，8.12mmol，1.42mL，4.00当量)，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。LCMS显示检测到约40％的期望化合物。将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用水(50mL*3)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(560.00mg，1.55mmol，76.54％收率，90％纯度)。LCMS:325[M+1]。
步骤9：9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：向6-乙基-3-[羟基(甲基)氨基甲酰基]-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(500.00mg，1.54mmol，1.00当量)和3-溴氧杂环丁烷(253.14mg，1.85mmol，1.20当量)在DMF(3.00mL)中的混合物中添加Cs2CO3(752.64mg，2.31mmol，1.50当量)和TBAI(56.88mg，154.00μmol，0.10当量)，将反应混合物在55℃下搅拌4小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用水(50mL*3)洗涤。将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱纯化，以获得白色固体状标题化合物(430.00mg，1.13mmol，73.39％收率)。LCMS:381[M+1]。
中间体24：(9R)-10-(叔丁氧羰基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：
Figure BDA0001982694780001461
步骤1：(9R)-10-叔丁氧羰基-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸的制备：向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(中间体18，500.00mg，1.36mmol，1.00当量，经SFC分离的非对映体)和NMO(1.19g，10.20mmol，1.08mL，7.50当量)的MeCN(10.00mL)溶液中添加TPAP(119.49mg，340.00μmol，0.25当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望的质量占主要部分。将混合物倾注到水(20mL)中并用叔丁基甲醚(10mL)洗涤，将水层用0.5N HCl酸化至pH～3，用DCM(20mL×2)萃取，将有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到黑褐色固体状标题化合物(520.00mg，粗制物)。LCMS:381[M+1]。
中间体25：(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基氨基甲酰基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001471
使(9R)-10-(叔丁氧羰基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(中间体24，256.00mg，672.99μmol，1.00当量，经SFC分离的非对映体)、甲胺(227.20mg，3.36mmol，5.00当量，HCl)、T3P(856.53mg，1.35mmol，800.50μL，50％纯度，2.00当量)、TEA(681.00mg，6.73mmol，932.88μL，10.00当量)在THF(10.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(20mL)中并用乙酸乙酯(10mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黑褐色固体状标题化合物(220.00mg，525.62μmol，78.10％收率，94％纯度)。LCMS:394[M+1]。
中间体26：10-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：
Figure BDA0001982694780001481
向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，400.00mg，1.14mmol，1.00当量)和NMO(1.00g，8.55mmol，902.37μL，7.50当量)在MeCN(20.00mL)中的溶液中添加TPAP(100.16mg，285.00μmol，0.25当量)。将混合物在20℃下搅拌12h。将混合物倾注到水(40mL)中并用叔丁基甲醚(20mL)洗涤，将水层用0.5N HCl酸化至pH＝3，用DCM(40mL*2)萃取。将有机层用盐水洗涤(20mL)，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得褐色油状标题化合物(550.00mg，粗制物)。
LCMS:367[M+1]。
中间体27：4-((2,2-二氟乙基)(甲基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001482
在0℃下，向10-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(中间体26，340.00mg，928.02μmol，1.00当量)、3-甲基吡啶(259.28mg，2.78mmol，270.08μL，3.00当量)和2,2-二氟-N-甲基-乙胺(244.16mg，1.86mmol，2.00当量，HCl)在MeCN(10.00mL)中的混合物中添加MsCl(212.61mg，1.86mmol，143.66μL，2.00当量)。将混合物在N2下在25℃下搅拌1小时。将混合物用1N HCL调节至pH＝6，然后用H2O(30mL)稀释并用乙酸乙酯(30mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝1/1)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(290.00mg，634.36μmol，68.36％收率，97％纯度)。
LCMS:444[M+1]。
中间体28：4-(叠氮甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001491
步骤1：2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于0℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，500.00mg，1.42mmol，1.00当量，经SFC分离的单一对映体)、TEA(574.76mg，5.68mmol，787.34μL，4.00当量)在DCM(10.00mL)中的混合物中滴加MsCl(487.98mg，4.26mmol，329.72μL，3.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于15℃下搅拌3小时。TLC显示原料完全被消耗并且形成一个新斑点。将混合物倾注到冰水(40mL)中并搅拌5min。用DCM(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤(50mL)，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(611.00mg，粗制物)。LCMS:431[M+1]
步骤2：4-(叠氮甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡 唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：使2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(611.00mg，1.42mmol，1.00当量)、NaN3(553.63mg，8.52mmol，6.00当量)在DMF(10.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌16小时。TLC显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物用乙酸乙酯(10mL)稀释并用盐水(30mL，*3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:1)纯化残余物，以获得无水油状标题化合物(500.00mg，1.26mmol，88.63％收率，95％纯度)。
LCMS:378[M+1]。
中间体29：(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001501
步骤1：(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于0℃下，向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，3.00g，8.19mmol，1.00当量)、TEA(4.14g，40.95mmol，5.67mL，5.00当量)在DCM(40.00mL)中的混合物中滴加MsCl(3.75g，32.76mmol，2.53mL，4.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌3小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。将混合物倾注到冰水(50mL)中并搅拌5min。用DCM(40mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:2)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(3.40g，7.34mmol，89.66％收率，96％纯度)。LCMS:445[M+1]。
步骤2：(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯的制备：使(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(1.20g，2.70mmol，1.00当量)、NaN3(877.53mg，13.50mmol，5.00当量)在DMF(20.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于70℃下搅拌16小时。LCMS显示约10％的原料，约85％的期望产物。将NaN3(351.01mg，5.40mmol，2.00当量)添加到混合物中，将混合物在70℃下再搅拌5小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望的产物占主要部分。将混合物用乙酸乙酯(60mL)稀释并用盐水(100mL，*3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(1.24g，粗制物)。LCMS:392[M+1]
中间体30：(9R)-4-(氨基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：
Figure BDA0001982694780001511
使(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体29，1.06g，2.71mmol，1.00当量)、PPh3(1.42g，5.42mmol，2.00当量)在THF(12.00mL)和H2O(2.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望的产物占主要部分。将混合物真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0：1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(827.00mg，2.20mmol，81.00％收率，97％纯度)。LCMS:366[M+1]
化合物001：N-(3-溴苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
步骤1：4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向3-[甲基(氧杂环丁烷-3-基氧基)氨基甲酰基]-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(中间体1，244.00mg，692.41μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TFA(2.31g，20.26mmol，1.50mL，29.26当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。LCMS显示反应已经完成。使混合物真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(253.00mg，690.71μmol，99.75％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。LCMS:253[M+1]。
步骤2：N-(3-溴苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：使N-甲基-N-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺(50.00mg，136.50μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-溴苯基)氨基甲酸苯酯(39.88mg，136.50μmol，1.00当量)、TEA(20.72mg，204.75μmol，28.38μL，1.50当量)在DCM(2.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到期望的质量。将混合物倾注到水(5mL)中并搅拌5min。用DCM(3mL×3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(25.00mg，54.96μmol，40.27％收率，99％纯度)。LCMS:450/452[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)7.68(s,1H),7.33-7.35(m,1H),7.15-7.17(m,2H),4.86(s,2H),4.53-4.73(m,2H),4.35-4.37(m,1H),3.82-3.84(m,2H),3.71-3.73(m,1H),3.66-3.67(m,1H),3.32(s,3H),2.81-2.84(m,2H)。
化合物002、003、004、005、006、007、008、009、010、011、012、013、014、015、016、017、018、020、021、022、023、、024、025、026、027、028、029、030、031、032、033、034和035以与化合物001类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780001521
Figure BDA0001982694780001531
Figure BDA0001982694780001541
Figure BDA0001982694780001551
Figure BDA0001982694780001561
化合物002：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(间甲苯基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):386.2
化合物003：N-(2-氯-3-氟吡啶-4-基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):424.1，
化合物004：N-(3-溴-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):468.1。
化合物005：N-(3,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):408.1。
化合物006：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(3,4,5-三氟苯基)-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):426.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.24(dd,J＝10.29,6.53Hz,2H)4.71(s,2H)4.48-4.62(m,2H)4.32-4.41(m,1H)3.82(t,J＝4.89Hz,2H)3.70-3.77(m,1H)3.62-3.68(m,1H)3.31-3.33(m,3H)2.82(t,J＝5.77Hz,2H)。
化合物007：N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):442.1。
化合物008：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(3-(三氟甲基)苯基)-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):440.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.82(s,1H)7.66(d,J＝8.03Hz,1H)7.46(t,J＝8.03Hz,1H)7.31(d,J＝7.53Hz,1H)4.77(s,2H)4.51-4.64(m,2H)4.33-4.43(m,1H)3.82-3.93(m,2H)3.63-3.81(m,2H)3.33-3.36(m,3H)2.86(t,J＝5.77Hz,2H)。
化合物009：N-(3-乙基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):400.2。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.22(s,1H)7.17(m,2H)6.88(m,1H)4.73(s,2H)4.50-4.63(m,2H)4.31-4.41(m,1H)3.80-3.89(m,2H)3.70-3.77(m,1H)3.62-3.69(m,1H)3.31-3.34(m,3H)2.83(t,J＝5.65Hz,2H)2.61(q,J＝7.53Hz,2H)1.22(t,J＝7.65Hz,3H)
化合物010：N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):486.0。
化合物011：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):458.1。
化合物011_E1：(S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):458。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.56-7.64(m,1H),7.15(t,J＝9.3Hz,1H),6.63(s,1H),4.74(d,J＝3.4Hz,2H),4.54-4.65(m,2H),4.39-4.48(m,1H),3.84-3.96(m,3H),3.72-3.83(m,1H),3.35(s,3H),2.89(t,J＝5.8Hz,2H),1.92(brs,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物011_E2：(R*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):458。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.66(dd,J＝6.09,2.70Hz,1H)7.55-7.61(m,1H)7.13(t,J＝9.41Hz,1H)6.64(s,1H)4.72(s,2H)4.51-4.62(m,2H)4.37-4.46(m,1H)3.75-3.93(m,4H)3.33(s,3H)2.86(t,J＝5.71Hz,2H)2.02(br.s.,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物012：N-(3,4-二氯苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):440.0。
化合物013：N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1)：442.11H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.60(t,J＝7.91Hz,1H)7.19(t,J＝9.66Hz,1H)4.73(s,2H)4.49-4.63(m,2H)4.30-4.44(m,1H)3.84(s,2H)3.61-3.78(m,2H)3.33-3.39(m,3H)2.83(t,J＝5.65Hz,2H)。
化合物014：N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):486.0。
化合物015：N-(3-溴-4,5-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):486.0。
化合物016：N-(2,5-二甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):400.2。
化合物017：N-(5-溴-2-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):464.1。
化合物018：N-(5-溴-4-氟-2-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):482.0。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.42(d,J＝6.78Hz,1H)7.09(d,J＝9.54Hz,1H)4.74(s,2H)4.50-4.64(m,2H)4.34-4.44(m,1H)3.84(t,J＝5.14Hz,2H)3.71-3.78(m,1H)3.63-3.69(m,1H)3.32(m,3H)2.83(t,J＝5.52Hz,2H)2.19(s,3H)。
化合物019：4-(羟甲基)-2-甲基-N-(3-甲基环己基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001591
步骤1：4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，200.00mg，567.55μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，23.80当量)，然后将混合物在15℃下搅拌30min。TLC显示原料被完全消耗，以及主要的期望产物。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(207.00mg，565.13μmol，99.57％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：4-(羟甲基)-2-甲基-N-(3-甲基环己基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：在0℃下，向3-甲基环己胺(30.00mg，235.79μmol，1.00当量，HCl)和TEA(146.00mg，1.44mmol，200.00μL，9.25当量)在DCM(2.0mL)中的混合物中添加三光气(46.27mg，155.92μmol，1.00当量)。将混合物在25℃下搅拌12min。然后将4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(50.00mg，136.50μmol，0.5当量，TFA)和TEA(100.00μL，3.06当量)添加至反应。将所得的混合物在25℃下搅拌12min。LCMS显示反应已经完成。真空蒸发溶剂。将残余物调节至pH＝6并通过制备型HPLC(FA)纯化，得到标题化合物。LCMS(M+1):392.2。
化合物020：4-(羟甲基)-N-(3-碘苯基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):498.0。
化合物021：N-(3-(二氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):422。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝ppm 7.58-7.63(m,1H)7.48(s,1H)7.37(t,J＝7.84Hz,1H)7.15-7.22(m,1H)6.79(s,1H)6.61(s,1H)6.47(s,1H)4.73(s,2H)4.49-4.60(m,2H)4.42(s,1H)3.70-3.95(m,4H)3.31(s,3H)2.86(s,2H)2.24-2.52(m,1H)。
化合物022：N-(3-氯-4-氟-5-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:492。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.84(dd,J＝6.02,2.64Hz,1H)7.52(dd,J＝5.21,2.57Hz,1H)6.76(s,1H)4.71(d,J＝3.89Hz,2H)4.56(d,J＝13.30Hz,2H)4.43(s,1H)3.86(dd,J＝7.15,5.52Hz,4H)3.33(s,3H)2.87(t,J＝5.71Hz,2H)1.89-2.11(m,1H)。
化合物023：N-(2,3-二氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:458/460。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.05(dd,J＝9.35,5.21Hz,1H)7.09(t,J＝8.78Hz,1H)6.97(s,1H)4.73-4.82(m,2H)4.51-4.62(m,2H)4.36-4.46(m,1H)3.75-3.93(m,4H)3.33(s,3H)2.89(t,J＝5.71Hz,2H)1.94(brs,1H)。
化合物024：N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:458。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.88-8.01(m,1H),7.23(dd,J＝1.9,9.1Hz,1H),6.70(d,J＝3.1Hz,1H),4.76(s,2H),4.51-4.65(m,2H),4.34-4.48(m,1H),3.72-3.96(m,4H),3.34(s,3H),2.89(t,J＝5.7Hz,2H)。
化合物025：N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:474/4761H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.75(d,J＝2.38Hz,1H)7.60(dd,J＝8.72,2.45Hz,1H)7.41(d,J＝8.66Hz,1H)6.74(s,1H)4.72(s,2H)4.51-4.61(m,2H)4.37-4.47(m,1H)3.77-3.93(m,4H)3.32(s,3H)2.86(t,J＝5.71Hz,2H)2.04(d,J＝15.06Hz,1H)。
化合物026：N-(3-氯-4-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:420。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.51(d,J＝1.8Hz,1H),7.12-7.20(m,2H),6.48(s,1H),4.72(s,2H),4.51-4.64(m,2H),4.35-4.47(m,1H),3.74-3.97(m,4H),3.34(s,3H),2.87(t,J＝5.7Hz,2H),2.33(s,3H),1.98(brs,1H)。
化合物027：N-(4,5-二氯-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):458/460。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.25-8.38(m,1H),7.21(d,J＝10.54Hz,1H),6.61-6.69(m,1H),4.74(s,2H),4.51-4.63(m,2H),4.35-4.47(m,1H),3.86(d,J＝16.06Hz,4H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.77Hz,2H),1.81-1.92(m,1H)。
化合物028：N-(3-氯-4,5-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:442。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.30-7.40(m,1H)7.19-7.24(m,1H)6.39-6.74(m,1H)4.69(d,J＝2.38Hz,2H)4.50-4.62(m,2H)4.36-4.48(m,1H)3.72-3.95(m,4H)3.33(s,3H)2.86(t,J＝5.58Hz,2H)1.81-1.99(m,1H)。
化合物028_E1：(S*)-N-(3-氯-4,5-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):442。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.33(ddd,J＝2.8,6.4,12.0Hz,1H),7.21(td,J＝2.4,5.2Hz,1H),6.74(brs,1H),4.69(s,2H),4.49-4.62(m,2H),4.37-4.47(m,1H),3.71-3.92(m,4H),3.31(s,3H),2.84(t,J＝5.6Hz,2H),2.28(s,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物029：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(3-(五氟-l6-硫烷基)苯基)-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:498。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.86(t,J＝1.94Hz,1H)7.60(d,J＝8.03Hz,1H)7.34-7.45(m,2H)6.80(brs,1H)4.74(s,2H)4.51-4.61(m,2H)4.38-4.47(m,1H)3.74-3.94(m,4H)3.32(s,3H)2.87(t,J＝5.77Hz,2H)2.13(brs,1H)。
化合物030：N-(3-氯苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):406。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.51(s,1H),7.16-7.25(m,2H),7.01(m,1H),6.69(s,1H),4.70(s,2H),4.49-4.60(m,2H),4.36-4.45(m,1H),3.70-3.93(m,4H),3.31(s,3H),2.85(t,J＝8.0Hz,2H),2.40(s,1H)。
化合物031_E1：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):424。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.55(dd,J＝4.0,8.0Hz,1H),7.15-7.23(m,1H),6.99–7.08(m,1H),6.69(s,1H),4.69(s,2H),4.60-4.49(m,2H),4.36-4.46(m,1H),3.71-3.92(m,4H),3.29-3.34(m,3H),2.84(t,J＝8.0Hz,2H),2.42(s,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物031_E2：(R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):424。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.56-7.58(dd,J＝6.53,2.64Hz,1H)7.17-7.20(dt,J＝8.88,3.40Hz,1H)7.03-7.08(m,1H)6.49(s,1H)4.57-4.70(s,2H)4.52-4.54(m,2H)4.40-4.42(m,1H)3.79-3.89(m,4H)3.32(s,3H)2.84-2.87(t,J＝5.77Hz,2H)1.89-1.94(m,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物032_E1：(S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):468/470。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝4.0,8.0Hz,1H),7.22-7.26(m,1H),7.03(t,J＝8.0Hz,1H),6.69(s,1H),4.69(s,2H),4.49-4.61(m,2H),4.36-4.45(m,1H),3.71-3.92(m,4H),3.31(s,3H),2.84(t,J＝8.0Hz,2H),2.42(s,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物033_E1：(S*)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):469/471。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.10-8.18(m,1H),8.06(d,J＝5.52Hz,1H),6.99-7.10(m,1H),4.76(s,2H),4.50-4.62(m,2H),4.37-4.46(m,1H),3.71-3.95(m,4H),3.32(s,3H),2.89(t,J＝5.71Hz,2H),2.20(d,J＝19.58Hz,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物034_E1：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):415。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.75(dd,J＝4.0,8.0Hz,1H),7.55-7.62(m,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.73(s,1H),4.71(d,J＝4.0Hz,2H),4.51-4.62(m,2H),4.37-4.47(m,1H),3.74-3.94(m,4H),3.33(s,3H),2.86(t,J＝8.0Hz,2H),2.02(s,1H)。
*纯但未知的对映体。
化合物035_E1：(S*)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):404。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.22(dd,J＝4.0,8.0Hz,1H),7.05-7.12(m,1H),6.91(t,J＝8.0Hz,1H),6.57(s,1H),4.69(s,2H),4.48-4.59(m,2H),4.35-4.43(m,1H),3.68-3.92(m,4H),3.29(s,3H),2.83(t,J＝5.6Hz,2H),2.66(brs,1H),2.23(d,J＝1.6Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物038_E1：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺
Figure BDA0001982694780001641
在N2下于-30℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物031_E1，20.00mg，47.19μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加DAST(45.64mg，283.14μmol，37.41μL，6.00当量)，将反应混合物在10℃下搅拌2小时。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到一个具有较低极性的主要新斑点。将反应混合物用水(10mL)猝灭并然后用DCM(20mL*3)萃取，将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物经由制备型TLC，之后以制备型HPLC(FA)纯化，得到白色固体状标题化合物。
LCMS(M+1):426/428。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝6.53,2.63Hz,1H)7.15-7.22(m,1H)7.03-7.10(m,1H)6.45(s,1H)4.53-4.73(m,6H)4.42(dd,J＝14.43,6.78Hz,1H)3.81-3.91(m,2H)3.33(s,3H)2.87(t,J＝5.71Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物036、037、039、040、041、042、043和044以与化合物038类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780001651
Figure BDA0001982694780001661
化合物036：4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(3-(三氟甲基)苯基)-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:442[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.72(s,1H)7.59(d,J＝7.53Hz,1H)7.41(t,J＝7.91Hz,1H)7.30(d,J＝7.78Hz,1H)6.71(s,1H)4.54-4.76(m,6H)4.42(dd,J＝14.43,6.90Hz,1H)3.81-3.94(m,2H)3.33(s,3H)2.88(t,J＝5.77Hz,2H)。
化合物037_E1：(S*)-N-(3-氯苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):408/410。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.52-7.55(m,1H)7.18-7.25(m,2H)7.00-7.05(m,1H)6.49(s,1H)4.54-4.73(m,6H)4.42(dd,J＝14.49,6.84Hz,1H)3.82-3.91(m,2H)3.33(s,3H)2.87(t,J＝5.77Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物039_E1：(S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):460。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.57-7.61(m,1H),7.47-7.54(m,1H),7.06(t,J＝9.4Hz,1H),6.46(s,1H),4.57-4.67(m,4H),4.45-4.56(m,2H),4.34(dd,J＝6.9,14.5Hz,1H),3.80(q,J＝5.7Hz,2H),3.25(s,3H),2.80(t,J＝5.7Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物040_E1：(S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1)：470/472。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.70(dd,J＝2.57,5.96Hz,1H),7.22-7.27(m,1H),7.04(t,J＝8.53Hz,1H),6.53(s,1H),4.50-4.82(m,6H),4.41(dd,J＝6.90,14.43Hz,1H),3.86(q,J＝5.56Hz,2H),3.32(s,3H),2.86(t,J＝5.71Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物041_E1：(S*)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):471/473。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.14-8.18(m,1H),8.07(d,J＝5.5Hz,1H),6.96(d,J＝3.4Hz,1H),4.77(s,2H),4.53-4.72(m,4H),4.42(dd,J＝6.7,14.5Hz,1H),3.88(t,J＝5.9Hz,2H),3.33(s,3H),2.90(t,J＝5.7Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物042_E1：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):417。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.71-7.81(m,1H),7.53-7.64(m,1H),7.15(s,1H),6.58(s,H),4.72(d,J＝2.08Hz,4H),4.56(d,J＝5.14Hz,2H),4.37-4.48(m,1H),3.80-3.93(m,2H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.81Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物043_E1：(S*)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):406.1H NMR(氯仿-d,400MHz)：δ＝7.16(d,J＝2.9Hz,1H),6.99-7.06(m,1H),6.85(t,J＝8.9Hz,1H),6.28(s,1H),4.46-4.65(m,7H),4.34(dd,J＝14.4,6.8Hz,1H),3.79(q,J＝5.4Hz,2H),3.25(s,3H),2.79(t,J＝5.7Hz,2H),2.18ppm(d,J＝1.3Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物044_E1：(S*)-N-(3-氯-4,5-二氟苯基)-4-(氟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):444。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.34(ddd,J＝11.76,6.43,2.64Hz,1H)7.21(dt,J＝5.30,2.43Hz,1H)6.49(s,1H)4.54-4.73(m,6H)4.42(dd,J＝14.49,6.96Hz,1H)3.81-3.91(m,2H)3.33(s,3H)2.87(t,J＝5.71Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物045：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-N,2-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001681
向3-氯-4-氟-N-甲基-苯胺(中间体2，45.00mg，229.53μmol，1.00当量，HCl)和三光气(34.06mg，114.77μmol，0.50当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中滴加TEA(116.13mg，1.15mmol，159.08μL，5.00当量)。将所得的混合物在0℃下搅拌0.5小时，然后在20℃下搅拌0.5小时。在0℃下分批加入4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(中间体1，66.27mg，229.53μmol，1.00当量，HCl)，然后升温回到20℃并搅拌1小时。LCMS显示原料被消耗，并且形成77.5％的产物。将两批反应混合物倾注到H2O(5mL)中并用DCM(3*5mL)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，并减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(70mg，84.92μmol，99.77％纯度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.33(dd,J＝2.70,6.46Hz,1H),7.19-7.26(m,1H),7.12-7.18(m,1H),4.43-4.55(m,2H),4.23-4.36(m,3H),3.66-3.75(m,1H),3.55-3.66(m,3H),3.31(s,6H),3.26(s,3H),3.18(s,3H)。LCMS[M+1]:438。
化合物046：N-(3-氯苯基)-4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001691
步骤1：4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1(2H)-酮：在0℃下，向4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体3，43.00mg，113.03μmol，1.00当量)的DCM(300.00μL)溶液中添加TFA(462.00mg，4.05mmol，300.00μL，35.85当量)的DCM(300.00μL)溶液，将反应混合物在10℃下搅拌一小时。TLC指示原料被完全消耗。在旋转蒸发仪上除去溶剂，得到黄色油状标题化合物(40.00mg，粗制物，TFA)。将产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤2：N-(3-氯苯基)-4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向4-(羟甲基)-2,8,8-三甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1(2H)-酮(40.00mg，101.43μmol，1.00当量，TFA)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TEA(41.06mg，405.73μmol，56.24μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氯苯基)氨基甲酸苯酯(25.12mg，101.43μmol，1.00当量)，将反应混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到约50％的期望化合物。用DCM(50mL*3)和水(30mL)萃取混合物，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(28.00mg，63.24μmol，62.35％收率，98％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.56(s,1H)7.18-7.24(m,2H)7.00-7.02(d,J＝7.78Hz,1H)6.64(s,1H)4.71(s,2H)4.52-4.56(m,2H)4.38-4.41(m,1H)3.85-3.86(m,1H)3.76-3.77(m,1H)3.52-3.62(m,2H)3.30(s,3H)2.18(brs,1H)1.34-1.36(d,J＝4.64Hz,6H)。LCMS:434/436[M+1]。
化合物047：N-(3-氯苯基)-4-(羟甲基)-2,8-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001701
向4-(羟甲基)-2,8-二甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(11H)-羧酸叔丁酯(中间体4，60.00mg，163.75μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(1.32g，11.58mmol，857.16μL，70.70当量)。将混合物在15℃下搅拌1小时。TLC(PE:EA＝0:1)显示原料被消耗。使混合物真空浓缩，得到黄色油状4-(羟甲基)-2,8-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1(2H)-酮(64.00mg，168.28μmol，102.77％收率，TFA)。将所得的油状物用DCM(5.00mL)溶解，并且添加TEA(82.48mg，815.10μmol，112.99μL，5.00当量)，然后添加N-(3-氯苯基)氨基甲酸苯酯(40.38mg，163.02μmol，1.00当量)。将混合物在15℃下搅拌16小时。LCMS显示出主要产物。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(25.00mg，59.25μmol，36.34％收率，99.5％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.56(s,1H),7.19-7.27(m,2H),7.03(d,J＝7.5Hz,1H),6.60(brs,1H),4.72-4.86(m,1H),4.51-4.69(m,3H),4.33-4.48(m,1H),4.07-4.19(m,1H),3.67-3.93(m,2H),3.33(s,3H),3.24(ddd,J＝8.3,13.2,17.4Hz,1H),3.10(d,J＝6.7Hz,1H),2.07(brs,1H),1.36(dd,J＝2.3,6.8Hz,1H)。LCMS:420/422[M+1]。
化合物048：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(甲基硫烷基甲基)-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001711
步骤1：[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基甲磺酸酯：在15℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物031，500.00mg，1.18mmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加Et3N(716.43mg，7.08mmol，981.40μL，6.00当量)，然后添加MsCl(540.68mg，4.72mmol，365.32μL，4.00当量)。将所得的混合物在25℃下搅拌20小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)显示原料几乎被消耗完，并且产生主要的期望产物。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释，用1N HCl(30mL*2)和盐水(30mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(590.00mg，1.02mmol，86.67％收率，87％纯度)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(甲基硫烷基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
向[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基甲磺酸酯(150.00mg，298.85μmol，1.00当量)的DMF(8.00mL)溶液中添加NaSMe(125.68mg，1.79mmol，114.25μL，6.00当量)。将所得的混合物在15℃下搅拌16小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)显示原料几乎被消耗完，并且主要产生期望产物。将反应混合物用EtOAc(30mL)稀释，用水(30mL*2)和盐水(30mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过柱色谱(二氯甲烷:甲醇＝20:1～10:1)纯化残余物，得到145.00mg黄色液体状期望产物(70.5％纯度)，其中30mg经由制备型HPLC(TFA)进一步纯化，以获得14.81mg的标题化合物(98％纯度)。1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.57-7.59(m,1H),7.28-7.30(m,1H),7.13(t,J＝9.20Hz,1H),4.84(s,2H),4.59-4.71(m,2H),4.42-4.45(m,1H),3.80-3.84(t,J＝6.00Hz,2H),3.31(s,3H),2.81-2.84(m,3H),2.67-2.70(m,1H),2.19(s,3H)。LCMS[M+1]:454.1
化合物049_E1：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(((S*)-甲基亚磺酰基)甲 基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001731
在15℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(甲基硫烷基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物048，80.00mg，123.37μmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加m-CPBA(29.27mg，135.71μmol，80％纯度，1.10当量)。将所得的混合物在30℃下搅拌16小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)和LCM显示原料被完全消耗，并且产生砜和亚砜。将反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释，然后用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。通过制备型TLC(二氯甲烷/甲醇＝15/1)，之后以制备型HPLC来纯化残余物，得到9.77mg的化合物050和29.09mg的外消旋化合物049。将29.09mg的外消旋化合物049通过两轮SFC进行分离，并通过制备型HPLC(TFA条件)进一步纯化，以获得4种对映体：化合物049_E1(6.86mg)，化合物049_E2(5.78mg)；化合物049_E3(7.15mg)和化合物049_E4(6.79mg)。1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.22(m,1H),7.07(t,J＝9.20Hz,1H),6.46(s,1H),5.03-5.12(m,1H),4.65-4.78(m,3H),4.45(dd,J＝7.60Hz,J＝7.60Hz,1H),3.75–3.96(m,2H),3.34(s,3H),2.85-3.05(m,4H),2.69(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物049_E2：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(((R*)-甲基亚磺酰基)甲 基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001741
从上述混合物分离出化合物049_E2。
1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.22(m,1H),7.07(t,J＝9.20Hz,1H),6.46(s,1H),5.03-5.12(m,1H),4.65-4.78(m,3H),4.45(dd,J＝7.60Hz,J＝7.60Hz,1H),3.75–3.96(m,2H),3.34(s,3H),2.85-3.05(m,4H),2.69(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物049_E3：(R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(((R*)-甲基亚磺酰基)甲 基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺
Figure BDA0001982694780001742
从上述混合物分离出化合物049_E3。
1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.22(m,1H),7.07(t,J＝9.20Hz,1H),6.46(s,1H),5.03-5.12(m,1H),4.65-4.78(m,3H),4.45(dd,J＝7.60Hz,J＝7.60Hz,1H),3.75–3.96(m,2H),3.34(s,3H),2.85-3.05(m,4H),2.69(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物049_E4：(R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(((S*)-甲基亚磺酰基)甲 基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001751
从上述混合物分离出化合物049_E4。
1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.22(m,1H),7.07(t,J＝9.20Hz,1H),6.46(s,1H),5.03-5.12(m,1H),4.65-4.78(m,3H),4.45(dd,J＝7.60Hz,J＝7.60Hz,1H),3.75-3.96(m,2H),3.34(s,3H),2.85-3.05(m,4H),2.69(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物050：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-((甲磺酰基)甲基)-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001761
从上述混合物分离出化合物050。
1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.53-7.57(m,1H),7.15-7.20(m,1H),7.07(t,J＝8.80Hz,1H),6.45(s,1H),5.12(s,1H),4.65-4.78(m,3H),4.53(d,J＝7.60Hz,1H),3.75–3.90(m,3H),3.32–3.45(m,3H),3.27(d,J＝4.80Hz,1H),3.03(s,3H),2.88(t,J＝6.00Hz,2H)。LCMS[M+1]:486.3
化合物051：(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基甲基碳酸 酯：
Figure BDA0001982694780001762
在冰水浴(使内部温度维持于5～10℃之间)下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物031，50.00mg，117.97μmol，1.00当量)的DCM(10.00mL)溶液中添加Et3N(119.37mg，1.18mmol，163.53μL，10.00当量)，然后添加氯甲酸甲酯(111.48mg，1.18mmol，91.38μL，10.00当量)。将所得的混合物在30℃下搅拌2小时。TLC和LCMS显示原料被消耗，并且产生期望产物。在真空中浓缩反应混合物。通过制备型HPLC纯化残余物，以获得白色固体状经纯化产物(50.00mg，102.73μmol，87.08％收率，99％纯度)。LCMS:482.1[M+1]。1H NMR：(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.23(m,1H),7.05(t,J＝8.80Hz,1H),6.43(s,1H),4.65-4.75(m,3H),4.55-4.63(m,1H),4.35-4.45(m,2H),4.21-4.31(m,1H),3.75-3.89(m,5H),3.31(s,3H),2.86(t,J＝6.00Hz,2H)。
化合物052、053、054、055和056以与化合物051类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780001771
化合物052：(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基乙酸酯：
LCMS:466.1[M+1]。1H NMR:(CDCl3,400MHz)δ＝7.56-7.59(m,1H),7.15-7.21(m,1H),7.06(t,J＝8.80Hz,1H),6.45(s,1H),4.55-4.75(m,4H),4.31-4.42(m,2H),4.14-4.22(m,1H),4.21-4.31(m,1H),3.79-3.91(m,2H),3.30(s,3H),2.86(t,J＝6.40Hz,2H),2.12(s,3H)。
化合物053：(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基异丙基碳酸 酯：
LCMS:510[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝2.69,6.48Hz,1H),7.17-7.23(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.53(s,1H),4.92(m,J＝6.24Hz,1H),4.65-4.75(m,3H),4.56-4.65(m,1H),4.32-4.41(m,2H),4.24(dd,J＝4.58,11.92Hz,1H),3.80-3.92(m,2H),3.30(s,3H),2.86(t,J＝5.75Hz,2H),1.29-1.38(m,6H)。
化合物054：((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)碳酸叔丁 酯：
LCMS:546[M+23]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.55(s,1H),4.65-4.77(m,3H),4.56-4.64(m,1H),4.27-4.41(m,2H),4.18(dd,J＝4.65,11.98Hz,1H),3.77-3.93(m,2H),3.30(s,3H),2.86(t,J＝5.75Hz,2H),1.51(s,9H)。
化合物055；(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基新戊酸酯：
LCMS:508[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.57(dd,J＝2.57,6.48Hz,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.53(s,1H),4.57-4.73(m,4H),4.29-4.39(m,2H),4.18-4.27(m,1H),3.86(t,J＝5.81Hz,2H),2.86(t,J＝5.75Hz,2H),1.24(s,9H)。
化合物056：(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基乙基碳酸 酯：
LCMS:496[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.57(dd,J＝2.69,6.48Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.52(s,1H),4.65-4.76(m,3H),4.56-4.65(m,1H),4.32-4.43(m,2H),4.21-4.30(m,3H),3.77-3.95(m,2H),3.31(s,3H),2.86(t,J＝5.75Hz,2H),1.35(t,J＝7.09Hz,3H)。
化合物057：(10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基氨基甲酸 酯：
Figure BDA0001982694780001791
在10℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物031，50.00mg，117.97μmol，1.00当量)的DCM(8.00mL)溶液中添加氰酸钠(230.08mg，3.54mmol，30.00当量)，然后添加CF3COOH(403.53mg，3.54mmol，262.03μL，30.00当量)。将所得的混合物在30℃下搅拌48小时。LCMS和HPLC显示原料/期望产物＝1/2。在真空中浓缩反应混合物。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物，以获得白色固体状期望产物(16.74mg，35.86μmol，30.40％收率)。1H NMR:(MeOD,400MHz)δ＝7.57-7.59(m,1H),7.23-7.39(m,1H),7.13(t,J＝9.20Hz,1H),4.65-4.75(m,3H),4.59-4.64(m,1H),4.33-4.41(m,1H),4.25-4.32(m,1H),4.13-4.20(m,1H),3.82(t,J＝6.00Hz,2H),3.31(s,3H),2.82(t,J＝6.40Hz,2H)。LCMS:467[M+1]。
化合物058：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001801
步骤1：2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，500.00mg，1.42mmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(358.95mg，3.55mmol，491.72μL，2.50当量)和MsCl(211.30mg，1.84mmol，142.77μL，1.30当量)。然后将混合物在20℃下搅拌2小时。TLC(乙酸乙酯)显示反应完全。将反应混合物用DCM(20mL)稀释并用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到作为黄色固体获得的2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(600.00mg，1.39mmol，98.16％收率)，其用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤2：4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯和4-(二甲基氨基甲酰基氧基甲基)-2- 甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧 酸叔丁酯：向2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(50.00mg，116.15μmol，1.00当量)和Me2NH(94.71mg，1.16mmol，106.42μL，10.00当量，HCl)的DMF(3.00mL)溶液中添加K2CO3(160.53mg，1.16mmol，161.00μL，10.00当量)。将混合物在80℃下搅拌12小时。LCMS显示原料被消耗，并且产生19％的3以及65％的3a。将混合物过滤，并且将滤液真空浓缩。通过制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)纯化粗制物，以获得无色油状第一标题化合物(9.00mg，22.53μmol，19.40％收率，95％纯度)，并且获得无色油状第二化合物(15.00mg，35.42μmol，
30.50％收率)。
4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.62-4.70(m,2H),4.47-4.59(m,2H),4.23-4.35(m,1H),3.58-3.86(m,2H),3.19-3.36(m,3H),2.77(t,J＝5.44Hz,2H),2.41-2.67(m,2H),2.34(s,6H),1.49(s,9H)。
4-(二甲基氨基甲酰基氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.51-4.72(m,4H),4.27-4.39(m,2H),4.15-4.25(m,1H),3.71(s,2H),3.28(s,3H),2.92(d,J＝17.73Hz,5H),2.70-2.80(m,2H),1.48(s,9H)。
步骤3：4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(67.00mg，176.57μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，152.99当量)。将混合物在15℃下搅拌30min。TLC(乙酸乙酯)显示反应已经完成。使混合物蒸发，以获得无色油状粗制标题化合物(80.00mg，粗制物，TFA)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。
步骤4：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11- 四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向4-[(二甲基氨基)甲基]-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(49.00mg，175.41μmol，1.00当量)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(46.60mg，175.41μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(53.25mg，526.23μmol，72.95μL，3.00当量)。将混合物在15℃下搅拌16小时。LCMS显示反应已经完成。真空蒸发混合物。通过制备型HPLC(柱：Boston Green ODS 150*305u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：11％-41％，10min)纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(48.00mg，106.24μmol，60.57％收率，99.8％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.57(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.17-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.53(s,1H),4.77(五重峰，J＝5.81Hz,1H),4.70(s,2H),4.59(dd,J＝5.93,14.61Hz,1H),4.34(dd,J＝4.89,14.67Hz,1H),3.77-3.96(m,2H),3.32(s,3H),2.86(t,J＝5.75Hz,2H),2.73(d,J＝6.72Hz,2H),2.48(s,6H)。LCMS:451[M+1]。
化合物059：[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基N,N-二甲基氨基甲酸 酯：
Figure BDA0001982694780001821
步骤1：(2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2, 5]噁二氮杂卓-4-基)甲基N,N-二甲基氨基甲酸酯：
向4-(二甲基氨基甲酰基氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(如上所述，55.00mg，129.88μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(14.81mg，129.88μmol，9.62μL，1.00当量)。然后将混合物在10℃下搅拌30min。TLC(乙酸乙酯)显示反应已经完成。使混合物蒸发，以获得无色油状标题化合物(70.00mg，粗制物，TFA)。
步骤2：[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基N,N-二甲基氨基甲酸酯：
向(2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基N,N-二甲基氨基甲酸酯(42.00mg，96.03μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(25.51mg，96.03μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(29.15mg，288.09μmol，39.93μL，3.00当量)。然后将混合物在15℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi C18150*25*10um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：35％-65％，10min)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(35.00mg，69.17μmol，72.02％收率，97.8％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.57(dd,J＝2.69,6.48Hz,1H),7.17-7.24(m,1H),7.02-7.08(m,1H),6.56(s,1H),4.64-4.73(m,3H),4.55-4.63(m,1H),4.32-4.40(m,2H),4.21-4.27(m,1H),3.86(t,J＝5.87Hz,2H),3.30(s,3H),2.93(d,J＝16.99Hz,6H),2.86(t,J＝5.69Hz,2H)。LCMS:495[M+1]。
化合物060_E1：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001831
步骤1：2-乙基-4-(羟甲基)-4,5,8,9,10,11六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体5，51.00mg，139.19μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(770.00mg，6.75mmol，500.00μL，48.52当量)。然后将混合物在10℃下搅拌1小时。LCMS显示反应已经完成。使混合物蒸发，以获得无色油状标题化合物(60.00mg，粗制物)，其直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤2：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向2-乙基-4-(羟甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(60.00mg，135.19μmol，1.00当量)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(22.27mg，83.82μmol，0.62当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TEA(27.36mg，270.38μmol，37.48μL，2.00当量)。然后将混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示反应已经完成。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi C18150*25*10um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：30％-60％，10min)纯化残余物。获得白色固体状N-(3-氯-4-氟苯基)-2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(34.00mg，76.88μmol，56.87％收率，99％纯度)。通过SFC(柱：Phenomenex Synergi Max-RP250*8010u；流动相：[碱-MeOH]；B％：40％-40％，3MIN；90min)，之后以制备型HPLC分离30mg的外消旋体，以获得白色固体状两种对映体(每种12.00mg，27.41μmol，40.00％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.54-7.62(m,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.12(m,1H),6.53(s,1H),4.63-4.79(m,2H),4.43-4.60(m,3H),3.78-3.96(m,4H),3.74(dd,J＝4.52,11.54Hz,1H),3.64(qd,J＝6.84,13.85Hz,1H),2.85(t,J＝5.40Hz,2H),2.03(s,1H),1.34(t,J＝7.03Hz,3H)。LCMS:438/440[M+1]。
*纯但未知的对映体。
化合物060_E2：(R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-乙基-4-(羟甲基)-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001841
从上述混合物分离化合物060_E2。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.55(dd,J＝2.51,6.40Hz,1H),7.15-7.23(m,1H),6.99-7.09(m,1H),6.63(s,1H),4.62-4.77(m,2H),4.44-4.60(m,3H),3.76-3.94(m,4H),3.69-3.76(m,1H),3.63(qd,J＝7.00,14.13Hz,1H),2.84(t,J＝5.58Hz,2H),2.29(s,1H),1.33(t,J＝7.09Hz,3H)。LCMS:438/440[M+1]。
*纯但未知的对映体。
化合物061：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,5-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001851
步骤1：2,5-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁 二氮杂卓-1-酮：向2,5-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体7，30.00mg，89.18μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，302.90当量)。将反应
混合物在15℃下搅拌12小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到约84％的期望产物。将反应混合物真空浓缩，以获得灰白色固体状标题化合物(35.00mg，粗制物，TFA)。LCMS:237[M+1]。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,5-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向2,5-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(35.00mg，99.92μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(26.00mg，97.92μmol，0.98当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(73.00mg，721.42μmol，100.00μL，7.22当量)。将反应混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示化合物4被完全消耗，并且检测到约75％的期望产物。真空浓缩反应混合物。通过制备型HPLC(HCl)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(15.00mg，34.21μmol，34.23％收率，93％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.49-7.65(m,1H),7.19(s,1H),7.00-7.09(m,1H),6.61(s,1H),4.62-4.81(m,4H),4.53(dd,J＝5.01,11.62Hz,1H),4.04(dd,J＝8.25,11.43Hz,1H),3.86(s,2H),3.33(s,3H),2.88(s,2H),1.64(d,J＝6.36Hz,3H)。LCMS:408[M+1]。
化合物062：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001861
步骤1：2,4-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁 二氮杂卓-1-酮：使2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体8，50.00mg，148.64μmol，1.00当量)溶解于TFA(5.13g，45.02mmol，3.33mL，302.90当量)中。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(PE:EA＝0:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得无色油状标题化合物(53.00mg，粗制物，TFA)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向2,4-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(45.00mg，128.46μmol，1.00当量，TFA)的DCM(5.00mL)溶液中添加TEA(65.00mg，642.32μmol，89.04μL，5.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(34.13mg，128.46μmol，1.00当量)。将混合物在30℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(HCl)纯化残余物，得到白色固体状N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺062(43.00mg，105.23μmol，81.91％收率，99.8％纯度)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.60(dd,J＝2.5,6.7Hz,1H),7.28-7.36(m,1H),7.15(t,J＝8.9Hz,1H),4.74(s,2H),4.65-4.69(m,1H),4.59(dd,J＝5.3,14.4Hz,1H),4.24(dd,J＝5.3,14.5Hz,1H),3.85(t,J＝5.6Hz,2H),3.30(s,3H),2.85(t,J＝5.6Hz,2H),1.29-1.37(m,3H)。LCMS:408[M+1]。
化合物063以与化合物062类似的方式制备。
化合物063：N-(3-氯苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4', 3':3,4]吡唑[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780001871
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.54(t,J＝2.0Hz,1H),7.29-7.35(m,1H),7.21-7.27(m,1H),7.02(d,J＝7.8Hz,1H),4.74(s,2H),4.64-4.71(m,1H),4.59(dd,J＝5.7,14.4Hz,1H),4.24(dd,J＝5.5,14.3Hz,1H),3.85(t,J＝5.9Hz,2H),3.30(s,3H),2.85(t,J＝5.8Hz,2H),1.34(d,J＝6.2Hz,3H)。LCMS:390[M+1]。
化合物064：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4,4-三甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001881
步骤1：2,4,4-三甲基-8,9,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-1-酮：向2,4,4-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体9，70.00mg，199.77μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，67.61当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(PE:EA＝0:1)显示化合物8被消耗。将混合物真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(73.00mg，粗制物，TFA)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4,4-三甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向2,4,4-三甲基-8,9,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(73.00mg，200.37μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(53.23mg，200.37μmol，1.00当量)在DCM(10.00mL)中的溶液中添加TEA(101.38mg，1.00mmol，138.88μL，5.00当量)。将混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示出检测到50％的期望产物。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(50.20mg，118.29μmol，59.03％收率，99.4％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.60(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.21(ddd,J＝2.76,4.02,8.91Hz,1H),7.04-7.11(m,1H),6.48(s,1H),4.71(s,2H),4.25(s,2H),3.88(t,J＝5.77Hz,2H),3.29(s,3H),2.88(t,J＝5.77Hz,2H),1.39(s,6H)。LCMS(M+1):422。
化合物065：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001891
步骤1：4-(甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于-40℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，50.00mg，141.89μmol，1.00当量)在DMF(4.00mL)中的混合物中一次性加入NaH(8.51mg，212.83μmol，60％纯度，1.50当量)。将混合物在-40～-10℃下搅拌30min，然后将MeI(40.28mg，283.78μmol，17.67μL，2.00当量)添加至混合物。将混合物在0℃下搅拌1小时。TLC(乙酸乙酯:石油醚＝2:1)显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(5mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(乙酸乙酯:石油醚＝2:1)纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(30.00mg，72.05μmol，50.78％收率，88％纯度)。LCMS:367[M+1]。
步骤2：4-(甲氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4- d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在N2下于0℃下，向4-(甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(30.00mg，81.88μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中一次性加入TFA(616.00mg，5.40mmol，400.00μL，65.98当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。LCMS显示反应已经完成。将残余物真空浓缩，获得黄色固体(31.34mg，粗制物，TFA)。LCMS:267[M+1]。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺的制备：在N2下，向4-(甲氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(31.14mg，81.88μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(21.75mg，81.88μmol，1.00当量)在DCM(4.00mL)中的混合物中添加TEA(82.85mg，818.78μmol，113.50μL，10.00当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。LCMS显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(24.00mg，54.16μmol，66.14％收率，98.8％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.53-7.63(m,1H),7.14-7.23(m,1H),7.06(s,1H),6.46(s,1H),4.70(s,2H),4.48-4.65(m,2H),4.41(s,1H),3.86(d,J＝12.67Hz,2H),3.57-3.67(m,1H),3.49-3.56(m,1H),3.44(s,3H),3.31(s,3H),2.82-2.93(m,2H)。LCMS:438[M+1]。
化合物066：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001901
步骤1：2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮 杂卓-1-酮：在N2下于0℃下，向2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体10，55.00mg，170.62μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中一次性加入TFA(616.00mg，5.40mmol，400.00μL，31.66当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。TLC(二氯甲烷：甲醇＝10:1)显示反应已经完成。将残余物浓缩，得到黄色油状物(57.37mg，170.61μmol，100.00％收率，TFA)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在N2下，向2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(57.37mg，170.61μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(45.33mg，170.61μmol，1.00当量)在DCM(4.00mL)中的混合物中添加TEA(172.64mg，1.71mmol，236.49μL，10.00当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。LCMS显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(42.00mg，105.05μmol，61.58％收率，98.5％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.55-7.62(m,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.48-6.56(m,1H),4.71(s,2H),4.52-4.60(m,2H),4.36-4.45(m,2H),3.82-3.93(m,2H),3.31(s,3H),2.87(s,2H)。LCMS：394[M+1]。
化合物067：2-烯丙基-N-(3-氯-4-氟苯基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001911
步骤1：2-烯丙基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二 氮杂卓-1-酮：向2-烯丙基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体12，30.00mg，86.11μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液添加TFA(770.00mg，6.75mmol，500.00μL，78.43当量)，将反应混合物在10℃下搅拌一小时。TLC指示化合物7被完全消耗，并且检测到一个具有较大极性的主要新斑点。在旋转蒸发仪上除去溶剂，以获得黄色油状标题化合物(30.00mg，粗制物，TFA)。粗产物不经纯化即直接用于下一步骤。
步骤2：2-烯丙基-N-(3-氯-4-氟苯基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向2-烯丙基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(30.00mg，82.80μmol，1.00当量，TFA)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(33.52mg，331.22μmol，45.91μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(22.00mg，82.80μmol，1.00当量)。将反应混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示化合物8被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。用DCM(30mL*2)和水(20mL)萃取混合物，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)进一步纯化，以获得白色固体状标题化合物(32.60mg，75.68μmol，91.41％收率，97.47％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.56-7.58(dd,J＝6.54,2.63Hz,1H)7.18-7.21(m,1H)7.03-7.07(m,1H)6.55(s,1H)5.92-5.97(ddt,J＝16.93,10.30,6.31,6.31Hz,1H)5.32-5.34(m,2H)4.71(s,2H)4.54-4.57(m,2H)4.36-4.39(m,2H)4.28-4.30(d,J＝6.36Hz,2H)3.85-3.87(t,J＝5.81Hz,2H)2.85-2.87(t,J＝5.75Hz,2H)。LCMS:420/422[M+1]。
化合物068：N-(3-氯-4-氟苯基)-1-氧代-2-丙基-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001931
步骤1：1-氧代-2-丙基-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5] 噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：将2-烯丙基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(化合物067，40.00mg，114.81μmol，1.00当量)和Pd/C(20.00mg，10％纯度)在MeOH(20.00mL)中的混合物在H2(15psi)下于10℃下搅拌16小时。LCMS显示化合物7被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。将反应混合物过滤并浓缩滤液，以获得黄色油状标题化合物(38.00mg，108.44μmol，94.46％收率)。LCMS:373[M+23]。
步骤2：2-丙基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮 杂卓-1-酮：向1-氧代-2-丙基-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧叔丁酸酯(38.00mg，108.44μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，124.55当量)。将反应混合物在10℃下搅拌一小时。TLC指示化合物9被完全消耗，并且检测到一个具有较大极性的主要新斑点。在旋转蒸发仪上除去溶剂，以获得黄色油状物(38.00mg，粗制物，TFA)，其直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-1-氧代-2-丙基-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向2-丙基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(38.00mg，104.30μmol，1.00当量，TFA)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(42.22mg，417.20μmol，57.84μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(27.71mg，104.30μmol，1.00当量)。将反应混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示化合物10被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。用DCM(30mL*2)和水(20mL)萃取混合物，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到作为白色固体获得的标题化合物(35.39mg，82.06μmol，78.67％收率，97.81％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.56-7.58(dd,J＝6.53,2.63Hz,1H)7.17-7.19(m,1H)7.03-7.08(m,1H)6.52(s,1H)4.70(s,2H)4.54-4.57(m,2H)4.38-4.41(m,2H)3.85-3.88(t,J＝5.77Hz,2H)3.64-3.68(m,2H)2.85-2.87(t,J＝5.77Hz,2H)1.74-1.83(m,J＝7.38Hz,2H)1.00-1.04(t,J＝7.40Hz,3H)。LCMS:422/424[M+1]。
化合物069_E1：(4S*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780001941
步骤1：4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4- d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：在N2下于0℃下，向4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体14，100.00mg，272.92μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中一次性加入TFA(616.00mg，5.40mmol，400.00μL，19.80当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。TLC和LCMS显示反应已经完成。将混合物真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(103.80g，粗制物，TFA)。LCMS:267[M+1]。
步骤2：(4S*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：在N2下，向4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(103.80mg，272.93μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(72.51mg，272.93μmol，1.00当量)在DCM(6.00mL)中的混合物中添加TEA(276.18mg，2.73mmol，378.32μL，10.00当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。LCMS和TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(二氯甲烷:甲醇＝100/1，50/1)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(98.00mg，218.90μmol，80.20％收率，97.8％纯度)，将该标题化合物通过SFC(仪器：SFCWaters_80_Q；柱：OD-10um；流动相：A为CO2且B为甲醇(0.1％NH3H2O)；等度洗脱：B 25％；流速：55mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm)进行拆分，以获得两种级分。通过SFC(仪器：SFC Thar_80_Q；柱：OJ-5um；流动相：A为CO2且B为异丙醇(0.1％NH3H2O)。等度洗脱：B25％；流速：55mL/min；背压：100巴；柱温：35℃。波长：220nm)分离第一级分，以获得白色固体状化合物070_E1(8.68mg，95.8％纯度)和化合物069_E2(20.43mg，98.0％纯度)。LCMS:438[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.55-7.63(m,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.43-6.52(m,1H),5.09-5.21(m,1H),4.80-4.93(m,1H),4.52-4.65(m,2H),4.33-4.50(m,2H),3.74-3.96(m,2H),3.34(s,3H),2.98-3.10(m,1H),2.63-2.74(m,1H),1.82-1.99(m,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物069_E2：(4R*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780001961
从上述混合物获得。
LCMS:438[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.53-7.64(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.12(m,1H),6.42-6.50(m,1H),5.07-5.18(m,1H),4.77-4.86(m,1H),4.38-4.66(m,4H),3.71-3.93(m,2H),3.33(s,3H),2.97-3.10(m,1H),2.68(d,J＝15.94Hz,1H),1.85-1.98(m,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
通过SFC(仪器：SFC Thar_80_Q；柱：OJ-5um；流动相：A为CO2且B为甲醇(0.1％NH3H2O)；等度洗脱：B 25％；流速：55mL/min；背压：100巴；柱温：35℃。波长：220nm)分离第二级分，以获得白色固体状化合物069_E3(15.37mg，97.3％纯度)和化合物069_E4(21.86mg，99.26％纯度)。
化合物069_E3：(4R*,9R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺
LCMS:438[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.55-7.65(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.01-7.13(m,1H),6.40-6.52(m,1H),5.07-5.23(m,1H),4.80-4.92(m,1H),4.52-4.63(m,2H),4.34-4.50(m,2H),3.74-3.96(m,2H),3.02(d,J＝5.77Hz,1H),2.71(s,1H),1.80-1.96(m,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物069_E4：(4S*,9R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺
LCMS:438[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.54-7.65(m,1H),7.15-7.23(m,1H),7.01-7.11(m,1H),6.40-6.52(m,1H),5.06-5.19(m,1H),4.75-4.86(m,1H),4.36-4.65(m,4H),3.71-3.91(m,2H),2.98-3.10(m,1H),2.68(d,J＝15.69Hz,1H),1.84-2.01(m,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。*纯但未知的立体化学
化合物070 N-(3-氯苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780001971
在N2下于0℃下，向6-甲基-3-(甲基(氧杂环丁烷-3-基氧基)氨基甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(中间体15，40.00mg，109.17μmol，1.00当量)在DCM(1.00mL)中的混合物中一次性加入TFA(770.00mg，6.75mmol，500.00μL，61.86当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。LCMS和TLC(二氯甲烷:甲醇＝5:1)显示反应已经完成。将该反应混合物用TEA(1mL)在-78℃下进行处理。在N2下，向所得的混合物中添加含有N-(3-氯苯基)氨基甲酸苯酯(27.04mg，109.16μmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)，然后添加TEA(110.46mg，1.09mmol，151.32μL，10.00当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。LCMS显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(17.00mg，40.17μmol，36.80％收率，99.2％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79-8.94(m,1H),7.62(s,1H),7.35-7.42(m,1H),7.22-7.29(m,1H),6.93-7.02(m,1H),5.13-5.22(m,1H),4.96-5.07(m,1H),4.80-4.91(m,1H),4.38-4.60(m,2H),4.09-4.34(m,2H),3.44-3.69(m,2H),3.23(d,J＝3.14Hz,3H),2.84-2.95(m,1H),2.58(dd,J＝4.20,15.75Hz,1H),1.09(d,J＝6.78Hz,3H)。LCMS:420[M+1]。
化合物071：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯：
Figure BDA0001982694780001981
在N2下于0℃下，向10-(叔丁基)4-甲基2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二羧酸酯(中间体16，110.00mg，289.18μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中一次性加入TFA(770.00mg，6.75mmol，500.00μL，23.35当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示反应已经完成。使残余物真空浓缩，以获得黄色油状2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸酯(114.02mg，289.17μmol，1.00当量，TFA)。在N2下使所得的油状物和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(76.82mg，289.17μmol，1.00当量)溶解于DCM(4.00mL)中并添加TEA(292.61mg，2.89mmol，400.84μL，10.00当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。LCMS显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(60.00mg，131.99μmol，45.65％收率，99.4％纯度)。LCMS:452[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.57(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.15-7.24(m,1H),7.01-7.11(m,1H),6.48(s,1H),4.92(s,2H),4.74(s,1H),4.50-4.68(m,2H),3.90(s,3H),3.86(s,2H),3.40(s,3H),2.77-2.98(m,2H)。
化合物072：N10-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780001991
步骤1：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯(化合物071，40.00mg，88.53μmol，1.00当量)在DCE(4.00mL)中的混合物中一次性加入羟基(三甲基)锡烷(80.04mg，442.65μmol，5.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成。真空浓缩残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(30.00mg，65.13μmol，73.57％收率，95.05％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.52-7.58(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.47-6.56(m,1H),4.84-5.03(m,1H),4.59-4.78(m,1H),3.85(s,1H),3.40(s,3H),2.87(br d,J＝5.50Hz,1H)。LCMS:438[M+1]。
步骤2：N10-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(20.00mg，45.68μmol，1.00当量)和NH4Cl(24.44mg，456.82μmol，15.97μL，10.00当量)在DMF(3.00mL)中的混合物中一次性加入HOBt(9.26mg，68.52μmol，1.50当量)、PyBOP(35.66mg，68.52μmol，1.50当量)和DIPEA(88.56mg，685.23μmol，119.67μL，15.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成，并且检测到期望产物。将残余物倾注到水(10mL)中。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(14.00mg，31.92μmol，69.88％收率，99.6％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)7.54-7.61(m,1H),7.15-7.23(m,1H),7.01-7.11(m,1H),6.44-6.55(m,1H),6.01-6.12(m,1H),5.55-5.67(m,1H),4.86-5.01(m,2H),4.64-4.79(m,3H),3.71-3.98(m,2H),3.37(s,3H),2.87(s,2H)。LCMS:437[M+1]。
化合物073：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺
Figure BDA0001982694780002001
步骤1：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯(化合物071，40.00mg，88.53μmol，1.00当量)在DCE(4.00mL)中的混合物中一次性加入羟基(三甲基)锡烷(80.04mg，442.65μmol，5.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成。真空浓缩残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(30.00mg，65.13μmol，73.57％收率，95.05％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.52-7.58(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.47-6.56(m,1H),4.84-5.03(m,1H),4.59-4.78(m,1H),3.85(s,1H),3.40(s,3H),2.87(br d,J＝5.50Hz,1H)。LCMS:438[M+1]。
步骤2：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(25.00mg，57.10μmol，1.00当量)和甲胺(MeNH2)(38.55mg，571.00μmol，10.00当量，HCl)在DMF(2.00mL)中的混合物中一次性加入HATU(32.57mg，85.65μmol，1.50当量)和DIPEA(110.69mg，856.50μmol，149.58μL，15.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应物没有反应。将混合物在30℃下再搅拌12小时，LCMS显示反应已经完成。将残余物倾注到水(10mL)中并搅拌2min。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(20.00mg，44.01μmol，77.07％收率，99.2％纯度)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)7.56-7.64(m,1H),7.26-7.36(m,1H),7.08-7.21(m,1H),4.98-5.05(m,1H),4.74(s,4H),3.72-3.96(m,2H),3.34(br.s.,4H),2.80-2.90(m,2H),2.76(s,3H)。LCMS:451[M+1]。
化合物074：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4,N4,2-三甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002021
步骤1：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯(化合物071，40.00mg，88.53μmol，1.00当量)在DCE(4.00mL)中的混合物中一次性加入羟基(三甲基)锡烷(80.04mg，442.65μmol，5.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成。真空浓缩残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(30.00mg，65.13μmol，73.57％收率，95.05％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.52-7.58(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.47-6.56(m,1H),4.84-5.03(m,1H),4.59-4.78(m,1H),3.85(s,1H),3.40(s,3H),2.87(br d,J＝5.50Hz,1H)。LCMS:438[M+1]。
步骤2：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4,N4,2-三甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶 并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：在N2下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(20.00mg，45.68μmol，1.00当量)和N-甲基甲胺(18.62mg，228.40μmol，20.92μL，5.00当量，HCl)在DMF(5.00mL)中的混合物中一次性加入HATU(26.05mg，68.52μmol，1.50当量)和DIPEA(88.56mg，685.20μmol，119.68μL，15.00当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示反应已经完成，并且检测到期望产物。将残余物倾注到水(10mL)中。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(16.00mg，33.94μmol，74.29％收率，98.6％纯度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)7.53-7.66(m,1H),7.22-7.39(m,1H),7.06-7.19(m,1H),5.28-5.40(m,1H),4.89-4.95(m,1H),4.72(s,2H),4.54-4.66(m,1H),3.70-3.97(m,2H),3.21(d,J＝9.41Hz,6H),3.02(s,3H),2.77-2.89(m,2H)。LCMS:465[M+1]。
化合物075：(9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002031
步骤1：(9R)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2, 5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(600.00mg，1.78mmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TFA(67.53mmol，5.00mL，37.94当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(640.00mg，粗制物，TFA)。
步骤2：(9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶 并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向(9R)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(90.00mg，256.93μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(71.67mg，269.78μmol，1.05当量)在DCM(2.00mL)中的溶液中添加TEA(78.00mg，770.79μmol，106.85μL，3.00当量)。将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌1小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示(9R)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮被完全消耗，并且形成一个主要斑点。LCMS指示检测到期望产物的MS。将混合物用DCM(10mL)稀释，并用HCl(1％，10mL*2)和盐水(10mL*1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(53.00mg，129.44μmol，50.38％收率，99.6％纯度)。LCMS:408(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.52-7.62(m,1H),7.16-7.24(m,1H),6.98-7.10(m,1H),6.63(s,1H),5.14(五重峰，J＝6.45Hz,1H),4.85(d,J＝15.65Hz,1H),4.53-4.59(m,2H),4.35-4.50(m,3H),3.23-3.35(m,3H),3.03(dd,J＝5.81,15.83Hz,1H),2.67(d,J＝15.77Hz,1H),1.17(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物076、077、078、079、080和081以与化合物075类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002041
化合物076：(R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:442(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝2.69,6.11Hz,1H),7.53-7.62(m,1H),7.12(t,J＝9.41Hz,1H),6.72(s,1H),5.15(五重峰，J＝6.42Hz,1H),4.87(d,J＝15.65Hz,1H),4.52-4.60(m,2H),4.45-4.52(m,1H),4.36-4.45(m,2H),3.25-3.37(m,3H),3.04(dd,J＝5.87,15.89Hz,1H),2.69(d,J＝15.89Hz,1H),1.18(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物077：(R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:452/454。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.64-7.77(m,1H),7.24-7.29(m,2H),7.04(t,J＝8.50Hz,1H),6.52-6.62(m,1H),5.14(五重峰，J＝6.45Hz,1H),4.79-4.92(m,1H),4.53-4.62(m,2H),4.37-4.51(m,3H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.81,15.83Hz,1H),2.68(d,J＝15.77Hz,1H),1.17(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物078：(R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:453/455。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.10-8.19(m,1H),7.97-8.08(m,1H),6.95-7.11(m,1H),5.00-5.15(m,1H),4.92(d,J＝15.77Hz,1H),4.48-4.61(m,3H),4.31-4.47(m,2H),3.25-3.38(m,3H),2.94-3.13(m,1H),2.63-2.79(m,1H),1.12-1.30(m,3H)。
化合物079：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:399(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.75(dd,J＝2.75,5.44Hz,1H),7.60(ddd,J＝2.81,4.58,9.11Hz,1H),7.11(t,J＝8.68Hz,1H),6.94(s,1H),5.11(五重峰，J＝6.45Hz,1H),4.88(d,J＝15.77Hz,1H),4.52-4.62(m,2H),4.32-4.50(m,3H),3.29(s,3H),2.94-3.08(m,1H),2.61-2.73(m,1H),1.17(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物080：(R)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:388(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.22-7.28(m,1H),7.05-7.16(m,1H),6.91(t,J＝8.99Hz,1H),6.45(br s,1H),5.15(五重峰，J＝6.45Hz,1H),4.85(d,J＝15.65Hz,1H),4.51-4.60(m,2H),4.29-4.50(m,3H),3.22-3.38(m,3H),2.96-3.10(m,1H),2.67(d,J＝15.77Hz,1H),2.24(d,J＝1.34Hz,3H),1.17(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物081：(R)-N-(3-氯-4,5-二氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:426。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.35(ddd,J＝63,6.45,11.95Hz,1H,7.22(td,J＝2.43,5.29Hz,1H),6.70(s,1H),5.12(五重峰，J＝6.45Hz,1H),4.85(d,J＝15.65Hz,1H),4.52-4.61(m,2H),4.34-4.49(m,3H),3.24-3.35(m,3H),2.95-3.10(m,1H),2.59-2.77(m,1H),1.09-1.22(m,3H)。
化合物083：(9R)-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8, 9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002061
步骤1：(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，300.00mg，470.00mg，1.28mmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TFA(5.55g，48.67mmol，3.60mL，37.94当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(乙酸乙酯:MeOH＝20:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(520.00mg，粗制物，TFA)。
步骤2：(9R)-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(138.00mg，362.85μmol，1.00当量，TFA)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TEA(146.87mg，1.45mmol，201.19μL，4.00当量)，然后添加N-(4-氟-3-甲基-苯基)氨基甲酸苯酯(88.99mg，362.85μmol，1.00当量)，将反应混合物在10℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且检测到具有期望MS的一个主峰。用DCM(50mL*2)和水(30mL)萃取混合物，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化1/3的残余物，得到白色固体状标题化合物(32.00mg，99.24％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)dppmδ＝7.25(d,J＝2.45Hz,1H)7.11(dt,J＝7.98,3.90Hz,1H)6.93(t,J＝8.99Hz,1H)6.37(s,1H)5.15(五重峰，J＝6.30Hz,1H)4.86(d,J＝15.53Hz,1H)4.52-4.62(m,2H)4.34-4.49(m,2H)3.75-3.93(m,2H)3.33(s,3H)3.04(dd,J＝15.77,5.87Hz,1H)2.68(d,J＝15.65Hz,1H)2.26(d,J＝1.59Hz,3H)1.82-2.04(m,1H)1.17(d,J＝6.97Hz,3H)。LCMS:418[M+1]。
化合物069、082、084、089、090和091以与化合物083类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002071
Figure BDA0001982694780002081
化合物088：(9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002091
在N2下于-30℃下，向(9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物069，75.00mg，171.29μmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加DAST(165.66mg，1.03mmol，135.79μL，6.00当量)，将反应混合物在15℃下搅拌2小时。LCMS指示反应物被完全消耗，并且检测到期望的MS。将混合物用饱和NaHCO3(10mL*1)和盐水(10mL*1)洗涤。然后将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(39.70mg，87.28μmol，50.96％收率，96.7％纯度)。
化合物085、086和087以与化合物088类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002092
Figure BDA0001982694780002101
化合物082_E1：(4S*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):472。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝6.05,2.75Hz,1H)7.55-7.62(m,1H)7.14(t,J＝9.41Hz,1H)6.56(s,1H)5.15(m,J＝6.45Hz,1H)4.88(d,J＝15.53Hz,1H)4.54-4.62(m,2H)4.36-4.51(m,2H)3.77-3.93(m,2H)3.34(s,3H)3.05(dd,J＝15.96,5.81Hz,1H)2.70(d,J＝15.65Hz,1H)1.89(br.s.,1H)1.19(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物082_E2：(4R*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):472。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.66-7.73(m,1H),7.56-7.65(m,1H),7.15(s,1H),6.59(s,1H),5.09-5.22(m,1H),4.76-4.92(m,1H),4.55(s,4H),3.87(s,2H),3.35(s,3H),3.00-3.12(m,1H),2.71(d,J＝15.65Hz,1H),1.88-2.01(m,1H),1.21(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物083_E1：(4S*,9R)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780002111
