CN109438166B - (1S,2S,4S)-β-榄香烯及其制备方法和应用 - Google Patents

(1S,2S,4S)-β-榄香烯及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明通过高效液相色谱法，从含有β‑榄香烯的粗品中成功分离出一种新型β‑榄香烯立体异构体，对其进行理化性质分析和结构鉴定，确认其为β‑榄香烯立体异构体1R‑甲基‑1‑乙烯基‑2R，4R‑二异丙烯基环己烷，具体结构记为结构为(1S,2S,4S)‑β‑榄香烯，该化合物具有和β‑榄香烯相同的平面结构。经过药理毒理活性实验发现，相比于β‑榄香烯，β‑榄香烯立体异构体1R‑甲基‑1‑乙烯基‑2R，4R‑二异丙烯基环己烷具有更小的副作用和更高的抗癌活性，为抗癌药物的研究提供了新的研究方向，同时丰富了β‑榄香烯的构型异构体。

Description

(1S,2S,4S)-β-榄香烯及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药领域，具体涉及β-榄香烯立体异构体，更具体地涉及β-榄香烯立体异构体的结构、制备及其应用。
背景技术
近年来，在抗癌天然药物研究领域，许多研究人员都致力于研究紫杉醇、榄香烯各种异构体、姜黄提取物、温郁金提取物等的抗癌活性和这些药物的各种制剂形式。
榄香烯是存在于某些植物中的一类倍半萜类化合物，拉丁名为Elemenum，英文名为Elemene，化学名是1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙烯基环己烷，分子式C15H24。榄香烯有多种异构体，在这些异构体中β-榄香烯，δ-榄香烯，γ-榄香烯已被证实有抗癌活性。
β-榄香烯是榄香烯的主要成份，存在于多种天然植物中，如莪术、香茅草、紫茎泽兰等。β-榄香烯具有抗肿瘤活性，且毒副作用低，目前已作为主要药效成分被开发成多种制剂，如榄香烯注射液、榄香烯口服乳等，在临床主要用于治疗神经胶质瘤、脑转移瘤、胃癌、食管癌等多种癌症及相关疾病，取得了较好的疗效。中国专利申请CN02117219.6榄香烯注射剂及其制备方法和用途中制备了榄香烯尤其β-榄香烯的新剂型，更具体地说是纳米脂质剂型，提高了活性成分的稳定性，而且该剂型给药途径广泛。但是，该专利并没有对β-榄香烯的纯度进行研究。β-榄香烯是榄香烯的主要成份，在对榄香烯进行图谱分析时，发现有一未知化合物始终伴随着β-榄香烯，尽管含量可以控制在标准之内，但无法完全将其去除。
此外，中国专利公布CN103284978 A将β-榄香烯及其衍生物用于制备抗动脉粥样硬化，证明β-榄香烯及其衍生物具有减少动物模型的冠状动脉粥样斑块面积的功效。但是，该专利的研究主要集中在β-榄香烯的衍生物及其是否存在治疗动脉粥状硬化的作用上，并没有进一步降低β-榄香烯的副作用并提高β-榄香烯本身的活性。
本发明通过分离并研究伴随着β-榄香烯的未知化合物，提供一种副作用更小、活性更高的抗肿瘤药物。
发明内容
本发明采用制备液相法对含有β-榄香烯的粗品中存在的未知化合物进行了纯化，得到了纯度在99％左右的该化合物；采用核磁共振等方法对其理化性质及结构鉴定进行了研究，并进行了其药理毒理活性实验。
本发明提供了一种β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷，该β-榄香烯立体异构体的结构为(1S,2S,4S)-β-榄香烯，如式(I)所示：
Figure BDA0001857927610000021
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷紫外检测时，最大吸收波长为205nm。
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的红外光谱，在3082、2968、2935、2871、1639、1448、1373、889cm-1处有中到强的峰强度。
取所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷加无水乙醇溶解，浓度为14mg/mL时，20℃下测定比旋光度为36.24。
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷做质谱检测时，高分辨飞行时间质谱显示该化合物的相对分子质量为[M]+＝204.1877，分子式为C15H24。
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷核磁共振的结果为：13C NMR(125MHz,CDCl3):150.22(d,C-8),148.18(s,C-10),147.99(s,C-14),112.37(t,C-12),110.19(t,C-15),110.11(t,C-9),47.77(d,C-2),39.83(s,C-1),39.11(d,C-4),34.74(t,C-6),30.29(t,C-3),25.46(q,C-11),24.70(t,C-5),22.27(q,C-13),20.20(q,C-7)；1H NMR(500MHz,CDCl3):5.82(1H,dd,J＝17.5,10.9Hz,H-8),4.91(1H,dd，J＝18.1,1.0Hz,H-9-1),4.90(1H,dd,J＝10.5,1.0Hz,H-9-2),4.85(1H,brs,H-15-1),4.84(1H,brs,H-12-1),4.79(1H,brs,H-15-2)4.68(1H,brs,H-12-2),2.36(1H,m,H-4),2.18(1H,dd,J＝9.1,4.6Hz,H-2),1.75(2H,m,H-3),1.74(3H,s,H-11),1.72(3H,s,H-13),1.70(2H,m,H-5),1.60(1H,m,H-6-1),1.32(1H,m,H-6-2),1.02(3H,s,H-7)。
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷关键的HMBC相关结果为：甲基氢δH 1.02与δC 39.11及δC 34.74相关，δH 5.82与δC 47.77及δC20.20相关，甲基氢δH 1.74和δH 1.72分别和末端双键的碳δC 110.19及δC 112.37相关，末端双键的δH 4.84，δH 4.68和δH 4.85，δH 4.79分别和环己烷环2位的δC 47.77和4位的δC39.11相关，而且甲基氢δH 1.74和δH1.72也分别和环己烷环2位的δC 47.77和4位的δC39.11相关，表明该化合物与β-榄香烯具有相同的平面结构。
所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷关键NOESY相关的结果为：7位甲基氢δH 1.02和6位的一个氢δH 1.32相关，6位的另一个氢δH1.60和2位的氢δH 2.18相关，14位末端双键氢δH 4.79与2位以及6位δH 1.60的氢都有明显相关，表明该化合物的结构为(1S,2S,4S)-β-榄香烯，为β-榄香烯的立体异构体。
本发明提供了所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的盐。
所述盐是指常规的有机酸或无机酸的加成盐，其保留了β-榄香烯立体异构体的生物有效性和特性。
所述有机酸是乙酸、酒石酸、水杨酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、邻苯二甲酸、丁二酸、己二酸、丙酮酸、羟基丁酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸、马来酸和琥珀酸中的一种。
所述无机酸是盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一种。
优选地，所述有机酸为富马酸、马来酸、甲磺酸、柠檬酸和酒石酸中一种。
优选地，所述无机酸为盐酸、氢溴酸、氢碘酸中的一种。
本发明提供了所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的制备方法，包括以下步骤：(1)从含有β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的粗品中收集β-榄香烯和β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷；(2)将β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷和β-榄香烯分离，收集β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷。
所述粗品可以为莪术油、香茅油、紫茎泽兰挥发油等含有β-榄香烯的植物提取物，或通过酵母发酵得到的发酵产物中的一种或多种。
所述的制备方法，具体包括以下步骤：(1)含有β-榄香烯立体异构体的粗品，经正己烷溶解上样，用高效制备液相色谱法进行分离，以90％乙腈和水的混合溶剂系统为流动相进行洗脱，流速：15mL/min，检测波长：210nm，色谱柱：YMC-pack ODS-A 10μM，20×250mm，在出峰时间为17min左右处，收集β-榄香烯及其立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷；(2)将步骤(1)得到样品经正己烷溶解上样，再次用高效制备液相色谱法进行分离，以80％乙腈和水的混合溶剂系统为流动相进行洗脱，流速：15mL/min，波长：210nm，色谱柱：YMC-pack Pro-C18RS,5μM，20×250mm，β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷在保留时间70min左右收集，样品经过正己烷萃取，旋蒸获得高纯度的β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷，制备的β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷经过HPLC和GC分析，纯度分别达到了99.61％和98.78％。
本发明提供了所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明提供了所述盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明提供了一种含有所述β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷或所述盐的药物组合物。
与现有技术相比，本申请具有如下有益效果：
(1)本发明发现了一种新的β-榄香烯立体异构体；
(2)本发明阐明了从莪术油中提取榄香烯原料中的杂质成份，有利于质量控制；
(3)本发明新发现的β-榄香烯立体异构体的抗肿瘤活性及安全性较β-榄香烯高，为开发安全有效的β-榄香烯类抗肿瘤药物提供了物质基础。
附图说明
图1为β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷关键的HMBC相关示意图
图2为β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷关键NOESY相关示意图
具体实施方式
实施例1β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的制备
(1)含有β-榄香烯立体异构体的粗品(莪术油、香茅油、紫茎泽兰挥发油等含有β-榄香烯的植物提取物，或通过酵母发酵得到的发酵产物中的一种或多种)，经正己烷溶解上样，用高效制备液相色谱法进行分离，以90％乙腈和水的混合溶剂系统为流动相进行洗脱，流速：15mL/min，检测波长：210nm，色谱柱：YMC-pack ODS-A 10μM，20×250mm，在出峰时间为17min左右处，收集β-榄香烯及其立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷5.05g；(2)将步骤(1)得到样品经正己烷溶解上样，再次用高效制备液相色谱法进行分离，以80％乙腈和水的混合溶剂系统为流动相进行洗脱，流速：15mL/min，波长：210nm，色谱柱：YMC-pack Pro-C18RS,5μM，20×250mm，β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷在保留时间70min收集，β-榄香烯在保留时间95min收集，样品分别经过正己烷萃取、旋蒸，获得高纯度的β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷共150mg，制备的β-榄香烯立体异构体经过HPLC和GC分析，纯度分别达到了99.61％和98.78％，获得的β-榄香烯GC纯度大于99％。
实施例2β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的理化性质与结构鉴定
取实施例1中制备的β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷进行理化性质分析。
紫外光谱：该β-榄香烯立体异构体最大吸收波长为205nm。
红外光谱：该β-榄香烯立体异构体在3082、2968、2935、2871、1639、1448、1373、889cm-1处有中到强的峰强度。
比旋度：取该β-榄香烯立体异构体，精密称定，加无水乙醇溶解，浓度为14mg/mL，20℃下测定比旋光度为36.24。
质谱：该β-榄香烯立体异构体高分辨质谱显示该化合物的分子量为[M]+＝204.1877，分子式为C15H24。
核磁共振：13C NMR(125MHz,CDCl3):150.22(d,C-8),148.18(s,C-10),147.99(s,C-14),112.37(t,C-12),110.19(t,C-15),110.11(t,C-9),47.77(d,C-2),39.83(s,C-1),39.11(d,C-4),34.74(t,C-6),30.29(t,C-3),25.46(q,C-11),24.70(t,C-5),22.27(q,C-13),20.20(q,C-7)；1H NMR(500MHz,CDCl3):5.82(1H,dd,J＝17.5,10.9Hz,H-8),4.91(1H,dd，J＝18.1,1.0Hz,H-9-1),4.90(1H,dd,J＝10.5,1.0Hz,H-9-2),4.85(1H,brs,H-15-1),4.84(1H,brs,H-12-1),4.79(1H,brs,H-15-2)4.68(1H,brs,H-12-2),2.36(1H,m,H-4),2.18(1H,dd,J＝9.1,4.6Hz,H-2),1.75(2H,m,H-3),1.74(3H,s,H-11),1.72(3H,s,H-13),1.70(2H,m,H-5),1.60(1H,m,H-6-1),1.32(1H,m,H-6-2),1.02(3H,s,H-7)。
关键的HMBC相关：甲基氢δH 1.02与δC 39.11及δC 34.74相关，δH 5.82与δC 47.77及δC 20.20相关，甲基氢δH 1.74和δH 1.72分别和末端双键的碳δC 110.19及δC 112.37相关，末端双键的δH 4.84，δH 4.68和δH 4.85，δH 4.79分别和环己烷环2位δC 47.77和4位δC39.11的碳相关，而且甲基氢δH 1.74和δH 1.72也分别和环己烷环2位δC 47.77和4位δC39.11相关，表明该化合与与β-榄香烯具有相同的平面结构。
