CN109701011A - 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 - Google Patents
疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109701011A CN109701011A CN201910139736.XA CN201910139736A CN109701011A CN 109701011 A CN109701011 A CN 109701011A CN 201910139736 A CN201910139736 A CN 201910139736A CN 109701011 A CN109701011 A CN 109701011A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- virus
- antigen
- adjuvant
- double stranded
- stranded polynucleotide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims abstract description 129
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 73
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 73
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 72
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 62
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 32
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 48
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 42
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 239000004411 aluminium Substances 0.000 claims abstract description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 29
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 25
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- -1 glycan compound Chemical class 0.000 claims description 19
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 16
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 10
- 229910021502 aluminium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000032982 Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 claims description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 claims description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 4
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 claims description 4
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 229940001007 aluminium phosphate Drugs 0.000 claims description 4
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 claims description 4
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 claims description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims description 3
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 claims description 3
- 241000702247 Reoviridae Species 0.000 claims description 3
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 claims description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 claims description 2
- 241000701242 Adenoviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000120516 African horse sickness virus Species 0.000 claims description 2
- 241000712892 Arenaviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 claims description 2
- 241001533362 Astroviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 claims description 2
- 241001260012 Bursa Species 0.000 claims description 2
- 241000714198 Caliciviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 claims description 2
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 2
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 claims description 2
- 241001533384 Circovirus Species 0.000 claims description 2
- 108010034145 Helminth Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 241000724675 Hepatitis E virus Species 0.000 claims description 2
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 claims description 2
- 241001263448 Mycetozoa Species 0.000 claims description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 claims description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000701945 Parvoviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000242594 Platyhelminthes Species 0.000 claims description 2
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 claims description 2
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 claims description 2
- 241000711931 Rhabdoviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 claims description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000710924 Togaviridae Species 0.000 claims description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 2
- 108700010877 adenoviridae proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 239000013566 allergen Substances 0.000 claims description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 2
- 208000003836 bluetongue Diseases 0.000 claims description 2
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 claims description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 2
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 2
- 244000000013 helminth Species 0.000 claims description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 241000427159 Achyranthes Species 0.000 claims 1
- WZUKKIPWIPZMAS-UHFFFAOYSA-K Ammonium alum Chemical compound [NH4+].O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O WZUKKIPWIPZMAS-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims 1
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 claims 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 claims 1
- 241000700739 Hepadnaviridae Species 0.000 claims 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 claims 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 claims 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 claims 1
- 241000700625 Poxviridae Species 0.000 claims 1
- 101710132701 Protein L1 Proteins 0.000 claims 1
- 239000005864 Sulphur Substances 0.000 claims 1
- 235000011126 aluminium potassium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 238000004070 electrodeposition Methods 0.000 claims 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 claims 1
- 229940050271 potassium alum Drugs 0.000 claims 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 claims 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 abstract description 3
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 abstract description 3
- SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N hepatitis b vaccine Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1N=CN=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229940124736 hepatitis-B vaccine Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000011160 research Methods 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 159000000013 aluminium salts Chemical class 0.000 description 7
- 229910000329 aluminium sulfate Inorganic materials 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 7
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 7
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 4
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 4
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 4
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 4
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 3
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 3
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 101100325756 Arabidopsis thaliana BAM5 gene Proteins 0.000 description 2
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 2
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 2
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 101150046378 RAM1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100476489 Rattus norvegicus Slc20a2 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 2
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000000091 immunopotentiator Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- AUHDWARTFSKSAC-HEIFUQTGSA-N (2S,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-(6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolane-2-carboxylic acid Chemical compound [C@]1([C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)(N1C=NC=2C(O)=NC=NC12)C(=O)O AUHDWARTFSKSAC-HEIFUQTGSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100031584 Cell division cycle-associated 7-like protein Human genes 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229940032024 DPT vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 229940124855 Haemophilus influenzae vaccine Drugs 0.000 description 1
- 206010061192 Haemorrhagic fever Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000777638 Homo sapiens Cell division cycle-associated 7-like protein Proteins 0.000 description 1
- 101000619564 Homo sapiens Putative testis-specific prion protein Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000001718 Immediate Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- GRSZFWQUAKGDAV-UHFFFAOYSA-N Inosinic acid Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 GRSZFWQUAKGDAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 108010084333 N-palmitoyl-S-(2,3-bis(palmitoyloxy)propyl)cysteinyl-seryl-lysyl-lysyl-lysyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000150350 Peribunyaviridae Species 0.000 description 1
- 102100022208 Putative testis-specific prion protein Human genes 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 1
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010045240 Type I hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 208000010216 atopic IgE responsiveness Diseases 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007233 immunological mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000007365 immunoregulation Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000004245 inosinic acid Substances 0.000 description 1
- 229940028843 inosinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013902 inosinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 229940066827 pertussis vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 229940126583 recombinant protein vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 230000009959 type I hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明提供一种疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用。它是由铝佐剂、双链聚核苷酸—ε‑聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及水性溶剂组成，其中铝佐剂的临床使用浓度为0.1‑10.0mg/ml，双链聚核苷酸—ε‑聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的临床使用浓度以双链聚核苷酸计为100‑10000μg/ml。构成的复合佐剂系统具有良好的抗RNase水解能力、稳定性、安全性及免疫刺激活性，且与乙肝疫苗及灭活狂犬疫苗等不同形式的疫苗联合应用，均可显著提高疫苗的免疫原性。
Description
技术领域
本发明涉及免疫学技术领域，具体涉及一种复合佐剂系统及其在抗原中的应用，用于免疫治疗及预防。
背景技术
疫苗佐剂的概念
佐剂(Adjuvant)又称免疫调节剂或免疫增强剂(Immunepotentiator)，起源于拉丁文“Adjuvare”，是辅助或者增强的意思。佐剂是疫苗的一种添加剂，当它先于抗原或与抗原混合注入机体后，能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型，属于非特异性的免疫增强剂，而其本身无抗原性。理想的佐剂不仅能够增强免疫反应，而且能使机体获得最佳的保护性免疫。
疫苗佐剂的应用目的
经研究认为，佐剂主要包括免疫调节、细胞毒性T淋巴细胞诱导、抗原递呈、抗原靶向和储存等几种作用方式。通过以上几种方式，达到的使用目的有：
(1)增强纯化的或者重组抗原的免疫原性、免疫应答速度及耐受性；
(2)降低抗原的用量或者达到免疫保护所需要的接种剂量；
(3)提高疫苗在婴儿、老年人或者免疫系统受损人群的免疫效力；
(4)作为通过黏膜摄取抗原的抗原递送体系，可促进胃肠黏膜对疫苗的吸收。佐剂的概念来源于在接种部位形成的溃疡，并促进高水平特异性抗体的产生，即使是由接种不相关的物质产生的溃疡也能够诱导高特异性抗体的产生；
(5)佐剂能够增加对细胞的渗入性，防止抗原降解，将抗原运输到特异的抗原提呈细胞，增强抗原的呈递或诱导细胞因子的释放。
疫苗佐剂的种类
目前，国际上对于佐剂的分类尚无统一标准，根据化学成分的不同可以分为铝盐佐剂、蛋白类佐剂、核酸类佐剂、含脂类佐剂和混合佐剂等几类。
1.铝盐佐剂
铝盐应用于临床已经有80多年的历史，它是首个被美国FDA批准可以用于人的经典佐剂。许多疫苗的成分中含有铝盐，如百白破疫苗和流感嗜血杆菌疫苗。根据制备过程的不同，以铝盐为佐剂的疫苗可以分为两种:铝吸附疫苗与铝沉淀疫苗。铝吸附疫苗是将抗原加入氢氧化铝或磷酸铝溶液；而铝沉淀疫苗是把铝剂悬浮液加入抗原溶液中。氢氧化铝或者磷酸铝是人们经常使用的铝佐剂。研究发现，铝佐剂疫苗能够减少抗原的使用量，增强机体免疫反应的强度和持久性。铝盐的作用机制至今尚不十分明确，普遍认为抗原吸附铝盐颗粒形成凝胶状态，注射入动物体内后形成抗原贮存库，这些不溶性颗粒能吸附抗原物质，增加了抗原表面积。另外，佐剂能在注射部位形成富含巨噬细胞的肉芽肿，延缓抗原的吸收，进而延长抗原的刺激时间，将在正常条件下存在数日的抗原留存数周之久，且注射部位摄取抗原的能力得到增强。研究表明，氢氧化铝作为佐剂还能激活Th2细胞分泌IL－4，诱导CD83、CD86和MHC－II类分子的表达，进而产生Th2型体液免疫应答。铝盐作为疫苗佐剂有很多优点，但是也存在不足。它虽然可以有效地诱导体液免疫应答，但是对细胞免疫不起作用，不能诱导细胞免疫应答。
2.蛋白类佐剂
此类佐剂多属于小分子多肽或糖蛋白，由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质，一般为细胞因子类，对Th细胞的分化起重要作用，还能增强NK细胞、T淋巴细胞的功能，对机体的免疫应答起到广泛上调的作用。蛋白类佐剂与抗原共同使用增强了疫苗的免疫效力，也可将其组装成质粒后与抗原一起混合注射。IL－12由单核细胞和B细胞产生，具有多种生物活性，能够显著减少细菌的入侵数量，提高黏膜和免疫系统中IgG2a、IgA的表达水平，是一种有着较为广阔应用前景的细胞因子佐剂。它诱导了Th1型免疫应答，肿瘤、AIDS的治疗正处于临床试验阶段。
3.核酸类佐剂
在人们研究疫苗的过程中发现一些核酸类物质也具备佐剂的特质，最具代表性的是CPGDNA，其序列中以非甲基化的胞嘧啶脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸为单元的寡聚体，TLR9的激动剂，是目前佐剂研究的热点。它在增强特异性免疫应答、诱导机体非特异性免疫应答以及调节免疫应答类型等方面发挥着重要的作用。CPG－ODN的特征性序列可激活多种免疫效应细胞，如T细胞、B细胞和NK等免疫活性细胞，因此CPG－ODN应用于较多的实验研究中。细菌DNA是CPG－ODN的来源，其作用包括增强体液免疫和细胞免疫两个方面。其在肿瘤和传染病等方面得到应用的可能性会较高。目前还没有报道CPG－ODN对人类产生严重的副作用，但在动物模型中已发现CPG－ODN能诱发自身免疫性疾病。一、双链聚核苷酸：双链聚核苷酸或其衍生物具有多种药理活性，来源是天然提取或人工合成。人工合成的双链聚核苷酸如聚肌胞(polyI:C)可诱导体内产生干扰素，保护细胞免受病毒感染，具有防治病毒性疾病等疗效；天然提取的双链聚核苷酸如呼肠孤病毒科提取的病毒双链RNA具有抗病毒、抗肿瘤等活性。聚肌胞(PolyIC，PIC)是人工合成的聚次黄嘌呤核苷酸(PolyI)和聚胞嘧啶核苷酸(PolyC)配对后的双链产物，是一种高效干扰素诱生剂。但由于PIC易于被人及灵长目动物血清中的核酸酶水解，限制了临床使用。聚肌胞主要用于预防和治疗病毒性感染，如流感、病毒性肝炎、疱疹性结膜炎。也试用于肿瘤的辅助性治疗。少数病人有一过性低热，偶见乏力、口干、恶心等。
4.含脂类佐剂
含脂类佐剂包括脂多糖(LPS)和脂质体两类。LPS为革兰氏阴性菌外膜脂多糖，类脂A是LPS中起佐剂作用的主要组分。研究人员将LPS作为百日咳疫苗的佐剂共同免疫小鼠，实验结果显示:LPS不仅提高了疫苗的免疫效率，而且减少了Ⅰ型超敏反应的发生。脂质体类似于生物膜，一般由磷脂和胆固醇形成的双分子层包被抗原形成的超微球状制剂，既能够运输抗原，又可作为疫苗的佐剂。脂质体佐剂没有毒性且能降低抗原的毒性，在宿主体内可以自行降解。研究表明，脂质体能够增强机体的体液免疫应答和细胞免疫应答，另外脂质体的结构有利于将抗原递呈给抗原处理细胞。研究还表明，脂质体与弗氏试剂或氢氧化铝联合使用有事半功倍的效果。但是它也有不足之处，如稳定性差、易氧化、生产成本高等。因此，目前对于脂质体应用的研究暂停留在医学研究方面。
5.混合佐剂
MF59是一种水包油乳剂，它是将吐温80、山梨糖醇三油酸酯和角鲨烯混合后于高压条件下进行微流化形成的均一的小滴状乳液。这种混合佐剂在注射部位能够诱导产生局部的免疫刺激环境，增加趋化因子、细胞因子含量，聚集肌肉中MHC+细胞。此外，MF59还能够增强树突状细胞摄取抗原的能力。由于MF59能够增强免疫力低下的人群中流感的免疫原性，因此20世纪90年代认证其作为流感疫苗的佐剂。大量数据显示，MF59用于流感疫苗是较为安全的。
6.聚集体结构佐剂
研究者对3种新型分子聚集体配方佐剂[蕃茄苷(RAM1)、糖基酰胺脂(RAM2)和第5代树状聚合物(RAM3)]的免疫增强作用进行了比较,并评估了这些佐剂与可溶性蛋白抗原一起应用时增强Th1或Th2应答的能力。该项研究以卵清蛋白(OVA)为抗原,上述3种新型聚集体为佐剂,并用结核菌素、Al(OH)3和弗氏不完全佐剂作对照。结果3种佐剂中RAM1优于其他佐剂,其诱导的细胞因子以Th1型为主,且在接种后期能诱导Th2型应答。
早期的佐剂研究主要基于经验，由于缺乏技术及免疫机制研究的支持，佐剂的研发相对滞后于疫苗研发。自铝佐剂首次应用于人体，有近70年的时间，它是唯一的人用佐剂(O'Hagan DT等人.Expert Rev Vaccines 2013Jan；12(1):13-30)。虽然铝佐剂成本低、安全性好，但该类佐剂主要活化Th2类免疫反应，对细胞免疫没有强化作用，且在许多人用疫苗(尤其是重组蛋白疫苗和多肽疫苗)中没有明显的强化免疫反应的效果。因此，随着越来越多候选疫苗的涌现及疫苗经济效益的凸显，对临床上可用的新型佐剂的需求正在快速增长。
具有免疫刺激活性的分子是新型佐剂的发展方向之一。特别是Pam3Cys、poly IC、MPL、咪喹莫特(Imiquimod)、CpG ODN等TLR刺激剂。
苏文全的发明专利《一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物及其制备使用方法》201610053971.1阐述了用ε-聚赖氨酸作为poly IC稳定剂，较好的提高了poly IC机体内稳定性及免疫调节活性。
由于目前已知的铝佐剂与双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物活化免疫反应的机制存在明显差异，活化的免疫反应类型也不相同，将二者联合使用，可望通过协同作用更为全面地活化免疫反应。将安全性好的铝佐剂与免疫刺激活性强的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物混合使用，亦可望减少抗原的用量，将免疫反应的强度控制在一定范围内，兼顾安全性和有效性。因此，发明人将本发明所述的铝佐剂与双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物按一定比例混合后，与不同类型的疫苗联合免疫，采用这种策略获得的新佐剂具有很好的应用前景，可望同时应用于预防性疫苗及治疗性疫苗领域。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的抗RNase水解能力强，稳定性好，免疫刺激活性好、具有人体应用前景的疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用，研究该复合佐剂系统及免疫组合物在免疫治疗及预防领域的用途。
本发明人经研究发现，ε-聚赖氨酸的等电点与铝佐剂相近，佐剂系统中两种成分有着很好的相容性，铝佐剂的存在提升了双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的抗RNase水解能力，采用恰当的配伍方式将一种双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂进行组合，构成的复合佐剂系统具有良好的抗RNase水解能力、稳定性、安全性及免疫刺激活性，且与乙肝疫苗及灭活狂犬疫苗等不同形式的疫苗联合应用，均可显著提高疫苗的免疫原性。本发明基于以上发现，现已完成，在本文实施例中提供数据。
本发明第一方面提供一种双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统，其包含铝佐剂、双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物，其中铝佐剂的临床使用浓度为0.1mg/ml-10.0mg/ml，双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的临床使用浓度以双链聚核苷酸计为100μg/ml-10000μg/ml。
具体的，本发明第一方面提供的复合佐剂系统中，其中双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物，其特征是含有双链聚核苷酸与阳离子ε-聚赖氨酸、阴离子硫酸聚糖及金属阳离子相互复合而成的复合物，
所述的双链聚核苷酸是指阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物，来源可选自但不限于天然提取或人工合成；天然提取双链聚核苷酸来源于呼肠孤病毒科病毒的核酸提取物，包含鸡传染性法氏囊病毒RNA、轮状病毒RNA、羊蓝舌病病毒RNA、非洲马瘟病毒RNA；人工合成的双链聚核苷酸包含聚肌胞；优选的，所述双链聚核苷酸为聚肌苷酸-聚胞苷酸poly IC；
所述的阳离子ε-聚赖氨酸是指阳离子的ε-氨基同型单体聚合物；
所述的阴离子硫酸聚糖是指含硫酸基的亲水性阴离子聚糖或其衍生物，并可与双链聚核苷酸、ε-聚赖氨酸及金属阳离子相互复合成水溶性复合物溶液，包括多糖和低聚糖；优选的，所述阴离子硫酸聚糖可选自但不限于肝素、硫酸软骨素A、香菇多糖硫酸酯、牛膝多糖硫酸酯；双链聚核苷酸、硫酸聚糖与ε-聚赖氨酸的优选比例是双链聚核苷酸的磷酸根所具有的阴离子电荷数与硫酸聚糖的硫酸基所具有的阴离子电荷数总和与ε-聚赖氨酸的氨基所具有的阳离子电荷数比为1：1；
所述的金属阳离子可选自但不限于Ca2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+中的一种或一种以上，且其金属离子呈可溶性金属盐的形式，临床使用浓度为0.01mmol—100mmol/L；优选的，所述的金属阳离子为Ca2+。
所使用的水性溶剂包含人体可耐受的pH缓冲剂和离子强度调节剂，其中所述人体可耐受的pH缓冲剂可选自但不限于柠檬酸盐或磷酸盐，所述离子强度调节剂包含氯化钠和/或氯化钾，所述水相成分的pH值在6.0-9.0范围内，
优选的，所述水相成分为PBS缓冲液。
本发明另一方面提供一种免疫组合物即疫苗复合佐剂系统在抗原中的应用，其成分由本发明第一方面所述的佐剂组合物及不同形式的抗原组成。其中，所述抗原可选自但不限于来源于细菌、病毒、寄生虫、真菌、肿瘤、利用基因工程等方法制备的抗原、人体自身抗原和/或变态反应原等的抗原，且所述免疫组合物中抗原的数量可为一种或多种。
优选的，所述免疫组合物的抗原来源于病原微生物的抗原，可选自但不限于痘病毒科、疱疹病毒科、腺病毒科、多瘤病毒科、乳头瘤病毒科、细小病毒科、圆环病毒科、嗜肝DNA病毒科、逆转录病毒科、呼肠孤病毒科、副黏病毒科、弹状病毒科、丝状病毒科、正黏病毒科、布尼亚病毒科、沙粒病毒科、小RNA病毒科、杯状病毒科、星状病毒科、戊肝病毒科、黄病毒科、冠状病毒科、披膜病毒科、放线菌、衣原体、硬壁菌、变形菌、螺旋体、子囊菌、担子菌、肉足鞭毛门、顶覆门、纤毛门、扁形动物门、线虫门和/或节肢动物门等的抗原。
更优选的，所述抗原来源于人乳头瘤病毒、狂犬病毒、乙型脑炎病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、水痘病毒、肾综合症出血热病毒。
特别优选的，所述抗原为灭活病毒，例如但不限于：狂犬病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型脑炎病毒、水痘病毒、肾综合症出血热病毒。特别优选的，所述的免疫组合物的抗原为病毒来源的重组蛋白抗原和/或多肽或表位抗原，，例如但不限于：人乳头瘤病毒或乙型肝炎病毒的病毒样颗粒VLP、嵌合病毒样颗粒cVLP、人乳头瘤病毒主要外壳蛋白L1和/或次要外壳蛋白L2来源的重组蛋白抗原或多肽或表位抗原。
本发明还涉及所述复合佐剂系统及免疫组合物的用途，可应用于制备免疫治疗及预防等多种用途的制剂，包括但不限于：(1)预防病原微生物感染及感染相关的各种疾病，如流感病毒、狂犬病毒、HIV、HPV等的感染及感染相关疾病；(2)肿瘤的预防及治疗、(3)过敏反应等免疫相关疾病的治疗。
根据本发明，所述的复合佐剂系统及免疫组合物可采用人体可接受的形式进行接种，接种部位包括但不限于肠道外注射给药、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射、皮下注射、经呼吸道吸入、直肠给药、阴道给药、经鼻给药、经口给药、经眼给药、局部给药、透皮或皮内给药等。
相关术语的说明及解释
根据本发明，术语“抗原”是指在适当情形下被免疫系统所识别的各种物质，可来源于病原体、人体自身、肿瘤、利用基因工程等方法制备的物质等。
具体实施方式
下面将通过非限制性实施例进一步说明本发明，本领域技术人员公知，在不背离本发明精神的情况下，可以对本发明做出许多修改，这样的修改也落入本发明的范围。下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围，因为实施方案必然是多样的。本说明书中使用的用语仅是为了阐述特定的实施方案，而非作为限制，本发明的范围已界定在所附的权利要求中。
除非特别说明，本说明书中所使用的所有技术和科学用语均和本案所属技术领域的技术人员所普遍明了的意义相同。下面就本发明的优选方法和材料加以叙述，但是与本说明书中所述方法和材料类似或等效的任何方法和材料均可用以实施或测试本发明。下述实验方法如无特别说明，均为常规方法或产品说明书所描述的方法，所使用的实验材料如无特别说明，均可容易地从商业公司获取。本说明书中所提到的所有公开文献均被并入于此作为参考，以揭示并说明所述公开文献中的方法和/或材料。
实施例1：一种双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统的稳定性实验
取21日龄小鸡随机分为八组，每组10只，一组注射双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物(每ml含poly IC 2mg、ε-聚赖氨酸1.0mg、硫酸肝素钠1.6mg、氯化钙0.4mmol/L)、第二组注射双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统(每ml含poly IC 2mg、ε-聚赖氨酸1.0mg、硫酸肝素钠1.6mg、氯化钙0.4mmol/L、氢氧化铝佐剂1.6mg)、第三组注射双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统(每ml含poly IC 2mg、ε-聚赖氨酸1.0mg、硫酸肝素钠1.6mg、氯化钙0.4mmol/L、磷酸铝佐剂1.0mg)、第四组注射双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统(每ml含poly IC 2mg、ε-聚赖氨酸1.0mg、硫酸肝素钠1.6mg、氯化钙0.4mmol/L、硫酸铝佐剂2.0mg)、。每只鸡按0.01ml/Kg体重注射，间隔三天再注射一次，在最后一次注射12小时、36小时后采血，用ELISA方法测定血液中的α干扰素含量；其次，将上述双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物、双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统在37℃放置2周后同法检测α干扰素含量；其三，将上述双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物、双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统各加入终浓度50ug/ml的RNase，在室温放置15min后，同法检测12小时α干扰素含量。。检测结果如下：
试验结果表明，双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物、双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统均有良好的干扰素诱导效果。在37℃放置2周后，两组样品的稳定性有明显差别，铝佐剂的加入提升了双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的稳定性。
实施例2：双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统异常毒性检测
将实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统按《中国药典》方法进行异常毒性检测，检测结果如下：
试验结果表明，实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统小鼠异常毒性检测结果合格。
实施例3：双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统联合灭活狂犬疫苗的效价检测
将实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和磷酸铝佐剂(磷酸铝佐剂含量1.0mg/ml)组成的复合佐剂系统与灭活狂犬病毒抗原按1:1的比例充分混合，作为样品疫苗组，以灭活狂犬病毒抗原，作为对照疫苗组。然后按狂犬病疫苗效价测定法(NIH法)进行效价检测，检测结果如下：
| 组别 | 疫苗效价(IU/ml) |
| 样品疫苗组 | 7.2 |
| 对照疫苗组 | 4.0 |
试验结果表明，样品疫苗组效价高于对照疫苗组。
实施例4：双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和硫酸铝佐剂组成的复合佐剂系统联合灭活乙脑疫苗的中和指数T值检测
将实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和硫酸铝佐剂(硫酸铝佐剂含量2.0mg/ml)组成的复合佐剂系统与灭活乙脑病毒抗原按1:1的比例充分混合，作为样品疫苗组，以PBS与灭活乙脑病毒抗原按1:1的比例充分混合，作为对照疫苗组。然后按《中国药典》方法进行中和指数T值检测，检测结果如下：
| 组别 | 疫苗中和指数(T值) |
| 样品疫苗组 | 1.74 |
| 对照疫苗组 | 1.36 |
试验结果表明，样品疫苗组中和指数高于对照疫苗组。
实施例5：双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统联合重组表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的效价检测
将实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和氢氧化铝佐剂(氢氧化铝佐剂含量1.6mg/ml)组成的复合佐剂系统与重组表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)按1:2的比例充分混合，作为样品疫苗组，以含1.6mg/ml氢氧化铝的PBS与重组表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)按1:2的比例充分混合，作为对照疫苗组。然后按《中国药典》方法进行效价测定，检测结果如下：
| 组别 | 效价测定 |
| 样品疫苗组 | 2.4 |
| 对照疫苗组 | 1.4 |
试验结果表明，样品疫苗组的效价高于对照疫苗组。
实施例6：双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和铝佐剂组成的复合佐剂系统联合灭活Ⅰ型、Ⅱ型肾综合症出血热病毒抗原的效价检测
将实施例1所制备的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物和氢氧化铝佐剂(氢氧化铝佐剂含量1.6mg/ml)组成的复合佐剂系统与灭活Ⅰ型、Ⅱ型肾综合症出血热病毒抗原按1:2的比例充分混合，作为样品疫苗组，以含1.6mg/ml氢氧化铝的PBS与灭活Ⅰ型、Ⅱ型肾综合症出血热病毒抗原按1:2的比例充分混合，作为对照疫苗组。然后按空斑减少中和试验(PRNT)法进行家兔血清效价检测，检测结果如下：
试验结果表明，样品疫苗组的效价高于对照疫苗组。
Claims (8)
1.一种疫苗复合佐剂系统，其特征是：它是由铝佐剂、双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及水性溶剂组成，其中铝佐剂的临床使用浓度为0.1-10.0mg/ml，双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物的临床使用浓度以双链聚核苷酸计为100-10000μg/ml。
2.根据权利要求1中所述的疫苗复合佐剂系统，其特征是：所述铝佐剂是指，氢氧化铝佐剂、磷酸铝佐剂、硫酸铝佐剂、铵明矾佐剂或钾明矾佐剂。
3.根据权利要求1或2所述的疫苗复合佐剂系统，其特征是：所述双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物是含有双链聚核苷酸与阳离子ε-聚赖氨酸、阴离子硫酸聚糖及金属阳离子相互复合而成的复合物，
所述的双链聚核苷酸是指阴离子的双链聚核苷酸或其衍生物，来源是天然提取或人工合成；天然提取双链聚核苷酸来源于呼肠孤病毒科病毒的核酸提取物，为鸡传染性法氏囊病毒RNA、轮状病毒RNA、羊蓝舌病病毒RNA或非洲马瘟病毒RNA；人工合成的双链聚核苷酸包含聚肌胞；优选的，所述双链聚核苷酸为聚肌苷酸-聚胞苷酸poly IC；
所述的阳离子ε-聚赖氨酸是指阳离子的ε-氨基同型单体聚合物；
所述的阴离子硫酸聚糖是指含硫酸基的亲水性阴离子聚糖或其衍生物，并可与双链聚核苷酸、ε-聚赖氨酸及金属阳离子相互复合成水溶性复合物溶液，包括多糖和低聚糖；优选的，所述阴离子硫酸聚糖包含肝素、硫酸软骨素A、香菇多糖硫酸酯或牛膝多糖硫酸酯；双链聚核苷酸、硫酸聚糖与ε-聚赖氨酸的优选比例是双链聚核苷酸的磷酸根所具有的阴离子电荷数与硫酸聚糖的硫酸基所具有的阴离子电荷数总和与ε-聚赖氨酸的氨基所具有的阳离子电荷数比为1：1；
所述的金属阳离子是指Ca2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+中的一种或一种以上，且其金属离子呈可溶性金属盐的形式，临床使用浓度为0.01mmol—100mmol/L；优选的，所述的金属阳离子为Ca2 +。
4.根据权利要求3所述的疫苗复合佐剂系统，其特征是：所使用的水性溶剂包含人体可耐受的pH缓冲剂和离子强度调节剂，其中所述人体可耐受的pH缓冲剂包含柠檬酸盐或磷酸盐，所述离子强度调节剂包含氯化钠和/或氯化钾，所述水相成分的pH值在6.0-9.0范围内，优选的，所述水相成分为PBS缓冲液。
5.根据权利要求1或2所述的疫苗复合佐剂系统，其特征是：所使用的水性溶剂包含人体可耐受的pH缓冲剂和离子强度调节剂，其中所述人体可耐受的pH缓冲剂包含柠檬酸盐或磷酸盐，所述离子强度调节剂包含氯化钠和/或氯化钾，所述水相成分的pH值在6.0-9.0范围内，优选的，所述水相成分为PBS缓冲液。
6.权利要求1－5中任意一项所述的疫苗复合佐剂系统在抗原中的应用，其特征是：所述抗原来源于细菌、病毒、寄生虫、真菌、肿瘤、利用基因工程等方法制备的抗原、人体自身抗原和变态反应原的抗原中的一种或一种以上；优选的，所述抗原来源于痘病毒科、疱疹病毒科、腺病毒科、多瘤病毒科、乳头瘤病毒科、细小病毒科、圆环病毒科、嗜肝DNA病毒科、逆转录病毒科、呼肠孤病毒科、副黏病毒科、弹状病毒科、丝状病毒科、正黏病毒科、布尼亚病毒科、沙粒病毒科、小RNA病毒科、杯状病毒科、星状病毒科、戊肝病毒科、黄病毒科、冠状病毒科、披膜病毒科、放线菌、衣原体、硬壁菌、变形菌、螺旋体、子囊菌、担子菌、肉足鞭毛门、顶覆门、纤毛门、扁形动物门、线虫门和节肢动物门中的一种或一种以上；
更优选的，所述抗原来源于人乳头瘤病毒、狂犬病毒、乙型脑炎病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、水痘病毒、肾综合症出血热病毒中的一种或一种以上。
7.根据权利要求6所述的疫苗复合佐剂系统在抗原中的应用，其特征是：所述抗原为灭活病毒，所述灭活病毒选自灭活的狂犬病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、乙型脑炎病毒、水痘病毒、肾综合症出血热病毒中的一种或一种以上。
8.根据权利要求6所述的疫苗复合佐剂系统在抗原中的应用，其特征是：所述抗原为病毒来源的重组蛋白抗原或多肽或表位抗原的一种或全部，选自：人乳头瘤病毒或乙型肝炎病毒的病毒样颗粒VLP、嵌合病毒样颗粒cVLP、人乳头瘤病毒主要外壳蛋白L1和/或次要外壳蛋白L2来源的重组蛋白抗原或多肽或表位抗原中的一种及一种以上。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910139736.XA CN109701011B (zh) | 2019-02-26 | 2019-02-26 | 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910139736.XA CN109701011B (zh) | 2019-02-26 | 2019-02-26 | 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109701011A true CN109701011A (zh) | 2019-05-03 |
| CN109701011B CN109701011B (zh) | 2022-04-05 |
Family
ID=66263926
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910139736.XA Active CN109701011B (zh) | 2019-02-26 | 2019-02-26 | 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109701011B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1997391A (zh) * | 2005-06-08 | 2007-07-11 | 申益皮卡生物技术有限公司 | 以聚肌苷酸－聚胞苷酸为主的佐剂 |
| US20080131466A1 (en) * | 2006-09-26 | 2008-06-05 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| CN102813921A (zh) * | 2012-08-16 | 2012-12-12 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一种口蹄疫疫苗新型复合氢氧化铝佐剂以及制备疫苗方法 |
| CN103386128A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-11-13 | 中国食品药品检定研究院 | 一种含联合佐剂的结核亚单位疫苗 |
| CN105535964A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-05-04 | 苏文全 | 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法 |
| CN105664152A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-06-15 | 苏文全 | 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物及其制备使用方法 |
-
2019
- 2019-02-26 CN CN201910139736.XA patent/CN109701011B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1997391A (zh) * | 2005-06-08 | 2007-07-11 | 申益皮卡生物技术有限公司 | 以聚肌苷酸－聚胞苷酸为主的佐剂 |
| US20080131466A1 (en) * | 2006-09-26 | 2008-06-05 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| CN102813921A (zh) * | 2012-08-16 | 2012-12-12 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一种口蹄疫疫苗新型复合氢氧化铝佐剂以及制备疫苗方法 |
| CN103386128A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-11-13 | 中国食品药品检定研究院 | 一种含联合佐剂的结核亚单位疫苗 |
| CN105535964A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-05-04 | 苏文全 | 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法 |
| CN105664152A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-06-15 | 苏文全 | 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸复合物及其制备使用方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CHUAI X等: "Poly(I:C)/Alum Mixed Adjuvant Priming Enhances HBV Subunit Vaccine-Induced Immunity in Mice When Combined with Recombinant Adenoviral-Based HBV Vaccine Boosting", 《PLOS ONE》 * |
| 付丽丽等: "佐剂铝和PolyIC 在结核亚单位疫苗中的佐剂效应", 《2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周论文集》 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109701011B (zh) | 2022-04-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109701010A (zh) | 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 | |
| CN1091978A (zh) | 粒细胞-巨噬细胞-集落刺激因子作为疫苗佐剂的用途 | |
| CN111603556B (zh) | 一种新型冠状病毒亚单位纳米疫苗的制备和应用 | |
| CN102166356A (zh) | α-甘露聚糖肽作为疫苗佐剂的应用及基于该应用制备的疫苗制剂 | |
| US20080292663A1 (en) | Adjuvant compositions and methods for delivering vaccines | |
| CN112569348B (zh) | 一种带状疱疹疫苗 | |
| CN102949717A (zh) | 一种含poly I:C佐剂的新型乙肝疫苗制剂 | |
| KR101751376B1 (ko) | 점막 백신 | |
| WO2023131356A2 (zh) | 四氧化三锰颗粒在制备疫苗佐剂中的应用 | |
| CN117897487A (zh) | 人工合成的含CpG单链脱氧寡核苷酸在疫苗中的应用 | |
| CN105535964B (zh) | 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法 | |
| Abd El-Aziz et al. | Evaluation of cell-mediated immunity of E. coli nanovaccines in chickens | |
| CN111701018A (zh) | 环二核苷酸修饰铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统 | |
| CN101559225B (zh) | 脑膜炎球菌疫苗 | |
| CN109701011A (zh) | 疫苗复合佐剂系统及其在抗原中的应用 | |
| CN115501333A (zh) | 一种疫苗佐剂、疫苗组合物及其应用 | |
| CN103908662A (zh) | 可生物分解的高效率登革疫苗、其制备方法及医药组合物 | |
| JP2004508424A (ja) | 免疫調節調剤物 | |
| CN102813920A (zh) | 一种疫苗佐剂 | |
| CN101891825B (zh) | 乙肝核心蛋白与结核抗原或抗原片段的重组融合蛋白及用途 | |
| WO2024040979A1 (zh) | 一种人参酸性多糖疫苗佐剂、疫苗组合物及其应用 | |
| EP4431111A1 (en) | Probiotic as vaccine immunoadjuvant | |
| CN107261136B (zh) | 多聚磷酸钠的应用及含有多聚磷酸钠的疫苗剂 | |
| CN1305527C (zh) | 乙型肝炎治疗疫苗及其制备方法 | |
| CN117462667A (zh) | 一种复合佐剂及其在疫苗制备中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20220909 Address after: 110169 No. 68-22, Quanyun Road, Hunnan District, Shenyang City, Liaoning Province (1-16-4) Patentee after: Liaoke Biology (Shenyang) Co.,Ltd. Address before: 110021 No. 462, building 55-3, Fuzhou Road, shenbeixin District, Shenyang City, Liaoning Province Patentee before: Su Wenquan |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230807 Address after: Room 332, 3rd Floor, Building 1, No. 25 Yongxing Road, Daxing District, Beijing, 102629 Patentee after: Beijing Jiayi Weike Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 110169 No. 68-22, Quanyun Road, Hunnan District, Shenyang City, Liaoning Province (1-16-4) Patentee before: Liaoke Biology (Shenyang) Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240506 Address after: Room 3-7-3, No. 84-2 Taibai Mountain Road, Huanggu District, Shenyang City, Liaoning Province, 110021 Patentee after: Su Wenquan Country or region after: China Address before: Room 332, 3rd Floor, Building 1, No. 25 Yongxing Road, Daxing District, Beijing, 102629 Patentee before: Beijing Jiayi Weike Biotechnology Co.,Ltd. Country or region before: China |