CN109486891A - 一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，包括原料准备、酶解预处理、酶解处理等步骤，本发明一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，先对鱼皮进行脱脂处理后再进行酶解处理，酶解处理过程中采用多种不同的蛋白酶对鱼皮进行酶解，不仅可以提高酶解速度，还能有效降低蛋白酶的用量，能够有效提高小分子鱼皮胶原蛋白肽的产量。本发明的提取方法中采用改性活性炭进行脱色，吸附性能佳，在酶解液能够分散均匀，在用量少、时间短的条件下即能达到良好的脱色脱腥效果，且有效成分不损失，提取方法具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、鱼皮胶原蛋白肽获得率高的优势，易于工业化规模生产，具有良好的应用价值和市场潜力。
Description
技术领域
本发明涉及胶原蛋白肽提取技术领域，具体是一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法。
背景技术
胶原蛋白是动物细胞合成的一种天然生物高分子，作为细胞外基质中的重要成分几乎存在于所有组织内，约占动物总蛋白的30％，胶原蛋白具有高度抗延伸能力，使得皮肤等结缔组织得以维持一定的结构并具有特殊的机械力学性质以实现支撑和保护细胞、组织和机体功能，对细胞和组织的结构与性能等方面十分关键。
胶原蛋白肽是指以胶原组织为原料，通过深度水解获得的具有特殊功能的低分子量的生物活性肤，分子量小，与胶原蛋白相比，胶原蛋白肽更易被人体吸收，吸收率约95％以上，而胶原蛋白的吸收率只有25％。胶原蛋白肚的亲水基团较多，因此水溶性更好，利用降解手段切断胶原蛋白的肤键，使功能性的片断显露出来，使得胶原蛋白肽中存在大量的生物活性组分，包括具有抗氧化、抑制ACE活性、抗溃疡、抑制关节炎、提高免疫力、增强骨密度以及预防骨质疏松等生物活性的肤，因此可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域中。
一般，小分子胶原蛋白肽可以作为有效成分被广泛应用于医药、高档化妆品、保健食品等与人体健康相关的行业。目前，国内外用于制备小分子胶原蛋白肽的原料主要来源于猪皮和牛皮。然而，由于对疯牛病、猪口蹄疫的恐慌以及宗教信仰等原因，以水产加工废弃物尤其利用鱼皮制备小分子胶原蛋白肽不断受到关注。据报道，小分子胶原蛋白肽易于消化吸收，具有保护胃粘膜防止胃溃疡，促进钙吸收防治骨质疏松，促进皮肤胶原代谢，抑制血压上升，以及降低血清中胆固醇含量等多方面的生理功能，导致市场对胶原蛋白的需求量不断增加。
目前，利用以鱼皮为原料制备小分子胶原蛋白肽在国内外已经有了大量的研究和报道。在胶原蛋白肽的提取方法中，利用蛋白酶对胶原蛋白进行酶解不仅效率高、而且产品的分子量分布容易控制，因此酶解提取法被广泛应用于工业化生产。然而，由于蛋白酶价格昂贵，如果没有对提取工艺进行合理设计，不仅需要添加大量的蛋白酶，而且酶解时间长，造成生产成本偏高，产品分子量分布广。另一方面，利用鱼皮制备的小分子胶原蛋白肽都存在颜色深、带有鱼腥味，导致应用范围受到限制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌20-30min后静置4-6h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗2-3次；
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入2-4倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：向浆液中加入蛋白酶进行酶解得到酶解液；
S5、灭活处理：将酶解液进行灭酶活性处理，得到灭酶酶解液；
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理；
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理；
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
进一步的：所述步骤S2中，氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1-2％，水的加入量为鱼皮质量的2-4倍。
进一步的：所述步骤S4中，酶解的具体过程为：先加入浆液重量0.1-0.2％的风味蛋白酶，调节pH值至6.5-7.5，将浆液加热至55-65℃，酶解1.5-2.5h；再加入浆液重量0.1-0.2％的中性蛋白酶，50-60℃的条件下酶解2-3h；然后降温至40-50℃，加入浆液重量0.05-0.1％的肽酶，40-50℃条件下酶解1-2h；加入浆液重量0.05-0.1％的碱性蛋白酶，调节pH值至8-9，40-50℃条件下酶解2-3h；加入浆液重量0.1-0.2％的胶原酶，调节pH值至7.0，40-50℃条件下酶解2-3h。
进一步的：所述步骤S5中，灭活处理的过程为将酶解液在90-100℃水浴下灭酶活性15-20min。
进一步的：所述步骤S6中，离心机的转速为3000-5000r/min。
进一步的：所述步骤S7中，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到50-70℃，调节pH为5-7，加入酶解液重量1-3％的改性活性炭，超声搅拌10-20min，过滤，得到滤清液。
进一步的：所述改性活性炭的制备方法为:按料液比为1:8-12g/mL将活性炭放入浓度为0.8-1.2M的氢氧化钠溶液中浸泡45-50h，然后用去离子水快速洗涤2-3次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在75-85℃下搅拌25-35h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
进一步的：所述步骤S8中，去腥处理的过程为：控制滤清液的pH值为4.5-5.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为15-60min。
进一步的：所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
进一步的：所述步骤S8中，纳滤处理的过程为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，先对鱼皮进行脱脂处理后再进行酶解处理，酶解处理过程中采用多种不同的蛋白酶对鱼皮进行酶解，不仅可以提高酶解速度，还能有效降低蛋白酶的用量，并且可以有效控制酶解液的分子量，从而有效提高小分子鱼皮胶原蛋白肽的产量。
本发明利用两种不同截留分子量的纳滤膜对小分子胶原蛋白肽进行截取，可以获得分子量分布范围集中的小分子胶原蛋白肽，可以有效控制的分子量大小，便于获得不同分子量大小的胶原蛋白肽。
本发明的提取方法中采用改性活性炭进行脱色，吸附性能佳，在酶解液能够分散均匀，在用量少、时间短的条件下即能达到良好的脱色脱腥效果，且有效成分不损失，能使得胶原蛋白肽较白，感官接受度较高。
本发明的提取方法提取制备的胶原蛋白肽，生物活性高，可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域中，提取方法具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、鱼皮胶原蛋白肽获得率高的优势，易于工业化规模生产，具有良好的应用价值和市场潜力。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，以下实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌20min后静置4h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗2次；其中氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1％，水的加入量为鱼皮质量的2倍。
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入2倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：先加入浆液重量0.1％的风味蛋白酶，调节pH值至6.5，将浆液加热至55℃，酶解1.5h；再加入浆液重量0.1％的中性蛋白酶，50℃的条件下酶解2h；然后降温至40℃，加入浆液重量0.05％的肽酶，40℃条件下酶解1h；加入浆液重量0.05％的碱性蛋白酶，调节pH值至8，40℃条件下酶解2h；加入浆液重量0.1％的胶原酶，调节pH值至7.0，40℃条件下酶解2h。
S5、灭活处理：将酶解液在90℃水浴下灭酶活性15min，得到灭酶酶解液。
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；其中离心机的转速为3000r/min。
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到50℃，调节pH为5，加入酶解液重量1％的改性活性炭，超声搅拌10min，过滤，得到滤清液；其中，改性活性炭的制备方法为：按料液比为1:8g/mL将活性炭放入浓度为0.8M的氢氧化钠溶液中浸泡45h，然后用去离子水快速洗涤2次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在75℃下搅拌25h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理，控制滤清液的pH值为4.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为15min。
所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
纳滤处理的过程具体为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
实施例2
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌20min后静置4.5h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗2次；其中氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1.2％，水的加入量为鱼皮质量的2.5倍。
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入2.5倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：先加入浆液重量0.12％的风味蛋白酶，调节pH值至6.5，将浆液加热至55℃，酶解1.5h；再加入浆液重量0.12％的中性蛋白酶，50℃的条件下酶解2.5h；然后降温至40℃，加入浆液重量0.06％的肽酶，40℃条件下酶解1h；加入浆液重量0.06％的碱性蛋白酶，调节pH值至8，40℃条件下酶解2h；加入浆液重量0.12％的胶原酶，调节pH值至7.0，40℃条件下酶解2h。
S5、灭活处理：将酶解液在92℃水浴下灭酶活性16min，得到灭酶酶解液。
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；其中离心机的转速为3500r/min。
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到55℃，调节pH为5.5，加入酶解液重量1.5％的改性活性炭，超声搅拌10min，过滤，得到滤清液；其中，改性活性炭的制备方法为：按料液比为1:9g/mL将活性炭放入浓度为0.9M的氢氧化钠溶液中浸泡45h，然后用去离子水快速洗涤2次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在75℃下搅拌28h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理，控制滤清液的pH值为4.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为20min。
所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
纳滤处理的过程具体为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
实施例3
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌25min后静置5h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗3次；其中氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1.5％，水的加入量为鱼皮质量的3倍。
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入5倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：先加入浆液重量0.15％的风味蛋白酶，调节pH值至7.0，将浆液加热至60℃，酶解2.0h；再加入浆液重量0.15％的中性蛋白酶，55℃的条件下酶解2.5h；然后降温至45℃，加入浆液重量0.07％的肽酶，45℃条件下酶解1.5h；加入浆液重量0.08％的碱性蛋白酶，调节pH值至8.5，45℃条件下酶解2.5h；加入浆液重量0.15％的胶原酶，调节pH值至7.0，45℃条件下酶解2.5h。
S5、灭活处理：将酶解液在95℃水浴下灭酶活性18min，得到灭酶酶解液。
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；其中离心机的转速为4000/min。
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到60℃，调节pH为6，加入酶解液重量2％的改性活性炭，超声搅拌15min，过滤，得到滤清液；其中，改性活性炭的制备方法为：按料液比为1:10g/mL将活性炭放入浓度为1.0M的氢氧化钠溶液中浸泡48h，然后用去离子水快速洗涤3次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在80℃下搅拌30h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理，控制滤清液的pH值为5.0，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为30min。
所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
纳滤处理的过程具体为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
实施例4
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌30min后静置5.5h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗3次；其中氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1.8％，水的加入量为鱼皮质量的3.5倍。
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入3.5倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：先加入浆液重量0.18％的风味蛋白酶，调节pH值至7.5，将浆液加热至65℃，酶解2.5h；再加入浆液重量0.18％的中性蛋白酶，60℃的条件下酶解3h；然后降温至50℃，加入浆液重量0.09％的肽酶，50℃条件下酶解2h；加入浆液重量0.09％的碱性蛋白酶，调节pH值至8.8，50℃条件下酶解3h；加入浆液重量0.18％的胶原酶，调节pH值至7.0，40℃条件下酶解3h。
S5、灭活处理：将酶解液在100℃水浴下灭酶活性20min，得到灭酶酶解液。
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；其中离心机的转速为4500r/min。
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到65℃，调节pH为6.5，加入酶解液重量2.5％的改性活性炭，超声搅拌20min，过滤，得到滤清液；其中，改性活性炭的制备方法为：按料液比为1：11g/mL将活性炭放入浓度为1.1M的氢氧化钠溶液中浸泡50h，然后用去离子水快速洗涤3次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在85℃下搅拌35h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理，控制滤清液的pH值为5.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为45min。
所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
纳滤处理的过程具体为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
实施例5
一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌30min后静置6h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗3次；其中氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的2％，水的加入量为鱼皮质量的4倍。
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入4倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：先加入浆液重量0.2％的风味蛋白酶，调节pH值至-7.5，将浆液加热至65℃，酶解2.5h；再加入浆液重量0.2％的中性蛋白酶，60℃的条件下酶解3h；然后降温至50℃，加入浆液重量0.1％的肽酶，50℃条件下酶解2h；加入浆液重量0.1％的碱性蛋白酶，调节pH值至9，50℃条件下酶解3h；加入浆液重量0.2％的胶原酶，调节pH值至7.0，50℃条件下酶解3h。
S5、灭活处理：将酶解液在100℃水浴下灭酶活性20min，得到灭酶酶解液。
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；其中离心机的转速为5000r/min。
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到70℃，调节pH为7，加入酶解液重量3％的改性活性炭，超声搅拌20min，过滤，得到滤清液；其中，改性活性炭的制备方法为：按料液比为1:12g/mL将活性炭放入浓度为1.2M的氢氧化钠溶液中浸泡50h，然后用去离子水快速洗涤3次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在85℃下搅拌35h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理，控制滤清液的pH值为5.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为60min。
所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
纳滤处理的过程具体为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明的范围内。本发明要求的保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
Claims (10)
1.一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、原料准备：取新鲜鱼类采集鱼皮，将鱼皮洗净，沥干鱼皮表面的水，将鱼皮切碎；
S2、脱脂处理：往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水，搅拌20-30min后静置4-6h，滤去水，对鱼皮进行脱脂处理，脱脂结束将鱼皮冲洗2-3次；
S3、酶解预处理：向脱脂的碎鱼皮中加入2-4倍碎鱼皮质量的去离子水，打浆并混合，得到浆液；
S4、酶解处理：向浆液中加入蛋白酶进行酶解得到酶解液；
S5、灭活处理：将酶解液进行灭酶活性处理，得到灭酶酶解液；
S6、离心处理：将灭酶酶解液置于离心机中进行离心，取上清液；
S7、脱色处理：利用脱色剂对上清液进行脱色处理；
S8、去腥处理：利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理；
S9、纳滤处理：采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理，得到小分子蛋白酶解液；
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩，喷雾干燥，得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
2.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1-2％，水的加入量为鱼皮质量的2-4倍。
3.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S4中，酶解的具体过程为：先加入浆液重量0.1-0.2％的风味蛋白酶，调节pH值至6.5-7.5，将浆液加热至55-65℃，酶解1.5-2.5h；再加入浆液重量0.1-0.2％的中性蛋白酶，50-60℃的条件下酶解2-3h；然后降温至40-50℃，加入浆液重量0.05-0.1％的肽酶，40-50℃条件下酶解1-2h；加入浆液重量0.05-0.1％的碱性蛋白酶，调节pH值至8-9，40-50℃条件下酶解2-3h；加入浆液重量0.1-0.2％的胶原酶，调节pH值至7.0，40-50℃条件下酶解2-3h。
4.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S5中，灭活处理的过程为将酶解液在90-100℃水浴下灭酶活性15-20min。
5.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S6中，离心机的转速为3000-5000r/min。
6.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S7中，脱色处理的具体过程为:将上清液升温到50-70℃，调节pH为5-7，加入酶解液重量1-3％的改性活性炭，超声搅拌10-20min，过滤，得到滤清液。
7.根据权利要求6所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述改性活性炭的制备方法为:按料液比为1:8-12g/mL将活性炭放入浓度为0.8-1.2M的氢氧化钠溶液中浸泡45-50h，然后用去离子水快速洗涤2-3次，再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中，在75-85℃下搅拌25-35h，取出活性炭干燥，即得改性活性炭。
8.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S8中，去腥处理的过程为：控制滤清液的pH值为4.5-5.5，将滤清液置于去腥树脂中，滤清液在去腥树脂中停留的时间为15-60min。
9.根据权利要求8所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
10.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法，其特征在于，所述步骤S8中，纳滤处理的过程为：将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜，第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿，再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜，第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿，被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿，为小分子蛋白酶解液。
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