CN109504622B - 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法 - Google Patents

一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109504622B
CN109504622B CN201811368174.8A CN201811368174A CN109504622B CN 109504622 B CN109504622 B CN 109504622B CN 201811368174 A CN201811368174 A CN 201811368174A CN 109504622 B CN109504622 B CN 109504622B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bacillus
lysine
bacillus subtilis
fermentation
fusiformis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811368174.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109504622A (zh
Inventor
王勇
温书恒
陈燕琼
武展
梁仕权
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Geolong Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Guangdong Geolong Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Geolong Biotechnology Co ltd filed Critical Guangdong Geolong Biotechnology Co ltd
Priority to CN201811368174.8A priority Critical patent/CN109504622B/zh
Publication of CN109504622A publication Critical patent/CN109504622A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109504622B publication Critical patent/CN109504622B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

本发明公开了一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法，属于农业微生物技术领域，由枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW‑3发酵液混合配置制成，所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW‑3的保藏编号为CGMCC NO.16228，枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW‑3发酵液的配比为1：1‑10：1。本发明提供的复合菌剂对植物具有显著的促生长和抗菌防病作用，可显著抑制青枯病、枯萎病、根腐病等病害的发生，提高产量和质量；具有安全、高效、无毒、无污染的特点，可有效减少化肥农药的使用，缓解环境污染压力，助力农业可持续发展。

Description

一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备 方法
技术领域
本发明涉及一种芽孢杆菌复合菌剂及其制备方法，具体涉及一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法，属于农业微生物技术领域。
背景技术
磷是植物生长过程中重要的营养元素。磷是核酸与核苷酸的组成成分，是组成细胞核和各种细胞器的重要元素，缺磷会影响植物细胞的分裂与形成，导致根系发育不良，植株生长缓慢乃至停滞。此外，磷是磷脂、腺三磷及许多酶的成分，是植物光合作用各个过程中的重要参与物质，缺磷时，叶片暗绿无光泽，植株矮小，抗性减弱，直接影响作物的产量与品质。
钾在植物生长发育过程中同样起着重要的作用。钾是许多酶的激活剂，调节植物气孔开闭及水分代谢，参与植物光合作用。钾元素可以增强植物的抗逆性。
土壤中含有丰富的难溶性磷、钾。土壤磷，按溶解度，可分为水溶性磷、枸溶性磷和难溶性磷，不易被作物吸收利用的难溶性磷约占全磷的99％，成为土壤磷的主要部分，致使土壤磷起不到相应的肥力效果。土壤中95％的钾是作物不能利用的矿物态钾。另外，农业生产中长期以来施用的磷肥主要是化学磷肥，而水溶态磷进入土壤后易发生化学固定或吸附固定，导致土壤中大量累积难以被植物吸收利用的磷素，大大降低磷肥利用率的同时也造成磷素污染。
农业生产过程中，养分供应及植物病虫害问题是影响作物产量的重要因子，显然地，化肥和农药可以满足植物生长发育过程中的营养需求以及解决植物病虫害问题，从而有利于实现作物增产增收。然而，长期以来，由于化肥和农药的过量施用而引发的土壤板结、土壤重金属污染、水体污染、大气污染、农药残留等一系列的生态环境破坏问题和农产品质量安全问题接踵而至，化肥和农药成为了农业可持续发展的重大障碍，因此，亟需寻找绿色、安全、高效的方法来实现作物增产增收，助力农业可持续发展。
微生物肥料具有绿色、安全、高效、无毒、无污染等优点，符合“环保”、“绿色”的理念要求，但是，单一微生物肥料产品往往作用单一，成本高，使得复合型微生物肥料的研究尤为迫切。
因此，为了克服单一菌剂作用单一的缺陷，同时提高肥效药效，有效减少化肥农药的使用，避免环境污染的同时又能满足农业生产需求，提供一种可替代化肥农药的既能促进植物生长发育又能抗菌防病的复合菌剂就成为该技术领域急需解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种具有显著的溶磷解钾作用、可分解土壤中难溶性磷和钾转化为有效磷和钾、有效提高土壤肥力、调节土壤酸碱度、改善土壤微生态环境、活化根际周围土壤菌群、促进植物生长的芽孢杆菌。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于：所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的分类命名为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)LW-3，其保藏编号为CGMCCNO.16228；保藏日为2018年08月07日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
本发明的另一目的是提供一种上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在制备纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液中的应用。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌在制备纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液中的应用。
本发明的再一目的是提供一种上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液的制备方法。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液的制备方法，其步骤如下：
(1)种子活化：将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3接种于LB固体培养基上培养，得到活化种子；
(2)液体种子培养：从步骤(1)得到的活化种子中，挑取单菌落接种于种子培养基中，得到种子液；
(3)发酵培养：将步骤(2)得到的种子液，以1％-5％的接种量接入发酵培养基中培养，制得发酵液。
优选地，所述步骤(1)中所述LB固体培养基培养的具体条件是：32℃条件下培养24h。
优选地，所述步骤(2)中所述种子培养基培养的具体条件是：摇床转速180-200rpm，温度32-35℃，培养12-16h。
优选地，所述步骤(3)中所述发酵培养基培养的具体条件是：通气量0.5-1.5vvm，转速200-400rpm，温度32-35℃，培养时间24-30h。
优选地，所述步骤(3)中所述发酵培养基的组成为：豆粕粉20-40g/L，玉米淀粉20-38g/L，蔗糖15-30g/L，氯化钠2-4g/L，碳酸钙3-5g/L，磷酸二氢钾1-3g/L。
本发明的再一目的是提供一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其特征在于：由枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液混合配置制成，枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液的配比为1:1-10:1。
优选地，所述枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液的配比为3:1-5:1。
本发明的再一目的是提供上述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂的制备方法。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂的制备方法，其步骤如下：
(1)菌种活化
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31菌种分别在LB固体培养基上培养，分别得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的活化种子；
(2)种子培养
将步骤(2)得到的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的活化种子分别进行种子培养，挑取已活化种子中的单菌落，接种于LB种子培养基中进行种子培养，分别得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的种子液；
(3)发酵液制备
将培养好的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3种子液以1％-5％的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.5vvm，转速200-400rpm，温度32-35℃，培养时间24-30h，制得纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液；
将培养好的枯草芽孢杆菌R31种子液以1％-5％的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.8vvm，转速200-400rpm，温度32-37℃，培养时间24-30h，制得枯草芽孢杆菌R31发酵液；
(4)复合菌剂配置
将步骤(3)制备的枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液按比例混合，配置，即得芽孢杆菌复合菌剂。
优选地，所述步骤(1)中所述培养的具体条件是：温度32℃，活化培养24h。
优选地，所述步骤(2)中所述LB种子培养基的组成是：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，水1000mL，pH7.2。
优选地，所述步骤(2)中所述种子培养的步骤是：配置种子培养基，高压蒸汽灭菌备用，摇床转速180-200rpm，温度32-35℃，培养12-16h。
优选地，所述步骤(3)中所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的发酵培养基组成为：豆粕粉25-40g/L，玉米淀粉20-38g/L，蔗糖20-40g/L，氯化钠2-4g/L，碳酸钙3-5g/L，磷酸二氢钾1-3g/L。
优选地，所述步骤(3)中所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的发酵培养基的组成为：豆粕粉40g/L，玉米淀粉38g/L，蔗糖40g/L，氯化钠3g/L，碳酸钙5g/L，磷酸二氢钾3g/L。
优选地，所述步骤(3)中所述枯草芽孢杆菌R31的发酵培养基组成为：豆粕粉20-30g/L，玉米淀粉20-28g/L，氯化钠1-3g/L，碳酸钙0.5-3g/L，硫酸镁0.5-2g/L，磷酸二氢钾1-2g/L。
优选地，所述步骤(3)中所述枯草芽孢杆菌R31的发酵培养基的组成为：豆粕粉30g/L，玉米淀粉28g/L，氯化钠2g/L，碳酸钙3g/L，硫酸镁2g/L，磷酸二氢钾1g/L。
优选地，所述步骤(4)中所述枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液的比例为1：1-10：1；优选3：1-5：1。
本发明的有益效果是：
本发明的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3具有显著的溶磷解钾作用，可分解土壤中的难溶性磷、钾，转化为有效磷、钾，有效提高土壤肥力，改善土壤微生态环境，活化根际周围土壤菌群，调节土壤，改良土壤活性，可有效减少化肥的使用量，促进作物良好生长，改善农产品品质。
本发明提供的赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其中的枯草芽孢杆菌R31与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3具有超加和作用，对植物具有显著的促生长和抗菌防病作用，可显著抑制青枯病、枯萎病、根腐病等病害的发生，提高产量和质量；具有安全、高效、无毒、无污染的特点，可有效减少化肥农药的使用，缓解环境污染压力，助力农业可持续发展。
下面通过具体实施方式对本发明进行详细说明。应该理解的是，所述的实施例仅仅涉及本发明的优选实施方案，在不脱离本发明的精神和范围情况下，各种成分及含量的变化和改进都是可能的。
具体实施方式
实施例1
一、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的分离
将从广东江门古井采集土壤自然风干，研磨成粉得土壤样品；称取5g样品，溶于装有45ml无菌水和玻璃珠的三角瓶中，150rp振荡器振荡；振荡后成10-1倍的稀释液，将三角瓶置于80℃水浴，保持30分钟，然后用移液枪吸取1ml至装有9ml的无菌水试管中，充分振荡成10-2倍的稀释液，并依次稀释成10-5倍的稀释液；
配置溶磷解钾培养基，121℃灭菌30min，将稀释液取0.1ml，涂布于培养基上，然后放置于培养箱培养，观察产生有溶磷圈、溶钾圈的菌株，并挑取划线于营养琼脂(NA)培养基上，再挑取单菌落，做溶磷、解钾效果试验，选取溶磷、解钾效果最好的菌株，备用；
二、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的鉴定
(1)纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的菌落形态及细胞形态
上述筛选的菌株，菌落淡黄色，近圆形，不透明，表面扁平，边缘不整齐；菌体杆状，可形成芽孢，革兰氏染色阳性；
(2)纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3生理生化特征见表1；
表1：纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3生理生化特征
Figure BDA0001869142400000051
Figure BDA0001869142400000061
(3)纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3分子生物学特性
16S rRNA基因序列测定结果如下(如序列表中序列1所示)：
CTTCGGCGGCTGGCTCCAAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGGCTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGAACGACTTTATCGGATTAGCTCCCTCTCGCGAGTTGGCAACCGTTTGTATCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTAAATGATGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGTTGCCCCCGAAGGGGAAACCATATCTCTACAGTGGTCAACGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGTGTCAGTTACAGACCAGATAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCAAATCTCTACGCATTTCACCGCTACACTTGGAATTCCACTATCCTCTTCTGCACTCAAGTCTCCCAGTTTCCAATGACCCTCCACGGTTGAGCCGTGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCACCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTAATAAGGTACCGTCAAGGTACAGCCAGTTACTACTGTACTTGTTCTTCCCTTACAACAGAGTTTTACGAACCGAAATCCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCCATCAGGCTTTCGCCCATTGTGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTCGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGCCCATCCTATAGCGACAGCCGAAACCGTCTTTCAGTGTTTCACCATGAGGTGAAACAGATTATTCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAAACTATAAGGTAGGTTGCCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACGTCGAAGGAGCAAGCTCCTTCTCTGTTCGCTCGACTTGC
gyrB基因序列测定结果如下(如序列表中序列2所示)：
AATCAATCTAAAGAGCCTATTCATGATCCTATTGATGTACTTGGAGAAAAAGATGGTATCTCGGTTGAGATTGCTATGCAATATAATGCTGGATTCTCTTCTAATATTTTTTCATTTGCTAATAACATTAATACGTATGAAGGTGGTACACATGAGTCTGGTTTTAAAACAGCTCTTACACGCGTCATTAATGATTACGCACGAAAAGGTGGATTATTGAAAGAAGCTGATGCCAATTTGACAGGTGAGGATGTCCGTGAAGGTTTAACAGCCATTGTCTCTGTTAAACATCCAGATCCTCAATTTGAGGGGCAAACAAAAACAAAGCTAGGGAACTCAGAAGTAAGTCAAATTACTAACGCTTTATTCTCGGATGGCTTTGAACGATTTATGTTGGAAAATCCAACTGTTGCTCGCAAAGTAGTTGAAAAAGGTTTAATGGCAGCTCGTGCTCGTGTAGCAGCCAAAAAGGCCCGTGAGTTTACACGTCGTAAAAATGCACTTGAAGTGTCAAGCTTGCCTGGTAAATTGGCGGACTGTTCTTCAACGAATCCAGCTGAATGTGAAA
将上述测序结果在NCBI数据库中比对，与Lysinibacillus fusiformis高度同源。
综合菌株的菌落及细胞形态、生理生化特征、16S rRNA基因序列、gyrB基因序列等实验数据分析，参考《伯杰氏系统细菌学手册》，确定本发明菌种为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)LW-3。
三、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的保藏
将本发明菌种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3(Lysinibacillus fusiformis)于2018年08月07日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.16228，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
四、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3解磷解钾能力的测定
(一)、培养基
解无机磷固体培养基：葡萄糖10g，硫酸铵0.5g，氯化钠0.3g，硫酸镁0.3g，硫酸亚铁0.03g，硫酸锰0.03g，碳酸钙5g，氯化钾0.3g，磷酸三钙5g，琼脂粉15g，pH7.2，121℃灭菌30min。
解有机磷固体培养基：葡萄糖10g，硫酸铵0.5g，氯化钠0.3g，硫酸镁0.3g，硫酸亚铁0.03g，硫酸锰0.03g，碳酸钙5g，氯化钾0.3g，卵磷脂0.3g，琼脂粉15g，pH7.2，121℃灭菌30min。
解钾固体培养基：蔗糖10g，磷酸氢二钠1g，硫酸铵0.5g，硫酸镁1g，酵母膏0.2g，硫酸亚铁0.03g，碳酸钙2.5g，钾长石粉10g，琼脂粉15g，pH7.2，121℃灭菌30min。
种子培养基：玉米淀粉3g，蔗糖1.2g，硫酸铵0.48g，硫酸镁1.2g，磷酸氢二钾1.2g，氯化铁0.12g，碳酸钙1.2g，酵母粉0.6g，水1000mL，pH7.2。
解无机磷液体培养基：葡萄糖10g，磷酸三钙5g，硫酸铵0.5g，氯化钠0.2g，氯化钾0.2g，七水硫酸镁0.3g，硫酸锰0.03g，七水硫酸亚铁0.03g，酵母粉0.5g，蒸馏水1000mL，pH7.2，121℃灭菌30min。
解有机磷液体培养基：葡萄糖10g，硫酸铵0.5g，氯化钠0.2g，氯化钾0.2g，七水硫酸亚铁0.03g，硫酸锰0.03g，卵磷脂0.3g，碳酸钙5g，酵母粉0.4g，蒸馏水1000mL，pH7.2，121℃灭菌30min。
解钾液体培养基：蔗糖10g，七水硫酸镁0.5g，硫酸铵0.2g，氯化钠0.1g，碳酸钙0.1g，钾长石粉5g，蒸馏水1000mL，pH7.2，121℃灭菌30min。
(二)、解磷能力测定
采用溶磷圈法和钼锑抗比色法分别测定纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的溶磷性能和解磷能力的强弱。
(1)溶磷圈法
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3接种于营养琼脂上，划线培养活化，32℃下培养24h；将活化的菌株分别点接在上述解无机磷固体培养基和解有机磷固体培养基上，设置3个重复，于32℃培养箱中培养5天，使用十字交叉法测量并记录溶磷圈直径。
(2)钼锑抗比色法
a.种子液制备
挑取一环活化好的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3菌种接入50ml种子培养基中，150r/min、30℃摇床培养到对数期，菌体含量不少于2×108cfu/mL；
b.发酵液制备
500mL三角瓶分别加入上述解无机/有机磷液体培养基95mL，121℃灭菌30min备用；向已灭菌的无机/有机磷液体培养基中接入纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3种子液5mL，以等量灭活种子液为对照，设置三个重复，于30℃、150r/min条件下培养5天，制得发酵液；
c.发酵液的处理－过氧化氢灰化法
将全部发酵液转入蒸发皿中，在水浴锅中浓缩至10mL左右，加入2.0mL 20％H2O2溶液，继续蒸发并不断搅动，如此反复至粘性物质完全消化；将溶液转移到离心管中3500r/min离心10min，将上清液收集到50mL容量瓶中，用蒸馏水定容，钼锑抗比色法测定溶液中的磷含量；
根据速效磷相对增加量衡量菌种的解磷能力：
速效磷相对增加量(％)＝[试验组速效磷的含量(mg/L)－对照组速效磷的含量(mg/L)]/试验组速效磷的含量(mg/L)×100％
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3解磷能力试验结果见表2；
表2：纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3解磷能力试验结果
Figure BDA0001869142400000091
(三)、解钾能力测定
采用解钾圈法和火焰光度计法分别测定纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的解钾性能和解钾能力的强弱；
(1)解钾圈法
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3接种于营养琼脂上，划线培养活化，32℃下培养24h；将活化的菌株分别点接在上述解钾固体培养基上，设置3个重复，于32℃培养箱中培养5天，使用十字交叉法测量并记录解钾圈直径；
(2)火焰光度计法
a.种子液制备
挑取一环活化好的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3菌种接入50ml种子培养基中，150r/min、30℃摇床培养到对数期，菌体含量不少于2×108cfu/mL；
b.发酵液制备
500mL三角瓶分别加入上述解钾液体培养基95mL，121℃灭菌30min备用。向已灭菌的解钾液体培养基中接入纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3种子液5mL，以等量灭活种子液为对照，设置三个重复，于30℃、150r/min条件下培养5天，制得发酵液；
c.发酵液的处理－过氧化氢灰化法
将全部发酵液转入蒸发皿中，在水浴锅中浓缩至10mL左右，加入2.0mL20％H2O2溶液，继续蒸发并不断搅动，如此反复至粘性物质完全消化。将溶液转移到离心管中3500r/min离心10min，将上清液收集到50mL容量瓶中，用蒸馏水定容，然后用火焰光度计法测定溶液中速效钾含量；
d.速效钾的测定
先绘制KCI标准曲线，再测定待测溶液速效钾含量。具体操作：吸取100μg/mL钾标准溶液0，5.00，10.00，15.00，20.00mL分别置于5个50mL容量瓶中，加10.0mL浓度为1mol/L的硝酸溶液，用水定容；此溶液为1mL含钾(K)0，10.00，20.00，30.00，40.00μg的标准溶液系列，记录仪器示值，根据钾浓度和仪器示值绘制校准曲线或求出直线回归方程，将步骤c制备的溶液与标准溶液系列同条件上机测定，由校准曲线或求出直线回归方程求得待测溶液中速效钾含量；
根据速效钾相对增加量衡量菌种的解钾能力：
速效钾相对增加量(％)＝[试验组速效钾的含量(mg/L)－对照组速效钾的含量(mg/L)]/试验组速效钾的含量(mg/L)×100％
(3)纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3解钾能力试验结果见下表3：
表3纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3解钾能力试验结果
Figure BDA0001869142400000101
五、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌的促生长试验
(一)、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液的制备
(1)菌种的活化
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3接种于LB固体培养基上，32℃培养箱中恒温培养24h；
(2)液体种子培养
配置种子培养基(LB液体培养基：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，水1000mL，pH7.2)，装液量为50mL/250mL三角瓶，高温蒸汽灭菌备用；挑取活化的种子中单菌落接种于已灭菌种子培养基中，摇床转速180-200rpm，温度32-35℃，培养12-16h；
(3)发酵液制备
经单因素试验和正交试验优化，发酵培养基组成为：豆粕粉40g/L，玉米淀粉38g/L，蔗糖40g/L，氯化钠3g/L，碳酸钙5g/L，磷酸二氢钾3g/L；将培养好的种子液以1％-5％的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.5vvm，转速200-400rpm，温度32-35℃，培养时间24-30h，制得纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液；
(4)发酵液菌量测定
采用稀释涂布平板法测定发酵液菌量。
(二)、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液对黄瓜的促生长实验
将黄瓜种子于育苗床育苗一周后，挑取生长一致的黄瓜幼苗移栽于装好土壤的杯子中，每杯一株幼苗。在黄瓜幼苗移栽后第4天，以淋施法向黄瓜幼苗茎基部浇淋200倍稀释液既10-6的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液，30ml/株，以等量清水为对照，发酵液处理与清水处理各16株黄瓜幼苗，于环境温度25-30℃，空气湿度50％-80％以上，温室光照时间为9h/天，光源为全光谱LED灯，光强8000Lx条件下栽培，每天定量浇水一次。处理后21天，分别测量各黄瓜植株的高度(茎基部到生长点的距离)、茎粗(距地面1cm处)、第一片真叶长度和宽度；实验结果见下表4；
表4：实验结果展示
Figure BDA0001869142400000111
从表4可以看出，与对照组相比，经纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液处理的黄瓜植株株高、叶长及叶宽均明显增加；其中，株高比对照组增加22.85％，茎粗比对照组增加23.53％，叶长比对照组增加35.02％，叶宽比对照组增加34.59％。
本发明的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3具有溶磷解钾作用，纺锤形赖氨酸芽孢杆菌发酵液可有效减少化肥的使用量，改良土壤环境，促进植物良好生长。
应用实施例1芽孢杆菌复合菌剂的制备
(1)菌种活化
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31菌种分别在LB固体培养基上，在32℃条件下活化培养24h；
(2)液体种子培养
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的液体种子培养方法相同：配置种子培养基(LB液体培养基：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，水1000mL，pH7.2)，装液量为50mL/250mL三角瓶，高压蒸汽灭菌备用；挑取步骤(1)中制备的已活化种子中的单菌落，接种于种子培养基中，摇床转速180-200rpm，温度32-35℃，培养12-16h；
(3)发酵液制备
经单因素试验和正交试验优化，确定纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的发酵培养基的组成为：豆粕粉40g/L，玉米淀粉38g/L，蔗糖40g/L，氯化钠3g/L，碳酸钙5g/L，磷酸二氢钾3g/L；将培养好的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3种子液以1％-5％的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.5vvm，转速200-400rpm，温度32-35℃，培养时间24-30h，制得纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液；
枯草芽孢杆菌R31的发酵培养基的组成为：豆粕粉30g/L，玉米淀粉28g/L,氯化钠2g/L，碳酸钙3g/L，硫酸镁2g/L，磷酸二氢钾1g/L；将培养好的枯草芽孢杆菌R31种子液以1％-5％的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.8vvm，转速200-400rpm，温度32-37℃，培养时间24-30h，制得枯草芽孢杆菌R31发酵液；
(4)复合菌剂配置
通过菌株间的拮抗试验，获得合适的菌种配比，将枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液按菌种配比混合配置即制成芽孢杆菌复合菌剂。
应用实施例2芽孢杆菌复合菌剂的大田试验
一、枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液为3:1菌种配比的复合菌剂的大田试验
在广东省中山市坦洲镇南村的番茄大田进行试验，在番茄幼苗定植后一周，叶片5-6片，生长势一致，无明显病害发生的情况下，将本发明枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液为3:1菌种配比的复合菌剂稀释500倍后罐施于番茄的根系及附近，300ml/株，设置3个重复，每个重复为30平方米的小区，设置空白对照(CK)，处理后持续调查番茄的生长发育情况及青枯病菌发生情况，于试验处理后第25天统计番茄生长高度、开花量，第35天统计青枯病株数，计算发病率、防治效果；
青枯病发病率＝发病株数/试验总株数×100％
防治效果＝(对照组发病率—试验组发病率)/对照组发病率×100％
试验结果如下表5-7所示：
表5芽孢杆菌复合菌剂对番茄生长高度的影响
Figure BDA0001869142400000121
表6芽孢杆菌复合菌剂对番茄开花情况的影响
Figure BDA0001869142400000122
Figure BDA0001869142400000131
表7芽孢杆菌复合菌剂对番茄青枯病的防治效果
处理 番茄株基数 病株数 防治效果/％
复合菌剂 200 2 88.89
CK 200 18 －
试验结果表明，本发明提供的芽孢杆菌复合菌剂能够明显促进番茄生长和发育，显著降低番茄青枯病的发病率，防治效果达到88％以上。
二、枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3为5:1菌种配比的复合菌剂的大田试验
在广东省珠海市灯笼路口进行的辣椒大田进行试验，在辣椒幼苗定植后一周，真叶4—5张，生长势一致，无明显病害发生的情况下，将本发明枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3为5:1菌种配比的复合菌剂稀释500倍后淋施于辣椒的根系，每株300ml，设置3个重复，每个重复为30平方米的小区，设置空白对照(CK)，处理后持续调查辣椒的生长发育情况，于试验处理后第27天统计辣椒生长高度，第30天统计开花量，第40天调查辣椒果实性状，统计辣椒果实首批产量。
试验结果如表8-11所示：
表8芽孢杆菌复合菌剂对辣椒生长高度的影响
Figure BDA0001869142400000132
表9芽孢杆菌复合菌剂对辣椒开花情况的影响
Figure BDA0001869142400000133
表10芽孢杆菌复合菌剂对辣椒果实性状的影响
Figure BDA0001869142400000134
Figure BDA0001869142400000141
表11芽孢杆菌复合菌剂对辣椒首批产量的影响
Figure BDA0001869142400000142
试验结果表明，本发明提供的芽孢杆菌复合菌剂能够明显促进辣椒生长发育，显著提高辣椒产量，增产率达72％以上。
三、枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3为3:2菌种配比的复合菌剂的大田试验
在广东省珠海市灯笼路口进行的黄瓜大田进行试验，在黄瓜幼苗定植后一周，真叶4—5张，生长势一致，无明显病害发生的情况下，将本发明枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3为3:2菌种配比的复合菌剂稀释500倍后淋施于黄瓜的根系，每株300ml，设置3个重复，每个重复为30平方米的小区，设置空白对照(CK)，处理后持续调查黄瓜的生长发育情况，于试验处理后第22天统计黄瓜生长高度及开花量，第25天调查黄瓜果实性状，统计黄瓜首批产量。
试验结果如表12-16所示：
表12芽孢杆菌复合菌剂对黄瓜生长高度的影响
Figure BDA0001869142400000143
表13芽孢杆菌复合菌剂对黄瓜开花情况的影响
Figure BDA0001869142400000144
表14芽孢杆菌复合菌剂对黄瓜果实性状的影响
Figure BDA0001869142400000151
表15芽孢杆菌复合菌剂对黄瓜首批产量的影响
Figure BDA0001869142400000152
表16芽孢杆菌复合菌剂对黄瓜枯萎病的防治效果
处理 黄瓜株基数 病株数 防治效果/％
复合菌剂 200 29 56.72
CK 200 67 －
试验结果表明，本发明提供的芽孢杆菌复合菌剂能够明显促进黄瓜生长发育，显著提高黄瓜产量，增产率达76％以上。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修改，皆应属本发明的涵盖范围。
序列表
<110> 广东植物龙生物技术股份有限公司
<120> 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1424
<212> DNA
<213> 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformisLW-3)
<400> 1
cttcggcggc tggctccaaa aggttacctc accgacttcg ggtgttacaa actctcgtgg 60
tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga acgtattcac cgcggcatgc tgatccgcga 120
ttactagcga ttccggcttc atgtaggcga gttgcagcct acaatccgaa ctgagaacga 180
ctttatcgga ttagctccct ctcgcgagtt ggcaaccgtt tgtatcgtcc attgtagcac 240
gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat gatttgacgt catccccacc ttcctccggt 300
ttgtcaccgg cagtcacctt agagtgccca actaaatgat ggcaactaag atcaagggtt 360
gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct cacgacacga gctgacgaca accatgcacc 420
acctgtcacc gttgcccccg aaggggaaac catatctcta cagtggtcaa cgggatgtca 480
agacctggta aggttcttcg cgttgcttcg aattaaacca catgctccac cgcttgtgcg 540
ggcccccgtc aattcctttg agtttcagtc ttgcgaccgt actccccagg cggagtgctt 600
aatgcgttag ctgcagcact aaggggcgga aaccccctaa cacttagcac tcatcgttta 660
cggcgtggac taccagggta tctaatcctg tttgctcccc acgctttcgc gcctcagtgt 720
cagttacaga ccagatagtc gccttcgcca ctggtgttcc tccaaatctc tacgcatttc 780
accgctacac ttggaattcc actatcctct tctgcactca agtctcccag tttccaatga 840
ccctccacgg ttgagccgtg ggctttcaca tcagacttaa gaaaccacct gcgcgcgctt 900
tacgcccaat aattccggac aacgcttgcc acctacgtat taccgcggct gctggcacgt 960
agttagccgt ggctttctaa taaggtaccg tcaaggtaca gccagttact actgtacttg 1020
ttcttccctt acaacagagt tttacgaacc gaaatccttc ttcactcacg cggcgttgct 1080
ccatcaggct ttcgcccatt gtggaagatt ccctactgct gcctcccgta ggagtctggg 1140
ccgtgtctca gtcccagtgt ggccgatcac cctctcaggt cggctacgca tcgtcgcctt 1200
ggtgagccgt tacctcacca actagctaat gcgccgcggg cccatcctat agcgacagcc 1260
gaaaccgtct ttcagtgttt caccatgagg tgaaacagat tattcggtat tagccccggt 1320
ttcccggagt tatcccaaac tataaggtag gttgcccacg tgttactcac ccgtccgccg 1380
ctaacgtcga aggagcaagc tccttctctg ttcgctcgac ttgc 1424
<210> 2
<211> 568
<212> DNA
<213> 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformisLW-3)
<400> 2
aatcaatcta aagagcctat tcatgatcct attgatgtac ttggagaaaa agatggtatc 60
tcggttgaga ttgctatgca atataatgct ggattctctt ctaatatttt ttcatttgct 120
aataacatta atacgtatga aggtggtaca catgagtctg gttttaaaac agctcttaca 180
cgcgtcatta atgattacgc acgaaaaggt ggattattga aagaagctga tgccaatttg 240
acaggtgagg atgtccgtga aggtttaaca gccattgtct ctgttaaaca tccagatcct 300
caatttgagg ggcaaacaaa aacaaagcta gggaactcag aagtaagtca aattactaac 360
gctttattct cggatggctt tgaacgattt atgttggaaa atccaactgt tgctcgcaaa 420
gtagttgaaa aaggtttaat ggcagctcgt gctcgtgtag cagccaaaaa ggcccgtgag 480
tttacacgtc gtaaaaatgc acttgaagtg tcaagcttgc ctggtaaatt ggcggactgt 540
tcttcaacga atccagctga atgtgaaa 568

Claims (5)

1.一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus fusiformis）和枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）的复合菌剂，其特征在于：由枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液混合配制制成，枯草芽孢杆菌R31发酵液和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液的配比为1：1-10：1；所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的保藏编号为CGMCCNO.16228；保藏日为2018年08月07日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101；
所述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂的制备步骤如下：
（1）菌种活化
将低温保存的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31菌种分别在LB固体培养基上培养，分别得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的活化种子；
（2）种子培养
将步骤（1）得到的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的活化种子分别进行种子培养，挑取已活化种子中的单菌落，接种于LB种子培养基中进行种子培养，分别得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3和枯草芽孢杆菌R31的种子液；
（3）发酵液制备
将培养好的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3种子液以1%-5%的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.5vvm，转速200-400rpm，温度32-35℃，培养时间24-30h，制得纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液；
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3的发酵培养基组成为：豆粕粉25-40g/L，玉米淀粉20-38g/L，蔗糖20-40g/L，氯化钠2-4g/L，碳酸钙3-5g/L，磷酸二氢钾1-3g/L；
将培养好的枯草芽孢杆菌R31种子液以1%-5%的接种量接入发酵培养基中，培养条件为通气量0.5-1.8vvm，转速200-400rpm，温度32-37℃，培养时间24-30h，制得枯草芽孢杆菌R31发酵液；
枯草芽孢杆菌R31的发酵培养基组成为：豆粕粉20-30g/L，玉米淀粉20-28g/L，氯化钠1-3g/L，碳酸钙0.5-3g/L，硫酸镁0.5-2g/L，磷酸二氢钾1-2g/L；
（4）复合菌剂配制
将步骤（3）制备的枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液按比例混合，配制，即得芽孢杆菌复合菌剂。
2.根据权利要求1所述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其特征在于：所述步骤（1）中所述培养的具体条件是：温度32℃，活化培养24h。
3.根据权利要求2所述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其特征在于：所述步骤（2）中所述LB种子培养基的组成是：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，水1000mL，pH7.2。
4.根据权利要求3所述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其特征在于：所述步骤（2）中所述种子培养的步骤是：配制LB种子培养基，高压蒸汽灭菌备用，摇床转速180-200rpm，温度32-35℃，培养12-16h。
5.根据权利要求1所述赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂，其特征在于：所述步骤（4）中所述枯草芽孢杆菌R31发酵液与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌LW-3发酵液的比例为3：1-5：1。
CN201811368174.8A 2018-11-16 2018-11-16 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法 Active CN109504622B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811368174.8A CN109504622B (zh) 2018-11-16 2018-11-16 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811368174.8A CN109504622B (zh) 2018-11-16 2018-11-16 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109504622A CN109504622A (zh) 2019-03-22
CN109504622B true CN109504622B (zh) 2022-01-07

Family

ID=65748841

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811368174.8A Active CN109504622B (zh) 2018-11-16 2018-11-16 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109504622B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142210A (zh) * 2017-04-23 2017-09-08 贵州省烟草公司黔西南州公司 一种硬质秸秆发酵菌剂的配制方法
CN109576171B (zh) * 2018-11-16 2021-11-23 广东植物龙生物技术股份有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用
CN110079484B (zh) * 2019-05-28 2022-07-08 青岛力力惠生物科技股份有限公司 一种枯草芽孢杆菌及其在农业生产中的应用
CN111893074B (zh) * 2020-08-14 2022-05-20 贵州大学 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株及其用途
CN112640742A (zh) * 2020-12-04 2021-04-13 常德市农林科学研究院 一种增加秋延后大棚鲜食辣椒座果量的栽培方法
CN113025538A (zh) * 2021-04-30 2021-06-25 中国水稻研究所 一株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌h16及其应用
CN117187077B (zh) * 2023-07-24 2024-03-08 广东省科学院南繁种业研究所 复合菌群及其应用、植物青枯病的防治方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101760438A (zh) * 2009-12-23 2010-06-30 珠海市农业科学研究中心 一株广谱抗真菌植物内生枯草芽胞杆菌及其应用
EP2532448A1 (en) * 2010-02-05 2012-12-12 Meisho.Co., Ltd Method for degrading organic material using mother cell lyases formed in association with spore formation of microorganism
DE102012000239A1 (de) * 2012-01-09 2013-07-25 KFL GmbH Löwenberg Verfahren zur biologischen Regenerierung von beladenen Adsorptionsmittel aus Biogasreinigungsprozessen
CN106754459A (zh) * 2016-10-20 2017-05-31 广东植物龙生物技术股份有限公司 一株来源于蚕沙的菌株Bacillus altitudinis SEM‑1及其应用
CN107384834A (zh) * 2017-08-29 2017-11-24 西安罗格斯生物科技有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株、酶制剂及其降解农药残留的应用
CN107815427A (zh) * 2017-11-01 2018-03-20 广东工业大学 一株具有甲胺降解能力的梭状芽孢杆菌及其应用
CN111893074A (zh) * 2020-08-14 2020-11-06 贵州大学 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株及其用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101489162B1 (ko) * 2013-08-26 2015-02-06 인하대학교 산학협력단 방사성 물질 처리능을 갖는 리시니바실러스 푸지포르미스 및 이를 포함하는 방사성 물질 처리용 조성물
CN103875718A (zh) * 2014-01-23 2014-06-25 广东植物龙生物技术有限公司 一种枯草芽胞杆菌与恶霉灵复配的土壤处理剂
CN103952350B (zh) * 2014-04-24 2016-05-18 烟台地元生物科技有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及微生物菌剂和它们的应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101760438A (zh) * 2009-12-23 2010-06-30 珠海市农业科学研究中心 一株广谱抗真菌植物内生枯草芽胞杆菌及其应用
EP2532448A1 (en) * 2010-02-05 2012-12-12 Meisho.Co., Ltd Method for degrading organic material using mother cell lyases formed in association with spore formation of microorganism
DE102012000239A1 (de) * 2012-01-09 2013-07-25 KFL GmbH Löwenberg Verfahren zur biologischen Regenerierung von beladenen Adsorptionsmittel aus Biogasreinigungsprozessen
CN106754459A (zh) * 2016-10-20 2017-05-31 广东植物龙生物技术股份有限公司 一株来源于蚕沙的菌株Bacillus altitudinis SEM‑1及其应用
CN107384834A (zh) * 2017-08-29 2017-11-24 西安罗格斯生物科技有限公司 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株、酶制剂及其降解农药残留的应用
CN107815427A (zh) * 2017-11-01 2018-03-20 广东工业大学 一株具有甲胺降解能力的梭状芽孢杆菌及其应用
CN111893074A (zh) * 2020-08-14 2020-11-06 贵州大学 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌菌株及其用途

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Screening and genome sequencing of deltamethrin-degrading bacterium ZJ6;Hao XX等;《Current microbiology》;20181130;第75卷(第11期);第1468-1476页 *
一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定;王勇等;《安徽农业科学》;20190527(第10期);第13-17页 *
广西药用野生稻内生细菌多样性及促生作用;阳洁等;《生态学杂志》;20151023;第34卷(第11期);摘要、第2.1节、表2和表3 *
枯草芽孢杆菌R31和TR21菌株防治香蕉枯萎病田间药效试验;黎永坚等;《广东农业科学》;20121210(第23期);摘要 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109504622A (zh) 2019-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109504622B (zh) 一种赖氨酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的复合菌剂及其制备方法
Prasanna et al. Cyanobacteria as a “green” option for sustainable agriculture
CN101497541B (zh) 一种烟草用高效抗病解磷菌肥及其生产方法
CN109679884A (zh) 一株能减少氮磷肥施用的玉米高效促生菌及其应用
CN106635903A (zh) 一种提高中重度盐碱地作物耐盐性的促生菌组合
CN111484951B (zh) 一种解磷固氮的芽孢杆菌及其在促生上的应用
CN109576171B (zh) 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用
CN102911875A (zh) 一种多功能土壤修复菌剂的制备方法
CN104560787B (zh) 一种花生根际促生菌hs11及其应用
CN104152385A (zh) 一株莫哈韦芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用
CN109868242B (zh) 一株耐盐产乙偶姻的枯草芽孢杆菌及其应用
CN104630094A (zh) 一种花生根际促生菌hs10及其应用
CN108048360B (zh) 一种具有降解有机磷和防病双重作用的枯草芽孢杆菌
CN110791459B (zh) 一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用
CN105132332B (zh) 一株葡糖醋杆菌及其作为植物促生菌的应用
CN111593001A (zh) 一株具有解磷能力的巨大芽孢杆菌及其在溶解磷矿粉中的应用
CN102191205B (zh) 能将难溶性磷酸盐转化为可溶性磷酸盐的菌株b1
CN116751709A (zh) 一种伯克霍尔德氏菌菌株b2op及其应用
CN105585379A (zh) 一种生物复合肥及应用
CN111484953A (zh) 一种促生解磷的芽孢杆菌及其应用
CN112979391B (zh) 一种促根型生物有机肥及其制备方法
CN111154668B (zh) 一株裂解亚氯酸假单胞菌及其应用
CN111909863B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌及其用途
US20180044627A1 (en) Pgpr compositions and methods for improved cultivation of tomato and potato species
CN111560324B (zh) 一种促生解磷固氮的芽孢杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant