CN109689039A - 用于预防或改善痴呆症或抑郁状态的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于预防或改善痴呆症或者抑郁状态的组合物，该组合物包一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。该组合物对痴呆症或者抑郁状态(特别是，由压力引起的抑郁状态)具有更有效的预防或改善效果，具有高安全性，并且可以连续摄取或者给药。

Description

用于预防或改善痴呆症或抑郁状态的组合物

技术领域

本发明涉及用于预防或改善痴呆症或抑郁状态(尤其是，由压力引起的抑郁状态)的组合物。

背景技术

随着近来老年人口的迅速增加，痴呆症患者的数量迅速增加，并且据报道，在2015年患者人口数达到年龄65岁以上的人口的8.4％。

根据厚生劳动省，痴呆症被定义为指“出生后正常发育的各种精神功能慢性衰退并消失到无法维持日常生活和社会生活的程度的状态”。

痴呆症包括由各种疾病引起的痴呆症，比如阿尔茨海默型痴呆症、额颞痴呆症(皮克病等)、路易体痴呆症和脑血管性痴呆症。虽然衰老是最大的危险因素，但是痴呆症原因往往不明确。

然而，在任何类型的痴呆症中，通常观察到记忆障碍、定向障碍等的核心症状以及行为异常、精神症状等的附加(peripheral)症状，并且症状的进展不仅对于病人而且对于他们的家人也具有严重的影响，例如增加护理负担等。

当前，乙酰胆碱酯酶抑制药(比如盐酸多奈哌齐)和NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体拮抗剂(比如美金刚)已被批准用作用于痴呆症的治疗药物。然而，这些用于痴呆症的治疗药基本上是用于阿尔茨海默型痴呆症，是对症治疗药，并且只不过可以稍微抑制症状的进展。

关于痴呆症的预防，已知膳食和运动的重要性。

关于膳食，已经报告了抗氧化剂(比如维生素C、维生素E、β-胡萝卜素)和ω-3长链不饱和脂肪酸的有效性，并且已经研究了ω-3长链不饱和脂肪酸、褪黑素和色氨酸的摄取对老年人的轻度认知损害的效果(非专利文献1)。此外，报导还表明L-精氨酸和赖氨酸对阿尔茨海默型痴呆症的效果(非专利文献2、3)。

关于运动，已发现：由运动而产生的脑血流量的增加可以改善身体活动并且预防阿尔茨海默病。

然而，膳食中摄取的一些上述成分中对于痴呆症不具有充分的预防效果，并且它们中的许多需要进一步验证有效性。

此外，一些罹患痴呆症的风险性升高的中老年人往往由于疾病等而难以进行运动，或者，由于身体机能下降而难以继续用于预防阿尔茨海默病的运动。

因此，难以说已经获得了对痴呆症具有有效的预防效果、安全性高且能够连续摄取的预防药物、或者能够改善痴呆症的治疗药物。

抑郁状态或抑郁是指情绪低落而不喜欢活动的状态，由于该状态从而影响思考、行为、情感和幸福感。

许多抑郁状态由各种压力(stress)(例如，工作上的问题比如失业、职业变化，以及家庭或职场上的人际关系等)而引起。此外，还已知有时由内分泌疾病(比如甲状腺功能减退症)、疾病(比如糖尿病、癌症、睡眠呼吸暂停综合征)以及药物(比如干扰素制剂、皮质类固醇药物)而引起。

暂时性抑郁状态可以通过克服产生上述状态的压力来改善。因此，抑郁状态或抑郁通常不用抗抑郁药等进行治疗。

然而，当压力是一种无法轻易解决并且持续很长时间的严重压力时，它可能会发展为病理性抑郁状态(比如临床抑郁症)。

此外，抑郁是一种作为痴呆症的附加症状之一而出现的症状。此外，还已知：抑郁状态是痴呆症发作的高风险因素(非专利文献4、5)。

因此，期望一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，其能够预防或改善抑郁状态(尤其是，由压力引起的抑郁状态)并且具有高安全性。

[文献列表]

[非专利文献]

非专利文献1：Angro Food Industry Hi-Tech 22(4)23-24(2011)

非专利文献2：The American Journal of Medicine 108(5)439(2000年4月1日)

非专利文献3：Neuropsychiatric Disease and Treatment 6 707-710(2010)

非专利文献4：The British Journal of Psychiatry 202 177-186(2013)

非专利文献5：Journal of Affective Disorders 202 220-229(2016)

发明内容

[本发明所要解决的问题]

考虑到上述情况，本发明的目的在于提供一种用于预防或改善痴呆症的组合物，其对痴呆症具有有效的预防或改善效果，安全性高，并且能够连续摄取。

本发明的目的还在于提供一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，其可以有利地预防或改善抑郁状态(尤其是，由压力引起的抑郁状态)，安全性高，并且允许连续摄取或给药。

[解決问题的方法]

本发明人进行了深入研究以试图解决上述问题，并且发现含有高含量的亮氨酸和一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸的组合物具有改善记忆障碍和认知功能的效果，并且对预防或改善痴呆症是有效的，从而完成了本发明。

此外，本发明人发现：含有高含量的亮氨酸和一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸的组合物对抑郁状态(尤其是，由压力引起的抑郁状态)具有预防或改善效果，从而完成了本发明。

也就是说，本发明涉及下述。

[1]一种用于预防或改善痴呆症的组合物，其包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

[2]根据[1]所述的组合物，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

[3]根据[1]或[2]所述的组合物，其中，一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸有异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

[4]根据[3]所述的组合物，其中，各氨基酸含量相对于必需氨基酸总含量的摩尔组成比在以下数值范围内：

亮氨酸35摩尔％～66摩尔％

异亮氨酸5摩尔％～15摩尔％

缬氨酸5摩尔％～15摩尔％

苏氨酸7摩尔％～14摩尔％

赖氨酸8摩尔％～16摩尔％

甲硫氨酸2摩尔％～10摩尔％

组氨酸0.1摩尔％～3.5摩尔％

苯丙氨酸2.5摩尔％～8摩尔％

色氨酸0.1摩尔％～2摩尔％。

[5]根据[1]～[4]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物预防或改善记忆障碍。

[6]根据[1]～[4]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物抑制认知功能低下或改善认知功能。

[7]根据[1]～[6]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是药品。

[8]根据[1]～[6]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是食品。

[9]根据[1]～[8]中任一项所述的组合物，其中，所述痴呆症是阿尔茨海默型痴呆症。

[10]一种用于预防或改善痴呆症的方法，其包括：使需要预防或改善痴呆症的症状的受试对象摄取或向需要预防或者改善痴呆症的症状的受试对象给药有效量的组合物，所述组合物包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

[11]根据[10]所述的方法，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

[12]根据[10]或[11]所述的方法，其中，一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸是异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

[13]根据[10]～[12]中任一项所述的方法，其中，所述痴呆症是阿尔茨海默型痴呆症。

[14]一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，其包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