LCMS(M+1):418。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.25(d,J＝2.45Hz,1H)7.11(dt,J＝7.98,3.90Hz,1H)6.93(t,J＝8.99Hz,1H)6.37(s,1H)5.15(m,J＝6.30Hz,1H)4.86(d,J＝15.53Hz,1H)4.52-4.62(m,2H)4.34-4.49(m,2H)3.75-3.93(m,2H)3.33(s,3H)3.04(dd,J＝15.77,5.87Hz,1H)2.68(d,J＝15.65Hz,1H)2.26(d,J＝1.59Hz,3H)1.82-2.04(m,1H)1.17(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物083_E2：(4R*,9R)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780002112
LCMS(M+1):472。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.24-7.27(m,1H),7.08-7.15(m,1H),6.89-6.97(m,1H),6.37(s,1H),5.04-5.25(m,1H),4.82(d,J＝15.65Hz,1H),4.29-4.65(m,4H),3.68-3.93(m,2H),3.33(s,3H),2.94-3.13(m,1H),2.56-2.74(m,1H),2.26(d,J＝1.71Hz,3H),1.89-2.01(m,1H),1.18(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物084_E1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS(M+1):429。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.79(dd,J＝5.44,2.75Hz,1H)7.54-7.61(m,1H)7.15(t,J＝8.68Hz,1H)6.50-6.58(m,1H)5.08-5.19(m,1H)4.78-4.91(m,1H)4.53-4.61(m,2H)4.37-4.51(m,2H)3.78-3.93(m,2H)3.35(s,3H)3.04(dd,J＝15.83,5.93Hz,1H)2.70(d,J＝15.53Hz,1H)1.78(br.s.,1H)1.17-1.22(m,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物084_E2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS[M+1]:429。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.78(br d,J＝2.57Hz,1H),7.59(brd,J＝4.40Hz,1H),7.14(br t,J＝8.80Hz,1H),6.62(br d,J＝16.14Hz,1H),5.13(br t,J＝6.54Hz,1H),4.82(br d,J＝15.77Hz,1H),4.39-4.63(m,4H),3.70-3.96(m,2H),3.34(s,3H),3.04(br dd,J＝5.99,15.65Hz,1H),2.70(br d,J＝16.02Hz,1H),1.88(br s,1H),1.20(br d,J＝6.97Hz,3H)。*纯但未知的对映体。
化合物085_E1：(4S*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):474。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝6.11,2.69Hz,1H)7.56-7.62(m,1H)7.14(t,J＝9.35Hz,1H)6.54(s,1H)5.15(m,J＝6.45Hz,1H)4.85(d,J＝15.65Hz,1H)4.57-4.73(m,4H)4.39-4.54(m,2H)3.33(s,3H)3.05(dd,J＝15.83,5.81Hz,1H)2.71(d,J＝16.02Hz,1H)1.20(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物085_E2：(4R*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):474。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.65-7.73(m,1H),7.56-7.63(m,1H),7.14(s,1H),6.54(s,1H),5.08-5.22(m,1H),4.82-4.92(m,1H),4.37-4.79(m,6H),3.34(s,3H),2.99-3.13(m,1H),2.62-2.79(m,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物086_E1：(4S*,9R)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS(M+1):420。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.25(d,J＝2.57Hz,1H)7.11(dt,J＝7.89,3.88Hz,1H)6.93(t,J＝8.99Hz,1H)6.34(s,1H)5.09-5.19(m,1H)4.79-4.89(m,1H)4.56-4.73(m,4H)4.37-4.52(m,2H)3.33(s,3H)3.04(dd,J＝15.71,5.81Hz,1H)2.69(d,J＝15.77Hz,1H)2.26(d,J＝1.59Hz,3H)1.18(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物086_E2：(4R*,9R)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS(M+1):420。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.24-7.27(m,1H),7.09-7.15(m,1H),6.87-6.98(m,1H),6.28-6.40(m,1H),5.07-5.23(m,1H),4.82-4.91(m,1H),4.37-4.79(m,6H),3.33(s,3H),2.99-3.11(m,1H),2.62-2.74(m,1H),2.26(d,J＝1.71Hz,3H),1.18(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物087_E1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS(M+1):431。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.78(dd,J＝5.46,2.82Hz,1H)7.58(ddd,J＝9.13,4.55,2.89Hz,1H)7.09-7.18(m,1H)6.62(s,1H)5.08-5.19(m,1H)4.84(d,J＝15.69Hz,1H)4.57-4.73(m,4H)4.38-4.54(m,2H)3.33(s,3H)3.04(dd,J＝15.94,5.90Hz,1H)2.71(d,J＝16.19Hz,1H)1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物087_E2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS[M+1]:431。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.74-7.81(m,1H),7.59(ddd,J＝2.82,4.49,9.13Hz,1H),7.14(t,J＝8.66Hz,1H),6.67(s,1H),5.13(五重峰，J＝6.40Hz,1H),4.87(d,J＝15.69Hz,1H),4.58-4.78(m,3H),4.39-4.57(m,3H),3.33(s,3H),3.04(dd,J＝5.77,15.94Hz,1H),2.69(d,J＝15.94Hz,1H),1.19(d,J＝7.03Hz,3H)。
化合物088_E1：(4S*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002141
LCMS:426。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.37(ddd,J＝2.8,6.4,12.0Hz,1H),7.24(td,J＝2.4,5.2Hz,1H),6.64(s,1H),5.14(m,1H),4.84(d,J＝16.0Hz,1H),4.54-4.59(m,2H),4.39-4.50(m,3H),3.32(s,3H),3.04(dd,J＝8.0,16.0Hz,1H),2.69(d,J＝16.0Hz,1H),1.18(d,J＝8.0Hz,3H)。
化合物088_E2：(4R*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002151
LCMS:426。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54-7.61(m,1H),7.17-7.24(m,1H),7.01-7.09(m,1H),6.60(s,1H),5.13(五重峰，J＝6.40Hz,1H),4.86(d,J＝15.69Hz,1H),4.57-4.75(m,3H),4.52-4.56(m,1H),4.37-4.48(m,2H),3.25-3.38(m,3H),2.96-3.10(m,1H),2.67(d,J＝15.94Hz,1H),1.17(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物089_E1：(4S*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:502/500[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.29(t,J＝7.89Hz,1H),6.90(dd,J＝7.95,10.64Hz,1H),6.52(br d,J＝2.81Hz,1H),4.97-5.18(m,1H),4.82(d,J＝15.77Hz,1H),4.35-4.65(m,4H),3.66-3.86(m,2H),3.30(s,3H),3.02(dd,J＝5.75,15.89Hz,1H),2.66(d,J＝15.89Hz,1H),1.18(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的对映体。
化合物089_E2：(4R*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:502/500[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.32(t,J＝7.89Hz,1H),6.94(dd,J＝7.95,10.64Hz,1H),6.57(br d,J＝2.69Hz,1H),5.10(br t,J＝6.42Hz,1H),4.91(d,J＝15.65Hz,1H),4.33-4.61(m,4H),3.70-3.97(m,2H),3.33(s,3H),3.05(dd,J＝5.81,15.83Hz,1H),2.70(d,J＝15.77Hz,1H),1.20(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物090_E1：(4S*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.19(t,J＝8.07Hz,1H),6.95(dd,J＝8.50,10.58Hz,1H),6.54(br s,1H),5.08(br t,J＝6.79Hz,1H),4.85(d,J＝15.65Hz,1H),4.41-4.67(m,4H),3.68-3.94(m,2H),3.34(s,2H),2.97-3.12(m,1H),2.70(d,J＝15.77Hz,1H),1.21(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物090_E2：(4R*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.09-8.35(m,1H),7.27(s,1H),6.88-7.07(m,1H),6.56(br s,1H),5.11(br d,J＝6.27Hz,1H),4.90(br d,J＝15.69Hz,1H),4.32-4.73(m,4H),3.69-4.00(m,2H),3.33(s,3H),3.05(br dd,J＝5.14,16.06Hz,1H),2.70(br d,J＝16.06Hz,1H),1.20(br d,J＝6.78Hz,3H)。
化合物091_E1：(4S*,9R)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.89(dt,J＝5.62,8.93Hz,1H),6.90-7.02(m,1H),6.55(br s,1H),5.09(br t,J＝6.60Hz,1H),4.89(d,J＝15.89Hz,1H),4.42-4.64(m,4H),3.69-3.93(m,2H),3.35(s,3H),3.07(dd,J＝6.05,15.71Hz,1H),2.71(d,J＝15.77Hz,1H),1.23(d,J＝6.97Hz,3H)。
化合物091_E2：(4R*,9R)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.89(dt,J＝5.56,8.89Hz,1H),6.90-7.03(m,1H),6.57(br s,1H),5.10(五重峰，J＝6.27Hz,1H),4.94(d,J＝15.77Hz,1H),4.37-4.63(m,4H),3.75-3.97(m,2H),3.35(s,3H),3.07(dd,J＝5.87,15.77Hz,1H),2.71(d,J＝15.77Hz,1H),1.22(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物092_E1：(4S*,9R)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002171
LCMS：502/500[M+1]1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.95(dt,J＝5.58,8.94Hz,1H),6.88-7.05(m,1H),6.54(br d,J＝2.64Hz,1H),5.09(br t,J＝6.53Hz,1H),4.89(d,J＝15.94Hz,1H),4.39-4.67(m,4H),3.72-3.94(m,2H),3.35(s,3H),3.06(dd,J＝6.02,15.81Hz,1H),2.71(d,J＝15.81Hz,1H),1.23(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物092_E2：(4R*,9R)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002181
LCMS:502/500[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.95(dt,J＝5.69,8.96Hz,1H),6.88-7.03(m,1H),6.60(br s,1H),5.02-5.24(m,1H),4.95(d,J＝15.65Hz,1H),4.34-4.63(m,4H),3.73-3.95(m,2H),3.07(dd,J＝5.81,15.96Hz,1H),2.71(d,J＝16.02Hz,1H),1.21(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物093_D1：(4S*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002182
步骤1：(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，1.50g，4.09mmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加TEA(2.07g，20.47mmol，2.84mL，5.00当量)和DMAP(50.01mg，409.38μmol，0.10当量)，然后添加MsCl(1.41g，12.27mmol，949.68μL，3.00当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示原料被消耗且产生一个主要斑点。将混合物与另一批次(1.3g规模)合并，并且用DCM(30mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯：30％～50％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(1.50g，2.70mmol，66.01％收率)。
步骤2：(9R)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(1.10g，2.47mmol，1.00当量)和Me2NH(2.01g，24.70mmol，2.26mL，10.00当量，HCl)的MeCN(60.00mL)溶液中添加K2CO3(4.44g，32.11mmol，13.00当量)。将混合物加热至80℃持续16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示原料被消耗，并且检测到一个主要斑点。将混合物用乙酸乙酯(100mL*2)和H2O(50mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯：80％～100％)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(800.00mg，1.97mmol，79.76％收率，96.7％纯度)和黄色油状标题化合物(200.00mg，72％纯度)。
经由SFC分离非对映混合物(1.0g)，得到两种非对映体(360mg)和(360mg)。SFC分离方法：仪器：SFC Thar_80；柱：IC-10um；流动相：A为CO2且B为MeOH(0.1％氨)；等度洗脱：B25％；流率：55mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm。
步骤3：(9R)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(360.00mg，914.91μmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加TFA(6.16g，54.03mmol，4.00mL，59.05当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得黄色油状标题化合物(380.00mg，粗制物，TFA)。
步骤4：(9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代- 5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向(9R)-4-[(二甲基氨基)甲基]-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(44.00mg，108.00μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(28.69mg，108.00μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(54.64mg，540.00μmol，74.85μL，5.00当量)。将混合物加热至20℃持续16小时。LCMS显示具有期望MS的一个主峰。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(38.00mg，81.65μmol，75.60％收率，99.9％纯度)。LCMS(M+1):465。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.21(s,1H),7.61(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.19-7.26(m,1H),7.03-7.12(m,1H),6.61(s,1H),5.08-5.19(m,1H),4.75-4.89(m,2H),4.62(dd,J＝5.90,14.68Hz,1H),4.50(d,J＝15.69Hz,1H),4.37(dd,J＝4.77,14.56Hz,1H),3.34(s,3H),3.05(br dd,J＝5.96,15.87Hz,2H),2.66-2.77(m,3H),2.48(s,6H)。
*纯但未知的立体化学
化合物094、095、096、097、098、099和100以与化合物093_D1类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780002201
Figure BDA0001982694780002211
Figure BDA0001982694780002221
化合物093_D2：(4R*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):465。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.13(s,1H),7.61(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.17-7.25(m,1H),7.03-7.12(m,1H),6.56(s,1H),5.16(五重峰，J＝6.68Hz,1H),4.87(d,J＝15.56Hz,1H),4.56-4.75(m,2H),4.47(d,J＝15.56Hz,1H),4.33(dd,J＝5.90,14.43Hz,1H),3.34(s,3H),3.05(dd,J＝5.90,15.81Hz,1H),2.58-2.81(m,4H),2.43(s,6H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物094_D1：(4S*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):509/511。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.22(brs,1H),7.73(dd,J＝2.64,6.02Hz,1H),7.30(dd,J＝2.70,4.20Hz,1H),7.27(d,J＝2.64Hz,1H),7.06(t,J＝8.53Hz,1H),6.59(br s,1H),5.14(五重峰，J＝6.49Hz,1H),4.71-4.90(m,2H),4.61(dd,J＝5.90,14.56Hz,1H),4.50(d,J＝15.56Hz,1H),4.37(dd,J＝4.83,14.62Hz,1H),3.34(s,3H),3.05(dd,J＝5.77,15.81Hz,1H),2.65-2.77(m,3H),2.47(s,6H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物094_D2：(4R*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS(M+1):509/511。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.12(s,1H),7.75(dd,J＝2.64,6.02Hz,1H),7.30(dd,J＝2.76,4.14Hz,1H),7.02-7.10(m,1H),6.60(s,1H),5.16(五重峰，J＝6.27Hz,1H),4.75-4.93(m,2H),4.62(dd,J＝5.90,14.56Hz,1H),4.45(d,J＝15.56Hz,1H),4.35(dd,J＝5.33,14.62Hz,1H),3.35(s,3H),3.05(dd,J＝5.71,15.87Hz,1H),2.67-2.83(m,3H),2.53(s,5H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物096_D1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):456。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.18(s,1H),7.80(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.62(ddd,J＝2.76,4.58,9.10Hz,1H),7.09-7.20(m,1H),6.76(s,1H),5.14(五重峰，J＝6.40Hz,1H),4.79-4.90(m,2H),4.63(dd,J＝5.90,14.68Hz,1H),4.51(d,J＝15.69Hz,1H),4.38(dd,J＝4.71,14.62Hz,1H),3.35(s,3H),3.05(dd,J＝5.90,15.94Hz,1H),2.66-2.82(m,3H),2.52(s,6H),1.21(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物096_D2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):456。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.10(s,1H),7.81(dd,J＝2.82,5.46Hz,1H),7.62(ddd,J＝2.76,4.58,9.10Hz,1H),7.15(t,J＝8.72Hz,1H),6.81(s,1H),5.16(五重峰，J＝6.40Hz,1H),4.78-4.96(m,2H),4.62(dd,J＝6.02,14.68Hz,1H),4.31-4.48(m,2H),3.35(s,3H),3.05(dd,J＝5.77,16.06Hz,1H),2.87(br d,J＝6.15Hz,2H),2.70(d,J＝16.06Hz,1H),2.58(s,6H),1.21(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物095_D1：(4S*,9R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):510/512。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.14-8.18(m,1H)8.07(d,J＝5.62Hz,1H)6.97(br s,1H)5.05(br t,J＝6.54Hz,1H)4.89(br d,J＝16.02Hz,1H)4.81(brd,J＝6.36Hz,1H)4.51-4.64(m,2H)4.38(dd,J＝14.61,4.34Hz,1H)3.33(s,3H)3.06(dd,J＝15.89,5.75Hz,1H)2.69-2.78(m,3H)2.49(s,6H)1.24(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物095_D2：(4R*,9R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):510/512。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.13-8.17(m,1H)8.06(d,J＝5.52Hz,1H)7.02(br d,J＝3.89Hz,1H)5.07(br t,J＝6.40Hz,1H)4.93(d,J＝15.81Hz,1H)4.48-4.68(m,3H)4.29(dd,J＝14.24,6.09Hz,1H)3.32(s,3H)3.05(dd,J＝15.94,5.90Hz,1H)2.68-2.76(m,2H)2.60(dd,J＝13.24,5.08Hz,1H)2.40(s,6H)1.23(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物097_D1：(4S*,9R)-4-((二甲基氨基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):445。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.23-7.27(m,1H)7.08-7.14(m,1H)6.92(t,J＝8.97Hz,1H)6.48(s,1H)5.12(m,J＝6.49Hz,1H)4.79-4.92(m,2H)4.61(dd,J＝14.68,6.02Hz,1H)4.48(d,J＝15.69Hz,1H)4.37(dd,J＝14.68,4.27Hz,1H)3.33(s,3H)3.03(dd,J＝15.87,5.96Hz,1H)2.83-2.91(m,1H)2.73-2.81(m,1H)2.67(d,J＝15.81Hz,1H)2.51-2.56(m,6H)2.25(d,J＝1.76Hz,3H)1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物097_D2：(4R*,9R)-4-((二甲基氨基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):445。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.23-7.27(m,1H)7.11(dt,J＝7.87,3.91Hz,1H)6.92(t,J＝8.97Hz,1H)6.56(s,1H)5.13(m,J＝6.37Hz,1H)4.86-4.98(m,2H)4.62(dd,J＝14.81,6.02Hz,1H)4.32-4.43(m,2H)3.33(s,3H)2.98-3.09(m,2H)2.92(dd,J＝13.55,8.41Hz,1H)2.62-2.70(m,7H)2.24(d,J＝1.76Hz,3H)1.17(d,J＝6.78Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物098_D1：(4S*,9R)-4-((二甲基氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):499。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.69(dd,J＝6.15,2.76Hz,1H)7.60(dt,J＝8.56,3.62Hz,1H)7.12(t,J＝9.41Hz,1H)6.82(s,1H)5.14(m,J＝6.46Hz,1H)4.86(d,J＝15.69Hz,1H)4.76(m,J＝5.65Hz,1H)4.60(dd,J＝14.68,5.90Hz,1H)4.49(d,J＝15.56Hz,1H)4.34(dd,J＝14.62,5.08Hz,1H)3.32(s,3H)3.04(dd,J＝15.94,5.77Hz,1H)2.65-2.71(m,3H)2.44(s,6H)1.18(d,J＝6.90Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物098_D2：(4R*,9R)-4-((二甲基氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):499。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.69(dd,J＝6.05,2.63Hz,1H)7.57-7.64(m,1H)7.12(t,J＝9.41Hz,1H)6.85(s,1H)5.15(m,J＝6.39Hz,1H)4.85-4.96(m,2H)4.61(dd,J＝14.67,5.99Hz,1H)4.32-4.46(m,2H)3.33(s,3H)3.03(dd,J＝15.96,5.81Hz,1H)2.83-2.96(m,2H)2.67(d,J＝15.89Hz,1H)2.60(s,6H)1.18(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物099_D1：(4S*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):483/485。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.16-8.22(m,1H),8.19(t,J＝7.72Hz,1H),8.16(s,1H),8.15-8.16(m,1H),6.95(dd,J＝8.41,10.54Hz,1H),6.54(d,J＝3.26Hz,1H),5.08(s,1H),4.85(d,J＝15.69Hz,1H),4.77(dd,J＝4.96,5.96Hz,1H),4.49-4.62(m,2H),4.36(dd,J＝4.64,14.56Hz,1H),3.33(s,3H),3.05(dd,J＝5.90,15.81Hz,1H),2.65-2.75(m,3H),2.45(s,6H),1.21(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物099_D2：(4R*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):483/485。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.20(t,J＝7.98Hz,1H),8.17-8.23(m,1H),8.16(s,1H),8.15-8.17(m,1H),6.97(dd,J＝8.41,10.54Hz,1H),6.57(br d,J＝3.14Hz,1H),5.11(s,1H),4.91(d,J＝15.69Hz,1H),4.78(s,1H),4.62(dd,J＝5.96,14.62Hz,1H),4.49(d,J＝15.56Hz,1H),4.33(dd,J＝5.71,14.62Hz,1H),3.34(s,3H),3.05(d,J＝5.77Hz,1H),2.63-2.86(m,3H),2.51(s,6H),1.22(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物100_D1：(4S*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):527/529。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.33(dd,J＝7.59,8.22Hz,1H),8.22(s,1H),7.29(s,1H),6.95(dd,J＝7.91,10.67Hz,1H),6.57(br d,J＝3.01Hz,1H),5.09(br t,J＝6.46Hz,1H),4.79-4.91(m,2H),4.49-4.65(m,2H),4.38(dd,J＝4.45,14.62Hz,1H),3.34(s,3H),3.02-3.10(m,1H),2.68-2.83(m,3H),2.50(s,6H),1.22(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物100_D2：(4R*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-((二甲基氨基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):527/529。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.34(dd,J＝7.53,8.28Hz,1H),8.17(s,1H),6.95(dd,J＝7.91,10.67Hz,1H),6.57(d,J＝3.01Hz,1H),5.11(s,1H),4.91(d,J＝15.69Hz,1H),4.74(s,1H),4.62(dd,J＝5.90,14.56Hz,1H),4.49(d,J＝15.69Hz,1H),4.33(dd,J＝5.96,14.49Hz,1H),3.34(s,3H),3.02-3.10(m,1H),2.62-2.83(m,3H),2.55(br s,7H),2.47(s,6H),1.22(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物101：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002271
步骤1：4-(乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在搅拌下，在N2下于-10℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，100.00mg，283.78μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加NaH(22.70mg，567.56μmol，22.70μL，60％纯度，2.00当量)持续0.5h。然后，将碘乙烷(66.39mg，425.67μmol，34.04μL，1.50当量)的DMF(1.00mL)溶液添加到混合物中。将混合物在15℃下搅拌1h。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1：5)显示原料被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。LCMS指示检测到期望产物的MS。将混合物用1mL的水猝灭并用EtOAc(10mL*3)萃取。将有机层合并，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:5)纯化残余物，得到灰白色油状标题化合物(105.00mg，粗制物)。LCMS[M+1]:381。
步骤2：4-(乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4- d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在搅拌下于15℃下向4-(乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(50.00mg，131.43μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，102.76当量)持续1h。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:5)示出反应物2被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。使混合物直接蒸发，以获得残余物。残余物无需纯化即直接用于下一步骤。获得黄色油状标题化合物(60.00mg，粗制物，TFA)。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于15℃下向4-(乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(60.00mg，152.15μmol，1.00当量，TFA)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(46.19mg，456.45μmol，63.27μL，3.00当量)，然后将所得的混合物在30℃下搅拌1h。TLC显示原料被完全消耗，并且LCMS指示检测到期望产物的MS。使混合物蒸发，以得到残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(28.00mg，61.78μmol，40.60％收率，99.7％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝2.8,6.4Hz,1H),7.20(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.55(s,1H),4.70(s,2H),4.51-4.64(m,2H),4.35-4.46(m,1H),3.79-3.94(m,2H),3.51-3.67(m,4H),3.31(s,3H),2.86(t,J＝5.6Hz,2H),1.24(t,J＝6.8Hz,3H)。LCMS[M+1]:452。
化合物102：4-(烯丙氧基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11- 四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002281
步骤1：4-(烯丙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在搅拌下，在N2下于-10℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，200.00mg，567.57μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加NaH(45.41mg，1.14mmol，22.70μL，60％纯度，2.00当量)持续0.5h。并然后将3-溴丙-1-烯(103.00mg，851.35μmol，1.50当量)添加到混合物中。将混合物在15℃下搅拌1h。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1：5)显示原料被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。LCMS指示检测到期望产物的MS。将混合物用1mL的水猝灭并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取。将有机层合并，并且经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，获得灰白色油状标题化合物(160.00mg，407.70μmol，71.83％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.96-5.84(m,1H),5.33-5.20(m,2H),4.63(brs,2H),4.60-4.48(m,2H),4.40-4.31(m,1H),4.04(d,J＝5.6Hz,2H),3.70(d,J＝5.2Hz,2H),3.64(dd,J＝6.0,12.0Hz,1H),3.57-3.50(m,1H),3.27(s,3H),2.81-2.72(m,2H),1.47(s,9H)。
LCMS[M+1]:393。
步骤2：4-(烯丙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2, 4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在搅拌下于15℃下向4-(烯丙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(30.00mg，76.44μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(770.00mg，6.75mmol，500.00μL，88.35当量)持续1h。TLC指示原料被完全消耗，并且形成一个主要斑点。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(50.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤3：4-(烯丙氧基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向4-(烯丙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(31.00mg，76.29μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(22.29mg，83.92μmol，1.10当量)在DCM(2.00mL)中的溶液中添加TEA(73.00mg，721.70μmol，100.00μL，9.46当量)持续1h。LCMS指示原料被完全消耗并且检测到期望产物的MS。使混合物蒸发，以得到残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(25.70mg，55.01μmol，72.11％收率，99.3％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.51-7.63(m,1H),7.16-7.25(m,1H),6.98-7.08(m,1H),6.61-6.79(m,1H),5.83-5.98(m,1H),5.19-5.34(m,2H),4.69(s,2H),4.48-4.64(m,2H),4.31-4.44(m,1H),4.00-4.11(m,2H),3.76-3.94(m,2H),3.52-3.69(m,2H),3.29(s,3H),2.85(t,J＝5.60Hz,2H)。LCMS[M+1]:464。
化合物103：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(丙氧基甲基)-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002301
步骤1：2-甲基-1-氧代-4-(丙氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2和搅拌下于-10℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，100.00mg，283.78μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加NaH(45.41mg，1.14mmol，22.70μL，60％纯度，2.00当量)持续0.5h。然后将1-溴丙烷(52.35mg，425.68μmol，38.78μL，1.50当量)添加到混合物中。将混合物在15℃下搅拌1h。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1：5)显示原料被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。LCMS指示检测到期望产物的MS。将混合物用1mL的水猝灭并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取。将有机层合并，并且经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，获得灰白色油状标题化合物(60.00mg，152.11μmol，53.60％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.62(brs,2H),4.46-4.58(m,2H),4.29-4.39(m,1H),3.69(d,J＝4.77Hz,2H),3.58-3.64(m,1H),3.47-3.55(m,1H),3.39-3.47(m,2H),3.26(s,3H),2.74(t,J＝5.14Hz,2H),1.55-1.64(m,2H),1.46(s,9H),0.86-0.97(m,3H)。LCMS[M+1]:395。
步骤2：2-甲基-4-(丙氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4- d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：在搅拌下于15℃下向2-甲基-1-氧代-4-(丙氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(60.00mg，152.11μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，88.79当量)持续1h。TLC指示原料被完全消耗，并且形成一个主要斑点。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(70.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.47-4.71(m,5H),3.57-3.73(m,4H),3.42-3.54(m,2H),3.33(s,3H),3.17(t,J＝6.0Hz,2H),1.59-1.69(m,2H),0.89-0.98(m,3H)。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(丙氧基甲基)-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向2-甲基-4-(丙氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(70.00mg，171.41μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(45.54mg，171.41μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(164.09mg，1.62mmol，224.78μL，9.46当量)持续1h。LCMS指示原料被完全消耗并且检测到期望产物的MS。使混合物蒸发，以得到残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(19.00mg，40.46μmol，23.60％收率，99.2％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.16-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.48(s,1H),4.70(s,2H),4.51-4.63(m,2H),4.37-4.43(m,1H),3.80-3.93(m,2H),3.62-3.68(m,1H),3.52-3.59(m,1H),3.44-3.51(m,2H),3.31(s,3H),2.86(t,J＝5.81Hz,2H),1.61-1.68(m,2H),0.95(t,J＝7.40Hz,3H)。LCMS[M+1]:466。
化合物104：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002321
步骤1：4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11–四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2和搅拌下于-10℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，500.00mg，1.42mmol，1.00当量)的DMF(5.00mL)溶液中添加NaH(113.51mg，2.84mmol，22.70μL，60％纯度，2.00当量)持续0.5h。然后将溴甲基环丙烷(287.33mg，2.13mmol，203.78μL，1.50当量)添加到混合物中。将混合物在0℃下搅拌1h。TLC显示原料被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。将混合物用1mL的水猝灭并用EtOAc(10mL*3)萃取。将有机层合并，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型TLC纯化残余物，得到黄色油状标题化合物(290.00mg，713.46μmol，50.24％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.62(brs,2H),4.46-4.59(m,2H),4.28-4.38(m,1H),3.66(dt,J＝5.50,11.07Hz,3H),3.53(dd,J＝5.26,10.15Hz,1H),3.33(dd,J＝2.32,6.85Hz,2H),3.27(s,3H),2.74(br s,2H),1.39-1.53(m,9H),0.99-1.10(m,1H),0.49-0.59(m,2H),0.15-0.24(m,2H)。
步骤2：4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11–六氢吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在搅拌下于15℃下向4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(80.00mg，196.82μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(3.99g，34.95mmol，2.59mL，177.60当量)持续1h。TLC显示原料被完全消耗。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(85.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11- 四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向4-(环丙基甲氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11–六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(83.00mg，197.44μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(57.70mg，217.18μmol，1.10当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(201.99mg，2.00mmol，276.70μL，10.11当量)持续1h。LCMS指示反应物被完全消耗并且检测到期望产物的MS。使混合物蒸发，以得到残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(48.60mg，100.67μmol，50.99％收率，99％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.14-7.23(m,1H),7.03(t,J＝8.80Hz,1H),6.71(s,1H),4.69(s,2H),4.51-4.63(m,2H),4.34-4.44(m,1H),3.75-3.91(m,2H),3.52-3.72(m,2H),3.33-3.39(m,2H),3.29(s,3H),2.84(t,J＝5.75Hz,2H),1.01-1.12(m,1H),0.52-0.61(m,2H),0.19-0.26(m,2H)。LCMS(M+1):478。
化合物105：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8, 9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002331
步骤1：4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2和搅拌下于-10℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，200.00mg，567.57μmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加NaH(68.11mg，1.70mmol，22.70μL，60％纯度，3.00当量)持续0.5h。然后将所得的2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(中间体19，5.68mmol，1.00mL，10.00当量)的DMF溶液添加到混合物中。将混合物在0℃下搅拌2h。TLC(PE:EtOAc＝1:5)显示第一反应物被完全消耗，并且形成一些新斑点。LCMS指示检测到期望的产物。将混合物倾注到10mL的冰水中，并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取。将有机层合并，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型TLC纯化残余物，得到黄色油状标题化合物(100.00mg，240.14μmol，42.31％收率)。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.69-6.04(m,1H),4.45-4.63(m,4H),4.27-4.40(m,1H),3.59-3.79(m,6H),3.24(s,3H),2.64-2.78(m,2H),1.45(s,9H)。
步骤3：4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在搅拌下于15℃下向4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(100.00mg，240.14μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，56.24当量)持续1h。TLC显示反应物被完全消耗，并且形成一个新斑点。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(110.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤4：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(103.00mg，239.35μmol，1.00当量，TFA)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(193.76mg，1.91mmol，265.42μL，8.00当量)持续1h。LCMS指示反应物被完全消耗并且检测到期望产物。使混合物蒸发，以得到残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(61.00mg，124.29μmol，51.93％收率，99.4％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54(dd,J＝2.70,6.59Hz,1H),7.19(ddd,J＝2.70,4.05,8.94Hz,1H),6.99-7.08(m,1H),6.73(s,1H),5.72-6.06(m,1H),4.69(s,2H),4.51-4.64(m,2H),4.33-4.43(m,1H),3.81-3.90(m,2H),3.66-3.80(m,4H),3.24-3.35(m,3H),2.77-2.91(m,2H)。LCMS(M+1):488。
化合物106：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-5, 8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002351
步骤1：2-甲基-1-氧代-4-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在-10℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，500.00mg，1.42mmol，1.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加NaH(170.27mg，4.26mmol，22.70μL，60％纯度，3.00当量)。将混合物在N2下搅拌0.5小时。然后将2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(中间体20，14.19mmol，1mL，10.00当量)的DMF溶液添加到混合物中。将混合物在0℃下搅拌5h。LCMS指示检测到期望产物的MS。将混合物倾注到10mL的冰水中，并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取。将有机层合并，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型TLC纯化残余物，获得黄色油状标题化合物(160.00mg，粗制物)。LCMS:435(M+1)。
步骤3：2-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：在搅拌下于15℃下向2-甲基-1-氧代-4-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(80.00mg，184.16μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，73.34当量)持续1h。TLC显示反应物被完全消耗，并且形成一个新斑点。使混合物直接蒸发，得到黄色油状标题化合物(85.00mg，粗制物，TFA)。
步骤4：化合物106的制备：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(2,2,2-三氟乙 氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向2-甲基-4-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(30.00mg，66.92μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(17.78mg，66.92μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(54.17mg，535.33μmol，74.21μL，8.00当量)持续1h。LCMS指示反应物被完全消耗并且检测到期望产物。真空蒸发混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(23.00mg，44.33μmol，33.12％收率，97.5％纯度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.58(dd,J＝2.51,6.65Hz,1H),7.23-7.36(m,1H),7.06-7.19(m,1H),4.65-4.75(m,1H),4.59(br dd,J＝5.71,14.49Hz,1H),4.37(dd,J＝6.90,14.56Hz,1H),4.02(q,J＝8.87Hz,1H),3.75-3.91(m,1H),3.28(s,1H),2.82(br t,J＝5.58Hz,1H)。LCMS:506(M+1)。
化合物107：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-1-氧代-2-(三氘甲基)-5,8,9,11- 四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002371
步骤1：4-(羟甲基)-2-(三氘甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2, 4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：向4-(羟甲基)-2-(甲基-d3)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体21，40.00mg，112.55μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，120.00当量)，然后将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗并且出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(41.57mg，112.56μmol，100.00％收率，TFA)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-1-氧代-2-(三氘甲基)-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：使4-(羟甲基)-2-(三氘甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(41.57mg，112.56μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(32.89mg，123.82μmol，1.10当量)、TEA(22.78mg，225.12μmol，31.21μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于10℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(5mL)中并搅拌5min。用DCM(3mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(21.00mg，48.21μmol，42.83％收率，98％纯度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.54-7.59(m,1H)7.16-7.22(m,1H)7.06(t,J＝8.78Hz,1H)6.51(s,1H)4.70(s,2H)4.51-4.62(m,2H)4.34-4.47(m,1H)3.74-3.93(m,4H)2.86(s,2H)1.87-2.07(m,1H)。LCMS:427[M+1]。
化合物108_D1：(4S*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002381
化合物108_D1以与化合物121类似的方式制备。
LC-MS:564/566[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.34(t,J＝7.89Hz,1H),6.94(dd,J＝7.95,10.64Hz,1H),6.53(br s,1H),5.68-6.13(m,1H),5.09(br t,J＝6.17Hz,1H),4.86(d,J＝15.77Hz,1H),4.35-4.71(m,4H),3.61-3.84(m,4H),3.31(s,3H),3.05(dd,J＝5.69,15.71Hz,1H),2.70(d,J＝15.89Hz,1H),1.21(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物108_D2：(4R*,9R)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002391
化合物108_D1以与化合物121类似的方式制备。
LCMS(M+1):564/566。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.31-8.37(m,1H),6.94(dd,J＝7.91,10.67Hz,1H),6.53(br s,1H),5.75-6.06(m,1H),5.10(br t,J＝6.09Hz,1H),4.88(d,J＝15.69Hz,1H),4.37-4.64(m,4H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.05(dd,J＝5.46,16.00Hz,1H),2.71(d,J＝15.81Hz,1H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物109：(4S*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780002392
步骤11：9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体23，50.00mg，131.43μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，102.76当量)。将反应混合物在25℃下搅拌30分钟。TLC指示原料被完全消耗，并且检测到一个具有较大极性的主要新斑点。使反应混合物在旋转蒸发仪上浓缩，以获得黄色油状标题化合物(50.00mg，粗制物，TFA)，该标题化合物直接用于下一步骤。
步骤2：(4S*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(50.00mg，126.79μmol，1.00当量，TFA)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TEA(51.32mg，507.16μmol，70.30μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(33.68mg，126.79μmol，1.00当量)，并将反应混合物在25℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。用DCM(50mL)和水(30mL*2)萃取混合物，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(46.00mg，99.76μmol，78.68％收率，98％纯度)，将该标题化合物通过SFC，之后以制备型HPLC进行分离，得到两种非对映体(109_D1：20mg和109_D2：20mg)。
SFC分离条件：仪器：SFC 80；柱：AD-5um；流动相：A为CO2且B为IPA(0.1％NH3H2O)；梯度：B 30％；流速：60mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.59(dd,J＝2.70,6.46Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.50(s,1H),4.81-4.89(m,2H),4.51-4.63(m,2H),4.40-4.48(m,2H),3.72-3.89(m,2H),3.33(s,3H),3.00(dd,J＝5.77,15.94Hz,1H),2.77(d,J＝16.19Hz,1H),1.95(br s,1H),1.40-1.54(m,2H),0.94(t,J＝7.40Hz,3H)。LCMS:452/454[M+1]
*纯但未知的立体化学
化合物109_D2：(4S*,9R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002411
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.60(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.18-7.23(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.58(s,1H),4.84-4.93(m,2H),4.52-4.60(m,2H),4.35-4.43(m,2H),3.75-3.92(m,2H),3.33(s,3H),3.00(dd,J＝6.02,16.06Hz,1H),2.77(d,J＝15.81Hz,1H),1.92-2.08(m,1H),1.42-1.55(m,2H),0.94(t,J＝7.34Hz,3H)。
LCMS:452/454[M+1]
*纯但未知的立体化学
化合物109_D3/D4通过109_D1/D2的类似过程制备。
SFC分离条件：仪器：SFC 80；柱：OJ-5um；流动相：A为CO2且B为EtOH(0.1％NH3H2O)；梯度：B 20％；流速：50mL/min；背压：100巴；柱温：35℃；波长：220nm。
109_D3：(4R*,9R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002421
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.60(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.18-7.23(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.52(s,1H),4.84-4.92(m,2H),4.52-4.59(m,2H),4.36-4.43(m,2H),3.86-3.92(m,1H),3.76-3.82(m,1H),3.33(s,3H),3.00(dd,J＝5.83,16.00Hz,1H),2.77(d,J＝15.94Hz,1H),1.83-2.04(m,1H),1.41-1.55(m,2H),0.94(t,J＝7.40Hz,3H)LCMS：452[M+1]。
*纯但未知的立体化学
109_D4：(4R*,9S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-9-乙基-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002422
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.59(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.20(ddd,J＝2.70,4.05,8.94Hz,1H),7.03-7.09(m,1H),6.55(br s,1H),4.84(br d,J＝15.69Hz,2H),4.51-4.62(m,2H),4.39-4.46(m,2H),3.81-3.88(m,1H),3.72-3.78(m,1H),3.33(s,3H),2.99(dd,J＝5.83,16.00Hz,1H),2.77(d,J＝15.94Hz,1H),1.87-2.19(m,1H),1.42-1.56(m,2H),0.94(t,J＝7.40Hz,3H)LCMS:452[M+1]。
*纯但未知的立体化学
化合物110_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲 酰胺：
Figure BDA0001982694780002431
步骤1：(9R)-N,2,9-三甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2, 4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺：向(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基氨基甲酰基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体25，165.00mg，419.38μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，32.21当量)，然后将混合物在30℃下搅拌0.5小时。TLC显示原料被完全消耗，期望的产物占主要部分。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(170.00mg，417.34μmol，99.51％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：(9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：使(9R)-N,2,9-三甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺(56.00mg，137.48μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氯-2,4-二氟苯基)氨基甲酸苯酯(46.80mg，164.97μmol，1.20当量)、TEA(27.82mg，274.95μmol，38.11μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并用DCM(5mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(40.00mg，80.35μmol，58.45％收率，97％纯度)。LCMS:483/484[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.84-7.93(m,1H),6.92-7.00(m,1H),6.49-6.57(m,1H),6.01-6.10(m,1H),4.95-5.05(m,2H),4.87-4.94(m,2H),4.64-4.71(m,1H),4.55(s,1H),3.35(s,3H),3.00-3.07(m,1H),2.85(d,J＝4.89Hz,3H),2.68-2.75(m,1H),1.22(d,J＝6.90Hz,2H),1.18-1.26(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物110_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲 酰胺：
Figure BDA0001982694780002441
化合物110_D2使用中间体25的相反对映体以与110_D1类似的方式制备。
LCMS:483/484[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.81-7.96(m,1H),6.96(br d,J＝1.10Hz,1H),6.49-6.61(m,1H),6.07-6.22(m,1H),5.02-5.11(m,1H),4.84-5.00(m,3H),4.75(s,1H),4.48(s,1H),3.35(s,3H),3.00-3.10(m,1H),2.89(d,J＝4.89Hz,3H),2.72(d,J＝15.89Hz,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物156、111和112以与化合物110类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002451
化合物111_D1：(4S*,9R)-N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲 酰胺：
LCMS:483/484[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.15-8.24(m,1H),6.91-7.01(m,1H),6.51-6.57(m,1H),6.00-6.08(m,1H),4.95-5.05(m,2H),4.85-4.94(m,2H),4.64-4.71(m,1H),4.48-4.55(m,1H),3.35(s,3H),2.99-3.08(m,1H),2.85(d,J＝4.89Hz,3H),2.68-2.76(m,1H),1.19-1.25(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物111_D2：(4R*,9R)-N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲 酰胺：
LCMS:483/484[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.16-8.22(m,1H),6.91-7.00(m,1H),6.53-6.59(m,1H),6.11-6.20(m,1H),5.02-5.12(m,1H),4.85-4.98(m,3H),4.69-4.76(m,1H),4.47(s,1H),3.35(s,3H),3.00-3.08(m,1H),2.89(d,J＝4.89Hz,3H),2.69-2.76(m,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物112_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰 胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.73-7.79(m,1H),7.57-7.64(m,1H),7.10-7.19(m,1H),6.67(s,1H),6.01-6.10(m,1H),4.81-5.12(m,4H),4.64-4.74(m,1H),4.51(d,J＝15.77Hz,1H),3.35(s,3H),2.98-3.08(m,1H),2.86(d,J＝4.89Hz,3H),2.66-2.75(m,1H),1.20(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物112_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰 胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.75-7.80(m,1H),7.59-7.66(m,1H),7.11-7.18(m,1H),6.80(s,1H),6.12-6.19(m,1H),5.08-5.16(m,1H),4.87-4.99(m,3H),4.68-4.75(m,1H),4.42(d,J＝15.69Hz,1H),3.35(s,3H),2.98-3.06(m,1H),2.89(d,J＝4.89Hz,3H),2.68-2.76(m,1H),1.15-1.20(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物113：4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002471
步骤1：[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基甲磺酸酯的制备：在N2下于0℃下，向N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物031,1.00g，2.36mmol，1.00当量)和TEA(1.19g，11.80mmol，1.64mL，5.00当量)在DCM(10.00mL)中的混合物中添加MsCl(1.08g，9.44mmol，730.64μL，4.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。TLC显示原料完全被消耗并且形成一个新斑点。将混合物倾注到冰水(20mL)中并搅拌5min。用DCM(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色固体状标题化合物(1.40g，粗制物)。LCMS:502/504[M+1]。
步骤2：4-(叠氮甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在N2下于0℃下，向[10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基甲磺酸酯(1.18g，2.35mmol，1.00当量)的DMF(15.00mL)溶液中添加NaN3(458.51mg，7.05mmol，247.84μL，3.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于50℃下搅拌16小时。LCMS显示原料/期望产物＝1/1。然后在N2下于0℃下，将NaN3(458.32mg，7.05mmol，3.00当量)添加到混合物中，将混合物在70℃下再搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释并用盐水(20mL，*3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(1.40g，粗制物)。LCMS:449/451[M+1]
步骤3：4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向4-(叠氮甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(1.06g，2.36mmol，1.00当量)在THF(12.00mL)和H2O(2.00mL)中的溶液中添加PPh3(1.24g，4.72mmol，2.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(30mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(15mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(DCM/MeOH＝100/1至20:1)纯化残余物，以获得黄色固体状标题化合物(702.00mg，1.49mmol，63.31％收率，90％纯度)，其中75mg通过制备型HPLC进一步纯化，得到25mg的纯期望产物。LCMS:423/425[M+1]；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.55-7.63(m,1H),7.26-7.34(m,1H),7.14(s,1H),4.72(br d,J＝2.13Hz,4H),4.38-4.47(m,1H),3.73-3.92(m,2H),3.33(s,3H),2.96-3.18(m,2H),2.80-2.87(m,2H)。
化合物114_E1：(S*)-4-(氨基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8, 9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002481
步骤1：4-(叠氮甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d] [1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向4-(叠氮甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体28，120.00mg，317.97μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，42.48当量)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(124.00mg，316.89μmol，99.66％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：4-(叠氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺的制备：使4-(叠氮甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(124.00mg，316.89μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(81.20mg，316.89μmol，1.00当量)、TEA(96.20mg，
950.67μmol，131.78μL，3.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下在25℃下搅拌16小时。TLC显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:2)纯化残余物，以获得黄色固体状标题化合物(115.00mg，
235.55μmol，74.33％收率，90％纯度)。LCMS:440[M+1]。
步骤3：(S*)-4-(氨基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向4-(叠氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11–四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(120.00mg，273.10μmol，1.00当量)在THF(6.00mL)和H2O(1.00mL)中的溶液中添加PPh3(143.26mg，546.20μmol，2.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(30mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(15mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(DCM/MeOH＝100/1至20:1)，之后以制备型HPLC(HCl)纯化残余物，以获得黄色固体状标题化合物(42.70mg，101.53μmol，37.18％收率，98.3％纯度)。
LCMS:414[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.76-7.83(m,1H),7.66-7.72(m,1H),7.27(s,1H),4.67-4.82(m,4H),4.38-4.47(m,1H),3.75-3.93(m,2H),3.40-3.67(m,1H),3.33(s,3H),3.05-3.19(m,1H),2.79-2.89(m,2H)
*纯但未知的立体化学
化合物115_D1：(4S*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002501
步骤1：(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体29，120.00mg，306.57μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，44.06当量)，然后将混合物在16℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(124.00mg，305.92μmol，99.79％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：(9R)-4-(叠氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：使(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(124.00mg，305.92μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(78.39mg，305.92μmol，1.00当量)、TEA(92.87mg，917.77μmol，127.22μL，3.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下在25℃下搅拌16小时。TLC显示原料被完全消耗，期望的产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:2)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(114.00mg，236.33μmol，77.25％收率，94％纯度)。LCMS:454[M+1]
步骤3：(4S*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向(9R)-4-(叠氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(114.00mg，251.42μmol，1.00当量)在THF(6.00mL)和H2O(1.00mL)中的溶液中添加PPh3(131.89mg，502.83μmol，2.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于15℃下搅拌16小时。TLC显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(30mL)中并搅拌5min。用乙酸乙酯(15mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(DCM/MeOH＝100/1至20:1)，之后以制备型HPLC(HCl)纯化残余物，以获得黄色固体状标题化合物(13.00mg，27.52μmol，10.94％收率，90.47％纯度)。LCMS:428[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(br s,1H),8.23(br s,2H),7.91-7.98(m,1H),7.75-7.84(m,1H),7.42(t,J＝9.10Hz,1H),4.98-5.11(m,1H),4.72(br s,3H),4.31-4.43(m,1H),4.11-4.21(m,1H),3.28(s,3H),3.03-3.19(m,2H),2.88-2.95(m,1H),2.61(br d,J＝15.81Hz,1H),1.10(d,J＝6.78Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物115_D2：(4R*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002521
化合物115_D2使用中间体29的其它对映体进行制备。
LCMS:428[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(br s,1H),8.23(br s,2H),7.91-7.98(m,1H),7.75-7.84(m,1H),7.42(t,J＝9.10Hz,1H),4.98-5.11(m,1H),4.72(brs,3H),4.31-4.43(m,1H),4.11-4.21(m,1H),3.28(s,3H),3.03-3.19(m,2H),2.88-2.95(m,1H),2.61(br d,J＝15.81Hz,1H),1.10(d,J＝6.78Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物116和117以与化合物115类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002522
Figure BDA0001982694780002531
化合物116_D1：(4S*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS:471[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.77(dd,J＝2.45,6.21Hz,1H),7.54-7.67(m,1H),7.54-7.69(m,1H),7.24(t,J＝9.66Hz,1H),5.03(d,J＝17.07Hz,1H),4.93(brd,J＝5.77Hz,1H),4.77-4.81(m,1H),4.72(br dd,J＝6.09,14.87Hz,1H),4.31-4.50(m,2H),3.32-3.37(m,4H),2.97-3.16(m,2H),2.69(br d,J＝15.69Hz,1H),1.23(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物116_D2：(4R*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS:471[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.78(dd,J＝2.75,6.17Hz,1H),7.61-7.68(m,1H),7.20-7.28(m,1H),5.09(s,1H),4.92-4.96(m,1H),4.75-4.81(m,1H),4.66-4.74(m,1H),4.39-4.47(m,1H),4.29-4.37(m,1H),3.34(s,4H),3.13-3.21(m,1H),2.99-3.08(m,1H),2.63-2.72(m,1H),1.20(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物117_D1：(4S*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:481/483[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.72(dd,J＝2.64,6.27Hz,1H),7.33(td,J＝3.40,8.88Hz,1H),7.12(t,J＝8.72Hz,1H),5.01(brd,J＝16.81Hz,1H),4.90-4.92(m,1H),4.63-4.77(m,1H),4.29-4.50(m,2H),3.32-3.39(m,1H),3.32-3.38(m,3H),2.95-3.13(m,2H),2.68(d,J＝16.06Hz,1H),1.22(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物117_D2：(4R*,9R)-4-(氨基甲基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:481/483[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.68-7.76(m,1H),7.30-7.38(m,1H),7.12(t,J＝8.68Hz,1H),5.09(d,J＝16.87Hz,1H),4.90-4.95(m,1H),4.75-4.82(m,1H),4.66-4.75(m,1H),4.43(dd,J＝4.89,14.79Hz,1H),4.31(d,J＝16.87Hz,1H),3.34(s,4H),3.12-3.23(m,1H),2.98-3.08(m,1H),2.67(br d,J＝15.89Hz,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物118：N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002541
步骤1：2-甲基-4-(甲基氨基甲酰基)-1-氧代-5,7,7a,8,9,11,11a,11b-八氢-4H- 吡啶并[1,2]吡唑并[3,5-c][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：将10-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(中间体26，500.00mg，1.35mmol，1.00当量)、T3P(1.72g，2.70mmol，1.61mL，50％纯度，2.00当量)和Et3N(1.37g，13.50mmol，1.87mL，10.00当量)在THF(8.00mL)中的混合物中添加至甲胺盐酸盐(455.72mg，6.75mmol，5.00当量)。将所得的混合物在密封管中在N2下于70℃下搅拌16小时。将混合物用HCl(1M)调节至pH＝6，然后用H2O(20mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL*2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝1:3)纯化残余物，得到黄色固体状标题化合物(235.00mg，612.87μmol，45.40％收率)。LCMS:380[M+1]
步骤2：N,2-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺的制备：在0℃下，向2-甲基-4-(甲基氨基甲酰基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(259.00mg，682.64μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(4.43g，38.87mmol，2.88mL，56.94当量)。将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物减压浓缩，得到黄色油状标题化合物(268.00mg，681.38μmol，99.82％收率，TFA)，该粗产物直接用于下一步骤。LCMS:280[M+1]。
步骤3：N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：向N,2-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺(60.00mg，152.55μmol，1.00当量，TFA)的DCM(3.00mL)溶液中添加N-(3-氯-2,4-二氟苯基)氨基甲酸苯酯(64.91mg，228.82μmol，1.50当量)和Et3N(77.18mg，762.74μmol，105.73μL，5.00当量)。在25℃下搅拌混合物16小时。将混合物用FA调节至pH＝6，过滤并减压浓缩。通过制备型HPLC(FA)，之后以制备型TLC(DCM/MeOH＝10/1)和制备型HPLC(FA)纯化残余物，获得白色固体(20.00mg，42.23μmol，27.68％收率，99％纯度)。LCMS[M+1]:469/471。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.88(dt,J＝5.52,8.97Hz,1H),6.96(ddd,J＝2.13,8.41,9.29Hz,1H),6.57(brd,J＝2.76Hz,1H),6.08(br d,J＝5.02Hz,1H),4.86-5.00(m,2H),4.61-4.82(m,3H),3.93(td,J＝5.49,13.74Hz,1H),3.72-3.82(m,1H),3.34(s,3H),2.80-2.94(m,5H)。
化合物195、119和120以与化合物118类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002561
化合物119：N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS[M+1]:469/471。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.18(t,J＝8.03Hz,1H),6.95(dd,J＝8.41,10.54Hz,1H),6.57(br d,J＝3.14Hz,1H),6.07(br d,J＝4.39Hz,1H),4.87-4.99(m,2H),4.64-4.77(m,3H),3.92(td,J＝5.52,13.68Hz,1H),3.70-3.81(m,1H),3.34(s,3H),2.81-2.93(m,5H)。
化合物120：N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS[M+1]:442。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.75(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.61(ddd,J＝2.82,4.58,9.16Hz,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.77(s,1H),6.10(br d,J＝4.89Hz,1H),4.85-5.00(m,2H),4.62-4.76(m,3H),3.77-3.93(m,2H),3.34(s,3H),2.81-2.93(m,5H)。
化合物121_D1：(4S*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002571
步骤1：(9R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六 氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯：在-40℃下，向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，700mg，1.91mmol，1.00当量，经SFC分离的单一非对映体)的DMF(5.00mL)溶液中添加NaH(152.80mg，3.82mmol，60％纯度，2.00当量)。将混合物在-40℃下搅拌30min。在-40℃下滴加2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(1.23g，5.73mmol，3.00当量)溶液。将混合物在-20℃下搅拌0.5小时。TLC(PE:乙酸乙酯＝1:1)显示原料几乎被消耗完，并且形成一个新斑点。将混合物添加到冰水(50mL)中并用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。将合并的有机层用H2O(50mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(PE:乙酸乙酯：30％～50％)纯化残余物，得到无色油状标题化合物(580.00mg，1.35mmol，70.55％收率)。
步骤2：(9R)-2-(2,2-二氟乙基)-4-(羟甲基)-9-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶 并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮的制备：向(9R)-2-(2,2-二氟乙基)-4-(羟甲基)-9-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(440.00mg，1.06mmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TFA(8.06g，70.65mmol，5.23mL，66.86当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC(PE:乙酸乙酯＝1:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得褐色油状标题化合物(460.00mg，粗制物，TFA)。
步骤3：(4S*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基- 1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：在20℃下，向(9R)-4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(55.00mg，123.78μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(34.53mg，129.97μmol，1.05当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(75.15mg，742.68μmol，102.95μL，6.00当量)。混合物在20℃下搅拌16h。LCMS指示检测到期望产物。将混合物直接真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(42.30mg，82.17μmol，66.39％收率，97.5％纯度)。LCMS:502[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.59(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.49(s,1H),6.45-6.46(m,1H),5.73-6.07(m,1H),5.08-5.18(m,1H),5.08-5.18(m,1H),4.82-4.83(m,1H),4.35-4.70(m,4H),3.65-3.81(m,4H),3.31(s,3H),3.01-3.04(m,1H),2.66-2.70(m,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物108、122、123、124、125、126和127以与化合物121类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780002581
Figure BDA0001982694780002591
Figure BDA0001982694780002601
化合物121_D2：(4R*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):502。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.60(dd,J＝2.70,6.59Hz,1H),7.20(ddd,J＝2.76,4.05,8.88Hz,1H),7.03-7.09(m,1H),6.47(s,1H),5.75-6.06(m,1H),5.10-5.19(m,1H),4.84(d,J＝15.43Hz,1H),4.54-4.66(m,2H),4.37-4.50(m,2H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.96,15.87Hz,1H),2.69(d,J＝15.94Hz,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物122_D1：(4S*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:546/548[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.72(dd,J＝2.57,6.09Hz,1H),7.24-7.29(m,2H),7.04(t,J＝8.47Hz,1H),6.51(br s,1H),5.73-6.06(m,1H),5.13(m,1H),4.83(m,1H),4.35-4.68(m,4H),3.64-3.81(m,4H),3.50(s,1H),3.31(s,3H),3.04(m,1H),2.68(m,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物122_D2：(4R*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):546/548。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.73(dd,J＝2.64,6.02Hz,1H),7.23-7.27(m,1H),7.05(t,J＝8.47Hz,1H),6.45(s,1H),5.74-6.06(m,1H),5.14(br t,J＝6.59Hz,1H),4.84(d,J＝15.56Hz,1H),4.54-4.65(m,2H),4.37-4.50(m,2H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝6.09,16.12Hz,1H),2.69(d,J＝16.31Hz,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物123_D1：(4S*,9R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:547/549[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.02-8.21(m,2H),6.99(br s,1H),5.73-6.07(m,1H),4.85-5.10(m,2H),4.39-4.66(m,4H),3.64-3.81(m,4H),3.31(s,3H),3.00-3.13(m,1H),2.72(br d,J＝15.94Hz,1H),1.23(d,J＝6.78Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物123_D2：(4R*,9R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):547/549。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.14-8.18(m,1H),8.07(d,J＝5.52Hz,1H),6.95(br d,J＝3.89Hz,1H),5.74-6.07(m,1H),5.07(m,1H),4.92(m,1H),4.35-4.66(m,4H),3.69-3.87(m,4H),3.31(s,3H),3.06(m,1H),2.73(d,J＝15.94Hz,1H),1.23(d,J＝6.90Hz,3H。
*纯但未知的立体化学
化合物124_D1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:493[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.77(dd,J＝2.76,5.52Hz,1H),7.59(ddd,J＝2.82,4.55,9.07Hz,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.71(s,1H),5.71-6.08(m,1H),5.06-5.19(m,1H),4.85(d,J＝15.69Hz,1H),4.36-4.69(m,4H),3.62-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.77,15.94Hz,1H),2.69(d,J＝15.81Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物124_D2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):493。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.79(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.59(m,1H),7.11-7.18(m,1H),6.64(s,1H),5.74-6.06(m,1H),5.15(br t,J＝6.21Hz,1H),4.86(d,J＝15.43Hz,1H),4.37-4.66(m,4H),3.70-3.86(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.83,15.75Hz,1H),2.70(d,J＝16.31Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物125_D1：(4S*,9R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:482[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.25(br d,J＝2.51Hz,1H),7.08-7.14(m,1H),6.93(t,J＝8.97Hz,1H),6.38(s,1H),5.74-6.07(m,1H),5.14(五重峰，J＝6.40Hz,1H),4.83(d,J＝15.69Hz,1H),4.38-4.68(m,4H),3.63-3.84(m,4H),3.50(s,1H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.83,15.87Hz,1H),2.67(d,J＝15.81Hz,1H),2.26(d,J＝1.63Hz,3H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物125_D2：(4R*,9R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-2, 9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):482。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.26(d,J＝2.89Hz,1H),7.11(td,J＝3.87,8.19Hz,1H),6.89-6.96(m,1H),6.37(s,1H),5.74-6.06(m,1H),5.15(m,J＝6.34Hz,1H),4.85(d,J＝15.56Hz,1H),4.54-4.66(m,2H),4.36-4.50(m,2H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.84,16.00Hz,1H),2.68(d,J＝16.06Hz,1H),2.26(d,J＝1.76Hz,3H),1.17(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物126_D1：(4S*,9R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:536[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.68(dd,J＝2.70,6.09Hz,1H),7.56-7.62(m,1H),7.13(t,J＝9.41Hz,1H),6.61(s,1H),5.72-6.11(m,1H),5.15(五重峰，J＝6.43Hz,1H),4.85(d,J＝15.56Hz,1H),4.36-4.70(m,4H),3.65-3.83(m,4H),3.31(s,3H),3.05(dd,J＝5.84,15.87Hz,1H),2.69(d,J＝15.81Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物126_D2：(4R*,9R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):536。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.69(dd,J＝2.82,6.21Hz,1H),7.56-7.62(m,1H),7.14(t,J＝9.29Hz,1H),6.59(s,1H),5.75-6.06(m,1H),5.16(m,J＝6.78Hz,1H),4.87(d,J＝15.56Hz,1H),4.54-4.66(m,2H),4.38-4.52(m,2H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.65,15.81Hz,1H),2.70(d,J＝16.19Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物127_D1：(4S*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LC-MS:520[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.19(t,J＝8.09Hz,1H),6.95(dd,J＝8.47,10.60Hz,1H),6.55(br d,J＝2.76Hz,1H),5.64-6.18(m,1H),4.79-5.25(m,2H),4.34-4.67(m,4H),3.59-3.86(m,4H),3.26-3.41(m,3H),3.05(dd,J＝5.77,15.81Hz,1H),2.70(d,J＝15.81Hz,1H),1.21(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物127_D2：(4R*,9R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS(M+1):520/522。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.20(t,J＝8.09Hz,1H),6.95(dd,J＝8.41,10.54Hz,1H),6.53(br d,J＝2.76Hz,1H),5.74-6.06(m,1H),5.06-5.14(m,1H),4.88(d,J＝15.69Hz,1H),4.37-4.63(m,4H),3.71-3.85(m,4H),3.31(s,3H),3.05(dd,J＝5.83,16.12Hz,1H),2.71(d,J＝15.94Hz,1H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物128：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-((三氟甲氧基)甲基)-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002641
步骤1 2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在充满氮气的手套箱中，向反应瓶中相继地添加AgOTf(192.50mg，749.19μmol，3.00当量)、Select
Figure BDA0001982694780002642
(301.60mg，851.36μmol，1.50当量)、KF(131.90mg，2.27mmol，53.19μL，4.00当量)、4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，200.00mg，567.57μmol，1.00当量)。然后，在N2气氛下相继地添加EtOAc(6.00mL)、2-氟吡啶(165.32mg，1.70mmol，146.30μL，3.00当量)和TMSCF3(242.12mg，1.70mmol，3.00当量)。将反应混合物在20℃下搅拌16h。LCMS上显示几个峰，并且剩余23％的原料且检测到13％的期望产物。将混合物用EtOAc(20mL*2)和H2O(20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(30.00mg，71.36μmol，12.57％收率)。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲氧基甲基)-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲氧基甲基)-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(45.00mg，107.05μmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TFA(5.00mL)。将混合物在20℃下搅拌5小时。TLC(PE:EtOAc＝0:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，得到褐色油状2-甲基-4-(三氟甲氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(48.00mg，粗制物，TFA)。向2-甲基-4-(三氟甲氧基甲基)-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(48.00mg，110.53μmol，1.00当量，TFA)的DCM(3.00mL)溶液中添加TEA(55.92mg，552.63μmol，76.60μL，5.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(35.24mg，132.64μmol，1.20当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。将混合物真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC(FA)纯化，通过制备型TLC(PE:EtOAc＝1:1)再纯化，通过制备型HPLC(碱)进一步纯化，得到白色固体状标题化合物(28.00mg，56.31μmol，50.94％收率，98.9％纯度)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.59(dd,J＝2.69,6.48Hz,1H),7.18-7.25(m,1H),7.03-7.11(m,1H),6.61(s,1H),4.68-4.78(m,3H),4.59-4.67(m,1H),4.39(dd,J＝6.60,14.43Hz,1H),4.14-4.22(m,1H),4.05-4.13(m,1H),3.80-3.94(m,2H),3.32(s,3H),2.88(t,J＝5.75Hz,2H)
LCMS:492[M+1]。
化合物129：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(乙基磺酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002661
化合物129以与化合物208类似的方式制备。
LCMS:527[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),7.72(dd,J＝2.57,6.85Hz,1H),7.48(br s,1H),7.41(ddd,J＝2.69,4.28,9.05Hz,1H),7.24-7.33(m,1H),4.58-4.68(m,3H),4.51(五重峰，J＝6.39Hz,1H),4.29(dd,J＝7.40,14.37Hz,1H),3.66-3.82(m,2H),3.24(s,5H),2.72(br t,J＝5.38Hz,2H),2.60-2.66(m,1H),0.88-1.00(m,4H).
化合物130：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(((2,2,2-三氟乙基)磺酰胺 基)甲基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002662
化合物130以与化合物208类似的方式制备。
LCMS:569[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),7.72(dd,J＝2.51,6.78Hz,1H),7.41(td,J＝4.36,7.22Hz,1H),7.25-7.31(m,1H),4.58-4.65(m,3H),4.44-4.57(m,3H),4.29(dd,J＝6.96,14.24Hz,1H),3.70-3.79(m,2H),3.28-3.30(m,2H),3.24(s,3H),2.72(br t,J＝5.58Hz,2H),2.70-2.76(m,1H)
化合物131：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
Figure BDA0001982694780002671
步骤1：2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯：向10-(叔丁基)4-甲基2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二羧酸酯(中间体22，1.00g，2.63mmol，1.00当量)的DCM(40.00mL)溶液中添加TFA(135.08mmol，10.00mL，51.36当量)。将混合物在10℃下搅拌1小时。TLC(PE:乙酸乙酯＝0:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，获得褐色油状标题化合物(1.10g，粗制物，TFA)。
步骤2：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯：向2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯(1.10g，2.79mmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(741.15mg，2.79mmol，1.00当量)在DCM(20.00mL)中的混合物中添加TEA(1.41g，13.95mmol，1.93mL，5.00当量)。将混合物加热至20℃持续16小时。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰，并且TLC(PE:乙酸乙酯＝0:1)显示形成两个斑点。将混合物用H2O(30mL)稀释。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速色谱(PE:乙酸乙酯：50％～80％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(1.00g，2.21mmol，79.33％收率)。
步骤3：10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸甲酯(900.00mg，1.99mmol，1.00当量)的DCE(10.00mL)溶液中添加羟基(三甲基)锡烷(1.44g，7.96mmol，4.00当量)。将混合物在50℃下搅拌16小时。TLC(PE:乙酸乙酯＝0:1)显示原料被消耗。将混合物用DCM(100mL)稀释并用KF水溶液(500mg，5mL)猝灭。将混合物用Na2SO4干燥，并且过滤。真空浓缩滤液，得到白色固体状标题化合物(700.00mg，1.60mmol，80.35％收率)。
步骤4：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-羰基)-2-甲基-1-氧代- 5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(80.00mg，182.73μmol，1.00当量)的DMF(3.00mL)溶液中添加3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(94.68mg，730.92μmol，4.00当量)，然后添加DIEA(296.00mg，2.29mmol，400.00μL，12.53当量)、PyBOP(142.64mg，274.09μmol，1.50当量)和HOBt(24.69mg，182.73μmol，1.00当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。将混合物用0.5MHCl(30mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL*2)萃取，然后用NaHCO3(30mL)洗涤。将合并的有机物经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过制备型TLC(DCM:MeOH＝15:1)，之后以制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(15.50mg，30.04μmol，16.44％收率，99.4％纯度)。LCMS[M+1]:513。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54-7.59(m,1H),7.17-7.23(m,1H),7.06(s,1H),6.50-6.54(m,1H),4.86-5.02(m,2H),4.62-4.77(m,3H),4.33-4.61(m,4H),3.85(s,2H),3.31(s,3H),2.88(br s,2H)。
化合物132、134、135和136以与化合物131类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002691
化合物132：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(3,3-二氟吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS[M+1]:527。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.55-7.59(m,1H),7.19(br s,1H),7.03-7.09(m,1H),6.55(s,1H),4.96-5.06(m,1H),4.88-4.95(m,1H),4.72-4.84(m,2H),4.60-4.69(m,2H),3.97-4.17(m,1H),3.74-3.96(m,5H),3.24(s,3H),2.87(br d,J＝5.6Hz,2H),2.36-2.61(m,2H)。
化合物133：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-N4-(2,2,2-三氟乙基)- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二 甲酰胺
Figure BDA0001982694780002692
在N2下于0℃下，向10-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(80.00mg，182.73μmol，1.00当量)、2,2,2-三氟-N-甲基-乙胺(27.33mg，182.73μmol，1.00当量，HCl)和3-甲基吡啶(51.05mg，548.18μmol，53.18μL3.00当量)在MeCN(5.00mL)中的混合物中滴加MsCl(29.30mg，255.82μmol，19.80μL，1.40当量)，然后将混合物在N2气氛下于20℃下搅拌0.5小时。LCMS显示原料被完全消耗，并且形成主要期望产物。将混合物倾注到水(10mL)中并用乙酸乙酯(5mL)萃取。将有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(42.00mg，78.03μmol，42.70％收率，99％纯度)。LCMS[M+1]:533。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.55-7.60(m,1H),7.16-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.51(s,1H),4.94-5.10(m,2H),4.75(s,1H),4.49-4.70(m,3H),3.86(s,3H),3.16-3.37(m,6H),2.88(d,J＝6.02Hz,2H)。
化合物134：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲 酰胺：
LCMS[M+1]:515。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54-7.61(m,1H),7.16-7.23(m,1H),7.06(s,1H),6.55(s,1H),6.04(s,1H),5.03(s,2H),4.74(s,1H),4.65(s,2H),3.93-4.15(m,1H),3.86(br t,J＝5.7Hz,2H),3.51-3.71(m,1H),3.15-3.34(m,6H),2.88(br d,J＝5.7Hz,2H)。
化合物135：N10-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-N4-(2,2,2-三氟乙基)-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰 胺：
LCMS[M+1]:519。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.54-7.58(m,1H),7.17-7.23(m,1H),7.07(s,1H),6.47-6.52(m,1H),6.34-6.41(m,1H),4.95(s,2H),4.72(d,J＝2.3Hz,3H),3.78-4.04(m,4H),3.35(s,3H),2.86(t,J＝5.7Hz,2H)。
化合物136：N10-(3-氯-4-氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS[M+1]:501。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.57(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.18-7.25(m,1H),7.04-7.11(m,1H),6.57(s,1H),6.37(br t,J＝6.17Hz,1H),5.68-6.02(m,1H),4.88-4.98(m,2H),4.67-4.77(m,3H),3.85(t,J＝5.81Hz,2H),3.58-3.78(m,2H),3.36(s,3H),2.87(t,J＝5.75Hz,2H),2.19(s,1H)。
化合物138_E1：(S*)-N-(3-氯-2,6-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002711
