CN109691596B - 一种肉鸡肠黏膜修复剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种肉鸡肠黏膜修复剂，其组成为：鞣花酸0.5～1.0重量份、L‑肉碱类化合物0.5～1.5重量份、百里香酚1～3重量份、载锌蒙脱石8～20重量份。与饲料中单独添加鞣花酸、L‑肉碱类化合物、百里香酚或载锌蒙脱石相比，本发明的肉鸡肠黏膜修复剂可显著改善肉鸡肠形态和肠屏障功能。四种组分在修复肠黏膜、改善线粒体功能和提高线粒体自噬水平上存在显著交互作用，四者有正的协同组合效应。此外，蒙脱石对鞣花酸、L‑肉碱类化合物、百里香酚有控释作用，使之易于与饲料混合，形成均匀分散系，使用方便。本发明通过各成分的协同效应，可显著提高肉鸡肠黏膜线粒体自噬水平，保护线粒体功能，促进肠黏膜修复，从而极大地改善肠形态和屏障功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种肉鸡肠黏膜修复剂。
背景技术
肠道在动物体内负责连接机体与外界，一方面，肠道具有消化、吸收营养物质、免疫和内分泌功能，另一方面，肠道还可以阻止肠腔内的毒素、细菌、抗营养因子等有害物质进入体内对机体造成损伤，起到一个重要的屏障功能。在现代家禽养殖产业里，饲养环境不当，日粮结构的选择，饲养环境中感染源和饲料毒素的存在，都是影响肠道健康的常见因素。而且肠道损伤进而会导致其他疾病的产生，给家禽生长和生产带来负面影响。近年来，人们越来越重视肠道健康在现代畜禽养殖中的作用。维持肠道正常的结构和功能对于家禽的生长和健康十分关键。因此，修复应激中受损的肠黏膜，开发肠黏膜修复剂具有重要意义。
在现今集约化的家禽养殖过程中，不适合的饲养环境常引发各种机体的应激反应，对肠黏膜结构造成破坏。饲养环境温度过高就会引起家禽的热应激，对家禽的健康、生产性能及肠黏膜结构有很大的负面影响。热应激使肉仔鸡小肠绒毛发生严重病变，肠腺长度缩短，部分小肠绒毛水肿、断裂。另外，免疫应激可导致肠绒毛间质充血水肿，黏膜细胞坏死脱落，同时破坏黏膜表面紧密连接蛋白的结构，使得肠黏膜通透性增加，造成肠源性细菌和内毒素移位，最终导致全身性炎症反应，影响家禽生产性能。我们最近的研究发现，多种应激均会导致线粒体功能损伤，并诱发线粒体自噬。然而应激所导致的代偿性线粒体自噬不足以抵抗各种应激导致的肠道损伤，因此可以通过营养手段调控肠道线粒体自噬水平，改善肠道线粒体功能来维持肠黏膜完整性。通过营养调节的手段调控线粒体自噬和线粒体功能，进而修复损伤的肠黏膜，具有现实的应用价值和广阔的市场前景。然而到目前为止，从调控线粒体自噬和线粒体功能角度修复受损肠黏膜的研究还未见报道。
发明内容
本发明的目的提供一种肉鸡肠黏膜修复剂。
一种肉鸡肠黏膜修复剂组成为：鞣花酸0.5～1.0重量份、L-肉碱类化合物0.5～1.5重量份、百里香酚1～3重量份、载锌蒙脱石8～20重量份。
所述的鞣花酸(Ellagic acid)，化学式C14H6O8，可以市购。鞣花酸广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中的一种天然多酚组分。我国是石榴生产大国，石榴年产量巨大，现代果汁加工业中，采用石榴全果压榨取汁，果皮作为废弃物资源丰富，价格低廉。因此生产中可以通过酶降解石榴皮多酚中的大分子单宁得到鞣花酸。
所述的L-肉碱类化合物为L-肉碱或者L-肉碱盐酸盐。其中L-肉碱含量≥50％，比旋度-14.0°～-16.0°。可市场采购，如黄冈华阳药业有限公司等。
所述的百里香酚可市场采购，如广州英赛特生物技术有限公司、上海梵蓝国际贸易有限公司等。
所述的载锌蒙脱石是采用锌盐溶液与蒙脱石经吸附、离子交换反应制备而成，按重量百分比计，锌在蒙脱石中的含量为1～4wt.％。所述的锌盐为氯化锌、硝酸锌或者硫酸锌。其制备方法的步骤如下：
1)将蒙脱石矿物研磨至大于300目，加水搅拌均匀，制成浓度为1wt.％～10wt.％的悬浮浆液；
2)将含锌量为蒙脱石重量1～4wt.％的锌盐，于搅拌下缓慢加入步骤1)的悬浮浆液中，检测并调节矿浆的pH值为3.0～5.0，室温反应3～7小时后，检测浆液pH值，用氢氧化钠溶液调节，使浆液pH值为8.0～9.0；
3)选用离心或过滤方法，使悬浮浆液脱水；
4)将步骤3)所得的滤饼在低于80℃温度下烘干，研磨至大于300目，得到锌在蒙脱石中的含量为的1～4wt.％载锌蒙脱石。
本发明还提供了一种含有上述肉鸡肠黏膜修复剂的饲料。该饲料中肉鸡肠黏膜修复剂的添加量为0.03wt.％～0.10wt.％。
本发明的肉鸡肠黏膜修复剂具有以下特点：
(1)与饲料中单独添加鞣花酸、L-肉碱类化合物、百里香酚或载锌蒙脱石相比，本发明的肉鸡肠黏膜修复剂可显著改善肉鸡肠形态和肠屏障功能。
(2)鞣花酸、L-肉碱类化合物、百里香酚和载锌蒙脱石在促进肠黏膜修复、改善线粒体功能和提高线粒体自噬水平上存在显著交互作用，四者有正的协同组合效应。
(3)蒙脱石对鞣花酸、L-肉碱类化合物、百里香酚有控释作用，使之易于与饲料混合，形成均匀分散系，使用方便。
(4)本发明的肉鸡肠黏膜修复剂通过各成分的协同效应，可显著提高肉鸡肠黏膜线粒体自噬水平，保护线粒体功能，促进肠黏膜修复，从而极大地改善肠形态和屏障功能。
具体实施方式
本发明结合以下实例作进一步的说明。
实施例l
预备：
1)将蒙脱石矿物研磨至300目，加水搅拌均匀，制成浓度为1wt.％的悬浮浆液；
2)将含锌量为蒙脱石重量2％的硫酸锌，于搅拌下缓慢加入步骤1)的悬浮浆液中，检测并调节矿浆的pH值为3.0，室温反应5小时后，检测浆液pH值，用氢氧化钠溶液调节，使浆液pH值为8.0；
3)选用离心或过滤方法，使悬浮浆液脱水；
4)将步骤3)所得的滤饼在60℃温度下烘干，研磨至300目，得到锌在蒙脱石中的含量为的2wt.％载锌蒙脱石。
取鞣花酸0.5公斤、L-肉碱0.5公斤、百里香酚1公斤、载锌蒙脱石8公斤混合后拌匀，即得一种肉鸡肠黏膜修复剂(Intestinal mucosal repair agent for broilers，IRAB)。在肉鸡饲料中的添加量为0.03wt.％。
选取90只1日龄Ross 308肉鸡分为6个处理组，分别为：对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组、IRAB组。其中：对照组喂食常规的肉鸡饲料，鞣花酸组喂食添加鞣花酸的肉鸡饲料，L-肉碱组喂食添加L-肉碱的肉鸡饲料，百里香酚组喂食添加百里香酚的肉鸡饲料，载锌蒙脱石组喂食添加载锌蒙脱石的肉鸡饲料，IRAB组喂食添加0.03wt.％IRAB的肉鸡饲料，鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组中所添加组分在饲料中的含量与IRAB组的饲料中对应组分含量一致。每个处理组15羽肉鸡。饲养试验持续21d。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，IRAB显著改善了肠形态和屏障功能，表现为空肠绒毛高度增加(P<0.05)，空肠黏膜中二胺氧化酶含量升高(P<0.05)，紧密连接蛋白Occludin和Claudin表达升高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在改善肉鸡的肠形态和屏障功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡的肠形态和屏障功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，添加IRAB显著改善了肉鸡线粒体功能，表现为空肠线粒体膜电位提高(P<0.05)，线粒体内ROS水平降低(P<0.05)，线粒体ATP含量升高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在提高肠道线粒体功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡肠黏膜线粒体功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，本发明的IRAB显著提高了肉鸡空肠黏膜线粒体自噬水平，表现为线粒体自噬相关蛋白PINK、Parkin表达水平提高(P<0.05)，LC3-Ⅱ表达量增高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在提高肠道线粒体自噬水平上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著增强了肉鸡的肠黏膜线粒体自噬水平。
由以上结果可知，在肉仔鸡饲料中添加IRAB，可通过提高肠黏膜线粒体自噬水平，改善线粒体功能，促进肠黏膜修复，改善肠形态和屏障功能。
实施例2
预备：
1)将蒙脱石矿物研磨至300目，加水搅拌均匀，制成浓度为10wt.％的悬浮浆液；
2)将含锌量为蒙脱石重量1％的硝酸锌，于搅拌下缓慢加入步骤1)的悬浮浆液中，检测并调节矿浆的pH值为4，室温反应6小时后，检测浆液pH值，用氢氧化钠溶液调节，使浆液pH值为8.5；
3)选用离心或过滤方法，使悬浮浆液脱水；
4)将步骤3)所得的滤饼在60℃温度下烘干，研磨至300目，得到锌在蒙脱石中的含量为的1wt.％载锌蒙脱石。
取鞣花酸1公斤、L-肉碱盐酸盐1.5公斤、百里香酚3公斤、载锌蒙脱石20公斤混合后拌匀，即得一种肉鸡肠黏膜修复剂(Intestinal mucosal repair agent for broilers，IRAB)。在肉鸡饲料中的添加量为0.05wt.％。
选取90只1日龄AA肉仔鸡分为6个处理组，分别为：对照组、鞣花酸组、L-肉碱盐酸盐组、百里香酚组、载锌蒙脱石组、IRAB组。其中：对照组喂食常规的肉鸡饲料，鞣花酸组喂食添加鞣花酸的肉鸡饲料，L-肉碱盐酸盐组喂食添加L-肉碱盐酸盐的肉鸡饲料，百里香酚组喂食添加百里香酚的肉鸡饲料，载锌蒙脱石组喂食添加载锌蒙脱石的肉鸡饲料，IRAB组喂食添加0.05wt.％IRAB的肉鸡饲料，鞣花酸组、L-肉碱盐酸盐组、百里香酚组、载锌蒙脱石组中所添加组分在饲料中的含量与IRAB组的饲料中对应组分含量一致。每个处理组15羽。饲养试验持续21d。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱盐酸盐组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，IRAB改善了肠道屏障功能，表现为肉鸡空肠绒毛高度增加(P<0.05)，紧密连接蛋白Occludin，Claudin-1和ZO-1的表达量提高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱盐酸盐、百里香酚和载锌蒙脱石在改善肉鸡的肠形态和屏障功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡的肠形态和屏障功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱盐酸盐组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，IRAB提高了肉鸡空肠黏膜线粒体功能，表现为空肠线粒体膜电位提高(P<0.05)，线粒体内ROS水平降低(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在提高肠道线粒体功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡的肠黏膜线粒体功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱盐酸盐组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，IRAB提高了肉鸡空肠黏膜线粒体自噬水平，表现为线粒体自噬相关蛋白PINK、Parkin表达水平提高(P<0.05)，LC3-Ⅱ表达量增高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在提高肠道线粒体自噬水平上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著提高了肉鸡的肠黏膜线粒体自噬水平。
由以上结果可知，在肉鸡饲料中添加本发明的IRAB，可通过提高肠黏膜线粒体自噬水平，改善线粒体功能，促进肠黏膜修复，进而改善肠道功能。
实施例3
预备：
1)将蒙脱石矿物研磨至300目，加水搅拌均匀，制成浓度为8wt.％的悬浮浆液；
2)将含锌量为蒙脱石重量4％的氯化锌，于搅拌下缓慢加入步骤1)的悬浮浆液中，检测并调节矿浆的pH值为5，室温反应7小时后，检测浆液pH值，用氢氧化钠溶液调节，使浆液pH值为9.0；
3)选用离心或过滤方法，使悬浮浆液脱水；
4)将步骤3)所得的滤饼在60℃温度下烘干，研磨至300目，得到锌在蒙脱石中的含量为的4wt.％载锌蒙脱石。
取鞣花酸0.8公斤、L-肉碱1公斤、百里香酚2公斤、载锌蒙脱石15公斤混合后拌匀，即得一种肉鸡肠黏膜修复剂(Intestinal mucosal repair agent for broilers，IRAB)。在肉鸡饲料中的添加量为0.10wt.％。
选取120只1日龄Avian肉鸡分为6个处理组，分别为：对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组、IRAB组。其中：对照组喂食常规的肉鸡饲料，鞣花酸组喂食添加鞣花酸的肉鸡饲料，L-肉碱组喂食添加L-肉碱的肉鸡饲料，百里香酚组喂食添加百里香酚的肉鸡饲料，载锌蒙脱石组喂食添加载锌蒙脱石的肉鸡饲料，IRAB组喂食添加0.10wt.％IRAB的肉鸡饲料，鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组中所添加组分在饲料中的含量与IRAB组的饲料中对应组分含量一致。每个处理组设20羽。饲养试验持续21d。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，添加IRAB显著增加了空肠绒毛高度增加(P<0.05)，同时提高空肠TER(P<0.05)，降低了空肠FD4通透性(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在改善肠形态和屏障功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡的肠形态和屏障功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，添加IRAB显著提高了肉鸡空肠黏膜线粒体功能，表现为空肠线粒体膜电位提高(P<0.05)，线粒体内ROS水平降低(P<0.05)，线粒体DNA含量升高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在改善肠道线粒体功能上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著改善了肉鸡的肠黏膜线粒体功能。
与对照组、鞣花酸组、L-肉碱组、百里香酚组、载锌蒙脱石组相比，添加IRAB显著提高了空肠线粒体自噬水平(P<0.05)，表现为PINK、Parkin表达水平提高(P<0.05)，LC3-Ⅱ表达量增高(P<0.05)。鞣花酸、L-肉碱、百里香酚和载锌蒙脱石在提高肠道线粒体自噬水平上存在显著交互作用(P<0.05)。上述结果表明，IRAB显著增强了肉鸡的肠黏膜线粒体自噬水平。
由以上结果可知，在肉鸡饲料中添加IRAB，可通过提高肠黏膜线粒体自噬水平进而改善线粒体功能，促进肠黏膜修复，从而改善肉鸡的肠形态和屏障功能。
Claims (4)
1.一种肉鸡肠黏膜修复剂，其特征在于，其组成为：鞣花酸0.5～1.0重量份、L-肉碱类化合物0.5～1.5重量份、百里香酚1～3重量份、载锌蒙脱石8～20重量份；所述的L-肉碱类化合物为L-肉碱或L-肉碱盐酸盐；
所述的载锌蒙脱石制备方法的步骤如下：
1) 将蒙脱石矿物研磨至大于300目，加水搅拌均匀，制成浓度为1 wt.%~10 wt.%的悬浮浆液；
2) 将含锌量为蒙脱石重量1~4%的锌盐，于搅拌下缓慢加入步骤1)的悬浮浆液中，检测并调节矿浆的pH值为3.0～5.0，室温反应3~7小时后，检测浆液pH值，用氢氧化钠溶液调节，使浆液pH值为8.0～9.0；
3）选用离心或过滤方法，使悬浮浆液脱水；
4）将步骤3）所得的滤饼在低于80 ℃温度下烘干，研磨至大于300目，得到锌在蒙脱石中的含量为的1~4 wt.%载锌蒙脱石。
2.根据权利要求1所述的一种肉鸡肠黏膜修复剂，其特征在于，所述的锌盐为氯化锌、硝酸锌或者硫酸锌。
3.一种含有如权利要求1或2所述肉鸡肠黏膜修复剂的饲料。
4.如权利要求3所述的饲料，其特征在于，饲料中肉鸡肠黏膜修复剂的添加量为0.03wt.%~0.10 wt.%。
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