CN109776633B - 一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents
一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109776633B CN109776633B CN201910202888.XA CN201910202888A CN109776633B CN 109776633 B CN109776633 B CN 109776633B CN 201910202888 A CN201910202888 A CN 201910202888A CN 109776633 B CN109776633 B CN 109776633B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- elution
- eluent
- gradient
- sub
- fractions
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用，属于医药技术领域。该苯丙素类化合物为苯丙素化合物A至苯丙素化合物I中的任意一种，上述苯丙素类化合物的制备方法是将经兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行多次分离后再经HPLC半制备所得，纯度较高。上述苯丙素类化合物均具有一定的抗炎活性，可用于制备抗炎药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体而言，涉及一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用。
背景技术
毛茛科的升麻族(Tribe Cimicifugeae)包含5属：铁破锣属、黄三七属、疏花升麻属、升麻属和类叶升麻属。升麻属(Cimicifuga)是升麻族中最大的属，全世界约有28种，中国约有9种，广泛分布于北部温带地区。升麻是我国著名的传统中药，最早见于《神农本草经》。在《神农本草经》、《本草纲目》、《中医药大辞典》中，均言“升麻主升”之性，而根据升麻的性味及主治，其亦有“主清主降”的作用。
2015版《中国药典》一部收录升麻(Cimicifuga foetida)、兴安升麻(Cimicifugadahurica)、大三叶升麻(Cmicifuga heracleifolia)的干燥根茎为药材升麻。升麻味辛、微甘，微寒，具有发表透疹、清热解毒、升举阳气之功效；主治风热头痛、齿痛、口疮、咽喉肿痛、麻疹不透、阳毒发斑、脱肛、子宫脱垂。升麻属植物的主要化学成分包括三萜皂苷类，苯丙素类，色原酮类以及其他类化合物。
迄今为止，从升麻属植物中分离鉴定出约450个化合物。现代药理学研究表明，升麻属植物的药理活性包括抗肿瘤、抗氧化、抗骨质疏松及抗血管生成等药理活性，临床上主要用于治疗妇女围绝经期综合征。目前我国上市的升麻现代制剂有希明婷片，其成分为升麻总皂苷，用于治疗围绝经期综合征，改善烘热汗出、烦躁易怒、失眠、胁痛、头晕耳鸣、腰膝酸痛、忧郁寡欢等症状。
升麻属植物的化学成分和药理活性一直是国内外研究热点。迄今，国内外学者对升麻属植物中化学成分的研究主要集中在三萜及其苷类成分上，对其药理活性研究则以抗肿瘤、抗骨质疏松为主。
发明内容
本发明的第一目的包括提供一种苯丙素类化合物，此苯丙素类化合物均为首次从升麻中提取得到的具有抗炎作用的全新化合物。
本发明的第二目的包括提供一种上述苯丙素类化合物的制备方法，该方法能够有效地制备纯的较高的将苯丙素类化合物。
本发明的第三目的包括提供一种上述苯丙素化合物的应用，例如可以将其用于制备抗炎药物。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明提出一种苯丙素类化合物，该苯丙素类化合物为苯丙素化合物A至苯丙素化合物I中的任意一种，苯丙素化合物A至苯丙素化合物I的化学结构式依次为：
此外，本发明还提出了一种苯丙素类化合物A至苯丙素类化合物I中的任意一种苯丙素类化合物的制备方法，包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；然后按(a)和/或(b)的步骤制备苯丙素类化合物：
(a)、将CD-2组分进行硅胶柱洗脱，得到2A至2M共计13个子组分；随后：
将2J子组分进行ODS柱分离，得到2J1至2J14共计14个子馏分；再将2J3子馏分再次进行ODS柱分离，得到2J3A至2J3K共计11个子馏分，再将2J3E子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物A或苯丙素化合物B或苯丙素化合物C；和/或，将2J4子馏分、2J6子馏分至2J10子馏分中的至少一种子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物F或苯丙素化合物D或苯丙素化合物E。
和/或，将2H子组分进行ODS柱分离，得到2H1至2H15共计15个子馏分；将2H10子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物G。
和/或，将2L子组分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物I。
(b)、将CD-3组分进行硅胶柱洗脱，得到3A至3L共计12个子组分；随后：将3G子组分进行ODS柱分离，得到3G1至3G7共计7个子馏分；将3G2子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物H。
此外，本发明还提出了一种上述苯丙素类化合物的应用，例如可将其用于制备抗炎药物。
本申请提供的苯丙素类化合物及其制备方法与应用的有益效果包括：
本申请提供的苯丙素类化合物均为首次从升麻中提取得到的具有抗炎作用的全新化合物，拓宽了升麻属植物中化学成分的研究。上述苯丙素类化合物均是将经兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行多次分离后再经HPLC半制备所得，纯度较高，纯度均能达到95％以上。上述苯丙素类化合物均具有一定的抗炎活性，可用于制备抗炎药物。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1至图9依次为本申请实施例制备得到的苯丙素化合物A至苯丙素化合物I的高效液相色谱图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请实施例提供的苯丙素类化合物及其制备方法与应用进行具体说明。
本申请提供的苯丙素类化合物为苯丙素化合物A至苯丙素化合物I中的任意一种，苯丙素化合物A至苯丙素化合物I的化学结构式依次为：
本申请中上述各苯丙素类化合物均是从采自黑龙江大兴安岭的兴安升麻(Cimicifuga dahurica)的根茎中分离得到。
上述各苯丙素类化合物的制备方法可包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；然后按(a)和/或(b)的步骤制备苯丙素类化合物：
(a)、将CD-2组分进行硅胶柱洗脱，得到2A至2M共计13个子组分；随后：
将2J子组分进行ODS柱分离，得到2J1至2J14共计14个子馏分；再将2J3子馏分再次进行ODS柱分离，得到2J3A至2J3K共计11个子馏分，再将2J3E子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物A或苯丙素化合物B或苯丙素化合物C；和/或，将2J4子馏分、2J6子馏分至2J10子馏分中的至少一种子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物F或苯丙素化合物D或苯丙素化合物E。
和/或，将2H子组分进行ODS柱分离，得到2H1至2H15共计15个子馏分；将2H10子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物G。
和/或，将2L子组分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物I。
(b)、将CD-3组分进行硅胶柱洗脱，得到3A至3L共计12个子组分；随后：将3G子组分进行ODS柱分离，得到3G1至3G7共计7个子馏分；将3G2子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物H。
值得说明的是，上述标号(a)和(b)并非对制备过程进行先后顺序限定，而是代表作为同一级别的选择性制备。
本申请中所提及的“提取物”可通过将兴安升麻的根茎进行回流提取后得到。在此过程中，回流过程始终保持液体微沸，提取时间例如可以为1.8-2.2h。优选地，为提高提取物的得率，回流提取的次数可以为多次(例如2次)，也即将第一次回流提取后的残留物重新按照相同的提取条件再次进行提取，依次类推。
作为可选地，回流提取过程中所用的提取剂为醇类，例如甲醇或乙醇等，鉴于乙醇较甲醇易得且毒性相对较小，在实际使用中，优选采用乙醇。
在一些实施方式中，本申请中的HP-20大孔树脂洗脱的条件可以包括：以乙醇-水为洗脱剂，按乙醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为0％、28-32％以及94-96％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均可以为24.5-25.5L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应分别得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分。
在一些优选的实施方式中，HP-20大孔树脂洗脱的条件中，乙醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为0％、30％和95％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为25L。
作为参考地，本申请中HP-20大孔树脂可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为20cm，洗脱柱中填料的高为78-82cm(优选为80cm)。大孔树脂洗脱可采用常压洗脱(也即不进行任何加压操作)。该HP-20大孔树脂填料例如可选自Diaion HP-20(MitsubishiChemical Co.,Tokyo,Japan)。
在一些实施方式中，上述CD-2组分进行硅胶柱洗脱的条件可以包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、84.5-85.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％、49.5-50.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均可以为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2A至2M共计13个子组分。
在一些优选的实施方式中，CD-2组分进行硅胶柱洗脱的条件中，二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、97％、95％、90％、85％、70％、60％、50％以及0％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为400mL。
值得说明的是，在CD-2组分进行硅胶柱洗脱过程中，还可向二氯甲烷-甲醇组成的洗脱剂中加入少许额外的水，以调节洗脱体系的极性。水与二氯甲烷的体积比可依次为0：100、0：96.5-97.5、0：94.5-95.5、0.8-1.2：89.5-90.5、1.3-1.7：84.5-85.5、4.8-5.2：69.5-70.5、7.8-8.2：59.5-60.5、9.8-10.2：49.5-50.5和0:0。
作为参考地，CD-2组分进行硅胶柱洗脱中所用的硅胶柱可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为8.5cm，洗脱柱中硅胶填料的高为100-120cm(优选110cm)。其中，硅胶填料可采用目数为200-300的硅胶。作为可选地，上述硅胶例如可选自Silica gel(200-300mesh,Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.,Shandong,China)。本申请中，CD-2组分进行硅胶柱洗脱过程采用常压洗脱。
在一些实施方式中，2J子组分进行ODS柱分离的条件可以包括：洗脱过程以甲醇-水为洗脱剂，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为19-21％、24-26％、29-31％、34-36％、39-41％、44-46％、49-51％、54-56％以及10％0的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均可以为350-450mL(优选为400mL)，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2J1至2J14共计14个子馏分。
在一些优选的实施方式中，2J子组分进行ODS柱分离的条件中，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％以及100％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为400mL。
作为参考地，2J子组分进行ODS柱分离过程中的ODS柱可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为16-20cm(优选为18cm)。作为可选地，上述ODS填料例如可选自：octadecyl silane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。2J子组分进行ODS柱分离过程优选采用加压洗脱。
在一些实施方式中，2J3子馏分再次进行ODS柱分离的条件可以包括：以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为28-32％、38-42％、48-52％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/3-1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2J3A至2J3K共计11个子馏分。
在一些优选的实施方式中，2J3子馏分再次进行ODS柱分离的过程中，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为30％、40％、50％以及100％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为400mL。
作为参考地，2J3子馏分再次进行ODS柱分离过程中的ODS柱也可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为16-20cm(优选为18cm)。该洗脱过程优选采用加压洗脱。该ODS填料也可选自：octadecyl silane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。
本申请中，2J3E子馏分的半制备过程例如可以包括：以18-22vt％(优选为20vt％)的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物A、苯丙素化合物B和苯丙素化合物C。该三种苯丙素化合物在HPLC图谱中为体积浓度百分比最高的三个保留峰且按先后出峰顺序依次对应。
作为参考地，上述半制备过程中，进样量可以为15-25μL(优选20μL)，流速可以设置为2.8-3.2mL/min(优选3mL/min)。
作为参考地，按上述半制备条件，苯丙素化合物A、苯丙素化合物B和苯丙素化合物C的保留时间依次为32.9min、29.2min和27.9min，值得说明的是，根据实验条件的差异，该保留时间可能稍有波动，但整体谱图趋势应当一致。
作为可选地，上述半制备过程中半制备柱的型号例如可以为：Phenomenex GeminiC18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
本申请中，2J4子馏分、2J6至2J10子馏分均可各自单独制备得到苯丙素化合物F、苯丙素化合物D和苯丙素化合物E。
其中，苯丙素化合物F可通过以下方式得到：将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分中的任意子馏分以12-18vt％(优选为15vt％)的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，即可得到苯丙素化合物F。作为参考地，该半制备过程中，进样量可以为25-35μL(优选30μL)，流速可以设置为2.8-3.2mL/min(优选3mL/min)，半制备柱的型号也可为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,LosAngeles,USA)。
苯丙素化合物D可通过以下方式得到：将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分中的任意子馏分以32-38vt％(优选为35vt％)的甲醇溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，即可得到苯丙素化合物D。作为参考地，该半制备过程中，进样量可以为25-35μL(优选30μL)，流速可以设置为2.8-3.2mL/min(优选3mL/min)，半制备柱的型号也可为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
苯丙素化合物E可通过以下方式得到：将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分中的任意子馏分以18-22vt％(优选为20vt％)的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，即可得到苯丙素化合物E。作为参考地，该半制备过程中，进样量可以为25-35μL(优选30μL)，流速可以设置为2.8-3.2mL/min(优选3mL/min)，半制备柱的型号也可为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
作为参考地，按上述半制备条件，苯丙素化合物F、苯丙素化合物D和苯丙素化合物E的保留时间依次为27.9min、35.6min和15.3min，值得说明的是，根据实验条件的差异，该保留时间可能稍有波动，但整体谱图趋势应当一致。
在一些实施方式中，2H子组分进行ODS柱分离的条件可以包括：洗脱过程以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为9-11％、14-16％、19-21％、24-26％、29-31％、34-36％、39-41％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/3-1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2H1至2H15共计15个子馏分。
在一些优选的实施方式中，2H子组分进行ODS柱分离的过程中，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％以及100％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为400mL。
作为参考地，2H子组分进行ODS柱分离过程中的ODS柱也可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为16-20cm(优选为18cm)。作为可选地，上述ODS填料例如也可选自：octadecyl silane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。2H子组分进行ODS柱分离的过程优选采用加压洗脱。
本申请中，2H10子馏分的半制备过程例如可以包括：以32-38vt％(优选为35vt％)的甲醇溶液(含0.1％甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物G。
作为参考地，该半制备过程中，进样量不作具体要求，流速可以为2.8-3.2mL/min(优选为3mL/min)，该苯丙素化合物G在上述半制备条件下的保留时间为33.5min，值得说明的是，根据实验条件的差异，该保留时间可能稍有波动，但整体谱图趋势应当一致。
作为可选地，该半制备过程中半制备柱的型号也可为：Phenomenex GeminiC18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
本申请中，2L子组分的半制备过程例如可以包括：以32-38vt％(优选为35vt％)的甲醇溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物I。
作为参考地，按上述半制备条件，苯丙素化合物I的保留时间为36.3min，值得说明的是，根据实验条件的差异，该保留时间可能稍有波动，但整体谱图趋势应当一致。
作为可选地，该半制备过程中半制备柱的型号也可为：Phenomenex GeminiC18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
在一些实施方式中，CD-3组分进行硅胶柱洗脱的条件可以包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、98.5-99.5％、97.5-98.5％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、79.5-80.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到3A至3L共计12个子组分。
在一些优选的实施方式中，CD-3组分进行硅胶柱洗脱的过程中，二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、99％、98％、97％、95％、90％、80％、70％、60％以及0％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为400mL。
作为参考地，CD-3组分进行硅胶柱洗脱中所用的硅胶柱可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为12cm，洗脱柱中硅胶填料的高为50-60cm(优选55cm)。其中，硅胶填料可采用目数为200-300的硅胶。作为可选地，上述硅胶也可选自Silica gel(200-300mesh,Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.,Shandong,China)。该过程中采用加压洗脱。
