CN109777809A - 油菜BnaB1基因及其在调控分枝数和株型上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了油菜BnaB1基因及其在调控分枝数和株型上的应用，所述的基因BnaB1的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No:2所示，构建含该基因的植物转基因表达载体，并通过转基因技术将该基因转入植物细胞并表达，能有效增加植物的分枝；因此，将该基因转入农作物和园艺植物中，能分别提高其生物学产量和观赏价值，具有很好的应用潜力。

Description

油菜BnaB1基因及其在调控分枝数和株型上的应用

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及油菜BnaB1基因及其在调控分枝数和株型上的应用。

背景技术

分枝是植物的重要特性，在很大程度上，分枝影响植物的形态建成。单子叶植物的分蘖是一种特殊的分枝。在农业生产中，适宜的分蘖数目与粮食作物的高产密切相关。植物的分枝来源于叶腋中的侧芽。尽管侧生分生组织与茎顶端分生组织具有同样的发育潜力，但是侧芽经常形成具有更少叶片的休眠芽。一旦环境条件适合，休芽便可以被激活，形成分枝。分枝发育的调控赋予植物对于持续变化的环境条件的可塑性，这一过程受到严格而精细的调控。

植物分枝的形成大概包括了三个阶段(赵赫等，2012)：腋生分生组织的形成、腋芽的形成、腋芽的休眠和生长。AM的形成为植物分枝发育的基础与起始，通常情况产生在植物的近轴端(Long et al， 2000)。目前有关AM形成的起源有两种模式：一种是AM起源于SAM，即是从SAM分化而来的，它们保留了原有分生组织的特性(Steeves et al，1989)；另一种认为，AM是从叶腋处重新形成的，具有分化能力的新的组织(McConnell et al，1998)。目前的研究发现，一些植物的 AM的确起源于SAM，比如番茄；而组织学的纵向切片却发现，拟南芥的AM起源于叶腋叶柄上的一团细胞(Long et al，2000)。所以到目前为止，两种有关叶腋的形成模式是并存的(于延冲，2011)。AM 形成之后会形成腋芽，腋芽的形成首先是叶原基从AM的侧面形成 (即营养生长阶段)，然后花分生组织开始形成(即生殖生长阶段)。在拟南芥中，大多数茎生叶腋芽都有花的结构，侧枝便可能在它们短暂的休眠之后伸长形成。但是拟南芥大多数莲座叶的腋芽，则可能在植物的整个生长过程中均处于休眠状态。而腋芽的这种选择性休眠和生长，便是植物维持地上形态并同时响应环境信号的重要机制。激素的调控是腋芽的休眠的主要原因，腋芽内部的一些基因可作出响应，分生组织的活性受到了抑制。

近年来通过遗传学和分子生物学等手段，人们对植物分枝发育调控的分子机制认识也在不断深入，与此同时还发掘出了大量的，可以调控植物分枝发育的基因。尽管人们已经在植物分枝调控机制的研究中取得了一定进展，但是其调控机制仍然存在很多没有阐明的问题。本发明研究表明BnaB1作为一个正调控因子调控油菜分枝发育。这在一定程度上加深了人们对于植物分枝调控机制的理解。在油菜中深入研究分枝发育的调控机制可能为作物育种提供一定的借鉴。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种控制油菜分枝数的基因BnaB1及其编码蛋白，用以改良油菜的株型，提高油菜产量。

本发明具体通过以下技术方案实现：

本发明所提供的能够影响油菜分枝数的基因为BnaB1，来源于油菜，其核苷酸序列如下：

序列表中的SEQ ID No:1所示核苷酸序列；或

序列表中的SEQ ID No：1核苷酸序列经过一或几个碱基的取代、缺失或添加而衍生的序列，并且具有90％以上一致性且编码相同功能蛋白的DNA序列。

在本发明的另一方面，所述基因BnaB1的编码蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。

在本发明的另一方面，所述的基因BnaB1在控制农作物或园艺植物分枝中的应用。

优选的，所述的农作物选自油菜。

具体的所述的应用为：构建含有所述BnaB1基因的表达载体，以农杆菌介导法将其导入农作物或园艺植物中，使所述BnaB1基因在植物中表达，得到分枝数目改变的转基因植物。

