CN109655422A - 一种番茄红素含量的检测方法 - Google Patents
一种番茄红素含量的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109655422A CN109655422A CN201811279975.7A CN201811279975A CN109655422A CN 109655422 A CN109655422 A CN 109655422A CN 201811279975 A CN201811279975 A CN 201811279975A CN 109655422 A CN109655422 A CN 109655422A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lycopene
- sample
- content
- test fluid
- detection method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 title claims abstract description 116
- JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N Lycophyll Natural products OC/C(=C/CC/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C(=C\C=C\C=C(/C=C/C=C(\C=C\C=C(/CC/C=C(/CO)\C)\C)/C)\C)/C)\C)/C)/C JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N 0.000 title claims abstract description 116
- 235000012661 lycopene Nutrition 0.000 title claims abstract description 116
- 239000001751 lycopene Substances 0.000 title claims abstract description 116
- 229960004999 lycopene Drugs 0.000 title claims abstract description 116
- ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N trans-isorenieratene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/c1c(C)ccc(C)c1C)C=CC=C(/C)C=Cc2c(C)ccc(C)c2C ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N 0.000 title claims abstract description 116
- OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N lycopene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)CCC=C(C)C OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N 0.000 title claims abstract description 104
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 63
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 31
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 238000010606 normalization Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 claims abstract 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 71
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 46
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 19
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 14
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 11
- 239000008601 oleoresin Substances 0.000 claims description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 8
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 claims description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 abstract description 63
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 abstract description 6
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 abstract description 5
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 17
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 15
- 150000002664 lycopenes Chemical class 0.000 description 11
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 9
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 9
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 3
- 125000003963 dichloro group Chemical group Cl* 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 3
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 2
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- -1 BHT Chloromethanes Chemical class 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 244000241235 Citrullus lanatus Species 0.000 description 1
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 208000002699 Digestive System Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 1
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003026 anti-oxygenic effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000024558 digestive system cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000002864 food coloring agent Nutrition 0.000 description 1
- 201000010231 gastrointestinal system cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000001497 healthy food Nutrition 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/33—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种番茄红素含量的检测方法，其方法工艺为：（1）番茄样品提取得到样品溶液，或者番茄提取物样品溶解得到样品溶液；所述样品溶液浓度为0.01～0.1mg/mL；（2）使用分光光度计测定样品溶液，得到样品中总类胡萝卜素的含量；（3）使用高效液相色谱仪测定样品溶液，得到番茄红素的峰面积归一化比例，色谱柱为Agilent ZOBAX SB‑C18、150mm*4.6mm、5μm，流动相条件为甲醇:二氯甲烷=95:5，采用与步骤（2）相同的检测波长；（4）通过计算公式X=X0×P，计算得到样品中番茄红素的含量；其中X为样品中番茄红素的含量；X0为样品中总类胡萝卜素的含量；P为样品中番茄红素的峰面积归一化比例。本方法能够保证检测的准确性和稳定性，操作简单快捷。
Description
技术领域
本发明属于食品检测领域，尤其是一种番茄红素含量的检测方法。
背景技术
番茄红素(Lycopene)是一种天然食用色素，主要植物来源是番茄，其他类 型植物如西瓜和胡萝卜中也含有少量番茄红素。番茄红素是由11个共轭和2个 非共轭碳-碳双键组成的直链型碳氢化合物，分子式为C40H56。番茄红素是一种 非常重要的天然抗氧化剂，其抗氧化性能在类胡萝卜素中最强，其清除单线态氧 效果是VE的100倍。番茄红素也是一种保健食品原料，在防癌和抗癌作用具有 一定的效果，能有效预防前列腺癌、消化道癌等及心血管疾病的发生。番茄红素 已被联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)，联合国食品添加剂委员会 (JECFA)认定为A类营养素，并为50多个国家和地区作为营养和着色双重作用 的食品添加剂。
关于番茄及其提取物中番茄红素含量的检测方法，目前主要有分光光度法和 高效液相色谱法，但这两种方法均不能准确定量样品中的番茄红素含量。其中： 分光光度法测定的是番茄提取物中总类胡萝卜素的含量，其中包括番茄红素和其 他类胡萝卜素成分，从检测原理上无法真实地反应样品中番茄红素的含量；高效 液相色谱法虽能够准确的定位到番茄红素成分，但由于番茄红素标准品的稳定性 和不易控制问题(粉末条件下与氧气快速发生反应而降解，溶液条件下即使在-20℃ 条件下存在，在24h内即会发生成分转化和降解)，造成液相番茄红素检测方法 很难控制，检测结果误差达到10％水平。
由于目前行业番茄红素检测方法的不准确和可操作性问题，造成行业内经常 出现贸易纠纷，尤其是涉及到国际贸易过程中。因此，准确的检测番茄红素含量， 对于提高行业质量控制水平，更好地促进国内番茄红素产品推向国际市场具有重 要的意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种准确性高的番茄红素含量的检测方法。
为解决上述技术问题，本发明所采取的方法工艺为：
(1)番茄粉样品用含有0.05wt％BHT的二氯甲烷溶液采用超声或水浴的方式 进行提取，料液体积比1:5～20(m/v)，过滤得到测试液A；
或者，番茄提取物样品用含有0.05wt％BHT的二氯甲烷溶液直接溶解，得到 测试液A；
(2)移取2mL测试液A至100mL容量瓶中，加入10mL无水乙醇，石油醚定 容，混合均匀，得到测试液B；测试液B以石油醚为空白，在472nm处测定吸光 度；样品中总类胡萝卜素含量以质量分数w计，数值以％表示，按公式E.1计算 样品中总类胡萝卜素的含量：
式中：X0－样品中总类胡萝卜素的质量分数，％；
A－测试液B的吸光度；
K－样品的稀释倍数；
3450－1％试样液在石油醚中波长472nm处的吸收系数；
m－样品的称样量，g；