步骤1：4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-1-酮：在0℃下，向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，320.00mg，908.08μmol，1.00当量，经SFC分离的单一对映体)在DCM(10.00mL)中的混合物中滴加TFA(7.70g，67.53mmol，5.00mL，74.37当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。TLC和LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(332.60mg，908.02μmol，99.99％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：N-(3-氯-2,6-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：使4-(羟甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(40.00mg，109.20μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氯-2,6-二氟苯基)氨基甲酸苯酯(34.07mg，120.12μmol，1.10当量)、TEA(22.10mg，218.40μmol，30.27μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并用DCM(5mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(25.00mg，56.58μmol，51.82％收率，100％纯度)。
化合物137、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150和151以与化合物138类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780002721
Figure BDA0001982694780002731
化合物137_E1：(S*)-N-(3-氯-2,4,5-三氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:460/462[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.95-8.05(m,1H),6.64-6.70(m,1H),4.74(d,J＝3.01Hz,2H),4.50-4.63(m,2H),4.37-4.48(m,1H),3.72-3.94(m,4H),3.33(s,3H),2.88(s,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物138_E1：(S*)-N-(3-氯-2,6-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:442/444[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.17-7.25(m,1H),6.91(br d,J＝1.83Hz,1H),6.08-6.16(m,1H),4.79(s,2H),4.56(br d,J＝12.59Hz,2H),4.43(s,1H),3.73-3.97(m,4H),3.32(s,3H),2.88(t,J＝5.69Hz,1H),2.84-2.92(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物139_E1：(S*)-N-(5-氯-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:424/426[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.14-8.19(m,1H),6.90-7.04(m,2H),6.68-6.73(m,1H),4.74(s,2H),4.55(br d,J＝13.18Hz,2H),4.37-4.47(m,1H),3.71-3.95(m,4H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.77Hz,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物140_E1：(S*)-N-(5-溴-2,3-二氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:486/488[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.10(br s,1H),6.97-7.05(m,1H),6.69-6.76(m,1H),4.75(s,2H),4.55(br d,J＝13.45Hz,2H),4.43(s,1H),3.72-3.95(m,4H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.75Hz,2H),1.53-1.64(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物141_E1：(S*)-N-(5-溴-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:468/470[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.29-8.34(m,1H),7.06-7.13(m,1H),6.91-6.98(m,1H),6.66-6.72(m,1H),4.74(s,2H),4.51-4.62(m,2H),4.37-4.46(m,1H),3.72-3.96(m,4H),3.33(s,3H),2.88(s,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物142_E1：(S*)-N-(2,4-二氟-3-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:422[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.69-7.79(m,1H),6.77-6.86(m,1H),6.48-6.55(m,1H),4.74(s,2H),4.51-4.61(m,2H),4.36-4.46(m,1H),3.73-3.93(m,4H),3.33(s,3H),2.83-2.90(m,2H),2.21(s,3H)。*纯但未知的立体化学
化合物143_E1：(S*)-N-(2,4-二氟-5-甲基苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:422[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.75-7.81(m,1H),6.76-6.84(m,1H),6.49(br d,J＝2.51Hz,1H),4.73(s,2H),4.50-4.62(m,2H),4.37-4.47(m,1H),3.86(br d,J＝14.81Hz,4H),3.32(s,3H),2.87(t,J＝5.71Hz,2H),2.22(s,3H),2.00-2.15(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物144_E1：(S*)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(2,4,5-三氟-3-甲基苯基)- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:440[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.78-7.89(m,1H),6.57-6.63(m,1H),4.73(s,2H),4.51-4.62(m,2H),4.37-4.47(m,1H),3.71-3.94(m,4H),3.33(s,3H),2.87(s,2H),2.24(t,J＝1.90Hz,2H),2.20-2.28(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物145_E1：(S*)-N-(5-氰基-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:415[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.29-8.36(m,1H),7.41-7.46(m,1H),7.35-7.40(m,1H),6.91-6.95(m,1H),4.77(s,2H),4.50-4.64(m,2H),4.37-4.48(m,1H),3.72-3.96(m,4H),3.33(s,3H),2.89(t,J＝5.75Hz,2H),1.84-1.92(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物146_E1：(S*)-N-(3-氰基-2-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:415[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.32-8.38(m,1H),7.24-7.27(m,1H),7.18-7.24(m,1H),6.70-6.83(m,1H),4.77(s,2H),4.50-4.63(m,2H),4.37-4.47(m,1H),3.73-3.97(m,4H),3.33(s,3H),2.89(t,J＝5.75Hz,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物147_E1：(S*)-N-(2,4-二氟-5-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:476[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.35-8.42(m,1H),6.95-7.05(m,1H),6.59-6.67(m,1H),4.75(s,2H),4.56(br d,J＝12.23Hz,2H),4.36-4.47(m,1H),3.72-3.97(m,4H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.75Hz,2H)。*纯但未知的立体化学
化合物148_E1：(S*)-N-(2-氟-5-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:458[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.47(dd,J＝2.01,7.28Hz,1H),7.24-7.27(m,1H),7.14-7.21(m,1H),6.80(br d,J＝3.76Hz,1H),4.76(s,2H),4.51-4.62(m,2H),4.38-4.47(m,1H),3.72-3.97(m,4H),3.33(s,3H),2.85-2.93(m,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物149_E1：(S*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:476[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.17-8.26(m,1H),6.95-7.03(m,1H),6.62-6.68(m,1H),4.75(d,J＝2.13Hz,2H),4.56(br d,J＝12.93Hz,2H),4.43(s,1H),3.73-3.94(m,4H),3.33(s,3H),2.88(s,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物150_E1：(S*)-N-(2-溴-5-氟吡啶-4-基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:469/471[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.38-8.43(m,1H),8.14(d,J＝2.13Hz,1H),6.94-7.00(m,1H),4.75(d,J＝3.26Hz,2H),4.51-4.63(m,2H),4.43(br d,J＝9.16Hz,1H),3.72-3.96(m,4H),3.33(s,3H),2.89(t,J＝5.83Hz,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物151_E1：(S*)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-N-(2,3,4,5-tetra氟苯基)-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:444[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.80-7.90(m,1H),6.65(br s,1H),4.74(d,J＝3.14Hz,2H),4.51-4.62(m,2H),4.38-4.48(m,1H),3.85(br d,J＝5.65Hz,4H),3.33(s,3H),2.88(t,J＝5.83Hz,2H)。
*纯但未知的立体化学
化合物152_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2, 9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002771
步骤1：(9R)-10-叔丁氧羰基-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸：向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，500.00mg，1.36mmol，1.00当量，经SFC分离的非对映体)和NMO(1.19g，10.20mmol，1.08mL，7.50当量)在MeCN(10.00mL)中的溶液中添加TPAP(119.49mg，340.00μmol，0.25当量)。将混合物在30℃下搅拌12小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(20mL)中并用叔丁基甲醚(10mL)洗涤，将水层用0.5N HCl酸化至pH 3，用DCM(20mL*2)萃取，将有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，以获得黑褐色固体状标题化合物(520.00mg，粗制物)。LCMS:381[M+1]。
步骤2：(9R)-4-[2,2-二氟乙基(甲基)氨基甲酰基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于0℃下，向(9R)-10-叔丁氧羰基-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-羧酸(250.00mg，657.22μmol，1.00当量)、2,2-二氟-N-甲基-乙胺(172.91mg，1.31mmol，2.00当量，HCl)、3-甲基吡啶(183.62mg，1.97mmol，191.27μL，3.00当量)在MeCN(5.00mL)中的混合物中滴加MsCl(112.93mg，985.83μmol，76.30μL，1.50当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。
LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/2)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(244.00mg，517.37μmol，78.72％收率，97％纯度)。LCMS:458[M+1]。
步骤3：(9R)-N-(2,2-二氟乙基)-N,2,9-三甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺：向(9R)-4-[2,2-二氟乙基(甲基)氨基甲酰基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(180.00mg，393.47μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.85g，16.21mmol，1.20mL，41.19当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(185.47mg，393.46μmol，100.00％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤4：(9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2,9-三甲基-1- 氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰 胺：对(9R)-N-(2,2-二氟乙基)-N,2,9-三甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺(60.00mg，127.29μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氯-2,4-二氟苯基)氨基甲酸苯酯(43.33mg，152.75μmol，1.20当量)、TEA(25.76mg，254.58μmol，35.29μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并用DCM(5mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(51.00mg，86.73μmol，68.13％收率，93％纯度)。LCMS:547/548[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.87(br d,J＝5.50Hz,1H),6.92-7.00(m,1H),6.56(br s,1H),6.04(s,1H),4.94-5.16(m,4H),4.59-4.70(m,1H),4.42(d,J＝15.53Hz,1H),3.94-4.10(m,1H),3.60(br dd,J＝4.34,13.02Hz,1H),3.15-3.35(m,6H),3.05-3.13(m,1H),2.62-2.74(m,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物152_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2, 9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002801
化合物152_D2使用中间体18的相反对映体以与化合物152_D1类似的方式制备。
LCMS:547/548[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.83-7.93(m,1H),6.91-7.02(m,1H),6.46-6.55(m,1H),5.86-6.21(m,1H),5.03(s,3H),4.78-4.87(m,1H),4.51-4.71(m,2H),3.95-4.11(m,1H),3.52-3.67(m,1H),3.16-3.33(m,6H),3.00-3.09(m,1H),2.70-2.78(m,1H),1.21-1.27(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物153、154和155以与化合物152类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002802
Figure BDA0001982694780002811
化合物153_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4, 2,9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:538[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.22-8.32(m,1H),6.99-7.06(m,1H),6.61-6.68(m,1H),6.04(s,1H),4.94-5.16(m,4H),4.59-4.70(m,1H),4.39-4.47(m,1H),3.93-4.08(m,1H),3.52-3.70(m,1H),3.15-3.34(m,6H),3.04-3.13(m,1H),2.66-2.74(m,1H),1.20(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物153_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4, 2,9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:538[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.24-8.37(m,1H),6.97-7.09(m,1H),6.50-6.62(m,1H),6.04(s,1H),5.03(s,3H),4.53-4.87(m,3H),3.95-4.12(m,1H),3.53-3.69(m,1H),3.16-3.33(m,6H),2.99-3.09(m,1H),2.70-2.79(m,1H),1.24(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物154_D1：(4S*,9R)-N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2, 9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:547/548[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.19(s,1H),6.92-6.99(m,1H),6.56-6.61(m,1H),5.87-6.21(m,1H),4.93-5.17(m,4H),4.60-4.70(m,1H),4.41(d,J＝15.65Hz,1H),3.94-4.18(m,1H),3.51-3.73(m,1H),3.14-3.34(m,6H),3.06(br d,J＝5.75Hz,1H),2.72(s,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物154_D2：(4R*,9R)-N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2, 9-三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:547/548[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.16-8.23(m,1H),6.91-6.99(m,1H),6.48-6.55(m,1H),5.87-6.22(m,1H),5.03(s,3H),4.76-4.84(m,1H),4.51-4.72(m,2H),3.95-4.11(m,1H),3.51-3.68(m,1H),3.15-3.34(m,6H),2.98-3.09(m,1H),2.70-2.78(m,1H),1.23(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物155_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2,9- 三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:520[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.78-7.83(m,1H),7.58-7.65(m,1H),7.14(s,1H),6.84(s,1H),5.85-6.26(m,1H),4.89-5.23(m,4H),4.60-4.72(m,1H),4.39(d,J＝15.65Hz,1H),3.95-4.14(m,1H),3.52-3.75(m,1H),3.15-3.35(m,6H),3.02-3.11(m,1H),2.71(s,1H),1.13-1.22(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物155_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2,9- 三甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
LCMS:520[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.76(s,1H),7.54-7.61(m,1H),7.11-7.19(m,1H),6.56-6.62(m,1H),5.88-6.21(m,1H),5.04(s,3H),4.74-4.82(m,1H),4.51-4.70(m,2H),3.93-4.15(m,1H),3.52-3.72(m,1H),3.15-3.35(m,6H),2.97-3.09(m,1H),2.76(s,1H),1.22(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物156_D1：(4S*,9R)-N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二 甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002831
化合物156以与化合物110类似的方式制备。
LCMS:474[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.25-8.36(m,1H),6.98-7.08(m,1H),6.57-6.64(m,1H),6.00-6.11(m,1H),4.95-5.07(m,2H),4.91(s,2H),4.65-4.72(m,1H),4.51-4.57(m,1H),3.35(s,3H),2.99-3.08(m,1H),2.85(d,J＝4.89Hz,3H),2.68-2.77(m,1H),1.23(d,J＝6.85Hz,2H),1.19-1.26(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物156_D2：(4R*,9R)-N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4,2,9-三甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二 甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002841
LCMS:474[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.24-8.34(m,1H),6.99-7.06(m,1H),6.62-6.68(m,1H),6.09-6.20(m,1H),5.02-5.11(m,1H),4.86-4.99(m,3H),4.68-4.77(m,1H),4.46(d,J＝15.89Hz,1H),3.35(s,3H),2.99-3.09(m,1H),2.89(d,J＝4.89Hz,3H),2.69-2.78(m,1H),1.20(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物157_D1：(4S*,9R)-N-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-4-(羟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002842
步骤1：(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，40.00mg，109.17μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，123.72当量)，然后将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(41.52mg，109.17μmol，100.00％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：(4S*,9R)-N-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：使(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(41.00mg，107.80μmol，1.00当量，TFA)、N-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(35.48mg，118.58μmol，1.10当量)、TEA(21.82mg，215.61μmol，29.89μL，2.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并用DCM(5mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(35.00mg，73.50μmol，68.19％收率，99％纯度)。LCMS:472[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.48(dd,J＝1.90,7.27Hz,1H),7.24-7.27(m,1H),7.17(s,1H),6.73-6.81(m,1H),5.05-5.17(m,1H),4.87(s,1H),4.52-4.64(m,3H),4.46(s,1H),3.81-3.88(m,1H),3.71-3.80(m,1H),3.34(s,3H),3.01-3.11(m,1H),2.71(d,J＝15.89Hz,1H),1.22(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物157_D2：(4R*,9R)-N-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-4-(羟甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002861
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.46-8.52(m,1H),8.46-8.52(m,1H),7.24-7.27(m,1H),7.14-7.22(m,1H),6.75-6.82(m,1H),5.06-5.19(m,1H),4.92(s,1H),4.48-4.62(m,3H),4.35-4.44(m,1H),3.86-3.94(m,1H),3.75-3.82(m,1H),3.34(s,3H),3.02-3.11(m,1H),3.02-3.11(m,1H),2.65-2.78(m,1H),1.21(d,J＝6.85Hz,2H),1.19-1.24(m,1H)。
*纯但未知的立体化学
化合物158：N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)- 二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780002862
步骤1：N-(2,2-二氟乙基)-N,2-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺：在0℃下，向4-[2,2-二氟乙基(甲基)氨基甲酰基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(150.00mg，338.26μmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，79.86当量)。将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物减压浓缩，得到黄色油状标题化合物(154.70mg，338.25μmol，100.00％收率，TFA)，该粗产物直接用于下一步骤。LCMS:344[M+1]
步骤2：N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧代-5, 8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺：向N-(2,2-二氟乙基)-N,2-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-酰胺(50.00mg，109.33μmol，1.00当量，TFA)的DCM(3.00mL)溶液中添加N-(3-氯-2,4-二氟苯基)氨基甲酸苯酯(46.52mg，164.00μmol，1.50当量)和Et3N(55.32mg，546.65μmol，75.78μL，5.00当量)。在25℃下搅拌混合物16小时。将混合物用FA调节至中性条件(pH～6)并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化所得的残余物，得到白色固体状N10-(3-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10-二甲酰胺(40.00mg，74.31μmol，67.97％收率，99％纯度)。LCMS[M+1]:533/535。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.86-7.88(m,1H),6.90-7.03(m,1H),6.57(br s,1H),5.85-6.22(m,1H),4.94-5.12(m,2H),4.58-4.84(m,3H),3.76-4.13(m,3H),3.50-3.69(m,1H),3.13-3.37(m,6H),2.80-2.98(m,2H)。
化合物159、160和161以与158类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002871
化合物159：N10-(5-氯-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)- 二甲酰胺：
LCMS[M+1]:533/535。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.17(t,J＝8.07Hz,1H),6.95(dd,J＝8.44,10.64Hz,1H),6.59(br d,J＝2.81Hz,1H),5.85-6.20(m,1H),4.93-5.09(m,2H),4.58-4.83(m,3H),3.80-4.12(m,3H),3.59(br dd,J＝4.28,13.08Hz,1H),3.12-3.34(m,6H),2.82-2.96(m,2H)。
化合物160：N10-(3-氰基-4-氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二 甲酰胺：
LCMS[M+1]:506。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.77(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.54-7.63(m,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.71(s,1H),5.86-6.22(m,1H),4.95-5.10(m,2H),4.73-4.84(m,1H),4.57-4.69(m,2H),3.78-4.09(m,3H),3.47-3.68(m,1H),3.14-3.36(m,6H),2.81-2.95(m,2H)。
化合物161：N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4-(2,2-二氟乙基)-N4,2-二甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10 (2H)-二甲酰胺：
LCMS[M+1]:524。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.28(dt,J＝5.90,9.10Hz,1H),7.02(ddd,J＝1.69,8.00,9.51Hz,1H),6.63(d,J＝2.51Hz,1H),5.83-6.20(m,1H),4.95-5.10(m,2H),4.58-4.85(m,3H),3.79-4.09(m,3H),3.52-3.69(m,1H),3.13-3.34(m,6H),2.79-2.97(m,2H)。
化合物162：-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780002881
在N2下于0℃下，向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，80.00mg，189.20μmol，1.00当量)、TEA(95.72mg，946.00μmol，131.12μL，5.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物中滴加乙酸乙酰酯(77.26mg，756.80μmol，70.88μL，4.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到冰水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(48.00mg，102.22μmol，54.03％收率，99％纯度)。LCMS:465/467[M+1]。1H NMR(400MHz,Acetone)δ8.33-8.39(m,1H),7.82-7.88(m,1H),7.43-7.49(m,1H),7.32-7.41(m,1H),7.16(t,J＝9.10Hz,1H),4.55-4.69(m,4H),4.36(s,1H),3.83(s,2H),3.52-3.62(m,1H),3.35-3.44(m,1H),3.24(s,3H),2.74-2.78(m,2H),1.90(s,3H)。
化合物163、164、165和166以类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780002891
化合物163：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-((2,2,2-三氟乙酰胺基)甲 基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:519/520[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.55-7.60(m,1H),7.17-7.23(m,1H),7.07(s,1H),6.60-6.69(m,1H),6.47-6.51(m,1H),4.64-4.79(m,3H),4.56-4.63(m,1H),4.44-4.51(m,1H),3.76-3.94(m,2H),3.66(s,2H),3.31(s,3H),2.81-2.91(m,2H)。
化合物164：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰胺基)甲 基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
LCMS:555/556[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.54-7.60(m,1H),7.17-7.24(m,1H),7.06(s,1H),6.58(s,1H),4.67(s,4H),4.43-4.49(m,1H),3.76-3.95(m,2H),3.39-3.51(m,2H),3.31(s,3H),2.81-2.89(m,2H),2.81-2.89(m,2H)。
化合物165：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4-(甲基磺酰胺基甲基)-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:501/502[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.57-7.62(m,1H),7.21-7.26(m,1H),7.02-7.09(m,1H),6.79-6.84(m,1H),5.16-5.25(m,1H),4.69(s,3H),4.51-4.58(m,1H),4.38-4.45(m,1H),3.76-3.95(m,2H),3.35-3.45(m,1H),3.23-3.33(m,1H),3.19(s,3H),3.03(s,3H),2.85(br s,2H)。
化合物166：((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸 甲酯：
LCMS:481/482[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.55-7.61(m,1H),7.17-7.23(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.53-6.59(m,1H),4.95-5.06(m,1H),4.50-4.76(m,4H),4.38(brdd,J＝4.39,14.05Hz,1H),3.79-3.94(m,2H),3.72(s,3H),3.39-3.49(m,2H),3.30(s,3H),2.85(s,2H)。
化合物167_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780002911
步骤1：4-(氨基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向4-(叠氮甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体28，850.00mg，2.25mmol，1.00当量)在THF(12.00mL)和H2O(2.00mL)中的溶液中添加PPh3(1.18g，4.50mmol，2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。LCMS显示反应物被完全消耗。将混合物倾注到水(20mL)中并用乙酸乙酯(20mL*3)萃取，将有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱纯化粗制物，得到白色固体状标题化合物(790.00mg，2.25mmol，99.92％收率)。
步骤2：4-(乙酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向4-(氨基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(720.00mg，2.05mmol，1.00当量)的DCM(10.00mL)溶液中添加TEA(622.00mg，6.15mmol，852.05μL，3.00当量)和Ac2O(251.01mg，2.46mmol，230.29μL，1.20当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。TLC显示反应已完成。将混合物倾注到水(20mL)中，用DCM(20mL*3)萃取，将有机层用HCl(20mL，1N)、盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到白色固体状标题化合物(770.00mg，1.96mmol，95.66％收率)。
步骤3：N-[(2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基]乙酰胺：在0℃下，向4-(乙酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(450.00mg，1.14mmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.02mmol，2.00mL，23.70当量)。将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物减压浓缩，得到黄色油状标题化合物(464.00mg，1.14mmol，99.92％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤4：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺
向(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氢-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂-11-酮(55.00mg，138.08μmol，1.00当量，TFA)和Et3N(69.86mg，690.40μmol，95.70μL，5.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(36.68mg，138.08μmol，1.00当量)，将混合物在25℃下搅拌16h。将混合物用FA调节至中性条件(pH～6)并直接蒸发以获得残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(31.70mg，69.33μmol，50.21％收率，99.7％纯度)。LCMS:474[M+1]。LCMS:474[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.28(dt,J＝5.77,9.10Hz,1H),6.96-7.07(m,1H),6.62(d,J＝2.64Hz,1H),5.74(br s,1H),4.68-4.82(m,2H),4.59-4.66(m,1H),4.50-4.56(m,1H),4.36-4.57(m,1H),3.76-3.96(m,2H),3.42-3.59(m,2H),3.31(s,3H),2.81-2.92(m,2H),2.02(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物168、169、170、171、172、173、174和175以与化合物167类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780002931
化合物168_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代- 1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:456[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.77(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.59(ddd,J＝2.82,4.49,9.13Hz,1H),7.10-7.19(m,1H),6.69(s,1H),5.75(br s,1H),4.68-4.78(m,2H),4.59-4.67(m,1H),4.36-4.57(m,2H),3.82-3.92(m,2H),3.43-3.58(m,2H),3.31(s,3H),2.82-2.91(m,2H),2.02(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物169_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:483/485[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.87(dt,J＝5.58,8.94Hz,1H),6.90-7.02(m,1H),6.56(d,J＝2.76Hz,1H),5.77(br s,1H),4.68-4.81(m,2H),4.62(五重峰，J＝5.46Hz,1H),4.35-4.56(m,2H),3.76-3.95(m,2H),3.42-3.57(m,2H),3.30(s,3H),2.79-2.92(m,2H),2.01(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物170_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:527/529[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.94(dt,J＝5.65,8.97Hz,1H),6.94(ddd,J＝2.07,7.72,9.41Hz,1H),6.56(d,J＝3.01Hz,1H),5.73(br s,1H),4.70-4.80(m,2H),4.58-4.67(m,1H),4.34-4.57(m,2H),3.74-3.97(m,2H),3.43-3.60(m,2H),3.30(s,3H),2.81-2.93(m,2H),2.01(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物171_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-溴-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:509/511[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.71(dd,J＝2.64,6.02Hz,1H),7.24-7.27(m,1H),7.00-7.10(m,1H),6.52(s,1H),5.75(br s,1H),4.67-4.78(m,2H),4.59-4.66(m,1H),4.35-4.57(m,2H),3.76-3.94(m,2H),3.44-3.61(m,2H),3.30(s,3H),2.80-2.91(m,2H),2.01(s,3H)。*纯但未知的立体化学
化合物172_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS:517[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.22(dt,J＝5.40,8.91Hz,1H),6.94-7.05(m,1H),6.64(br d,J＝3.64Hz,1H),5.75(br s,1H),4.75(d,J＝1.51Hz,2H),4.58-4.67(m,1H),4.35-4.57(m,2H),3.76-3.96(m,2H),3.42-3.60(m,2H),3.30(s,3H),2.81-2.95(m,2H),2.01(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物173_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:483/485[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.18(t,J＝8.03Hz,1H),6.95(dd,J＝8.47,10.60Hz,1H),6.56(d,J＝3.14Hz,1H),5.74(br s,1H),4.69-4.77(m,2H),4.59-4.66(m,1H),4.35-4.56(m,2H),3.74-3.96(m,2H),3.43-3.58(m,2H),3.30(s,3H),2.82-2.92(m,2H),2.01(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物174_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-2-甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：
LCMS:527/529[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.27-8.36(m,1H),6.94(dd,J＝7.91,10.79Hz,1H),6.56(br d,J＝3.14Hz,1H),5.76(br s,1H),4.73(s,2H),4.62(五重峰，J＝5.43Hz,1H),4.35-4.56(m,2H),3.74-3.97(m,2H),3.42-3.57(m,2H),3.30(s,3H),2.80-2.93(m,2H),2.01(s,3H)。*纯但未知的立体化学
化合物175_E1：(S*)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-甲基- 1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS:499[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.67(dd,J＝2.76,6.02Hz,1H),7.54-7.62(m,1H),7.13(t,J＝9.41Hz,1H),6.66(s,1H),5.76(br s,1H),4.70-4.78(m,2H),4.58-4.68(m,1H),4.36-4.57(m,2H),3.79-3.94(m,2H),3.45-3.57(m,2H),3.30(s,3H),2.80-2.92(m,2H),2.01(s,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物176_D1：(4S*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002961
步骤1：(9R)-4-(氨基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：使(9R)-4-(叠氮甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体29，1.06g，2.71mmol，1.00当量)、PPh3(1.42g，5.42mmol，2.00当量)在THF(12.00mL)和H2O(2.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0:1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(827.00mg，2.20mmol，81.00％收率，97％纯度)。LCMS:366[M+1]
步骤2：(9R)-4-(乙酰胺基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并 [2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于0℃下，向(9R)-4-(氨基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11–四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(250.00mg，684.13μmol，1.00当量)、TEA(346.13mg，3.42mmol，474.16μL，5.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物中滴加Ac2O(279.37mg，2.74mmol，256.30μL，4.00当量)，并然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得白色固体状标题化合物(270.00mg，粗制物)。LCMS:408[M+1]。
步骤3：(4S*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：向(9R)-4-(乙酰胺基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(140.00mg，343.59μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，39.31当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。
TLC显示原料完全被消耗并且形成一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状N-[[(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]乙酰胺(144.78mg，343.59μmol，100.00％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤4：(4S*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰 胺：使N-[[(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]乙酰胺(70.00mg，166.12μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(42.57mg，166.12μmol，1.00当量)、TEA(50.43mg，498.36μmol，69.08μL，3.00当量)在DCM(3.00mL)中混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(30.00mg，61.98μmol，37.31％收率，97％纯度)。LCMS:470[M+1]1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.04(s,1H),7.77(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.56-7.63(m,1H),7.14(s,1H),6.67(s,1H),5.74-5.86(m,1H),5.06-5.22(m,1H),4.77-4.87(m,1H),4.62-4.70(m,1H),4.49-4.59(m,2H),4.39-4.47(m,1H),3.50(s,2H),3.31(s,3H),2.97-3.07(m,1H),2.66-2.75(m,1H),2.01(s,3H),1.20(d,J＝7.03Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物176_D2：(4R*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002981
LCMS:470[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.78(dd,J＝2.69,5.26Hz,1H),7.56-7.66(m,1H),7.14(t,J＝8.74Hz,1H),6.78(br s,1H),5.80(br s,1H),5.14(m,J＝6.48Hz,1H),4.90(d,J＝15.65Hz,1H),4.63(q,J＝5.47Hz,1H),4.51-4.58(m,1H),4.37-4.46(m,2H),3.50-3.57(m,2H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.87,15.77Hz,1H),2.68(d,J＝15.65Hz,1H),2.02(s,3H),1.18(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物177以与176类似的方式制备。
化合物177_D1：(4S*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002991
LCMS:513[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.64-7.73(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.10-7.17(m,1H),6.55-6.65(m,1H),5.69-5.83(m,1H),5.05-5.22(m,1H),4.78-4.88(m,1H),4.62-4.69(m,1H),4.55(s,2H),4.39-4.46(m,1H),3.51(br d,J＝4.77Hz,2H),3.31(s,3H),3.01(s,1H),2.70(d,J＝15.69Hz,1H),1.97-2.05(m,3H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物177_D2：(4R*,9R)-4-(乙酰胺基甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780002992
LCMS:513[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.69(dd,J＝2.69,6.11Hz,1H),7.57-7.63(m,1H),7.13(t,J＝9.35Hz,1H),6.68(br s,1H),5.79(br s,1H),5.15(m,J＝6.42Hz,1H),4.91(d,J＝15.53Hz,1H),4.59-4.67(m,1H),4.51-4.58(m,1H),4.36-4.48(m,2H),3.47-3.60(m,2H),3.31(s,3H),3.04(dd,J＝5.87,16.02Hz,1H),2.67(d,J＝16.02Hz,1H),2.02(s,3H),1.18(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物178_D1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰胺基 甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003001
步骤1：(9R)-4-(甲烷磺酰胺基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯的制备：在N2下于0℃下，向(9R)-4-(氨基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体30，250.00mg，684.13μmol，1.00当量)、TEA(138.45mg，1.37mmol，189.66μL，2.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物中滴加MsCl(117.55mg，1.03mmol，79.43μL，1.50当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到冰水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE/EA＝0/1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(218.00mg，471.86μmol，68.97％收率，96％纯度)。
LCMS:444[M+1]
步骤2：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰胺基甲基)-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：向(9R)-4-(甲烷磺酰胺基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(109.00mg，245.76μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TFA(2.31g，20.26mmol，1.50mL，82.44当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状N-[[(9R)-2,9-二甲基-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]甲烷磺酰胺(112.40mg，245.73μmol，99.99％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤3：4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰胺基甲基)-1- 氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺使N-[[(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]乙酰胺(56.00mg，122.43μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(31.37mg，122.43μmol，1.00当量)、TEA(24.78mg，244.86μmol，33.95μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(33.30mg，65.87μmol，53.80％收率，100％纯度)。LCMS:506[M+1]1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.75-7.81(m,1H),7.56-7.65(m,1H),7.11-7.19(m,1H),6.68-6.77(m,1H),5.05-5.15(m,1H),4.84-4.97(m,1H),4.67-4.82(m,2H),4.55(br d,J＝17.85Hz,3H),3.31(s,5H),3.01(s,4H),2.64-2.73(m,1H),1.19(d,J＝6.85Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物178_D2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰胺基 甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003021
LCMS:506[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.80(dd,J＝2.76,5.52Hz,1H),7.58-7.67(m,1H),7.15(t,J＝8.72Hz,1H),6.78(s,1H),5.16(br t,J＝6.40Hz,1H),4.91(s,2H),4.55-4.74(m,2H),4.36-4.50(m,2H),3.36-3.43(m,2H),3.33(s,3H),2.97-3.11(m,4H),2.69(d,J＝15.94Hz,1H),1.20(d,J＝7.03Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物179以与化合物178类似的方式制备。
化合物179_D1：(4S*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺 酰胺基甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003031
LCMS:549[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.65-7.71(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.14(s,1H),6.60(s,1H),5.06-5.18(m,1H),4.76-4.87(m,2H),4.66-4.75(m,1H),4.49-4.63(m,2H),4.44(d,J＝3.42Hz,1H),3.28-3.42(m,5H),3.00(s,4H),2.65-2.74(m,1H),1.20(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物179_D2：(4R*,9R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9-二甲基-4-(甲基磺 酰胺基甲基)-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003032
LCMS:549[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.70(dd,J＝2.70,6.21Hz,1H),7.60(br s,1H),7.15(s,1H),6.69(s,1H),5.17(s,1H),4.93(d,J＝15.69Hz,1H),4.86(s,1H),4.56-4.74(m,2H),4.34-4.50(m,2H),3.36-3.44(m,2H),3.33(s,3H),3.01-3.10(m,4H),2.69(d,J＝15.81Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H).