本发明的有益效果为：

本发明提供了从油菜中获得控制植物分枝的BnaB1基因，构建含该基因的植物转基因表达载体，并通过转基因技术将该基因转入植物细胞并表达，能有效影响植物的分枝；因此，将该基因转入农作物和园艺植物中，能分别提高其生物学产量和观赏价值，具有很好的应用潜力。

附图说明

图1是本发明实施例1油菜叶片RNA电泳图；

图2是本发明实施例1油菜叶片RNA反转cDNA电泳图；

图3是本发明实施例2目的基因的扩增电泳图；

图4是本发明实施例2T克隆的阳性筛选电泳图；

图5是本发明实施例3选用EcoRI和XhoI酶切结果；

图6是本发明实施例4阳性苗检测电泳图；

图7是本发明实施例5中WT与BnaB1的发芽时间；

图8是本发明实施例5中WT与BnaB1的开花时间；

图9是本发明实施例5中WT与BnaB1的开花情况；

图10是本发明实施例5中WT与BnaB1的根长长度统计；

图11是本发明实施例5中WT与BnaB1的根长；

图12是本发明实施例5中WT与BnaB1的分枝数目统计；A莲座分枝；B主茎分枝；C总分枝；

图13是本发明实施例5中WT与BnaB1的分枝情况；

图14是本发明实施例5中各株系茎秆表达量结果图。

具体实施方式

下面将结合本发明具体的实施例，对本发明技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

1、实验材料与仪器

1.1植物材料与载体、菌株

油菜中双11号种植于重庆市北碚区油菜工程技术研究中心试验基地。拟南芥为哥伦比亚生态型野生型。

pGMD-T EasyVector T载体、DH5α大肠杆菌、pBin35SRed3植物表达载体和GV3101根瘤农杆菌。

1.2试剂及培养基

试剂：近岸蛋白质科技有限公司2xTaq Master Mix、生工Sangon Biotech总RNA抽提取试剂盒、天根生化公司胶回收试剂盒、天根生化公司质粒小提取试剂盒、ThermoScientific FastDigest EcoRI及XhoI、氯仿、无水乙醇、甘油、矿物油、蔗糖、CTAB、β-巯基乙醇、异戊醇、核酸染料、琼脂糖、loading buffer、DNA marker、表面活性剂SILWET L-77等。

LB液体培养基(1L)：胰蛋白胨(Tryptone)10g；酵母粉(Yeast Extract)5g；氯化钠(NaCl)10g，pH6.8，121℃灭菌20min。

LB固体培养基(1L)：LB液体培养基的基础上，加琼脂粉(agar) 10g，pH6.8。

YEB液体培养基(1L)：牛肉浸膏(Beef extract)5g，酵母粉(Yeast extract)1g，胰蛋白胨(Tryptone)，蔗糖(Sucrose)5g，一水硫酸镁MgSO₄·H₂O 0.5g，PH 6.8，121℃灭菌20min。

YEB固体培养基(1L)：YEB液体培养基的基础上，加琼脂粉(agar) 10g，pH6.8。

CTAB Buffer(1L)：CTAB 20g，Nacl 81.88g，EDTA(0.5M，pH8.0) 40mL，Tris-HCl(1M，pH8.0)100mL，121℃灭菌20min。

