CN109512972A - 一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途 - Google Patents

一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明属于一种中药配方技术领域，具体是涉及到一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途，其原料包括如下重量份数组分：柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草，本发明使肝气得疏，脾肾得补，瘀毒得消，抑郁得除。全方寓攻于补，补中有消，攻补兼顾，标本兼治。

Description

一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途
技术领域
本发明属于一种中药配方技术领域，具体是涉及到一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途。
背景技术
乳腺癌合并抑郁症研究进展，黄立芳，芦文娟，辽宁中医药大学学报，第19卷第12期，报道了国内外研究由于调查方法、调查人群等的不同，乳腺癌患者抑郁症患病率为10-63.5％不等，但明显高于健康人群的抑郁症患病率。其常用的治疗方法为西药治疗，心理治疗，中药治疗，针灸治疗。
目前，西医治疗BCRD策略是在诊断确定后，再给予抗抑郁药，而没有考虑乳腺癌和抑郁症的关联性发生机制，属于被动治疗，存在诸多缺点。如常用的三环类抗抑郁药(TCA)，因其作用于多种受体，存在心率失常、高血压、抗胆碱作用等不良反应，加上癌症本身所致的躯体不适，癌症治疗过程中所致的胃肠反应等，使患者的服药依从性大大降低，不仅使抑郁症得不到充分治疗，还会增加患者的心理负担，进一步加大治疗难度。中医药立足于整体，辨证论治，对于BCRD的全程管理与治疗具有独特疗效。因此，把握BCRD的中医病机理论，进行紧扣其关联性发病机制的理法方药研究，对于BCRD的防治具有重要的科学价值与临床意义。
乳腺癌属中医“乳岩”的范畴，七情内伤是其发病的重要因素，肝为其发病的始动部位，若肝失疏泄，情志不遂，气机失调，气血运行受阻，则气血瘀滞，乳络不通，日久酿毒，渐生乳岩。而气滞血瘀，瘀毒阻脑，清窍失养，神明不用，情志异常，则发为郁证。抑郁症属中医“郁证”的范畴，病始在肝，与脑相关。情志失调是其发病的重要因素。情志以血为本，以气为用，因情而郁，气血失调是其病机关键。若肝失疏泄，气滞血瘀，瘀血内阻，神明不用，则精神抑郁。中医脑神理论认为“脑为元神之府”，脑主神明而总统诸神。若气血失调，元神失养，神机运转不利，就会导致反应迟钝、精神萎靡等抑郁症状的产生。而抑郁日久，肝郁不舒，气滞血瘀更甚，则易诱发乳岩的产生。
由以上分析可知，情志不畅为乳岩和郁证的共同发病因素。乳岩可并发郁证，郁证又可诱发乳岩和(或)加重其病情的进展。因此，BCRD属中医“乳岩”合并“郁证”的范畴，情志失调是其发病的主要因素，与肝脾肾脑密切相关。BCRD总属本虚标实之证，正气亏虚为本，瘀毒内结为标，因虚致实，虚实相兼。其病机关键可用“虚、瘀、毒、郁”来概括。故BCRD中药的辅助治疗当以“疏肝解郁、健脾补肾、化瘀解毒”为法。
逍遥散加味对乳腺癌术后化疗患者抑郁症的影响，孙士玲等，中华中医药杂志(原中国医药学报)2016年4月第31卷第4期，公开了多种用于乳腺癌术后化疗患者抑郁症患者治疗的中药。其虽然基于逍遥散方以柴胡9g、当归6g、白芍12g、白术15g、茯苓15g、生姜3片、大枣3枚、薄荷6g、炙甘草9g、熟地黄15g、女贞子15g、墨旱莲15g、泽泻9g为基础随症加减，即在疏肝健脾药物上加用了滋补肝肾之品。但主方未考虑到BCRD“瘀、毒”的中医标实病机，即使随症加减药物较多，不乏活血软坚之品，但没有形成统一的证治标准，不利于中药新药的研发。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物、制备方法和用途。
本发明的内容包括一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其原料包括如下重量份数组分：柴胡2-5份、当归2-5份、白芍2-5份、茯苓2-5份、白术2-5份、枸杞1-3份、菟丝子1-3份、夏枯草3-10份、重楼2-5份、人参1-3份、姜黄2-5份、贯叶连翘0.5-2份和炙甘草0.5-2份。
优选的，所述防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其原料包括如下重量份数组分：柴胡3份、当归3份、白芍3份、茯苓3份、白术3份、枸杞2份、菟丝子2份、夏枯草5份、重楼3份、人参2份、姜黄3份、贯叶连翘1份、炙甘草1份。
本发明还提供一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：将柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草混合，加水煎煮，浓缩，优选的，所述浓缩后的药量浓度为0.975g/ml。制得防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物。
优选的，本发明的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)洗净所有药材；
(2)将当归、白术、白芍分别用水浸泡后，提取收集挥发油，收集滤渣及水溶液；
(3)将步骤(2)所得的挥发油用β-环糊精制成包合物，制成细粉；
(4)将步骤(2)所得的滤渣加水煎煮，过滤，收集滤液得滤液a，取滤液a与步骤(2)所得的水溶液合并，得合并液；
(5)将柴胡、人参、炙甘草、姜黄和枸杞，分别或混合后用乙醇提取，过滤，取滤液合并得滤液b，将滤液b减压回收乙醇，浓缩成浸膏；
(6)将步骤(5)中的滤渣与夏枯草、贯叶连翘、重楼、茯苓、菟丝子五味药混匀，加水煎煮，过滤，取滤液c，将滤液c与步骤(4)所得的合并液混匀后，减压浓缩成浸膏；
(7)将步骤(5)所得浸膏和步骤(6)的浸膏合并、混匀，加入步骤(3)所得的包合物，混匀，即得。
本发明还提供一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物在治疗乳腺癌合并抑郁症方面的用途。
本发明的有益效果是，本发明全方由柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草组成。枸杞、菟丝子补肾益精，夏枯草、重楼化瘀解毒，而人参、姜黄、贯叶连翘三味具有理气活血，宁心安神之功。姜黄活血化瘀、行气止痛，善破肝脾二经之血瘀气结，主血瘀气滞诸证；贯叶连翘疏肝解郁，取散诸结之意；人参大补元气、安神益智。而以逍遥散为主方用于治疗乳腺癌和抑郁症的文献报道众多，明代张介宾在《景岳全书》“乳痈乳岩”中也指出：“乳岩属肝脾二脏郁怒，气血亏损，故初起小核结于乳内，肉色如故……用加味逍遥散，多自消散”。实验研究发现，逍遥散提取液可通过阻断乳腺癌细胞MCF-7 DNA合成而抑制乳腺癌细胞体外增殖。以上诸药合用,配伍精当。使肝气得疏，脾肾得补，瘀毒得消，抑郁得除。全方寓攻于补，补中有消，攻补兼顾，标本兼治。
本发明为逍遥抗癌解郁方，可明显改善BCRD小鼠的一般状况，上调单胺类神经递质高分泌，辅助化疗药物减低肿瘤标志物表达和抗肿瘤生长，其作用可能与保护海马损伤和逆转HPA轴功能亢进，改变NR2A、NR2B、CaMKⅡ和CREB基因表达有关。
本发明是基于BCRD“虚、瘀、毒、郁”的中医病机关键，在“疏肝解郁、健脾补肾、化瘀解毒”治法指导下，基于经典名方逍遥散和抗抑郁六类中药百事乐方的临床疗效化裁而成。目前虽然以逍遥散为主方用于治疗乳腺癌后抑郁的文献报道较多，但均是以逍遥散为基础方，对BCRD的中医病机实质认识不足，如大多未考虑到肾虚病机，或只仅仅加上诸如桃仁、红花的活血化瘀之品。现有研究表明，加味逍遥丸(柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、栀子、牡丹皮、甘草)治疗乳腺癌术后伴有抑郁的疗效与提高抑郁状态下血浆5-HT、DA及NE表达水平有关(胡鑫，李凤珍，尚亚平，等，长春中医药大学学报，2018，4)。逍遥益生颗粒柴胡、白芍、当归、白术、茯苓、薄荷、半枝莲、守宫)能在一定程度上缓解乳腺癌相关性抑郁患者抑郁情绪，与降低肿瘤患者血清IGF-1及8-OHdG水平有关(康娜，北京中医药大学硕士学位论文，2014，5)。
本发明中柴胡可影响单胺类神经递质、脑源性神经营养因子(BDNF)和海马受损而起抗抑郁作用；柴胡提取物Z-isochaihulactone可以诱导癌细胞的形态学改变，抑制癌细胞增殖；柴胡皂苷d可以通过诱导癌细胞中P53的活性，激活Fas/FasL凋亡系统以抑制癌细胞的增殖能力。当归可增强人体免疫力，保肝强肾健体。白芍有效成分为白芍总苷，具有保护肝脏、止痛及抗炎等作用。茯苓可抗炎、保肝、镇静，增强免疫功能。白术中的挥发油、多糖、白术内酯是其发挥诸多药理作用的主要物质基础，白术对免疫系统及神经系统皆有调节作用，临床上可用于免疫力低下、慢性消耗性疾病及癌症的辅助治疗。枸杞含有多种活性成分，具有提高机体免疫功能、抗氧化活性、和抗肿瘤活性等多种功效。菟丝子补肾、调节免疫、保肝等作用确切，可提高巨噬细胞吞噬功能，促进淋巴细胞增殖反应，诱导白介素产生。夏枯草中主要含有萜类、酚酸类、黄酮类、甾醇类等成分，具有抗菌消炎、免疫抑制、清除自由基及抗氧化、抗肿瘤、抑制病毒生长等多种药理作用。重楼在抗肿瘤、抑菌消炎、抗病毒、止痛镇静、免疫调节、肝肾保护等方面具有很好的活性。炙法会影响甘草的有机成分及无机微量元素，能够改变主要成分之间的比例，炙甘草有镇痛、抗炎、调节免疫等药理作用。方中贯叶连翘具有良好的抗抑郁作用，可能通过调节单胺递质发挥抗抑郁作用。姜黄有效成分姜黄素可以上调应激大鼠海马和皮层的脑源性神经营养因子(BDNF)和环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的表达。人参皂苷可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴功能，进而提高脑组织BDNF表达水平起到抗抑郁的作用。本方中各药通过多种有效成分合理、有机的组合，多途径地作用于机体，促使其最大限度的发挥抗癌解郁的功效。
附图说明
图1为为各组小鼠海马DG区病理染色结果(×400)。
注：A.空白组，B.BCRD组，C.实施例1组，D.化疗联合抗抑郁组，E.复方中药组，F.实施例3组。
图2为各组小鼠海马CA3区病理染色结果(×400)。
注：A.空白组，B.BCRD组，C.实施例1组，D.化疗联合抗抑郁组，E.复方中药组，F.实施例3组。
图3为各组小鼠乳腺肿瘤肉眼形态特征。
注：A.BCRD组，B.实施例1组，C.化疗联合抗抑郁组，D.复方中药组，E.实施例3组。
图4为各组小鼠乳腺肿瘤病理染色结果(1：×40；2：×400)。
注：A.BCRD组，B.实施例1组，C.化疗联合抗抑郁组，D.复方中药组，E.实施例3组。
图5为各组小鼠肾上腺病理染色结果
注：A.空白组，B.BCRD组，C.实施例1组，D.化疗联合抗抑郁组，E.复方中药组，F.实施例3组。
图6为NR2A、NR2B、CERB和CaMKⅡ扩增曲线(左)与溶解曲线(右)。
图7为乳腺癌NR2A和NR2B扩增曲线(左)与溶解曲线(右)。
具体实施方式
实施例1
本发明的制备方法，包括如下步骤：将柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草混合，其中，各组分的重量份数如下：柴胡3份、当归3份、白芍3份、茯苓3份、白术3份、枸杞2份、菟丝子2份、夏枯草5份、重楼3份、人参2份、姜黄3份、贯叶连翘1份、炙甘草1份。加水煎煮，浓缩，制得防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物。
实施例2
本发明的制备方法，包括如下步骤：将柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草混合，其中，各组分的重量份数如下：柴胡5份、当归2份、白芍5份、茯苓2份、白术2份、枸杞3份、菟丝子1份、夏枯草10份、重楼2份、人参1份、姜黄2份、贯叶连翘0.5份和炙甘草2份。加水煎煮，浓缩，制得防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物。
实施例3
本发明所述防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其原料包括如下重量份数组分：柴胡3份、当归3份、白芍3份、茯苓3份、白术3份、枸杞2份、菟丝子2份、夏枯草5份、重楼3份、人参2份、姜黄3份、贯叶连翘1份、炙甘草1份。
(1)洗净所有药材；
(2)将当归、白术、白芍分别用水浸泡后，提取收集挥发油，收集滤渣及水溶液；
(3)将步骤(2)所得的挥发油用β-环糊精制成包合物，制成细粉；
(4)将步骤(2)所得的滤渣加水煎煮，过滤，收集滤液得滤液a，取滤液a与步骤(2)所得的水溶液合并，得合并液；
(5)将柴胡、人参、炙甘草、姜黄和枸杞，分别或混合后用乙醇提取，过滤，取滤液合并得滤液b，将滤液b减压回收乙醇，浓缩成浸膏；
(6)将步骤(5)中的滤渣与夏枯草、贯叶连翘、重楼、茯苓、菟丝子五味药混匀，加水煎煮，过滤，取滤液c，将滤液c与步骤(4)所得的合并液混匀后，减压浓缩成浸膏；
(7)将步骤(5)所得浸膏和步骤(6)的浸膏合并、混匀，加入步骤(3)所得的包合物，混匀，即得。
实施例4
1实验材料
1.1实验动物
1.2实验药物
逍遥抗癌解郁方(枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、姜黄、贯叶连翘、人参等)，药材原材料均购于湖南中医药大学第一附属医院，经水煎浓缩成生药量浓度为0.975g/ml。
盐酸氟西汀(百忧解)，购自湖南中医药大学第一附属医院，批准号：J20130010，规格20mg/颗，法国patheon france。
注射用紫杉醇脂质体，购自湖南省肿瘤医院，规格30mg/支，批准号：H20051076。
1.3主要试剂
1.4主要仪器
2实验方法
2.1 4T1炎性乳腺癌细胞的培养
4T1炎性乳腺癌元代细胞株购买于上海科学院细胞库，在显微镜下观察细胞生长状态，用0.22μm过滤器过滤细胞，弃掉培养液，加入适量PBS轻轻吹打细胞，1500rpm,8min离心，加入含有RPMI培养液(内含10％胎牛血清，1％双抗)10ml，转移至25cm2培养瓶中，放入37℃恒温培养箱中，培养2天后，观察细胞生长状态，若长至80％-90％，弃去培养液，用适量PBS洗1次，弃PBS，加入2ml胰酶，使其与培养板细胞充分接触，培养箱中消化2min后，显微镜下观察细胞消化情况，若大部分细胞未变圆，用移液枪轻轻吹打细胞，使80％-90％细胞消化，加入2倍胰酶体积的培养液终止消化，将细胞转移至5ml离心管中，1500rpm，8min，4℃离心，弃去培养液，加入适量PBS轻轻吹打细胞，使其完全成细胞悬浮状态，1500rpm，8min，4℃离心，弃PBS，加入培养液，将细胞浓度调整为106个/ml，置于培养箱中培养，待细胞生长至对数期时，将细胞消化收集，用PBS将细胞吹打成单个悬浮状态，并将其浓度调整为107个/ml。
2.2 BCRD动物模型的制备
以BALB/C小鼠为造模对象，在其腋下接种0.1ml的107个/ml 4T1炎性乳腺癌细胞，用以制备乳腺癌小鼠模型，接种7天后，观察其是否成瘤。在乳腺癌小鼠成功造模后，采用背部皮下注射皮质酮混悬液(每300mg皮质酮用5ml DMSO预溶解，超声将皮质酮在DMSO中充分溶解之后，加入95ml生理盐水)，小鼠等效剂量为30mg/Kg，给药体积为20ml/Kg，连续注射21天，用以制备抑郁症小鼠模型，而BCRD小鼠模型则在接种4T1炎性乳腺癌细胞7天后，在其背部皮下注射皮质酮混悬液，连续注射21天。
2.3动物分组与给药
小鼠适应性喂养5天后，将小鼠按糖水消耗量随机分为空白组、模型组、化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组，共6组，每组10只。
复方中药组的原料配方为柴胡3份、当归3份、白芍3份、茯苓3份、白术3份、炙甘草1份。将上述原料加水煎煮，浓缩，制得。
化疗联合抗抑郁药组为同时进行化疗和抗抑郁治疗。化疗组为予注射用紫杉醇脂质体(每30mg注射用紫杉醇脂质体中加入5ml的5％葡萄糖，振荡使其充分溶解后，再加入25ml的5％葡萄糖，制成1mg/ml的混合液，现配现用)，小鼠体重等效剂量为20mg/Kg，注射体积为20ml/Kg，腹腔注射，每周一次；抗抑郁为给予氟西汀(每20mg氟西汀胶囊溶解于154ml的蒸馏水中，充分震荡，使其成0.13mg/ml的混悬液，4℃低温保存备用)，小鼠等效剂量为19.5mg/Kg，给药体积为20ml/Kg，灌胃给药，每天一次；
复方中药组、实施例1组、实施例3组分别给予相应药物，小鼠等效剂量为19.5g/Kg，给药体积为20ml/Kg，灌胃给药，每天一次。
空白组和BCRD组均灌胃给予等体积蒸馏水。各组均于相应处理3周后进行指标检测。
2.4统计学处理
使用SPSS 17.0软件对数据进行统计，计量数据使用表示。组间差异比较采用单因素方差分析，两两比较方差齐时采用LSD检验法，方差不齐时采用Dunnett’s T3进行两两比较。
3实验结果
3.1乳腺肿瘤瘤重、瘤体积及抑瘤率结果
与BCRD模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组乳腺肿瘤瘤重和瘤体积明显下降，差异具有统计学意义(P﹤0.01或P<0.05)，且各组抑瘤率均大于50％，中药组差异无统计学意义提示。复方中药逍遥抗癌解郁方可在一定程度上辅助化疗药物抑制肿瘤增殖。结果见表1。
表1逍遥抗癌解郁方对小鼠乳腺肿瘤瘤重、抑瘤率及瘤体积的影响
注:##P﹤0.01，#<0.05与模型组比较
3.2行为学变化
3.2.1逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠快感缺乏的影响
与空白组比较，造模前和造模第一周BCRD小鼠糖水消耗无统计学意义，造模第二周和第三周BCRD模型组糖水消耗明显下降(P﹤0.01或P﹤0.05)，提示造模成功，且随着造模时间延长，糖水消耗下降程度更低；与模型组比较，造模第二周和第三周化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组的糖水消耗明显上升(P﹤0.05)，第二周化疗药物组糖水消耗无统计学意义。提示，BCRD小鼠存在快感缺乏症状，而逍遥抗癌解郁方联合化疗药物可以提高BCRD小鼠对快感的反应度。结果见表2。
表2逍遥抗癌解郁方对各组小鼠糖水消耗的影响
注:**P﹤0.01，*P﹤0.05与空白组比较；#P﹤0.05与模型组比较
3.2.2逍遥抗癌解郁方对小鼠自主行为和探索欲望的影响
与空白组比较，BCRD模型组小鼠跨立格子数、直立次数明显下降(P﹤0.05)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组跨立格子数、直立次数明显上升(P﹤0.01或P﹤0.05)，复方中药组站立次数无统计学意义；与空白组比较，BCRD模型组小鼠首次摄食所耗时间明显上升，差异具有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁组、实施例1组、实施例3组首次摄食时间明显下降，差异具有统计学意义(P﹤0.05)。提示，BCRD小鼠缺乏在新奇环境中的自主行为、探索与摄食欲望，存在饥饿与对新环境恐惧的矛盾冲突，而逍遥抗癌解郁方可以缓解BCRD小鼠上述症状。结果见表3。
表3逍遥抗癌解郁方对各组小鼠旷场实验、新奇摄食的影响
注:*P﹤0.05与空白组比较；##P﹤0.01，#P﹤0.05与模型组比较
3.2.3逍遥抗癌解郁方对小鼠绝望行为的影响
与空白组比较，BCRD模型组小鼠在悬尾实验中不动总时间明显上升，差异具有统计学意义(P﹤0.01或P﹤0.05)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组不动时间明显下降(P﹤0.01或P﹤0.05)，化疗组悬尾不动时间无统计学差异。提示，BCRD小鼠存在抑郁绝望精神状态，而逍遥抗癌解郁方可以较好地逆转BCRD小鼠这种精神状态。结果见表4。
表4逍遥抗癌解郁方对各组小鼠悬尾不动时间的影响
注:**P﹤0.01，*P﹤0.05与空白组比较；##P﹤0.01，#P﹤0.05与模型组比较
3.3逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠肿瘤标志物含量的影响
与空白组比较，BCRD模型组小鼠肿瘤标志物CA153、CA125和CEA均明显上升(P﹤0.01)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组肿瘤标志物明显下降(P﹤0.01或P﹤0.05)，化疗联合中药组较单纯的化疗组而言，肿瘤标志物的下降趋势更加明显。提示，逍遥抗癌解郁方可以在一定程度上辅助化疗药物降低肿瘤标志物表达的作用。结果见表5。
表5各组小鼠血清乳腺癌相关标志物的含量
注:**P﹤0.01与空白组比较；##P<0.01，#P﹤0.05与模型组比较
3.4逍遥抗癌解郁方的BCRD小鼠单胺类神经递质含量的影响
与空白组比较，BCRD模型组小鼠血液中单胺类神经递质NE、DA和5-HT均明显下降，差异具有统计学意义(P﹤0.01)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例组、实施例3组的单胺类神经递质明显上升(P﹤0.01或P﹤0.05)。提示，逍遥抗癌解郁方可以升高BCRD小鼠血液中单胺类神经递质NE、DA和5-HT的表达。结果见表6。
表6各组小鼠血清中单胺类神经递质的含量
注:**P﹤0.01，与空白组比较；##P<0.01，#P<0.05与模型组比较
3.5逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠HPA轴相关指标的影响
与空白组比较，乳腺癌组和BCRD模型组小鼠血清中CORT、ACTH和明显升高(P﹤0.01或P﹤0.05)，差异具有统计学意义；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组血清中CORT、ACTH和CRH显著下降(P﹤0.01或P﹤0.05)。提示，逍遥抗癌解郁方可以在明显地降低BCRD小鼠血清中单胺类神经递质CORT、ACTH和CRH的表达，逆转HPA功能紊乱。结果见表7。
表7各组小鼠血清中CORT、ACTH和CRH的含量
注:**P﹤0.01，*P﹤0.05与空白组比较；##P<0.01，#P﹤0.05与模型组比较
3.6海马、乳腺肿瘤及肾上腺组织结构变化
3.6.1逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠海马DG区病理结构的影响
光镜下观察小鼠海马DG区神经元，与空白组比较，BCRD模型组神经元大部分呈现萎缩现象，胞浆浓缩，细胞核体积变小或者消失，细胞核深度核染；与模型组比较，实施例1组海马神经元结构恢复与化疗联合抗抑郁组趋势一致，细胞界限清楚，神经元细胞增多，细胞结构层次，细胞核形态无明显差异，可见少量变性细胞，复方中药组核深染和细胞萎缩现象有所减轻。提示BCRD小鼠海马存在海马DG区损伤，而实施例3可以缓解模型小鼠海马DG区神经元损伤。结果见图1。
3.6.2逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠海马CA3区病理结构的影响
光镜下观察小鼠海马CA3区神经元，与空白组比较，BCRD模型组神经元出现萎缩，细胞间隙变宽，胞浆浓缩，有空泡样改变，细胞核体积变小或者消失，且出现一定程度的深染，细胞甚至出现破裂状态；与模型组比较，化疗联合抗抑郁组和实施例1组细胞体积变大，神经元增多，细胞结构层次，细胞核形态无明显差异，只可见少量变性细胞，复合中药组核染减轻，神经元增殖生长的恢复尚不明显，提示BCRD小鼠海马存在海马CA3区损伤，实施例3组可以轻微缓解模型小鼠海马CA3区神经元损伤。结果见图2。
3.6.3逍遥抗癌解郁方的BCRD小鼠肉眼下小鼠乳腺肿瘤形态的影响
肉眼观察观察各组离体乳腺肿瘤组织，乳腺肿瘤呈不规则的长椭圆形、球形或结节形，外表有完整的包膜包被，颜色为肉红色，有丰富的血管包裹，部分肿瘤分化生长成多个瘤体，或者有黑色的坏死区，质硬，与BCRD组比较，各用药组乳腺癌体积有不同程度的减小。结果见图3。
3.6.4逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠光镜下肿瘤病理结构的影响
光镜下观察小鼠乳腺肿瘤结构，模型组肿瘤细胞排列紧密，坏死少，核质比大，400倍下课明显观察到较多的核分裂现象，细胞大小形态不一，有较多血管充盈其中；与模型组比较，化疗联合抗抑郁组出现大面积成片坏死，400倍可见明显的蛋白样和细胞碎片，未坏死部分细胞排列疏松，间隙变大，核分裂现象变少，而实施例3组仅见散在小面积坏死区域。结果见图4。
3.6.5逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠肾上腺病理结构的影响
光镜下观察小鼠肾上腺结构，与空白组比较，BCRD模型组出现不同程度的球状带结构不明显，束状带间隙变宽，细胞增大，网状带的细胞相互吻合成更密集的网状结构，表示肾上腺皮质处于亢进状态；与模型组比较，实施例3组束状带细胞间隙明显变窄，排列整齐，空泡样改变减少，细胞核固缩和深染程度减轻。结果见图5。
