CN109438532A - 一种提取d-氨基葡萄糖的方法 - Google Patents
一种提取d-氨基葡萄糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109438532A CN109438532A CN201811589031.XA CN201811589031A CN109438532A CN 109438532 A CN109438532 A CN 109438532A CN 201811589031 A CN201811589031 A CN 201811589031A CN 109438532 A CN109438532 A CN 109438532A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acetate
- glucosamine
- raw material
- powder
- concentration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
- C07H5/06—Aminosugars
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
Abstract
本申请公开了一种提取D‑氨基葡萄糖的方法，该方法包括以下步骤：取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉，对原料粉依次进行脱脂、脱蛋白、脱钙和脱色处理，得甲壳素粗品；取甲壳素粗品，将其和醋酸水溶液在沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST‑1的PP膜条件下回流反应，得D‑氨基葡萄糖醋酸盐粗品，并依次通过乙醇、乙醇/乙酸乙酯体系的重结晶，得到D‑氨基葡萄糖醋酸盐粉末，具有提高D‑氨基葡萄糖的含量的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取D-氨基葡萄糖的方法。
背景技术
甲壳素是节肢动物如虾蟹与昆虫等外壳的重要成分，同时也是低等植物如菌藻类的重要成分，资源十分丰富。由于其独特的性质，国内外学者专家纷纷对其进行研究。随着研究的深入，发现甲壳素的水解产物D-氨基葡萄糖具有抑制肿瘤细胞的生长、治疗肠炎，提高抗生素的注射效果等作用，并可作为糖尿病人的营养剂。
皖西学院生物系的陈乃富、刘文中和闵运江在《氨基酸和生物资源》的P40-42页发表的《克氏螯虾虾壳制备氨基葡萄糖盐酸盐的工艺研究》中公开的工艺流程，其包括以下步骤：
由克敖虾虾壳制取甲壳素工艺流程：克氏螯虾壳→破碎冲洗→碱处理(1)→水洗至中性→酸处理(1)→水洗至中性→碱处理(2)→水洗至中性→酸处理(2)→水洗至中性→干燥→甲壳素；
由甲壳素制备氨基葡萄糖盐酸盐工艺流程：甲壳素→粉碎→盐酸水解→冷却静置结晶→过滤(滤液废弃)(1)→粗结晶→加水热溶解(1)→活性碳脱色→过滤(活性碳可再生)(2)→滤液→减压蒸干→结晶→乙醇洗结晶→70~80℃烘干→加水热溶解(2)→加乙醇重结晶→过滤(滤液回收乙醇)(3)→结晶→70~80℃烘干→成品(GAH)。
研究发现，制备的D-氨基葡萄糖含量仍有待提高。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取D-氨基葡萄糖的方法，具有提高D-氨基葡萄糖的含量的效果。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，20~40KHZ且25~40℃下超声清洗30~60min，静置10~20min后除漂浮物，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为6~10:100:2.5~3.2:1.0~1.5；
③取脱脂原料粉，加6~8wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在50~60℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和6~8wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为10~20:100；
④取脱蛋白原料粉，加3~5wt%浓度的柠檬酸水溶液，在40~45℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和3~5wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为10~20:100；
⑤取脱钙原料粉，加10~15wt%浓度的双氧水水溶液，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌5~10min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和10~15wt%浓度的双氧水水溶液的质量比为10~20:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加3~5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至53~57℃并反应60~90min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、3~5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为10~15:100:1~2:0.2~0.4:0.5~0.6:1~2；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，静置10~20min后取乙醇层，40~50℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:4~6:1~3。
优选的，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，28KHZ且30℃下超声清洗45min，静置15min后除漂浮物，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为8:100:3.0:1.2；
③取脱脂原料粉，加7wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在55℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和7wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为16:100；
④取脱蛋白原料粉，加4wt%浓度的柠檬酸水溶液，在42℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
⑤取脱钙原料粉，加12wt%浓度的双氧水水溶液，在27℃下以150r/min速度搅拌8min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至55℃并反应75min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，45℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为125:100:1.2:0.3:0.52:1.5；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，静置15min后取乙醇层，45℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:5:2。
优选的，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至65~68℃体系溶清并在保温条件下以50~80r/min速率搅拌2.5~3.0hr，以4~6℃/hr的降温速率降温至50~53℃并在该温度下保温28~31min，再以7~9℃/hr的降温速率降温至35~38℃，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:1.9~2.1:0.48~0.51。
优选的，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:2.0:0.50。
优选的，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K30，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K3的质量比为1:2.0:0.50:0.04:0.03。
优选的，还包括步骤（3）：取D-氨基葡萄糖醋酸盐，加水，以100~200r/min在25~35℃下搅拌分散，加入45~51wt%碳酸氢钠水溶液，搅拌反应10~20min，过滤取滤液，滤液在40~50℃下浓缩除尽溶剂，加乙醇超声分散，过滤取滤液在40~50℃下浓缩除尽溶剂，得到D-氨基葡萄糖；D-氨基葡萄糖醋酸盐和水的质量比为1:3~5，D-氨基葡萄糖醋酸盐和碳酸氢钠的摩尔比为1:2.4~2.7。
本发明技术效果主要体现在以下方面：取甲壳素粗品，利用醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜来获得醋酸盐，替代现有的用盐酸溶液分解作用，反应条件温和，减少因强酸破坏造成的降解物产生，通过对粗品进行重结晶，得到高含量的醋酸盐，吸湿率好，易于存放，明显优于现有技术。
具体实施方式
实施例1：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，28KHZ且30℃下超声清洗45min，静置15min后除漂浮物，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为8:100:3.0:1.2；
③取脱脂原料粉，加7wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在55℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和7wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为16:100；
④取脱蛋白原料粉，加4wt%浓度的柠檬酸水溶液，在42℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
⑤取脱钙原料粉，加12wt%浓度的双氧水水溶液，在27℃下以150r/min速度搅拌8min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至55℃并反应75min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，45℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为125:100:1.2:0.3:0.52:1.5；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，静置15min后取乙醇层，45℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:5:2。
实施例2：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，20KHZ且25℃下超声清洗60min，静置10min后除漂浮物，过滤，水洗固体，40℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为6:100:2.5:1.0；
③取脱脂原料粉，加8wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在50℃下以200r/min速度搅拌60min，过滤，水洗固体，40℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和8wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为10:100；
④取脱蛋白原料粉，加5wt%浓度的柠檬酸水溶液，在40℃下以200r/min速度搅拌60min，过滤，水洗固体，40℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和5wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为10:100；
⑤取脱钙原料粉，加15wt%浓度的双氧水水溶液，在25℃下以200r/min速度搅拌10min，过滤，水洗固体，40℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和15wt%浓度的双氧水水溶液的质量比为10:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至53℃并反应90min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，40℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为10:100:1:0.2:0.5:1；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在25℃下以200r/min速度搅拌30min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在25℃下以200r/min速度搅拌30min，静置10min后取乙醇层，40℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:4:1。
实施例3：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，40KHZ且40℃下超声清洗30min，静置20min后除漂浮物，过滤，水洗固体，50℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为10:100:3.2:1.5；
③取脱脂原料粉，加6wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在60℃下以100r/min速度搅拌30min，过滤，水洗固体，50℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和6wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为20:100；
④取脱蛋白原料粉，加3wt%浓度的柠檬酸水溶液，在45℃下以100r/min速度搅拌30min，过滤，水洗固体，50℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和3wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为20:100；
⑤取脱钙原料粉，加10wt%浓度的双氧水水溶液，在30℃下以100r/min速度搅拌5min，过滤，水洗固体，50℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和10wt%浓度的双氧水水溶液的质量比为20:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加3wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至57℃并反应60min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，50℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、3wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为15:100:2:0.4:0.6:2；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在30℃下以100r/min速度搅拌60min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在30℃下以100r/min速度搅拌60min，静置20min后取乙醇层，50℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:6:3。
实施例4：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例1的区别在于，在步骤（2）中还包括步骤③：③取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:2.0:0.50。
实施例5：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例4的区别在于，步骤（2）的步骤③用以下方法替代：③取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至65℃体系溶清并在保温条件下以50r/min速率搅拌3.0hr，以4℃/hr的降温速率降温至50℃并在该温度下保温28min，再以7℃/hr的降温速率降温至35℃，过滤，水洗固体，40℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:1.9:0.48。
实施例6：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例4的区别在于，步骤（2）的步骤③用以下方法替代：③取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至68℃体系溶清并在保温条件下以80r/min速率搅拌2.5hr，以6℃/hr的降温速率降温至53℃并在该温度下保温31min，再以9℃/hr的降温速率降温至38℃，过滤，水洗固体，50℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:2.1:0.51。
实施例7：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例4的区别在于，步骤（2）的步骤③用以下方法替代：③取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K30，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K3的质量比为1:2.0:0.50:0.04:0.03。
实施例8：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：取实施例1制备的D-氨基葡萄糖醋酸盐，加水，以150r/min在30搅拌分散，加入50wt%碳酸氢钠水溶液，搅拌反应15min，过滤取滤液，滤液在45℃下浓缩除尽溶剂，加乙醇超声分散，过滤取滤液在45℃下浓缩除尽溶剂，得到D-氨基葡萄糖；D-氨基葡萄糖醋酸盐和水的质量比为1:4，D-氨基葡萄糖醋酸盐和碳酸氢钠的摩尔比为1:2.5。
实施例9：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：取实施例2制备的D-氨基葡萄糖醋酸盐，加水，以100r/min在25℃下搅拌分散，加入51wt%碳酸氢钠水溶液，搅拌反应20min，过滤取滤液，滤液在40℃下浓缩除尽溶剂，加乙醇超声分散，过滤取滤液在40℃下浓缩除尽溶剂，得到D-氨基葡萄糖；D-氨基葡萄糖醋酸盐和水的质量比为1:3，D-氨基葡萄糖醋酸盐和碳酸氢钠的摩尔比为1:2.4。
实施例10：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤：取实施例3制备的D-氨基葡萄糖醋酸盐，加水，以200r/min在35℃下搅拌分散，加入45wt%碳酸氢钠水溶液，搅拌反应10min，过滤取滤液，滤液在50℃下浓缩除尽溶剂，加乙醇超声分散，过滤取滤液在50℃下浓缩除尽溶剂，得到D-氨基葡萄糖；D-氨基葡萄糖醋酸盐和水的质量比为1:5，D-氨基葡萄糖醋酸盐和碳酸氢钠的摩尔比为1:2.7。
实施例11：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例8的区别在于，D-氨基葡萄糖醋酸盐来源于实施例4。
实施例12：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例8的区别在于，D-氨基葡萄糖醋酸盐来源于实施例5。
实施例13：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例8的区别在于，D-氨基葡萄糖醋酸盐来源于实施例6。
实施例14：一种提取D-氨基葡萄糖的方法，与实施例8的区别在于，D-氨基葡萄糖醋酸盐来源于实施例7。
对比实施例1：一种利用虾蟹壳制取氨糖的方法，参照CN104480228A的实施例1，即包括以下步骤：
（1）原材料的选取与处理：选取虾、蟹壳为原料，清洗干净，送入烘箱内烘干，取出后加入其质量3倍的水，加热至50℃；
（2）酶解：将含虾、蟹壳的液体中加木瓜蛋白酶进行酶解除蛋白，酶解温度37℃，酶解时间4hr，得酶解液；木瓜蛋白酶的用量为虾、蟹壳质量的0.2%；
（3）酸解：将虾、蟹壳从酶解液中取出，用清水冲洗后，加入浓度为20%柠檬酸溶液中浸泡30小时进行脱钙，得酸解液，该酸解液中有可见白色沉淀物；虾、蟹壳与柠檬酸溶液的质量比这1:3；
（4）清洗干燥：将酸解液进行过滤，去除块状杂质，滤液离心，得到沉淀物，用清水清洗4次，干燥，得甲壳素；
（5）甲壳素二次水解：将甲壳素按照质量比1:5加入盐酸中，盐酸浓度为38%；搅拌，加热至105℃，保温回流4h，加清水和活性炭，控温70℃，保温30min；清水加入量为反应液质量的90%；活性炭的加入量为反应液质量的4%；
（6）醇沉、洗涤干燥：将甲壳素二次水解后的液体迅速过滤，得滤液；活性炭用热水洗涤，得洗液；将洗液与滤液合并，减压蒸馏，进行浓缩，浓缩后的残液迅速过滤，滤液倾入无水乙醇中，使溶液中乙醇的终浓度为72%，即有混浊出现，搅拌后加盖，室温静置过夜，抽滤，滤得的固体再采用无水乙醇洗涤1次，得粗产物；将粗产物加水加热至70℃，加入溶液质量2%的活性炭，搅拌，保温30min，过滤，滤液倾入乙醇中，使溶液中乙醇的终浓度为72%，搅拌后加盖，静置过夜，抽滤，将滤得的固体干燥，得无色晶体粉末，即氨糖。
对比实施例2：一种硫酸氨基葡萄糖的制备方法，参照CN101343294B的实施例1，即包括以下步骤：取甲壳质20g，加浓度为90wt%的硫酸40g，冰浴冷却至0℃左右，在此温度降解反应8h后，缓慢加去离子水将反应液体系稀释至酸度达8%，升温至110℃，维持此温度范围继续反应4小时，过滤得棕色溶液。用扩散渗析法除硫酸至硫酸质量浓度在5%以下，继续用截留分子量为150道尔顿的纳滤膜除硫酸，直至溶液的pH值为5.8。所得的溶液用真空浓缩器浓缩至质量浓度为10%。浓缩液用离心喷雾干燥，得到硫酸氨基葡萄糖。
对比实施例3：甲壳素制备氨基葡萄糖盐酸盐的方法，参照CN102096218B的实施例1，即包括以下步骤：（1）在装有30m2直管式回流装置的3000L搪瓷反应釜中加入36%盐酸1200kg，加入废母液300kg，废母液盐酸浓度28%，加温至60℃，启动搅拌装置，转速45r/min，用涂聚四氟乙烯的螺旋浆加入粉碎过筛后的甲壳素(灰分8.4%，水分9.2%)1000kg；(2)溶解后升温至82℃，搅拌转速25r/min，保温至83℃，15min后滴加36%盐酸，流量为8.5L/min，盐酸量为500L，60min后继续保温83℃；(3)30min后用冷却水降温至40℃，放料，料液沉淀8h后真空抽滤得粗品，经去离子水溶解、脱色、浓缩、重结晶、真空干燥得精品。
氨糖含量测定（HPLC法）
标准储备液的配制：精密称定适量的D-氨基葡萄糖对照品置一容量瓶中，加水，超声溶解。用水稀释至刻度，混匀作标准储备液，浓度约为1.0mg/ml。
标准工作溶液的配制：吸取标准储备液适量至另一容量瓶中，加350μl异硫氰酸苯酯和10ml甲醇，超声溶解，加甲醇/水（65/35，v/v）至刻度，混匀，80℃水浴中加热10min，冷却至室温；转移上述溶液约5ml溶液至离心管中，加5ml庚烷，振摇2min，将甲醇层转移至HPLC瓶中，进样。
样品处理：称取一定量的供试品置一容量瓶中，加水，超声溶解。用水稀释至刻度，混匀；吸取上述溶液至另一容量瓶中，加350μl异硫氰酸苯酯，再加10ml甲醇，超声溶解，加甲醇/水（65/35，v/v）至刻度，混匀，80℃水浴中加热10min，冷却至室温；转移上述溶液5ml溶液至离心管中，加5ml庚烷，振摇2min，将甲醇层转移至HPLC瓶中，进样。
计算公式为氨基葡萄糖含量（mg/g）=（C对×W对×A样）/（A对×W样）。
测试结果：相比对比实施例1-3，实施例1-14的含量均有明显提高。
表1液相色谱条件
| 仪器 | 高效液相色谱仪，带紫外检测器 |
| 色谱柱 | C18柱，50mm×4.6mm，2.7μm |
| 流速 | 1.0mL/min |
| 测波长 | UV240nm |
| 柱温 | 30℃ |
| 进样量 | 2μL |
| 流动相 | 如表2所示 |
表2流动相信息
表3含量测定
吸湿性试验（DVS法）
动态水份吸附分析(DVS)数据采自于TAInstrumentsQ5000TGA，仪器控制软件是ThermalAdvantage，分析软件是UniversalAnalysis。通常取1～10毫克的样品放置于白金坩埚内，控制程序在20%RH并保湿至样品恒重（恒重质量为m1），控制相对湿度至80%RH并保湿至样品恒重（恒重质量为m2），吸湿率为100%×（m2-m1）/m1。
测试结果：相比游离态（实施例8、实施例11和实施例14）和盐酸盐（对比实施例1-3），实施例1、4和7的吸湿率低，吸湿性好。
表4 吸湿率测定
当然，以上只是本发明的典型实例，除此之外，本发明还可以有其它多种具体实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求保护的范围之内。
Claims (6)
1.一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，20~40KHZ且25~40℃下超声清洗30~60min，静置10~20min后除漂浮物，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为6~10:100:2.5~3.2:1.0~1.5；
③取脱脂原料粉，加6~8wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在50~60℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和6~8wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为10~20:100；
④取脱蛋白原料粉，加3~5wt%浓度的柠檬酸水溶液，在40~45℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和3~5wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为10~20:100；
⑤取脱钙原料粉，加10~15wt%浓度的双氧水水溶液，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌5~10min，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和10~15wt%浓度的双氧水水溶液的质量比为10~20:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加3~5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至53~57℃并反应60~90min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、3~5wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为10~15:100:1~2:0.2~0.4:0.5~0.6:1~2；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在25~30℃下以100~200r/min速度搅拌30~60min，静置10~20min后取乙醇层，40~50℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:4~6:1~3。
2.根据权利要求1所述的一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，包括以下步骤：
（1）提取甲壳素
①取蟹壳和/或虾头和/或虾壳，清洗、干燥至恒重，粉碎得到原料粉；
②取原料粉，加水、氯化钠和麸皮，28KHZ且30℃下超声清洗45min，静置15min后除漂浮物，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱脂原料粉；原料粉、纯水、氯化钠和麸皮的质量比为8:100:3.0:1.2；
③取脱脂原料粉，加7wt%浓度的氢氧化钠水溶液，在55℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱蛋白原料粉；脱脂原料粉和7wt%浓度的氢氧化钠水溶液的质量比为16:100；
④取脱蛋白原料粉，加4wt%浓度的柠檬酸水溶液，在42℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得脱钙原料粉；脱蛋白原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
⑤取脱钙原料粉，加12wt%浓度的双氧水水溶液，在27℃下以150r/min速度搅拌8min，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得甲壳素粗品；脱钙原料粉和4wt%浓度的柠檬酸水溶液的质量比为15:100；
（2）提取D-氨基葡萄糖
①取甲壳素粗品，加4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜，升温至55℃并反应75min，去沸石和外表面上涂敷有一层金属有机框架材料HKUST-1的PP膜后过滤，水洗固体，45℃下烘干，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品；甲壳素粗品、4wt%浓度的醋酸水溶液、沸石、氯化亚铁、金属有机框架材料HKUST-1和PP膜的质量比为125:100:1.2:0.3:0.52:1.5；
②取D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品，加乙醇，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，过滤取滤液；向滤液中添加乙酸乙酯，在28℃下以150r/min速度搅拌45min，静置15min后取乙醇层，45℃下浓缩除尽溶剂，得D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末；D-氨基葡萄糖醋酸盐粗品、乙醇和乙酸乙酯的质量比为1:5:2。
3.根据权利要求1所述的一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至65~68℃体系溶清并在保温条件下以50~80r/min速率搅拌2.5~3.0hr，以4~6℃/hr的降温速率降温至50~53℃并在该温度下保温28~31min，再以7~9℃/hr的降温速率降温至35~38℃，过滤，水洗固体，40~50℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:1.9~2.1:0.48~0.51。
4.根据权利要求2所述的一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇和水，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇和水的质量比为1:2.0:0.50。
5.根据权利要求2所述的一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，步骤（2）提取D-氨基葡萄糖还包括步骤③：取D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末，加乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K30，升温至66℃体系溶清并在保温条件下以60r/min速率搅拌2.8hr，以5℃/hr的降温速率降温至52℃并在该温度下保温30min，再以8℃/hr的降温速率降温至36℃，过滤，水洗固体，45℃下烘干，得到D-氨基葡萄糖醋酸盐精制品；D-氨基葡萄糖醋酸盐粉末、乙醇、水、烟酰胺和聚维酮K3的质量比为1:2.0:0.50:0.04:0.03。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种提取D-氨基葡萄糖的方法，其特征是，还包括步骤（3）：取D-氨基葡萄糖醋酸盐，加水，以100~200r/min在25~35℃下搅拌分散，加入45~51wt%碳酸氢钠水溶液，搅拌反应10~20min，过滤取滤液，滤液在40~50℃下浓缩除尽溶剂，加乙醇超声分散，过滤取滤液在40~50℃下浓缩除尽溶剂，得到D-氨基葡萄糖；D-氨基葡萄糖醋酸盐和水的质量比为1:3~5，D-氨基葡萄糖醋酸盐和碳酸氢钠的摩尔比为1:2.4~2.7。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811589031.XA CN109438532B (zh) | 2018-12-25 | 2018-12-25 | 一种提取d-氨基葡萄糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811589031.XA CN109438532B (zh) | 2018-12-25 | 2018-12-25 | 一种提取d-氨基葡萄糖的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109438532A true CN109438532A (zh) | 2019-03-08 |
| CN109438532B CN109438532B (zh) | 2020-06-30 |
Family
ID=65535318
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811589031.XA Active CN109438532B (zh) | 2018-12-25 | 2018-12-25 | 一种提取d-氨基葡萄糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109438532B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110804077A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-02-18 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种氨基葡萄糖盐酸盐的制备方法 |
| CN111533769A (zh) * | 2020-05-09 | 2020-08-14 | 马鞍山市天泰生物科技有限公司 | 一种氨基葡萄糖盐酸盐颗粒的制备方法 |
| CN111978359A (zh) * | 2020-09-14 | 2020-11-24 | 青岛中仁动物药品有限公司 | 一种一步水解零污染物排放提取氨基葡萄糖的方法 |
| CN112521426A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-03-19 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种制备氨基葡萄糖的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101343294A (zh) * | 2008-08-20 | 2009-01-14 | 厦门蓝湾科技有限公司 | 一种硫酸氨基葡萄糖的制备方法 |
| CN102633844A (zh) * | 2012-04-15 | 2012-08-15 | 耿福能 | 一种以美洲大蠊为原料制备氨基葡萄糖盐酸盐的方法 |
| CN104277141A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-01-14 | 陈冬年 | 一种从干虾壳中提取甲壳素的方法 |
| CN104327129A (zh) * | 2014-11-25 | 2015-02-04 | 广东侨丰实业股份有限公司 | 一种以螃蟹外壳为原料制备氨基葡萄糖盐酸盐的方法 |
| CN104480228A (zh) * | 2014-11-25 | 2015-04-01 | 荣成宏业海洋科技有限公司 | 一种利用虾蟹壳制取氨糖的方法 |
-
2018
- 2018-12-25 CN CN201811589031.XA patent/CN109438532B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101343294A (zh) * | 2008-08-20 | 2009-01-14 | 厦门蓝湾科技有限公司 | 一种硫酸氨基葡萄糖的制备方法 |
| CN102633844A (zh) * | 2012-04-15 | 2012-08-15 | 耿福能 | 一种以美洲大蠊为原料制备氨基葡萄糖盐酸盐的方法 |
| CN104277141A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-01-14 | 陈冬年 | 一种从干虾壳中提取甲壳素的方法 |
| CN104327129A (zh) * | 2014-11-25 | 2015-02-04 | 广东侨丰实业股份有限公司 | 一种以螃蟹外壳为原料制备氨基葡萄糖盐酸盐的方法 |
| CN104480228A (zh) * | 2014-11-25 | 2015-04-01 | 荣成宏业海洋科技有限公司 | 一种利用虾蟹壳制取氨糖的方法 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110804077A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-02-18 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种氨基葡萄糖盐酸盐的制备方法 |
| CN111533769A (zh) * | 2020-05-09 | 2020-08-14 | 马鞍山市天泰生物科技有限公司 | 一种氨基葡萄糖盐酸盐颗粒的制备方法 |
| CN111978359A (zh) * | 2020-09-14 | 2020-11-24 | 青岛中仁动物药品有限公司 | 一种一步水解零污染物排放提取氨基葡萄糖的方法 |
| CN112521426A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-03-19 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种制备氨基葡萄糖的方法 |
| CN112521426B (zh) * | 2020-12-15 | 2022-01-11 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种制备氨基葡萄糖的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109438532B (zh) | 2020-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109438532A (zh) | 一种提取d-氨基葡萄糖的方法 | |
| CN108703989B (zh) | 一种工业化制备白芸豆α-淀粉酶抑制剂的方法 | |
| CN106117387B (zh) | 一种低分子量银耳多糖及其制备方法与应用 | |
| JP3195937B2 (ja) | アミラーゼ阻害物質の取得方法 | |
| US20160316794A1 (en) | Method for the preparation of a protein peptide, a protein peptide and use thereof | |
| CN109593034A (zh) | 一种从银杏叶提取废液中制备莽草酸的方法 | |
| CN109651480A (zh) | 一种分离罗汉果甜苷v的方法 | |
| CN110818751B (zh) | 一种硫酸氨基葡萄糖氯化钠复盐的制备方法 | |
| CN109170532A (zh) | 一种薏米提取物的制备方法与应用 | |
| CN100422198C (zh) | N-乙酰d-氨基葡萄糖的生产方法 | |
| CN106831894A (zh) | 一种脱乙酰基耦合吸附分离d‑氨基葡萄糖盐酸盐的方法 | |
| CN106432549A (zh) | 一种从动物肺中提取肝素钠的方法及该肝素钠 | |
| CN104844551B (zh) | 一种同时分离、提纯荷叶黄酮和多糖的方法 | |
| CN102241767A (zh) | 一种牛血清白蛋白提取方法 | |
| CN109851650A (zh) | 一种从发酵液中提取腺苷的方法 | |
| CN108740219A (zh) | 神秘果叶水浸物和功能茶饮料的制备方法及其用途 | |
| JP2870871B2 (ja) | 酵素を用いる甲殼類の甲殼の処理方法 | |
| CN103173423A (zh) | 从玉米中高产率提取超氧化物歧化酶的方法 | |
| JPH04207173A (ja) | 食物繊維含有デキストリンの製造法 | |
| CN106359840B (zh) | 一种低温酶解牡蛎肉制备低糖低盐牡蛎肽的方法 | |
| CN105440163A (zh) | 一种制备及纯化依诺肝素钠的方法 | |
| CN108864224A (zh) | 一种锦葵素-3-o-阿拉伯糖苷的分离纯化方法及其应用 | |
| CN109355336A (zh) | 一种牛皮胶原蛋白的提取方法 | |
| JP7423803B2 (ja) | カルノシンに富む化合物を効率的に製造するためのプロセス方法 | |
| CN110643660B (zh) | 一种超声辅助驴皮蛋白酶解制备抗氧化肽的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |