CN109745563A

CN109745563A - Sirt1抑制剂用于预防和治疗放射引起的口腔损伤

Info

Publication number: CN109745563A
Application number: CN201910020591.1A
Authority: CN
Inventors: 华国强; 郭强; 徐小雅; 高建军; 周轶
Original assignee: Fudan University
Current assignee: Fudan University
Priority date: 2019-01-09
Filing date: 2019-01-09
Publication date: 2019-05-14
Anticipated expiration: 2039-01-09
Also published as: CN109745563B

Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体而言，涉及SIRT1抑制剂在预防和治疗放射引起的口腔损伤中的应用。本发明提供了SIRT1抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗放射引起的口腔损伤。并由此提供了用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物以及相应的制剂。利用SIRT1抑制剂对于放射引起的口腔损伤表现出良好的预防和治疗效果。

Description

SIRT1抑制剂用于预防和治疗放射引起的口腔损伤

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体而言，涉及SIRT1抑制剂在预防和治疗放射引起的口腔损伤中的应用。

背景技术

在医学领域，放射性诊断和治疗应用广泛，临床对肿瘤患者进行放疗已经成为肿瘤治疗的常用手段。放射性口腔黏膜炎是头颈部肿瘤放射治疗过程中常见的严重并发症之一，会导致口腔粘膜红肿，随后出现毛细血管反应性扩张，局部充血、红斑、糜烂、溃疡、假膜覆盖，严重者合并粘膜广泛萎缩和局部感染。常见有口腔粘膜不适、口干，甚至持续难忍的疼痛感。放射线除直接损伤口腔黏膜外,同时还会使放射野内的微血管发生肿胀，管壁增厚，管腔变窄或闭塞，出现受损部位供血不足，发生口腔黏膜炎。

目前，尚未找到治疗放射性口腔黏膜炎的特效药，大部分的治疗方法都还未能将放射性口腔黏膜炎彻底根治。现阶段对于放射性口腔黏膜炎临床上多采用局部消炎、杀菌和止痛剂来治疗和缓解，但是单纯的抗菌消炎对粘膜的修复起不到积极的作用，而辐射引起机体免疫力降低，常因合并其他感染而加重症状，影响创面愈合。所以，放射性口腔黏膜炎的防治药物的研发是目前亟需解决的问题。

发明内容

本发明旨在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出SIRT1抑制剂在预防和治疗放射引起的放射性口腔黏膜炎中的应用。由此，采用SIRT1抑制剂可以有效对放射引起的口腔上皮损伤进行预防或治疗。因此，本发明可以有效解决头颈部放疗导致的放射性口腔黏膜炎缺乏理想防治药物和有效治疗方法的问题。

为此，根据本发明的一个方面，本发明提出了SIRT1抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗放射引起的口腔损伤。

由此，通过采用SIRT1抑制剂可以对放射引起的口腔上皮损伤进行预防或治疗，减少辐射引起的上皮细胞死亡。因此，本发明提出的SIRT1抑制剂在制备药物中的用途可以有效解决放射性口腔黏膜炎缺乏理想药物和有效治疗方法的问题，具有广阔的市场应用前景。

在本发明的一些实施例中，所述口腔损伤为放射性口腔黏膜炎。由此，可以有效降低由于辐射引发的各种口腔损伤几率，进而预防和治疗辐射后动物的口腔黏膜炎。

在本发明的一些实施例中，所述口腔损伤为采用8～20Gy强度的射线照射引起的口腔损伤。

在本发明的一些实施例中，所述SIRT1抑制剂选自烟酰胺、EX527、Sirtinol、Salermide中的至少一种。

根据本发明的第二个方面，本发明还提出了一种用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物，所述药物组合物包含SIRT1抑制剂。

由此，通过采用本发明上述实施例的用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物，可以在辐射24小时后给药，并能够从根本上保护并治疗放射引起的口腔上皮损伤，减少辐射引起的上皮细胞死亡，具有广阔的市场应用前景。