(3)测试液A过滤后用高效液相色谱仪测定，得到番茄红素的峰面积归一 化比例P；色谱柱为Agilent ZOBAX SB-C18、150mm*4.6mm、5μm，流动相条件 为甲醇:二氯甲烷＝95:5，流速1.5mL/min，检测波长472nm，色谱柱温度40℃， 进样量10μL；
(4)通过计算公式X＝X0×P，计算得到样品中番茄红素的含量；其中X为样 品中番茄红素的含量；X0为样品中总类胡萝卜素的含量；P为样品中番茄红素的 峰面积归一化比例。
本发明所述步骤(1)中，番茄提取物包括番茄红素油树脂、番茄红素晶体、 番茄红素油或番茄红素粉末。
本发明所述步骤(1)中，超声功率200～400W，超声频率40KHZ，超声温度 为25～50℃，超声时间为20～60min。
本发明所述步骤(1)中，水浴温度25～50℃，水浴时间为30～90min。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明具有无需使用番茄红素标 准品定量的优势，只需要通过标准品在色谱图上进行峰位置定性，然后对所有色 谱组分在基线部分进行积分，在积分结果表中读取番茄红素成分的峰面积比例； 再结合分光光度法测定样品中的总类胡萝卜素含量，通过总类胡萝卜素乘以番茄 红素比例，即可得到准确的番茄红素含量。
本发明使用的面积归一化法对高效液相色谱条件的选择具有较高的要求，需 要解决总类胡萝卜素含量乘以番茄红素的峰面积归一化例等于番茄红素含量的 对等关系问题；因此，本发明采用下述改进：首先，在检测波长选择上，高效液 相色谱条件的波长与分光光度法测定总类胡萝卜素的波长一致。其次，在流动相 选择和色谱柱选择上，使得样品液中的各种类胡萝卜素成分均能在液相图谱上得 到分离，且番茄红素成分的分离度需要满足要求。最后，在液相检测样品液的浓 度选择上，调整至合适的浓度范围，得到的番茄红素峰面积归一化比例能真实的 反应样品成分比例。
本发明克服了番茄红素标准品由于不稳定带来的检测技术困难，解决了番茄 红素传统检测方法中分光光度法检测稳而不准和高效液相色谱法准而不稳的技 术问题，具有明显技术进步。本发明采用一种面积归一化法测定番茄红素，能够 保证检测的准确性和稳定性，解决了番茄红素标准品不稳定的问题，该方法操作 简单快捷，易于在行业内推广使用。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1是番茄红素的紫外分光光度计扫描图谱；
图2是实施例1番茄粉的液相检测图谱；
图3是实施例7番茄红素油树脂的液相检测图谱；
图4是实施例8番茄红素油的液相检测图谱；
图5是实施例9番茄红素粉末的液相检测图谱；
图6是实施例10番茄红素晶体的液相检测图谱。
具体实施方式
本番茄红素含量的检测方法采用下述工艺：
(1)制备样品溶液：番茄样品提取或者番茄提取物样品溶解得到测试液A； 具体提取或配置工艺为：
A、番茄粉样品使用含有0.05wt％BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)的二氯 甲烷溶液按照料液比1:5～20(m/v)的方式，使用超声或水浴的方式进行提取， 提取液经定性滤纸过滤制备得到测试液A。采用超声提取时的参数为：超声功率 200～400W，超声频率为40KHZ，超声温度为25～50℃，超声时间为20～60min。 采用水浴提取时的参数为：水浴温度25～50℃，水浴时间为30～90min。
B、番茄提取物样品使用含有0.05wt％BHT的二氯甲烷溶液直接溶解得到测 试液A；番茄提取物包括：番茄红素油树脂、番茄红素晶体、番茄红素油或番茄 红素粉末。
(2)测定样品中总类胡萝卜素的含量：移取2mL测试液A置于100mL棕色 容量瓶中，加入10mL无水乙醇，石油醚定容，混合均匀，得到测试液B。使用 分光光度计进行测定，将得到的测试液B置于1cm比色皿中，以石油醚为空白， 在472nm处测定吸光度。样品中总类胡萝卜素含量以质量分数w计，数值以％表 示，按公式E.1计算样品中总类胡萝卜素的含量：
式中：X0－样品中总类胡萝卜素的质量分数，％；
A－测试液B的吸光度；
K－样品的稀释倍数；
3450－1％试样液在石油醚中波长472nm处的吸收系数；
m－样品的称样量，g。
由于样品溶解(萃取)后不占体积，所以稀释倍数K按下式进行计算：测试 液B*测试液A/2。
(3)测定样品中番茄红素的峰面积归一化比例：使用高效液相色谱仪进行 测定，将步骤(1)所得测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行 检测，记录色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果 表中读出番茄红素成分的峰面积归一化比例P。高效液相色谱参数条件如下：
色谱柱：Agilent ZOBAX SB-C18，150mm*4.6mm，5μm；
流动相条件：甲醇:二氯甲烷＝95:5(V/V)；流速：1.5mL/min；
检测波长：472nm；
色谱柱温度：40℃；
进样量：10μL。
(4)番茄红素结果计算：样品中番茄红素含量以质量分数X计，数值以％ 表示，按公式E.1计算：
X＝X0×P(E.2)
式中：X－样品中番茄红素的质量分数，％；
X0－样品中总类胡萝卜素的含量；
P－番茄红素的峰面积归一化比例。
实施例1：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
(1)称取番茄粉样品5.05g置于250mL三角瓶中，加入100mL含0.05％BHT 的二氯甲烷溶液。置于超声清洗器中进行萃取，超声功率400W，超声频率为40KHZ， 超声温度为40℃，超声时间为30min。超声萃取结束后用定性滤纸过滤，得到测 试液A。
(2)从测试液A中移取2mL溶液置于100mL容量瓶中，添加10mL无水乙 醇，用石油醚定容，混合均匀，记作测试液B。将测试液B置于1cm比色皿中， 以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度0.325。将A＝0.325、K＝5000和m＝5.05 带入到上述计算公式(Ⅰ)中，得到该番茄粉样品中总类胡萝卜素含量X0为 0.0933％。