关键NOESY相关：7位甲基氢δH 1.02和6位的一个氢δH 1.32相关，6位的另一个氢δH1.60和2位的氢δH 2.18相关，14位末端双键氢δH 4.79与2位以及6位δH 1.60的氢均有明显相关，表明该化合物的结构为(1S,2S,4S)-β-榄香烯，为β-榄香烯的立体异构体。
对比例1β-榄香烯的理化性质
取实施例1中制备的β-榄香烯进行理化性质分析：
紫外光谱：最大吸收波长为205nm。
红外光谱：在3082、2970、2929、2860、1643、1439、1375、889cm-1处有中到强的峰强度。
比旋度：精密称定，加无水乙醇溶解，浓度为20mg/mL，20℃下测定比旋光度为-13.64。
质谱：β-榄香烯的TOF高分辨质谱，显示该化合物的分子量为[M]+＝204.1890，分子式为C15H24。
核磁共振：13C NMR(125MHz,CDCl3)：150.50(s,C-14),150.45(d,C-8),147.83(s,C-10),112.25(t,C-12),109.99(t,C-9),108.40(t,C-15),52.94(d,C-2),45.89(d,C-4),40.08(t,C-6),39.95(s,C-1),33.07(t,C-3),27.01(t,C-5),24.90(q,C-11),21.20(q,C-13),16.80(q,C-7)；1H NMR(500MHz,CDCl3)：5.83(1H,dd,J＝17.4,10.9Hz,H-8),4.91(1H,dd，J＝18.0,1.25Hz,H-9-1),4.90(1H,dd,J＝10.6,1.0Hz,H-9-2),4.82(1H,brs,H-12-1),4.73(1H,brs,H-15-1),4.72(1H,brs,H-15-2)4.60(1H,brs,H-12-2),1.95(1H,m,H-4),2.02(1H,dd,J＝9.1,6.4Hz,H-2),1.75(3H,s,H-13),1.72(3H,s,H-11),1.62(1H，m,H-5-1),1.56(2H,m,H-3),1.50(1H,m,H-6-1),1.46(1H,m,H-5-2),1.46(1H,m,H-6-2),1.01(3H,s,H-7)。
以上数据和β-榄香烯文献数据相符(Gaydou EM,Journal of Agriculture Foodand Chemistry,1998,37,1032-1037)，结构表示为(1S,2S,4R)-β-榄香烯。
实验例3β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷与β-榄香烯急性毒性比较
受试样品：β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷、β-榄香烯，均由石药集团远大(大连)制药有限公司提供，液体形式，4℃保存。
配制方法：精确称取样品，用DMF溶解，再加入吐温80(TW80)助溶，最后溶于生理盐水(NS)，DMF:TW80:5％NS＝10:2:88(V:V:V)，超声5min，现配现用。
受试动物：ICR小鼠，由上海灵畅生物科技有限公司提供；实验动物质量合格证：SCXK(沪)2013-0016；合格证编号：2013001828818 2013001828481；实验动物使用许可证：SYXK(苏)2012-0004；体重：18-22g；动物数：100只；性别：雌雄各半。
实验室环境：室温24±2℃，相对湿度60-70％。
剂量设置：预试验显示受试β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷有一定毒性，尾静脉注射药物在2g/kg剂量可引起4/4只小鼠死亡，在0.6g/kg剂量可引起4/0只小鼠死亡；β-榄香烯有毒性，尾静脉注射药物在1g/kg剂量可引起4/4只小鼠死亡，在0.3g/kg剂量可引起4/0只小鼠死亡。在预实验基础上，将受试药物正式实验剂量按照表1进行设置形成实验1-10组，每组10只，测定LD50(半数致死量)：
表1
Figure BDA0001857927610000111
Figure BDA0001857927610000121
说明：给药体积为10mL；给药途径为尾静脉注射给药；剂量是指按照小鼠的体重计，每kg体重给予药物的质量；配药浓度是指每mL液体注射液中含有的实验药物的质量。
观察指标：将受试药品按表1中的剂量根据给药容积按等比稀释法配成相应浓度的药物溶液等容给药1次，记录小鼠各种中毒症状及死亡情况，死亡动物进行尸检。从注射药物后开始对动物情况进行观察，观察期14天。
实验结果：β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷较高剂量(1.45455g/kg、1.16364g/kg、0.93091g/kg)给药后1min内均出现呼吸急促、逃窜、惊厥症状，半数以上小鼠给药5min内倒地，抽搐，死亡；较低剂量(0.74473g/kg、0.59578g/kg)小鼠出现呼吸加快，活动减少，约1h后活动恢复正常，部分低剂量(0.74473g/kg、0.59578g/kg)动物给药12h后死亡。实验1-5组死亡小鼠解剖，心脏及肺可见肿大、淤血，其余脏器未见明显异常，因此推测死亡原因是样品的呼吸及循环系统毒性作用所致。β-榄香烯较高剂量(0.86272g/kg、0.69018g/kg、0.55214g/kg)给药后1min内均出现呼吸急促、逃窜、惊厥症状，半数以上小鼠给药5min内倒地，抽搐，死亡；较低剂量(0.44172g/kg、0.35337g/kg)小鼠出现呼吸加快，活动减少，约1h后活动恢复正常，部分低剂量(0.44172g/kg、0.35337g/kg)动物给药12h后死亡。实验6-10组死亡小鼠解剖，心脏及肺可见肿大、淤血，其余脏器未见明显异常，因此推测死亡原因是样品的呼吸及循环系统毒性作用所致。
实验1-10组小鼠体重变化见表2，死亡分布及LD50值(Bliss法)结果见表3：
表2
Figure BDA0001857927610000131
表3
Figure BDA0001857927610000132
Figure BDA0001857927610000141
说明：N表示每个实验组小鼠的数量。
本实验结果显示，受试β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷对小鼠有一定毒性，较高剂量(1.45455g/kg、1.16364g/kg、0.93091g/kg)下给药后由于呼吸及循环系统抑制作用，数分钟内即可引起小鼠死亡，尾静脉给药的LD50值为1.0362g/kg；β-榄香烯对小鼠有一定毒性，较高剂量(0.86272g/kg、0.69018g/kg、0.55214g/kg)下给药后由于呼吸及循环系统抑制作用，数分钟内即可引起小鼠死亡，尾静脉给药的LD50值为0.5865g/kg。β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷的LD50大于β-榄香烯的LD50，表明β-榄香烯立体异构体的安全性要大于β-榄香烯。
实施例4β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷与β-榄香烯体外抗肿瘤活性比较
设备：超净工作台(苏州艾可林净化设备有限公司)、CO2培养箱(SANYO)、生物倒置显微镜(OLYMPUS)、酶标仪(BioTek Instruments)
试剂：四甲基偶氮唑盐(MTT)(BIOSHARP公司)、二甲基亚砜(DMSO)(美国SIGMA公司)。
细胞株：
Figure BDA0001857927610000151
实验方法：
(1)配制细胞悬液(HepG2、HCT-116、Eca-109、PANC-1、T24、PC-3、MDA-MB-231 3.5×104个/mL，A549、K562 3.0×104个/mL，A2780 5.0×104个/mL)，96孔细胞培养板中每孔加入100μl细胞悬液；(2)96孔细胞培养板置于37℃，5％CO2培养箱中培养24小时；用培养基稀释药物至所需工作液浓度，每孔加入100μl相应的含药培养基，同时设立阴性对照组(阴性对照组细胞加入不含药物的正常培养基)；(3)96孔细胞培养板置于37℃，5％CO2培养箱中培养72小时；(4)每孔加入20μl MTT(5mg/mL)，在培养箱继续培养4小时，观察到含有细胞的96孔板底部形成蓝紫色结晶甲瓒；(5)弃上清，每孔加入150μl DMSO，摇床10分钟轻轻地混匀，使得甲瓒充分溶解；(6)在λ＝490nm条件下，采用酶标仪读出每孔的OD值，计算抑制率，其中，抑制率＝(阴性对照组OD值-实验组OD值)/阴性对照组OD值×100％，抑制率为50％时，培养基中的药物浓度即为该药物的IC50。实验结果，见表4。
表4
Figure BDA0001857927610000161
Figure BDA0001857927610000171
上述结果显示，β-榄香烯立体异构体1R-甲基-1-乙烯基-2R，4R-二异丙烯基环己烷对筛选的十株肿瘤细胞均显示出了良好的生长抑制作用(IC50范围为100-140μM)，且该作用较β-榄香烯(IC50在200μM左右)强。

Claims (3)

1.式(I)化合物在制备抗肿瘤药物中的应用；其特征在于，式(I)化合物结构如下所示：
Figure FDA0002988699660000011
2.如权利要求1所述的式(I)化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，式(I)化合物由如下步骤制备：
(1)从含有β-榄香烯立体异构体1S-甲基-1-乙烯基-2S,4S-二异丙烯基环己烷的粗品中收集β-榄香烯和β-榄香烯立体异构体1S-甲基-1-乙烯基-2S,4S-二异丙烯基环己烷；(2)将β-榄香烯立体异构体1S-甲基-1-乙烯基-2S,4S-二异丙烯基环己烷和β-榄香烯分离，收集β-榄香烯立体异构体1S-甲基-1-乙烯基-2S,4S-二异丙烯基环己烷。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述粗品为莪术油、香茅油、紫茎泽兰挥发油、通过酵母发酵得到的发酵产物中的一种或多种。
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