3.7 NR相关基因表达的变化
3.7.1逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠海马NR信号通路相关基因表达的影响
与空白组比较，BCRD组NR2A、NR2B、CREB和CaMK Ⅱ基因的表达发生异常(P﹤0.01或P﹤0.05)；与模型组比较，化疗联合抗抑郁药组、复方中药组、实施例1组、实施例3组海马中NR2A、NR2B和CaMK Ⅱ基因的表达明显下降(P﹤0.01)，CREB基因的表达明显升高(P﹤0.01)。提示，逍遥抗癌解郁方可以逆转BCRD小鼠海马中NR2A、NR2B、CREB和CaMK Ⅱ基因的表达，从而起到对海马的保护作用。结果见表8，图6。
表8各组小鼠海马中NR2A、NR2B、CREB和CaMKⅡ基因的表达
注:**P﹤0.01与空白组比较；##P<0.01与模型组比较
3.7.2逍遥抗癌解郁方对BCRD小鼠肿瘤NR2A、NR2B基因表达的影响
与乳腺癌组比较，BCRD模型组小鼠肿瘤中NR2B表达明显升高，差异具有统计学意义(P﹤0.05)。与BCRD组比较，各用药组NR2A和NR2B基因表达均明显下调(P﹤0.01或P﹤0.05)。提示，逍遥抗癌解郁方可以逆转BCRD小鼠肿瘤中NR2A基因的表达，从而起到对海马的保护作用。结果见表9，图7。
表9各组小鼠肿瘤中NR2A、NR2B基因的表达
注:*P﹤0.05与乳腺癌组比较；##P﹤0.01，#P﹤0.05与模型组比较。

Claims (6)

1.一种防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其特征是，其原料包括如下重量份数组分：柴胡2-5份、当归2-5份、白芍2-5份、茯苓2-5份、白术2-5份、枸杞1-3份、菟丝子1-3份、夏枯草3-10份、重楼2-5份、人参1-3份、姜黄2-5份、贯叶连翘0.5-2份和炙甘草0.5-2份。
2.如权利要求1所述的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其特征是，所述防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物，其原料包括如下重量份数组分：柴胡3份、当归3份、白芍3份、茯苓3份、白术3份、枸杞2份、菟丝子2份、夏枯草5份、重楼3份、人参2份、姜黄3份、贯叶连翘1份、炙甘草1份。
3.一种如权利要求1或2所述的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：将柴胡、当归、白芍、茯苓、白术、枸杞、菟丝子、夏枯草、重楼、人参、姜黄、贯叶连翘和炙甘草混合，加水煎煮，浓缩，制得防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物。
4.如权利要求3所述的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物的制备方法，其特征是，所述浓缩后的药量浓度为0.975g/ml。
5.一种如权利要求1或2所述的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
(1)洗净所有药材；
(2)将当归、白术、白芍分别用水浸泡后，提取收集挥发油，收集滤渣及水溶液；
(3)将步骤(2)所得的挥发油用β-环糊精制成包合物，制成细粉；
(4)将步骤(2)所得的滤渣加水煎煮，过滤，收集滤液得滤液a，取滤液a与步骤(2)所得的水溶液合并，得合并液；
(5)将柴胡、人参、炙甘草、姜黄和枸杞，分别或混合后用乙醇提取，过滤，取滤液合并得滤液b，将滤液b减压回收乙醇，浓缩成浸膏；
(6)将步骤(5)中的滤渣与夏枯草、贯叶连翘、重楼、茯苓、菟丝子五味药混匀，加水煎煮，过滤，取滤液c，将滤液c与步骤(4)所得的合并液混匀后，减压浓缩成浸膏；
(7)将步骤(5)所得浸膏和步骤(6)的浸膏合并、混匀，加入步骤(3)所得的包合物，混匀，即得。
6.一种如权利要求1或2所述的防治乳腺癌合并抑郁症的中药组合物在治疗乳腺癌合并抑郁症方面的用途。
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