CN109486701B - 一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用，本发明所述的苯氧羧酸类除草剂降解菌为嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14844。嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32具有以苯氧羧酸类除草剂为唯一碳源和能源进行生长的能力，能够高效降解环境中的苯氧羧酸类除草剂。该菌株还能够适应较宽范围的pH值，在强碱性环境中仍然能够高效降解苯氧羧酸类除草剂，具有较强的环境适应性和广泛的应用潜力，能够在实践中用于苯氧羧酸类除草剂污染环境的生物修复。

Description

一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用
技术领域
本发明涉及环境污染的微生物修复技术领域，具体涉及一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用。
背景技术
苯氧羧酸类农药是世界上第一类商品化生产的选择性除草剂，于20世纪40年代开始投入使用，其代表性产品主要有2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)系列、2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)系列等，在使用时通常加工为盐类(如钠盐、二甲胺盐)和酯类(如丁酯、异辛酯)。在其投入使用的70余年来，由于其对阔叶杂草具有较好的防除效果，且成本低廉，苯氧羧酸类除草剂在全球范围得到广泛的应用。据中国农药统计资料记载，2012年中国的2,4-D原粉产量约5.3万吨，销售4.7万吨。尽管半衰期相对较短，苯氧羧酸类除草剂的长期大量使用对土壤和水体造成了严重的污染，因此，受污染环境的修复迫在眉睫。更重要的是，2,4-D的代谢产物2,4-二氯苯酚(2,4-DCP)是一种难降解高毒性的有机物，会给自然环境造成很大的危害。而且，有研究证实2,4-DCP能引起病理学症状，影响人体内分泌系统，已被美国环保局(EPA)和中国政府列入优先污染物行列。鉴于此，随着苯氧羧酸类除草剂的广泛使用，人们一直致力于研究其残留的控制和毒害的消除，相继开发出许多苯氧羧酸类除草剂降解和修复方法，如吸附、辐射等物理法，臭氧氧化、光催化氧化等化学法，以及活性污泥、生物膜、基因工程菌等生物法。其中，生物法尤其是微生物修复法以其高效、安全、廉价和无二次污染等突出优势而备受青睐。
目前，国内外对苯氧羧酸类除草剂的降解菌已有报道，苯氧羧酸类除草剂的降解菌包括假单胞菌、贪铜菌和肠杆菌等。专利CN 101402927公开了一株假单胞菌Pseudomonassp.Ld1(CGMCC No.2601)，其可以使土壤中10mg/kg的2,4-D丁酯农药残留量降低70％以上；CN 103740622公开了一株贪铜菌Cupriavidus campinensis BJ71(CCTCC No.M2014006)，该菌株21天对土壤中500mg/kg 2,4-D的降解率可达92％以上；CN 103173377公开了一株肠杆菌Enterobacter sp.SE08(CGMCC No.7016)，3天可以使无机盐培养液中500mg/L MCPA降解68.5％。然而，目前已报道的降解菌对于苯氧羧酸类除草剂的降解效率仍然较低，而且基本都是在比较温和的pH范围内生长，因此其实际应用受到限制。
发明内容
为解决现有技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用。
本发明提供一株能够高效降解苯氧羧酸类除草剂的嗜碱贪铜菌(Cupriavidusalkaliphilus)X32，所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32于2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为嗜碱贪铜菌Cupriavidus alkaliphilus，保藏编号为CGMCC No.14844。
嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32在LB固体培养基上单个菌落为白色至淡黄色，似黏液状，具有光滑凸起，边缘规则。经扫描电子显微镜观察，其单个细胞近似球状，直径约1μm。嗜碱贪铜菌X32为革兰氏染色阴性；VP试验阴性；接触酶、氧化酶、精氨酸双水解酶阳性；不能利用α-D-葡萄糖、D-麦芽糖、α-D-乳糖、蔗糖；能够利用D-果糖、L-乳酸、柠檬酸盐。化学敏感试验：对盐酸胍、萘啶酸、二甲胺四环素不敏感；对利福霉素SV、万古霉素、氨曲南敏感。
本发明提供的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
进一步地，本发明提供包含所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂。
本发明中，所述包含嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂可以为采用常规技术手段、加入菌剂制备领域允许的辅料制备得到的菌剂。
优选地，所述菌剂为液体菌剂或固体菌剂。
具体地，所述液体菌剂为包含所述嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌悬液或经处理的菌悬液；所述固体菌剂为包含所述嗜碱贪铜菌(Cupriavidusalkaliphilus)X32的菌悬液或经处理的菌悬液与吸附剂混合后制得。
所述经处理的菌悬液包括但不限于加入甘油处理的菌悬液。
所述吸附剂包括但不限于硅藻土、膨润土、白炭黑、活性白土、秸秆粉中的一种或多种。
根据实际需要，所述菌剂可以制备成粉剂或颗粒剂形式。
本发明所述的包含嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂的制备方法包括如下步骤：将所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32经培养制备为菌悬液；将菌悬液经处理制备为液体菌剂或固体菌剂。
具体地，所述培养为在25～35℃，pH为6.0～10.5的条件下进行。
优选地，所述培养为在28～32℃，pH为6.5～9.5的条件下进行。
本发明中，所述嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的培养可以采用微生物培养的常规培养基，如常规的含有碳源、氮源及无机离子的培养基，包括但不限于LB培养基，含有碳源和能源的基础无机盐培养基(MSM)等。
本发明所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32能够以苯氧羧酸类除草剂为唯一碳源和能源生长，具有高效降解苯氧羧酸类除草剂的活性，因此，本发明还提供所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或所述的包含嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂在如下任意一方面的应用：
(1)在降解苯氧羧酸类除草剂中的应用；
(2)在修复苯氧羧酸类除草剂污染的水体或土壤中的应用；
(3)在缓解苯氧羧酸类除草剂引起的植物药害中的应用；
所述植物包括但不限于玉米、小麦、水稻、高粱、棉花等。
(4)在制备环境污染治理剂或清洁剂中的应用。
苯氧羧酸类除草剂的分子结构中包含苯氧羧酸结构，可以分为两个系列，分别以2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)为代表化合物：一个系列以2，4-二氯酚为本体，包括2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯等，另一个系列以邻甲酚为本体，包括2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)、MCPA钠盐、MCPA异辛酯等。
本发明所述的苯氧羧酸类除草剂包括但不限于2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯、2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)、MCPA钠盐、MCPA异辛酯中的一种或多种。
本发明所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或所述的包含嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂的应用为将所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidusalkaliphilus)X32或将所述的菌剂添加至水体或土壤中。
具体地，所述应用中，嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或菌剂中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的添加量为1×105～1×109CFU/g水或土壤。
优选地，所述应用中，嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或菌剂中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的添加量为1×106～1×108CFU/g水或土壤。
本发明的有益效果在于：本发明通过科学的驯化和筛选，得到一株苯氧羧酸类除草剂高效降解菌——嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32。该菌株对于苯氧羧酸类除草剂的降解效率高，实验证明该菌株能够在2天内将水中500mg/L 2,4-D完全降解；在7天内将土壤中500mg/kg 2,4-D或MCPA完全降解，进而能够极大地缓解苯氧羧酸类除草剂引起的植物药害。嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32还能够适应较宽范围的pH值，在pH高达10.5的强碱性环境中依然能够进行苯氧羧酸类除草剂的高效降解。
本发明提供的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32菌株可以直接使用或者进一步加工制备成生物降解菌剂应用于苯氧羧酸类除草剂污染水体或土壤的生物修复，具有很好的应用潜力。
附图说明
图1为实施例1中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32在LB固体培养基上的菌落形态图。
图2为实施例1中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32在LB培养基上的扫描电子显微镜图。
图3为实施例2中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32在以500mg/L 2,4-D为唯一碳源和能源的MSM培养液中培养的菌株生长情况和2,4-D降解曲线，其中，CK代表对照组，样品代表接种嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的试验组。
图4为实施例2中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32在不同pH条件下对2,4-D的降解曲线。
图5为实施例3中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32对土壤中的2,4-D的降解曲线，其中，CK代表未接种嗜碱贪铜菌X32的对照组。
图6为实施例4中嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32对于玉米药害的缓解实验中玉米的长势情况图，其中A为不含2,4-D、未接种菌株X32的对照组的玉米长势；B为含100mg/kg 2,4-D、未接种菌株X32的对照组的玉米长势；C为不含2,4-D、接种菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)的对照组的玉米长势；D为含100mg/kg 2,4-D、接种菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)的试验组的玉米长势。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1嗜碱贪铜菌X32的驯化、筛选和分离
从河北省保定市河北农业大学污水沟采集污泥，在无菌条件下，取5g上述污泥样品加入100mL含50mg/L 2,4-D的基础无机盐培养液(MSM)中，30℃、150r/min恒温振荡培养。
MSM的成分如下(g/L)：K2HPO4 1.0，KH2PO4 1.0，NH4Cl 1.0，NaCl 1.0，MgSO4 0.2，CaCl2 0.02，去离子水补足至1L；pH约6.5，121℃高压蒸汽灭菌30min。
每隔一周，分别取上述培养液接种于含一定浓度2,4-D的新鲜MSM，逐渐增大驯化浓度，2,4-D浓度依次为100、200、300和500mg/L。
驯化一段时间后，利用高效液相色谱法(HPLC)检测培养液中2,4-D的浓度。结果发现，经过驯化后的污泥样品对2,4-D降解效果显著提升，3d即可将500mg/L 2,4-D完全降解；而未驯化的污泥样品7d最高仅能降解20％的2,4-D。表明该驯化样品中可能存在2,4-D高效降解菌群。采用稀释涂布平板法对该驯化后的污泥样品中的菌群进行分离，挑取单菌落纯化，共得到上百种细菌和真菌。对上述分离得到的55种细菌逐一进行2,4-D降解性能试验，最终筛选出一株能够高效降解苯氧羧酸类除草剂的菌株，命名为嗜碱贪铜菌(Cupriavidusalkaliphilus)X32。
嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32于2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为嗜碱贪铜菌Cupriavidusalkaliphilus，保藏编号为CGMCC No.14844。
菌株的形态鉴定：菌株X32在LB固体培养基上单个菌落为白色至淡黄色，似黏液状，具有光滑凸起，边缘规则，其培养形态如图1所示。经扫描电子显微镜观察的形态如图2所示，菌株X32单个细胞近似球状，直径约1μm。
菌株的生理生化鉴定：革兰氏染色阴性；VP试验阴性；接触酶、氧化酶、精氨酸双水解酶阳性；不能利用α-D-葡萄糖、D-麦芽糖、α-D-乳糖、蔗糖；能够利用D-果糖、L-乳酸、柠檬酸盐。化学敏感试验：对盐酸胍、萘啶酸、二甲胺四环素不敏感；对利福霉素SV、万古霉素、氨曲南敏感。
16S rRNA基因分子鉴定：采用细菌16S rRNA基因的通用扩增引物进行16S rRNA基因序列的PCR扩增，得到长度为811bp的16S rRNA基因序列(如SEQ ID NO.1所示)。根据菌株的形态学特征、生理生化特征、分子鉴定结果等实验数据综合分析，菌株X32被鉴定为嗜碱贪铜菌Cupriavidus alkaliphilus。
实施例2嗜碱贪铜菌X32在降解苯氧羧酸类除草剂中的应用
(1)菌株X32生长特性和降解特性试验
利用紫外-可见分光光度计测定样品的浊度OD600来表征菌体生长量，分析菌株利用苯氧羧酸类除草剂的生长特性。利用高效液相色谱法分析检测MSM培养液中2,4-D或MCPA的残留量，分析菌株对于苯氧羧酸类除草剂的降解特性。
将菌株X32在以500mg/L 2,4-D为唯一碳源和能源的MSM培养液中进行培养，初始pH为6.5，培养温度30℃，摇床转速150r/min，其生长和2,4-D降解特性如图3所示。结果表明：菌株X32能够利用2,4-D为唯一碳源和能源进行生长，在2d以内即可将500mg/L 2,4-D完全降解，菌株的OD600可达0.18。而未接种X32的对照组中2,4-D浓度基本保持不变，培养液仍为澄清。
MCPA和2,4-D同属苯氧羧酸类除草剂，将菌株X32接种于以500mg/L MCPA为唯一碳源和能源的MSM培养液中培养(初始pH为6.5，培养温度30℃，摇床转速150r/min)，结果表明：菌株X32能够利用MCPA为唯一碳源和能源进行生长，在3.5d以内可将500mg/L MCPA完全降解，菌株的OD600可达0.3。而未接种X32的对照组中MCPA浓度基本保持不变，培养液仍为澄清。
上述试验结果证明：菌株X32具有以2,4-D、MCPA等苯氧羧酸类除草剂为唯一碳源和能源进行生长的能力，能够显著降低所在环境中苯氧羧酸类除草剂的浓度，具有较大的应用潜力。
(2)菌株X32在不同pH条件下对苯氧羧酸类除草剂的降解试验
将菌株X32分别接种于以500mg/L 2,4-D为唯一碳源和能源的MSM培养液中，初始pH值分别为4.5、5.5、6.5、8.5、9.5、10.5和11.5，培养温度30℃，摇床转速150r/min。定期取样检测培养液中2,4-D的残留量，结果如图4所示。结果表明：在pH为6.5-9.5时，菌株X32正常生长，在4d以内可将500mg/L 2,4-D完全降解(pH为6.5时，在2d以内可将500mg/L 2,4-D完全降解)；而在pH为4.5、5.5和11.5时，菌株X32的2,4-D降解活性受到明显抑制，14d降解率分别约为15％、35％和0；值得注意的是，在pH高达10.5时，菌株X32仍然能够降解2,4-D，经过7d适应期后，降解率迅速提高，在14d即可将500mg/L 2,4-D完全降解。
上述试验结果证明：本发明提供的菌株X32能够耐受较宽范围的pH，特别是在pH较高的强碱性环境中仍然能够高效降解苯氧羧酸类除草剂，菌株的环境适应性能力强，应用范围广。
实施例3菌株X32在修复苯氧羧酸类除草剂污染土壤中的应用
X32接种菌液的制备：从X32平板上挑单菌落接种于以500mg/L2,4-D为唯一碳源和能源的MSM培养液中，培养温度30℃，摇床转速150r/min。培养2d后，采用平板菌落计数法进行计数，约为2×108CFU/mL。
MSM的成分如下(g/L)：K2HPO4 1.0，KH2PO4 1.0，NH4Cl 1.0，NaCl 1.0，MgSO4 0.2，CaCl2 0.02，去离子水补足至1L；pH约6.5，121℃高压蒸汽灭菌30min。
供试土壤取自中国农业大学西校区校园(北京市海淀区圆明园西路2号)，自然风干后过筛备用。对照组：A.未灭菌土壤+500mg/kg2,4-D；B.灭菌土壤+500mg/kg 2,4-D。试验组：C.未灭菌土壤+500mg/kg 2,4-D+菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)；D.灭菌土壤+500mg/kg 2,4-D+菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)。以上各组用灭菌的去离子水调节土壤含水量为20％。培养条件：温度30℃，自然光。
定期取样检测土壤中2,4-D残留量。测定方法：称取1g土样，加入3mL去离子水，涡旋振荡2min，4500r/min离心15min，取上清液过膜后进行HPLC分析。每组样品重复取样3次，取平均值作为该时间点的残留量。2,4-D的降解曲线如图5所示。
结果显示，菌株X32在灭菌土壤中对2,4-D的降解更迅速，将灭菌土壤中500mg/L2,4-D完全降解的时间为7d，在未灭菌土壤中为10d。而对照组中2,4-D残留量在14d时仍基本保持不变，未灭菌土壤中2,4-D自然降解率仅为24.5％。结果表明，菌株X32不仅在液体培养基中能够高效降解苯氧羧酸类除草剂，而且在土壤中仍然表现出较强的降解能力。
实施例4菌株X32在缓解苯氧羧酸类除草剂植物药害中的应用
供试土壤为市售营养土，主要成分为草炭。供试玉米品种为郑单958。对照组和试验组各选择10株玉米。其中，对照组：A.不含2,4-D、未接种菌株X32；B.含100mg/kg 2,4-D、未接种菌株X32；C.不含2,4-D、接种菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)。试验组：D.含100mg/kg 2,4-D、接种菌株X32(接菌量约2×106CFU/g土壤)。以上各组分别均匀播种玉米种子10颗，用灭菌的去离子水调节土壤含水量为40％。培养条件：温度30℃，自然光。
培养7d后，测量各组玉米株高、鲜重，计算株高抑制率、鲜重抑制率。试验数据如表1所示，培养7d时各组玉米长势情况如图6所示。
表1培养7d后各组玉米的生理指标
Figure GDA0002340804490000101
结果表明：菌株X32对土壤中100mg/kg 2,4-D导致的玉米药害具有显著的缓解效果，7d时玉米株高、鲜重和对照组A相当，植株生长较好；而对照组B中玉米受药害严重，株高和鲜重均受到明显抑制，植株矮小、畸形，叶片无法正常伸展。另外，对照组C的结果说明土壤中施用外源微生物X32，不会对玉米的正常生长产生不良影响，安全性好，可以应用于苯氧羧酸类除草剂污染土壤的生物修复。
综上所述，本发明提供的嗜碱贪铜菌Cupriavidus alkaliphilus X32，是一株苯氧羧酸类除草剂高效降解菌，能够利用2,4-D、MCPA等苯氧羧酸类除草剂为唯一碳源和能源生长，具有降解效率高、环境适应性强、安全性好等特点，尤其是在pH较高的碱性环境中仍然能够保持高效降解活性，同时菌株本身具有对铜离子等重金属较高的耐受性，可以直接使用或者进一步加工制备成生物降解菌剂，应用于苯氧羧酸类除草剂污染水体和土壤的生物修复，具有广阔的应用潜力。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 中国农业大学
<120> 一株苯氧羧酸类除草剂降解菌及其应用
<130> KHP181116305.6
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 811
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
tgtgactgtc aggctagagt atgtcagagg ggggtagaat tccacgtgta gcagtgaaat 60
gcgtagagat gtggaggaat accgatggcg aaggcagccc cctgggacgt cactgacgct 120
catgcacgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca cgccctaaac 180
gatgtcaact agttgttggg gattcatttc ttcagtaacg tagctaacgc gtgaagttga 240
ccgcctgggg agtacggtcg caagattaaa actcaaagga attgacgggg acccgcacaa 300
gcggtggatg atgtggatta attcgatgca acgcgaaaaa ccttacctac ccttgacatg 360
ccactaacga agcagagatg ccttaggtgc ccgaaaggga aagtggacac aggtgctgca 420
tggctgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct 480
tgtctctagt tgctacgcaa gagcactcta gagagactgc cggtgacaaa ccggaggaag 540
gtggggatga cgtcaagtcc tcatggccct tatgggtagg gcttcacacg tcatacaatg 600
gtgcgtacag agggttgcca acccgcgagg gggagctaat cccagaaaac gcatcgtagt 660
ccggatcgta gtctgcaact cgactacgtg aagctggaat cgctagtaat cgcggatcag 720
catgccgcgg tgaatacgtt cccgggtctt gtacacaccg cccgtcacac catgggagtg 780
ggttttgcca gaagtagtta gcctaaccgc a 811

Claims (10)

1.一株嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32，其特征在于，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14844。
2.包含权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的菌剂。
3.权利要求2所述菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32经培养制备为菌悬液；将菌悬液经处理制备为液体菌剂或固体菌剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述培养为在25～35℃，pH为6.0～10.5的条件下进行。
5.权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或权利要求2所述的菌剂在降解苯氧羧酸类除草剂中的应用；所述苯氧羧酸类除草剂为选自2,4-D、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯、MCPA、MCPA钠盐、MCPA异辛酯中的一种或多种。
6.权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或权利要求2所述的菌剂在修复苯氧羧酸类除草剂污染的水体或土壤中的应用；所述苯氧羧酸类除草剂为选自2,4-D、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯、MCPA、MCPA钠盐、MCPA异辛酯中的一种或多种。
7.权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或权利要求2所述的菌剂在缓解苯氧羧酸类除草剂引起的植物药害中的应用；所述苯氧羧酸类除草剂为选自2,4-D、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯、MCPA、MCPA钠盐、MCPA异辛酯中的一种或多种。
8.权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或权利要求2所述的菌剂在制备苯氧羧酸类除草剂环境污染治理剂或清洁剂中的应用；所述苯氧羧酸类除草剂为选自2,4-D、2,4-D钠盐、2,4-D丁酯、2,4-D异辛酯、MCPA、MCPA钠盐、MCPA异辛酯中的一种或多种。
9.根据权利要求5～8任一项所述的应用，其特征在于，所述应用为将权利要求1所述的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32或将权利要求2所述的菌剂添加至水体或土壤中。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用中嗜碱贪铜菌(Cupriavidusalkaliphilus)X32或菌剂中的嗜碱贪铜菌(Cupriavidus alkaliphilus)X32的添加量为1×105～1×109CFU/g水或土壤。
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