在一些实施方式中，3G子组分进行ODS柱分离的条件可以包括：以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为48-52％、58-62％、68-72％以及78-82％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为850-950mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到3G1至3G7共计7个子馏分。
在一些优选的实施方式中，3G子组分进行ODS柱分离的过程中，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为50％、60％、70％以及80％，每个梯度所用洗脱剂的体积均为900mL。
作为参考地，3G子组分进行ODS柱分离过程中的ODS柱可按以下方式进行设置：洗脱柱的直径为5cm，洗脱柱的高为45-55cm(优选为50cm)。作为可选地，上述ODS填料例如可选自：octadecyl silane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。该洗脱过程优选采用加压洗脱。
本申请中，3G2子馏分的半制备过程例如可以包括：以16-20vt％(优选为18vt％)的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物H。
作为参考地，上述半制备过程中，进样量可以为30-40μL(优选35μL)，流速可以设置为2.8-3.2mL/min(优选3mL/min)。
按上述半制备条件，苯丙素化合物H的保留时间为25.8min，值得说明的是，根据实验条件的差异，该保留时间可能稍有波动，但整体谱图趋势应当一致。
作为可选地，上述半制备过程中半制备柱的型号也可以为：Phenomenex GeminiC18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)。
经上述方法得到的苯丙素类化合物的纯度均能达到95％以上。
此外，本申请还提供了上述各苯丙素类化合物的应用，所得的9种苯丙素类化合物均具有一定的抗炎效果，以对PGE2的抑制效果为参照时，其中的苯丙素类化合物D至苯丙素类化合物I具有更为明显的抗炎效果。在实际应用中，上述9种苯丙素类化合物均可用于制备抗炎药物。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例
以采自黑龙江大兴安岭的兴安升麻(Cimicifuga dahurica)的根茎(19.5kg)为原料，以乙醇为提取剂进行两次回流提取，每次2h，合并两次所得的提取液，得到2.8kg的提取物。
将上述提取物进行HP-20大孔树脂常压洗脱：以乙醇-水为洗脱剂，按乙醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为0％、30％和95％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均为25L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应分别得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分。
该过程中，洗脱柱的直径为20cm，洗脱柱中填料的高为80cm，该HP-20大孔树脂填料选自Diaion HP-20(Mitsubishi Chemical Co.,Tokyo,Japan)。
将上述CD-2组分(102g)进行硅胶柱常压洗脱：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、97％、95％、90％、85％、70％、60％、50％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为400mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2A至2M共计13个子组分。
此过程中，硅胶柱的直径为8.5cm，填料的高为110cm，硅胶选自Silica gel(200-300mesh,Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.,Shandong,China)。
将2J子组分(4.9g)进行ODS柱加压分离：以甲醇-水为洗脱剂，甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为400mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2J1至2J14共计14个子馏分。
此过程中，洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为18cm。ODS填料选自：octadecylsilane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。
将2J3子馏分(305mg)再次进行ODS柱加压分离：以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为30％、40％、50％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为400mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2J3A至2J3K共计11个子馏分。
此过程中，洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为18cm。ODS填料选自：octadecylsilane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。
将2J3E子馏分的进行半制备：以20vt％的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，进样量为20μL，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间依次为32.9min、29.2min和27.9min的苯丙素化合物A(2.8mg)、苯丙素化合物B(11.7mg)和苯丙素化合物C(3.8mg)。制备所得的苯丙素化合物A、苯丙素化合物B和苯丙素化合物C的高效液相色谱谱图(以20wt％乙腈为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图1至图3所示。
将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分分别或均以15vt％的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，进样量为30μL，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为27.9min的苯丙素化合物F(4.5mg)。制备所得的苯丙素化合物F的高效液相色谱谱图(以25wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图4所示。
将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分分别或均以35vt％的甲醇溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，进样量为30μL，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为35.6min的苯丙素化合物D(11.7mg)。制备所得的苯丙素化合物D的高效液相色谱谱图(以35wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图5所示。
将2J4子馏分、2J6至2J10子馏分分别或均以20vt％的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，进样量为30μL，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为15.3min的苯丙素化合物E(13.6mg)。制备所得的苯丙素化合物E的高效液相色谱谱图(以40wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图6所示。
将2H子组分(2.0g)进行ODS柱加压分离：以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为400mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到2H1至2H15共计15个子馏分。
此过程中，洗脱柱的直径为3cm，洗脱柱的高为18cm。ODS填料选自：octadecylsilane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。
将2H10子馏分进行半制备：以35vt％的甲醇溶液(含0.1％甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为33.5min的苯丙素化合物G(21.3mg)。制备所得的苯丙素化合物G的高效液相色谱谱图(以35wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图7所示。
将2L子组分(300mg)进行半制备：以35vt％的甲醇溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex GeminiC18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为36.3min的苯丙素化合物I(4.8mg)。制备所得的苯丙素化合物I的高效液相色谱谱图(以35wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图8所示。
将CD-3组分(534.5g)进行硅胶柱加压洗脱：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按二氯甲烷在洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、99％、98％、97％、95％、90％、80％、70％、60％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为400mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到3A至3L共计12个子组分。
此过程中，洗脱柱的直径为12cm，洗脱柱的高为55cm。硅胶选自Silica gel(200-300mesh,Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.,Shandong,China)。
将3G子组分(35.3g)进行ODS柱加压分离：以甲醇-水为洗脱剂，按甲醇在洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为50％、60％、70％以及80％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为900mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到3G1至3G7共计7个子馏分。
此过程中，洗脱柱的直径为5cm，洗脱柱的高为50cm。ODS填料选自：octadecylsilane(ODS)silica gel(12nm,S-50μm,YMC Ltd.,Tokyo,Japan)。
将3G2子馏分(320mg)进行半制备：以18vt％的乙腈溶液(含有0.1vt％的甲酸)为洗脱剂进行HPLC半制备等度分离，进样量为35μL，流速为3mL/min，半制备柱的型号为：Phenomenex Gemini C18column(5μm,φ10.0×250mm；Phenomenex Inc.,Los Angeles,USA)，得到保留时间为25.8min的苯丙素化合物H(4.0mg)。制备所得的苯丙素化合物H的高效液相色谱谱图(以52wt％甲醇为洗脱剂进行等度洗脱)分别如图9所示。
试验例1
对实施例所得的苯丙素化合物A至I(以下分别对应化合物1-9)进行测定，包括核磁共振测定、质谱测定以及部分理化性能测定。其中，核磁共振测试结果如表1至表3所示：
表1 化合物1-3的1H and 13C NMR数据(1H:600MHz；13C:150MHz,in DMSO-d6)
表2 化合物4-6的1H and 13C NMR数据(1H:600MHz；13C:150MHz,in CD3OD)
表3 化合物7,9的1H and 13C NMR数据(1H:600MHz；13C:150MHz,in CD3OD)，化合物8的1H and 13C NMR数据(1H:600MHz；13C:150MHz,in DMSO-d6)
其余数据如下：
苯丙素化合物A：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):210(4.61),285(3.99),321(4.03)；IR(KBr)νmax cm-1:3442,1637,1512,1388,1264；HR-ESIMS m/z:589.1882(calc.for C27H34O13Na:589.1897)。
苯丙素化合物B：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):205(4.73),286(4.17),314(4.10)；IR(KBr)νmax cm-1:3439,1637,1512,1385,1264；HR-ESIMS m/z:589.1896(calc.for C27H34O13Na:589.1897)。
苯丙素化合物C：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):210(4.58),283(3.43)；IR(KBr)νmax cm-1:3442,1631,1512,1385；HR-ESIMS m/z:591.2057(calc.forC27H36O13Na:591.2054)。
苯丙素化合物D：白色粉末；
UV(MeOH)λmax nm(logε):213(4.78),287(4.51),312(4.47)；IR(KBr)νmax cm-1:3338,1705,1634,1590,1512,1267；HR-ESIMS m/z:717.1999(calc.for C32H38O17Na:717.2007)。
苯丙素化合物E：白色水晶状；
UV(MeOH)λmax nm(logε):212(4.83),289(4.39)；IR(KBr)νmax cm-1:3415,1682,1512,1254,1130；HR-ESIMS m/z:747.2113(calc.for C33H40O18Na:747.2112)。
苯丙素化合物F：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):212(4.78),289(4.42),313(4.35)；IR(KBr)νmax cm-1:3406,1652,1595,1515,1264；HR-ESIMS m/z:492.1872(calc.for C24H30NO10:492.1870)。
苯丙素化合物G：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):210(4.66),285(4.01),320(4.09)；IR(KBr)νmax cm-1:3359,1595,1512,1264,1041；HR-ESIMS m/z:506.2024(calc.for C25H32NO10:506.2026)。
苯丙素化合物H：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):209(4.67),290(4.44),312(4.38)；IR(KBr)νmax cm-1:3421,1650,1601,1510,1384；HR-ESIMS m/z:460.1964(calc.for C24H30NO8:460.1971)。
苯丙素化合物I：棕黄色胶状物；
UV(MeOH)λmax nm(logε):202(4.34),213(4.47),321(3.94)；IR(KBr)νmax cm-1:3421,1711,1622,1509,1254；HR-ESIMS m/z:617.1479(calc.for C27H30O15Na:617.1482)。
试验例2
将细胞以0.25wt％胰酶(含0.02wt％EDTA)消化，含10wt％FBS的DMEM培养基调整细胞密度为1×105个/mL，均匀接种至24孔板，每孔400μL，种板后放入培养箱培养24小时。
培养24小时后，取出24孔板，吸去上清液，加入无血清的DMEM培养基配制的含药培养基：
溶剂对照组(C组)：每孔加入495μL含千分之一DMSO的无血清DMEM培养基；
模型组(M组)：每孔加入495μL含千分之一DMSO的无血清的DMEM培养基；
给药样品组：每孔加495μL含相应浓度样品的培养基；
加药完毕后将24孔板放入CO2细胞培养箱培养1小时。
1小时后，除溶剂对照组外，其余每孔加入5μL的100μg/mL的LPS(终浓度为1μg/ml)，溶剂对照组每孔加入5μL含千分之一DMSO的无血清的DMEM培养基，加药完毕后将24孔板放入CO2细胞培养箱继续培养18小时。
收集细胞培养液，所有孔上清用无血清DMEM稀释8倍，按Elisa试剂盒说明书检测PGE2含量，并计算各化合物IC50值，其结果如表4所示。
表4抗炎活性
由表4可以看出，苯丙素化合物A-I均能对PGE2具有一定的抑制作用，但其中苯丙素化合物D-I对PGE2生成的抑制作用更为显著，说明苯丙素化合物A-I尤其是苯丙素化合物D-I具有一定的潜在抗炎作用，可用于制备抗炎药物。
综上所述，本申请提供的苯丙素类化合物均为首次从升麻中提取得到全新化合物，拓宽了升麻属植物中化学成分的研究。上述苯丙素类化合物均是将经兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行多次分离后再经HPLC半制备所得，纯度较高，纯度均能达到95％以上。上述苯丙素类化合物均具有一定的抗炎活性，可用于制备抗炎药物。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种苯丙素类化合物的制备方法，其特征在于，所述苯丙素类化合物为苯丙素化合物A至苯丙素化合物F中的任意一种，所述苯丙素化合物A至所述苯丙素化合物F的化学结构式依次为：
制备包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；HP-20大孔树脂洗脱的条件包括：以乙醇-水为洗脱剂，按所述乙醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为0％、28-32％以及94-96％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均为24.5-25.5L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应得到所述CD-1、所述CD-2和所述CD-3共计3个组分；
将所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱，得到2A至2M共计13个子组分；所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱的条件包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按所述二氯甲烷在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、84.5-85.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％、49.5-50.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2A至所述2M共计13个子组分；
随后：
将2J子组分进行ODS柱分离，得到2J1至2J14共计14个子馏分；所述2J子组分进行ODS柱分离的条件包括：以甲醇-水为洗脱剂，按所述甲醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为19-21％、24-26％、29-31％、34-36％、39-41％、44-46％、49-51％、54-56％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2J1至所述2J14共计14个子馏分；
再将2J3子馏分再次进行ODS柱分离，得到2J3A至2J3K共计11个子馏分，所述2J3子馏分再次进行ODS柱分离的条件包括：以甲醇-水为洗脱剂，按所述甲醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为28-32％、38-42％、48-52％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/3-1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2J3A至所述2J3K共计11个子馏分；
再将2J3E子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物A或苯丙素化合物B或苯丙素化合物C；和/或，将2J4子馏分、2J6子馏分至2J10子馏分中的至少一种子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物F或苯丙素化合物D或苯丙素化合物E。
2.一种苯丙素类化合物的制备方法，其特征在于，所述苯丙素类化合物为苯丙素化合物G，所述苯丙素化合物G的化学结构式为：
制备包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；HP-20大孔树脂洗脱的条件包括：以乙醇-水为洗脱剂，按所述乙醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为0％、28-32％以及94-96％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均为24.5-25.5L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应得到所述CD-1、所述CD-2和所述CD-3共计3个组分；
将所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱，得到2A至2M共计13个子组分；所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱的条件包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按所述二氯甲烷在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、84.5-85.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％、49.5-50.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2A至所述2M共计13个子组分；
随后将2H子组分进行ODS柱分离，得到2H1至2H15共计15个子馏分；所述2H子组分进行ODS柱分离的条件包括：以甲醇-水为洗脱剂，按所述甲醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为9-11％、14-16％、19-21％、24-26％、29-31％、34-36％、39-41％以及100％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/3-1/4收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2H1至所述2H15共计15个子馏分；
将2H10子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物G。
3.一种苯丙素类化合物的制备方法，其特征在于，所述苯丙素类化合物为苯丙素化合物I，所述苯丙素化合物I的化学结构式为：
制备包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；HP-20大孔树脂洗脱的条件包括：以乙醇-水为洗脱剂，按所述乙醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为0％、28-32％以及94-96％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均为24.5-25.5L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应得到所述CD-1、所述CD-2和所述CD-3共计3个组分；
将所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱，得到2A至2M共计13个子组分；所述CD-2组分进行硅胶柱洗脱的条件包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按所述二氯甲烷在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、84.5-85.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％、49.5-50.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述2A至所述2M共计13个子组分；
将2L子组分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物I。
4.一种苯丙素类化合物的制备方法，其特征在于，所述苯丙素类化合物为苯丙素化合物H，所述苯丙素化合物H的化学结构式为：
制备包括以下步骤：
将兴安升麻的根茎经醇类提取后的提取物进行HP-20大孔树脂洗脱，得到CD-1、CD-2和CD-3共计3个组分；HP-20大孔树脂洗脱的条件包括：以乙醇-水为洗脱剂，按所述乙醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为0％、28-32％以及94-96％的比例进行梯度洗脱，每个梯度所用洗脱剂的体积均为24.5-25.5L，分别收集每个洗脱梯度后的洗脱馏分，对应得到所述CD-1、所述CD-2和所述CD-3共计3个组分；
将所述CD-3组分进行硅胶柱洗脱，得到3A至3L共计12个子组分；所述CD-3组分进行硅胶柱洗脱的条件包括：以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂，按所述二氯甲烷在所述洗脱剂中的体积浓度百分比依次为100％、98.5-99.5％、97.5-98.5％、96.5-97.5％、94.5-95.5％、89.5-90.5％、79.5-80.5％、69.5-70.5％、59.5-60.5％以及0％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为350-450mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述3A至所述3L共计12个子组分；
将3G子组分进行ODS柱分离，得到3G1至3G7共计7个子馏分；所述3G子组分进行ODS柱分离的条件包括：以甲醇-水为洗脱剂，按所述甲醇在所述洗脱剂中的体积浓度百分比梯度依次为48-52％、58-62％、68-72％以及78-82％的比例进行梯度洗脱，每个洗脱梯度的洗脱体积均为850-950mL，按每个洗脱梯度所用洗脱液体积的1/2-1/3收集成多个洗脱馏分，检测并将结果一致的洗脱馏分进行合并，得到所述3G1至所述3G7共计7个子馏分；
将3G2子馏分进行HPLC半制备等度分离，得到苯丙素化合物H。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910202888.XA CN109776633B (zh) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | 一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910202888.XA CN109776633B (zh) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | 一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109776633A CN109776633A (zh) | 2019-05-21 |
| CN109776633B true CN109776633B (zh) | 2020-08-04 |
Family
ID=66488198
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910202888.XA Active CN109776633B (zh) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | 一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109776633B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5719129A (en) * | 1991-03-21 | 1998-02-17 | Parfums Christian Dior | Derivative of caffeic acid, oraposide, and cosmetic or pharmaceutical compositions, in particular dermatological compositions, containing it |
| CN101513426A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-08-26 | 中国人民解放军第二军医大学 | 肉桂酸脂类化合物及其在制备白三烯a4水解酶功能调节药物中的应用 |
| CN102198141A (zh) * | 2010-03-25 | 2011-09-28 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一类苯丙素苷的医学用途 |
-
2019
- 2019-03-18 CN CN201910202888.XA patent/CN109776633B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5719129A (en) * | 1991-03-21 | 1998-02-17 | Parfums Christian Dior | Derivative of caffeic acid, oraposide, and cosmetic or pharmaceutical compositions, in particular dermatological compositions, containing it |
| CN101513426A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-08-26 | 中国人民解放军第二军医大学 | 肉桂酸脂类化合物及其在制备白三烯a4水解酶功能调节药物中的应用 |
| CN102198141A (zh) * | 2010-03-25 | 2011-09-28 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一类苯丙素苷的医学用途 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Hyaluronidase Inhibitors from "Cimicifugae Rhizoma"(a Mixture of the Rhizomes of Cimicifuga dahurica and C. heracleifolia);Atsufumi Iwanaga,et al.;《J. Nat. Prod.》;20100301;第73卷;第573-578页 * |
| Lignan and Neolignan Glycosides from the Roots of Glehnia littoralis;Yi Xu,et al.;《Planta. Med.》;20100617;第76卷;第1706-1709页 * |
| Two new compounds from Cynanchum amplexicaule;Huan Chen,et al.;《Journal of Asian Natural Products Research》;20080331;第10卷(第3期);第248-251页 * |
| 升麻属植物化学成分、生物活性及临床应用研究进展;孙启泉 等;《中草药》;20170731;第48卷(第14期);第3005-3016页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109776633A (zh) | 2019-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112094176B (zh) | 一种从山橿中提取的二苯乙烯类化合物及其制备方法与应用 | |
| KR102404533B1 (ko) | 전통 한약 조성물에서 18가지 성분을 분리하는 방법 | |
| CN105440092B (zh) | 一种油茶粕中黄酮苷的快速制备方法 | |
| Teng et al. | A comprehensive review on traditional and modern research of the genus Bupleurum (Bupleurum L., Apiaceae) in recent 10 years | |
| CN108186474A (zh) | 桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、制备方法及应用 | |
| CN103169727B (zh) | 流苏花总黄酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN108997296B (zh) | 几种异戊烯基二氢茋和异戊烯基黄酮的结构和用途 | |
| CN108276460B (zh) | 一种从血人参中提取的化合物及其提取工艺和应用 | |
| CN108610387B (zh) | 一种具有神经细胞保护活性的四个异黄烷苷类化合物及其制备方法 | |
| Jiang et al. | α-glucosidase inhibitory and anti-inflammatory coumestans from the roots of Dolichos trilobus | |
| CN109776633B (zh) | 一种苯丙素类化合物及其制备方法与应用 | |
| Wang et al. | Determination and isolation of potential α-glucosidase and xanthine oxidase inhibitors from Trifolium pratense L. by ultrafiltration liquid chromatography and high-speed countercurrent chromatography | |
| CN113717046B (zh) | 茵陈中新的双酚类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN111909228B (zh) | 一种生物碱类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN112898357B (zh) | 金莲花中一种二萜苷类新化合物及其分离纯化方法和应用 | |
| CN111329866B (zh) | 一种五环三萜类化合物在制备抗偏头痛药物中的应用 | |
| Çalış et al. | Xanthones and Xanthone O‐β‐D‐Glucosides from the Roots of Polygala azizsancarii Dönmez | |
| Jiang et al. | Herpecaudin from Herpetospermum caudigerum, a xanthine oxidase inhibitor with a novel isoprenoid scaffold | |
| CN111995645B (zh) | 一种苯丙素类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN106377523B (zh) | 一种天然活性药物及其制备与应用 | |
| CN115611844B (zh) | 一种从关苍术中分离得到的化合物的制备方法和应用 | |
| CN109206392A (zh) | 一种香豆素类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN114031625B (zh) | 甘草中具有抗结直肠癌活性的化合物制备及其应用 | |
| CN114539192B (zh) | 松香烷型二萜化合物及其制备方法和应用 | |
| KR102327486B1 (ko) | 마키 엉겅퀴 추출물을 유효 성분으로 하는 간 독성 물질에 의한 간 손상을 예방 또는 치료하기 위한 조성물의 제조 방법 및 이에 의하여 제조된 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |