CN1096443A - 17α-二氢马烯雌酮抗动脉粥样硬化的用途 - Google Patents

Abstract

治疗动脉粥样硬化的方法，是通过在无天然存在 的雌激素类固醇存在的条件下，给需要抗动脉粥样硬 化治疗的病人使用有效量的17α-二氢马烯雌酮、其 C₂—C₆链烷酸酯或药学上可接受的、它的硫酸酯或 磷酸酯盐。药用组合物含有17α-二氢马烯雌酮、其 C₂-C₆链烷酸酯或药学上可接受的，它的硫酸酯或磷 酸酯盐，以及药学上可接受的载体，不含天然存在的 雌激素类固醇。

Description

在美国，心血管疾病（CVD）仍然是致残和死亡的主要原因，尽管几十年来这方面的治疗已取得了很大进展。冠状动脉疾病是CVD的重要形式，是美国当今死亡的重要原因，每年因此病死亡人数超过55万人。脑血管疾病在美国列为第三大死亡原因。冠状动脉与脑血管疾病的病因就是动脉粥样硬化。虽然动脉粥样硬化的临床表现形式各异，但它是每年1百多万心脏病发作和药40万中风者的主要原因。除动脉粥样硬化发病率高和死亡率高之外，据估计，它还使美国经济每年在工资、生产率及医疗费用方面损失价值超过800亿美元。[Levy，R.，Am.Heart        J.110：1116（1985）]。

动脉粥样硬化是动脉硬化最重要的形式，可涉及主动脉及其所有分支。主动脉在邻近完全正常的血管壁区域的小段内，可有严重散在和融合在一起的粥样硬化斑。这种粥样硬化斑（即动脉粥样硬化斑）经过数年的缓慢发展，最终成为脂质团块，其大部分是胆固醇和胆固醇酯。这些动脉内的团块在血管腔内达到足够大时，就可以阻碍血流，并引起涡流，从而导致粥样硬化表面破裂，形成缺损和微栓子。由于血流受阻，结果使微栓子定位因而产生急性症状。

据信，在导致动脉粥样硬化的一连串过程中，触发因素就是在颈动脉、冠状动脉、脑动脉及主动脉内有脂质条纹的形成。这种损害包括胆固醇和胆固醇酯的沉积，而这些东西通常是发现在平滑肌细胞内和内膜层的巨噬细胞内。[Ross，R.，.New        Eng.J.Med.295：369（1977）]。内皮的脱去或损伤，引起环绕细胞的细胞外基质完整性的暴露和可能的破坏，导致1）血液循环中单核细胞及由其所分化的巨噬细胞的聚集，2）巨噬细胞和平滑肌细胞内的脂质积累[Ross，R.，New        Eng.J.Med.314：488（1986）]，3）平滑肌表型从静止的、收缩的状态，转变成可移行、增殖的形式[Manderson，J.A.，Arteriosclerosis        9：289（1989）]，4）可移动的平滑肌细胞从中层最终移动到内膜层损伤之下[Clowes，A.W.Cire.Res.56：139（1985）]以及5）接着就是内膜平滑肌层的大量增生，导致动脉腔的阻塞，[Clowes，A.W.，J.Cardiovas        Pharm.14（Suppl        6）：S12（1989）]。

已经证实，有多种危险因素可使人患动脉粥样硬化，可以推断，具有至少一种危险因素的人，患动脉粥样硬化的危险性大于无危险因素的人;具有多种危险因素的人，患该病的可能性更大。这些危险因素包括高脂血症（高胆固醇血症和/或高甘油三酯血症）、高血糖、糖尿病、高血压、肥胖症、吸烟、家族性高脂蛋白血症、老年人及男性。近绝经期和绝经后的妇女，是一组特殊的正在步入老年人行列的人群，她们易患冠心病。自本世纪50年代以来，已观察到绝经前的妇女不易患冠心病。这些观察使人们想到用动物作了几组研究，证实了高脂肪食物喂养的动物，服用雌性激素可预防饮食性的冠状动脉粥样硬化。[Barrett-Connor.E.，JAMA        265：（1991）]。据认为，雌激素防止粥样硬化性冠心病的机理之一，就是通过降低血浆总胆固醇（TPC），即诱导分解代谢的增加和低密度脂蛋白（LDL）胆固醇经肝脏排到胆管的增加。LDL分解代谢的增加及胆固醇的排泄增加，可能是肝内低密度脂蛋白的受体对雌激素依赖性增加的结果，正如由服用大剂量的17α-炔雌醇的老鼠所证实的那样。[Chao，Y-S.，J.Biol.Chem.254：11360（1979）;Kovanen，P.T.，J.Biol.Chem.254：11367（1979）;Windler        E.E.T.，J.Biol.Chem.，255：10464（1980）]。已经证明，绝经后接受雌激素替代性治疗（ERT）的妇女，患冠状动脉粥样硬化性心脏病的危险性减少了50-70%。[Stampfer.M.L.，N.Engl，J.Med.313：1044（1985）]。经雌激素治疗的妇女与未治疗的更年期妇女相比，CVD的死亡率降低了63%，心肌梗塞的死亡率降低了2.3-2.7倍。

尽管ERT对绝经后妇女的益处是显著的，已证实使用单纯性的ERT（未同时使用孕激素的雌激素治疗）与子宫膜内增生之间存在着一种联系，因而增加了子宫内膜癌的危险。[Utian，W，H.，Obstet.Gynecol.Surv.32：193（1977）;ACOG        Technical        Bulletin        93：1（1986）;Hammond，C.B.，Fertil.Steril.37：5（1982）;Whitehead，M.I.，Am.J.Obstet.Gyncol.142：791（1982）;Gambrell，R.D.，South        Med.J.71：1280（1978）;McDonald        T.W.，Am.J.Obstet.Gynecol.127：572（1977）]。为了减少或完全消除由于ERT所致的子宫内膜腺癌的危险，而又保持ERT的好处，已证实，在每个雌激素周期最后的10-14天期间，可将孕激素与雌激素同时使用。[Whitehead，M.I.，J.R.Soc.Med.72：322（1979）;Whitehead，M.I.，Semin.Reprod.Endocrin.1：41（1983）;Barrett-Connor，E.，Annu.Rev.Med.43：239（1992）]。

硫酸17α-二氢马烯雌酮约占共轭雌激素（conjugated estrogens）Premarin

（马雌激素）重量组成的15%（Premarin是Wyeth-Ayerst的注册商标），它通常是作为ERT的处方药用于绝经后的妇女。已经有一些关于各种雌激素药性的报告，比较子宫的反应，来测定这些药物是否对绝经后血管舒缩症、尿中促性腺激素水平、血浆脂质和脂蛋白的代谢及肝脏球蛋白的合成有特殊的影响。有两项研究显示，在老鼠的模型中，17α-二氢马烯雌酮对子宫的重量或阴道细胞的成熟几乎无刺激性的影响，并且也不抑制绝经后妇女尿中的促性腺激素。雌激素样活性是最小的。[Howard，等，Arch Int，Med.128：229（1971）;Stern，Maturitas        4：333（1982）]。也还没有一项研究提示17α-二氢马烯雌酮在减少动脉粥样硬化方面的应用。

动脉粥样硬化的治疗，一般是通过使用抗血脂药，降低血压10-20%，及通过饮食和锻炼来提高血液中高密度脂质水平，使后遗症（心绞痛、心肌梗塞、心律失常、心衰、肾功能衰竭、中风、周围动脉栓塞及有关病态）减轻。这些措施通常只是减慢这种病态的进展速度，而不是改变它的发展方向。