[15]根据[14]所述的组合物，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

[16]根据[14]或[15]所述的组合物，其中，一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸包括异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

[17]根据[16]所述的组合物，其中，各氨基酸与所述必需氨基酸总含量的摩尔组成比在以下数值范围内：

亮氨酸：35摩尔％～66摩尔％

异亮氨酸：5摩尔％～15摩尔％

缬氨酸：5摩尔％～15摩尔％

苏氨酸：7摩尔％～14摩尔％

赖氨酸：8摩尔％～16摩尔％

甲硫氨酸：2摩尔％～10摩尔％

组氨酸：0.1摩尔％～3.5摩尔％

苯丙氨酸：2.5摩尔％～8摩尔％

色氨酸：0.1摩尔％～2摩尔％。

[18]根据[14]～[17]中任一项所述的组合物，其中，所述抑郁状态是由压力引起的抑郁状态。

[19]根据[14]～[18]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是药品。

[20]根据[14]～[18]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是食品。

[21]一种用于预防或改善抑郁状态的方法，其包括：使需要预防或改善抑郁状态的受试对象摄取或向需要预防或者改善抑郁状态的受试对象给药有效量的组合物，所述组合物包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

[22]根据[21]所述的方法，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

[23]根据[21]或[22]所述的方法，其中，一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸包括异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

[24]根据[21]～[23]中任一项所述的方法，其中，所述抑郁状态是由压力引起的抑郁状态。

[发明效果]

根据本发明，可以提供一种用于预防或改善痴呆症的组合物。

本发明的用于预防或改善痴呆症的组合物会有效地预防或改善记忆障碍，还有效抑制或改善认知功能低下，并且尤其是有效预防或改善阿尔茨海默型痴呆症。

此外，本发明的用于预防或改善痴呆症的组合物是高度安全的，并且适用于连续摄取或给药。

根据本发明，可以提供一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，该组合物可以有利地预防或改善抑郁状态。

本发明的用于预防或改善抑郁状态的组合物尤其是对预防或改善由压力引起的抑郁状态是有效的。

此外，本发明的用于预防或改善抑郁状态的组合物具有高安全性，并且适用于连续摄取或给药。

附图说明

图1示出在试验例1的Y迷宫(Y-maze)试验中，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)中和在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中的进入臂中的总进入次数与年龄相关的变化。

图2示出在试验例1的Y迷宫试验中，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)中和在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中的空间工作记忆(短期记忆)的评价结果。在该图中，“P8”表示将向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)，“P8-AL40”表示将向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)。此外，在该图中，“*”表示在上述两组之间发现P＜0.05的显著性差异，“**”表示在上述两组之间发现P＜0.01的显著性差异。

图3示出在试验例1的被动回避试验中，在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)、向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，在第一次试行时进入暗室所需要的时间(转移潜伏时间(transferlatency time))、在第一次试行时使个体在明室内停留120秒所需要的试行的次数(达到标准的试行次数(trials to criterion))、和在第二次试行时停留在明室内120秒的个体数量的比率。在该图中，“SAMP8”表示向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)。此外，在该图中，“*”表示与SAMR1之间发现P＜0.05的显著性差异，“***”表示与SAMR1之间发现P＜0.005的显著性差异。

图4示出在试验例1的被动回避试验中，在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)、向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，3天后停留在明室内的时间(停留时间(retention time))。在该图中，“SAMP8”表示向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)。此外，在该图中，“**”表示与SAMR1之间发现P＜0.01的显著性差异。

图5示出在试验例1中，在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)、向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，海马切片的Klüver-Barrera染色图像。

图6示出在试验例1中，在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)、向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，海马切片中的神经元数量的测量结果。在该图中，“SAMP8”表示向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)。此外，在该图中，“**”表示与SAMR1之间发现P＜0.01的显著性差异。

图7示出在试验例1中，在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)、向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，前额皮质(PFC)的匀浆中的乙酰胆碱含量。在该图中，“***”表示与SAMR1之间发现P＜0.005的显著性差异。

图8示出试验例2中的压力负载选单。

图9示出在试验例2中，各组的老鼠的体重变化。

图10示出在试验例2中，各组的老鼠在饲养第31天和在饲养开始时那天之间体重的差值。

图11示出在试验例2中，强迫游泳试验中的各组的不动时间的测量结果。在该图中，“a”、“b”和“c”的不同字母表示各组之间存在显著差异。

具体实施方式

本发明的用于预防或改善痴呆症的组合物(以下，在本说明书中也称为“本发明用于痴呆症的组合物”)含有：一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸(即，选自异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸中的一种以上)和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

在本说明书中，“痴呆症”是指记忆障碍、认知功能低下(定向障碍)、判断力低下和执行功能缺损中的任一症状呈现为核心症状的状态，并且还包括抑郁状态、依赖、焦虑、攻击行为、幻觉、妄想、睡眠障碍、徘徊等的各种附加症状。

此外，它还包括由各种疾病和病变引起的痴呆症，比如阿尔茨海默病、额颞叶变性(皮克病等)、路易体病和脑血管疾病。

“痴呆症的预防”是指对呈现上述症状或状态的痴呆症的发作的抑制，“痴呆症的改善”是指上述症状或状态的减轻。

本发明的用于预防或改善抑郁状态的组合物(以下，在本说明书中也称为“本发明的用于抑郁状态的组合物”)含有：一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸(即，选自异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸中的一种以上)和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

在本说明书中，“抑郁状态”是指情绪低落且不喜欢活动的状态，由于该状态，从而影响思考、行为、情感和幸福感。

具体地，它是具有“情感淡漠”、“感到沮丧”、“身心皆感到疲劳”、“无法摆脱悲伤”、“无法专心思考、无法集中、或者无法作出判断”、“恼怒或者无法保持冷静”、“感到悲惨或被自卑感所困扰”、“头部沉重或身体沉重”、“醒来感觉不好、或者早上无法醒来”、“难以入睡、无法入睡”、“无法阅读书籍或报纸、或者甚至在阅读后无法理解”、“不想见人、想要待在家里而不去任何地方、感觉移动是麻烦”、“感到孤独、感到焦虑、感到疏离、或者感到陌生”、“没有食欲、或者没有感觉食物美味”、“感到痛苦、感到绝望、或者希望去死”等中的至少一种作为主诉。

抑郁状态的起因包括：与近亲或宠物的死别和离别、人际关系中的烦恼、工作变动、工作调动、晋升、人事改组、强制退休、重组、商业破产、学业或工作失败、挫折、失恋、离婚、孩子独立、生病、过度操劳、事故、更年期障碍、怀孕、分娩、搬家、建造新家、生活环境中的突变、苦难、来自成长经历和生活史中的内部压力、来自与年龄相关的身心功能退化等中的精神压力或肉体压力；身体疾病，比如脑失调、慢性病、内分泌病等；药物比如干扰素制剂、肾上腺皮质甾醇药(泼尼松等)和抗高血压药(缬沙坦、苯磺酸氨氯地平等)等药物的副作用。

“抑郁状态的预防”是指上述抑郁状态的出现的抑制，“抑郁状态的改善”是指观察到的抑郁状态的症状或水平的减轻。

在本发明中，所使用的“亮氨酸”和“除亮氨酸以外的必需氨基酸”可为L形、D型和DL型中的任一种。优选使用L型和DL型，更优选使用L型。

在本发明中，“亮氨酸”和“除亮氨酸以外的必需氨基酸”不仅可以以游离形式使用，还可以以盐形式使用。本说明书中的术语“亮氨酸”和“除亮氨酸以外的必需氨基酸”各自也包含盐的概念。对盐形式并无特别限定，只要其为药理学上可接受的盐即可，可以列举酸加成盐(acid addition salt)、与碱的盐等。

具体例子包括：与无机碱的盐、与有机碱的盐、与无机酸的盐、与有机酸的盐、与氨基酸的盐等。

与无机碱的盐的例子包括：与碱金属(比如，锂、钠、钾等)的盐、与碱土金属(比如镁、钙等)的盐、铵盐等。

与有机碱的盐的例子包括：与链烷醇胺(比如，单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等)的盐、与杂环胺(比如吗啉、哌啶等)的盐等。

与无机酸的盐的例子包括：与氢卤酸(盐酸、氢溴酸、氢碘酸等)、硫酸、硝酸、磷酸等的盐等。

与有机酸的盐的例子包括：与一元羧酸(比如，甲酸、醋酸、丙酸等)的盐；与饱和二元羧酸(比如草酸、丙二酸、苹果酸、丁二酸等)的盐；与不饱和二元羧酸(比如马来酸、富马酸等)的盐；与三元羧酸(比如柠檬酸等)的盐；与酮酸(比如α-酮戊二酸等)的盐。

与氨基酸的盐的例子包括：与脂肪族氨基酸(比如甘氨酸、丙氨酸等)的盐；与芳香族氨基酸(比如酪氨酸等)的盐；与碱性氨基酸(比如精氨酸等)的盐；与酸性氨基酸(比如天冬氨酸、谷氨酸等)的盐；与形成内酰胺的氨基酸(比如焦谷氨酸等)的盐；等。

上述盐可各自为水合物(水合盐)，并且水合物的例子包括1水合物～6水合物等。

在本发明中，各上述游离形式或盐形式的“亮氨酸”和“除亮氨酸以外的必需氨基酸”可单独使用一种，或者可组合使用其两种以上。

为了本发明的目的，优选各“亮氨酸”和“除亮氨酸以外的必需氨基酸”的游离形式、盐酸盐等。

在本发明中，上述待使用的游离形式或盐形式的各氨基酸可从天然存在的动植物等中提取且纯化，或者，可通过化学合成法、发酵法、酶法或基因重组方法等获取。此外，还可利用各公司提供的市售品。

本发明的用于痴呆症的组合物中，相对于必需氨基酸的总含量，以不低于35摩尔％的高含量含有亮氨酸。

本说明书中，关于本发明的用于痴呆症的组合物中的各氨基酸含量(比如亮氨酸)，在它以盐形式被含有时，通过换算为游离形式的含量的含量表示。

从预防或改善痴呆症的效果的方面考虑，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量优选为35摩尔％～66摩尔％，更优选为35摩尔％～57摩尔％，进一步优选为35摩尔％～50摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的异亮氨酸的含量为5摩尔％～15摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的缬氨酸的含量为5摩尔％～15摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的苏氨酸的含量为7摩尔％～14摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的赖氨酸的含量为8摩尔％～16摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的甲硫氨酸的含量为2摩尔％～10摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的组氨酸的含量为0.1摩尔％～3.5摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的苯丙氨酸的含量为2.5摩尔％～8摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的色氨酸的含量为0.1摩尔％～2摩尔％。

从预防或改善痴呆症的效果的方面考虑，本发明的用于痴呆症的组合物更优选以上述含量含有异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸作为除亮氨酸以外的必需氨基酸。

本发明的用于抑郁状态的组合物中，相对于必需氨基酸的总含量，以不低于35摩尔％的高含量含有亮氨酸。

本说明书中，关于本发明的用于抑郁状态的组合物中的各氨基酸(比如亮氨酸)的含量，在它以盐形式被含有时，通过换算为游离形式的含量的含量表示。

从对抑郁状态的预防或改善效果的方面考虑，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量优选为35摩尔％～66摩尔％，更优选为35摩尔％～57摩尔％，进一步优选为35摩尔％～50摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的异亮氨酸的含量为5摩尔％～15摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的缬氨酸的含量为5摩尔％～15摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的苏氨酸的含量为7摩尔％～14摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的赖氨酸的含量为8摩尔％～16摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的甲硫氨酸的含量为2摩尔％～10摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的组氨酸的含量为0.1摩尔％～3.5摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的苯丙氨酸的含量为2.5摩尔％～8摩尔％。

优选地，相对于必需氨基酸的总含量，作为除亮氨酸以外的必需氨基酸而含有的色氨酸的含量为0.1摩尔％～2摩尔％。

从对抑郁状态的预防或改善效果的方面考虑，本发明的用于抑郁状态的组合物更优选以上述含量含有异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸作为除亮氨酸以外的必需氨基酸。

除上述必需氨基酸之外，本发明的用于痴呆症的组合物或者用于抑郁状态的组合物还可含有其它营养成分，比如碳水化合物、脂质、蛋白质、非必需氨基酸、维生素、矿物等。

本发明的用于痴呆症的组合物或者用于抑郁状态的组合物可以通过根据需要将其它营养成分和制药上可接受的添加剂加入亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸中，然后根据制剂领域中公知的制剂化方法(例如，日本药典(日本药方局)XVII制剂总则[3]制剂专题中所述的方法等)，被配制成各种形式，例如，液态(比如溶液、悬浮液、乳液等)；半固态(比如凝胶、乳膏等)；固态(比如粉末、颗粒、片剂、胶囊剂等)；等。

上述制药上可接受的添加剂可以根据本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物的形态进行适当选择，例如，可以列举赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包覆剂(coating agent)、基料(base)、溶剂、增溶剂(solubilizing agent)、可溶剂(solubilizer)、乳化剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、增稠剂、安抚剂、等渗剂、pH调节剂、抗氧化剂、防腐剂、保存剂、矫味剂、甜味剂、香料、着色剂等。

具体地，赋形剂的例子包括碳酸镁、糖类(葡萄糖、乳糖、玉米淀粉等)、糖醇(山梨糖醇、甘露糖醇等)等。

粘合剂的例子包括明胶、预胶化淀粉、部分预胶化淀粉、纤维素及其衍生物(结晶纤维素、羟丙基纤维素等)等。

崩解剂的例子包括交联聚乙烯吡咯烷酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯烷酮(povidone)、结晶纤维素等。

润滑剂的例子包括滑石、硬脂酸镁等。

包覆剂的例子包括甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物、甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸二甲氨基乙酯共聚物、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸乙酯基三甲基氯化铵(trimethylammonioethylmethacrylatechrolide)共聚物等。

基料的例子包括动植物油脂(橄榄油、可可脂、牛脂、芝麻油、氢化油、蓖麻油等)、蜡(巴西棕榈蜡、蜂蜡等)、聚乙二醇等。

溶剂的例子包括纯化水、注射用水、一价醇(乙醇等)、多元醇(甘油等)等。

增溶剂的例子包括丙二醇、中链甘油三酯等。

可溶剂、乳化剂、分散剂和悬浮剂的例子包括表面活性剂等，比如失水山梨糖醇脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯(聚山梨酸酯20(polysorbate20)、聚山梨酸酯80(polysorbate 80)等)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、蔗糖脂肪酸酯等。

稳定剂的例子包括己二酸、β-环糊精、乙二胺、乙二胺四乙酸钠等。

增稠剂的例子包括水溶性聚合物(聚丙烯酸钠、羧基乙烯基聚合物等)、多糖类(藻酸钠、黄原胶、黄芪胶等)等。

安抚剂的例子包括氨基苯甲酸乙酯、氯代丁醇、丙二醇、苄醇等。

等渗剂的例子包括氯化钾、氯化钠、山梨糖醇、盐水等。

pH调节剂的例子包括盐酸、硫酸、醋酸、柠檬酸、乳酸、氢氧化钠、氢氧化钾等。

抗氧化剂的例子包括二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基苯甲醚(BHA)、dl-α-生育酚、异抗坏血酸(erythorbic acid)等。

防腐剂和保存剂的例子包括对羟基苯甲酸酯(paraben)(对羟基苯甲酸甲酯等)、苄醇、脱氢醋酸钠、山梨酸等。

矫味剂的例子包括抗坏血酸、赤藓醇、L-谷氨酸钠等。

甜味剂的例子包括天冬甜素(aspartame)、甘草浸液、糖精等。

香料的例子包括l-薄荷醇、d-樟脑、香草醛等。

着色剂的例子包括焦油色素(食用色素红色2号、食用色素蓝色1号、食用色素黄色4号等)、无机颜料(红色氧化铁、黄色氧化铁、黑色氧化铁等)、天然色素(姜黄提取物、β-胡萝卜素、叶绿素铜钠等)等。

在本发明中，可以使用一种以上的上述添加剂。

本发明的用于痴呆症的组合物的日摄取量或日剂量根据被适用对象(以下，在本说明书中也称为“适用对象”)的性别、年龄、适用对象中观察到的痴呆症的症状或水平、本发明的用于痴呆症的组合物的形态、给药方法等适当决定。在适用对象为成人时，作为亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量(换算为游离形式的量的总量)，该日摄取量或日剂量通常为0.5g～22g，优选为1g～20g，更优选为3g～16g。

上述量可以一次或者每日分几次(例如，2～4次)摄取或给药。

此外，本发明的用于痴呆症的组合物的摄取周期或给药周期还根据适用对象的状态和症状等适当决定。考虑到痴呆症伴随着老龄化、各种疾病、脑内的病变等发病并且慢性地进行，优选长时间连续摄取或给药以预防或改善痴呆症。

本发明的用于抑郁状态的组合物的日摄取量或日剂量根据适用对象的性别、年龄、适用对象中观察到的抑郁状态的症状或水平、本发明的用于抑郁状态的组合物的形态、给药方法等适当决定。在适用对象为成人时，作为亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量(换算为游离形式的量的总量)，该日摄取量或日剂量通常为0.5g～22g，优选为1g～20g，更优选为3g～16g。

上述量可以一次或者每日分几次(例如2～3次)摄取或给药。

此外，本发明的用于抑郁状态的组合物的摄取周期或给药周期还根据适用对象的抑郁状态的状态和症状等适当决定。考虑到抑郁状态经常由日常施加的压力引起，为了预防或改善抑郁状态，优选长时间连续摄取或给药地使用本发明的组合物。

本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物可以配制成单元包装形态。本说明书中，“单元包装形态”是指下述形态：以特定量(例如，每一次的摄取量或剂量等)作为一单元的一个以上单元填充在一个容器中或者包装在包装物的形态。例如，以单次的摄取量或剂量作为一单元的单元包装形态称为“用于单次的摄取量或剂量的单位包装形态”。用于单元包装形态的容器或包装物可以根据本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物的形态等适当选择。例如，可以列举纸制容器或纸制袋、塑料容器或塑料袋、包袋(pouch)、铝罐、钢罐、玻璃瓶、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)瓶、PTP(泡罩(pressthrough pack))包装片材等。

本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物的适用对象包括例如，哺乳动物(例如，人类、猴、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、猫、狗、牛、马、驴、猪、羊等)、鸟类(例如，鸭、鸡、鹅、火鸡等)等。

在将本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物应用于除人以外的适用对象动物(以下，也简称为“对象动物”)时，本发明的用于痴呆症的组合物或用于抑郁状态的组合物的摄取量或剂量可以根据对象动物的种类、性别、体重等适当设定。

在被视为痴呆症的核心症状的症状中，本发明的用于痴呆症的组合物更有效地预防或改善记忆障碍，并且更有效地抑制或改善认知功能低下。此外，它对预防或改善阿尔茨海默型痴呆症(其中，脑中的神经递质乙酰胆碱的含量低下)特别有效。

此外，由于本发明的用于痴呆症的组合物包含在食品中并且含有具有充足的食用经验的氨基酸作为活性成分，因此它是高度安全的，适用于连续摄取，从而对预防或改善痴呆症是有用的。

因此，优选地，使呈现痴呆症的症状的患者、有痴呆症的发病风险的患者以及需要预防痴呆症的老年人和壮年人或中年人摄取本发明的用于痴呆症的组合物，或者，向这些人给药本发明的用于痴呆症的组合物。

特别优选地，可使呈现阿尔茨海默型痴呆症的症状的患者、可能罹患上述痴呆症的患者、阿尔茨海默型痴呆症的发病风险性高的老年人和壮年人或中年人等摄取本发明的用于痴呆症的组合物，或者可向这些人给药本发明的用于痴呆症的组合物。

本发明的用于抑郁状态的组合物对预防或改善由各种因素引起的抑郁状态是有效的，并且尤其是对由精神或身体压力引起的抑郁状态提供良好的预防或改善效果。

此外，由于本发明的用于抑郁状态的组合物包含在食品中并且含有具有充足的食用经验的氨基酸作为活性成分，因此它是高度安全的，适用于连续摄取或给药，从而对预防或改善由日常施加的压力引起的抑郁状态是有用的。

因此，优选地，可使呈现抑郁状态者以及呈现抑郁状态的可能性高者(比如，遭受与年龄相关的身体机能或精神功能的下降的老年人，和在工作场所、家庭等中经常遭受各种压力的壮年人或者中年人)摄取本发明的用于抑郁状态的组合物，或者可向他们给药本发明的用于抑郁状态的组合物。