*纯但未知的立体化学
化合物180_D1：(((4S*,9R)-10-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2,9-二甲基- 1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 4-基)甲基)氨基甲酸甲酯：
Figure BDA0001982694780003041
步骤1：(9R)-4-[(甲氧基羰基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢- 4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于0℃下，向(9R)-4-(氨基甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体30，250.00mg，684.13μmol，1.00当量)、TEA(346.14mg，3.42mmol，474.16μL，5.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物中滴加氯甲酸甲酯(258.60mg，2.74mmol，211.97μL，4.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌2小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到冰水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(180.00mg，412.32μmol，60.27％收率，97％纯度)。LCMS:424[M+1]。
步骤2：N-[[(9R)-10-[(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8, 9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]氨基甲酸甲 酯：向(9R)-4-[(甲氧基羰基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(90.00mg，212.53μmol，1.00当量)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，63.55当量)，然后将混合物在30℃下搅拌1小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状N-[[(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]氨基甲酸甲酯(92.95mg，212.52μmol，100.00％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤3：(((4S*,9R)-10-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2,9-二甲基-1-氧代- 1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲 基)氨基甲酸甲酯：使N-[[(9R)-2,9-二甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基]甲基]氨基甲酸甲酯(46.00mg，105.17μmol，1.00当量，TFA)、N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(26.95mg，105.17μmol，1.00当量)、TEA(21.28mg，210.34μmol，29.15μL，2.00当量)在DCM(3.00mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌16小时。LCMS显示原料被完全消耗，期望产物占主要部分。将混合物倾注到水(10mL)中并搅拌5min。用DCM(5mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(36.40mg，74.23μmol，70.58％收率，99％纯度)。LCMS:486[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.78(dd,J＝2.81,5.38Hz,1H),7.55-7.62(m,1H),7.14(s,1H),6.62(s,1H),5.08-5.20(m,1H),4.92-5.02(m,1H),4.79(s,1H),4.37-4.66(m,4H),3.72(s,3H),3.44(brd,J＝5.38Hz,2H),3.31(s,3H),2.98-3.07(m,1H),2.66-2.74(m,1H),1.19(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物180_D2：(((4R*,9R)-10-((3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2,9-二甲基- 1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 4-基)甲基)氨基甲酸甲酯：
Figure BDA0001982694780003061
LCMS:486[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.80(dd,J＝2.82,5.46Hz,1H),7.58-7.67(m,1H),7.16(t,J＝8.66Hz,1H),6.70(s,1H),5.16(br t,J＝6.40Hz,1H),5.00(br s,1H),4.90(d,J＝15.56Hz,1H),4.52-4.68(m,2H),4.46(br d,J＝15.69Hz,2H),3.73(s,3H),3.42-3.57(m,2H),3.33(s,3H),3.00-3.10(m,1H),2.70(d,J＝15.94Hz,1H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物181以与化合物180类似的方式制备。
化合物181_D1：(((4S*,9R)-10-((4-氟-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸甲酯：
Figure BDA0001982694780003062
LCMS:529[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.68(br s,1H),7.56-7.62(m,1H),7.14(s,1H),6.56(s,1H),5.08-5.22(m,1H),4.92-5.02(m,1H),4.82(d,J＝15.65Hz,1H),4.55(s,4H),3.72(s,3H),3.36-3.52(m,2H),3.31(s,3H),2.98-3.08(m,1H),2.69(d,J＝15.89Hz,1H),1.19(d,J＝6.97Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物181_D2：(((4R*,9R)-10-((4-氟-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)-2,9-二 甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮 杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸甲酯：
Figure BDA0001982694780003071
LCMS:529[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.70(dd,J＝2.70,6.21Hz,1H),7.58-7.65(m,1H),7.15(s,1H),6.63(s,1H),5.11-5.23(m,1H),4.95-5.04(m,1H),4.91(d,J＝15.56Hz,1H),4.58(br d,J＝13.68Hz,2H),4.47(brd,J＝15.56Hz,2H),3.73(s,3H),3.48(br d,J＝5.27Hz,2H),3.33(s,3H),3.01-3.11(m,1H),2.70(d,J＝15.69Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物182_D1：(4S*,9R)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲 基)苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003081
步骤1：(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于0℃下，向(9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体18，3.00g，8.19mmol，1.00当量)、TEA(4.14g，40.95mmol，5.67mL，5.00当量)在DCM(40.00mL)中的混合物中滴加MsCl(3.75g，32.76mmol，2.53mL，4.00当量)，然后将混合物在N2气氛下于30℃下搅拌3小时。TLC显示原料完全被消耗，出现一个新斑点。将混合物倾注到冰水(50mL)中并搅拌5min。用DCM(40mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:2)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(3.40g，7.34mmol，89.66％收率，96％纯度)。LCMS:445[M+1]。
步骤2：(9R)-4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四 氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向(9R)-2,9-二甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(1.10g，2.47mmol，1.00当量)的DMSO(12.00mL)溶液中添加2,2-二氟乙胺(12.01g，148.20mmol，60.00当量)，将混合物在90℃下搅拌72h。LCMS显示反应物被剩余。将混合物在90℃下搅拌24h。将混合物用H2O 30mL稀释并用EtOAc(30mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:2)纯化残余物，得到黄色油状标题化合物(510.00mg，1.01mmol，40.87％收率，85％纯度)。
步骤3：(9R)-4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向(9R)-4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(220.00mg，512.27μmol，1.00当量)的DCM(8.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，52.73当量)，将反应混合物在25℃下搅拌一小时。TLC指示原料被完全消耗。在旋转蒸发仪上除去溶剂，以获得黄色油状标题化合物(220.00mg，粗制物，TFA)，该标题化合物直接用于下一步骤而无需纯化。
步骤3：(4S*,9R)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向(9R)-4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(55.00mg，124.05μmol，1.00当量，TFA)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TEA(50.21mg，496.20μmol，68.78μL，4.00当量)，然后添加N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(37.12mg，124.05μmol，1.00当量)，将反应混合物在25℃下搅拌4小时。在LCMS上显示出几个新峰，并且检测到40％的期望化合物。在旋转蒸发仪上除去溶剂。通过制备型HPLC(HCl)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(15.00mg，27.22μmol，21.95％收率，97％纯度)。LCMS:571[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03-9.10(m,1H),9.06(s,1H),7.88-7.96(m,1H),7.75-7.84(m,1H),7.41(d,J＝9.91Hz,1H),6.23-6.62(m,1H),4.94-5.10(m,2H),4.82-4.93(m,1H),4.70(dd,J＝6.09,14.87Hz,1H),4.44(dd,J＝4.45,14.87Hz,1H),4.18(d,J＝17.19Hz,1H),3.47-3.62(m,2H),3.29(s,3H),3.14-3.24(m,2H),2.86-2.96(m,1H),2.57-2.69(m,2H),2.30-2.36(m,1H),1.11(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物182_D2：(4R*,9R)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲 基)苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1, 2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003101
LCMS:535[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.78(dd,J＝2.57,6.34Hz,1H),7.62-7.68(m,1H),7.24(t,J＝9.66Hz,1H),6.19-6.50(m,1H),5.13(d,J＝16.81Hz,1H),4.95(br d,J＝6.78Hz,2H),4.74(dd,J＝6.02,14.93Hz,1H),4.46(dd,J＝3.83,15.00Hz,1H),4.31(d,J＝16.81Hz,1H),3.67(dt,J＝2.89,15.50Hz,2H),3.55(dd,J＝2.64,13.68Hz,1H),3.38-3.44(m,1H),3.36(s,3H),3.05(dd,J＝5.90,16.06Hz,1H),2.68(d,J＝15.94Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物183、184和185以与化合物182类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780003102
Figure BDA0001982694780003111
化合物183_D1：(4S*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺
LCMS:528[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(s,1H),7.91-7.98(m,1H),7.76-7.84(m,1H),7.43(t,J＝9.10Hz,1H),6.24-6.62(m,1H),5.02(brd,J＝17.19Hz,2H),4.82-4.92(m,1H),4.68(br d,J＝5.90Hz,1H),4.40-4.49(m,1H),4.18(br d,J＝17.32Hz,1H),3.50-3.64(m,1H),3.29(s,3H),3.13-3.24(m,2H),2.85-2.95(m,1H),2.58-2.69(m,2H),2.31-2.34(m,1H),1.07-1.15(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物183_D2：(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:492[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.79(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.60(ddd,J＝2.82,4.52,9.10Hz,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.74(s,1H),5.69-6.02(m,1H),5.10-5.20(m,1H),4.89(d,J＝15.56Hz,1H),4.51-4.60(m,2H),4.35-4.48(m,2H),3.32(s,3H),2.98-3.11(m,4H),2.87(dd,J＝4.45,12.99Hz,1H),2.69(d,J＝16.19Hz,1H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物184_D1：(4S*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:581[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,1H),7.85(dd,J＝2.64,6.40Hz,1H),7.42-7.50(m,1H),7.26(t,J＝8.85Hz,1H),6.23-6.61(m,1H),5.01(br d,J＝17.07Hz,2H),4.81-4.90(m,1H),4.68(br d,J＝6.15Hz,1H),4.46(br d,J＝4.27Hz,1H),4.16(d,J＝17.19Hz,1H),3.56(br s,2H),3.29(s,3H),3.17-3.23(m,2H),2.85-2.95(m,1H),2.65-2.70(m,1H),2.56-2.63(m,1H),2.28-2.36(m,1H),1.10(d,J＝6.78Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物184_D2：(4R*,9R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:545/547[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.73(dd,J＝2.57,6.09Hz,1H),7.29(br d,J＝3.01Hz,1H),7.05(t,J＝8.53Hz,1H),6.57(br s,1H),5.69-6.02(m,1H),5.09-5.20(m,1H),4.87(d,J＝15.56Hz,1H),4.31-4.62(m,4H),3.32(s,3H),2.96-3.13(m,4H),2.86(dd,J＝4.33,12.99Hz,1H),2.68(d,J＝15.81Hz,1H),1.18(d,J＝6.90Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物185_D1：(4S*,9R)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:517[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.18-7.24(m,1H),7.13(br d,J＝4.40Hz,1H),6.93(t,J＝9.11Hz,1H),6.32(s,1H),4.95-5.05(m,2H),4.90-4.93(m,2H),4.70-4.80(m,1H),4.31-4.52(m,2H),3.50-3.70(m,3H),3.35(s,3H),2.94-3.06(m,1H),2.59-2.76(m,1H),2.23(d,J＝1.83Hz,3H),1.22(d,J＝6.85Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物185_D2：(4R*,9R)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-甲基苯 基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:481[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.26(br s,1H),7.09-7.15(m,1H),6.93(t,J＝9.03Hz,1H),6.41(s,1H),5.68-6.02(m,1H),5.15(五重峰，J＝6.37Hz,1H),4.87(d,J＝15.69Hz,1H),4.50-4.61(m,2H),4.31-4.48(m,2H),3.31(s,3H),2.96-3.12(m,4H),2.86(dd,J＝4.33,12.99Hz,1H),2.67(d,J＝15.94Hz,1H),2.26(d,J＝1.51Hz,3H),1.17(d,J＝6.90Hz,3H)
*纯但未知的立体化学
化合物186_E1：(S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲 基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003131
步骤1：2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-羧酸叔丁酯(中间体1，500.00mg，1.42mmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TEA(358.95mg，3.55mmol，491.72μL，2.50当量)和MsCl(211.30mg，1.84mmol，142.77μL，1.30当量)。然后将混合物在20℃下搅拌2小时。TLC(乙酸乙酯)显示反应完全。将反应混合物用DCM(20mL)稀释并用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到作为黄色固体获得的2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(600.00mg，1.39mmol，98.16％收率)，其用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤2：4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶 并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向2-甲基-4-(甲基磺酰氧基甲基)-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(640.00mg，1.49mmol，1.00当量)的DMSO(15.00mL)溶液中添加2,2-二氟乙胺(7.25g，89.40mmol，60.00当量)。将混合物在密封管中于90℃下搅拌72小时。LCMS显示检测到82％的期望产物，2％的反应物和4％的副产物。将混合物倾注到水(50mL)中，用乙酸乙酯(20mL*3)萃取，将有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱纯化粗制物，得到黄色固体状标题化合物(540.00mg，1.30mmol，87.24％收率)。LCMS:416[M+1]。
步骤3：4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3] 吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：在0℃下，向4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(70.00mg，168.50μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，80.16当量)。将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物减压浓缩，得到黄色油状标题化合物(80.00mg，147.23μmol，87.38％收率，2TFA)，该粗产物直接用于下一步骤。
步骤4：(S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-2-甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：向4-[(2,2-二氟乙基氨基)甲基]-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(80.00mg，147.23μmol，1.00当量，2TFA)的DCM(3.00mL)溶液中添加N-[2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(56.04mg，176.68μmol，1.20当量)和Et3N(74.49mg，736.16μmol，102.04μL，5.00当量)。在25℃下搅拌混合物16小时。在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(29.00mg，50.63μmol，34.39％收率，94％纯度)。LCMS:496[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.29(dt,J＝5.90,8.97Hz,1H),7.02(t,J＝8.72Hz,1H),6.60(br s,1H),5.67-6.02(m,1H),4.68-4.81(m,2H),4.48-4.59(m,2H),4.32-4.43(m,1H),3.76-3.95(m,2H),3.31(s,3H),2.95-3.09(m,3H),2.78-2.93(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物187、188、189、190、191、192、193和194以与化合物186类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780003151
Figure BDA0001982694780003161
化合物187_E1：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-2- 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
LCMS:478[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.77(dd,J＝2.76,5.27Hz,1H),7.53-7.62(m,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.64(s,1H),5.67-6.03(m,1H),4.63-4.79(m,2H),4.48-4.59(m,2H),4.31-4.42(m,1H),3.80-3.93(m,2H),3.31(s,3H),2.96-3.11(m,3H),2.77-2.92(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物188_E1：(S*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:505/507[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.88(dt,J＝5.52,8.85Hz,1H),6.89-7.01(m,1H),6.54(br s,1H),5.67-6.04(m,1H),4.68-4.80(m,2H),4.48-4.60(m,2H),4.29-4.40(m,1H),3.76-3.98(m,2H),3.31(s,3H),2.95-3.10(m,3H),2.77-2.93(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物189_E1：(S*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:549/551[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.95(dt,J＝5.83,8.88Hz,1H),6.94(br t,J＝8.47Hz,1H),6.54(br s,1H),5.68-6.02(m,1H),4.67-4.81(m,2H),4.47-4.61(m,2H),4.30-4.42(m,1H),3.75-3.95(m,2H),3.31(s,3H),2.94-3.09(m,3H),2.77-2.92(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物190_E1：(S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-2-甲 基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
LCMS:531/533[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.71(dd,J＝2.57,5.96Hz,1H),7.24(br d,J＝2.89Hz,1H),7.05(t,J＝8.53Hz,1H),6.48(s,1H),5.68-6.03(m,1H),4.63-4.76(m,2H),4.49-4.59(m,2H),4.32-4.41(m,1H),3.78-3.93(m,2H),3.31(s,3H),2.95-3.09(m,3H),2.78-2.90(m,3H)。*纯但未知的立体化学
化合物191_E1：(S*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨 基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5] 噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:539[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.22(dt,J＝5.58,8.88Hz,1H),6.99(t,J＝9.60Hz,1H),6.63(br d,J＝3.51Hz,1H),5.67-6.02(m,1H),4.75(d,J＝2.64Hz,2H),4.48-4.59(m,2H),4.29-4.42(m,1H),3.78-3.96(m,2H),3.27-3.34(m,3H),2.96-3.09(m,3H),2.77-2.91(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物192_E1：(S*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:505/507[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.19(t,J＝8.09Hz,1H),6.95(dd,J＝8.60,10.48Hz,1H),6.55(br d,J＝2.51Hz,1H),5.68-6.02(m,1H),4.73(d,J＝1.88Hz,2H),4.49-4.60(m,2H),4.30-4.42(m,1H),3.77-3.94(m,2H),3.31(s,3H),2.96-3.09(m,3H),2.78-2.92(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物193_E1：(S*)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)- 2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003181
LCMS:549/551[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.33(t,J＝7.91Hz,1H),6.94(dd,J＝7.91,10.67Hz,1H),6.54(br d,J＝2.51Hz,1H),5.67-6.04(m,1H),4.66-4.80(m,2H),4.49-4.59(m,2H),4.30-4.42(m,1H),3.77-3.97(m,2H),3.31(s,3H),2.96-3.10(m,3H),2.79-2.92(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物194_E1：(S*)-4-(((2,2-二氟乙基)氨基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯 基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二 氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003191
LCMS:521[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.64-7.71(m,1H),7.59(br dd,J＝3.70,8.47Hz,1H),7.13(t,J＝9.35Hz,1H),6.62(s,1H),5.68-6.03(m,1H),4.65-4.78(m,2H),4.49-4.60(m,2H),4.31-4.43(m,1H),3.79-3.93(m,2H),3.31(s,3H),2.96-3.10(m,3H),2.80-2.91(m,3H)。
*纯但未知的立体化学
化合物195：N10-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-N4,2-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4,10(2H)-二甲酰胺：
Figure BDA0001982694780003192
化合物195以与118类似的方式制备。
LCMS[M+1]:460。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.29(dt,J＝5.77,9.10Hz,1H),6.95-7.09(m,1H),6.64(br s,1H),6.09(br d,J＝3.76Hz,1H),4.85-5.01(m,2H),4.63-4.80(m,3H),3.73-3.97(m,2H),3.35(s,3H),2.82-2.96(m,5H)。
化合物196：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-oxo-4-[(2-oxo吡咯烷-1-基)甲基]- 5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003201
步骤1：4-[(4-氯丁酰氨基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9, 11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，80.00mg，189.20μmol，1.00当量)和TEA(38.29mg，378.40μmol，52.45μL，2.00当量)在DCM(5.00mL)中的混合物中添加4-氯丁酰氯(26.68mg，189.20μmol，21.17μL，1.00当量)，将混合物在15℃下搅拌4h。将残余物用H2O(10mL)稀释并用DCM(10mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1板1)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(60.00mg，113.77μmol，60.13％收率)。LCMS:528[M+1]。
步骤2：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-[(2-氧代吡咯烷-1-基)甲基]-5, 8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：在0℃下，向4-[(4-氯丁酰氨基)甲基]-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(40.00mg，75.85μmol，1.00当量)的THF(4.00mL)溶液中添加NaH(6.07mg，151.69μmol，60％纯度，2.00当量)持续0.5h，然后将混合物在15℃下搅拌1h。将混合物用H2O(10mL)稀释并用EtOAc(10mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过制备型HPLC(FA)来纯化混合有反应混合物的残余物，得到黄色固体状标题化合物(13.00mg，25.16μmol，95％纯度)，
LCMS:491[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.58(dd,J＝2.64,6.40Hz,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.56(s,1H),4.70(s,3H),4.40-4.55(m,2H),3.79-3.94(m,2H),3.74(dd,J＝7.40,14.68Hz,1H),3.35-3.46(m,2H),3.31(s,3H),3.23(dt,J＝5.65,8.91Hz,1H),2.80-2.91(m,2H),2.36-2.48(m,2H),1.89-2.07(m,2H)。
化合物204：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((3,3-二甲基脲基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺
Figure BDA0001982694780003211
向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，40.00mg，94.60μmol，1.00当量)和TEA(19.14mg，189.20μmol，26.23μL，2.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加N,N-二甲基氨基甲酰氯(15.26mg，141.90μmol，13.04μL，1.50当量)，然后将混合物在25℃下搅拌16h。LCMS指示原料被完全消耗并且检测到期望产物。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(27.00mg，54.50μmol，57.61％收率，99.7％纯度)。LCMS:494[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),7.72(dd,J＝2.57,6.85Hz,1H),7.39-7.44(m,1H),7.29(t,J＝9.11Hz,1H),6.54(t,J＝5.14Hz,1H),4.61(s,2H),4.49-4.56(m,2H),4.27-4.35(m,1H),3.74(br s,2H),3.22(s,3H),3.11-3.18(m,1H),3.11-3.18(m,1H),3.11-3.18(m,1H),2.79(s,6H),2.72(br t,J＝5.38Hz,2H)。
化合物197、198、200、201和202以与化合物204类似的方式制备。
Figure BDA0001982694780003221
化合物197：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(丙酰氨基甲基)-1,4,5,8,9, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:479[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),8.05(t,J＝5.75Hz,1H),7.72(dd,J＝2.63,6.91Hz,1H),7.41(ddd,J＝2.75,4.34,9.05Hz,1H),7.25-7.32(m,1H),4.61(s,2H),4.54-4.60(m,1H),4.44-4.52(m,1H),4.28(dd,J＝7.03,14.24Hz,1H),3.69-3.78(m,2H),3.44(br d,J＝7.70Hz,1H),3.16-3.23(m,4H),2.72(br t,J＝5.69Hz,2H),2.07-2.15(m,2H),1.00(t,J＝7.58Hz,3H)。
化合物198：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(环丙烷甲酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4, 5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:491[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),8.36(br t,J＝5.33Hz,1H),7.73(dd,J＝2.57,6.84Hz,1H),7.42(ddd,J＝2.64,4.27,9.03Hz,1H),7.26-7.32(m,1H),4.62(s,2H),4.54-4.61(m,1H),4.45-4.53(m,1H),4.28(dd,J＝7.22,14.24Hz,1H),3.68-3.81(m,2H),3.44(td,J＝7.17,14.40Hz,1H),3.25(br t,J＝4.58Hz,1H),3.21(s,3H),2.72(br t,J＝5.58Hz,2H),1.54-1.67(m,1H),0.64-0.72(m,4H)。
化合物200：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(异丁酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:493[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),8.02(br t,J＝5.50Hz,1H),7.72(dd,J＝2.57,6.85Hz,1H),7.41(ddd,J＝2.63,4.28,8.99Hz,1H),7.25-7.32(m,1H),4.61(s,2H),4.57(dd,J＝5.69,14.12Hz,1H),4.45-4.53(m,1H),4.28(dd,J＝6.91,14.12Hz,1H),3.70-3.79(m,2H),3.39-3.47(m,2H),3.15-3.23(m,4H),2.72(br t,J＝5.50Hz,2H),2.39(td,J＝6.80,13.66Hz,1H),1.01(dd,J＝3.91,6.85Hz,6H)
化合物201：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-(新戊酰胺基甲基)-1,4,5,8, 9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:507[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.58(dd,J＝2.57,6.71Hz,1H),7.29(ddd,J＝2.64,4.17,9.00Hz,1H),7.10-7.16(m,1H),4.71(s,2H),4.52-4.65(m,2H),4.36(dd,J＝5.71,14.49Hz,1H),3.74-3.90(m,2H),3.54(dd,J＝7.22,14.24Hz,1H),3.33-3.37(m,1H),3.28(s,3H),2.83(t,J＝5.77Hz,2H),1.18(s,9H)。
化合物202：((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸 乙酯：
LCMS:495[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.56-7.61(m,1H),7.56-7.61(m,1H),7.58(dd,J＝2.64,6.65Hz,1H),7.56-7.61(m,1H),7.29(ddd,J＝2.64,4.05,9.00Hz,1H),7.10-7.16(m,1H),4.72(s,2H),4.53-4.61(m,2H),4.31-4.39(m,1H),4.10(q,J＝7.19Hz,2H),3.75-3.88(m,1H),3.75-3.88(m,1H),3.37-3.44(m,1H),3.29(s,4H),2.82(t,J＝5.77Hz,2H),1.20-1.29(m,3H)
化合物203：((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9, 10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸 环丙酯：
Figure BDA0001982694780003241
向环丙烷(100.00mg，1.72mmol，1.00当量)和吡啶(408.16mg，5.16mmol，416.49μL，3.00当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加(4-硝基苯基)氯甲酸酯(346.68mg，1.72mmol，1.00当量)。将混合物在20℃下搅拌1h。TLC(PE:EtOAc＝3:1)显示反应物(4-硝基苯基)氯甲酸酯被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。将混合物用10mL的DCM稀释，并用HCl(1N，30mL*1)、饱和NaHCO3溶液(30mL)和盐水(20mL*1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得白色固体状(4-硝基苯基)碳酸环丙酯(400.00mg，粗制物)并直接用于下一步骤。
步骤2：((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10, 11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸环丙 酯：向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，35.00mg，82.77μmol，1.00当量)和TEA(25.13mg，248.32μmol，34.42μL，3.00当量)的THF(1.00mL)溶液中添加(4-硝基苯基)碳酸环丙酯(36.95mg，165.54μmol，2.00当量)，然后将混合物在45℃下搅拌16h。TLC(PE:EtOAc＝0:1)显示反应物(4-硝基苯基)碳酸环丙酯完全被消耗并且形成两个新斑点。将混合有中试反应物(5mg)的混合物用15mL的DCM稀释，并用水(10mL*1)和盐水(10mL*1)洗涤。然后将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝0:1)，之后以制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(17.2mg，33.93μmol，37.59％收率，95％纯度)。LCMS:507[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.58(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.17-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.51(s,1H),4.92(br s,1H),4.64-4.76(m,2H),4.50-4.63(m,2H),4.38(br dd,J＝4.20,14.49Hz,1H),4.09(br d,J＝3.89Hz,1H),3.79-3.92(m,2H),3.39-3.49(m,2H),3.30(s,3H),2.85(t,J＝5.77Hz,2H),0.71(br d,J＝6.02Hz,4H)。
化合物199：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-((3,3,3-三氟丙酰胺基)甲 基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)- 酰胺：
Figure BDA0001982694780003251
向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，40.00mg，94.60μmol，1.00当量)和3,3,3-三氟丙酸(14.54mg，113.52μmol，10.03μL，1.20当量)在DMF(2.00mL)中的溶液中添加HATU(43.16mg，113.52μmol，1.20当量)和DIPEA(73.36mg，567.60μmol，99.14μL，6.00当量)，然后将混合物在25℃下搅拌2h。LCMS指示原料被完全消耗并且检测到期望产物。将混合物用15mL的DCM稀释，并用水(10mL*1)和盐水(10mL*1)洗涤。然后将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状化合物199(33.00mg，61.25μmol，64.74％收率，98.9％纯度)。LCMS:533[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(s,1H),8.55(br t,J＝5.44Hz,1H),7.72(dd,J＝2.57,6.85Hz,1H),7.38-7.45(m,1H),7.25-7.32(m,1H),4.57-4.66(m,3H),4.47-4.55(m,1H),4.28(dd,J＝7.15,14.37Hz,1H),3.68-3.81(m,2H),3.48(td,J＝7.11,14.52Hz,1H),3.25-3.31(m,3H),3.20(s,3H),2.72(br t,J＝5.50Hz,2H)。
化合物205和206以与化合物199类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780003261
化合物205：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2-氰基乙酰胺基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:490[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.58(dd,J＝2.64,6.65Hz,1H),7.29(ddd,J＝2.76,4.11,8.94Hz,1H),7.08-7.18(m,1H),4.72(s,2H),4.50-4.67(m,3H),4.33-4.44(m,1H),3.74-3.91(m,2H),3.63(dd,J＝7.09,14.62Hz,1H),3.36-3.56(m,2H),3.29-3.30(m,1H),3.29(br s,2H),2.84(t,J＝5.71Hz,2H)。
化合物206：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2-羟基乙酰胺基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1, 4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
LCMS:481[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ＝7.58(dd,J＝2.64,6.65Hz,1H),7.29(ddd,J＝2.64,4.17,9.00Hz,1H),7.13(t,J＝8.97Hz,1H),4.72(s,2H),4.70-4.71(m,1H),4.55-4.68(m,2H),4.55-4.68(m,1H),4.38(dd,J＝5.71,14.24Hz,1H),3.97-4.02(m,1H),4.00(s,1H),3.79-3.85(m,2H),3.65(dd,J＝7.15,14.18Hz,1H),3.42(dd,J＝4.33,14.24Hz,1H),3.29(brs,2H),3.29-3.30(m,1H),2.83(t,J＝5.65Hz,2H)。
化合物207：2,2,2-三氟乙基((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧 代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4- 基)甲基)氨基甲酸酯：
Figure BDA0001982694780003271
步骤1：4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H- 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113)：向2,2,2-三氟乙醇(100.00mg，999.60μmol，71.94μL，1.00当量)和吡啶(237.21mg，3.00mmol，242.05μL，3.00当量)的DCM(20.00mL)溶液中添加氯甲酸苯酯(156.51mg，999.60μmol，125.21μL，1.00当量)。将混合物在20℃下搅拌1h。TLC(PE:EtOAc＝3:1)显示反应物氯甲酸苯酯被完全消耗，并且形成一个主要新斑点。将混合物用10mL的DCM稀释，并用HCl(1N，30mL*1)和盐水(20mL*1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得无色油状2,2,2-三氟乙基碳酸苯酯(250.00mg，粗制物)。
步骤2：2,2,2-三氟乙基((10-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-甲基-1-氧代-1,2,4,5,8,9,10,11-八氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-4-基)甲基)氨基甲酸酯：向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，35.00mg，82.77μmol，1.00当量)和TEA(25.13mg，248.31μmol，34.42μL，3.00当量)在THF(2.00mL)中的溶液中添加2,2,2-三氟乙基碳酸苯酯(54.67mg，248.31μmol，3.00当量)，然后将混合物在45℃下搅拌16h。LCMS指示反应物2,2,2-三氟乙基碳酸苯酯被完全消耗并且检测到期望产物。将混合有中试反应物(5mg)的混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(TFA)，然后通过制备型TLC(PE:EtOAc＝0:1)和制备型HPLC(FA)纯化残余物，获得标题化合物(6.5mg，11.84μmol，12.30％收率，98％纯度)白色固体。LCMS:549[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.57(dd,J＝2.70,6.46Hz,1H),7.17-7.23(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.50(s,1H),5.22(br s,1H),4.64-4.76(m,2H),4.36-4.63(m,5H),3.80-3.92(m,2H),3.42-3.55(m,2H),3.30(s,3H),2.85(t,J＝5.58Hz,2H)。
化合物208：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(乙基磺酰胺基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,4,5, 8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺
Figure BDA0001982694780003281
向4-(氨基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺(化合物113，40.00mg，94.60μmol，1.00当量)和TEA(19.14mg，189.20μmol，26.23μL，2.00当量)在DCM(2.00mL)中的溶液中添加乙磺酰氯(18.25mg，141.90μmol，13.42μL，1.50当量)，然后将混合物在25℃下搅拌16h。LCMS指示原料被完全消耗并且检测到期望产物。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(25.00mg，46.61μmol，49.27％收率，96％纯度)。LCMS:515[M+1]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.91(s,1H),7.72(dd,J＝2.57,6.84Hz,1H),7.38-7.49(m,2H),7.25-7.32(m,1H),4.57-4.65(m,3H),4.50(五重峰，J＝6.31Hz,1H),4.28(dd,J＝7.22,14.37Hz,1H),3.67-3.80(m,2H),3.24(s,3H),3.20(br s,2H),3.07(q,J＝7.28Hz,2H),2.72(br t,J＝5.58Hz,2H),1.20(t,J＝7.34Hz,3H),1.16-1.24(m,1H)。
化合物129和130以与化合物208类似的方法制备。
Figure BDA0001982694780003291
化合物209：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六 氢-[1,2,5]氧二氮杂并[5,4-b]吲唑-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003292
步骤1：3-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-环己烷羧酸乙酯：在-65℃下，向LiHMDS(1M，35.26mL，1.20当量)的THF(30.00mL)溶液中滴加4-氧代环己烷羧酸乙酯(5.00g，29.38mmol，4.67mL，1.00当量)，在搅拌30min之后，在-65℃下添加含有草酸二叔丁酯(6.54g，32.32mmol，1.10当量)的THF(10.00mL)，使混合物缓慢升温至20℃并在20℃下搅拌1小时。TLC显示反应已经完成。将混合物倾注到HCl(0.5N，200mL)中，用乙酸乙酯(80mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到标题化合物(6.90g，23.13mmol，78.73％收率)，其被用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤2：5-乙基4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二羧酸3-叔丁酯：向3-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙酰基)-4-氧代-环己烷羧酸乙酯(6.70g，22.46mmol，1.00当量)的EtOH(70.00mL)溶液中添加N2H4.H2O(1.32g，22.46mmol，1.28mL，1.00当量)。将混合物在20℃下搅拌2小时。TLC显示反应已经完成。使混合物真空浓缩，将残余物倾注到HCl水溶液(0.5N，50mL)中，用乙酸乙酯(100mL*2)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过柱色谱纯化粗制物，获得无色油状标题化合物(4.70g，15.17mmol，67.54％收率，95％纯度)。
步骤3：3-叔丁氧羰基-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-5-羧酸：采用冰水浴在10℃下向5-乙基4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二羧酸3-叔丁酯(2.40g，8.15mmol，1.00当量)在MeOH(20.00mL)、THF(20.00mL)和H2O(10.00mL)中的溶液中添加LiOH.H2O(1.50g，35.75mmol，4.39当量)。将混合物在20℃下搅拌3小时。TLC显示反应物被消耗并且检测到一个主要斑点。使混合物真空浓缩，将残余物通过1N HCl酸化至pH＝5，并过滤，以获得白色固体状标题化合物(1.60g，5.41mmol，66.35％收率，90％纯度)。
步骤4：5-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸叔丁 酯：向3-叔丁氧羰基-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-5-羧酸(1.50g，5.63mmol，1.00当量)和3-氯-4-氟-苯胺(983.92mg，6.76mmol，1.20当量)在DMF(5.00mL)中的溶液中添加DIPEA(2.18g，16.90mmol，2.95mL，3.00当量)和HATU(2.36g，6.20mmol，1.10当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。LCMS显示反应物被消耗，并且检测到45％的期望产物和多个峰。将混合物倾注到水(200mL)中，用乙酸乙酯(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过快速反相分离来纯化粗制物，得到白色固体状标题化合物(650.00mg，1.65mmol，29.26％收率，99.8％纯度)。
步骤5：5-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸：采用冰水浴在10℃下向5-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸叔丁酯(300.00mg，761.73μmol，1.00当量)的DCM(6.00mL)溶液中添加TFA(4.27g，37.41mmol，2.77mL，49.11当量)。将混合物在20℃下搅拌3小时。TLC和LCMS显示反应物被消耗并且检测到一个主要斑点。使混合物真空浓缩，得到白色固体状标题化合物(250.00mg，740.24μmol，97.18％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),7.96(dd,J＝2.64,6.90Hz,1H),7.49(ddd,J＝2.57,4.30,9.07Hz,1H),7.31-7.41(m,1H),3.02(d,J＝11.54Hz,1H),2.57-2.83(m,5H),2.09(d,J＝10.16Hz,1H),1.65-1.86(m,1H)。
步骤6：N5-(3-氯-4-氟苯基)-N3-羟基-N3-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二 甲酰胺：向5-[(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基]-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3-羧酸(100.00mg，296.09μmol，1.00当量)和N-甲基羟胺(74.19mg，888.28μmol，3.00当量，HCl)在DMF(2.00mL)中的溶液中添加HATU(135.10mg，355.31μmol，1.20当量)和DIPEA(191.34mg，1.48mmol，258.56μL，5.00当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。LCMS显示反应已经完成。将反应混合物用水(20mL)猝灭并用乙酸乙酯(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并减压浓缩，得到黄色固体状标题化合物(90.00mg，223.30μmol，75.42％收率，91％纯度)。LCMS:367/369[M+1]。
步骤7：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢- [1,2,5]氧二氮杂并[5,4-b]吲唑-10-酰胺：向N5-(3-氯-4-氟苯基)-N3-羟基-N3-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二甲酰胺(50.00mg，136.33μmol，1.00当量)和3-溴氧杂环丁烷(37.35mg，272.65μmol，2.00当量)的DMF(2.00mL)溶液中添加Cs2CO3(66.63mg，204.49μmol，1.50当量)和TBAI(5.04mg，13.63μmol，0.10当量)。将混合物在80℃下搅拌7.5小时。LCMS显示反应物被消耗，并且检测到主要期望的产物。将混合物倾注到水(20mL)中，用乙酸乙酯(10mL*3)萃取，将有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过制备型HPLC纯化粗制物，得到白色固体状N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-4,5,8,9,10,11-六氢-[1,2,5]氧二氮杂并[5,4-b]吲唑-10-酰胺(45.00mg，101.10μmol，74.16％收率，95％纯度)。LCMS:423/425[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.74(dd,J＝2.26,6.53Hz,1H),7.56(br d,J＝10.04Hz,1H),7.34(td,J＝2.13,4.77Hz,1H),7.08(dt,J＝1.19,8.75Hz,1H),4.45-4.63(m,2H),4.34-4.43(m,1H),3.63-3.88(m,2H),3.31(d,J＝1.25Hz,3H),3.10-3.25(m,1H),2.82-3.04(m,2H),2.40-2.71(m,3H),2.26(br d,J＝13.05Hz,1H),1.94-2.09。
化合物210：(4S,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-4-((2,2,2-三 氟乙氧基)甲基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂 卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003321
步骤1：(5R)-5,13-二甲基-14-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-12-氧杂-4,8, 9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯：在搅拌和N2下于-10℃下将NaH(10.04mg，251.08μmol，22.70μL，60％纯度，1.0当量)添加到(5R)-11-(羟甲基)-5,13-二甲基-14-氧代-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯(100.00mg，251.08μmol，1.00当量)的THF(1.00mL)溶液中持续0.5h。然后将2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(233.11mg，1.00mmol，35.39μL，4当量)的THF(0.5mL)溶液添加到混合物中。将混合物在0℃下搅拌2h。使混合物冷却至-10℃并添加NaH(10.04mg，251.08μmol，60％纯度，1.0当量)，将混合物搅拌30min，然后添加2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(233.11mg，1.00mmol，4当量)。将混合物在0℃下搅拌1h。将混合物倾注到10mL的冰冷1NHCl水溶液中并用EtOAc(15mL*3)萃取。将有机层合并，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过制备型TLC(乙酸乙酯:石油醚＝1:3)纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(30mg，26.64％收率)和无色油状副产物(5R)-5,13-二甲基-11-亚甲基-14-氧代-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯(45mg，51.44％收率)。
步骤2：(5R)-5,13-二甲基-11-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-12-氧杂-4,8,9,13-四 氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮：向(5R)-5,13-二甲基-14-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯(58mg，129.34μmol，1当量)的DCM(3mL)溶液中添加TFA(462.00mg，4.05mmol，0.3mL，31.33当量)，然后将混合物在15℃下搅拌1h。使混合物直接真空浓缩，得到黄色油状标题化合物(60mg，粗制物，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤3：(4S,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-4-((2,2,2-三氟乙 氧基)甲基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：向(5R)-5,13-二甲基-11-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮(60mg，129.77μmol，1当量，TFA)的DCM(7mL)溶液中添加TEA(78.79mg，778.64μmol，108.38μL，6当量)和(5R)-5,13-二甲基-11-(2,2,2-三氟乙氧基甲基)-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮(60mg，129.77μmol，1当量，TFA)，然后将混合物在15℃下搅拌16h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(43mg，84.24μmol，64.91％收率，100％纯度)。LCMS:511[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.78(dd,J＝2.82,5.46Hz,1H),7.58(m,1H),7.11-7.18(m,1H),6.54(s,1H),5.13(m,1H),4.84(d,J＝15.69Hz,1H),4.63-4.69(m,1H),4.55-4.62(m,1H),4.50(d,J＝15.56Hz,1H),4.39-4.46(m,1H),3.88-3.97(m,2H),3.73-3.87(m,2H),3.31(s,3H),3.05(dd,J＝5.83,16.00Hz,1H),2.70(d,J＝15.94Hz,1H),1.20(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物211：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-4-((2,2,2-三氟乙氧 基)甲基)-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10 (2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003341
步骤1：4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于-40℃下，向NaH(85.13mg，2.13mmol，60％纯度，2.5当量)在DMF(3mL)中的悬浮液滴加4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(单一对映体，300mg，851.34μmol，1当量)的DMF(0.5mL)溶液。将混合物在-40℃下搅拌0.5小时。在-40℃下，添加2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(546.85mg，2.55mmol，3当量)。将反应混合物在-20℃下搅拌1小时。将反应混合物在0℃下用1N HCl(30mL)猝灭并用EA(30mL*3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。使残余物与另一批次合并，以通过柱色谱(SiO2，PE:EA:3:1～1:1)纯化，以获得400mg白色固体状标题化合物。
步骤2：4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：向4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(160mg，384.23μmol，1当量)的DCM(4mL)溶液中添加TFA(6.16g，54.02mmol，4.00mL，140.60当量)。将混合物在20℃下搅拌30min。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示原料被消耗。将混合物真空浓缩，以获得褐色油状标题化合物(180mg，粗制物，TFA)。
步骤3：(S*)N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-5, 8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-酰胺：向4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(84mg，195.20μmol，1当量，TFA)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(50.02mg，195.20μmol，1当量)在DCM(5mL)中的混合物中添加TEA(98.76mg，976.00μmol，135.85μL，5当量)。混合物在20℃下搅拌2h。LCMS显示检测到具有期望MS的一个主峰。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(45.93mg，94.72μmol，48.52％收率，98.66％纯度)。LCMS:479[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.69(dd,J＝2.75,5.44Hz,1H),7.52(ddd,J＝2.81,4.58,9.11Hz,1H),7.06(t,J＝8.68Hz,1H),6.67(s,1H),5.68-5.98(m,1H),4.56(五重峰，J＝5.72Hz,1H),4.45-4.52(m,1H),4.30-4.37(m,1H),3.75-3.84(m,2H),3.60-3.74(m,4H),3.23(s,3H),2.79(t,J＝5.81Hz,2H)。
化合物212：(S*)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2- 甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓- 10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003351
在步骤3使用4-(2,2-二氟乙氧基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮和(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酸苯酯，以与化合物211类似的方式制备标题化合物。LCMS:522[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.68(dd,J＝2.75,6.17Hz,1H),7.57-7.63(m,1H),7.15(t,J＝9.35Hz,1H),6.68(s,1H),5.75-6.09(m,1H),4.73(s,2H),4.54-4.68(m,2H),4.38-4.46(m,1H),3.84-3.96(m,2H),3.69-3.83(m,4H),3.32(s,3H),2.88(t,J＝5.75Hz,2H)。
*纯但未知的对映体。
化合物213：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,4,4,9-四甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：
Figure BDA0001982694780003361
步骤1：N-羟基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向N-甲基羟胺(20g，425.02mmol，1当量，HCl)和NaHCO3(53.56g，637.53mmol，24.80mL，1.5当量)在THF(400mL)和H2O(200mL)中的溶液中缓慢地添加含有Boc2O溶液(92.76g，425.02mmol，97.64mL，1当量)的THF(100mL)。然后将混合物在16℃下搅拌16小时。将混合物用H2O(200mL)稀释并且用EtOAc(200mL*3)萃取。然后将有机层用1N HCl(200mL)萃取。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，以获得红色液体状标题化合物(29.6g，粗制物)。
步骤2：2-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氧基-2-甲基-丙酸甲酯：在0℃下，向N-羟基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(5g，33.97mmol，1当量)的MeOH(50mL)溶液中添加CH3ONa(1.84g，33.97mmol，1当量)和2-溴-2-甲基-丙酸甲酯(6.15g，33.97mmol，4.39mL，1当量)。然后，将混合物在搅拌下加热至60℃维持16h。然后，向混合物中添加另一批CH3ONa(0.92g，17mmol，0.5当量)和2-溴-2-甲基丙酸甲酯(3.08g，17mmol，2.2mL，0.5当量)。将混合物在60℃下搅拌5小时。将混合物减压浓缩。将残余物用H2O(80mL)溶解并用EA(80mL*3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至20/1)纯化残余物，得到白色液体状标题化合物(8.05g，粗制物)。
步骤3：N-(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯：在N2下于-40℃下，向LiBH4(1.42g，65.11mmol，2当量)在THF(80mL)中的悬浮液添加2-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氧基-2-甲基-丙酸甲酯(8.05g，32.55mmol，1当量)的THF(20mL)溶液。然后将混合物在0℃下搅拌4小时。将反应物倾注到饱和NH4Cl水溶液(200mL)中并用EtOAc(150mL*3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。经由柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至20/1)纯化残余物，以获得白色液体状标题化合物(3.8g，17.33mmol，53.24％收率)和白色液体状不纯产物(80％纯度，2.4g，8.76mmol)。
步骤4：2-甲基-2-(甲基氨基氧基)丙-1-醇：向N-(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(3.8g，17.33mmol，1当量)的二氧杂环己烷(10mL)溶液中添加HCl/二氧杂环己烷(4M，6mL，1.38当量)。将混合物在16℃下搅拌2小时。使混合物减压浓缩，以获得浅黄色油状标题化合物(3.04g，粗制物，HCl)，其直接用于下一步骤。
步骤5：(6R)-3-[(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4, 6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向(6R)-5-叔丁氧羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(800mg，2.84mmol，1当量)和2-甲基-2-(甲基氨基氧基)丙-1-醇(575.34mg，3.70mmol，1.3当量，HCl)在吡啶(5mL)中的溶液中添加EDCI(708.73mg，3.70mmol，1.3当量)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将混合物与另一批次合并，并且用H2O(50mL)稀释并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用1N HCl(100mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/5)纯化残余物，以获得浅黄色固体状标题化合物(918mg)。
步骤6：(R)-6-甲基-3-(甲基((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基 甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯和(R)-6-甲基-3-(甲基 ((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基甲酰基)-2-(甲磺酰基)-2,4,6,7-四 氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(6R)-3-[(2-羟基-1,1-二甲基-乙氧基)-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(600mg，1.57mmol，1当量)的DCM(10mL)溶液中添加DIEA(608.27mg，4.71mmol，819.78μL，3当量)和MsCl(215.65mg，1.88mmol，145.71μL，1.2当量)。将混合物在0℃下搅拌2h。添加附加的MsCl(215.65mg，1.88mmol，145.71μL，1.2当量)并将混合物在0℃下搅拌0.5小时。将混合物用H2O(20mL)稀释并且用DCM(20mL)萃取。将有机层用0.5N HCl(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得白色固体状(R)-6-甲基-3-(甲基((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯与(R)-6-甲基-3-(甲基((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基甲酰基)-2-(甲磺酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯的混合物(900mg粗制物)，其直接用于下一步骤。
步骤7：(5R)-5,11,11,13-四甲基-14-氧代-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并 [7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(R)-6-甲基-3-(甲基((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基甲酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯和(R)-6-甲基-3-(甲基((2-甲基-1-((甲磺酰基)氧基)丙-2-基)氧基)氨基甲酰基)-2-(甲磺酰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(820mg粗制物)在THF(15mL)中的混合物中添加NaH(164.00mg，4.10mmol，60％纯度，2.5当量)。将混合物在搅拌下加热至45℃持续14小时。将混合物倾注到1N HCl(40mL)水溶液中并用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(40mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至1:1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(440mg，1.15mmol，70.16％收率，95.3％纯度)。
步骤8：(5R)-5,11,11,13-四甲基-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7] 十四碳-1,7-二烯-14-酮：向(5R)-5,11,11,13-四甲基-14-氧代-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-羧酸叔丁酯(150mg，411.59μmol，1当量)的DCM(5mL)溶液中添加TFA(770.00mg，6.75mmol，0.5mL，16.41当量)。将混合物在16℃下搅拌2小时。减压浓缩混合物，以获得黄色油状标题化合物(164mg，粗制物，TFA)。粗制标题化合物无需纯化即直接用于下一步骤。
步骤9：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,4,4,9-四甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10(2H)-酰胺：向(5R)-5,11,11,13-四甲基-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮(82mg，216.73μmol，1当量，TFA)的DCM(2mL)溶液中添加TEA(109.66mg，1.08mmol，150.83μL，5当量)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(55.53mg，216.73μmol，1当量)。将混合物在16℃下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(54.35mg，127.32μmol，58.75％收率，99.9％纯度)。LCMS:427[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.79(dd,J＝2.8,5.2Hz,1H),7.57-7.58(m,1H),7.15(t,J＝8.4Hz,1H),6.53(s,1H),5.11-5.17(m,1H),4.83(d,J＝15.2Hz,1H),4.51(d,J＝15.2Hz,,1H),4.25(s,2H),3.29(s,3H),3.05(dd,J＝2.0,15.6Hz,1H),2.70(d,J＝15.6Hz,1H),1.38(d,J＝17.6Hz,6H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)。
化合物214：(5R)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5,11,11,13-四甲基-14-氧代- 12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-4-酰胺：
Figure BDA0001982694780003391
向(5R)-5,11,11,13-四甲基-12-氧杂-4,8,9,13-四氮杂三环并[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮(82mg，216.73μmol，1当量，TFA)的DCM(2mL)溶液中添加TEA(131.59mg，1.30mmol，181.00μL，6当量)和N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(64.85mg，216.73μmol，1当量)。将混合物在16℃下搅拌16小时。在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(46.1mg，98.01μmol，45.22％收率，99.8％纯度)。LCMS:470[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.68(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.57-7.60(m,1H),7.14(t,J＝9.2Hz,1H),6.53(s,1H),5.12-5.18(m,1H),4.83(d,J＝15.2Hz,1H),4.51(d,J＝15.2Hz,,1H),4.25(s,2H),3.28(s,3H),3.05(dd,J＝5.6,16.0Hz,1H),2.70(d,J＝16.0Hz,1H),1.38(d,J＝17.6Hz,6H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H)。
化合物215：(4S,9R)-4-(羟甲基)-10-(4-碘苯甲酰基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10, 11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1(2H)-酮：
Figure BDA0001982694780003401
步骤1：(4S,9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮：在N2气氛下，将(4S,9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-5,8,9,11–四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(120mg，327.50μmol，1当量)和TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，82.48当量)在DCM(4mL)中的混合物在15℃下搅拌1小时。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(124mg，326.04μmol，99.55％收率，TFA)，其直接用于下一步骤。
步骤2：(4S,9R)-4-(羟甲基)-10-(4-碘苯甲酰基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11- 六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1(2H)-酮：使(4S,9R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]噁二氮杂卓-1-酮(124mg，326.04μmol，1当量，TFA)、4-碘苯甲酰氯(104.25mg，391.25μmol，1.2当量)、TEA(98.98mg，978.13μmol，136.14μL，3当量)和DMAP(3.98mg，32.60μmol，0.1当量)在DCM(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次。将混合物在N2气氛下于15℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(150.08mg，281.23μmol，86.26％收率，93％纯度)。LCMS:497[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(br d,J＝7.53Hz,2H),7.17(d,J＝7.91Hz,2H),5.36-5.71(m,1H),4.18-4.81(m,5H),3.63-3.92(m,2H),3.29(br s,4H),2.50-2.77(m,1H),1.84-2.28(m,1H),1.25(brs,2H),1.09-1.37(m,1H)。
化合物216：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-3,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[2, 3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003411
步骤1：N-(苄氧基羰基氨基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯：向N-氨基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(3.00g，20.52mmol，1.00当量)的二氧杂环己烷(20.00mL)溶液中添加NaOH(820.80mg，20.52mmol，1.00当量)的H2O(5.00mL)溶液，然后添加CbzCl(4.55g，26.68mmol，3.79mL，1.30当量)，将反应混合物在25℃下搅拌一小时。将反应混合物用EA(200mL)稀释并用水(80mL×3)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到作为黄色油状物获得的标题化合物(4.00g，14.27mmol，69.54％收率)。LCMS:303[M+23]。
步骤2：2-[苄氧基羰基-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氨基]乙酸甲酯：在N2下，向N-(苄氧基羰基氨基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(4.00g，14.27mmol，1.00当量)和2-溴乙酸甲酯(3.27g，21.41mmol，2.02mL，1.50当量)在DMF(10.00mL)中的混合物中添加K2CO3(2.96g，21.41mmol，1.50当量)，将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将反应混合物用EA(150mL)稀释并用水(50mL×3)洗涤，将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到黄色油状标题化合物(3.50g，9.93mmol，69.60％收率)。LCMS:375[M+23]。
步骤3：N-[苄氧基羰基(2-羟乙基)氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯：在N2下于0℃下，向2-[苄氧基羰基-[叔丁氧羰基(甲基)氨基]氨基]乙酸甲酯(3.50g，9.93mmol，1.00当量)的THF(30.00mL)溶液中添加LiBH4(432.55mg，19.86mmol，2.00当量)，将反应混合物在20℃下搅拌2小时。将反应用水(150mL)猝灭，然后用EA(200mL×3)萃取，将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到作为黄色油状物获得的标题化合物(2.40g，7.40mmol，74.51％收率)。
LCMS:347[M+23]。
步骤4：N-(2-羟乙基)-N-(甲基氨基)氨基甲酸苄酯：向N-[苄氧基羰基(2-羟乙基)氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.40g，7.40mmol，1.00当量)的二氧杂环己烷(20.00mL)溶液中添加HCl/二氧杂环己烷(4M，20.00mL，10.81当量)，将反应混合物在25℃下搅拌一小时。在减压下移除有机物，得到黄色油状标题化合物(1.80g，粗制物，HCl)。粗产物不经纯化即直接用于下一步骤。
步骤5：3-[[苄氧基羰基(2-羟乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑 并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.50g，5.61mmol，1.00当量)和N-(2-羟乙基)-N-(甲基氨基)氨基甲酸苄酯(1.76g，6.73mmol，1.20当量，HCl)在DMF(20.00mL)中的混合物中添加PYBOP(3.50g，6.73mmol，1.20当量)、HOBt(909.97mg，6.73mmol，1.20当量)和DIPEA(2.90g，22.45mmol，3.92mL，4.00当量)，将反应混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物用EA(200mL)稀释并用水(100mL×3)洗涤，将有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱来纯化残余物。通过制备型HPLC(FA)进一步纯化，得到黄色固体状标题化合物(1.50g，2.53mmol，45.17％收率，80％纯度)。LCMS:474[M+1]。
步骤6：3-[[苄氧基羰基(2-甲基磺酰氧基乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6, 7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在N2下于0℃下，向3-[[苄氧基羰基(2-羟乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(500.00mg，1.06mmol，1.00当量)和TEA(214.52mg，2.12mmol，293.86μL，2.00当量)在DCM(10.00mL)中的混合物中添加MsCl(242.85mg，2.12mmol，164.09μL，2.00当量)，将反应混合物在20℃下搅拌30分钟。将反应用水(30mL)猝灭并然后用DCM(80mL×2)萃取，将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(380.00mg，661.34μmol，62.39％收率，96％纯度)。LCMS:552[M+1]。
步骤7：O3-苄基O10-叔丁基2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑 并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-3,10-二羧酸酯：在N2和-10℃下，向3-[[苄氧基羰基(2-甲基磺酰氧基乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(380.00mg，688.89μmol，1.00当量)的THF(15.00mL)溶液中添加NaH(55.11mg，1.38mmol，60％纯度，2.00当量)，将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应用水(20mL)猝灭并然后用EA(50mL×3)萃取，将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(130.00mg，285.39μmol，41.43％收率)。LCMS:456[M+1]。
步骤8：2-甲基-1-氧代-3,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5] 三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下，向O3-苄基O10-叔丁基2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-3,10-二羧酸酯(250.00mg，548.84μmol，1.00当量)的MeOH(15.00mL)溶液中添加Pd/C(50.00mg，10％纯度)，使悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫三次，将混合物在H2(15psi)下在25℃下搅拌2小时。使反应混合物过滤，减压浓缩滤液，以获得黄色油状标题化合物(145.00mg，粗制物)。粗产物直接用于下一步骤而无需纯化。LCMS:322[M+1]。
步骤9：2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢-3H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三 氮杂-1-酮：向2-甲基-1-氧代-3,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(15.00mg，46.67μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(384.97mg，3.38mmol，249.98μL，72.34当量)，将反应混合物在25℃下搅拌一小时。减压除去溶剂。获得黄色油状标题化合物(15.00mg，粗制物，TFA)。粗产物直接用于下一步骤而无需纯化。
步骤10：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-1-氧代-3,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢-3H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂-1-酮(15.00mg，44.74μmol，1.00当量，TFA)在DCM(2.00mL)中的混合物中添加TEA(18.11mg，178.95μmol，24.81μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(11.89mg，44.74μmol，1.00当量)，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL×2)萃取，将有机层合并，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(11.00mg，26.60μmol，59.46％收率，95％纯度)。LCMS:393/395[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.59(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.17-7.24(m,1H),7.02-7.09(m,1H),6.75(s,1H),4.69(s,2H),4.55(t,J＝7.76Hz,1H),4.40(t,J＝6.42Hz,2H),3.86(t,J＝5.81Hz,2H),3.47(q,J＝6.72Hz,2H),3.23(s,3H),2.85(t,J＝5.75Hz,2H)。
化合物217：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,3-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢- 10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003441
步骤1：O5-叔丁基O3-乙基2-烯丙基-6,7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧 酸酯：
向O5-叔丁基O3-乙基2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(20.00g，67.72mmol，1.00当量)和3-溴丙-1-烯(12.29g，101.58mmol，1.50当量)的DMF(200.00mL)溶液中添加Cs2CO3(55.16g，169.30mmol，2.50当量)。然后将混合物在25℃下搅拌16h。TLC(石油醚:EtOAc＝3:1)显示O5-叔丁基O3-乙基2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯被完全消耗，并且形成两个新斑点。将混合物用100mL的水稀释并用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至3/1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(13.50g，40.25mmol，59.44％收率)及其白色固体状位置异构体(9.50g，28.32mmol，41.83％收率)。
步骤2：2-(2-氧代乙基)-6,7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸叔丁基乙 酯在0℃下，向O5-叔丁基O3-乙基2-烯丙基-6,7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(1.00g，2.98mmol，1.00当量)在THF(1.00mL)和H2O(500.00μL)中的溶液中添加OsO4(75.80mg，298.15μmol，15.47μL，0.10当量)，然后添加NaIO4(1.91g，8.94mmol，495.63μL，3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌5小时。将混合物用饱和Na2S2O3(50mL)猝灭并用EA(80mL×2)萃取。将合并的有机层在Na2SO4上干燥，过滤并真空浓缩。此残余物直接用于下一步骤。获得无色油状标题化合物(700.00mg，粗制物)。
步骤3：O5-叔丁基O3-乙基2-[2-[[叔丁氧羰基(甲基)氨基]-甲基-氨基]乙基]-6, 7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯：向N-甲基-N-(甲基氨基)氨基甲酸叔丁酯(432.14mg，2.70mmol，1.30当量)和O5-叔丁基O3-乙基2-(2-氧代基乙基)-6,7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(700.00mg，2.07mmol，1.00当量)的EtOH(15.00mL)溶液中添加HOAc(1.25mg，20.75μmol，1.19μL，0.01当量)。将混合物在20℃下搅拌5小时。加入NaBH3CN(391.16mg，6.22mmol，3.00当量)并将混合物在20℃下搅拌16小时。将混合物用H2O(50mL)稀释并且用EA(60mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(PE：EA＝15％～25％)，然后通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(100.00mg，186.88μmol，9.03％收率，90％纯度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝4.38-4.60(m,4H),4.17-4.31(m,2H),3.51-3.67(m,2H),2.77(s,3H),2.67(s,2H),2.55(s,3H),1.40(d,J＝10.9Hz,18H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤4：2-[2-[甲基(甲基氨基)氨基]乙基]-4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3- 羧酸乙酯：使O5-叔丁基O3-乙基2-[2-[[叔丁氧羰基(甲基)氨基]-甲基-氨基]乙基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(50.00mg，103.82μmol，1.00当量)溶解于HCl/二氧杂环己烷(103.82μmol，2.00mL，4M，1.00当量)中并将混合物在25℃下搅拌1小时。减压浓缩反应混合物，以获得无色油状标题化合物(40.00mg，粗制物，2HCl)。
步骤5：2,3-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1, 2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向2-[2-[甲基(甲基氨基)氨基]乙基]-4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸乙酯(60.00mg，169.36μmol，1.00当量，2HCl)的MeOH(500.00μL)溶液中添加CH3ONa(45.74mg，846.80μmol，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在25℃下再搅拌16小时。添加附加的CH3ONa(20mg)并将混合物在25℃下再搅拌16小时。将混合物真空浓缩以获得残余物。将残余物溶解于H2O(500.00μL)和THF(3.00mL)中。向溶液中添加Boc2O(44.35mg，203.23μmol，46.68μL，1.20当量)和NaHCO3(28.46mg，338.72μmol，13.18μL，2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并且用EA(20mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得褐色油状标题化合物(60.00mg，粗制物)。
步骤6：2,3-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三 氮杂-1-酮：
向2,3-二甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(70.00mg，208.71μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1.00mL，64.71当量)，将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩，以获得褐色油状标题化合物(77.00mg，粗制物，TFA)。
步骤7：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,3-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向2,3-二甲基-4,5,8,9,10,11-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,2,5]三氮杂-1-酮(75.00mg，214.71μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(57.04mg，214.71μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(108.63mg，1.07mmol，148.81μL，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(20.00mg，48.82μmol，22.74％收率，99.3％纯度)。LCMS:407[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.61(dd,J＝2.6,6.5Hz,1H),7.19-7.25(m,1H),7.02-7.09(t,1H),6.70(s,1H),4.73(s,2H),4.53(t,J＝6.1Hz,2H),3.88(t,J＝5.8Hz,2H),3.61(t,J＝6.1Hz,2H),3.25(s,3H),2.86(t,J＝5.8Hz,2H),2.69(s,3H)。
化合物218：(R)-3-烯丙基-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4, 5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003461
步骤1：N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁 酯：向N-氨基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.00g，13.68mmol，1.00当量)的DMF(20.00mL)溶液中添加2-溴乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(3.60g，15.05mmol，1.10当量)和DIEA(2.30g，17.78mmol，3.11mL，1.30当量)。将混合物在90℃下搅拌32小时。将混合物用H2O(100mL)稀释并且用EA(100mL×2)萃取。将合并的有机层经H2O(50mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(PE/EA：0％～10％)纯化残余物，得到无色油状N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(4.00g，10.51mmol，76.82％收率，80％纯度)。
步骤2：N-[烯丙基-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]氨基]-N-甲基-氨基 甲酸叔丁酯：
向N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基氨基]-N-甲基–氨基甲酸叔丁酯(4.00g，10.51mmol，1.00当量)和3-溴丙-1-烯(1.91g，15.76mmol，1.50当量)的DMF(40.00mL)溶液中添加DIEA(1.77g，13.66mmol，2.39mL，1.30当量)。然后将混合物加热至65℃持续16小时。将混合物用H2O(100mL)稀释并用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机层用H2O(50mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(PE:EA:0％～5％)纯化残余物，以获得无色油状N-[烯丙基-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.80g，6.50mmol，61.85％收率，80％纯度)。
步骤3：2-[烯丙基(甲基氨基)氨基]乙醇：向N-[烯丙基-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基]氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.00g，4.64mmol，1.00当量)的EtOAc(20.00mL)溶液中添加HCl/EtOAc(4M，10.00mL，8.62当量)。将混合物在10℃下搅拌3小时。将混合物真空浓缩，得到褐色油状2-[烯丙基(甲基氨基)氨基]乙醇(1.30g，粗制物，HCl)。
步骤4：(6R)-3-[[烯丙基(2-羟乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7- 四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向(6R)-5-叔丁氧羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.00g，3.35mmol，1.00当量)和2-[烯丙基(甲基氨基)氨基]乙醇(888.61mg，5.33mmol，1.50当量，HCl)在DMF(20.00mL)中的溶液中添加PYBOP(2.03g，3.91mmol，1.10当量)、HOBt(528.36mg，3.91mmol，1.10当量)和DIEA(2.30g，17.77mmol，3.10mL，5.00当量)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物用H2O(100mL)稀释并用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机层用H2O(100mL×2)、1N HCl(50mL)、饱和NaHCO3(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速色谱(石油醚:乙酸乙酯：60％～100％)纯化残余物，得到白色固体状(6R)-3-[[烯丙基(2-羟乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(860.00mg，1.92mmol，58.08％收率，88％纯度)。LCMS:394[M+1]。
步骤5：(6R)-3-[[烯丙基(2-甲基磺酰氧基乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲 基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(6R)-3-[[烯丙基(2-羟乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(800.00mg，1.79mmol，1.00当量)和DIEA(462.46mg，3.58mmol，624.95μL，2.00当量)在DCM(8.00mL)中的溶液中滴加MsCl(246.05mg，2.15mmol，166.25μL，1.20当量)的DCM(500.00μL)溶液。将混合物在0℃下搅拌0.5小时。添加MsCl(205.05mg，1.79mmol，138.55μL，1.00当量)并将混合物在10℃下搅拌0.5小时。将混合物用H2O(50mL)稀释并且用DCM(100mL)萃取。将有机层用0.5N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得无色油状标题化合物(800.00mg，粗制物)。LCMS:472[M+1]。
步骤6：(R)-3-烯丙基-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(6R)-3-[[烯丙基(2-甲基磺酰氧基乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(800.00mg，1.70mmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中添加NaH(203.58mg，5.09mmol，60％纯度，3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。添加附加的NaH(203.58mg)并将混合物加热至40℃持续16小时。将混合物用0.5N HCl(20mL)猝灭并用乙酸乙酯(80mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(PE:EA:30％～50％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(450.00mg，970.81μmol，57.11％收率，81％纯度)。LCMS:376[M+1]。
步骤7：(R)-3-烯丙基-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向(R)-3-烯丙基-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(250.00mg，539.34μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(3.12g，27.35mmol，2.02mL，50.71当量)。将混合物在10℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩，获得褐色油状标题化合物(212.00mg，粗制物，TFA)。
步骤8：(R)-3-烯丙基-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8, 9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(R)-3-烯丙基-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(212.00mg，544.47μmol，1.00当量，TFA)的DCM(5.00mL)溶液中添加N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(139.51mg，544.47μmol，1.00当量)和TEA(330.57mg，3.27mmol，452.83μL，6.00当量)。将混合物在30℃下搅拌16小时。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(150.00mg，335.68μmol，61.65％收率，97.9％纯度)。产生58.48mg的期望产物。LCMS:438[M+1]；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.82-7.84(m,1H),7.70-7.72(m,1H),7.29(t,J＝9.05Hz,1H),5.83(m,1H),5.14-5.23(m,2H),4.96-5.09(m,2H),4.31-4.50(m,3H),3.61(t,J＝6.36Hz,2H),3.45-3.47(m,2H),3.21(s,3H),3.04(dd,1H),2.66-2.70(d,1H),1.22(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物219：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-3-丙基-1,2,3,4,5, 8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003491
在N2下，向(R)-3-烯丙基-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺(化合物218，25mg，57.15μmol，1当量)的MeOH(10mL)溶液中添加Pd/C(2mg，10％纯度，1.00当量)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫几次。将混合物在H2(20psi)下于15℃下搅拌20min。将混合物与(1753，5mg)合并，用MeOH(20mL)稀释，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到13mg白色固体状标题化合物。LCMS:440[M+1]；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ＝7.81-7.83(m,1H),7.70-7.72(m,1H),7.28(t,J＝8.97Hz,1H),4.92-5.08(m,2H),4.33-4.49(m,3H),3.56(t,J＝6.40Hz,2H),3.21(s,3H),3.03-3.05(dd,1H),2.79-2.81(m,2H),2.67(d,J＝15.81Hz,1H),1.42-1.48(m,2H),1.21(d,J＝6.90Hz,3H),0.86(t,J＝7.40Hz,3H)。
化合物220：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(2-羟乙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2, 3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003501
步骤1：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-3-(2-氧代基乙基)-1,2, 3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(R)-3-烯丙基-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺(化合物218，70mg，156.65μmol，1.00当量)在THF(4.00mL)和H2O(2.00mL)中的溶液中添加OsO4(7.97mg，31.33μmol，1.63μL，0.20当量)和NaIO4(100.52mg，469.95μmol，26.04μL，3.00当量)。将混合物在15℃下搅拌6小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并且用EA(20mL×2)萃取。将合并的有机层用饱和Na2S2O3(10mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:1～0:1)纯化残余物，得到褐色油状标题化合物(40mg，91.02μmol，58.11％收率)。
步骤2：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(2-羟乙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4, 5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：在0℃下，向(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-3-(2-氧代基乙基)-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺(20.00mg，45.51μmol，1.00当量)在THF(1.00mL)和EtOH(100.00μL)中的溶液中添加NaBH4(5.16mg，136.53μmol，3.00当量)。将混合物在15℃下搅拌30分钟。将混合物用饱和NH4Cl(10mL)猝灭并用EA(10mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(3.77mg，8.10μmol，17.79％收率，94.8％纯度)。LCMS:442[M+1]；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ＝7.83(dd,J＝2.75,5.56Hz,1H),7.71(m,1H),7.28(t,J＝9.05Hz,1H),4.98-5.08(m,1H),4.97(s,1H),4.31-4.54(m,3H),3.68(t,J＝6.30Hz,2H),3.59(t,J＝5.56Hz,2H),3.27(s,3H),3.02(dd,J＝5.75,15.65Hz,1H),2.93(d,J＝3.42Hz,2H),2.67(d,J＝16.14Hz,1H),1.22(d,J＝6.85Hz,3H)。
化合物221：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(2,2-二氟乙基)-2,9-二甲基-1-氧代- 1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰 胺：
Figure BDA0001982694780003511
在-40℃下，向(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,9-二甲基-1-氧代-3-(2-氧代基乙基)-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺(20.00mg，45.51μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加DAST(44.01mg，273.06μmol，36.08μL，6.00当量)。将混合物在0℃下搅拌30min。将混合物用H2O(10mL)稀释并用DCM(10mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(3.67mg，7.65μmol，16.81％收率，96.2％纯度)。LCMS:462[M+1]；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ＝7.83(dd,J＝2.7,5.5Hz,1H),7.71(m,1H),7.28(t,J＝9.0Hz,1H),5.72-6.05(m,1H),4.92-5.07(m,2H),4.33-4.56(m,3H),3.70(s,2H),3.25(s,3H),3.12-3.22(m,2H),3.04(dd,J＝5.7,15.8Hz,1H),2.69(d,J＝15.8Hz,1H),1.22(d,J＝6.8Hz,3H)。
化合物222：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2, 3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003521
步骤1：(R)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯和(9R)-3-(2-羟丙基)- 2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1, 2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向(R)-3-烯丙基-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(30.00mg，64.72μmol，1.00当量)和Rh(PPh3)3Cl(11.98mg，12.94μmol，0.20当量)在THF(1.00mL)中的溶液中添加1,3,2-苯并二氧硼杂环戊烷(1M，40.42μL，5.00当量)。将混合物在0℃下搅拌1小时。然后，在-30℃下添加NaOH(18.12mg，453.04μmol，7.00当量)的H2O(500.00μL)溶液，添加H2O2(205.07mg，1.81mmol，173.79μL，30％纯度，27.95当量)并将混合物在10℃下搅拌1小时。将混合物用H2O(20mL)稀释并且用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用NaOH水溶液(0.25N，30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到无色油状(R)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(10mg，25.41μmol，39.27％收率)和无色油状(9R)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(2mg，5.08μmol，7.85％收率)。
步骤2：(R)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向(R)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(98mg，249.06μmol，1当量)在DCM(3mL)中的混合物中添加TFA(4.62g，40.52mmol，3mL，162.68当量)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。将混合物减压浓缩以获得残余物。获得黄色油状标题化合物(103mg，粗制物，TFA)。
步骤3：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4, 5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(R)-3-(3-羟丙基)-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(103mg，252.83μmol，1当量，TFA)和3-氰基-4-氟-苯甲酸苯酯(60.99mg，252.83μmol，1当量)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(153.50mg，1.52mmol，211.15μL，6当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。将混合物减压浓缩以获得残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(60.2mg，130.85μmol，51.75％收率，99.0％纯度)。LCMS:456[M+1]；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(dd,J＝2.64,5.40Hz,1H),7.56-7.62(m,1H),7.13(t,J＝8.66Hz,1H),6.74(s,1H),5.15(t,J＝6.71Hz,1H),4.83(d,J＝16.31Hz,1H),4.47-4.48(m,1H),4.45-4.53(m,3H),3.69-3.72(m,2H),3.59-3.62(m,2H),3.25(s,3H),2.91-3.08(m,3H),2.67(d,J＝16.06Hz,1H),1.71-1.77(m,2H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物223：(9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1, 2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰 胺：
Figure BDA0001982694780003541
步骤1：(9R)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向(9R)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(52.26mg，132.82μmol，1当量)在DCM(3mL)中的混合物中添加TFA(4.62g，40.52mmol，3.00mL，305.07当量)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。将混合物减压浓缩，得到黄色油状标题化合物(40.5mg，粗制物，TFA)。
步骤2：(9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,3, 4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(9R)-3-(2-羟丙基)-2,9-二甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(40.5mg，99.41μmol，1当量，TFA)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(25.47mg，99.41μmol，1当量)在DCM(3mL)中的溶液中添加TEA(60.36mg，596.46μmol，83.02μL，6当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。将混合物减压浓缩以获得残余物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(30.22mg，64.95μmol，65.34％收率，97.9％纯度)。LCMS:456[M+1]；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(dd,J＝2.76,5.40Hz,1H),7.52-7.66(m,1H),7.14(t,J＝8.66Hz,1H),6.67(s,1H),5.06-5.25(m,1H),4.84(m,J＝10.29Hz,1H),4.39-4.63(m,3H),3.56-3.91(m,3H),3.28(d,J＝4.27Hz,3H),2.84-3.10(m,2H),2.58-2.74(m,2H),1.08-1.22(m,6H)。
化合物224：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,3,9-三甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9, 11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003551
步骤1：N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁 酯：向N-氨基-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(10g，68.41mmol，1当量)和2-溴乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(18.00g，75.25mmol，1.1当量)在DMF(85mL)中的溶液中添加DIEA(11.49g，88.93mmol，15.49mL，1.3当量)。将混合物在90℃下搅拌48小时。将混合物用50mL的水稀释并用EtOAc(50mL×3)萃取，然后将合并的有机层用0.5N HCl(50mL×1)、水(50mL×2)和盐水(50mL×1)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至30/1)纯化残余物，得到无色液体状标题化合物(9.7g，27.40mmol，40.05％收率，86％纯度)。
步骤2：N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基-甲基-氨基]-N-甲基-氨基甲 酸叔丁酯：
在15℃下，向N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(5g，14.12mmol，1当量)的DMF(5mL)溶液中添加MeI(12.03g，84.73mmol，5.27mL，6当量)，然后将混合物在搅拌下加热至70℃持续3h。将混合物用0.5N HCl(30mL)猝灭并用EtOAc(30mL×4)萃取，并且将有机层用水(30mL×2)和盐水(30mL×1)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至30/1)纯化残余物。获得黄色液体状标题化合物(2.7g，8.48mmol，60.03％收率)。
步骤3：2-[甲基(甲基氨基)氨基]乙醇：向N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙基-甲基-氨基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.94g，9.23mmol，1当量)的二氧杂环己烷(6mL)溶液中添加HCl/二氧杂环己烷(4M，6.92mL，3当量)，然后将混合物在15℃下搅拌3小时。使混合物真空浓缩。不对残余物进行纯化。获得无色油状标题化合物(1.35g，粗制物，HCl)。
步骤4：(6R)-3-[[2-羟乙基(甲基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四 氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向(6R)-5-叔丁氧羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.0g，3.55mmol，1当量)的吡啶(10mL)溶液中添加EDCI(817.76mg，4.27mmol，1.2当量)，并将混合物在搅拌下加热至15℃保持16h。将混合物用20mL的水稀释并用EtOAc(20mL×3)萃取，并且将合并的有机层用HCl水溶液(1N，30mL×3)、饱和NaHCO3水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/3)纯化残余物。获得红色固体状标题化合物(970mg，2.64mmol，74.26％收率)。
步骤5：(6R)-6-甲基-3-[甲基-[甲基(2-甲磺酰基氧基乙基)氨基]氨基甲酰基]- 2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：
在搅拌下于0℃下向(6R)-3-[[2-羟乙基(甲基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-6-甲基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(970mg，2.64mmol，1当量)和DIEA(1.36g，10.56mmol，1.84mL，4当量)在DCM(25mL)中的溶液中添加MsCl(362.88mg，3.17mmol，245.19μL，1.2当量)持续1h。将混合物用20mL的水稀释并用DCM(20mL×3)萃取，并且将合并的有机层用HCl水溶液(1N，30mL×3)、饱和NaHCO3水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。不对残余物进行纯化。获得黄色固体状标题化合物(1.2g，粗制物)并将其直接用于下一步骤。
步骤6：(R)-2,3,9-三甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(6R)-6-甲基-3-[甲基-[甲基(2-甲磺酰基氧基乙基)氨基]氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(1.2g，粗制物，2.69mmol，1当量)的THF(25mL)溶液中添加NaH(269.31mg，6.73mmol，60％纯度，2.5当量)，然后将混合物在搅拌下加热至40℃持续16h。将混合物用HCl水溶液(1N，10mL)猝灭并用EtOAc(20mL×3)萃取，并将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物无需纯化即用于下一步骤。获得黄色油状850mg标题化合物。
步骤7：(R)-2,3,9-三甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡 唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向(R)-2,3,9-三甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(200mg，89％纯度，509.41μmol，1当量)的DCM(3mL)溶液中添加TFA(462.00mg，4.05mmol，0.3mL，7.95当量)，并将混合物在15℃下搅拌1小时。使混合物真空浓缩。残余物无需纯化即直接用于下一步骤。获得黄色油状标题化合物(190mg，粗制物，TFA)。
步骤8：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-2,3,9-三甲基-1-氧代-1,2,3,4,5,8,9,11-八 氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(R)-2,3,9-三甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(95mg，261.47μmol，1当量，TFA)的DCM(3mL)溶液中添加TEA(158.75mg，1.57mmol，218.36μL，6当量)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(70.35mg，274.54μmol，1.05当量)，并将混合物在15℃下搅拌16小时。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(57mg，138.26μmol，52.88％收率，99.8％纯度)。LCMS:412[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.81(dd,J＝2.76,5.52Hz,1H),7.60(m,J＝2.76,4.58,9.10Hz,1H),7.15(t,J＝8.72Hz,1H),6.71(s,1H),5.14-5.23(m,1H),4.88(d,J＝15.81Hz,1H),4.50-4.60(m,3H),3.64(t,J＝6.09Hz,2H),3.27(s,3H),3.05(dd,J＝5.96,15.87Hz,1H),2.66-2.73(m,4H),1.19(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物225：(R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,3,9-三甲基-1-氧代-1,2,3,4, 5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003581
向(R)-2,3,9-三甲基-2,3,4,5,8,9,10,11-八氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(95mg，261.47μmol，1当量，TFA)的DCM(3mL)溶液中添加TEA(158.75mg，1.57mmol，218.36μL，6当量)和N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(82.15mg，274.54μmol，1.05当量)。将混合物在15℃下搅拌16小时。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(57mg，125.43μmol，47.97％收率，100％纯度)。LCMS:455[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.69(dd,J＝2.70,6.09Hz,1H),7.57-7.63(m,1H),7.13(t,J＝9.41Hz,1H),6.65(s,1H),5.14-5.24(m,1H),4.87(d,J＝15.69Hz,1H),4.49-4.59(m,3H),3.60-3.65(m,2H),3.25(s,3H),3.04(dd,J＝5.90,15.81Hz,1H),2.65-2.71(m,4H),1.17(d,J＝6.90Hz,3H)。
化合物226：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-羟基-2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲基)-1,2,3, 4,5,8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003582
步骤1：3-[苄氧基羰基氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡 啶-5-羧酸叔丁酯：在25℃下，向5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(6.00g，22.45mmol，1.00当量)和N-(甲基氨基)氨基甲酸苄酯(6.32g，29.19mmol，1.30当量，HCl)在DMF(50.00mL)中的溶液中添加PYBOP(1.29g，2.47mmol，0.11当量)、HOBt(3.34g，24.69mmol，1.10当量)和DIPEA(17.41g，134.69mmol，23.52mL，6.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3h。LCMS指示剩余大部分的5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸，并且检测到少量期望产物。将混合物用50mL的水稀释并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，以获得残余物，将该残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至1/1)纯化，以回收5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸。
使回收的5-叔丁氧羰基-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸溶解于50mL的DMF中。向该溶液中添加PYBOP(12.85g，24.69mmol，1.10当量)、HOBt(3.34g，24.69mmol，1.10当量)、DIPEA(17.41g，134.69mmol，23.52mL，6.00当量)和N-(甲基氨基)氨基甲酸苄酯(6.32g，29.19mmol，1.30当量，HCl)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用50mL的水稀释并且用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3(30mL)、HCl(1N，30mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至1/1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(2.60g，5.31mmol，23.65％收率，87.7％纯度)。
步骤2：3-[氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔 丁酯：在N2下，向3-[苄氧基羰基氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(2.60g，6.05mmol，1.00当量)的MeOH(50.00mL)溶液中添加Pd/C(500.00mg，10％纯度)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫几次。在H2(15psi)下于25℃下，将混合物搅拌16小时。将混合物用30mL的MeOH稀释，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至1/4)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(1.30g，4.18mmol，69.12％收率，95％纯度)。
步骤3：3-[[(Z)-[1-(溴甲基)-2,2,2-三氟-亚乙基]氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2, 4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在25℃下，向3-[氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(150.00mg，507.89μmol，1.00当量)和3-溴-1,1,1-三氟-丙-2-酮(145.47mg，761.84μmol，79.06μL，1.50当量)在DCM(15.00mL)中的混合物中一次性加入TsOH·H2O(19.32mg，101.58μmol，0.20当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将3-溴-1,1,1-三氟-丙-2-酮(77.59mg，406.31μmol，42.17μL，0.80当量)添加到混合物中并将混合物于25℃再搅拌12小时。将反应混合物用H2O(5mL)猝灭，然后用DCM(10×2mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。利用制备型TLC(PE/EA＝1/1)纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(210.00mg，448.46μmol，88.30％收率)。LCMS:411[M-56]。
步骤4：2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲基)-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于25℃下，向3-[[(Z)-[1-(溴甲基)-2,2,2-三氟-亚乙基]氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(100.00mg，213.55μmol，1.00当量)的DMF(5.00mL)溶液中一次性加入Cs2CO3(139.16mg，427.10μmol，2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(40mL)稀释，然后用EtOAc(10×2mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。利用制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化残余物。获得黄色油状标题化合物(45.00mg，116.17μmol，54.40％收率)。
步骤5：2-甲基-4-(三氟甲基)-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：在搅拌下于30℃下向2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲基)-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(100.00mg，258.16μmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TFA(29.44mg，258.16μmol，19.12μL，1.00当量)持续1h。使混合物减压浓缩，以获得黄色油状标题化合物(40.00mg，99.69μmol，38.61％收率，TFA)，该标题化合物直接用于下一步骤。
步骤6：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-羟基-2-甲基-1-氧代-4-(三氟甲基)-1,2,3,4,5, 8,9,11-八氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于30℃下向2-甲基-4-(三氟甲基)-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(35.00mg，87.23μmol，1.00当量，TFA)和TEA(52.96mg，523.38μmol，72.55μL，6.00当量)在DCM(8.00mL)中的溶液中添加N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(23.17mg，87.23μmol，1.00当量)持续1h。使混合物在真空下直接蒸发并通过制备型HPLC(FA)纯化，得到白色固体状标题化合物(12mg，29.46％)。LCMS:459[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.16-7.24(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.65(s,1H),4.76(s,2H),3.82-3.92(t,2H),3.45(s,3H),3.06(d,J＝1.71Hz,1H),2.96(m,J＝6.19Hz,2H),2.22(s,1H)。
化合物227：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六 氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003611
步骤1：3-[[(Z)-[1-(乙酰氧基甲基)-2-氯-亚乙基]氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2, 4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在N2下于25℃下，在搅拌下向3-[氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(200.00mg，677.19μmol，1.00当量)和p-TsOH(11.66mg，67.72μmol，0.10当量)在DCM(15.00mL)中的溶液中添加(3-氯-2-氧代-丙基)乙酸酯(132.54mg，880.35μmol，1.30当量)持续4h。将混合物用30mL的DCM稀释并用盐水(50mL×1)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝1:1)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(250.00mg，584.28μmol，86.28％收率)。
步骤2：4-(乙酰氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在搅拌下于25℃下向3-[[(Z)-[1-(乙酰氧基甲基)-2-氯-亚乙基]氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(250.00mg，584.28μmol，1.00当量)的DMF(10.00mL)溶液中添加Cs2CO3(380.74mg，1.17mmol，2.00当量)和TBAI(21.58mg，58.43μmol，0.10当量)持续2h。将混合物用20mL的水稀释并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×1)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。获得黄色油状标题化合物(270.00mg，粗制物)。
步骤3：4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在搅拌下于25℃下向4-(乙酰氧基甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(250.00mg，638.70μmol，1.00当量)在THF(10.00mL)和H2O(1.00mL)中的溶液中添加LiOH·H2O(53.60mg，1.28mmol，2.00当量)持续2h。将混合物用20mL的水稀释并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝1:3)将残余物纯化为灰白色胶状标题化合物(160.00mg，粗制物)。
步骤4：4-(羟甲基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：在搅拌下于30℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(40.00mg，114.49μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(308.07mg，2.70mmol，200.05μL，23.60当量)持续0.5h。将混合物在30℃下真空浓缩。获得黄色油状标题化合物(45.00mg，粗制物，TFA)。
步骤5：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢- 10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：在搅拌下于25℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(45.00mg，123.87μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(34.55mg，130.06μmol，1.05当量)的DCM(5.00mL)溶液中添加TEA(75.21mg，743.21μmol，103.02μL，6.00当量)持续16h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(18.00mg，42.35μmol，34.19％收率，99％纯度)。LCMS:421[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.57(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.17-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.56(s,1H),4.87(s,2H),4.72(s,2H),4.51(s,2H),3.85(t,J＝5.75Hz,2H),3.50(s,3H),2.83(t,J＝5.75Hz,2H)。
化合物228：N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11- 六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003631
在搅拌下于25℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(85.00mg，233.97μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(62.95mg，245.67μmol，1.05当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加TEA(142.05mg，1.40mmol，194.59μL，6.00当量)持续16h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(TFA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(12.05mg，28.71μmol，12.27％收率，98％纯度)。LCMS:412[M+1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.77(dd,J＝2.81,5.50Hz,1H),7.57-7.64(m,1H),7.14(t,J＝8.68Hz,1H),6.86(s,1H),4.88(s,2H),4.73(s,2H),4.51(s,2H),3.86(t,J＝5.75Hz,2H),3.51(s,3H),2.84(t,J＝5.75Hz,2H)。
化合物229：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(1-羟丙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11- 六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003632
步骤1：4-甲酰基-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4] 吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在搅拌下于25℃下向4-(羟甲基)-2-甲基-1-氧代-5,8,9,11-四氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(600.00mg，1.72mmol，1.00当量)的DCM(30.00mL)溶液中添加DMP(1.46g，3.43mmol，1.06mL，2.00当量)维持2h。将混合物过滤并对滤液进行真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，PE/EtOAc＝10/1至3/1)纯化残余物，得到浅黄色固体状标题化合物(450.00mg，1.30mmol，75.32％收率)。
步骤2：4-(1-羟丙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于-78℃下，向4-甲酰基-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(50.00mg，143.94μmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中滴加EtMgBr(3M，57.58μL，1.20当量)。然后将混合物在搅拌下升温至25℃持续1h。接着，在-78℃下分三批添加EtMgBr(3M，719.70μL，15.00当量)，并且每次使混合物在搅拌下升温至25℃持续一小时。将混合物用10mL的水猝灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。收集有机相并用盐水(20mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝1:2)纯化残余物，以获得灰白色油状标题化合物(14.00mg，37.09μmol，25.77％收率)。
步骤3：4-(1-羟丙基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向4-(1-羟丙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(14.00mg，37.09μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(77.00mg，675.32μmol，50.00μL，18.21当量)。然后将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物真空浓缩，以获得黄色油状标题化合物(15.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤4：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(1-羟丙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢- 10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向4-(1-羟丙基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(15.00mg，38.33μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(10.18mg，38.33μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(31.03mg，306.64μmol，42.51μL，8.00当量)，然后将混合物在25℃下搅拌16h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，获得白色固体状标题化合物(6.01mg，13.12μmol，34.23％收率，98％纯度)。LCMS:449[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.57(dd,J＝2.63,6.54Hz,1H),7.17-7.23(m,1H),7.02-7.09(m,1H),5.11-5.15(d,1H),4.93-5.01(m,1H),4.71(s,2H),4.60(s,2H),4.44(t,J＝5.20,7.03Hz,1H),3.80-3.87(m,2H),3.48(s,3H),2.83(t,J＝5.75Hz,2H),1.71-1.59(m,2H),0.83(t,J＝7.40Hz,3H)。
化合物230：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(1-羟乙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11- 六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003651
步骤1：4-(1-羟乙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在N2下于-78℃下，向4-甲酰基-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(100.00mg，287.88μmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中分三批滴加MeMgBr(3M，576.67μL，6.00当量)。然后，使混合物在搅拌下升温至25℃持续4h。将混合物用10mL的水猝灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。收集合并的有机层并用盐水(20mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝0:1)纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(24.00mg，66.04μmol，22.94％收率)。
步骤2：4-(1-羟乙基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向4-(1-羟乙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(24.00mg，66.04μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(77.00mg，675.59μmol，50.00μL，10.23当量)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。使混合物真空浓缩。获得黄色油状标题化合物(25.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(1-羟乙基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢- 10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向4-(1-羟乙基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(25.00mg，66.26μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(17.60mg，66.26μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(53.64mg，530.05μmol，73.47μL，8.00当量)，然后将混合物在25℃下搅拌3h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物。获得白色固体状标题化合物(16.00mg，36.06μmol，54.42％收率，98％纯度)。LCMS:435[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.58(dd,J＝2.76,6.53Hz,1H),7.27-7.19(m,J＝2.70,4.05,8.94Hz,1H),7.02-7.09(m,1H),6.53(s,1H),4.86-5.02(m,2H),4.71(s,2H),4.64(m,J＝6.65Hz,1H),3.85(t,J＝5.84Hz,2H),3.49(s,3H),2.84(t,J＝5.77Hz,2H),1.42(d,J＝6.65Hz,3
化合物231：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5, 8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003661
步骤1：4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在-78℃下于N2下，向4-甲酰基-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(200.00mg，575.75μmol，1.00当量)的THF(10.00mL)溶液中滴加溴(环丙基)镁(0.458M，5.03mL，4.00当量)。使混合物在搅拌下升温至20℃持续1h。然后在0℃下滴加溴(环丙基)镁(0.458M，5.03mL，4.00当量)并将混合物在搅拌下升温至20℃持续1h。在0℃下滴加溴(环丙基)镁(0.458M，12.57mL，10.00当量)并将混合物在搅拌下升温至20℃持续2h。使混合物与较早批料(200mg)合并，并用10mL的DCM稀释，用HCl(1N，30mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EtOAc＝1:1)和制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得13mg白色固体状标题化合物。
步骤2：4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3': 3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(13.00mg，33.38μmol，1.00当量)的DCM(1.00mL)溶液中添加TFA(38.94mg，341.48μmol，25.28μL，10.23当量)，然后将混合物在25℃下搅拌1h。使混合物真空浓缩。不对残余物进行纯化。获得黄色油状标题化合物(14.00mg，粗制物，TFA)并直接用于下一步骤。
步骤3：N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-1-氧代-1,2,5,8,9, 11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向4-(环丙基(羟基)甲基)-2-甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(14.00mg，34.71μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(9.22mg，34.71μmol，1.00当量)在DCM(3.00mL)中的溶液中添加TEA(28.10mg，277.67μmol，38.49μL，8.00当量)，然后将混合物在25℃下搅拌3h。使混合物真空浓缩。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(8.50mg，18.20μmol，52.44％收率，98.7％纯度)。LCMS:461[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.58(dd,J＝2.64,6.53Hz,1H),7.16-7.22(m,1H),7.03-7.09(m,1H),6.55(s,1H),5.07-5.13(m,1H),4.92-4.99(m,1H),4.72(d,J＝2.89Hz,2H),3.81-3.88(m,3H),3.49(s,3H),2.79-2.88(m,3H),0.98-1.09(m,1H),0.57-0.67(m,2H),0.45-0.54(m,2H)。
化合物232：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003681
步骤1：3-[[(E)-(2-羟基-1-甲基-亚乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四 氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：在N2下于20℃下，在搅拌下向3-[氨基(甲基)氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(300.00mg，1.02mmol，1.00当量)和p-TsOH(17.56mg，102.00μmol，0.10当量)在DCM(20.00mL)中的溶液中添加1-羟基丙-2-酮(377.81mg，5.10mmol，349.82μL，5.00当量)持续2h。使混合物直接蒸发。通过制备型TLC(PE:EA＝0:1)纯化残余物，以获得灰白色油状标题化合物(240.00mg，682.98μmol，66.96％收率)。
步骤2：3-[甲基-[(E)-(1-甲基-2-甲基磺酰氧基-亚乙基)氨基]氨基甲酰基]-2, 4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向3-[[(E)-(2-羟基-1-甲基-亚乙基)氨基]-甲基-氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(100.00mg，284.58μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加吡啶(45.02mg，569.15μmol，45.94μL，2.00当量)，然后添加MsCl(65.20mg，569.15μmol，44.05μL，2.00当量)。将混合物在20℃下搅拌20小时。将混合物用H2O(30mL)稀释并且用EA(50mL×2)萃取。将合并的有机层用饱和Cu2SO4(30mL)洗涤，经用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。利用制备型TLC(PE:EA＝1:1)纯化残余物。获得无色油状标题化合物(70.00mg，162.98μmol，57.27％收率)。
步骤3：2,4-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在-10℃下，向NaH(9.31mg，232.84μmol，60％纯度，2.00当量)在THF(5.00mL)中的悬浮液中添加3-[甲基-[(E)-(1-甲基-2-甲基磺酰氧基-亚乙基)氨基]氨基甲酰基]-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(50.00mg，116.42μmol，1.00当量)的THF(500.00μL)溶液。将混合物在20℃下搅拌2小时。将混合物用H2O(10mL)猝灭并用EA(20mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过制备型TLC(PE:EA＝1:1)纯化残余物，以获得无色油状标题化合物(20.00mg，49.19μmol，42.25％收率，82％纯度)。
步骤4：2,4-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d] [1,2,5]三氮杂-1-酮：向2,4-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(20.00mg，59.99μmol，1.00当量)的DCM(3.00mL)溶液中添加TFA(3.08g，27.01mmol，2.00mL，450.31当量)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。将残余物真空浓缩，获得褐色油状标题化合物(22.00mg，粗制物，TFA)。
步骤5：N-(3-氯-4-氟苯基)-2,4-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向2,4-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(22.00mg，63.35μmol，1.00当量，TFA)的DCM(5.00mL)溶液中添加TEA(32.05mg，316.75μmol，43.90μL，5.00当量)，然后添加3-氯-4-氟-苯甲酸苯酯(15.88mg，63.35μmol，1.00当量)。将混合物在20℃下搅拌16小时。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(16.00mg，35.25μmol，55.65％收率，89.2％纯度)。LCMS:405[M+1]；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.98(s,1H),7.79(dd,J＝2.57,6.85Hz,1H),7.48(m,J＝2.69,4.28,9.05Hz,1H),7.29-7.37(m,1H),4.99(s,2H),4.69(s,2H),3.79(t,J＝5.62Hz,2H),3.36(s,3H),2.77(t,J＝5.56Hz,2H),2.24(s,3H)。
化合物233：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5, 8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003701
步骤1：(R)-3-(2-((苄氧基)羰基)-1-甲肼-1-羰基)-6-甲基-2,4,6,7-四氢-5H- 吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向(R)-5-(叔丁氧羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(4.80g，17.06mmol，1.00当量)和N-(甲基氨基)氨基甲酸苄酯(4.81g，22.18mmol，1.30当量，HCl)在DMF(30.00mL)中的溶液中添加PYBOP(9.77g，18.77mmol，1.10当量)、HOBT(2.54g，18.77mmol，1.10当量)和DIPEA(13.23g，102.37mmol，17.88mL，6.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用H2O(100mL)稀释并且用EA(100mL×3)萃取。将合并的有机层分离，用H2O(100mL×3)、1N HCl(80mL)和NaHCO3(饱和水溶液，80mL)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱(SiO2，PE/EA＝10:1至1:3)纯化残余物，以获得白色固体状标题化合物(6.80g，15.33mmol，89.87％收率)。
步骤2：(R)-6-甲基-3-(1-甲肼-1-羰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶- 5-羧酸叔丁酯：在N2下，向(R)-3-(2-((苄氧基)羰基)-1-甲肼-1-羰基)-6-甲基-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(2.00g，4.51mmol，1.00当量)的MeOH(20.00mL)溶液中添加Pd/C(400.00mg，10％纯度)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫几次。在H2(15psi)和25℃下，将混合物搅拌16小时。将反应溶液直接过滤。将滤液真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，PE/EA＝1:2-0:1～EA/MeOH＝50:1)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(1.20g，3.88mmol，86.01％收率)。
步骤3：(R,Z)-3-(2-(1-乙酰氧基-3-氯丙-2-亚基)-1-甲肼-1-羰基)-6-甲基-2, 4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯：向(R)-6-甲基-3-(1-甲肼-1-羰基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(1.80g，5.82mmol，1.00当量)和(3-氯-2-氧代-丙基)乙酸酯(1.14g，7.56mmol，1.30当量)在DCM(15.00mL)中的溶液中添加p-TsOH(100.19mg，581.85μmol，0.10当量)。将混合物在N2下在25℃下搅拌4小时。真空浓缩混合物。通过柱色谱(PE:EA:30％～50％)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(2.32g，5.25mmol，90.21％收率)。
步骤4：(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并 [4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：向(R,Z)-3-(2-(1-乙酰氧基-3-氯丙-2-亚基)-1-甲肼-1-羰基)-6-甲基-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(2.00g，4.53mmol，1.00当量)的THF(30.00mL)溶液中添加DBU(1.38g，9.06mmol，1.37mL，2.00当量)。将混合物加热至70℃持续16小时。使混合物冷却至25℃并添加H2O(10.00mL)。将反应混合物在25℃下搅拌5小时。将混合物用H2O(100mL)稀释并且用EA(50mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，以获得残余物。通过柱色谱(PE:EA：50％～100％)纯化残余物，以获得1g黄色固体状标题化合物。
步骤5：(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：在0℃下，向(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(100.00mg，214.63μmol，1.00当量)的DCM(5.00mL)溶液中缓慢地添加TFA(7.21g，63.21mmol，4.68mL，294.49当量)。将混合物在25℃下搅拌1小时。真空浓缩混合物。获得褐色固体状标题化合物。
步骤6：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9, 11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：向(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(95.00mg，251.78μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(64.51mg，251.78μmol，1.00当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加TEA(127.39mg，1.26mmol，174.50μL，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并且用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用1N HCl(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC(PE:EA＝0:1)和制备型HPLC(碱)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(25.00mg，57.18μmol，22.71％收率，97.31％纯度)。LCMS:426[M+1]；1H NMR(400MHz,Acetone)δ＝8.55(s,1H),8.06(dd,J＝2.7,5.8Hz,1H),7.91-7.81(m,1H),7.31(t,J＝9.0Hz,1H),5.19-4.95(m,4H),4.70-4.58(m,1H),4.40-4.33(m,2H),3.40(s,3H),2.95-3.25(dd,J＝6.1,16.0Hz,1H),2.88-2.85(m,1H),2.61-2.65(d,J＝15.9Hz,1H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H)。
化合物234：(R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8, 9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003721
向(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(52.00mg，137.81μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-溴-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(42.74mg，137.81μmol，1.00当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加TEA(69.72mg，689.05μmol，95.51μL，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。真空浓缩混合物。通过制备型HPLC(碱)纯化残余物两次，以获得白色固体状标题化合物(20.00mg，40.48μmol，29.37％收率，97％纯度)。LCMS:479/481[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.74(dd,J＝2.6,6.1Hz,1H),7.31-7.29(m,1H),7.06(t,J＝8.5Hz,1H),6.57(s,1H),5.20-5.11(m,1H),4.90(s,2H),4.86(s,1H),4.87-4.84(m,1H),4.57-4.46(m,3H),3.53(s,3H),3.33(d,J＝2.8Hz,1H),3.03(dd,J＝5.5,15.6Hz,1H),2.80(t,J＝5.2Hz,1H),2.67(d,J＝16.1Hz,1H),1.18(d,J＝6.9Hz,3H)。
化合物235：(R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8, 9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003731
向(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(52.00mg，137.81μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-氯-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(36.61mg，137.81μmol，1.00当量)在DCM(5.00mL)中的溶液中添加TEA(69.72mg，689.05μmol，95.51μL，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。真空浓缩混合物。将残余物通过制备型HPLC(FA)纯化，然后通过制备型TLC(PE:EA＝0:1)纯化。通过制备型HPLC(碱)进一步纯化，得到白色固体状标题化合物(8.00mg，17.86μmol，12.96％收率，97.1％纯度)。LCMS:435[M+1]；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.61(dd,J＝2.6,6.5Hz,1H),7.18-7.25(m,1H),7.04-7.11(m,1H),6.55(s,1H),5.16(m,J＝6.5Hz,1H),4.90(s,2H),4.86(s,1H),4.45-4.56(m,3H),3.53(s,3H),3.33(d,J＝2.3Hz,1H),2.98-3.07(m,1H),2.80(s,1H),2.67(m,J＝15.8Hz,1H),1.18(d,J＝6.9Hz,3H)。
化合物236：(R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基- 1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓- 10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003741
步骤1：(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六 氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯：在-40℃下，向(R)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(50.00mg，107.32μmol，1.00当量)的DMF(1.00mL)溶液中添加NaH(8.59mg，214.63μmol，60％纯度，2.00当量)。将混合物在-20℃下搅拌0.5小时。然后，在-20℃下添加2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(68.93mg，321.95μmol，3.00当量)的DMF(300.00μL)溶液。将反应混合物在-20℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(10mL)猝灭并用EA(20mL×2)萃取。将合并的有机层用H2O(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。获得无色油状标题化合物(40.00mg，粗制物)。
步骤2：(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮：向(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-羧酸叔丁酯(40.00mg，93.58μmol，1.00当量)的DCM(2.00mL)溶液中添加TFA(27.01mmol，2.00mL，288.66当量)。将混合物在25℃下搅拌1小时。真空浓缩混合物。获得褐色油状标题化合物(43.00mg，粗制物，TFA)。
步骤3：(R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧 代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂卓-10-酰 胺：向(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(40.00mg，90.63μmol，1.00当量，TFA)和N-(3-溴-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(28.11mg，90.63μmol，1.00当量)的DCM(4.00mL)溶液中添加TEA(45.85mg，453.15μmol，62.81μL，5.00当量)。将混合物在25℃下搅拌5小时。将混合物用H2O(15mL)稀释并且用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(碱)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(18.00mg，32.63μmol，36.01％收率，98.5％纯度)。LCMS:543/545[M+1]； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.75(dd,J＝2.7,6.1Hz,1H),7.24-7.28(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.54(s,1H),5.77-6.10(m,1H),5.12-5.21(m,1H),4.93-5.04(m,2H),4.87(d,J＝15.9Hz,1H),4.49(d,J＝15.9Hz,1H),4.41(s,2H),3.66-3.77(m,2H),3.51(s,3H),3.35(d,J＝4.0Hz,1H),3.03(dd,J＝6.0,16.1Hz,1H),2.68(d,J＝16.1Hz,1H),1.17(d,J＝6.9Hz,3H)。
化合物237：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲 基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂 卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003751
向(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(150.00mg，339.87μmol，1.00当量，TFA)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TEA(137.57mg，1.36mmol，188.45μL，4.00当量)，然后添加N-(3-氰基-4-氟苯基)氨基甲酸苯酯(87.08mg，339.87μmol，1.00当量)，将反应混合物在20℃下搅拌3小时。将混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL×3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(碱)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(48.00mg，96.11μmol，28.28％收率，98％纯度)。LCMS:490[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(dd,J＝2.82,5.46Hz,1H),7.58(m,J＝2.82,4.55,9.07Hz,1H),7.14(t,J＝8.72Hz,1H),6.52-6.72(m,1H),5.75-6.09(m,1H),5.15(m,J＝6.27Hz,1H),4.91-5.03(m,2H),4.87(d,J＝15.81Hz,1H),4.50(d,J＝15.69Hz,1H),4.33-4.44(m,2H),3.66-3.77(m,2H),3.50(s,3H),3.34(d,J＝3.14Hz,1H),2.98-3.06(m,1H),2.68(d,J＝16.19Hz,1H),1.14-1.19(d,3H)。
化合物238：(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2,9- 二甲基-1-氧代-1,2,5,8,9,11-六氢-10H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮 杂卓-10-酰胺：
Figure BDA0001982694780003761
向(R)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-2,5,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]三氮杂-1-酮(150.00mg，339.87μmol，1.00当量，TFA)在DCM(3.00mL)中的混合物中添加TEA(137.57mg，1.36mmol，188.45μL，4.00当量)，然后添加N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酸苯酯(101.69mg，339.87μmol，1.00当量)，将反应混合物在20℃下搅拌3小时。将混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL×3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(碱)纯化残余物，得到白色固体状标题化合物(30.00mg，53.53μmol，15.75％收率，95％纯度)。LCMS:533[M+1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(dd,J＝2.82,6.09Hz,1H),7.56-7.62(m,1H),7.14(t,J＝9.47Hz,1H),6.57(s,1H),5.76-6.08(m,1H),5.16(m,J＝6.02Hz,1H),4.92-5.02(m,2H),4.88(d,J＝15.69Hz,1H),4.46-4.55(m,1H),4.39(s,2H),3.65-3.76(m,2H),3.50(s,3H),3.34(d,J＝4.27Hz,1H),2.97-3.07(m,1H),2.67(d,J＝16.44Hz,1H),1.14-1.21(d,3H)。
实施例1：HBV组装测定
本发明的化合物对HBV衣壳组装的干扰可基于荧光猝灭利用体外组装测定来测量，其根据Zlotnick和coworkers(Nature Biotechnology 2006,24:358)所述的方法进行改进。在典型的测定中，将突变型HBV C150蛋白质(氨基酸1-150、C49A、C61A、C107A、150C)克隆到基于T7RNA-聚合酶的表达载体中，在大肠杆菌(E.coli)中表达并作为二聚体纯化至均质。对经纯化的HBV核心蛋白进行脱盐并用BODIPY-FL染料标记。
在一个非限制性实施方案中，组装测定在96-孔板格式中进行。组装反应在50mMHepes缓冲液，pH 7.5和150mM NaCl中进行。将化合物与HBV CA蛋白质一起预温育15min，并且通过添加NaCl引发组装反应。使反应在室温下继续进行1小时。记录经DMSO处理和经化合物处理的样品之间的荧光变化并分析组装调节。
实施例2：HBV复制抑制测定
所公开的化合物对HBV复制的抑制在经HBV感染或转染的细胞，或者具有稳定整合的HBV的细胞中测定，诸如HepG2.2.15细胞(Sells等人1987)。在该实施例中，使HepG2.2.15细胞维持于包含10％胎牛血清(FBS)、遗传霉素、L-谷氨酸盐、青霉素和链霉素的细胞培养基中。将HepG2.2.15细胞以40,000个细胞/孔的密度接种到96-孔板中，并且单独用最终DMSO浓度为0.5％的系列稀释的化合物处理或者通过在检查器框格式中添加药物进行联合处理。将细胞用化合物温育三天，其后移除培养基并将包含化合物的新鲜培养基添加至细胞并再温育三天。在第6天，移除上清液并用DNase在37℃下处理60分钟，然后在75℃下酶失活15分钟。通过在50℃下于包含2.5μg蛋白酶K的裂解缓冲液(Affymetrix QS0010)中温育40分钟，使衣壳化HBV DNA从病毒体和共价连接的HBV聚合酶中释放。HBV DNA通过添加0.2MNaOH而变性，并且根据制造商的推荐(Affymetrix)使用分支DNA(BDNA)QuantiGene测定试剂盒进行检测。HBV DNA水平也用qPCR进行定量，这基于对用QuickExtraction Solution(Epicentre Biotechnologies)得到的衣壳化HBV DNA提取物进行扩增以及用可与HBV DNA杂交的HBV特异PCR探针和荧光标记的探针对HBVDNA进行扩增以用于定量。此外，单独或组合地用受试化合物温育的HepG2.2.15细胞的细胞活力根据制造商的方案(Promega)使用CellTitre-Glo试剂进行测定。从所有其它样品减去来自仅包含培养基的孔的背景信号平均值，并且各个化合物浓度下的抑制百分比通过归一化为经0.5％DMSO处理的HepG2.2.15细胞的信号使用公式E1进行计算。
E1：％抑制＝(DMSO平均–Xi)/DMSO平均×100％。
其中DMSOave为从经DMSO对照(0％抑制对照)处理的孔计算的信号平均值，并且Xi为从各个孔测量的信号。EC50值(实现50％抑制作用的有效浓度)通过非线性拟合使用Graphpad Prism软件(San Diego,CA)和公式E2进行测定
E2：Y＝Y最小+(Y最大-Y最小)/(1+10(LogEC50-X)×HillSlope)其中Y表示抑制百分比值，并且X表示化合物浓度的对数。
在如上所述的HBV复制测定(BDNA测定)中对所选的所公开化合物进行测定，并且这些活性化合物的代表性的组示于表7中。表7示出通过对一组所选化合物的BDNA测定获得的EC50值。在表7中，“A”表示1<EC50≤100；“B”表示100<EC50≤500；“C”表示500<EC50≤1000；并且“D”表示EC50>1000。
表7：BDNA-测定中的活性(EC50)
Figure BDA0001982694780003781
Figure BDA0001982694780003791
Figure BDA0001982694780003801
Figure BDA0001982694780003811
Figure BDA0001982694780003821
Figure BDA0001982694780003831
Figure BDA0001982694780003841
Figure BDA0001982694780003851
Figure BDA0001982694780003861
Figure BDA0001982694780003871
Figure BDA0001982694780003881
Figure BDA0001982694780003891
Figure BDA0001982694780003901
Figure BDA0001982694780003911
Figure BDA0001982694780003921
Figure BDA0001982694780003931
Figure BDA0001982694780003941
Figure BDA0001982694780003951
Figure BDA0001982694780003961
Figure BDA0001982694780003971
Figure BDA0001982694780003981
Figure BDA0001982694780003991
Figure BDA0001982694780004001
Figure BDA0001982694780004011
Figure BDA0001982694780004021
Figure BDA0001982694780004031
*纯但未知的对映体或非对映体。
实施例3：中间体18类似物的结晶形式
本文描述了结晶形式的化合物215，其为中间体18的碘代-苯甲酸类似物。
Figure BDA0001982694780004032
X-射线晶体结构示于图1中。表8也示出该中间体的晶体数据和结构精修。
表8：晶体数据和结构精修。
Figure BDA0001982694780004041
表9还示出中间体的原子坐标(×104)和等效各向同性位移参数(A2×103)。
表9：原子坐标和等效各向同性位移参数：
Figure BDA0001982694780004042
Figure BDA0001982694780004051
可以看出，中间体18类似物的立体构型为4S、9R。因此，衍生自中间体18的化合物的立体构型是已知的。
本文所引用的每项专利、专利申请和专利公开中的公开内容均全文以引用方式并入本文中。
尽管已结合具体实施方案公开了本发明，但是显而易见，本领域其它技术人员可以在不脱离本发明的真正实质和范围的情况下设计本发明的其它实施方案和变型形式。所附权利要求旨在被理解为包括所有此类实施方案及等同变型形式。

Claims (22)

1.一种式IA的化合物：
Figure 240292DEST_PATH_IMAGE001
，
或其药学上可接受的盐，其中
A为N或C(H)；
R1为C1-C6-烷基或C1-C6-烯基；
R2在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基任选地被1、2、或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH和卤素；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-环烷基，其中杂芳基、芳基和环烷基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基；
R5为H；
R6选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烯基、以及C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基；
R7选自H、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基、-C(O)C1-C6-卤代烷基、-C(O)C1-C6-烷基-OR10、-C(O)C1-C6-烷基-CN、-C(O)C3-C7-环烷基、-C(O)O-C1-C6-烷基、-C(O)N(R10)2、-S(O)2C1-C6-烷基、-S(O)2C1-C6-卤代烷基和-S(O)2C3-C7-环烷基；或者
其中两个R7基团与它们所连接的N一起形成C2-C6杂环，其中所述C2-C6杂环进一步独立且任选地被1或2个氧代基或卤素取代基取代；
R8为C1-C6-烷基；
R9为C1-C6-烷基；
R10选自H和C1-C6-烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中A为N。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R1为–CH3、–CH2CH3、–CH2CH2CH3、–CH2CH=CH2、或–CD3。
4.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中m为1或2；并且
每个R2独立地选自C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C0-C6-烷基-OR6、C1-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2和C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。
5.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其具有式II的结构：
Figure 688591DEST_PATH_IMAGE002
，
或其药学上可接受的盐。
6.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中所述R3处于以下位置：
Figure 336568DEST_PATH_IMAGE003
。
7.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R2选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH=CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2、–CH2N(CH3)2、–CH2OCF3、–C(O)-3,3-二氟氮杂环丁烷、–C(O)-3,3-二氟吡咯烷、–C(O)N(CH3)(CH2CHF2)、–C(O)N(CH3)(CH2CF3)、–C(O)N(H)(CH2CHF2)、–C(O)N(H)(CH3)、–C(O)N(H)(CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH3)、–CH2N(H)(C(O)CF3)、–CH2N(H)(C(O)OCH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CF3)、–CH2-吡咯烷-2-酮、–CH2N(H)(C(O)CH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)CH2CF3)、–CH2N(H)(C(O)CH(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)C(CH3)3)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CH3)、–CH2N(H)(C(O)O-环丙基)、–CH2N(H)(C(O)N(CH3)2)、–CH2N(H)(C(O)CH2CN)、–CH2N(H)(C(O)CH2OH)、–CH2N(H)(C(O)OCH2CF3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CH3)、–CH2N(H)(S(O)2CH2CF3)和–CH2N(H)(S(O)2-环丙基)。
8.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R4为C1-C5-杂芳基、C6-芳基、或C3-C7-环烷基，它们中的任一者任选地被1、2、或3个基团取代，所述基团各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基。
9.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R4为苯基、吡啶基、或环己基，其中R4任选地被1、2、或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–I、–CN、–CH3、–CH2CH3、–CF3、–CHF2和–SF5。
10.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R4选自：
Figure 528515DEST_PATH_IMAGE004
。
11.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中
R1为C1-C6-烷基；
R2在每次出现时独立地选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH=CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4选自(CRaRb)p-C1-C9-杂芳基和(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中所述杂芳基或芳基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自卤素、–CN、–SF5、C1-C6-烷基和C1-C6-卤代烷基；
R5为H；
m为0、1或2；
n为0、1或2；并且
p为0。
12.根据权利要求1至2中任一项所述的化合物，其中
R1为CH3；
R2在每次出现时独立地选自–CH3、–CH2OH、–CH2F、–CH2OCH3、–CH2OCH2CH3、–CH2OCH2CH2CH3、–CH2OCH2-环丙基、–CH2OCH2CHF2、–CH2OCH2CF3、–CH2OCH2CH=CH2、–CH2SCH3、–CH2S(O)CH3、–CH2-S(O)2CH3、–CH2OC(O)OCH3、–CH2OC(O)OCH(CH3)2、–CH2OC(O)OC(CH3)3、–CH2OC(O)OCH2CH3、–CH2OC(O)CH3、–CH2OC(O)C(CH3)3、–C(O)OH、–C(O)OCH3、–CH2OC(O)NH2、–CH2OC(O)N(CH3)2、–C(O)NH2、–C(O)NHCH3、–C(O)N(CH3)2和–CH2N(CH3)2；
R3为CH3；
R4为苯基、吡啶基或环己基，各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–CN、–CH3和–CF3；
R5为H；
m为1；
n为0或1；并且
p为0。
13.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中
n为1，并且R3为甲基。
14.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中
R4为
Figure 749412DEST_PATH_IMAGE005
。
15.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物为
(4R*,9R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]氧杂二氮杂䓬-10(2H)-甲酰胺;
(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(羟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]氧杂二氮杂䓬-10(2H)-甲酰胺;
(4R*,9R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-4-(氟甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]氧杂二氮杂䓬-10(2H)-甲酰胺;
(4R*,9R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]氧杂二氮杂䓬-10(2H)-甲酰胺; 或
(4R*,9R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-4-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-2,9-二甲基-1-氧代-1,4,5,8,9,11-六氢吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[5,1-d][1,2,5]氧杂二氮杂䓬-10(2H)-甲酰胺；
或其药学上可接受的盐。
16.根据权利要求5所述的化合物，其中所述式II的化合物选自：
Figure DEST_PATH_IMAGE006
或其药学上可接受的盐。
17.一种式III的化合物：
Figure 103033DEST_PATH_IMAGE007
，
或其药学上可接受的盐，其中
Figure 25858DEST_PATH_IMAGE008
为单键或双键；
X为N-Rc；
R1为C1-C6-烷基；
R2在每次出现时独立地选自–OH、C1-C6-烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-环烷基和C0-C6-烷基-OR6，其中烷基和环烷基任选地被1、2或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–OH和卤素；
R3在每次出现时独立地选自C1-C6-烷基；
R4为(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基任选地被1、2、3、或4个基团取代，所述基团各自独立地选自卤素、–CN和C1-C6-卤代烷基；
R5为H；
R6选自H和C1-C6-卤代烷基；
Ra在每次出现时独立地选自H、–OH、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、–O-C1-C6-烷基和C1-C6-烷基-OH；
Rb在每次出现时独立地选自H和C1-C6-烷基；
Rc不存在，为H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-卤代烷基、或C1-C6-烷基-OH；
m为0或1；
n为0或1；并且
p为0。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中R4为苯基，其中R4任选地被1、2、或3个基团取代，所述基团各自独立地选自–F、–Br、–Cl、–I、–CN、–CF3和–CHF2。
19.根据权利要求17-18中任一项所述的化合物，其中R1为CH3；
R2选自：C1-4卤代烷基、C1-4烷基、CH2OH、CH(OH)CH3、CH(OH)CH2CH3、CH(OH)环丙基和CH2OCH2CHF2；
R3为CH3；
R4为
Figure 959179DEST_PATH_IMAGE009
；
R5为H；
Rc不存在，为H、C1-4烷基、CH2CH=CH2、CH2CHF2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、或CH2CH(OH)CH3；
m为0或1；并且
n为0或1。
20.一种药物组合物，包含根据权利要求1-19中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
21.根据权利要求1-19中任一项所述的化合物或根据权利要求20所述的药物组合物在制备用于在对其有需要的个体中治疗HBV感染的药物中的用途。
22.根据权利要求21所述的用途，其中所述治疗还包括向所述个体施用至少一种附加治疗剂，所述至少一种附加治疗剂选自：HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂、干扰素、病毒侵入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、亲环蛋白/TNF抑制剂、TLR-激动剂、HBV疫苗、以及它们的任何组合。
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