(3)将测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行检测，记录 色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果表中读出番 茄红素成分的峰面积归一化比例P＝87.52％。高效液相色谱参数条件如上所述， 液相检测图谱见图2。
(4)将X0＝0.0933％和P＝87.52％带入到上述计算公式(Ⅱ)中，得到该番茄 粉样品中番茄红素含量X为0.0816％。
实施例2：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
除步骤(1)之外，其他工艺过程同实施例1。
步骤(1)为：称取番茄粉样品，加入0.05％BHT的二氯甲烷溶液，料液比 1:5(m/v)。置于超声清洗器中进行萃取，超声功率300W，超声频率为40KHZ， 超声温度为25℃，超声时间为60min。超声萃取结束后用定性滤纸过滤，得到测 试液A。
检测结果：A＝0.425、K＝5000和m＝8.08，计算得到X0为0.0762％；峰面积 归一化比例P＝83.33％；计算得到番茄红素含量X为0.0635％。
实施例3：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
除步骤(1)之外，其他工艺过程同实施例1。
步骤(1)为：称取番茄粉样品，加入0.05％BHT的二氯甲烷溶液，料液比 1:20(m/v)。置于超声清洗器中进行萃取，超声功率200W，超声频率为40KHZ， 超声温度为50℃，超声时间为20min。超声萃取结束后用定性滤纸过滤，得到测 试液A。
检测结果：A＝0.3250.418、K＝5000和m＝10.38，计算得到X0为0.0584％； 峰面积归一化比例P＝86.28％；计算得到番茄红素含量X为0.0504％。
实施例4：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
除步骤(1)之外，其他工艺过程同实施例1。
步骤(1)为：称取番茄粉样品，加入0.05％BHT的二氯甲烷溶液，料液比 1:20(m/v)。采用水浴提取，水浴温度35℃，水浴时间为90min。萃取结束后用 定性滤纸过滤，得到测试液A。
检测结果：A＝0.628、K＝5000和m＝15.45，计算得到X0为0.0589％；峰面积 归一化比例P＝88.67％；计算得到番茄红素含量X为0.0522％。
实施例5：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
除步骤(1)之外，其他工艺过程同实施例1。
步骤(1)为：称取番茄粉样品，加入0.05％BHT的二氯甲烷溶液，料液比 1:12(m/v)。采用水浴提取，水浴温度25℃，水浴时间为75min。萃取结束后用 定性滤纸过滤，得到测试液A。
检测结果：A＝0.399、K＝5000和m＝8.38，计算得到X0为0.0690％；峰面积 归一化比例P＝86.75％；计算得到番茄红素含量X为0.0599％。
实施例6：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
除步骤(1)之外，其他工艺过程同实施例1。
步骤(1)为：称取番茄粉样品，加入0.05％BHT的二氯甲烷溶液，料液比 1:5(m/v)。采用水浴提取，水浴温度50℃，水浴时间为30min。萃取结束后用 定性滤纸过滤，得到测试液A。
检测结果：A＝0.655、K＝5000和m＝10.45，计算得到X0为0.0908％；峰面积 归一化比例P＝86.37％；计算得到番茄红素含量X为0.0785％。
实施例7：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
(1)称取番茄红素油树脂样品0.5325g置于100mL容量瓶中，用含0.05％BHT 的二氯甲烷溶液定容，混合均匀，得到测试液A。
(2)从测试液A中移取2mL溶液置于100mL容量瓶中，添加10mL无水乙 醇，用石油醚定容，混合均匀，记作测试液B。将测试液B置于1cm比色皿中， 以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度0.485。将A＝0.485、K＝5000和m＝0.5325 带入到上述计算公式(Ⅰ)中，得到该番茄红素油树脂样品中总类胡萝卜素含量 X0为1.32％。
(3)将测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行检测，记录 色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果表中读出番 茄红素成分的峰面积归一化比例P＝89.35％。高效液相色谱参数条件如上所述， 液相检测图谱见图3。
(4)将X0＝1.32％和P＝89.35％带入到计算公式(Ⅱ)中，得到该番茄红素油 树脂样品中番茄红素含量X为1.18％。
实施例8：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
(1)称取番茄红素油样品0.1542g置于50mL容量瓶中，用含0.05％BHT 的二氯甲烷溶液定容，混合均匀。再移取10mL样品液至另一个50mL容量瓶中， 含0.05％BHT的二氯甲烷溶液定容，混合均匀，得到测试液A。
(2)从测试液A中移取2mL溶液置于100mL容量瓶中，添加10mL无水乙 醇，用石油醚定容，混合均匀，记作测试液B。将测试B液置于1cm比色皿中， 以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度0.466。将A＝0.466、K＝25000和m＝0.1542 带入到上述计算公式(Ⅰ)中，得到该番茄红素油样品中总类胡萝卜素含量X0为21.90％。
(3)将测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行检测，记录 色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果表中读出番 茄红素成分的峰面积归一化比例P＝97.58％。高效液相色谱参数条件如上所述， 液相检测图谱见图4。
(4)将X0＝21.90％和P＝97.58％带入到计算公式(Ⅱ)中，得到该番茄红素 油样品中番茄红素含量X为21.37％。
实施例9：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
(1)称取番茄红素粉末样品0.1112g置于100mL容量瓶中，用含0.05％BHT 的二氯甲烷溶液定容，混合均匀，得到测试液A。
(2)从测试液A中移取2mL溶液置于100mL容量瓶中，添加10mL无水乙 醇，用石油醚定容，混合均匀，记作测试液B。将测试B液置于1cm比色皿中， 以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度0.424。将A＝0.538，K＝5000和m＝0.1112 带入到上述计算公式(Ⅰ)中，得到该番茄红素油样品中总类胡萝卜素含量X0为7.01％。
(3)将测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行检测，记录 色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果表中读出番 茄红素成分的峰面积归一化比例P＝96.22％。高效液相色谱参数条件如上所述， 液相检测图谱见图5。
(4)将X0＝7.01％和P＝96.22％带入到计算公式(Ⅱ)中，得到该番茄红素油 样品中番茄红素含量X为6.75％。
实施例10：本番茄红素含量的检测方法采用下述具体工艺。
(1)称取番茄红素晶体样品0.0711g置于100mL容量瓶中，用含0.05％BHT 的二氯甲烷溶液定容，混合均匀。再移取10mL样品液至另一个50mL容量瓶中， 含0.05％BHT的二氯甲烷溶液定容，混合均匀，得到测试液A。
(2)从测试液A中移取2mL溶液置于100mL容量瓶中，添加10mL无水乙 醇，用石油醚定容，混合均匀，记作测试液B。将测试B液置于1cm比色皿中， 以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度0.472。将A＝0.472，K＝50000和m＝0.0711 带入到上述计算公式(Ⅰ)中，得到该番茄红素油样品中总类胡萝卜素含量X0为96.21％。
(3)将测试液A用0.45μm有机滤膜过滤后注入液相色谱进行检测，记录 色谱图。将色谱图中所有可见成分在基线位置进行积分，从积分结果表中读出番 茄红素成分的峰面积归一化比例P＝97.25％。高效液相色谱参数条件如上所述， 液相检测图谱见图6。
(4)将X0＝96.21％和P＝97.25％带入到计算公式(Ⅱ)中，得到该番茄红素 油样品中番茄红素含量X为93.56％。
对比实验：本检测方法与GB 28316检测结果对比情况如下所述。
(1)分别选取番茄粉、番茄红素油树脂和番茄红素晶体样品各3批，分别 使用GB28316方法以及本检测方法进行对比检测，评价两种方法的一致性情况。 结果表明：两种方法评价各类样品结果基本一致，说明本检测方法的准确性较可 靠。
表1：不同方法检测番茄红素含量对比数据
(2)精密度实验：分别选取番茄粉、番茄红素油树脂和番茄红素晶体各1 批，按照本检测方法进行检测，评价本检测方法对于各类样品检测的精密度情况， 检测数据见表2、表3和表4。结果表明：本检测方法检测各类样品的精密度在 3％以内，说明本检测方法的稳定性较好。
表2：番茄粉检测精密度数据
表3：番茄红素油树脂检测精密度数据
| 检测次数 | 面积归一化比例％ | 总类胡萝卜素含量％ | 番茄红素含量％ |
| 1 | 86.381 | 1.366 | 1.180 |
| 2 | 86.815 | 1.361 | 1.182 |
| 3 | 86.993 | 1.348 | 1.173 |
| 4 | 86.903 | 1.355 | 1.178 |
| 5 | 87.211 | 1.364 | 1.190 |
| 6 | 86.841 | 1.351 | 1.173 |
| 7 | 84.438 | 1.359 | 1.147 |
| 8 | 84.398 | 1.360 | 1.148 |
| 9 | 85.076 | 1.358 | 1.155 |
| 平均值 | 86.117 | 1.358 | 1.169 |
| RSD | 1.33％ | 0.43％ | 1.34％ |
表4：番茄红素晶体检测精密度数据
Claims (4)
1.一种番茄红素含量的检测方法，其特征在于，其方法工艺为：（1）番茄粉样品用含有0.05wt%BHT的二氯甲烷溶液采用超声或水浴的方式进行提取，料液体积比1:5～20（m/v），过滤得到测试液A；
或者，番茄提取物样品用含有0.05wt%BHT的二氯甲烷溶液直接溶解，得到测试液A；
（2）移取2mL测试液A至100mL容量瓶中，加入10mL无水乙醇，石油醚定容，混合均匀，得到测试液B；测试液B以石油醚为空白，在472nm处测定吸光度；样品中总类胡萝卜素含量以质量分数w计，数值以%表示，按公式E.1计算样品中总类胡萝卜素的含量：
式中：X0－样品中总类胡萝卜素的质量分数，%；
A－测试液B的吸光度；
K－样品的稀释倍数；
3450－1%试样液在石油醚中波长472nm处的吸收系数；
m－样品的称样量，g；
（3）测试液A过滤后用高效液相色谱仪测定，得到番茄红素的峰面积归一化比例P；色谱柱为Agilent ZOBAX SB-C18、150mm*4.6mm、5μm，流动相条件为甲醇:二氯甲烷=95:5，流速1.5mL/min，检测波长472nm，色谱柱温度40℃，进样量10μL；
（4）通过计算公式X=X0×P，计算得到样品中番茄红素的含量；其中X为样品中番茄红素的含量；X0为样品中总类胡萝卜素的含量；P为样品中番茄红素的峰面积归一化比例。
2.根据权利要求1所述的一种番茄红素含量的检测方法，其特征在于：所述步骤（1）中，番茄提取物包括番茄红素油树脂、番茄红素晶体、番茄红素油或番茄红素粉末。
3.根据权利要求1所述的一种番茄红素含量的检测方法，其特征在于：所述步骤（1）中，超声功率200～400W，超声频率为40KHZ，超声温度为25～50℃，超声时间为20～60min。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种番茄红素含量的检测方法，其特征在于：所述步骤（1）中，水浴温度25～50℃，水浴时间为30～90min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811279975.7A CN109655422A (zh) | 2018-10-30 | 2018-10-30 | 一种番茄红素含量的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811279975.7A CN109655422A (zh) | 2018-10-30 | 2018-10-30 | 一种番茄红素含量的检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109655422A true CN109655422A (zh) | 2019-04-19 |
Family
ID=66110457
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811279975.7A Pending CN109655422A (zh) | 2018-10-30 | 2018-10-30 | 一种番茄红素含量的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109655422A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110824065A (zh) * | 2019-12-04 | 2020-02-21 | 南京中科药业有限公司 | 一种包埋后的番茄红素的检测方法 |
| CN114047155A (zh) * | 2021-09-26 | 2022-02-15 | 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 | 类胡萝卜素快速检测方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101082609A (zh) * | 2006-05-30 | 2007-12-05 | 田丽萍 | 食品中天然色素辣椒红色素的检测方法 |
| CN101360828A (zh) * | 2005-12-23 | 2009-02-04 | 阿维沙基因有限公司 | 植物中类胡萝卜素的增强 |
| MX2010011899A (es) * | 2010-10-29 | 2012-04-30 | Bioderpac S A De C V | Mezcla y método por cromatografia liquida de alta resolucion para la cuantificación de astaxantina en residuos de camarón fermentados. |
| CN104316610A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-01-28 | 西安莹朴生物科技股份有限公司 | 番茄红素的测定方法 |
| CN106124670A (zh) * | 2016-09-06 | 2016-11-16 | 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 | 一种检测番茄红素的方法 |
| CN107478738A (zh) * | 2017-08-01 | 2017-12-15 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 检测乳制品中叶黄素的方法 |
| CN107966513A (zh) * | 2017-11-25 | 2018-04-27 | 江苏艾兰得营养品有限公司 | 运用HPLC测定复杂组分中β-胡萝卜素、番茄红素含量的方法 |
-
2018
- 2018-10-30 CN CN201811279975.7A patent/CN109655422A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101360828A (zh) * | 2005-12-23 | 2009-02-04 | 阿维沙基因有限公司 | 植物中类胡萝卜素的增强 |
| CN101082609A (zh) * | 2006-05-30 | 2007-12-05 | 田丽萍 | 食品中天然色素辣椒红色素的检测方法 |
| MX2010011899A (es) * | 2010-10-29 | 2012-04-30 | Bioderpac S A De C V | Mezcla y método por cromatografia liquida de alta resolucion para la cuantificación de astaxantina en residuos de camarón fermentados. |
| CN104316610A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-01-28 | 西安莹朴生物科技股份有限公司 | 番茄红素的测定方法 |
| CN106124670A (zh) * | 2016-09-06 | 2016-11-16 | 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 | 一种检测番茄红素的方法 |
| CN107478738A (zh) * | 2017-08-01 | 2017-12-15 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 检测乳制品中叶黄素的方法 |
| CN107966513A (zh) * | 2017-11-25 | 2018-04-27 | 江苏艾兰得营养品有限公司 | 运用HPLC测定复杂组分中β-胡萝卜素、番茄红素含量的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 中华人民共和国卫生部: "食品添加剂 番茄红", 《食品安全国家标准》 * |
| 赵小阳等: "叶黄素的测定方法研究", 《饲料广角》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110824065A (zh) * | 2019-12-04 | 2020-02-21 | 南京中科药业有限公司 | 一种包埋后的番茄红素的检测方法 |