本发明的用于痴呆症的组合物可以直接作为药品(以下，在本说明书中也称为“本发明的用于痴呆症的药品”)被提供，或者通过进一步添加上述制药上可接受的添加剂作为药品被提供。

本发明的用于痴呆症的药品可以具有口服制剂(比如片剂、包衣片剂、咀嚼片剂、丸剂、(微)胶囊剂、颗粒剂、微粒剂、散剂、酏剂(elixir)、柠檬水剂、糖浆剂、悬浮剂、乳剂、口服胶冻剂等)、注射剂(比如溶液、悬浮液、乳液等)、使用时通过溶解或者悬浮来使用的固体注射剂、注射用制剂(比如输液剂、持续性注射剂等)、经管液剂(tubal liquid)等的剂型。

本发明的用于痴呆症的药品可含有抗痴呆症药，只要不损害本发明的特征即可。

抗痴呆症药的例子包括：乙酰胆碱酯酶抑制药，比如盐酸多奈哌齐、加兰他敏、利凡斯的明等；NMDA受体拮抗剂，比如美金刚等，并且这些药品可以根据常规剂量使用。

优选地，可向患有痴呆症的患者、可能会罹患痴呆症的患者、痴呆症的发病风险性高的老年人和壮年人或中年人等给药本发明的用于痴呆症的药品。

以使得每日的亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日剂量的方式，向上述适用对象给药本发明的用于痴呆症的药品。

本发明的用于抑郁状态的组合物可以直接作为药品(以下，在本说明书中，也称为“本发明的用于抑郁状态的药品”)被提供，或者通过进一步添加上述制药上可接受的添加剂作为药品被提供。

本发明的用于抑郁状态的药品可以具有口服制剂(比如片剂、包衣片剂、咀嚼片剂、丸剂、(微)胶囊剂、颗粒剂、微粒剂、散剂、酏剂、柠檬水剂、糖浆剂、悬浮剂、乳剂、口服胶冻剂等)、注射剂(比如溶液、悬浮液、乳液等)、使用时通过溶解或者悬浮来使用的固体注射剂、注射用制剂(比如输液剂、持续性注射剂等)、经管液剂等的剂型。

本发明的用于抑郁状态的药品可含有抗抑郁药，只要不损害本发明的特征即可。

抗抑郁药的例子包括：三环类抗抑郁药，比如盐酸丙咪嗪、盐酸氯米帕明、马来酸曲米帕明等；四环类抗忧郁药，比如盐酸马普替林、盐酸米安色林、马来酸司普替林等；选择性血清素再摄取抑制剂，比如马来酸氟伏沙明、盐酸帕罗西汀水合物等；选择性血清素-去甲肾上腺素再摄取抑制剂，比如盐酸米那普仑等。这些可以根据常规剂量使用。

优选地，可向呈现抑郁状态者以及因被暴露于各种压力下而呈现抑郁状态的可能性高者给药本发明的用于抑郁状态的药品。

以使得每日的亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日剂量的方式，向上述适用对象给药本发明的用于抑郁状态的药品。

此外，本发明的用于痴呆症的组合物可以通过添加到各种食品中来摄取。对本发明的组合物所添加的食品并无特别限定，并且可为任意食品，只要它是通常用于膳食或甜点的形式的食品即可。

例如，将本发明的用于痴呆症的组合物添加入饮料(比如饮料水等)中，并且视需求添加适当的香精香料，从而可以提供饮料。

更具体地，本发明的用于痴呆症的组合物可以添加到例如饮料水(比如果汁饮料、运动饮料等)；乳制品(比如牛奶、酸奶等)；点心(比如果冻、巧克力、糖果等)等中。

优选地，以使得亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日剂量的每日摄取量，将本发明的用于痴呆症的组合物添加入上述各种食品中。

本发明的用于痴呆症的组合物可以直接作为食品(以下，在本说明书中，也称为“本发明的用于痴呆症的食品”)被提供，或者通过添加根据需要的常规食品添加剂并且根据常规食品制造技术作为食品被提供。

本发明的用于痴呆症的食品可以制成各种形态，比如液状、悬浮液状、乳液状、凝胶状、膏状、粉末状、颗粒状、片状、胶囊状、片剂状等。

此外，通过将本发明的用于痴呆症的组合物添加到各种食品原料中并且根据需要添加常规食品添加剂，本发明的用于痴呆症的食品可以制成各种食品形态，比如饮料水(果汁饮料、运动饮料、咖啡饮料、茶饮料等)、乳制品(乳酸发酵饮料、发酵乳、黄油、乳酪、酸奶、加工奶、脱脂奶等)、肉制品(火腿、香肠、汉堡等)、鱼肉加工海鲜浆制品(鱼饼、管状鱼香肠、油炸鱼丸等)、蛋制品(日式煎蛋卷、蒸蛋羹等)、点心(饼干、果冻、口香糖、糖果、零食、冷冻甜点等)、面包、面类、腌渍品、鱼干、用酱油煮的食品、汤、调味料等。此外，它还可为瓶装食品、罐装食品或者软罐头食品(retort pouch food)。

作为上述食品添加剂，可以列举制造用试剂(卤水、粘合剂等)、增稠稳定剂(黄原胶、羧甲基纤维素钠等)、胶凝剂(明胶、琼脂、卡拉胶等)、胶基(醋酸乙烯酯树脂、节路顿胶、糖胶树胶(chicle)等)、乳化剂(甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、皂苷、卵磷脂等)、保存剂(苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、ε-聚赖氨酸等)、抗氧化剂(抗坏血酸、异抗坏血酸、儿茶素等)、上光剂(虫胶、石蜡、蜂蜡等)、杀菌剂(噻苯哒唑(thiabendazole)、咯菌腈等)、膨松剂(碳酸氢钠、葡糖酸δ-内酯、明矾等)、甜味剂(天冬甜素、丁磺氨钾(acesulfamepotassium)、甘草浸液等)、苦味剂(咖啡碱、柚皮苷、苦艾提取物等)、酸化剂(柠檬酸、酒石酸、乳酸等)、调味料(L-谷氨酸钠、5’-肌苷酸二钠等)、着色剂(胭脂树红(annatto)色素、姜黄色素、栀子色素等)、香料(合成香料比如乙酰乙酸乙酯、茴香醛(anisealdehyde)等，天然香料比如柑橘香料、熏衣草香料等)等。

在本发明中，可以使用一种以上的上述食品添加剂。

优选地，可使要求改善痴呆症症状者、具有罹患痴呆症风险者、罹患痴呆症风险性高的老年人和壮年人或中年人摄取本发明的用于痴呆症的食品。

此外，出于预防痴呆症的目的，还可以广泛地使除了痴呆症患者以及罹患痴呆症风险高的老年人和壮年人或中年人外的受试对象摄取本发明的用于痴呆症的食品。

因此，本发明的用于痴呆症的食品还可以作为用于预防或改善痴呆症的保健功能食品(比如特定保健用食品、营养功能食品、标示功能性的食品等)、特殊用途食品(比如病人用食品、老年人用食品等)、健康辅助食品、营养补充品等被提供。

