CN109549018A - 一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明属于畜牧技术领域，具体涉及一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂及其制备方法。中草药益生素复合制剂按照重量份数计：包括中草药制剂30～45份、复合益生菌1.0～1.5重量份、寡糖0.3～0.8重量份、酶制剂0.2～0.5重量份。本发明制备得到的防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，能调节鸡群消化道微生态平衡，增强鸡群免疫力，减少鸡球虫病发生率，减少抗生素用量。

Description

一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂
【技术领域】
本发明涉及畜牧技术领域，具体涉及一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂。
【背景技术】
鸡球虫病是养鸡生产中最常见且危害十分严重的寄生虫病，特别是对于林下散养模式下的鸡群，发病率和死亡率高，同时影响饲料报酬，给养殖业带来巨大经济损失。目前防治鸡球虫病的主要措施是疫苗免疫接种和抗生素治疗。尽管抗生素对鸡球虫病的防治起到重要作用，但多重抗药性和交叉抗药性的产生是养殖者要面临的问题。疫苗接种在预防鸡球虫病上可以起到很好的效果，但基于球虫病的生活史特点，每个发育阶段不同，所需的疫苗种类也不同，给疫苗的研发带来巨大挑战。
中草药微生态制剂是目前养殖业疾病防治的新方向。微生态制剂如益生素可以改善动物消化道微生态平衡，补充益生素的同时可抑制致病菌群的生长繁殖和球虫卵囊的发育。中草药具有抗菌、抑菌且抗菌谱广、毒副作用小、不易产生耐药性的特点，并具有促生长、抗病毒、增强机体免疫功能的作用，是一种天然、绿色药物，对动物和人体安全性高。因此，研究能防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，减少抗生素用量和耐药菌株的产生，增强机体免疫力，具有重要意义。
【发明内容】
本发明的发明目的在于：针对上述的问题，提供一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，能调节鸡群消化道微生态平衡，增强鸡群免疫力，减少鸡球虫病发生率，减少抗生素用量。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，由下述原料制备得到，按照重量份数计：包括中草药制剂30～45份、复合益生菌1.0～1.5重量份、寡糖0.3～0.8重量份、酶制剂0.2～0.5重量份；
所述中草药制剂由以下原料按照重量份数计制得：
黑地榆10～15份、青蒿13～16份、黑槐花2～3份、生地黄5～9份、紫茎泽兰8～15份、白头翁5～8份、乌梅6～9份、诃子1～3份、仙鹤0.5～1.5份、黄芪6～12份、白术2～6份、甘草6～10份，柴胡8～12份；
所述复合益生菌由以下原料按照重量份数计制得：产朊假丝酵母菌5-8份、枯草芽孢杆菌2～3份、布氏乳杆菌2～4份、屎肠球菌2～3份；
所述寡糖为大豆低聚糖、低聚果糖、异麦芽寡糖三种原料按照质量比为1:1.5～2.5:1～1.3混合而得；
所述酶制剂是由纤维素酶、α-淀粉酶、β-葡萄糖酶三种酶按照重量比为3-5:1-2:1混合而得。
进一步说明，所述产朊假丝酵母菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将产朊假丝酵母菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖5-10g、苹果泥5-10g、香蕉泥5-10g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml，自然pH值；将菌种按照3％的量接到培养基中，置30±1℃、180r/min摇床培养24h，获得有效活菌数1.32×109-2.33×109cfu/g的产朊假丝酵母菌种子液；
所述枯草芽孢杆菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、党参多糖8.0-10.0g、苹果泥3.0-6.0g/L、香蕉泥2.0-4.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L、pH 6.8±0.2；将菌按照3％的量接到培养基中置37℃、180r/min摇床培养22-24h，获得活菌数1.25×109-1.78×109cfu/g的枯草芽孢杆菌种子液；
所述布氏乳杆菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖5.0-8.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁7.0-10.0g/L、苹果泥8.0-12.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置35±2℃、180r/min摇床培养20-25h，获得活菌数1.22×109-1.75×109cfu/g布氏乳杆菌种子液；
所述屎肠球菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、金盏花瓣汁4.0-5.5g/L、苹果泥5.0-10.0g/L、党参多糖5.0-10.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-801.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置37±2℃、50r/min、不通气摇床培养15-18h，获得活菌数0.46×109-0.78×109cfu/g的屎肠球菌种子液。
