CN109628390A - 一种水凝胶状的细胞培养配方 - Google Patents

一种水凝胶状的细胞培养配方 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液10‑100mL为基础，还含有棉籽糖2‑4mL、葡萄糖2‑4mL、胰岛素0.05‑0.1mL、转铁蛋白0.005‑0.01mL、生长激素0.001‑0.002mL、谷胱甘肽0.1‑2.2mL、谷氨酰胺0.01‑0.03mL、非必需氨基酸0.01‑0.012mL、水凝胶6‑8mL。相对现有技术，本发明通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。

Description

一种水凝胶状的细胞培养配方
技术领域
本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种水凝胶状的细胞培养配方。
背景技术
目前，对脐带间充质干细胞的培养体系主要应用含动物血清(如胎牛血清)的培养基，血清中含有细胞生长所需的生长因子、激素、载体蛋白、贴壁因子、微量元素以及其他营养物质，可以促进细胞生长，但含有血清的培养基存在携带病原体，利用动物血清培养的干细胞，其内部结构会发生何种变化尚未可知，为避免含动物血清培养中病毒等病原体污染和异种血清所致的过敏反应，目前有报道开发了不含有血清的培养基以培养干细胞，然而所得效果却不甚理想。
发明内容
本发明的目的是提供一种水凝胶状的细胞培养配方，所要解决的技术问题是：目前有报道开发了不含有血清的培养基以培养干细胞配方，但是效果不佳。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液10-100mL为基础，还含有棉籽糖2-4mL、葡萄糖2-4mL、胰岛素0.05-0.1mL、转铁蛋白0.005-0.01mL、生长激素0.001-0.002mL、谷胱甘肽0.1-2.2mL、谷氨酰胺0.01-0.03mL、非必需氨基酸0.01-0.012mL、水凝胶6-8mL。
进一步，由以下原料组成：以DMEM培养液10mL为基础，还含有棉籽糖2mL、葡萄糖2mL、胰岛素0.05mL、转铁蛋白0.005mL、生长激素0.001mL、谷胱甘肽0.1mL、谷氨酰胺0.01mL、非必需氨基酸0.01mL、水凝胶6mL。
进一步，由以下原料组成：以DMEM培养液100mL为基础，还含有棉籽糖4mL、葡萄糖4mL、胰岛素0.1mL、转铁蛋白0.01mL、生长激素0.002mL、谷胱甘肽2.2mL、谷氨酰胺0.03mL、非必需氨基酸0.012mL、水凝胶8mL。
进一步，由以下原料组成：以DMEM培养液55mL为基础，还含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰岛素0.07mL、转铁蛋白0.008mL、生长激素0.0015mL、谷胱甘肽1.2mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.006mL、水凝胶7mL。
进一步，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
进一步，所述的水凝胶由热交联明胶制成。
进一步，所述水凝胶的含水率为75％以上且95％以下。
进一步，所述水凝胶的厚度为1μm以上且30mm以下。
本发明的有益效果是：通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1：
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液10mL为基础，还含有棉籽糖2mL、葡萄糖2mL、胰岛素0.05mL、转铁蛋白0.005mL、生长激素0.001mL、谷胱甘肽0.1mL、谷氨酰胺0.01mL、非必需氨基酸0.01mL、水凝胶6mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为75％；所述水凝胶的厚度为1μm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
实施例2：
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液100mL为基础，还含有棉籽糖4mL、葡萄糖4mL、胰岛素0.1mL、转铁蛋白0.01mL、生长激素0.002mL、谷胱甘肽2.2mL、谷氨酰胺0.03mL、非必需氨基酸0.012mL、水凝胶8mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为85％；所述水凝胶的厚度为15mm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
实施例3：
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液55mL为基础，还含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰岛素0.07mL、转铁蛋白0.008mL、生长激素0.0015mL、谷胱甘肽1.2mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.006mL、水凝胶7mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为95％；所述水凝胶的厚度为30mm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
实施例4：
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液70mL为基础，还含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰岛素0.08mL、转铁蛋白0.008mL、生长激素0.002mL、谷胱甘肽1.8mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.011mL、水凝胶7mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为88％；所述水凝胶的厚度为20mm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
实施例5:
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液30mL为基础，还含有棉籽糖2mL、葡萄糖2mL、胰岛素0.05mL、转铁蛋白0.006mL、生长激素0.001mL、谷胱甘肽0.5mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.01mL、水凝胶7mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为78％；所述水凝胶的厚度为10μm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
实施例6:
一种水凝胶状的细胞培养配方，由以下原料组成：以DMEM培养液60mL为基础，还含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰岛素0.08mL、转铁蛋白0.008mL、生长激素0.002mL、谷胱甘肽1.8mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.011mL、水凝胶7mL。
上述实施例中，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
上述实施例中，所述的水凝胶由热交联明胶制成；所述水凝胶的含水率为79％；所述水凝胶的厚度为20mm。
通过对各种生长因子种类和多种组分和用量进行研究而获得，以无血清方式实现了胎盘间充质干细胞体外培养；在此无血清培养基体系中，间充质干细胞能够实现贴壁生长并有效地提高间充质干细胞的扩增能力，使得不含外源血清的培养体系更有利于干细胞被安全地应用于临床移植；水凝胶作为各种生长因子种类和多种组分的载体，细胞生长因子由水凝胶被缓释，持续为细胞培养提供各种生长因子种类和多种组分，保障细胞持续扩增能力。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，由以下原料组成：以DMEM培养液10-100mL为基础，还含有棉籽糖2-4mL、葡萄糖2-4mL、胰岛素0.05-0.1mL、转铁蛋白0.005-0.01mL、生长激素0.001-0.002mL、谷胱甘肽0.1-2.2mL、谷氨酰胺0.01-0.03mL、非必需氨基酸0.01-0.012mL、水凝胶6-8mL。
2.根据权利要求1所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，由以下原料组成：以DMEM培养液10mL为基础，还含有棉籽糖2mL、葡萄糖2mL、胰岛素0.05mL、转铁蛋白0.005mL、生长激素0.001mL、谷胱甘肽0.1mL、谷氨酰胺0.01mL、非必需氨基酸0.01mL、水凝胶6mL。
3.根据权利要求1所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，由以下原料组成：以DMEM培养液100mL为基础，还含有棉籽糖4mL、葡萄糖4mL、胰岛素0.1mL、转铁蛋白0.01mL、生长激素0.002mL、谷胱甘肽2.2mL、谷氨酰胺0.03mL、非必需氨基酸0.012mL、水凝胶8mL。
4.根据权利要求1所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，由以下原料组成：以DMEM培养液55mL为基础，还含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰岛素0.07mL、转铁蛋白0.008mL、生长激素0.0015mL、谷胱甘肽1.2mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.006mL、水凝胶7mL。
5.根据权利要求1所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于， 所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝 氨酸和酪氨酸组成。
6.根据权利要求1至5任一项所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，所述的水凝胶由热交联明胶制成。
7.根据权利要求6所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，所述水凝胶的含水率为75％以上且95％以下。
8.根据权利要求7所述一种水凝胶状的细胞培养配方，其特征在于，所述水凝胶的厚度为1μm以上且30mm以下。
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