优选地，以使得每日亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日摄取量的方式，使上述适用对象摄取本发明的用于痴呆症的食品。

此外，可以通过将本发明的用于抑郁状态的组合物添加到各种食品中来摄取。对本发明的用于抑郁状态的组合物所添加的食品并无特别限定，并且可为任意食品，只要其是一般用于膳食或甜点的形式的食品即可。

例如，将本发明的用于抑郁状态的组合物添加入饮料(比如饮料水等)中，并且视需要添加适当的香料，从而可以提供饮料。

更具体地，可以将本发明的用于抑郁状态的组合物添加到例如饮料水(比如果汁饮料、运动饮料等)；乳制品(比如牛奶、酸奶等)；点心(比如果冻、巧克力、糖果等)等中。

优选地，以使亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日剂量的每日摄取量，将本发明的用于抑郁状态的组合物添加到上述各种食品中。

本发明的用于抑郁状态的组合物可以直接作为食品(以下，在本说明书中，也称为“本发明的用于抑郁状态的食品”)被提供，或者通过添加根据需要的上述常规食品添加剂并且根据常规食品制造技术作为食品被提供。

本发明的用于抑郁状态的食品可以制成各种形态，比如液状、悬浮液状、乳液状、凝胶状、膏状、粉末状、颗粒状、片状、胶囊状、片剂状等。

此外，通过将本发明的用于抑郁状态的组合物添加到各种食品原料中并且根据需要添加上述常规食品添加剂，本发明的用于抑郁状态的食品可以制成各种食品形态，比如饮料水(果汁饮料、运动饮料、咖啡饮料、茶饮料等)、乳制品(乳酸发酵饮料、发酵乳、黄油、乳酪、酸奶、加工奶、脱脂奶等)、肉制品(火腿、香肠、汉堡等)、鱼肉加工海鲜浆制品(鱼饼、管状鱼香肠、油炸鱼丸等)、蛋制品(日式煎蛋卷、蒸蛋羹等)、点心(饼干、果冻、口香糖、糖果、零食、冷冻甜点等)、面包、面类、腌渍品、鱼干、用酱油煮的食品、汤、调味料等。此外，它还可为瓶装食品、罐装食品或者软罐头食品。

优选地，可使要求改善抑郁状态者摄取本发明的用于抑郁状态的食品。此外，出于预防抑郁状态的目的，可以广泛地使因暴露于各种压力下而可能出现抑郁状态者摄取本发明的用于抑郁状态的食品。

因此，本发明的用于抑郁状态的食品还可以作为用于预防或改善抑郁状态的保健功能食品(比如特定保健用食品、营养功能食品、标示功能性的食品等)、特殊用途食品(比如病人用食品、老年人用食品等)、健康辅助食品、营养补充品等被提供。

优选地，以使得每日亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的总量为上述每日摄取量的方式，使上述适用对象摄取本发明的用于抑郁状态的食品。

此外，本发明还提供一种用于预防或改善需要预防或改善痴呆症的对象动物中的痴呆症的方法(以下，在本说明书中，也称为“本发明的痴呆症的预防/改善方法”)。

本发明的痴呆症的预防/改善方法包括：以有效预防或改善对象动物的痴呆症症状的量，使需要预防或改善痴呆症症状的对象动物摄取或者向其给药亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸。

在被视为痴呆症的核心症状的症状中，本发明的痴呆症的预防/改善方法对预防或改善记忆障碍以及认知功能低下是更有效的，并且尤其是对预防或改善阿尔茨海默型痴呆症是有效的。

在人类的情况下，优选地，将本发明的痴呆症的预防/改善方法应用于要求改善记忆障碍和认知功能低下的患者、有罹患痴呆症的风险的患者以及罹患痴呆症的风险高的老年人和壮年人或中年人等。

虽然本发明的痴呆症的预防/改善方法中的亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的有效量根据对象动物的种类、年龄、性别、痴呆症症状水平、状态等决定，但是对于人类或者除人类以外的对象动物，可以以上述频率和周期，摄取或者给药与本发明的用于痴呆症的组合物的上述摄取量或者剂量相类似的量。

此外，本发明还提供一种用于预防或改善需要预防或者改善抑郁状态的对象动物中的抑郁状态的方法(以下，在本说明书中，也称为“本发明的抑郁状态的预防/改善方法”)。

本发明的抑郁状态的预防/改善方法包括：以有效预防或改善对象动物的抑郁状态的量，使需要预防或改善抑郁状态的对象动物摄取或者向其给药亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸。

本发明的抑郁状态的预防/改善方法对预防或改善抑郁状态是有效的，并且尤其是对预防或改善由压力引起的抑郁状态是有效的。

在人类的情况下，优选地，可将本发明的抑郁状态的预防/改善方法应用于呈现抑郁状态且要求改善抑郁状态者、或者因暴露于各种应力下而可能出现抑郁状态者。

虽然本发明的抑郁状态的预防/改善方法中的亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的有效量根据对象动物的种类、年龄、性别、抑郁状态的症状和水平等决定，但是对于人类或者除人类以外的对象动物，可以以上述频率和周期，摄取或者给药与本发明的用于抑郁状态的组合物的上述摄取量或者剂量相类似的量。

在本发明中的对象动物包括：哺乳动物(例如，人类、猴、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、猫、狗、牛、马、驴、猪、羊等)、鸟类(例如，鸭、鸡、鹅、火鸡等)等。

在本发明中的亮氨酸和除亮氨酸以外的必需氨基酸的摄取方法或者给药方法包括：口服给药、经肠经管给药、通过输液给药等。优选口服给药，这是由于可以方便地摄取而不需要在医疗机构的医生的指导和监督下进行。

[实施例]

以下，通过参照实施例进一步详细地说明本发明。

[实施例1]用于预防或改善痴呆症的组合物

为提供表1中所示的组成，称重给定量的各成分然后混合，以制备实施例1的用于预防或改善痴呆症的组合物(以下，有时也称为“实施例1的组合物”)。

[表1]

成分	相对于必需氨基酸总含量的摩尔组成比(％)
		L-亮氨酸	42.1
L-异亮氨酸	11.2
		L-缬氨酸	13.0
L-苏氨酸	10.8
		L-赖氨酸盐酸盐	12.6
L-甲硫氨酸	3.1
		L-组氨酸盐酸盐·一水合物	1.1
L-苯丙氨酸	5.6
		L-色氨酸	0.5

[试验例1]实施例1的组合物对认知功能的作用的研究

使用SAMP8(其为加速老化小鼠模型和学习记忆障碍小鼠模型)和对应的SAMR1(其为对照小鼠)(两者均为10周龄，雄性)(购自CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN,INC.)，针对实施例1的组合物对认知功能的作用进行研究。