进一步说明，所述党参多糖是由以下具体操作制备得到：将党参超微粉碎后，然后加入体积3～5倍的石油醚混合，水浴50～55℃下进行回流提取1～3次、过滤后将滤渣进醇提，然后离心取沉淀，与D160大孔吸附树脂按照体积比为1:2混合，接着振荡混匀过滤后，以流速2s/ml的速度使用清水冲洗D160大孔吸附树脂，过滤，合并滤液，然后加入适量亚硒酸钠，混匀，再加入适量次磷酸钠，混匀，在60℃下水浴反应2～3小时，趁热过滤，向滤液中加入质量浓度75％乙醇进行醇提过夜，过滤后的滤液进行浓缩、喷雾干燥得到富硒的党参多糖。
进一步说明，所述金盏花瓣汁是将新鲜采摘于上午十点的金盏花的花瓣洗净后加入10-15倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成汁，然后经三层纱布过滤即可。
进一步说明，所述苹果泥是将新鲜采摘的苹果放置在催熟剂内催熟后，将苹果去皮去核，加入2-3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成泥即可；
所述香蕉泥是将香蕉去皮后，加入2-3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成泥即可。
进一步说明，所述中草药制剂具体操作如下：
第一步、按照重量份数计，分别称取黑地榆10～15份、青蒿13～16份、黑槐花2～3份、生地黄5～9份、紫茎泽兰8～15份、白头翁5～8份、乌梅6～9份、诃子1～3份、仙鹤0.5～1.5份、黄芪6～12份、白术2～6份、甘草6～10份、柴胡8～12份；
第二步、将甘蔗压榨汁、灭菌、酒精发酵、醋酸发酵、过滤灭菌得到甘蔗原醋；
第三步、将黑地榆、青蒿、黑槐花、生地黄、紫茎泽兰、白头翁、乌梅、诃子、仙鹤、黄芪、白术、柴胡经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，加入甘蔗原醋直至浸没超过混合粉末并高出1～2cm，常温下进行浸泡20～30min后，然后进行真空浓缩，得到中草药醋粉；
第四步、将甘草经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，然后与中草药醋粉混合得到中草药制剂。
进一步说明，所述甘蔗原醋的酸度为2.81～2.96g/100mL。
如上所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂的应用，所述防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂做为制备饲料添加剂的应用。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
现有技术中虽已公开寡糖、益生菌和中草药之间达到在调整肠道微生态平衡方面具有协同作用，但是并未有针对鸡禽的饲料添加剂，且并未有公开过如何能提高饲料添加剂在鸡禽肠道中能充分发挥添加剂的作用达到防治鸡球虫病的功效，并且能提高益生菌存活率提高，中草药制剂如何能充分利用？也是丞待解决的问题。本申请采用的技术方案完全能解决上述的问题。
(1)本申请人经过无数次的试验筛选研究后，选择了产朊假丝酵母菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、布氏乳杆菌种子液、屎肠球菌种子液按照本申请设计的比例混合，各个菌种各有优点，但是也有缺点，产朊假丝酵母(Candida utilis)其蛋白质和维生素B的含量都比啤酒酵母高，它能利用五碳糖和六碳糖，有氧条件下不产酒精，能发酵葡萄糖、蔗糖、棉子糖，不发酵麦芽糖、半乳糖、乳糖和蜜二糖；不分解脂肪，能同化硝酸盐。枯草芽孢杆菌生长过程中产生多种活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，枯草芽孢杆菌生长降低肠道氧量，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它致病菌生长，并且具有提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。屎肠球菌提高动物免疫力、调节肠道微生态平衡，提高营养吸收、减少腹泻率、降低死亡率等方面均有很好的效果，但是在肠道中屎肠球菌很适合生长，若是不限生长，有效量过大，将会带来多种鸡的不良并发症，因此，需要严格的控制它大量生长，经过研究发现将4种益生菌按照本申请的比例混合，具有，使得在发酵过程中，4种益生菌的有效菌含量在本申请的范围内并按照产朊假丝酵母菌5-8份、枯草芽孢杆菌2～3份、布氏乳杆菌2～4份、屎肠球菌2～3份的比例混合后能够相互协同共同摄取营养并能将营养充分吸收利用而不会出现有营养过剩的现象造成菌种过早进入衰亡期，4种菌混合同时能达到相互监督制约的作用，防止出现一种菌快速生长特别是屎肠球菌在进入鸡肠胃中特殊的是它特别适应肠胃的环境而大量快速生长，破坏肠胃中其他菌生长的环境，出现单一菌一支独大造成的鸡各种并发症的现象，降低鸡的生存率；各种益生菌直接进入鸡肠胃后在肠胃本性的抵制情况下，存活率不高，仅仅达到40-50％，本申请人研究发现需要筛选出具有普通菌种更强的活性的菌能解决这一问题，经过研究实验得出，对正交试验筛选出来的菌进行预处理，通过在培养基方向上创新预处理的菌的活力更强，产朊假丝酵母菌的预处理培养基中不仅能提高菌种营养物质，并且添加的党参多糖、苹果泥、香蕉泥的物质不能直接被菌种吸收利用的碳源氮源，存活下来的菌种为活力强的菌种，未存活下来的菌种成为菌液中的副产品会直接影响菌液的培养环境，使得菌朝向衰亡期生长，发现添加的熊果苷具有改善菌液培养环境，提高菌的活性，但是熊果苷的量过大具有一定的杀菌作用，影响菌的生长，经过研究发现培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖5-10g、苹果泥5-10g、香蕉泥5-10g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml最适合提高产朊假丝酵母菌活力的培养基；枯草芽孢杆菌的培养也是同理；布氏乳杆菌的培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖5.0-8.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁7.0-10.0g/L、苹果泥8.0-12.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L，不仅提供菌种生长的营养元素，同时添加党参多糖、苹果泥减少碳氮源能一开始筛选出活性强的菌，存活下来的菌种为活力强的菌种，随着菌种生长，发现添加金盏花瓣汁中富含的维生素C、A具有较强的抗氧化能力防止菌种衰老，苹果酸对菌具有增效作用，提高存活下来菌的有效含量，保证了预处理后的菌的有效含量；屎肠球菌的预处理培养也是同理；
(2)鸡球虫病的鸡球虫卵囊是鸡感染球虫的主要途径，而饲料、饮水、土壤都是容易传播，另外肠道细菌(例如痢疾杆菌、大肠杆菌)破坏肠粘膜的粘膜层，给球虫卵创造良好的裂繁环境；本申请中草药制剂使用的13种中草药原料复合得到，药效相辅相成，能有效的提高防治功效，但是发现现有很多的养殖户为了达到提高鸡免疫力的作用仅仅将中草药粉碎后作为饲料的添加剂，发现药效并不显著，并且对鸡粪进行检测长期食用，鸡粪中残留的中草药含量高达28～35％，说明中草药的利用率有限，经过本申请人的研究发现对中草药进行超微处理能进一步的提高鸡肠胃的消化率，并且将超微粉碎后的混合粉末进行甘蔗原醋处理后，能有效的软化中草药粉末，并能对中草药中难溶物质进行溶解出液体相，接着加入超微粉碎后的草粉末，能进一步的提高中草药制剂的适口性和促进鸡的采食量；
综上所述，本申请的技术方案中有针对性的对鸡的患鸡球虫病进行研究，筛选适合的复合益生菌，并针对各种环境的应对，创新对复合益生菌进行特殊培养基培养，并复配适合的复合益生菌的寡糖，并选择本申请中草药制剂(配方+配比+处理方式)，四者直接相互协同促进，相辅相成，缺一不可，共同作用，应用在鸡饲料中，有效的防治鸡患上鸡球虫病。
【具体实施方式】
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合实施例，进一步阐述本发明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
13种中草药简介：黑地榆是寒性的药材，可以清火解毒、凉血止痛。青蒿，中药名。为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分。遍及全国。具有清虚热，除骨蒸，解暑热，截疟，退黄之功效。常用于温邪伤阴，夜热早凉，阴虚发热，骨蒸劳热，暑邪发热，疟疾寒热，湿热黄疸等病症的治疗。黑槐花其性味苦,凉。有清热,凉血,止血的功效。含芸香甙,花蕾中含量多,开放后含量少。从干花蕾中得三萜皂甙0.4％,水解后得白桦脂醇、槐花二醇和葡萄糖、葡萄糖醛酸。生地黄性味：甘苦，凉。有滋阴清热，凉血补血的功效。紫茎泽兰辛、苦，凉。疏风解表，调经活血，解毒消肿。白头翁苦，寒。具有清热解毒，凉血止痢之功效，常用于热毒血痢，阴痒带下。乌梅为蔷薇科植物梅Prunus mume(Sieb.)Sieb.etZuce.的干燥近成熟果实。我国各地均有栽培，以长江流域以南各省最多。具有敛肺，涩肠，生津，安蛔之功效。常用于肺虚久咳，久泻久痢，虚热消渴，蛔厥呕吐腹痛。诃子为使君子科植物诃子Terminalia chebula Retz.或绒毛诃子Terminalia chebula Retz.var.tomentellaKurt.的干燥成熟果实。秋、冬二季果实成熟时采收，除去杂质，晒干。苦、酸、涩，平。涩肠敛肺，降火利咽。用于久泻久痢，便血脱肛，肺虚喘咳，久嗽不止，咽痛音哑。仙鹤为蔷薇科植物龙芽草等带有不定芽的根茎。冬、春季新株萌发前挖取根茎，去老根，留幼芽，洗净，晒干。有效成分为鹤草酚。治绦虫病。黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春、秋二季采挖，除去须根及根头，晒干。甘，温。补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎。冬季下部叶枯黄、上部叶变脆时采挖，除去泥沙，烘干或晒干，再除去须根。苦、甘，温。健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安。土白术健脾，和胃，安胎。用于脾虚食少，泄泻便溏，胎动不安。柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinenseDC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根。苦，微寒。和解表里，疏肝，升阳。用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子官脱垂，脱肛。甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根。甘，平。补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。
实施例1
一、原料组成：
一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，按照重量份数计：包括中草药制剂30份、复合益生菌1.5重量份、寡糖0.8重量份、酶制剂0.5重量份；
所述中草药制剂由以下原料按照重量份数计制得：
黑地榆10份、青蒿13份、黑槐花2份、生地黄5份、紫茎泽兰8份、白头翁5份、乌梅6份、诃子1份、仙鹤0.5份、黄芪6份、白术2份、甘草6份，柴胡8份；
所述复合益生菌由以下原料按照重量份数计制得：产朊假丝酵母菌5-8份、枯草芽孢杆菌2份、布氏乳杆菌2份、屎肠球菌2份；
所述寡糖为大豆低聚糖、低聚果糖、异麦芽寡糖三种原料按照质量比为1:1.5:1混合而得；
所述酶制剂是由纤维素酶、α-淀粉酶、β-葡萄糖酶三种酶按照重量比为3:1:1混合而得。
二、原料准备：
党参多糖是由以下具体操作制备得到：将党参超微粉碎后，然后加入体积3倍的石油醚混合，水浴50℃下进行回流提取1次、过滤后将滤渣进醇提，然后离心取沉淀，与D160大孔吸附树脂按照体积比为1:2混合，接着振荡混匀过滤后，以流速2s/ml的速度使用清水冲洗D160大孔吸附树脂，过滤，合并滤液，然后加入适量亚硒酸钠，混匀，再加入适量次磷酸钠，混匀，在60℃下水浴反应2小时，趁热过滤，向滤液中加入质量浓度75％乙醇进行醇提过夜，过滤后的滤液进行浓缩、喷雾干燥得到富硒的党参多糖。
金盏花瓣汁是将新鲜采摘于上午十点的金盏花的花瓣洗净后加入10倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000转/min的速度搅拌成汁，然后经三层纱布过滤即可。
苹果泥是将新鲜采摘的苹果放置在催熟剂内催熟后，将苹果去皮去核，加入2倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000转/min的速度搅拌成泥即可；
香蕉泥是将香蕉去皮后，加入2倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000转/min的速度搅拌成泥即可。
三、制备工艺：
将上述的原料应用在以下的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂的制备方法，具体步骤如下：
步骤一：中草药制剂制备：
1)、按照重量份数计，分别称取黑地榆10份、青蒿13份、黑槐花2份、生地黄5份、紫茎泽兰8份、白头翁5份、乌梅6份、诃子1份、仙鹤0.5份、黄芪6份、白术2份、甘草6份，柴胡8份；
2)、将甘蔗压榨汁、灭菌、酒精发酵、醋酸发酵、过滤灭菌得到甘蔗原醋；
3)、将黑地榆、青蒿、黑槐花、生地黄、紫茎泽兰、白头翁、乌梅、诃子、仙鹤、黄芪、白术、柴胡经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，加入酸度为2.81g/100mL的甘蔗原醋直至浸没超过混合粉末并高出1cm，常温下进行浸泡20min后，然后进行真空浓缩，得到中草药醋粉；
4)、将甘草经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，然后与中草药醋粉混合得到中草药制剂；
步骤二：将产朊假丝酵母菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖5g、苹果泥5g、香蕉泥5g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml，自然pH值；将菌种按照3％的量接到培养基中，置30±1℃、180r/min摇床培养24h，获得有效活菌数1.32×109-2.33×109cfu/g的产朊假丝酵母菌种子液；
步骤三：将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、党参多糖8.0g、苹果泥3.0g/L、香蕉泥2.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L、pH 6.8±0.2；将菌按照3％的量接到培养基中置37℃、180r/min摇床培养22-24h，获得活菌数1.25×109-1.78×109cfu/g的枯草芽孢杆菌种子液；
步骤四：将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖5.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁7.0g/L、苹果泥8.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置35±2℃、180r/min摇床培养20-25h，获得活菌数1.22×109-1.75×109cfu/g布氏乳杆菌种子液；
步骤五：将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、金盏花瓣汁4.0g/L、苹果泥5.0g/L、党参多糖5.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置37±2℃、50r/min、不通气摇床培养15-18h，获得活菌数0.46×109-0.78×109cfu/g的屎肠球菌种子液；
步骤六：将步骤一的中草药制剂和步骤二、三、四五分别预处理得到的菌种子液混合，在35℃下发酵3天即可。
实施例2
一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，按照重量份数计：包括中草药制剂45份、复合益生菌1.0重量份、寡糖0.3重量份、酶制剂0.2重量份；
所述中草药制剂由以下原料按照重量份数计制得：
黑地榆15份、青蒿16份、黑槐花3份、生地黄9份、紫茎泽兰15份、白头翁8份、乌梅9份、诃子3份、仙鹤1.5份、黄芪12份、白术6份、甘草10份，柴胡12份；
所述复合益生菌由以下原料按照重量份数计制得：产朊假丝酵母菌8份、枯草芽孢杆菌3份、布氏乳杆菌4份、屎肠球菌3份；
所述寡糖为大豆低聚糖、低聚果糖、异麦芽寡糖三种原料按照质量比为1:2.5:1.3混合而得；
所述酶制剂是由纤维素酶、α-淀粉酶、β-葡萄糖酶三种酶按照重量比为5:2:1混合而得。
三、原料准备：
党参多糖是由以下具体操作制备得到：将党参超微粉碎后，然后加入体积5倍的石油醚混合，水浴55℃下进行回流提取3次、过滤后将滤渣进醇提，然后离心取沉淀，与D160大孔吸附树脂按照体积比为1:2混合，接着振荡混匀过滤后，以流速2s/ml的速度使用清水冲洗D160大孔吸附树脂，过滤，合并滤液，然后加入适量亚硒酸钠，混匀，再加入适量次磷酸钠，混匀，在60℃下水浴反应3小时，趁热过滤，向滤液中加入质量浓度75％乙醇进行醇提过夜，过滤后的滤液进行浓缩、喷雾干燥得到富硒的党参多糖。
金盏花瓣汁是将新鲜采摘于上午十点的金盏花的花瓣洗净后加入15倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2500转/min的速度搅拌成汁，然后经三层纱布过滤即可。
苹果泥是将新鲜采摘的苹果放置在催熟剂内催熟后，将苹果去皮去核，加入3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2500转/min的速度搅拌成泥即可；
香蕉泥是将香蕉去皮后，加入3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2500转/min的速度搅拌成泥即可。
三、制备工艺：
将上述的原料应用在以下的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂的制备方法，具体步骤如下：
步骤一：中草药制剂制备：
1)、按照重量份数计，分别称取黑地榆15份、青蒿16份、黑槐花3份、生地黄9份、紫茎泽兰15份、白头翁8份、乌梅9份、诃子3份、仙鹤1.5份、黄芪12份、白术6份、甘草10份，柴胡12份；
2)、将甘蔗压榨汁、灭菌、酒精发酵、醋酸发酵、过滤灭菌得到甘蔗原醋；
3)、将黑地榆、青蒿、黑槐花、生地黄、紫茎泽兰、白头翁、乌梅、诃子、仙鹤、黄芪、白术、柴胡经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，加入酸度为2.96g/100mL的甘蔗原醋直至浸没超过混合粉末并高出2cm，常温下进行浸泡30min后，然后进行真空浓缩，得到中草药醋粉；
4)、将甘草经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，然后与中草药醋粉混合得到中草药制剂；
步骤二：将产朊假丝酵母菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖10g、苹果泥10g、香蕉泥10g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml，自然pH值；将菌种按照3％的量接到培养基中，置30±1℃、180r/min摇床培养24h，获得有效活菌数1.32×109-2.33×109cfu/g的产朊假丝酵母菌种子液；
步骤三：将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、党参多糖10.0g、苹果泥6.0g/L、香蕉泥4.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L、pH 6.8±0.2；将菌按照3％的量接到培养基中置37℃、180r/min摇床培养22-24h，获得活菌数1.25×109-1.78×109cfu/g的枯草芽孢杆菌种子液；
步骤四：将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖8.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁10.0g/L、苹果泥12.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置35±2℃、180r/min摇床培养20-25h，获得活菌数1.22×109-1.75×109cfu/g布氏乳杆菌种子液；
步骤五：将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、金盏花瓣汁5.5g/L、苹果泥10.0g/L、党参多糖10.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置37±2℃、50r/min、不通气摇床培养15-18h，获得活菌数0.46×109-0.78×109cfu/g的屎肠球菌种子液；
步骤六：将步骤一的中草药制剂和步骤二、三、四五分别预处理得到的菌种子液混合，在35℃下发酵5天即可。
实施例3
一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，按照重量份数计：包括中草药制剂38份、复合益生菌1.2重量份、寡糖0.6重量份、酶制剂0.3重量份；
所述中草药制剂由以下原料按照重量份数计制得：
黑地榆13份、青蒿14份、黑槐花2.5份、生地黄7份、紫茎泽兰11份、白头翁7份、乌梅7份、诃子2份、仙鹤1.0份、黄芪8份、白术5份、甘草8份，柴胡10份；
所述复合益生菌由以下原料按照重量份数计制得：产朊假丝酵母菌6份、枯草芽孢杆菌2.7份、布氏乳杆菌3.2份、屎肠球菌2.5份；
所述寡糖为大豆低聚糖、低聚果糖、异麦芽寡糖三种原料按照质量比为1:2:1.1混合而得；
所述酶制剂是由纤维素酶、α-淀粉酶、β-葡萄糖酶三种酶按照重量比为4:1.2:1混合而得。
四、原料准备：
党参多糖是由以下具体操作制备得到：将党参超微粉碎后，然后加入体积4倍的石油醚混合，水浴53℃下进行回流提取2次、过滤后将滤渣进醇提，然后离心取沉淀，与D160大孔吸附树脂按照体积比为1:2混合，接着振荡混匀过滤后，以流速2s/ml的速度使用清水冲洗D160大孔吸附树脂，过滤，合并滤液，然后加入适量亚硒酸钠，混匀，再加入适量次磷酸钠，混匀，在60℃下水浴反应2.5小时，趁热过滤，向滤液中加入质量浓度75％乙醇进行醇提过夜，过滤后的滤液进行浓缩、喷雾干燥得到富硒的党参多糖。
金盏花瓣汁是将新鲜采摘于上午十点的金盏花的花瓣洗净后加入12倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2200转/min的速度搅拌成汁，然后经三层纱布过滤即可。
苹果泥是将新鲜采摘的苹果放置在催熟剂内催熟后，将苹果去皮去核，加入2倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2300转/min的速度搅拌成泥即可；
香蕉泥是将香蕉去皮后，加入3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2400转/min的速度搅拌成泥即可。
三、制备工艺：
将上述的原料应用在以下的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂的制备方法，具体步骤如下：
步骤一：中草药制剂制备：
1)、按照重量份数计，分别称取黑地榆13份、青蒿14份、黑槐花2.5份、生地黄7份、紫茎泽兰11份、白头翁7份、乌梅7份、诃子2份、仙鹤1.0份、黄芪8份、白术5份、甘草8份，柴胡10份；
2)、将甘蔗压榨汁、灭菌、酒精发酵、醋酸发酵、过滤灭菌得到甘蔗原醋；
3)、将黑地榆、青蒿、黑槐花、生地黄、紫茎泽兰、白头翁、乌梅、诃子、仙鹤、黄芪、白术、柴胡经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，加入酸度为2.90g/100mL的甘蔗原醋直至浸没超过混合粉末并高出1.5cm，常温下进行浸泡27min后，然后进行真空浓缩，得到中草药醋粉；
4)、将甘草经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，然后与中草药醋粉混合得到中草药制剂；
步骤二：将产朊假丝酵母菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖8g、苹果泥7g、香蕉泥6g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml，自然pH值；将菌种按照3％的量接到培养基中，置30±1℃、180r/min摇床培养24h，获得有效活菌数1.32×109-2.33×109cfu/g的产朊假丝酵母菌种子液；
步骤三：将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、党参多糖9.0g、苹果泥5.0g/L、香蕉泥3.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L、pH 6.8±0.2；将菌按照3％的量接到培养基中置37℃、180r/min摇床培养22-24h，获得活菌数1.25×109-1.78×109cfu/g的枯草芽孢杆菌种子液；
步骤四：将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖6.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁9.0g/L、苹果泥10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置35±2℃、180r/min摇床培养20-25h，获得活菌数1.22×109-1.75×109cfu/g布氏乳杆菌种子液；
步骤五：将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、金盏花瓣汁5.0g/L、苹果泥7.0g/L、党参多糖8.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置37±2℃、50r/min、不通气摇床培养15-18h，获得活菌数0.46×109-0.78×109cfu/g的屎肠球菌种子液；
步骤六：将步骤一的中草药制剂和步骤二、三、四五分别预处理得到的菌种子液混合，在35℃下发酵4天即可。
验证一：
1.试验方法
分别将实施例1-3制备得到的中草药益生素复合制剂作为鸡饲料的添加剂，添加量为饲料重量的分别为1％、1.5％、0.5％；
将210只14日龄SPF雏鸡随机分成7组，每组30只鸡。按照表1进行试验分组和处理，试验7d后统计鸡相对增重率、存活率、粪便中的卵囊值。
表1试验分组及处理
3.结果
3.1治疗试验结果
表2中草药益生素复合制剂对鸡生长的影响
组别 鸡数 相对增重率％ 存活率(％) 卵囊值
1 30 100 100 0
2 30 68.5 90.5 45
3 30 92.1 100 9
4 30 89.4 100 12
5 30 97.8 100 3
6 30 98.9 98 1
7 30 91.7 95 15
由表2可知，实施例3(中草药制剂含量低剂量组)、实施例1(中草药制剂含量中剂量组)、实施例2(中草药制剂含量高剂量组)制备得到的中草药益生素复合制剂组的相对增重率比阳性对照分别提高30.5％、42.77％、44.38％，成活率分别比阳性对照组提高10.5％、10.5％、8.29％；组7相对增重率和存活率分别比阳性对照提高33.89％、4.97％。且实施例1(中草药制剂含量中剂量组)、实施例2(中草药制剂含量高剂量组)中草药益生素复合制剂可降低粪便中的卵囊数。综上可知，选用实施例1(中草药制剂含量中剂量组)作为饲料添加剂，对防治鸡球虫病的效果最佳。
另外发现通过实施例1-3制备得到的中草药益生菌制剂作为鸡饲料添加剂对鸡的生产性能提高42.77％-45.26％。
试验证明二：
1、试验建立：
1.1人工模拟胃液的制备：
盐酸1.64mL，胃蛋白酶1g，加水定容至100mL，pH为1.2，过滤除菌。
1.2微囊耐胃酸试验
对比例1：原料组成与实施例3基本相同，制备工艺基本相同，不同点是：步骤一中，中草药制剂是将所有原料混合超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末即可。
对比例2：原料组成与实施例3基本相同，制备工艺基本相同，不同点是：步骤一中，中草药制剂按照重量份数计，包括黑地榆13份、青蒿14份、黑槐花2.5份、生地黄7份、甘草8份。
对比例3：原料组成与实施例3基本相同，制备工艺基本相同，不同点是：步骤一中，中草药制剂按照重量份数计，包括紫茎泽兰11份、白头翁7份、乌梅7份、诃子2份、仙鹤1.0份、黄芪8份、白术5份、甘草8份。
对比例4：原料组成与实施例3基本相同，制备工艺基本相同，不同点是：步骤一中，中草药制剂按照重量份数计，包括黑地榆13份、青蒿14份、乌梅7份、诃子2份、仙鹤1.0份、黄芪8份、白术5份、甘草8份，柴胡10份。