本发明提供治疗动脉粥样硬化的方法，它包括经口服或非肠道使用抗动脉粥样硬化量的17α-二氢马烯雌酮，或其药物前体如C₂-C₆链烷酸酯，或药学上可接受的其硫酸酯或磷酸酯的盐。根据本项发明，这些化合物的应用不存在任何雌激素类固醇（estrogenic steroid）。含本发明抗动脉粥样硬化剂和药学上可接受的载体的药用组合物构成本发明的另外一个方面。优选的链烷酸酯是乙酸酯和新戊酸酯。优选的金属盐是碱金属（钠、钾、锂）或碱土金属（钙或镁）盐。一烷基胺盐含有1-6个碳原子，如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、丁胺、叔丁胺、己胺等。二烷基胺盐在每个烷基团中含有1-6个碳原子，是由二甲胺、二乙胺、二异丙胺、二（2-甲基戊基）胺、二乙胺等产生的。

此种类固醇以与剂量相关的方式，可明显地减少动脉表面区域的缺损和动脉胆固醇的含量，并伴有血浆总胆固醇的少量减少。没有观察到与17α-二氢马烯雌酮的联合应用可以减少血浆甘油三酯。因此，这种类固醇可使参与动脉粥样硬化的脂肪物质沉积惊人地减少，而对血浆脂质只有温和的作用。

由于水溶性的关系，最佳化合物是17α-二氢马烯雌酮硫酸酯的碱金属盐、包括钠盐、钾盐和锂盐，根据本发明方法，当它们单独或与其它药物联合应用治疗动脉粥样硬化时，这些盐容易被吸收;所述其它药物为通常用于治疗动脉粥样硬化的药物，如抗血脂药、抗心律失常药、β-阻滞剂等。使用本发明抗动脉粥样硬化的化合物，摆脱了在天然来源的混合的雌激素酯中所发现的物质中的雌激素类固醇，如马雌激素中的结合酯。因此，这些化合物可以单独用于需要它们的病人，或可与药学上可接受的载体配合使用。任何合适的、本领域公知的载体都可以用来制备这种药用组合物。在这种组合物中，载体可以是固体、液体或固体与液体的混合物。固体组合物包括粉剂、片剂和胶囊剂。固体载体可以是一种或多种物质，它们也可以充当矫味剂、润滑剂、增溶剂、助悬剂、粘合剂或片剂崩解剂。粉剂中，载体是很细小的、与细碎的活性成分混合的固体。片剂中，活性成分与具有所需的粘合特性的载体，按适当比例混合，并按所需的形状和大小压制。合适的固态载体是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点的蜡、可可脂等。也可以用胶囊物质与应用在本发明方法的类固醇合用。组合物一词是指包括活性物质以及与之混合的胶囊物质如含有或不含有其它载体的制剂。也可以用扁囊剂来提供本发明抗动脉粥样硬化的药物。

无菌液体组合物包括溶液、悬浮液、乳浊液、糖浆和酏剂。类固醇可以被溶解或悬浮在药学上可以接受的载体之中，所述载体包括如无菌水、无菌有机溶剂或两者的混合物。优选的液体载体是适合于非胃肠道注射的载体。生理盐水与或不与适当的有机溶剂如丙二醇或聚乙二醇合用，均可直接溶解足够的类固醇。如果需要的话，可将类固醇在淀粉水溶液或羧甲基纤维素钠水溶液中或在合适的油如花生油中制成细小的类固醇的分散体。是无菌溶液或悬浮液的液体药用组合物体可以通过肌内、腹膜内或皮下注射来使用。在很多情况下，可以用液体组合物的形式来替代优选的固体口服的使用方法。

将类固醇制成单位剂量形式是优选的。在这种情况下，按照医生的指导可容易地将组合物进一步分成更小的剂量。例如，单位剂量可以制成小袋的粉剂、小瓶或安瓿，最好是胶囊或片剂。根据病人的具体需要，活性类固醇在组合物的这些单位剂量形式中的含量可以从约0.1毫克至大约2克或更多。每日活性类固醇的剂量取决于使用方法、病人的体重、年龄和性别、病情的严重程度及通过血液分析及病人的恢复率来追踪对治疗的反应。通过最初用最小剂量如0.5毫克治疗的方法，血液类固醇水平和病人症状缓解分析可以用来确定是否有大剂量治疗指征。

用本发明中所用的类固醇治疗男性的动脉粥样硬化是有利的，由下述事实表明：17α-二氢马烯雌酮硫酸酯盐的雌性激素作用，较其它在商品化的雌激素混合物如马雌激素中所有的天然存在的雌激素要小得多。

17α-二氢马烯雌酮可以从自然界获取，如从怀孕的母马尿中，也可以从市场上买到。含有钙或镁阳离子的碱土金属盐是用适当的碱，通过硫酸酯的碱金属盐的直接的金属转移，或在合适的循环过程中，通过与阳离子交换树脂的交换来生产的，所述阳离交换树脂包括如弱酸性的Amberlite交换剂DP-1、IRC-50、IRC-76、CG-50或IRP-64。若有必要，用弱酸如醋酸化硫酸酯的碱金属，然后用醇如正丁醇提取，并且化学计量的氢氧化钙或氢氧化镁、氢氧化铵或所需的胺中和，可以得到其它盐。至于胺盐，-烷基胺盐可直接由胺如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、丁胺、叔丁胺、己胺等来制备。二烷基胺盐由二甲胺、二乙胺、二异丙胺、二（2-甲基戊基）胺、二己胺等来制备。磷酸酯盐的制备也采用类似方式，这些制备方法在甾类化学中是熟知的，它们是在甾类化学家的熟练技术范畴内。

确认17α-二氢马烯雌酮的抗动脉粥样硬化的性质，是通过检测其硫酸酯钠盐应用在胆固醇喂养的SEA鹌鹑的情况来完成的，此种鹌鹑是日本鹌鹑的亚种，为标准的研究主动脉粥样硬化进展的实验动物。根据本方法，用成年、雄性SEA鹌鹑，出生约6个月时分开笼养，随便饮食、饮水。向试验组和对照组的鹌鹑提供的现成的干饲料含有胆固醇和猪油。[Day，Artery        17.49（1989）]。将17α-二氢马烯雌酮（75和15毫克）溶解在蒸馏水里，并与含有胆固醇的干饲料1.0kg相混合。类固醇的实际消耗量按二种饲料混合水平，它们分别是：浓度为75mg/kg的，为5mg/kg/日;浓度为15mg/kg的，为1mg/kg/日。定期作血液分析，来测定血清总胆固醇浓度、血清高密度脂蛋白和血清甘油三酯的浓度。最后，杀死这些动物，直接检查动脉粥样硬化损害覆盖的动脉表面，以测定损害覆盖的面积。同时也测定动脉的胆固醇浓度。

这项研究结果证实：17α-二氢马烯雌酮硫酸酯的钠盐，以5mg/kg/日剂量水平，在8周后可使血清总胆固醇轻度降低（对照组胆固醇＝2044±634mg/dl，试验组＝1469±1246mg/dl，P＜0.05）;按1mg/kg/日喂养剂量，4周后血清高密度脂蛋白胆固醇轻度降低（对照组＝311±93mg/dl;试验组＝250±67mg/dl;P＜0.05），并在8周后按5mg/kg/日剂量水平（对照组＝301±69mg/dl;试验组＝255±65mg/dl;P＜0.05），而且在第四周时（不是第八周），5mg/kg/日剂量组的血清甘油三酯水平轻度降低（对照组＝476±197mg/dl，试验组＝362±110mg/dl，P＜0.05）。观察到了按5mg/kg/日喂养的动物，其动脉表面的动脉粥样硬化损害显著地减少（对照组＝总面积的62±38%;试验组＝总面积的29±34%;P＜0.01）。动脉粥样硬化的第二个量度，动脉胆固醇浓度，在以5mg/kg/日喂养的试验动物组中也显著地降低了（对照组＝30.00±12.91mg/g;试验组＝16.23±11.27mg/g;P＜0.01）。

17α-二氢马烯雌酮的抗动脉粥样硬化特性，也通过检测其硫酸酯钠盐对胆固醇喂养的、去卵巢新西兰雌性白兔的作用而得到证实。根据此项程序，成年去卵巢雌兔分开笼养，随便饮水24周。最初，这些动物按35g/kg兔重/日配给食物。对照组头8周仅消耗25g/kg/日，这样，所有的组在剩下的16周里，限制在25g/kg/日。喂养试验组和对照组的现成的干饲料含有0.2%的胆固醇和5%的玉米油。将胆固醇和17α-二氢马烯雌酮（145mg/公斤食物）溶解在液态玉米油里并加至食物中，使35g的食物中含有5mg药物。由于对照组的实际消耗量仅是25g/kg/日，所以限制饮食，且最后16周的实际药物消耗量为3.58mg/kg/日。进行定期血液分析，以测定血清总胆固醇浓度、血清高密度脂蛋白和血清甘油三酯浓度。在治疗到24周时，杀死动物，直接检查动脉粥样硬化损害覆盖的动脉表面，以测定损害覆盖的面积，同时也测定动脉胆固醇浓度。

本研究结果证实，17α-二氢马烯雌酮硫酸酯的钠盐在24周内对血浆胆固醇无显著地影响。两组之间，血浆总胆固醇变化在833-993的范围内，无显著性差异。药物治疗对高密度脂蛋白胆固醇水平也无影响，同样，对甘油三酯的影响也一样。药物治疗组的LDL胆固醇轻度升高，从550±203升到780±136mg/dl（P＜0.05）。尽管脂蛋白方面有点儿消极的变化（血浆LDL胆固醇升高），但胸主动脉和腹主动脉的粥样硬化损害却发生显著地减少。在胸主动脉，硫酸17α-二氢马烯雌酮使损害的动脉表面面积减少，从对照组的26.3±27.0%减到6.10±5.65%（P＜0.05），减少了77%;胆固醇酯含量从7.00±6.08mg/克净重组织减少到2.08±2.39mg/g（P＜0.05），减少了70%。在腹主动脉，硫酸17α-二氢马烯雌酮使损害的动脉表面面积减少，从对照组的17.94±16.70%减少到5.14±3.47%（P＜0.05），减少了71%;胆固醇酯含量从3.82±3.05mg/克净重组织减少到1.30±0.65mg/g（P＜0.05），减少了66%。

这些数字表明，17α-二氢马烯雌酮本身和它的3-链烷酸酯以及它的硫酸酯或磷酸酯的碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、烷基胺盐和二烷基胺盐的形式，对直接减少伴随动脉粥样硬化发展的动脉损害，是非常有效的药物。因此，本发明提供了缓解可能是该病情最严重症状的直接方法，而不明显改变血液其它化学成分。

Claims (10)

1、动脉粥样硬化的治疗方法，它包括在无天然存在的雌激素类固醇存在下，给需要抗动脉粥样硬化治疗的病人使用有效量的17α-二氢马烯雌酮、其C₂-C₆链烷酸酯或药学上可接受的、它的硫酸酯或磷酸酯盐。

2、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是钠盐。

3、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是钾盐。

4、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是锂盐。

5、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是钙盐。

6、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是镁盐。

7、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是铵盐。

8、权利要求1的方法，其中所述药学上可接受的盐是二烷基胺盐。

9、参与动脉粥样硬化进展的动脉损伤的去除方法，它包括给患动脉粥样硬化的病人口服或经非胃肠道途径使用含有抗动脉粥样硬化量的17α-二氢马烯雌酮的碱金属盐的药用组合物。

10、一种药用组合物，它含有抗动脉粥样硬化量的17α-二氢马烯雌酮、其C₂-C₆链烷酸酯或硫酸酯或磷酸酯的药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体，不含天然存在的雌激素类固醇。