CN105434225B - 一种稻草复合酶液及其在皮肤护理及化妆品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种稻草复合酶液及其在皮肤护理和化妆品中的应用。本发明的稻草复合酶液是一种多酶体系,以稻草为原料,通过发酵、超声水解、离心分离等步骤制得,具有催化活性高、催化效率高、催化效果佳的特点;该稻草复合酶液还可以进一步精炼成精炼复合酶。本发明的稻草复合酶液或精炼复合酶可直接用于皮肤的日常清洁或患有水肿、烫伤、皲裂、痱子、湿疹等症状皮肤的护理,或添加到皮肤日常清洁用品、皮肤护理剂、化妆品中;其制备过程的副产物草蓉可用作面膜材料,草渣可与有机肥料混合用于制备植物育苗基质。本发明的稻草复合酶液pH7~7.5,比重0.95~0.98,呈咖啡色并带有松香、檀香味,制作方法简单,制作过程环保无污染、成本低。

Description

一种稻草复合酶液及其在皮肤护理及化妆品中的应用
技术领域
本发明涉及一种天然植物提取液及其应用方式,具体是一种稻草复合酶液及其在皮肤护理及化妆品中的应用。
背景技术
稻为禾本科植物,是一类重要的谷类作物,除了提供作为粮食的大米,其加工产物稻草、稻根、米糠也具有其他的不同用途。
稻去除稻谷后,为稻草。稻草的主要化学成分为纤维素、半纤维素、木质素、灰分,根据相关化学分析发现稻草中的灰分含量约10~17%,聚戊糖含量约18~23%,木质素含量约8~15%,纤维素含量则大约在25~42%。在我国,稻草产地主要有江苏、浙江、河北、安徽、辽宁等省份。稻草的主要利用方式目前常见的是用于燃料燃烧、酿酒、造纸、饲料、制炭黑、覆盖保温材料、结绳索、铺垫材料等。例如,利用稻草制作燃料乙醇,即将稻草在发酵水解,纤维素经纤维素酶降解成葡萄糖,再经据秸秆菌等菌体发酵,制成酒精。
稻根是稻草草根,稻根是多糖体,其中含有维生素pp、烟酰胺、植酸等,日本用稻根提取物制作稻根皮肤化妆水并申请了专利;稻谷去壳后的米糠,可提取获得米糠溶剂,其中含有甾体类化合物,维生素,类脂化合物等;被称为“神仙水”的知名化妆品牌的SK II LXP系列是将大米经过严格的发酵、提炼而成,该系列产品可提供肌肤以养分,调理肌肤天然机能,有修复受损肌肤组织、强化肌肤结构,达到固本培元的效果。从植物生理学角度来看,稻根吸收了土壤里的水分和养料,稻草在光合作用下把水分和生长养料输送到生长的花穗、开花,结果,最终形成稻谷,稻谷经过去壳加工成米,因此,稻根、米糠、大米中对肌肤有益的养分实际上在稻草中都含有,只是百分比不同。
对稻草化学成分及其在化妆品领域的关联已经有了大量的文献报道。纤维素是细胞壁的主要成分,是由β-D葡萄糖以β-1,4苷键连接而成的高分子化合物,纤维素在纤维素酶的作用下可降解生产纤维二糖。纤维二糖是一种多糖体,且为四级结构的多糖。这类四级结构多糖在生物体内起到传递资讯的功能,如有不均一多糖,可以通过共价键与蛋白质构成蛋白聚糖,发挥生物学功能,作为机体润滑剂、识别外来组织的细胞、血型等。研究表明,1,4-β-D葡萄糖含量高的多糖具有明显的抗肿瘤活性,多糖能从整体上提高机体的免疫功能,还可以有抗溃疡、清除自由基、延缓细胞衰老的作用。
日本前田浩明教授在其《发酵古代米》一书中提出,利用糙米中的半纤维经过水解后,成为半纤维素水解物——寡糖。半纤维素寡糖是改善血清胆固醇与血糖、增强免疫机体、医治肠胃癌,效果明显,强化身体的抗氧化作用,可预防老化,保持年轻。《现代化妆品生物技术》一书中记载,水解酶制剂提取液中的蛋白水解酶是皮肤养分精华,可使得皮肤表面细胞蛋白质分子断裂水解,有利于除去皮肤表面老化组织,与解脂酶共同作用,其作用更强烈、快速,皮肤的表面组织得到更新。脂肪酶,能促进脂肪水解,在化妆品中添加脂肪酶有益于粉刺等多余脂肪物质的消除。
《现代化妆品》记载SILAB最近研究的基于水稻的二肽、三肽具有刺激纤维细胞增殖、促进细胞恢复和胶原制造能力,可有效减少眼尾纹。同时,该文献还记载,细胞生长因子是一条刺激细胞增殖的多肽类物质,它是通过与特意的高亲和细胞膜上的受体结合而起作用,当生长因子受体具有蛋白质启动酶活性时,生长因子作用于细胞,通过一系列传导,最终引起细胞内有关的增值基因表达,从而发挥其刺激作用,细胞生长因子包括表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、上皮修复因子。表皮细胞生长因子能促进皮肤细胞的新陈代谢,延缓肌肤衰老作用,碱性成纤维细胞因子是一种肽结构的蛋白质,含有155个氨基酸,是人体中胚层和精神外层组织的分裂原,对各种组织的损伤有显著修复作用,可治疗烫伤、溃疡等。bFGF可诱导皮肤微血管形成、发育和分化,促进弹性纤维细胞的发育、增强其功能,促进神经细胞及表皮细胞生长和神经纤维的再生,无毒无刺激,无致毒副作用,也非致敏源,安全性极高。
《绿色日用品化学》中提及,烟酸(烟酸胺)属于B族维生素,是人体和动物不可缺少的营养成分,能与体内蛋白质结合辅酶参与机体的氧化还原作用,促进新陈代谢过程,是治疗皮肤及精神性障碍的药物。另外,人体全身的角质细胞日夜不断地更新脱落,需要大量的补充,当烟酸缺乏时皮肤就发生粗糙、皮疹等,烟酸还具有抗衰老、美白的功效,它不是通过抑制黑色素颗粒的形成,而是当部分黑色素不可避免的达到皮肤表面,烟酸胺能促进神经细胞及表皮细胞生长和神经纤维的再生,通过加速皮肤细胞更新,从而促进含有黑色素的细胞脱落,从内到外实现改善肤质,净白肌肤的效果。
世界化妆品牌评论主席、美国顶级化妆师拉培罔在其著作《带着我去化妆品柜台》指出,烟酸胺是细胞沟通因子可以使皮肤维持正常状态,医学把这一成分成为细胞信号传导物质。这些物质能指令皮肤细胞维持正常状态,或是能组织抗氧化物质对皮肤的改善功能,一般的皮肤是完整细胞内实现自我更新,即使遭到破坏细胞增生繁殖,那细胞机构变得扁平不规则时,由于细胞形态畸形,它的功能也就变得糟糕。这就需要细胞沟通因子,比如烟酸胺和三磷酸腺苷来修复。每一个细胞都有数量繁多的接收物质,这些接收器接受细胞资讯接收线圈,针对特定的接收器物质出现时它会自己接收资讯,并把资讯传递给细胞。对皮肤来说细胞沟通因子会指令细胞开始像健康皮肤细胞那样形事,如果细胞接收了资讯,它会把同样的资讯连续传递给周围的细胞。只要有空间的接收器和事宜的信号,众多的有益资讯沟通和传递就会发生。
人体的皮肤是与外界环境接触最紧密的一层保护层。受到外部紫外线、空气、灰尘等的影响,皮肤表面的细胞发生角质层的老化,形成死皮。死皮是指皮肤表面上寄存的死亡角质细胞残骸,许多皮肤疾病都与角质化不正常有关,陈腐角质化细胞的堆积会使得皮肤粗糙暗淡无关并形成细小颗粒,还会引起角质增厚,产生一系列皮肤病。
现有的沐浴露、洗面奶等清洁用品,只能清除皮肤表面的部分油脂,而对于皮肤的老化角质,往往清洁效果不理想。有些清洁产品通过在配方中添加细微的颗粒,在使用该类产品时,通过颗粒的物理摩擦作用去除过多过厚的角质层,虽然可以达到一定的深层清洁作用,但长期使用此类产品,则会造成皮肤的过度清洁,使得皮肤真皮受到伤害,加速皮肤的老化。
如何进一步充分利用稻草中的养分,是实现稻草资源在皮肤护理、化妆品领域的最大化利用的突破口之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种以农业废弃物稻草为原料,通过发酵、水解、离心分离、消毒等步骤提取得到的稻草复合酶液,该稻草复合酶液是一种多酶体系,具有催化活性高、催化效率高、催化效果佳、酶活时间长的特点,该稻草复合酶液还可以进一步精炼成精炼复合酶;该稻草复合酶液或精炼复合酶可直接用于皮肤的日常清洁,或患有水肿、烫伤、皲裂、痱子、湿疹等症状皮肤的护理,或作为成分之一添加到皮肤日常清洁用品、皮肤护理剂、化妆品中;其制备过程的副产物草蓉可用作面膜材料,草渣可与有机肥料混合用于制备植物育苗基质。该稻草复合酶液的制备方法简单、制备过程环保、制备成本低。
本发明的技术方案如下:一种稻草复合酶液,其制备方法包括如下步骤:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中10~24小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在65~75%;
(3)将用量为湿草料质量5~8%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,以塑料薄膜或加盖密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,辅以超声处理,进行水解,水解反应总时间40~60小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度65~75%,pH8~8.5;所述混合容器设置有排气装置;
(4)水解反应结束,取纯净水或清洁山泉水,按照体积比1:1与水解后的湿草料混合,并加入混合物质量0.2~0.4%的氯化钠,搅拌均匀,加入混合容器中,得混合湿料;将混合湿料装入纱布袋中,经离心分离,获得滤液和草渣;所述离心分离条件是:800~3000r/分钟的转速下离心5~15分钟;
(5)将滤液加热至75~80℃,经消毒10~20分钟,收集巴氏消毒过程中漂浮于滤液表面的细小纤维,然后将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.8~1%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌5~20分钟,混合均匀,置于深色或棕色玻璃容器中,密封,阴凉处静置24~48小时,再经过120目滤过,即得复合酶液。
进一步的,所述复合酶液在制备时,所述步骤(3)的超声处理,具体处理方法是:将混合容器放入恒温水浴后,在20~40kHz下超声处理10~30分钟,再进行水解反应;
更进一步的,所述复合酶液在制备时,所述步骤(3)的超声处理,具体处理方法是:将混合容器放入恒温水浴后,先在30~50kHz下超声处理5~10分钟,进行水解反应10~20小时,再在40~60kHz下超声处理5~10分钟,再进行水解反应30~40小时。
所述排气装置可以是一根或者是若干根直径2~5cm、两端开口的排气管组成,排气管一端插入湿草料中,排气管另一端直接通向大气,另一端的截面高于塑料薄膜或盖10~20cm。所述排气装置不限于上述的排气管的形式,排气装置应可将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应。
进一步的,可将上述技术方案步骤(3)获得的水解后的湿草料进一步精炼,获得精炼复合酶:
(1)将水解后的湿草料直接置于纱布袋中,以转速1000~5000r/分钟离心脱水10~30分钟,得滤液及草渣,将滤液在75~80℃巴氏消毒10~20分钟,将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.05~0.15%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌5~20分钟混合均匀,静置3~4小时,取上清液;
(2)取上清液,浓缩至含水量为20%,加入5~6倍体积的乙醇溶液,搅拌0.5小时,复合酶上浮,静置,分离,取上层上浮物质,置于小口棕色瓶内,将瓶口敞开置于消毒室内静置12小时,至其中的乙醇全部挥发,获得精炼复合酶或乙醇全部挥发后22~30℃低温烘干,保存。
所述乙醇溶液优选体积分数95%的乙醇溶液。
本发明所述复合酶液或精炼复合酶可以水稀释后直接用于皮肤的日常清洁,或用于制备沐浴露、香皂、洗手液等皮肤日常清洁用品。
本发明所述复合酶液或精炼复合酶可以水稀释后直接用于患有水肿、烫伤、皲裂、痱子、湿疹、毛周角质化、黑色素沉积等症状的皮肤的处理,或用于制备治疗水肿、烫伤、皲裂、痱子、湿疹、毛周角质化、黑色素沉积等症状的皮肤护理剂。
所述的皮肤日常护理产品或皮肤护理剂包括了婴儿用品,在制备时,可以根据产品配方或不同的肤质、不同人群的特点,加入甘油和其他天然功能性添加剂使产品更具有特殊需求等其他功能。
本发明所述复合酶液或精炼复合酶可作为化妆品添加剂。
本发明所述草蓉的应用方式可以是将其作为面膜的制作材料,如采用现有工艺将草蓉制成面膜纸,具有天然环保、容易降解的特点。
本发明所述的草渣可与有机肥料混合后用作制备植物育苗基质的材料。
本发明的复合酶液,直接使用时,可以是如下几种方式,使用说明如下。
1、清洁皮肤:取复合酶液与水按照体积比1:60~130的比例混合进行沐浴或泡澡,辅以搓洗,可将死亡角质层及污垢去除,增加皮肤表面免疫力和抗氧化功能。经发明人4年使用经验表明,按照1:60比例使用,酶液中酶的活性较高,增强皮肤新陈代谢的能力较强,沐浴完后身体暖和,人会感到兴奋,较难入睡,这对于老弱多病体质较好;但对于一般人群,建议采用1: 130的比例,此浓度的复合酶液可以抑制酶的活性,既可以达到清洁皮肤的效果,又不至于因酶活力较强带来的新陈代谢过旺,难以入睡的情况。
2、改善皮肤颜色:取新鲜制备复合酶液与温水按照体积比1:30的比例混合,浸泡20~25分钟,每天2~3次,直至患处皮肤颜色变淡。
3、去水肿:取复合酶液,用水按照1:30的体积比将其稀释,将水肿患处浸泡在稀释液中20分钟。浸泡后擦干,可看到水肿皮肤表面有小皱纹,不显排汗开始,6~8小时后,水肿基本消失。
4、去烫伤烧伤疤痕:取复合酶液按清洁皮肤所用的沐浴浓度泡洗患处,使用1~3个月;对于长时间存在的疤痕,想要一次去除,对皮肤的恢复功能不利,采用沐浴浓度处理可以先冲洗至疤痕逐渐扁平,不凸出皮肤表面,颜色变淡后,可使得皮肤光滑。
本发明相对于现有技术的有益技术效果如下:
(1)本发明所获得的稻草复合酶液是一种天然的秸秆菌水解酶液体系,它是一种多酶体系,其中含蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶,还含有β-1,4苷键结合的葡萄糖纤维素二糖、半纤维素寡糖,相当于四级结构的酶,它是由特定三级结构肽键通过非共价键形成大分子体系组合,即使被广泛折叠,仍结构紧密的多肽;此外,还含有多种维生素,特别是维生素pp(烟酸)这一种具有保护皮肤新陈代谢、增强皮肤保湿、促进皮肤修复的成分。
(2)从酶催化机制来看,多酶体系中,每一种酶分别催化各自的反应,所有反应依次连接构成一个代谢途径或代谢途径的一个部分,由于连串反应在高度有序的多酶复合体内完成,反应效率非常高,多酶复合体集不同催化活性于一身,当受体的形态不同,表现不同催化作用;当底物形态改变,酶的活性受到激发,酶的自身基因调节功能随之变化,还能使催化连续反应的活性中心邻近化而提高催化率;因此,本发明的多酶体系为纯天然体系,具有催化活性高、催化效率高、催化效果佳的特点。
(3)传统稻草发酵,容易产生类似于牛粪、牛尿的臭味,现有技术通过多层次过滤、采用活性炭、稀释等处理都无法避免臭味的产生,影响其使用;而本发明的复合酶液的制造工艺可使得发酵后的酶液无该臭味,酶液的pH为7~7.5,比重为0.95~0.98,呈中咖啡色并带有松香、檀香的味道,酶活可保持5~6个月。
(4)本发明复合酶液或精炼复合酶用于沐浴时,复合酶液中的蛋白酶、脂肪酶等与皮肤受体起催化反应,使堵塞皮肤毛囊的皮肤表面堆积的凋亡细胞与多余的皮肤皮脂混合物从皮脂腺开口处除去,使皮肤呼吸顺畅,新陈代谢增强,微循环活跃,预防微血管瘀堵;既可以起到洁净皮肤表皮的作用,由于皮肤微循环作用的增强,还可以进一步提高皮肤的免疫力;沐浴后皮肤爽滑,身体感觉温暖,身心舒适。
(5)对糖尿病、肾病患者,一周4~5次采用本发明的复合酶液进行沐浴,由于复合酶液中还含有烟酰胺、纤维多糖、半纤维素寡糖等,在复合酶的作用下,可以通过促进患者皮肤的新陈代谢、血液循环,促进其顺畅排汗、减轻肾脏负担,起到一定的保健作用;尤其对具有粗糙、破损、有顽疾的皮肤和患有长期、慢性病的患者的保健效果尤为显著。
(6)皮肤呼吸不畅直接影响皮肤微血管血液中供给皮下微血管的血液氧气不足,当血液中低氧或缺氧时,皮肤颜色加深,通过本发明的稻草复合酶液进行浸泡,可以使得皮肤表面堆积的老化角质层和污垢去除,皮肤毛孔打开,恢复皮肤的呼吸,促进新陈代谢及血液循环,最终使得皮肤颜色获得改善。
(7)水肿是皮下组织空隙充满比正常时更多的液体,组织间隙与血管之间液体交换发生不平衡,水肿从皮肤表面来说是皮肤不能排泄、没有不显排汗、排不出汗造成;通过复合酶液的作用调节了皮肤的细胞组织液和血管纸件交换护肤平和,使皮肤内分泌、排泄得到恢复,水肿得到改善。
(8)烫伤和烧伤是因高温伤至皮肤与肌肉神经组织;在烫伤过程中,表皮细胞受到刺激,形态发生变异,产生了伤痛、红、肿等现象,这时,全浓度复合酶液作用于烫伤、烧伤的皮肤受体的变化,直接对复合酶也产生响应,酶的细胞生长调节基因功能也跟着变化,如复合酶液中的蛋白质酶不再是使皮肤表面细胞蛋白质分子键断裂,而是成为多肽蛋白酶、氨基酸的精华养分;复合酶中具有刺激纤维增殖,促进细胞恢复和胶原制造能力的二肽、三肽、纤维素二糖、皮肤传导因子烟酸胺这些高效信息传递唤醒了皮肤中的表皮生长因子EGF、碱性成纤维生长因子bFGF,给它们指令进行修复。此外,复合酶液中多肽、纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶会合为一体,集不同催化活性于一身,依次排列连续反应的活性中心邻近化,而提高催化率。在短短的20-30分钟可体现这一过程,使得烫伤皮肤的神经系统的疼痛受器,受温器,触觉受器从变异状态逐渐恢复到完好状态,使得红肿、疼痛消失。为了保证酶的活性,可经常更换新鲜的全浓度复合酶液的原液进行处理,处理后的皮肤的感温器快速把皮肤所受的热量外传,一直浸泡到无红、肿、疼痛,修复完毕,真正达到修复肌肤结构,达到固本培元的效果。对于烫伤36小时或更长烫伤者,也可以浸泡,浸泡处理完后,就不会流脓,并开始结痂,皮肤好后没有疤痕,不会发红,皮肤光滑平整,对烫伤儿童很有益。
稻草复合酶液中的多肽、多糖等可通过其与细胞膜上的受体结合,促进细胞因子增殖,使表皮生长因子EGF、碱性成纤维生长因子bFGF修复表皮细胞,最终校正变异细胞的形态,再在浸泡的过程中复合酶液中的蛋白质酶、脂肪酶、纤维素多糖等营养的供给,促进细胞因子的基因表达,使得受损皮肤细胞被快速修复;而在烧伤时,复合酶液中的蛋白质酶起到提供养分精华的作用提供给细胞受体,通过一系列作用,唤醒表皮生长因子EGF、碱性成纤维生长因子bFGF、上皮细胞修复因子共同参与积极作用于患处,EGF促进细胞的新陈代谢,bFGF是人体中胚层和神经外层组织的分裂元,通过巨噬细胞介导分泌活性物质促进细胞复制与诱导微血管内细胞形成发育和分化,促进神经纤维细胞的再生,刺激新血管生成,最终合成胶原蛋白,使患处皮肤组织重新愈合、生成,复合酶液中的纤维二糖、半纤维素寡糖起到抗溃疡、消炎、抗氧化、提高免疫力的作用。
枯草芽孢杆菌俗称枯草杆菌,细胞大小为0.7~0.8×2~3微米,直杆状,单个着色均匀,无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏染色阳性。芽孢小于或等于细胞宽,椭圆至圆柱状,中性至近中性,壁薄,菌落粗糙,不透明不闪光,泛白色或微黄色。革兰氏阳性菌的细胞持有磷壁酸,这是革兰氏阳性菌细胞壁特有成分,其生理功能有:
(1)带负电荷,可与环境中Mg2+等阳离子结合成酶,维持高活性的需要;
(2)保持革兰氏致病菌与宿主之间的粘性;
(3)赋予革兰氏阳性菌以特异的表面抗原;
(4)提供某些噬菌体以特异吸附受体。
枯草杆菌的芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学物、抗静水压力等。芽孢的休眠能力十分惊人,在无任何代谢活力下,一般可以几年或几十年,更有2000年或更长时间仍保持芽孢生命的载体的存在。枯草杆菌中噬菌体存在因为它是一个宿主为单细胞的简单寄生物,噬菌体共六中类型,其中A类型中,芽孢杆菌属于SP-50,C类型中芽孢杆菌属于GA/1。吞噬细胞内含有丰富的溶酶体,其中含有水解酶,溶酶等多种酶类和其他杀菌物质。当病原微生物入侵时,吞噬细胞可在趋化因子和粘附分子的作用下穿过血管壁到达感染局部,吞入病原体形成吞噬体,进而与溶酶体融合为吞噬溶酶体,将细胞内的病体杀灭。然后,溶酶体中的蛋白水解酶、多糖酶、核酸酶、酯酶等消化分解,最后将不能消化的残渣排出体外。革兰氏阳性菌细胞壁是肽聚糖结构,它的肽聚糖层厚20-80nm,由40层左右的网状分子组成。它是生产多肽必要先决条件,那么稻草复合酶的多肽的存有是无疑义的了。枯草杆菌可生产各种制剂,如α-淀粉酶、蛋白酶、青霉素酶等;可生产核苷的多种药物原料,此类药物治疗病毒性疾病,提高机体免疫功能;可生产某些抗生素;可生产各种多肽、蛋白质药物和酶。
根据枯草杆菌的芽孢的耐热性,本发明所述步骤(5)的稻草复合酶液的消毒温度也可以提高到100℃,消毒时间15min,代替巴氏消毒,使得稻草复合酶液消毒更彻底,使用更为安全。
本发明是将枯草芽孢杆菌用于将用量为湿草料质量5~8%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合共同发酵。所采用的枯草芽孢杆菌可以是市售的枯草芽孢杆菌菌粉产品。
本发明的稻草复合酶液在用于浸泡去水肿时,时皮肤内组织间液体从带正电荷变成带负电荷。这是由于酶液中带负电荷的磷壁酸起了作用,因此可以获得较好的快速消肿效果。在将稻草复合酶液长期的用于沐浴时,沐浴过冲可以使得皮肤患处,如烧伤治愈后凸出、泛红的疤痕逐渐平复光滑、颜色变淡接近正常皮肤。这是由于革兰氏阳性菌特有的磷壁酸提供的某些噬菌体以特异吸附受体的作用,吸附使噬菌体吞噬皮肤表面血柱与不正常组织,长期作用,使得皮肤趋于光滑。
在烧伤皮肤上使用稻草复合酶液浸泡后,伤口不会化脓流脓液,过2~3天后在烧伤处的边缘有较厚的黑色颗粒排出,并且很快从皮肤脱落,没有疤痕。这是由于革兰氏阳性菌特有的磷壁酸与宿体之间的粘性,有特异的表面抗原杀菌,提供某些噬菌体以特异吸附受体,同时噬菌内细胞含有丰富溶酶体,水解酶,溶菌酶等多种酶类和其他杀菌物质,这些活性成分吞入病原体然后与溶酶体融合为吞噬溶酶体,形成吞噬体,然后经溶酶体中的蛋白水解酶、多糖酶、核酸酶、酯酶等消化分解,不能消化水解的残渣则排出体外,使得皮肤烧伤患处恢复平滑。如没有磷壁酸与噬菌体作用,那些不能消化的残渣就留在患处表面,使得经烧伤治愈的皮肤突出于正常皮肤表面,并且组织发硬。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明,这些实施例仅用来说明本发明,并不限制本发明的范围。
实施例1采用以下步骤制备复合酶液:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中12小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在70%;
(3)将用量为湿草料质量6%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,以塑料薄膜密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,在30kHz下超声处理20分钟,再进行水解反应48小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度70%;在混合容器中安放5根直径5cm、两端开口的排气管,排气管一端插入湿草料中,另一端的截面高于塑料薄膜20cm,排气管另一端直接通向大气,将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应;
(4)水解反应结束,取纯净水,按照体积比1:1与水解后的湿草料混合,并加入混合物质量0.3%的氯化钠,搅拌均匀,加入混合容器中,得混合湿料;将混合湿料装入纱布袋中,1500r/分钟的转速下离心10分钟,经离心分离,获得滤液和草渣;
(5)将滤液加热至75~80℃,经消毒10分钟,收集巴氏消毒过程中漂浮于滤液表面的细小纤维,然后将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.8%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌10分钟,混合均匀,置于深色或棕色玻璃容器中,密封,阴凉处静置24小时,再经过120目滤过,即得复合酶液。
实施例2采用以下步骤制备复合酶液:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中10小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在65%;
(3)用量为湿草料质量5%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,以塑料薄膜密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,在40kHz下超声处理30分钟,再进行水解反应40小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度65%;在混合容器中安放一根或者是若干根直径5cm、两端开口的排气管,排气管一端插入湿草料中,另一端的截面高于塑料薄膜20cm,排气管另一端直接通向大气,将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应;
(4)水解反应结束,取清洁山泉水,按照体积比1:1与水解后的湿草料混合,并加入混合物质量0.2%的氯化钠,搅拌均匀,加入混合容器中,得混合湿料;将混合湿料装入纱布袋中,800r/分钟的转速下离心15分钟,经离心分离,获得滤液和草渣;
(5)将滤液加热至75~80℃,经消毒20分钟,收集巴氏消毒过程中漂浮于滤液表面的细小纤维,然后将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入1%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌20分钟,混合均匀,置于深色或棕色玻璃容器中,密封,阴凉处静置24小时,再经过120目滤过,即得复合酶液。
实施例3采用以下步骤制备复合酶液:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中24小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在72%;
(3)用量为湿草料质量8%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,加盖密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,先在30kHz下超声处理10分钟,进行水解反应20小时,再在40kHz下超声处理5分钟,再进行水解反应40小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度70%;在混合容器中安放5根根直径2cm、两端开口的排气管,排气管一端插入湿草料中,另一端的截面高于盖20cm,排气管另一端直接通向大气,将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应;
(4)水解反应结束,取纯净水,按照体积比1:1与水解后的湿草料混合,并加入混合物质量0.4%的氯化钠,搅拌均匀,加入混合容器中,得混合湿料;将混合湿料装入纱布袋中,3000r/分钟的转速下离心5分钟;
(5)将滤液加热至75~80℃,经消毒10~20分钟,收集巴氏消毒过程中漂浮于滤液表面的细小纤维,然后将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.8~1%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌5分钟,混合均匀,置于深色或棕色玻璃容器中,密封,阴凉处静置48小时,再经过120目滤过,即得复合酶液。
实施例4采用以下步骤制备精炼复合酶:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中18小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在75%;
(3)用量为湿草料质量7%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,加盖密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,先在50kHz下超声处理5分钟,进行水解反应10小时,再在60kHz下超声处理10分钟,再进行水解反应30小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度68%;在混合容器中安放一根直径10cm、两端开口的排气管,排气管一端插入湿草料中,另一端的截面高于盖10cm,排气管另一端直接通向大气,将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应;
(4)将水解后的湿草料直接置于纱布袋中,以转速3000r/分钟离心脱水15分钟,得滤液及草渣,将滤液在75~80℃巴氏消毒10分钟,将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0. 15%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌10分钟混合均匀,静置3小时,取上清液;
(5)取上清液,加入5倍体积的体积分数95%的乙醇溶液,搅拌0.5小时,复合酶上浮,静置,分离,取上层上浮物质,置于小口棕色瓶内,将瓶口敞开置于消毒室内静置12小时,至其中的乙醇全部挥发,获得精炼复合酶。
实施例5采用以下步骤制备精炼复合酶:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中24小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在75%;
(3)用量为湿草料质量5%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,加盖密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,先在50kHz下超声处理5分钟,进行水解反应10小时,再在60kHz下超声处理10分钟,再进行水解反应30小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度68%;在混合容器中安放一根直径10cm、两端开口的排气管,排气管一端插入湿草料中,另一端的截面高于盖10cm,排气管另一端直接通向大气,将水解过程的气体排出混合容器,避免水汽进入混合容器中,影响水解反应;
(4)将水解后的湿草料直接置于纱布袋中,以转速1000r/分钟离心脱水30分钟,得滤液及草渣,将滤液在75~80℃巴氏消毒20分钟,将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.05%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌20分钟混合均匀,静置4小时,取上清液;
(5)取上清液,加入6倍体积的体积分数95%的乙醇溶液,搅拌0.5小时,复合酶上浮,静置,分离,取上层上浮物质,置于小口棕色瓶内,将瓶口敞开置于消毒室内静置12小时,至其中的乙醇全部挥发后22~30℃低温烘干,保存,获得精炼复合酶。
实施例6 具体应用实例。
李某,女,72岁,小腿皮肤面积因硝酸淋伤面积25~30%,经医疗处理后,患处植皮四周有突出的疤痕,疤痕使得两脚行动不能自如,只有经过物理康复之后疤痕松动才能自然行走,且疤痕表面坚硬,神经感觉很差,且患处疤痕的皮肤均为红色,影响美观。患者采用实施例1制备的稻草复合酶液,与水按照体积比1: 130的比例混合稀释后用于淋浴,并用未稀释稻草复合酶液原液涂抹患处皮肤,连续两个月后,发现疤痕颜色变淡,皮肤颜色接近自然肤色,且部分患处肌肤表面平滑。
王某,65岁,患有糖尿病和肾病,身体皮肤较为粗糙。患者采用实施例1制备的稻草复合酶液,与温水按照体积比1: 130的比例混合稀释后用于淋浴,每星期4~5次,每次淋浴后,感觉排汗顺畅,身心感觉舒适,坚持以此方法淋浴1个月,在淋浴后2.5小时测量血糖,通常测定值较淋浴前降低。
李某,28岁,属于皮脂分泌较旺盛现象,面部有青春痘及粉刺,四肢有毛周角质化现象,患者采用实施例1制备的稻草复合酶液,与温水按照体积比1: 120的比例混合稀释后用于面部清洁及淋浴,每星期2~3次,坚持1个月,面部青春痘及粉刺见少,脸部无泛油光,毛周角质化减轻。

Claims (5)

1.一种稻草复合酶液,其特征在于:其制备方法包括如下步骤:
(1)选取当季收割的新鲜稻草,除去杂质,在室外阳光下晒2~3天,然后清水洗净,沥干水分,粉碎成10~15mm的碎草料;
(2)将碎草料浸泡入pH 9~10的碳酸钙溶液中10~24小时,捞出,沥去多余溶液,得湿草料,控制湿草料的湿度在65~75%;
(3)将用量为湿草料质量5~8%的枯草芽孢杆菌与湿草料混合均匀,置于混合容器中,压实,以塑料薄膜或加盖密封;然后将混合容器整体放入恒温水浴中,辅以超声处理,进行水解,水解反应总时间40~60小时,得水解后的湿草料;水解过程中,控制湿草料温度36±2℃,湿度65~75%,pH8~8.5;所述混合容器设置有排气装置;
(4)水解反应结束,取纯净水或清洁山泉水,按照体积比1:1与水解后的湿草料混合,并加入混合物质量0.2~0.4%的氯化钠,搅拌均匀,加入混合容器中,得混合湿料;将混合湿料装入纱布袋中,经离心分离,获得滤液和草渣;所述离心分离条件是:800~3000r/分钟的转速下离心5~15分钟;
(5)将滤液加热至75~80℃,经巴氏消毒10~20分钟,收集巴氏消毒过程中漂浮于滤液表面的细小纤维,然后将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.8~1%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌5~20分钟,混合均匀,置于深色或棕色玻璃容器中,密封,阴凉处静置24~48小时,再经过120目滤过,即得复合酶液;所述复合酶液以水稀释后直接用于皮肤的日常清洁或用于制备皮肤日常清洁用品;
其中,所述步骤(3)的超声处理,具体处理方法是:将混合容器放入恒温水浴后,在20~40kHz下超声处理10~30分钟,再进行水解反应;所述步骤(3)的排气装置是由若干根直径2~5cm、两端开口的排气管组成,排气管一端插入湿草料中,排气管另一端直接通向大气,另一端的截面高于塑料薄膜或盖10~20cm。
2.根据权利要求1所述的复合酶液,其特征在于:所述步骤(3)的超声处理,具体处理方法是:将混合容器放入恒温水浴后,先在30~50kHz下超声处理5~10分钟,进行水解反应10~20小时,再在40~60kHz下超声处理5~10分钟,再进行水解反应30~40小时。
3.一种权利要求1所述的复合酶液的应用,其特征在于:所述复合酶液以水稀释后直接用于制备治疗水肿、烫伤、皲裂、痱子、湿疹、毛周角质化、黑色素沉积的皮肤护理剂。
4.一种权利要求1所述的复合酶液的应用,其特征在于:所述复合酶液作为化妆品添加剂。
5.一种精炼复合酶,其特征在于,以权利要求1所述步骤(3)水解后的湿草料采用以下步骤进一步精炼获得:
(1)将水解后的湿草料直接置于纱布袋中,以转速1000~5000r/分钟离心脱水10~30分钟,得滤液及草渣,将滤液在75~80℃巴氏消毒10~20分钟,将消毒后的滤液降温至45℃,再按质量配比,加入0.05~0.15%的广谱抗菌剂杰马BP,搅拌5~20分钟混合均匀,静置3~4小时,取上清液;
(2)取上清液,浓缩至含水量为20%,加入5~6倍体积的乙醇溶液,搅拌0.5小时,复合酶上浮,静置,分离,取上层上浮物质,置于小口棕色瓶内,将瓶口敞开置于消毒室内静置12小时,至其中的乙醇全部挥发,获得精炼复合酶或乙醇全部挥发后22~30℃低温烘干,保存。
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枯草芽孢杆菌的研究与应用;李明等;《东北农业大学学报》;20090930;第40卷(第9期);第111-114页 *

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