| CN110824065B (zh) * | 2019-12-04 | 2022-07-26 | 南京中科药业有限公司 | 一种包埋后的番茄红素的检测方法 |
| CN114047155A (zh) * | 2021-09-26 | 2022-02-15 | 嘉必优生物技术（武汉）股份有限公司 | 类胡萝卜素快速检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Robbins et al. | Development of a liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for the determination of sulfite in food | |
| Jakob et al. | Application of a simplified HPLC assay for the determination of phylloquinone (vitamin K1) in animal and plant food items | |
| Chen et al. | Rapid and sensitive determination of plasticizer diethylhexyl phthalate in drink by diffuse reflectance UV spectroscopy coupled with membrane filtration | |
| CN106093216B (zh) | 一种烟叶中11种着色剂的高效液相色谱测试方法 | |
| CN102721778A (zh) | 一种快速高效测定葡萄酒中酚酸的方法 | |
| CN109655422A (zh) | 一种番茄红素含量的检测方法 | |
| Li et al. | Measurement of antioxidant capacity by electron spin resonance spectroscopy based on copper (II) reduction | |
| Aguilar Urbano et al. | Spectrophotometric quantitation of antioxidant capacity through the formation of a phosphomolybdenum complex: specific application to the determination of vitamin E1 | |
| CN101701945A (zh) | 一种利用hplc测定黑大豆种质种皮中花色苷构成谱及含量的方法 | |
| CN106124670A (zh) | 一种检测番茄红素的方法 | |
| Geoffroy et al. | Suitability of DPPH spiking for antioxidant screening in natural products: the example of galloyl derivatives from red maple bark extract | |
| CN113267588A (zh) | 一种同时检测塑料制品中7种丙烯酸及丙烯酸酯类单体的方法 | |
| Huang et al. | Semiquantitative screening of THC analogues by silica gel TLC with an Ag (I) retention zone and chromogenic smartphone detection | |
| CN101393179B (zh) | 反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法 | |
| CN113219119A (zh) | 一种番茄果实中16种多酚类物质的提取与测定方法 | |
| Konieczka et al. | Improved derivatization of malondialdehyde with 2-thiobarbituric acid for evaluation of oxidative stress in selected tissues of chickens. | |
| CN107703232A (zh) | 一种虾青素含量的检测方法 | |
| CN108152425A (zh) | 一种高效液相色谱检测芝麻油木脂素的方法 | |
| CN109100456B (zh) | 一种同时测定多种维生素注射液中3种脂溶性维生素含量的方法 | |
| Zokaei et al. | Determining the amount of acrylamide in potato chips using xanthydrol as a derivative representative with gas chromatography-mass spectrometry | |
| CN106093264A (zh) | 一种草莓叶黄素循环组分的测定方法 | |
| CN109632781A (zh) | 抗球虫饲料添加剂产品中绿原酸与咖啡酸含量的测定方法 | |
| CN103558174A (zh) | 一种利用紫外分光光度法测定来苏儿中甲酚含量的方法 | |
| Ponhong et al. | Dual determination of nitrite and iron by a single greener sequential injection spectrophotometric system employing a simple single aqueous extract from Areca catechu Linn. serving as a natural reagent | |
| CN114113372A (zh) | 天然食用色素残留溶剂检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190419 |