将SAMP8和SAMR1的各小鼠分成表2所示的3组(n＝16/组)，从到达当天到尸检当天一直进行饲养，同时允许它们自由食用含有16重量％的酪蛋白的饲料，并且连续地(除星期六和星期日以外)每日两次(早晚)，以1g/kg体重，强制口服给药实施例1的组合物(AL40)或者去离子水(vehicle)。

[表2]

(1)对空间工作记忆(短期记忆)的作用的研究

使表2中所示的各组的小鼠在10、13、15、17、19、21和23周龄时按照如下所示地进行Y迷宫试验(在Y迷宫试验日的早上，停止实施例1的组合物或者去离子水的口服给药)。

使用Y形迷宫装置，将小鼠小鼠放置在该迷宫装置的一个臂上并使其自由移动8分钟，并记录小鼠进入臂的次数。此时，当尾巴的根部进入臂时，小鼠被认定“进入”。

可认为，Y迷宫试验可以评价小鼠的自发行为和空间工作记忆(短期记忆)。

小鼠的自发行为可以通过小鼠进入臂的总次数来评价。使用向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组，比较基于年龄的小鼠进入臂的总次数的变化，并在图1中显示为16只小鼠的平均值±平均值的标准误差。对于小鼠的总进入次数的测量结果，进行了双因素方差分析和Bonferroni的多重比较检验。

作为空间工作记忆(短期记忆)的指标，数值通过下述方法求取：将三次连续进入不同臂中的次数除以通过臂进入的总数减1而获得的值，然后将该除法结果乘以100(交替反应值(alternation behavior value))。比较向各周龄的SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)的16只小鼠的平均值±平均数的标准误差，并示于图2。对交替反应值，进行学生t检验。

如图1所示，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)之间或者根据周龄，在作为自发行为量(spontaneous behavior)的指标的臂进入数量上并未观察到显著性差异。

另一方面，如图2所示，与口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)相比，在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，在17周龄、19周龄、21周龄和23周龄下，交替反应值显著上升(对于17、19、21周龄，P＜0.05；对于23周龄，P＜0.01)，由此表明通过口服给药实施例1的组合物，会改善空间工作记忆(短期记忆)。

(2)对短期记忆和长期记忆的作用的评价

如下所示地，使表2中所示的各组的小鼠在23周龄下进行被动回避试验(在被动回避试验日的早上，停止实施例1的组合物或者去离子水的口服给药)。

(i)使用在暗室中具有电刺激装置的由明室-暗室构成的装置，将小鼠放入明室中，测定进入暗室之前的时间(潜伏期时间(latency))，最大120秒。在小鼠进入暗室时，在进入的同时关上门，施加电刺激(2mA，1秒)。将进入暗室定义为尾巴的根部进入暗室的时间点。

(ii)最大重复5次(i)的试行，直到小鼠停留在明室内120秒。

(iii)三天后，将小鼠放在明室中，测定小鼠停留在明室内的时间(停留时间)，最大300秒。

被动回避试验中，从首日进行的试验，可以将在各试行中进入暗室中所需的时间(转移潜伏时间(transfer latency time))和停留在明室中120秒所需的试行次数(达到标准的试行次数(trials to criterion))评价作为短期记忆。此外，可以从3天后停留在明室中的时间(停留时间)评价长期记忆。

对于各组中的小鼠，在第一次试行时进入暗室所需的时间(转移潜伏时间)和停留在明室中120秒所需的试行次数(达到标准的试行次数)各自显示为图3中16只小鼠的平均值±平均值的标准误差。

此外，在第二次试行时停留在明室内120秒的小鼠的数量(即，由一次电刺激而记住暗室是可怕的小鼠的数量的比率)(第一次刺激获得的成果(achievement by 1st ES))一并示于图3。图中的数值显示在第二次试行时停留在明室内120秒的各组中小鼠的数量。

3天后停留在明室内的时间(停留时间)以16只小鼠的平均值±平均值的标准误差在图4中显示。图中的数值显示停留在明室内300秒的各组中的小鼠的数量。

关于在第一次试行时进入暗室所需的时间(转移潜伏时间)和停留在明室内120秒所需的试行次数(达到标准的试行次数)和3天后停留在明室内的时间(停留时间)，进行Dunnett多重比较检验。

如图3所示，与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)相比，其它两组在第一次试行时进入暗室所需的时间结果显著地(P＜0.05)更短。

此外，停留在明室120秒所需的试行次数(达到标准的试行次数)在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)中为一次，并且在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)和向SAMP8实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中均超过一次且小于两次。然而，与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)相比，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)中上述试行次数显著性(P＜0.005)增加，而在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中上述试行次数降低至未发现与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)的显著性差异的程度。

与向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)相比，在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，由一次电刺激而记住暗室可怕的小鼠的数量的比率(第一次刺激获得的成果)明显增加。

此外，如图4所示，与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)相比，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)中，3天后停留在明室内的时间(停留时间)也显著地(P＜0.01)降低。然而，在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，该时间增加至与在向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)中相同的水平。

从上述被动回避试验的结果中表明：本发明的实施例1的组合物可改善短期记忆以及长期记忆。

(3)对海马神经元作用的评价

将表2中所示的各组的小鼠在23周龄时在上述各试验完成之后进行解剖，并且制作海马切片并进行Klüver-Barrera染色。

在显微镜(“DFC350FX”，Leica制造，放大倍率：20倍)下，进行CA1区域的数字摄影，并且对于该图像，通过使用分析软件(“image-J”，NIH(美国国立卫生研究院)制造的开放资源)测定每特定像素的神经元数量。然后，将像素数换算为平方毫米，并且计算每一单位面积的神经元数量。算出的神经元数量显示为16只小鼠的平均值±平均值的标准误差，并且进行Dunnett多重比较检验。

在显微镜下的Klüver-Barrera染色图像示于图5中，并且神经元数量的测量结果示于图6中。

如图5和图6所示，与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)相比，在向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)中，发现海马CA1区域中的神经元显著性(P＜0.01)减少。与此相对，在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，并未发现神经元的减少，并且确认到存在与在向SAMR1口服给药的去离子水的组(SAMR1)中相同水平的神经元。

因此，本发明的实施例1的组合物抑制海马中神经元的脱落，并且表明抑制记忆障碍和认知功能低下的可能性。

(4)对前额皮质的乙酰胆碱含量的作用的评价

将表2中所示的各组的小鼠在23周龄时在完成上述各试验之后进行解剖，并且制造前额皮质(PFC)的匀浆。使用ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒，定量乙酰胆碱含量，并且前额皮质(PFC)的匀浆中的每1mg蛋白质的乙酰胆碱含量示于图7中(16只小鼠的平均值±平均值的标准误差)。对定量结果进行Holm-Sidak的多重比较检验。

如图7所示，在向SAMP8口服给药实施例1的组合物的组(SAMP8-AL40)中，发现与向SAMR1口服给药去离子水的组(SAMR1)相比，PFC中的乙酰胆碱含量显著性(P＜0.005)增加。此外，与向SAMP8口服给药去离子水的组(SAMP8-vehicle)相比，还显示出增加性倾向(p＝0.0615)。

乙酰胆碱是一种已知在患有阿尔茨海默型痴呆症的患者的脑中减少的神经递质。

因此，上述评价结果表明：本发明的实施例1的组合物可改善阿尔茨海默型痴呆症。

[实施例2]用于预防或改善抑郁状态的组合物

为提供表3中所示的组成，称重给定量的各成分，然后进行混合，以制造实施例2的用于预防或改善抑郁状态的组合物(以下，有时也称为“实施例2的组合物”)。

[表3]

成分	相对于必需氨基酸总含量的摩尔组成比(摩尔％)
		L-亮氨酸	42.1
L-异亮氨酸	11.2
		L-缬氨酸	13.0
L-苏氨酸	10.8
		L-赖氨酸盐酸盐	12.6
L-甲硫氨酸	3.1
		L-组氨酸盐酸盐·1水合物	1.1
L-苯丙氨酸	5.6
		L-色氨酸	0.5

[试验例2]实施例2的组合物对抑郁状态的作用的研究

使用BL6J小鼠(10周龄，雄性)(购自CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN,INC.)，针对实施例2的组合物对抑郁状态的作用进行研究。

将BL6J小鼠分成表4中所示的3组(n＝12/组)，将KN209饲养室在7点～19点之间设定为暗室并且在19点～7点之间设定为明室，并且将一只小鼠放置在一个笼子中并进行饲养，并且从到达那天到解剖那天一直进行饲养，同时允许它们自由食用含有16重量％的酪蛋白的饲料，并且连续地(除了星期六和星期日之外)每日两次(早晚)，以1g/kg体重强制口服给药实施例2的组合物(AL40)或者去离子水(vehicle)。在饲养期间，根据图8中所示的压力负载选单，对向受压小鼠口服给药去离子水的组(CUS-vehicle)和向受压小鼠口服给药实施例2的组合物的组(CUS-AL40)，施加各种压力(CUS：慢性不可预知性压力(chronicunpredictable stress))。

[表4]

组	压力负载的有无、饲料	n数
			CUS-vehicle	具有压力负载，含有16wt％酪蛋白的饲料+去离子水	12
CUS-AL40	具有压力负载，含有16wt％酪蛋白的饲料+实施例1的组合物	12
			Free-vehicle	不具有压力负载，含有16wt％酪蛋白的饲料+去离子水	12

在饲养的第6天、第13天、第20天、第27天和第31天测量各小鼠的体重，并且各组的平均值±平均值的标准误差示于图9中。此外，各组中的小鼠体重上增加(在饲养的第31天和饲养开始那天之间的体重差)示于图10中。

如图9和图10所示，与向不负载压力的小鼠口服给药去离子水的组(Free-vehicle)相比，在向负载压力小鼠口服给药去离子水的组(CUS-vehicle)和向负载压力小鼠口服给药实施例2的组合物的组(CUS-AL40)中，体重增加的倾向于受到抑制。

在饲养的第30天，对各组小鼠实施强制游泳试验(1L气缸，室温，6分钟)。

在强迫游泳试验中，被放入水槽中的小鼠首先挣扎、四处游泳，但是此后在水中漂浮同时停止移动，只有鼻尖从水面伸出。将小鼠不移动时的时间(不动时间)作为抑郁状态的指标。

测量各组小鼠的不动时间，并且将结果示于图11中。对测量结果进行Holm-Sidak的多重比较检验。

如图11所示，与向不负载压力小鼠口服给药去离子水的组(Free-vehicle)相比，在向负载压力小鼠口服给药去离子水的组(CUS-vehicle)和向负载压力小鼠口服给药实施例2的组合物的组(CUS-AL40)中，不动时间显著性(P＜0.0001)增加。然而，发现：与向负载压力小鼠口服给药去离子水的组(CUS-vehicle)相比，在向负载压力小鼠口服给药实施例2的组合物的组(CUS-AL40)中，不动时间显著性(P＜0.05)缩短。

上述评价结果表明：本发明的实施例2的组合物可改善由压力引起的抑郁状态。

[工业实用性]

如上详述，根据本发明，可以提供用于预防或改善痴呆症的组合物。

本发明的用于预防或改善痴呆症的组合物会有效地预防或改善记忆障碍，还对认知功能低下的抑制或改善是有效的，并且尤其是对预防或改善阿尔茨海默型痴呆症是有效的。

此外，本发明的用于预防或改善痴呆症的组合物是高度安全的，并且适用于连续摄取或给药。

根据本发明，可以提供一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，该组合物可以有利地预防或改善抑郁状态。

本发明的用于预防或改善抑郁状态的组合物尤其是对预防或改善由压力引起的抑郁状态是有效的。

此外，本发明的用于预防或改善抑郁状态的组合物具有高安全性，并且适用于连续摄取或给药。

本申请基于在日本提出申请的专利申请JP2016-176295和JP2016-178739，这些专利申请的内容全部包含在本文中。

Claims (16)

1.一种用于预防或改善痴呆症的组合物，其包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，所述一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸是异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中，各氨基酸含量相对于必需氨基酸总含量的摩尔组成比在以下数值范围内：

亮氨酸35摩尔％～66摩尔％

异亮氨酸5摩尔％～15摩尔％

缬氨酸5摩尔％～15摩尔％

苏氨酸7摩尔％～14摩尔％

赖氨酸8摩尔％～16摩尔％

甲硫氨酸2摩尔％～10摩尔％

组氨酸0.1摩尔％～3.5摩尔％

苯丙氨酸2.5摩尔％～8摩尔％

色氨酸0.1摩尔％～2摩尔％。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中，所述组合物预防或改善记忆障碍。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中，所述组合物抑制认知功能低下或改善认知功能。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是药品。

8.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是食品。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中，所述痴呆症是阿尔茨海默型痴呆症。

10.一种用于预防或改善抑郁状态的组合物，其包含一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸和相对于必需氨基酸总含量不低于35摩尔％的亮氨酸。

11.根据权利要求10所述的组合物，其中，相对于必需氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为35摩尔％～66摩尔％。

12.根据权利要求10或11所述的组合物，其中，所述一种以上的除亮氨酸以外的必需氨基酸包括异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。

13.根据权利要求12所述的组合物，其中，各氨基酸与所述必需氨基酸总含量的摩尔组成比在以下数值范围内：

亮氨酸：35摩尔％～66摩尔％

异亮氨酸：5摩尔％～15摩尔％

缬氨酸：5摩尔％～15摩尔％

苏氨酸：7摩尔％～14摩尔％

赖氨酸：8摩尔％～16摩尔％

甲硫氨酸：2摩尔％～10摩尔％

组氨酸：0.1摩尔％～3.5摩尔％

苯丙氨酸：2.5摩尔％～8摩尔％

色氨酸：0.1摩尔％～2摩尔％。

14.根据权利要求10至13中任一项所述的组合物，其中，所述抑郁状态是由压力引起的抑郁状态。

15.根据权利要求10至14中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是药品。

16.根据权利要求10至14中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是食品。