对比例5：原料组成与实施例3基本相同，制备工艺基本相同，不同点是：步骤一中，中草药制剂按照重量份数计，包括黑槐花2.5份、生地黄7份、紫茎泽兰11份、白头翁7份、黄芪8份、白术5份、甘草8份，柴胡10份。
空白对照：基础日粮。
1材料与方法
大肠杆菌标准株来源于中国兽药监察所。参照LB液体培养基说明书配置培养液，按照1％的量接入大肠杆菌，37℃度摇床培养24h。
将180只1日龄土鸡随机分成6组，每组30只，用不添加抗微生物药物和促生长添加剂饲喂10d后分组，分别将实施例1-3、对比例1-5制备得到的中草药制剂分别添加在基础日粮中，添加量为基础日粮的3％分别进行分组饲喂，并且均进行，攻菌处理。
试验按照大肠杆菌菌液1mL(1×106cfu/g)的量经鸡胸注射接种20日龄健康鸡，接种24h后统计鸡的死亡数、死亡率(％)。
2结果：
表3接种大肠杆菌死亡情况
组别 数量/羽 死亡数 死亡率/％
实施例1 30 0 0
实施例2 30 0 0
实施例3 30 0 0
对比例1 30 12 40.00
对比例2 30 11 36.66
对比例3 30 5 16.66
对比例4 30 8 26.66
对比例5 30 10 33.33
空白对照 30 28 93.33
由上表可知，本申请对中草药制剂的制备方案和复配的13种中草药，共同作用能减少大肠杆菌死亡率。
试验证明三：
1.试验方法
1.1设立对照组
对照组1：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是步骤二产朊假丝酵母菌预处理培养基中党参多糖8g、苹果泥7g、香蕉泥6g、使用21g葡萄糖替换并且未添加熊果苷；产朊假丝酵母菌液，有效活菌数1.17×109cfu/g。
对照组2：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是步骤三将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、葡萄糖17.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L，活菌数1.81×109-2.24×109cfu/g。
对照组3：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是步骤五，将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、葡萄糖15.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L，活菌数0.90×109-0.96×109cfu/g。
对照组4：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是，步骤四将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、酵母粉4.0g/L、葡萄糖21.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2，活菌数1.12×109-1.28×109cfu/g。
对照组5：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是步骤二-步骤五菌种均未进行预处理。
对照组6：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是第步骤二-步骤三步菌种均未进行预处理。
对照组7：原料组成与实施例3相同，制备工艺基本相同，不同点是第步骤四-步骤五步菌种均未进行预处理。
1.2将240只健康的14日龄土鸡随机分成8组，每组30只。
将实施例3(CK)与对照组1-7制备得到的中草药益生素复合制剂添加是基础日粮1％添加成饲料喂养；饲养条件相同，将11组鸡饲喂21d后称重，取脾脏和法氏囊，分别计算脾脏指数和法氏囊指数，脾脏指数＝脾脏重(mg)/体重(g)，法氏囊指数＝法氏囊重(mg)/体重(g)，并采血，进行以下试验。
1.3鸡外周血中IgG、IL-2测定：
采鸡的外周血，37℃放置2h，4℃放置4～6h后取血清，ELISA方法测定血清中的IgG、IL-2浓度。
1.4鸡外周血中CD4、CD8T淋巴细胞数的测定：
采鸡的外周血，分离外周血淋巴细胞，流式细胞仪测定外周血中CD4、CD8T淋巴细胞数。
试验结果见下表：
表4
如表4可以看出，针对菌种组合、菌种是否经过活化预处理、预处理使用的培养基配方、均对免疫力性能有影响。从高至低排序为：菌种组合＞菌种是否经过预处理＞预处理使用的培养基配方。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (8)

1.一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于：由下述原料制备得到，按照重量份数计：包括中草药制剂30～45份、复合益生菌1.0～1.5重量份、寡糖0.3～0.8重量份、酶制剂0.2～0.5重量份；
所述中草药制剂由以下原料按照重量份数计制得：
黑地榆10～15份、青蒿13～16份、黑槐花2～3份、生地黄5～9份、紫茎泽兰8～15份、白头翁5～8份、乌梅6～9份、诃子1～3份、仙鹤0.5～1.5份、黄芪6～12份、白术2～6份、甘草6～10份，柴胡8～12份；
所述复合益生菌由以下原料按照重量份数计制得：产朊假丝酵母菌5-8份、枯草芽孢杆菌2～3份、布氏乳杆菌2～4份、屎肠球菌2～3份；
所述寡糖为大豆低聚糖、低聚果糖、异麦芽寡糖三种原料按照质量比为1:1.5～2.5:1～1.3混合而得；
所述酶制剂是由纤维素酶、α-淀粉酶、β-葡萄糖酶三种酶按照重量比为3-5:1-2:1混合而得。
2.根据权利要求1所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，
所述产朊假丝酵母菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将产朊假丝酵母菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10g、党参多糖5-10g、苹果泥5-10g、香蕉泥5-10g、KH2PO4 2g、MgSO4.7H2O 0.3g、熊果苷0.5g、蒸馏水1000ml，自然pH值；将菌种按照3％的量接到培养基中，置30±1℃、180r/min摇床培养24h，获得有效活菌数1.32×109-2.33×109cfu/g的产朊假丝酵母菌种子液；
所述枯草芽孢杆菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将枯草芽孢杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为胰蛋白胨10.0g/L、党参多糖8.0-10.0g、苹果泥3.0-6.0g/L、香蕉泥2.0-4.0g/L、酵母提取物5.0g/L、氯化钠10.0g/L、熊果苷0.5g/L、琼脂1.0g/L、pH 6.8±0.2；将菌按照3％的量接到培养基中置37℃、180r/min摇床培养22-24h，获得活菌数1.25×109-1.78×109cfu/g的枯草芽孢杆菌种子液；
所述布氏乳杆菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将布氏乳杆菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、党参多糖5.0-8.0g/L、酵母粉4.0g/L、金盏花瓣汁7.0-10.0g/L、苹果泥8.0-12.0g/L、葡萄糖5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置35±2℃、180r/min摇床培养20-25h，获得活菌数1.22×109-1.75×109cfu/g布氏乳杆菌种子液；
所述屎肠球菌在使用前还经过预处理，具体操作是：将屎肠球菌菌种加入活化培养基中进行活化培养，培养基的配方为培养基的配方为蛋白胨10.0g/L、金盏花瓣汁4.0-5.5g/L、苹果泥5.0-10.0g/L、党参多糖5.0-10.0/Lg、酵母浸粉10.0g/L、甘油磷酸钠10.0g/L、乳糖1.0g/L、琼脂10.0g/L、乙酸钠5.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温-80 1.0g/L、pH 5.7±0.2；将菌种按照3％的量接到培养基中置37±2℃、50r/min、不通气摇床培养15-18h，获得活菌数0.46×109-0.78×109cfu/g的屎肠球菌种子液。
3.根据权利要求2所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，所述党参多糖是由以下具体操作制备得到：将党参超微粉碎后，然后加入体积3～5倍的石油醚混合，水浴50～55℃下进行回流提取1～3次、过滤后将滤渣进醇提，然后离心取沉淀，与D160大孔吸附树脂按照体积比为1:2混合，接着振荡混匀过滤后，以流速2s/ml的速度使用清水冲洗D160大孔吸附树脂，过滤，合并滤液，然后加入适量亚硒酸钠，混匀，再加入适量次磷酸钠，混匀，在60℃下水浴反应2～3小时，趁热过滤，向滤液中加入质量浓度75％乙醇进行醇提过夜，过滤后的滤液进行浓缩、喷雾干燥得到富硒的党参多糖。
4.根据权利要求2所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，所述金盏花瓣汁是将新鲜采摘于上午十点的金盏花的花瓣洗净后加入10-15倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成汁，然后经三层纱布过滤即可。
5.根据权利要求2所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，所述苹果泥是将新鲜采摘的苹果放置在催熟剂内催熟后，将苹果去皮去核，加入2-3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成泥即可；
所述香蕉泥是将香蕉去皮后，加入2-3倍重量的去离子水，在搅拌机中以转数为2000-2500转/min的速度搅拌成泥即可。
6.根据权利要求1所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，所述中草药制剂具体操作如下：
第一步、按照重量份数计，分别称取黑地榆10～15份、青蒿13～16份、黑槐花2～3份、生地黄5～9份、紫茎泽兰8～15份、白头翁5～8份、乌梅6～9份、诃子1～3份、仙鹤0.5～1.5份、黄芪6～12份、白术2～6份、甘草6～10份、柴胡8～12份；
第二步、将甘蔗压榨汁、灭菌、酒精发酵、醋酸发酵、过滤灭菌得到甘蔗原醋；
第三步、将黑地榆、青蒿、黑槐花、生地黄、紫茎泽兰、白头翁、乌梅、诃子、仙鹤、黄芪、白术、柴胡经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，加入甘蔗原醋直至浸没超过混合粉末并高出1～2cm，常温下进行浸泡20～30min后，然后进行真空浓缩，得到中草药醋粉；
第四步、将甘草经过超微粉碎后得到≤5μm粒径的混合粉末，然后与中草药醋粉混合得到中草药制剂。
7.根据权利要求6所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂，其特征在于，所述甘蔗原醋的酸度为2.81～2.96g/100mL。
8.一种如权利要求1-7任意一项所述的一种防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂的应用，其特征在于，所述防治鸡球虫病的中草药益生素复合制剂做为制备饲料添加剂的应用。
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