另外，根据本发明上述实施例的用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物还可以具有如下附加的技术特征：

在本发明的一些实施例中，所述口腔损伤为放射性口腔黏膜炎。由此，可以有效降低由于辐射引发的各种口腔并发症。

在本发明的一些实施例中，用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物进一步包含药学上可接受的赋形剂。由此，本发明用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物能够被制备成任何便于给药的药物剂型。

在本发明的一些实施例中，所述赋形剂为选自粘合剂、填料、涂膜聚合物、增塑剂、助流剂、崩解剂和润滑剂的至少一种。

根据本发明的第三方面，本发明提供了一种制剂，所述制剂由包括本发明第二方面所述的药物组合物制备而成。

在本发明的一些实施例中，所述制剂为注射液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、药膜、雾化剂、灌肠剂、混悬剂、软膏剂、滴剂、贴剂或乳剂。由此，本发明用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物能够被制备成任何便于给药的药物剂型。例如，根据本发明的一些实施例，本发明提供了一种注射剂，所述注射剂中包含有SIRT1抑制剂以及生理盐水。根据本发明的实施例，所述注射剂包含有烟酰胺和生理盐水。

附图说明

图1是根据本发明一个实施例提供的研究SIRT1抑制剂抗辐射效果的技术路线图。

图2是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射后，对照组及给予烟酰胺(10mM)处理的给药组在显微镜下的形貌对比图。

图3是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射，培养10天后给予烟酰胺处理的给药组(照射后24小时给药)与对照组类器官大小的对比图。

图4是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射后，对照组及给予EX527(10μM)处理的给药组在显微镜下的形貌对比图。

图5是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射，培养10天后给予EX527处理的给药组(照射24小时后给药)与对照组类器官大小的对比图。

图6是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射，培养10天后给予Sirtinol处理的给药组(照射24小时后给药)与对照组类器官大小的对比图。

图7是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射，培养10天后给予Salermide处理的给药组(照射24小时后给药)与对照组类器官大小的对比图。

图8是根据本发明一个实施例提供的采用X射线照射，培养10天后给予SIRT2抑制剂处理的给药组(照射24小时后给药)与对照组类器官大小的对比图。

图9是根据本发明一个实施例提供的采用X射线单次照射，10天后对照组与治疗组(烟酰胺腹腔注射)的舌上皮炎症部位纵截面HE切片在显微镜下的形貌对比图。

图10是根据本发明一个实施例提供的采用X射线单次照射，10天后对照组与治疗组(烟酰胺腹腔注射)的舌上皮炎症部位纵截面厚度对比图。

图11是根据本发明一个实施例提供的采用X射线单次照射，10天后对照组与治疗组(烟酰胺腹腔注射)的舌上皮炎症部位甲苯胺蓝(TB)染色形貌对比图，黑框标注为炎症部位(炎症部位即照射后舌根部上皮区域产生溃疡的部位)。

图12是根据本发明一个实施例提供的采用X射线单次照射，10天后对照组与治疗组(烟酰胺腹腔注射)的舌上皮炎症部位面积大小对比图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

在放射性治疗恶性肿瘤的过程中，放射线可以损伤肿瘤细胞的DNA，使肿瘤细胞不能继续分裂和增殖。但射线在杀伤肿瘤细胞的同时，射野内的正常组织细胞也不能幸免。人类口咽黏膜的表层是更新速度较快的复层扁平上皮，尤其是软腭、舌腹、舌侧缘及口腔底部等上皮细胞分化增殖速率快，对放射线的敏感性强，故极易出现放射性黏膜损伤。同时，由于放射治疗时腮腺、液腺等口腔分泌腺体均在照射范围内，使其功能受到抑制，引起唾液分泌明显减少，黏液成分增加，pH值下降，口腔自洁能力下降。易诱发细菌、真菌、厌氧菌等微生物的繁殖，在加上射线可导致放射性龋齿，出现牙痛、口臭、咀嚼困难等，加重口腔黏膜反应。而除了直接杀伤作用，放射线还可以使得射野内的微血管关闭发生肿胀、变窄或堵塞，使局部黏膜水肿，导致受损部位供血不良，进一步促进了口腔黏膜炎的发生。

为此，本发明提供了一种包括SIRT1抑制剂的药物，用于治疗由于放射引起的口腔损伤。根据本发明的实施例，本发明提供了一种SIRT1抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗放射引起的口腔损伤。

其中，需要说明的是，术语“预防”指获病或障碍的风险的减少(即：使疾病的至少一种临床症状在主体内停止发展，该主体可能面对或预先倾向面对这种疾病，但还没有经历或表现出疾病的症状)。

本发明中所述“SIRT1抑制剂”指的是任何可以抑制SIRT1基因表达或者SIRT1蛋白表达的物质。

哺乳动物SIRT蛋白家族包含7个成员，可分为四类：SIRT1-3属于第一类，SIRT4属于第二类，SIRT5属于第三类，而SIRT6/7属于第四类，其中，SIRT1是哺乳动物中重要的酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶，可以与染色质、许多重要的转录因子(p53，p300等)及转录共调控因子相互作用，通过去乙酰化作用调节基因转录、染色体稳定性和靶蛋白活性，进而参与代谢、衰老、肿瘤发生发展等一系列病理生理过程。由于所有SIRT1均是NAD+依赖性去乙酰化酶，其作用之一是将P53去乙酰化从而抑制P53的转录活性；SIRT1抑制剂通过抑制SIRT1来减少P53去乙酰化，对P53具有正性调控作用，P53稳定性增强，转录活性增加，通过调控G1期的生长限制位点阻止细胞从G1到S期转变，从而加速DNA修复，从而可以应用于放射引起的口腔损伤，具有显著的治疗效果。根据本发明的具体实施例，SIRT1抑制剂可以为选自salermide、Sirtinol、EX527和烟酰胺中至少一种。

本发明利用小鼠动物模型和体外培养舌上皮类器官水平证明SIRT1抑制剂对受照小鼠舌上皮细胞及受照舌上皮类器官具有保护作用，对放射性口腔黏膜炎具有防治作用。

根据本发明的实施例，所述口腔损伤为放射性口腔黏膜炎。所述放射性口腔黏膜炎的临床表现包括但不限于：口腔黏膜红肿、糜烂、溃疡，覆盖白色假膜，易出血，触痛明显，口杆，口臭等，或者严重的伴随着出现黏膜的深大溃疡，伴出血、感染及放射性龋齿、牙周炎等。或者伴随着由于放射性头颈部治疗引起的进食困难、张口受限等功能障碍和全身症状，如厌食、疲倦、头痛、记忆力下降、失眠等。所述放射性口腔黏膜炎包括急性放射性口腔黏膜炎以及慢性放射性口腔黏膜炎等等。

本发明还提出了一种治疗或预防放射引起的口腔损伤的方法，根据本发明的实施例，该方法包括对动物提供前面实施例所述的药物组合物。

由此，通过对动物提供前面实施例所述的药物组合物，可以有效针对辐射、治疗放射等引起的口腔损伤进行治疗，并且在辐射后24小时给药，能够从根本上保护并治疗放射引起的口腔上皮损伤，进而成功保护上皮细胞，减少辐射引起的上皮细胞死亡。

另外，根据本发明上述实施例的治疗或预防放射引起的口腔损伤的方法还可以具有如下附加的技术特征：

在本发明的一些实施例中，在所述动物受辐射后，对所述动物提供所述的药物组合物。由此，可以从根本上保护并治疗放射引起的口腔上皮损伤，进而成功保护上皮细胞，减少辐射引起的上皮细胞死亡。

本发明的发明人通过实验，以salermide、Sirtinol、EX527和烟酰胺为例，分别验证了SIRT1抑制剂对于放射引起的口腔损伤的治疗效果。如图1所示，根据图1给出的技术路线图，分别研究了SIRT1抑制剂烟酰胺、EX527、Sirtinol或Salermide的抗辐射效果。取小鼠舌干细胞，然后将其培养于细胞培养板中，培养48小时后进行照射，照射24小时后加入不同的药物进行处理，然后连续培养一定的天数，比较不同处理组中类器官的差别。针对表现出治疗活性的药物，加大辐射的程度，对药物的有效性再次进行验证。然后在小鼠体内验证药物的功效。

实验结果发现，本发明利用体外培养舌上皮类器官水平和小鼠动物模型证明SIRT1抑制剂对受照小鼠舌上皮细胞及受照舌上皮类器官均具有保护作用，对放射性引起的口腔损伤具有防治作用。而采用SIRT2抑制剂，例如SirReal2、AGK2均未表现出该治疗或者预防效果。发明人通过研究发现：SIRT1抑制剂作用靶点为SIRT1，通过抑制SIRT1通路减少P53去乙酰化；SIRT2抑制剂主要作用靶点为SIRT2，而SIRT2蛋白作用于微管蛋白，能够催化微管蛋白脱乙酰化，而对SIRT1几乎没有抑制效果，故不能作用于P53靶点，对DNA损伤无保护作用。

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。需要说明的是，以下实施例中在配制不同浓度的药物时，考虑到药物的溶解性质不同，仅在实施例1中配制烟酰胺溶液时，利用新鲜培养基作为溶剂，所以在实施例1中设置了利用等体积新鲜培养基处理的对照组。而在其他实施例中，在配制相应浓度的药物时，均利用DMSO作为溶剂进行溶解，所以设置了等体积DMSO处理作为对照组。同时，由于DMSO具有细胞毒性作用，因此需要限制溶剂体积(DMSO的终浓度<0.3％)，同时又要考虑到药物的作用效果，因此，相应的对加入的培养基的体积进行了稍微调整。每种药物的最终作用浓度均在实施例中已经示出。

实施例1

实施例1研究了烟酰胺对X射线8Gy照射引起舌类器官损伤的保护效果，包括如下过程：

从8-12周龄C57BL小鼠分离舌上皮根部干细胞，种植于基质胶中加条件培养基(以总体积50ml为例，成分为Advance DMEM/F12 medium 31.3ml；ABS(100u/ml Penicillin+100μg/ml streptomycin)500μl；Glutamax 500μl；10mM HEPES 500μl；1×N2 500μl；1×B27 1ml；1mM N-acetylcysteine 100μl；50ng/ml EGF 5μl；R-spondin 1+Noggin(Homemade)15.6m)。接种后5天，取舌类器官，分为两组，分别作为对照组(即模型对照组)和给药组(即照射24小时后给药组)。采用X射线8Gy对对照组和给药组两组舌类器官进行照射；照射24小时后，给药组立即给予烟酰胺(10mM，用新鲜培养基溶解)处理，对照组立即给予等体积新鲜培养基处理，分别处理24小时后更换新鲜培养基。将上述三组分别培养10天后观察对照组与给药组类器官形态大小。

结果如图2和图3所示，其中图2显示了对照组和给药组类器官在显微镜下的形貌图。图3示出了对照组与给药组存活类器官大小。根据图3显示的数据，对照组存活类器官大小为(1.149±0.3928)×10³像素值，给药组的存活类器官大小为(1.748±0.7927)×10³像素值，(以50X显微镜下面积表示；Mean±SD，p＜0.0001，以下实施例均以相同倍数显微镜下面积表示)。

结论：由上述结果可得，采用X射线照射24小时后，相对于对照组，给予烟酰胺处理的给药组的舌类器官面积相对较大。说明辐射24小时后对舌类器官给予以烟酰胺处理，对小鼠的舌类器官具有保护作用。

实施例2

实施例2研究EX527对X射线8Gy照射引起舌类器官损伤的保护效果，包括如下过程：

从8-12周龄C57BL小鼠分离舌上皮根部干细胞，种植于基质胶中加条件培养基，接种后5天，取舌类器官，分为三组，分别作为对照组、烟酰胺给药组(照后24小时给烟酰胺组)、EX527给药组(照后24小时给EX527组)。采用x射线8Gy对对照组、烟酰胺给药组、EX527给药组三组舌类器官进行照射，其中，对照组在照射后24小时立即给于等体积DMSO处理，烟酰胺给药组在照射后24小时立即给予烟酰胺(10mM，利用DMSO溶解)处理，EX527给药组于照射24小时后立即给予EX527(10μM，利用DMSO溶解)处理。分别进行上述处理24小时后换新鲜培养基。将上述类器官分别培养10天后观察烟酰胺给药组、EX527给药组与对照组类器官形态大小差异。

结果如图4和图5所示，其中图4显示了对照组和EX527给药组的类器官在显微镜下的形貌图。图5示出了对照组、烟酰胺给药组、EX527给药组的舌类器官面积比较图。

根据图5示出的数据可以看出，EX527给药组的类器官面积为(1.796±0.9243)×10³像素值，烟酰胺给药组的类器官面积为(1.956±0.9242)×10³像素值，对照组的类器官面积为(0.9624±.04440)×10³像素值，(Mean±SD，EX527vs对照p＜0.0001)。

结论：由上述结果可得，采用X射线照射后，舌类器官损伤严重，照射后24小时后立即给予EX527处理，舌类器官损伤能够得到有效恢复。从图5可以看出，采用X射线8Gy照射24小时后，给予EX527处理的给药组与对照组相比，类器官面积更大，其作用等同于烟酰胺给药处理(10mM)。综上，说明辐射24小时后对舌类器官给予以SIRT1抑制剂EX527处理，对小鼠的舌类器官损伤有治疗作用。

实施例3

实施例3研究了Sirtinol对X射线8Gy照射引起舌类器官损伤的保护效果，包括如下过程：

从8-12周龄C57BL小鼠分离舌上皮根部干细胞，种植于基质胶中加条件培养基，接种后5天，取舌类器官，分为三组，分别作为对照组、烟酰胺给药组、Sirtinol给药组。采用x射线8Gy对对照组、烟酰胺给药组、Sirtinol给药组三组舌类器官进行照射，其中，烟酰胺给药组在照射24小时后立即给予烟酰胺(10mM)，Sirtinol给药组于照射24小时后立即给予Sirtinol(100μM)，对照组在照射24小时后立即给予等体积DMSO处理。分别处理24小时后换上新鲜培养基。将上述类器官分别培养10天后观察烟酰胺给药组、Sirtinol给药组与对照组类器官形态大小差异。

结果如图6所示，图6显示了对照组、烟酰胺给药组、Sirtinol给药组的舌类器官面积比较图。根据图6所示，照射后24小时给予Sirtinol处理的给药组的类器官面积为(2.058±0.8694)×10³像素值，烟酰胺给药组的类器官面积为(1.956±0.9242)×10³像素值，对照组的类器官面积为(0.9624±.04440)×10³像素值，(Mean±SD，Sirtinol vs对照p＜0.0001)。

结论：由上述结果可得，采用X射线照射后，舌类器官损伤严重，照射24小时后给予Sirtinol处理的给药组的舌类器官损伤能够得到有效恢复。从图6可以看出，X射线8Gy照射24小时后，给予Sirtinol处理的给药组，相较于对照组，类器官面积更大，其作用等同于烟酰胺给药组(10mM)。综上说明，辐射24小时后对舌类器官给予以SIRT1抑制剂Sirtinol处理，对小鼠的舌类器官损伤有治疗作用。

实施例4

实施例4研究了Salermide对X射线8Gy照射引起舌类器官损伤的保护效果，包括如下过程：

从8-12周龄C57BL小鼠分离舌上皮根部干细胞，种植于基质胶中加条件培养基，接种后5天，取舌类器官，分为三组，分别作为对照组、烟酰胺给药组、Salermide给药组。采用x射线8Gy对对照组、烟酰胺给药组、Salermide给药组三组舌类器官进行照射，然后烟酰胺给药组在照射24小时后立即给予烟酰胺(10mM)，Salermide给药组于照射后24小时立即给予Salermide(100μM)，对照组在照射后24小时立即给予等体积DMSO处理。分别处理24小时后换新鲜培养基。将上述类器官分别培养10天后观察烟酰胺给药组、Salermide给药组与对照组类器官形态大小差异。

结果如图7所示，图7显示了对照组、烟酰胺给药组、Salermide给药组的舌类器官面积比较结果。如图7所示，照射后24小时给予Salermide处理的给药组的类器官面积为(1.921±0.7943)×10³像素值，烟酰胺给药组的类器官面积为(1.956±0.9242)×10³像素值，对照组的类器官面积为(0.9624±.04440)×10³像素值，(Mean±SD，Salermide vs对照p＜0.0001)。

结论：由上述结果可得，采用X射线照射后，舌类器官损伤严重，照射后24小时给予Sirtinol处理的给药组的舌类器官损伤得到有效恢复。从图7可以看出，X射线8Gy照射24小时后，给予Salermide处理，相比较于对照组，类器官面积更大，其作用等同于烟酰胺(10mM)。综上，说明辐射24小时后对舌类器官给予以SIRT1抑制剂Salermide处理，对小鼠的舌类器官损伤有治疗作用。

对比例1

研究SIRT2抑制剂(SirReal2、AGK2)对放射引起舌类器官损伤的保护效果，包括如下过程：

从8-12周龄C57BL小鼠分离舌上皮根部干细胞，种植于基质胶中加条件培养基，接种后5天，取舌类器官，分为两组，分别作为SirReal2给药组和AGK2给药组；采用X射线8Gy照射两组舌类器官，然后于照射后24小时分别加入两种SIRT2抑制剂SirReal2(50μM)和AGK2(50μM)，同时设DMSO对照组及烟酰胺给药组(10mM)。分别于处理24小时后换新鲜培养基。将上述类器官分别培养10天后观察各组类器官形态大小。

结果如图8所示，其中图8显示了对照组、SirReal2给药组(50μM)、AGK2给药组(50μM)以及烟酰胺给药组(10mM)的舌类器官面积大小。如图8所示，照射后24小时，给予SirReal2(50μM)处理的类器官面积为(0.9449±0.2858)×10³像素值，给予AGK2(50μM)处理的类器官面积为(0.9579±0.2871)×10³像素值。

结论：X射线8Gy照射24小时后，采用SIRT2抑制剂(SirReal2或AGK2)处理的给药组与对照组类器官面积相比无差别，对小鼠舌上皮无保护作用。

实施例5

实施例5研究了烟酰胺对X射线15Gy单次照射引起口腔舌上皮损伤的保护效果，包括如下过程：

8-12周龄C57BL/6小鼠18只，分别给予15Gy头部X射线单次照射，24小时后终止照射，然后将照射后小鼠随机分为两组，分别作为对照组和治疗组(采用腹腔注射给药)，每组8只。其中针对治疗组小鼠，给予注射药物两次，分别为：第一次为终止照射后(即经过照射24小时后)立刻给予烟酰胺(1000mg/Kg)腹腔注射，第二次为：从开始照射时间点起算，到96小时(即终止照射后的72小时)立刻给予烟酰胺(1000mg/Kg)腹腔注射，对照组在相同时间点给予相应溶剂PBS腹腔注射两次。照射终止后第10天处死小鼠，取舌做病理切片HE染色，观察舌纵截面上皮厚度。

结果如图9和图10所示，图9显示了对照组和治疗组(两次给药)辐射后小鼠舌炎症部位上皮厚度差异；其中，X射线照射后治疗组与对照组小鼠的舌上皮厚度统计如图10所示，结果显示，对照组舌炎症部位上皮厚度为48.12±12.73μm，治疗组舌炎症部位上皮厚度为79.37±16.39μm。(Mean±SD，p＜0.0001)

结论：由上述结果可得，X射线单次照射之后，小鼠舌上皮厚度变薄，损伤严重，而照射后给予烟酰胺治疗两次，小鼠舌上皮厚度变薄较少，舌上皮损伤较轻，说明照射后给予烟酰胺处理，对小鼠舌上皮具有保护作用。

而且，根据本发明的实施例可以得出，当利用烟酰胺给予口腔损伤的患者进行治疗时，药物中烟酰胺的浓度可以为81mg/kg。

实施例6

实施例6进一步研究了烟酰胺对X射线15Gy单次照射引起口腔舌上皮损伤的保护效果，包括如下过程：

8-12周龄C57BL/6小鼠18只，分别给予15Gy头部X射线单次照射，24小时后终止照射，然后将照射后小鼠随机分为两组，分别作为对照组和治疗组(腹腔注射给药)，每组8只。其中对给药组小鼠给予注射药物两次，分别为终止照射后立刻给予烟酰胺(1000mg/Kg)腹腔注射，终止照射72小时后(即从照射开始起算，为96小时后)立刻给予烟酰胺(1000mg/Kg)腹腔注射，对照组在相同时间点给予相应溶剂PBS腹腔注射两次。照射终止后第10天处死小鼠，取舌做溃疡甲苯胺蓝(TB)染色，观察舌上皮溃疡面积。

结果如图11和图12所示，其中图11显示了对照组和治疗组(两次给药)辐射后小鼠舌上皮炎症部位形貌差异结果；其中，图12示出了X射线照射后治疗组与对照组小鼠的舌上皮炎症部位面积百分比比较结果。结果显示，对照组舌炎症部位面积百分比为4.452±2.151％，治疗组舌炎症部位面积百分比为0.0275±0.03775％。(Mean±SD，p＜0.05)

结论：由上述结果可得，X射线单次照射之后，小鼠舌上皮炎症面积大，舌上皮损伤严重，而照射后两次给予烟酰胺治疗，小鼠舌上皮炎症面积减小，舌上皮损伤较轻，说明照射后给予烟酰胺处理，对小鼠舌上皮具有保护作用。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims

1.SIRT1抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗放射引起的口腔损伤。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述口腔损伤为放射性口腔黏膜炎。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述口腔损伤为采用8～20Gy强度的射线照射引起的口腔损伤。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述SIRT1抑制剂选自烟酰胺、EX527、Sirtinol、Salermide中的至少一种。

5.一种用于预防或治疗放射引起的口腔损伤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含SIRT1抑制剂。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述口腔损伤为放射性口腔黏膜炎。

7.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述SIRT1抑制剂选自烟酰胺、EX527、Sirtinol、Salermide中的至少一种。

8.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，进一步包含药学上可接受的赋形剂；

任选地，所述赋形剂为选自粘合剂、填料、涂膜聚合物、增塑剂、助流剂、崩解剂和润滑剂的至少一种。

9.一种制剂，其特征在于，所述制剂由包括权利要求5～8中任一项所述的药物组合物制备而成。

10.根据权利要求9所述的制剂，其特征在于，所述制剂为注射液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、药膜、雾化剂、灌肠剂、混悬剂、软膏剂、滴剂、贴剂或乳剂。