CN109694408A - 一种细胞色素c的离子交换纯化方法 - Google Patents

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高川
赵奕
王煦怡
刘咏梅
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
    • C07K14/80—Cytochromes

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Abstract

本发明涉及一种细胞色素C的离子交换纯化方法，属于离子交换技术领域。本发明采用大孔弱酸阳离子交换树脂直接从细胞色素C提取液中吸附细胞色素C，然后采用一定pH值得洗脱液将树脂吸附的细胞色素C洗脱下来，再经浓缩、干燥得到高纯度细胞色素C。该技术具有工艺操作简单，产品纯度高，产品收率高及产品生产成本低等优点。

Description

一种细胞色素C的离子交换纯化方法
技术领域
本发明涉及一种细胞色素C的纯化方法，更具体地说，本发明涉及一种细胞色素C的离子交换纯化方法，属于离子交换技术领域。
背景技术
细胞色素丙，简称细丙或细胞色素C。细脆色素C是一种以铁卟啉为辅基的呼吸酶，其结构中蛋白质部分是由104个氨基酸残基组成的单一肽链。猪、牛和羊的细胞色素C分子中氨基酸种类顺序都相同，分子量为12200，含铁量为0..456，是一种碱性蛋白。细胞色素C广泛存在于动物的需氧组织中，集中分布于动物心肌细胞质内的线粒体膜的外表面。它在生物氧化过程中，是一个非常重要的电子传递体，加速酶促作用的进行。对因组织缺氧而引起的疯瘫、肺气肿等病疗效甚佳，尤其在病情恶化抢救时，静脉注射本品均有较好的效果。起到调整细胞呼吸与物质代谢的作用细胞色素C易溶于水，也溶于酸和饱和硫酸铵溶液，对热、干燥、酸比较稳定，细胞色素C与线粒体内膜结合较松，较易提取。但是在生产中，往往因纯化工艺不过关导致所制备的细胞色素C纯度不高，达不到细胞色素C医药级的要求。
发明内容
本发明旨在解决现有技术中的问题，提供一种细胞色素C的离子交换纯化方法，该方法具有工艺操作简单，产品纯度高，产品收率高及产品生产成本低的优点。
为了实现上述发明目的，其具体的技术方案如下：
一种细胞色素C的离子交换纯化方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以5-10ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。
本发明优选的，所述大孔弱酸阳离子交换树脂为100份，所述细胞色素C提取液为1000-1500份。
本发明优选的，大孔弱酸阳离子交换树脂层析柱经1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替进行转型处理后再生，然后可重复使用。
本发明带来的有益技术效果：
本发明采用大孔弱酸阳离子交换树脂直接从细胞色素C提取液中吸附细胞色素C，然后采用一定pH值得洗脱液将树脂吸附的细胞色素C洗脱下来，再经浓缩、干燥得到高纯度细胞色素C。该技术具有工艺操作简单，产品纯度高，产品收率高及产品生产成本低等优点。
具体实施方式
实施例1
一种细胞色素C的离子交换纯化方法，包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以5ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。
实施例2
一种细胞色素C的离子交换纯化方法，包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以10ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。
实施例3
一种细胞色素C的离子交换纯化方法，包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以7.5ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。
实施例4
一种细胞色素C的离子交换纯化方法，包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以6ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。

Claims (3)

1.一种细胞色素C的离子交换纯化方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：
A、将大孔弱酸阳离子交换树脂填装于离子交换柱内，用酒精洗至流出液于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱中大孔弱酸阳离子交换树脂内的酒精；
B、采用1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替对大孔弱酸阳离子交换树脂进行转型处理；用去离子水将大孔弱酸阳离子交换树脂洗至中性，备用；
C、以5-10ml/min的流速使细胞色素C提取液通过树脂交换柱；待细胞色素C提取液全部通过去离子交换柱后，用去离子水洗去层析柱内残留的细胞色素C提取液；
D、用1NNaOH洗脱树脂吸附的细胞色素C；收集流出液并浓缩即得精制细胞色素C产品。
2.根据权利要求1所述的一种细胞色素C的离子交换纯化方法，其特征在于：所述大孔弱酸阳离子交换树脂为100份，所述细胞色素C提取液为1000-1500份。
3.根据权利要求1所述的一种细胞色素C的离子交换纯化方法，其特征在于：大孔弱酸阳离子交换树脂层析柱经1NHCl400ml、1NNaOH400ml交替进行转型处理后再生，然后可重复使用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114920828A (zh) * 2022-06-17 2022-08-19 德博尔(成都)生物科技有限公司 一种制备细胞色素c的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1069045A (en) * 1963-08-29 1967-05-17 Sankyo Co A process for the preparation of cytochrome c
CN102206265A (zh) * 2011-04-15 2011-10-05 安徽宏业药业有限公司 一种细胞色素c溶液的生产工艺
RU2435597C1 (ru) * 2010-05-27 2011-12-10 Хамзат Хамидович Арсамаков Способ получения цитохрома с

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1069045A (en) * 1963-08-29 1967-05-17 Sankyo Co A process for the preparation of cytochrome c
RU2435597C1 (ru) * 2010-05-27 2011-12-10 Хамзат Хамидович Арсамаков Способ получения цитохрома с
CN102206265A (zh) * 2011-04-15 2011-10-05 安徽宏业药业有限公司 一种细胞色素c溶液的生产工艺

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
E.MARGOLIASH: "细胞色素C与还原型细胞色素C", 《食品与药品》 *
何献君等: "3种不同离子交换树脂纯化细胞色素C的比较研究", 《中国生化药物杂志》 *
贾楠等: "以双水相萃取法从猪心中快速制备细胞色素C", 《广州化工》 *
陈光耀等: "IRC-50树脂应用于细丙精制的操作控制", 《生物药物杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114920828A (zh) * 2022-06-17 2022-08-19 德博尔(成都)生物科技有限公司 一种制备细胞色素c的方法
CN114920828B (zh) * 2022-06-17 2024-02-02 德博尔(成都)生物科技有限公司 一种制备细胞色素c的方法

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