CN109718317B - 一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物 - Google Patents
一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物,包括马鞭草27‑33份、马齿苋27‑33份、地锦草27‑33份、槟榔12‑18份、枳实12‑18份、当归12‑18份。本发明还涉及上述中药组合物的应用。通过建立大鼠溃疡性结肠炎模型来研究本发明的中药组合物对溃疡性结肠炎的治疗作用及机制,实验证明本发明的中药组合物能显著改善UC大鼠的DAI评分、结肠组织的病理损伤情况,同时也能显著抑制IκB/NF‑κB的活化,从而降低IL‑1β、TNF‑α等含量,起到抑制炎症的作用,且效果显著优于SASP组。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域,具体地说,是一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物。
背景技术
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性、非特异性肠病,主要发生在直肠、结肠的粘膜层,以溃疡、糜烂为主,多累及远端结肠,也可遍及全结肠。多数起病缓慢,亦有少数呈急性、灾难性爆发。病程漫长,常反复发作,可见于任何年龄。血性腹泻是最常见的早期症状,还可表现为腹痛、便血、体重减轻、里急后重、呕吐等,偶尔主要出现关节炎、虹膜睫状体炎、肝功能障碍、皮肤病变和发热等情况。其病因及发病机制尚不明确,可能与遗传、感染、免疫异常等因素有关。目前大多数学者倾向于认为:本病发病既有自身免疫机制的参与,也受遗传因素影响,感染和精神因素为主要诱因。该病治愈难度大,治愈后复发率较高,并与结肠癌的发病存在密切关系,尤其病变范围广泛、病程长者被公认为是结肠癌的癌前病变,一般认为病程15-20年后,癌变的危险性大约每年增加1%,因此UC被世界卫生组织列为现代难治病之一。此外,UC所引起的便血可使血压下降及血色素降低,需要输血治疗。全结肠出现UC的病人还可并发中毒性肠扩张,该并发症的死亡率可高达44%。
如何有效地防治该病是目前重大课题之一,目前常用的西药主要有皮质类固醇、氨基水杨酸类药物、免疫调节剂、抗生素等。西医治疗UC虽然在缓解症状、控制发作方面取得了一定疗效,但尚不能有效预防复发,而且药物副作用大、药价昂贵也令患者难以坚持治疗。该病在活动期及缓解期病机有所侧重,本病活动期多有湿热内蕴肠腑,气滞血瘀,肉腐血败之病理变化,当以清肠化湿为主,多以芍药汤或白头翁汤加减,常用黄连、黄芩、黄柏、白头翁、秦皮等苦寒之品,值得注意的是,过用苦寒不仅有碍脾胃健运,且有凉伏热毒及化燥伤阴之弊。同时溃疡性结肠炎活动期多以湿热、瘀热为主,应注重清肠化湿、凉血止血的治疗,目前临床上缺乏最佳药物配比的复方药物,尚不能推广运用。
中国专利文献201310080155.6公开了一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物,属于中药领域,由下述重量份配比的原料制成:芍药8-12份、黄岑3-10份、黄连2-5份、乌梅5-10份、大黄5-15份、槟榔3-10份、当归5-15份、木香2-5份、肉桂2-5份、紫珠草10-15份、地榆9-15份、苍术5-10份、薏仁9-30份、玄胡3-6份、乌药3-9份、枳实3-10份、白术6-12份、甘草5-15份,上述多味中药原料经过煎煮制备成汤剂、清热利湿消炎,佐以理气止痛,行气活血、健脾益气、养阴补血,调理人体机能,促使肠粘膜正常代谢,抑制免疫反应,改善肠粘膜功能,减少并发症。中国专利文献201811189958.4公开了一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法和应用。该组合物包括以下原料:地锦草、黄连、茵陈、砂仁、败酱草、凤尾草、当归、佛手、红景天、仙鹤草、地榆炭、乌梅炭、儿茶、酒白芍和葛根。此方可有效、持续地缓解溃疡性结肠炎临床症状,与现有技术相比,能够有效地预防复发,且副作用小,可显著提高患者生活质量。但是关于本发明的中药组合物在治疗溃疡型肠结炎中的应用,目前还未见报道。
发明内容
本发明的第一个目的是,针对现有技术中的不足,提供一种治疗溃疡型肠结炎的中药组合物。
本发明的第二个目的是,提供一种上述中药组合物的用途。
为实现上述第一个目的,本发明采取的技术方案是:
一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物,由下列重量份的原料药制成:马鞭草27-33份、马齿苋27-33份、地锦草27-33份、槟榔12-18份、枳实12-18份、当归12-18份。
优选地,所述中药组合物由下列重量份的原料药制成:马鞭草29-31份、马齿苋29-31份、地锦草29-31份、槟榔14-16份、枳实14-16份、当归14-16份。
更优选地,所述中药组合物由下列重量份的原料药制成:马鞭草30份、马齿苋30份、地锦草30份、槟榔15份、枳实15份、当归15份。
为实现上述第二个目的,本发明采取的技术方案是:
如上任一所述的中药组合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
优选地,所述的药物还包括药学上常规的辅料。
“药学上可接受”是指并非在生物学上或其它方面实质上不希望的物质,即可将所述物质给药于个体,而不会导致任何实质上不希望的生物影响或以有害的方式与包含这种物质的组合物的任何组分相互作用。
辅料包括药剂学中的任何常用剂型,并应基于相容性和希望的剂型的释放分布性质来选择。示例性载体物质包括,例如,乳化剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、调味剂、着色剂或助溶剂等。"药学上可接受的辅料"可包括,例如,阿拉伯胶、明胶、胶体二氧化硅、甘油磷酸钙、乳酸钙、糊精-麦芽糖复合剂、甘油、硅酸镁、酪蛋白酸钠、大豆卵磷脂、氯化钠、磷酸三钙、磷酸氢二钾、硬脂酰乳酸钠、角叉菜胶、甘油单酯、甘油二酯、预胶化淀粉等。
优选地,所述的药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、汤剂、合剂、丸剂、口服液或糖浆剂。
本发明通过建立大鼠溃疡性结肠炎模型来研究本发明的中药组合物对溃疡性结肠炎的治疗作用及机制,实验证明本发明的中药组合物能显著改善UC大鼠的DAI评分、结肠组织的病理损伤情况,同时也能显著抑制IκB/NF-κB的活化,从而降低IL-1β、TNF-α等含量,起到抑制炎症的作用,且效果显著优于SASP组。
具体实施方式
下面结合具体实施方式,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围;此外应理解,在阅读了本发明记载的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(一)
马鞭草30份、马齿苋30份、地锦草30份、槟榔15份、枳实15份、当归15份,按常规方法煎煮。
实施例2治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(二)
马鞭草33份、马齿苋33份、地锦草30份、槟榔15份、枳实12份、当归12份,按常规方法煎煮。
实施例3治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(三)
马鞭草30份、马齿苋30份、地锦草27份、槟榔12份、枳实18份、当归18份,按常规方法煎煮。
实施例4治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(四)
马鞭草27份、马齿苋27份、地锦草33份、槟榔18份、枳实15份、当归15份,按常规方法煎煮。
实施例5治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(五)
马鞭草31份、马齿苋31份、地锦草30份、槟榔15份、枳实14份、当归14份,按常规方法煎煮。
实施例6治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(六)
马鞭草30份、马齿苋30份、地锦草29份、槟榔14份、枳实16份、当归16份,按常规方法煎煮。
实施例7治疗治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备(七)
马鞭草29份、马齿苋29份、地锦草31份、槟榔16份、枳实15份、当归15份,按常规方法煎煮。
需要说明的是,实施例1-7所述的常规方法煎煮是中药汤剂常规的制作方法,即将所述的原料药加水煎煮成汤剂。
实施例8治疗溃疡性结肠炎的中药组合物片剂的制备
按照实施例1~7任一所述的比例称取中药原料,加水煎煮2次,每次1h,第一次加水12倍量,第二次加8倍量水,滤药渣,合并两次滤液,将水溶液合并后浓缩至相对密度为1.05~1.06(70℃),加乙醇使含醇量达55%,静置,滤过,滤液回收乙醇后并浓缩至相对密度为1.12~1.16(60℃)的流浸膏;将上述药物药渣细粉、包合物、流浸膏、与适量辅料混匀后一步制粒,压片,包薄膜衣即得。
实施例9治疗溃疡性结肠炎的中药组合物颗粒的制备
按照实施例1~7任一所述的比例称取中药原料,加水煎煮2次,每次1h,第一次加水12倍量,第二次加8倍量水,滤药渣,合并两次滤液,将水溶液合并后浓缩至相对密度为1.05~1.06(70℃),加乙醇使含醇量达55%,静置,滤过,滤液回收乙醇后并浓缩至相对密度为1.12~1.16(60℃)的流浸膏;将上述药物药渣细粉、包合物、流浸膏、与适量辅料混匀后一步制粒,即得。
实施例10治疗溃疡性结肠炎的中药组合物胶囊的制备
按照实施例1~7任一所述的比例称取中药原料,加水煎煮2次,每次1h,第一次加水12倍量,第二次加8倍量水,滤药渣,合并两次滤液,将水溶液合并后浓缩至相对密度为1.05~1.06(70℃),加乙醇使含醇量达55%,静置,滤过,滤液回收乙醇后并浓缩至相对密度为1.12~1.16(60℃)的流浸膏;将上述药物药渣细粉、包合物、流浸膏、与适量辅料混匀后一步制粒,装胶囊即得。
实施例11治疗溃疡性结肠炎的中药组合物合剂、口服剂的制备
按照实施例1~7任一所述的比例称取中药原料,加8-10倍量水,煎煮3小时,滤出药汁。再加8倍量水,煎煮2小时,滤出药汁,合并二次煎液,静置,滤取上清液,浓缩,放冷,加浓缩液2倍量酒精,搅拌沉淀过夜。取上清液,浓缩至稠浸膏;加适当制药辅料,制成合剂、口服液或糖浆剂。
实施例12治疗溃疡性结肠炎的中药组合物药效的动物学实验
1实验方法
1.1实验动物
60只SPF级雄性SD大鼠,体质量200±20g,由上海中医药大学动物实验中心提供,。饲喂鼠饲料,自由饮清洁水,每日换水,隔日换垫料,如此1周。
1.2实验药物与试剂
白介素(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA试剂盒购自arigo公司;鼠IκBα、兔NF-κB p65、兔p-IκBα、兔p-NF-κB p65等一抗,羊抗鼠IκBα、羊抗兔NF-κB p65,羊抗兔p-IκBα、羊抗兔p-NF-κB p65等二抗,美国Cell Signaling Technology公司;柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine,SASP)由上海三维制药有限公司生产,规格:250mg/片,国药准字h31020450;葡聚糖硫酸钠(DSS),美国MPBiomedicals公司;中药药材由上海中医药大学附属曙光医院提供;大便隐血(OB)试剂盒由南京建成生物工研究所提供。
1.3分组与造模
随机选取10只SD大鼠作为空白组,其余50只通过DSS建立UC模型,用蒸馏水配置成相应浓度的DSS溶液,SD大鼠自由饮用3%DSS溶液7d+5%DSS溶液5d,空白组正常饮水。每日观察大鼠的体重、大便性状和便血情况,造模12d后评估所有大鼠的疾病活动指数(DAI),从空白组和模型组各随机抽取1只SD大鼠,取结肠组织,肉眼观察结肠损伤情况,确定模型是否复制成功。造模成功后,再随机分为5组,分别为模型组、SASP组、中药1组、中药2组,中药3组,每组10只,停饮DSS,各组恢复正常饮水,给与相应药物,治疗时间为15d。
1.4治疗方法
SASP组:SASP组用蒸馏水配成质量浓度为0.1g/ml溶液,造模24h后各组开始给予2ml/100gSASP灌胃。
中药1组:马鞭草30g、地锦草30g、槟榔15g、枳实15g、当归15g,按常规方法煎煮,浓缩至1ml/g,造模24h后给与15g/kg灌胃,每日一次。
中药2组:马鞭草30g、马齿苋30g、地锦草30g、槟榔15g、当归15g,按常规方法煎煮,浓缩至1ml/g,造模24h后给与15g/kg灌胃每日一次。
中药3组:马鞭草30g、马齿苋30g、地锦草30g、槟榔15g、枳实15g、当归15g,按常规方法煎煮,浓缩至1ml/g,造模24h后给与15g/kg灌胃每日一次。
模型组:给与等剂量的生理盐水灌胃,每日一次。
2实验过程
2.1观察大鼠DAI评分
观察各组大鼠一般情况,包括精神状态、毛色光泽、活动情况、大便性状(性状、便血情况)、体重,造模成功后即治疗后进行疾病活动指数评分:DAI评分。
表1 UC大鼠DAI评分表
2.2血清IL-1β、TNF-α含量测定
各组大鼠于末次灌胃后,禁食不禁水24h,予5%戊巴比妥,腹腔注射麻醉,沿腹中线切开腹腔,腹主动脉取血5ml,将上述血液样本,4℃rpm离心10min,分离血清,-80℃保存。用ELISA法测定IL-1β、TNF-α浓度,具体步骤按试剂盒说明书操作。
2.3蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测大鼠结肠组织中p-IκBα、IκBα、p-NF-κBp65、NF-κB p65蛋白的表达
取各组结肠黏膜样品充分研磨,裂解,离心收集上清提取细胞蛋白,BCA法测定细胞总蛋白浓度。于15%(质量浓度)聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白分离,将分离后的蛋白电转移至聚偏氟乙烯(PVDF)膜,加入体积分数10%BSA封闭液于摇床上室温封闭2h。用TBST洗膜6次,每次5min,后分别加入一抗孵育(一抗稀释于体积分数1%BSA)4℃反应过夜。次日先以TBST洗膜3次,每次10min,后加入二抗孵育(二抗稀释于体积分数1%BSA),室温反应1h,再用TBST洗膜6次,每次5min。按ECL试剂盒说明进行显影,对蛋白条带进行分析。
2.4统计学方法
采用SPSS 20.0统计软件,各组指标检测结果使用单因素方差分析及配对t检验,用表示检验总体均数差异性,以P≤0.05为差异有统计学意义。
3实验结果
3.1UC大鼠治疗前后DAI评分
造模前各组SD大鼠健康,精神良好,反应灵敏,毛色光滑,饮食正常,大便正常呈球状或长条状,体重增加,记录体重。进行治疗前DAI评分,验证造模成功后,灌胃治疗2周,干预结束后再次行DAI评分,模型组仍有大鼠有肉眼血便,中药3组大便干燥成形,其他各组为软便。治疗后各干预组DAI评分与治疗前相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);治疗后各干预组大鼠DAI评分与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),中药三组大鼠与SASP组、中药一组、中药二组大鼠的DAI评分相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。
表2治疗前后DAI评分比较
3.2对UC大鼠血清IL-1β、TNF-α含量的影响
与模型组相比,各干预组血清IL-1β、TNF-α水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),中药三组大鼠与SASP组、中药一组、中药二组大鼠相比,血清IL-1β、TNF-α水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。
表3治疗后血清IL-1β、TNF-α含量
3.3对UC大鼠结肠组织中p-IκBα、IκBα、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白的表达的影响
研究结果显示,模型组p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达水平较空白组升高(P<0.001),表明模型组NF-κB信号通路已经活化,炎症启动。给予药物干预后,干预组的p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达水平明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.001),而中药三组组上述蛋白表达水平较SASP组、中药一组、中药二组明显降低(P<0.005)。
表3各组p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65灰度值比较
4讨论
IκBα和NF-κB p65均是NF-κB信号通路上的重要蛋白,是最经典的炎症通路之一,其磷酸化蛋白代表这条信号通路的活化。IκB/NF-κB本以二聚体无活性形式存在与细胞内,前者为抑制蛋白,当应激、炎症、细胞因子等多种因素通过多条信号通路激活核因子κB抑制蛋白激酶(inhibitor ofnuclear factor kappa-B kinase,IKK),从而使IκBα磷酸化,进而使NF-κB从IκB/NF-κB复合物上解离,异常活化的NF-κB易位至核内与UC致病密切相关的细胞因子基因启动子或增强子部位的κB序列结合,编码多种炎性因子的基因表达,促进多种促炎性因子的分泌,如IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α等,后续产生级联炎症反应,使炎症过程得以放大和持续,从而损伤肠黏膜,最终导致UC的发生。
本发明的中药组合物可抑制IκB/NF-κB的活化,从而降低IL-1β、TNF-α等含量,起到抑制炎症的作用,且效果显著优于SASP组。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明方法的前提下,还可以做出若干改进和补充,这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物由下列重量份的原料药制成:马鞭草27-33份、马齿苋27-33份、地锦草27-33份、槟榔12-18份、枳实12-18份、当归12-18份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物由下列重量份的原料药制成:马鞭草29-31份、马齿苋29-31份、地锦草29-31份、槟榔14-16份、枳实14-16份、当归14-16份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物由下列重量份的原料药制成:马鞭草30份、马齿苋30份、地锦草30份、槟榔15份、枳实15份、当归15份。
4.权利要求1-3任一所述的中药组合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的药物还包括药学上常规的辅料。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的药学上常规的辅料选自乳化剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、调味剂、着色剂或助溶剂。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、汤剂、合剂、丸剂或糖浆剂。
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