50x TAE Buffer(1L)：Tris 242g，Na₂EDTA·2H₂O 37.2g，冰醋酸57.1 mL。

抗生素：卡那霉素(kan)100mg/mL、链霉素(str)25mg/mL。

实施例1总RNA的提取及cDNA第一链的合成

选用生工Sangon Biotech总RNA抽提取试剂盒(参照步骤有改变) 操作，具体步骤：

(1)在油菜地里取新鲜的中双11号叶片50mg于2mL无RNAase 的离心管(EP)中，立即放入液氮中速冻和短期保存；

(2)提前预冷研钵、研棒和小勺，液氮低温中快速研磨叶片，然后转移到1.5mL无RNAase的EP中；

(3)加入500μL Lysis缓冲液，立即涡旋1min；

(4)转移溶液到gDNA Eliminator column收集管，室温1min，离心9000g，1min；

(5)转移收集管中的液体到新的1.5mL无RNAase的EP中，加 250μL无水乙醇，轻摇混匀；

(6)转移混液到RZ-10RNA Column收集管中，9000g，1min，弃废液；

(7)加500μLGT溶液(提前无水乙醇处理)到RZ-10RNA Column 收集管中，室温1min，离心9000g，1min，弃废液；

(8)加500μLNT溶液(提前无水乙醇处理)到RZ-10RNA Column 收集管中，室温1min，离心9000g，1min，弃收集管中的废液；

(9)将RZ-10RNA Column放回收集管中，空甩2min，弃收集管中的废液；

(10)转移RZ-10RNA Column到一个新的1.5mL无RNAase的离心管中，开盖挥发5min；

(11)加50μL去RNAase水，室温2min，离心9000g，2min。

琼脂糖凝胶电泳：按1％胶浓度比称取琼脂糖倒入三角瓶中，加入1x TAE缓冲液后微波炉中加热，待琼脂糖彻底溶解变澄清后取出冷却至50℃-60℃后按每100mL 1x TAE中加5μL核酸染料混匀，倒入插好小孔梳子的电泳槽中；待胶块完全凝固后小心拔出梳子，将胶块置于冰上；用移液枪取2μL RNA样品加入到2μl的Loading Buffer 中，混匀后点入小孔中；移液枪取3μL DNA Mark点入到空白小孔中做对照；电泳仪中加1x TAE并且没过胶块，启动电泳仪140V、400A 25 分钟；停止电泳，将胶块放入凝胶成像系统进行观察和拍照。

测浓度：采用紫外可见分光光度计，取1μL RNA测浓度。 RNA-80℃保存。

选用BIO-RAD公司反转录试剂盒，反应体系如下：

注：RNAtemplate加入的总量为1μg左右，加完样后混匀，在 PCR仪中进入反应程序。

反应程序为：Priming 25℃5min；Reverse transcription 46℃20 min；RTinactivation 95℃1min；Optional step 4℃。获得的cDNA-20℃保存。

取油菜叶片的RNA，并以此为基础扩增目的片段，检测RNA提取结果(图1)，片段清晰，可用于后续实验的操作。

Actin8检测得到的cDNA质量，Actin8引物序列如下：

反应体系如下：

反应程序：(1)预变性94℃5min；(2)变性94℃25s；(3) 退火57℃25s；(4)延伸72℃20s；(5)再延伸72℃5min；(6) 停止16℃1min；其中(2)-(4)循环30次，获得的产物可在4℃冰箱短期保存。

将RNA反转成cDNA链后，用Actin8检测cDNA质量(图2)，片段清晰，可用于后续实验的操作。

实施例2BnaB1的克隆

2.1设计引物，引物序列为：

以实施例1获得的cDNA为模板，用PCR仪来扩增目的片段。PCR 反应体系如下：

PCR反应程序：(1)预变性94℃5min；(2)变性94℃25s； (3)退火57℃25s；(4)延伸72℃55s；(5)再延伸72℃5min； (6)停止16℃1min；其中(2)-(4)循环30次。

琼脂糖凝胶电泳：按1％胶浓度比称取琼脂糖倒入三角瓶中，加入1X TAE缓冲液后微波炉中加热，待琼脂糖彻底溶解变澄清后取出冷却至50℃-60℃后按每100mL 1X TAE中加5μL核酸染料混匀，倒入插好大孔梳子的电泳槽中；待胶块完全凝固后小心拔出梳子，并将胶块置于电泳槽中；用移液枪取50μL(全部)PCR产物样品点入大孔中；移液枪另取5μLDNA Mark点入到空白胶孔中做对照；电泳仪中加1XTAE并且没过胶块，启动电泳仪140V、400A 25分钟；停止电泳，将胶块放入凝胶成像系统进行观察和拍照。将胶块放入切胶仪中，切取目的基因(±750bp)片段。

目的片段的回收选用天根胶回收试剂盒，操作步骤如下：

(1)向吸附柱CA2中加入500μL平衡液BL，离心12000g，1min, 弃废液；

(2)从琼脂糖凝胶中切下目的DNA条带，放入新的2mLEP中，称量加等体积的PN(0.1g视为100μL)，50℃水浴，期间翻转EP 使其充分溶解；

(3)溶解后溶液加入到吸附柱CA2中，室温2min，离心12000g， 1min，倒掉废液；

(4)向吸附柱中加入600μL漂洗液PW(事先无水乙醇处理)，离心12000g，1min，倒掉废液；

(5)重复步骤(4)；

(6)将吸附柱放回收集管中，空甩12000g，2min，倒掉废液，开盖挥发；

(7)将吸附柱放入新的1.5mLEP中，向吸附膜中间位置悬空滴加50μL ddH₂O(60℃预热)，室温2min，离心12000g，2min。

目的基因进行PCR扩增后，对目的片段进行胶回收。扩增结果如图3。扩增重复了两个样本，均在±750bp有明显条带，故扩增出该目的基因BnaB1。

2.2连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞

(1)-80℃大肠杆菌感受态细胞置于冰上5min，使大肠杆菌感受态细胞完全溶解；

(2)取50μL大肠杆菌感受态细胞并加入10μL的连接产物，轻轻混匀，冰浴30min；

(3)42℃水浴锅热激1min，冰浴2min；

(4)加入800μL LB液体培养基，37℃摇床，180rmp震荡培养 1.5h；

(5)5000g离心5min，超净台上倒掉700μL的上清液，用移液枪重悬沉淀和上清，将重悬液加入到含kan抗性的LB固体培养基中(提前37℃预热)，用灭菌冷却后的涂布棒轻轻涂布均匀；

(6)37℃培养箱倒置培养10h。

在2mL的灭菌EP中加入600μL含kan抗性的LB液体培养基，用10μL枪头挑取单菌落于2mL的EP中，37℃，250rmp恒温摇床中震荡培养8h至浑浊。通过菌液PCR来检测阳性克隆。使用引物M13 鉴定目的基因是否成功导入。引物序列如下：

PCR体系：

PCR反应程序：(1)预变性94℃5min；(2)变性94℃25s； (3)退火57℃25s；(4)延伸72℃55s；(5)再延伸72℃5min； (6)停止16℃1min；其中(2)-(4)循环30次。

当目的基因转入到T-克隆载体后，对阳性克隆菌液的筛选，选用引物组合为：(1)M13R+M13F；(2)QW703R+QW703F；(3) M13R+QW703F；(4)QW703R+M13F。琼脂糖凝胶电泳(图4)。挑选 12份材料进行PCR鉴定，若其在±750bp有明显条带，则为阳性克隆，相反，则为假阳性。结果显示，材料编号为1、2、3、6、7、8 的为阳性，其余6个为假阳性。实验中，选取其中编号为1的进行后续操作。

实施例3超表达载体的构建

3.1质粒的提取

分别提取测序正确含目的基因菌液的质粒和表达载体 (pBin35SRed3)的质粒，选取天根试剂盒，操作步骤如下：

(1)向吸附柱CP3中加500μL平衡液BL，离心12000g，1min，倒掉废液；

(2)取菌液6mL与3mL的EP中，离心12000g，弃上清；

(3)加250μL的P1(4℃保存)轻轻打匀沉淀；

(4)加250μL的P2，温和上下翻转3min；

(5)加350μL的P3，立即上下翻转，充分混匀，离心12000g， 10min；

(6)取上清到吸附柱CP3中，离心12000g，1min，倒掉废液；

(7)向CP3中加600μL漂洗液PW，离心12000g，1min，倒掉废液；

(8)重复步骤(7)；

(9)CP3空甩，离心12000g，5min，开盖挥发漂洗液；

(10)CP3在一个干净的1.5mLEP中，加50μLddH2O(60℃预热)，室温3min，离心12000g，2min，-20℃保存。

3.2引物设计

过表达载体为pBin35SRed3载体，设计双酶切引物，加入的酶切位点为EcoRI和XhoI。

引物序列为：

3.3目的片段与载体的双酶切

含目的基因质粒双酶切体系：

表达载体质粒双酶切体系：

上述酶切体系在37℃培养箱中酶切2h。

连接T载之后提取含目的基因的质粒，选用EcoRI和XhoI酶切结果(图5)。

实施例4农杆菌介导的拟南芥转化

4.1拟南芥的培养

(1)营养土在121℃高温灭菌40min，冷却后，移至花盆中，再用配好的营养液浸透灭菌后的土壤；

(2)4℃春化2天的拟南芥种子播种于灭菌后的土壤中，并用保鲜膜封好，以防水分丢失；

(3)播种后移至光照培养箱中(时间：16h/8h；湿度：40％/60％；温度：22℃/16℃；光照：10000LX/0LX)，种子萌发后去掉保鲜膜，每周浇一次营养液和一次水，直至拟南芥开花结果。

4.2浸花法转化拟南芥

(1)取1mL含重组质粒的农杆菌菌液于100mL含Kan的LB液体培养基中28℃，200rmp震荡培养12h；

(2)5000rmp室温离心20min，弃上清，用等体积的5％蔗糖溶液重悬农杆菌沉淀，再加0.2‰的表面活性剂，混匀；

(3)剪掉拟南芥荚果及开花，将拟南芥花序浸于重悬的农杆菌菌液30s，盖上保鲜膜，暗处理1d；

(4)去掉保鲜膜，移到光照培养箱中正常培养；

(5)一周后，重复步骤(1)～(5)再次转化，并且如此重复两周。

(6)当拟南芥荚果开始变黄裂开时，搜集脱落的种子，并于干燥通风的地方干燥种子。当植株整体上干枯时，将整个植株剪下，包好，置于烘箱中30℃烘2d，收集种子，种子4℃存放。

4.3阳性苗检测

在T0代种子中，绿色荧光透过红色滤光片，肉眼可见暗色和显红光的种子，挑选显红光的种子出来单独播种。将T0代种子直播于营养土中，光照培养箱中培养，抽薹后取其叶片提DNA，PCR鉴定阳性与否。

4.4 PCR鉴定

引物组成：(1)QW586F+QW586R；(2)QW703F+QW703R；(3) QW586F+QW703R；(4)QW586R+QW703F。

显红光的种子播种后取叶片提DNA进行PCR鉴定，选用引物组合为：(1)QW586F+QW586R；(2)QW703F+QW703R；(3) QW586F+QW703R；(4)QW586R+QW703F。琼脂糖凝胶电泳结果如图6。对播种的12份材料进行PCR鉴定，若其在±750bp有明显条带，则为转基因成功的阳性苗。结果显示除编号1、7和8外，剩余均为阳性苗。

实施例5转基因拟南芥表型观察

播种哥伦比亚野生型种子(WT)和转基因T3代种子(BnaB1)。统计生长过程中，转基因拟南芥的发芽、开花、根长及分枝的情况。

取野生型WT和T3代超表达BnaB1转基因拟南芥的主茎，跑定量PCR，分析目的基因在各株系的表达情况，引物设计如下：

RT-PCR BnaB1体系：

AtActnin7为内参：

RT-PCR程序为：

(1)94℃2min；(2)94℃15s；(3)60℃30s；+Plant Read； (4)GOTO 2,44moretimes；(5)Melt Curve 65℃to 95℃，increase 0.5℃，；for 0:05+Plate Read END。

在光照培养箱中培养拟南芥并统计发芽时间。发芽时间从播种日算起，每天定时观察种子的发芽情况，当看见拟南芥的两片绿色子叶时，记为发芽。结果显示(图7)所示，WT拟南芥的发芽时间平均为8.09±2.22天，而BnaB1的发芽时间平均为10.70±3.84天，BnaB1比WT平均晚发芽了2.61天，相比晚了32.26％。

在光照培养箱中培养拟南芥并统计开花时间。从拟南芥发芽之日起，直到见到拟南芥第一朵花开，记为开花。统计结果显示(图8；图9)：WT拟南芥的开花时间平均为35.00±3.01天，而BnaB1的开花时间平均为38.31±5.18天，BnaB1比WT平均晚开花3.31天，相比晚了9.46％。

在培养皿中培养拟南芥，置于光照培养箱中，发芽一周后统计各自的根长情况并在倒置显微镜下拍照。统计结果显示(图10；图11)： WT拟南芥的根长平均为1.56±0.63cm，而BnaB1的根长平均为0.35 ±0.13cm，BnaB1比WT平均短了1.21cm，相比短了77.56％。

在光照培养箱中培养拟南芥直至快干枯收种的时候，统计莲座分枝和主茎分枝的数目。统计结果显示(图12；图13)：WT拟南芥的莲座分枝平均为5.33±1.25个，而BnaB1的莲座分枝平均为7.41± 2.45个，BnaB1比WT莲座分枝平均多了2.08个，相比增加了39.02％；WT拟南芥的主茎分枝平均为4.17±0.69个，而BnaB1的主茎分枝平均为5.41±1.44个，BnaB1比WT的主茎分枝平均多了1.24个，相比增加了29.74％；WT拟南芥的总分枝平均为9.50±1.61个，而BnaB1 的总分枝平均为12.82±2.58个，BnaB1比WT的总分枝数平均多了3.32个，相比增加了34.95％。

取WT与各株系超表达BnaB1转基因拟南芥主茎的混样，基因 BnaB1的表达均是显著增加(图14)。其中株系3因为实验原因，误差太大，在此记为0。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

序列表

<110> 西南大学

<120> 油菜BnaB1基因及其在调控分枝数和株型上的应用

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 705

<212> DNA

<213> 基因(BnaB1)

<400> 1

atggctgttg aagcgtctac aaaacgtccc agaggatctc agtaccttga cacagacgct 60

aacttcgcgc caactgttaa acggaggtcc ggcgcgtttg gtttatcatc atcgttgata 120

aacgttgaac tcttatgtca gattcaaaac cagcaacaat tggagattga taggttcgta 180

gctcagcaaa cggagaagct taaaatagat attgaagcac gtcagcgaac gcaaacgatg 240

atgctagcgt ctgcggttca aaacgcgata gccaagaagg taaaagagaa agacgacgaa 300

atcgtacgga taagaaacat taacttagtt ttacaagagc gagtcaagag tctctatgtt 360

gaaaaccaaa tctggcgcga tatcgctcaa agcaacgaag aacacgctaa caaccttaga 420

acaaacctcg accaagttct ggctcaaatg gaaacgttac aaaccgtagc aaccgctgta 480

gaagacgatg ccgaatctag ctgcggaagt tgggttgaag gtggtgaagc tataagggcg 540

gttagtagcg gttgcaagcg gtgcggtgag agagaaggga gtgtgttggt gttaccttgt 600

cgtcatttgt gtttgtgtac ggtttgtggt tcggcttcgt tacgaacttg tccggtttgt 660

ggttcggtca tgaacgctag tgtacatgtt aacatgtctt cttga 705

<210> 2

<211> 234

<212> PRT

<213> 多肽(BnaB1)

<400> 2

Met Ala Val Glu Ala Ser Thr Lys Arg Pro Arg Gly Ser Gln Tyr Leu

1 5 10 15

Asp Thr Asp Ala Asn Phe Ala Pro Thr Val Lys Arg Arg Ser Gly Ala

20 25 30

Phe Gly Leu Ser Ser Ser Leu Ile Asn Val Glu Leu Leu Cys Gln Ile

35 40 45

Gln Asn Gln Gln Gln Leu Glu Ile Asp Arg Phe Val Ala Gln Gln Thr

50 55 60

Glu Lys Leu Lys Ile Asp Ile Glu Ala Arg Gln Arg Thr Gln Thr Met

65 70 75 80

Met Leu Ala Ser Ala Val Gln Asn Ala Ile Ala Lys Lys Val Lys Glu

85 90 95

Lys Asp Asp Glu Ile Val Arg Ile Arg Asn Ile Asn Leu Val Leu Gln

100 105 110

Glu Arg Val Lys Ser Leu Tyr Val Glu Asn Gln Ile Trp Arg Asp Ile

115 120 125

Ala Gln Ser Asn Glu Glu His Ala Asn Asn Leu Arg Thr Asn Leu Asp

130 135 140

Gln Val Leu Ala Gln Met Glu Thr Leu Gln Thr Val Ala Thr Ala Val

145 150 155 160

Glu Asp Asp Ala Glu Ser Ser Cys Gly Ser Trp Val Glu Gly Gly Glu

165 170 175

Ala Ile Arg Ala Val Ser Ser Gly Cys Lys Arg Cys Gly Glu Arg Glu

180 185 190

Gly Ser Val Leu Val Leu Pro Cys Arg His Leu Cys Leu Cys Thr Val

195 200 205

Cys Gly Ser Ala Ser Leu Arg Thr Cys Pro Val Cys Gly Ser Val Met

210 215 220

Asn Ala Ser Val His Val Asn Met Ser Ser

225 230

Claims (5)

1.一种油菜BnaB1基因，其特征在于，所述的基因BnaB1的碱基序列如下：

序列表中的SEQ ID No:1所示核苷酸序列；或

序列表中的SEQ ID No：1核苷酸序列经过一或几个碱基的取代、缺失或添加而衍生的序列，并且具有90％以上一致性且编码相同功能蛋白的DNA序列。

2.根据权利要求1所述的一种油菜BnaB1基因，其特征在于，所述基因BnaB1的编码蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。

3.权利要求1所述的基因BnaB1在控制农作物或园艺植物分枝中的应用。

4.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的农作物选自油菜。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，构建含有所述BnaB1基因的表达载体，以农杆菌介导法将其导入农作物或园艺植物中，使所述BnaB1基因在植物中表达，得到分枝数目改变的转基因植物。